Upload
trananh
View
232
Download
3
Embed Size (px)
Citation preview
Potensi Ekstrak Rimpang Kunyit (Curcuma domestica L) Sebagai Kandidat Inhibitor Pompa Efluks Pada
Salmonella enterica serovar Typhi Resisten
Pekanbaru 19 April 2018
Kongres XX dan PIT IAI 2018
Wahyu HendrartiSTIFA Makassar
OP-FA16
Outline Presentasi
bull Bahan amp Metode
bull Hasil
bull Pembahasan
bull Pendahuluan
bull Kesimpulan
bull Daftar Pustaka
Prevalensi DemamTifoid
S Typhi
Resistensi
diperparah munculnyaMDR-TF [Lini pertama]
Mekanisme Resistensi
kloramfenikol Tetrasiklin Cotrimoksazol Ciprofloxacin
Pompa Efluks Aktif
Isolat S Typhi terkarakterisasi
AcrB
Inhibitor Pompa Efluks
Inhibitor Pompa Efluks Alami
Latar belakang216 juta kasus 250000
kematian tahun1234 Sekitar 70-80 kasus dan kematian di
Asia5 termasuk Indonesia6
CCCP PaβN ~ Toksik ~ in vitro
Zingiberaceae
Adjuvan Antibiotik
klorpromazin reserpin verapamil omeprazole ~ ES tinggi
Curcuma domestica L [Kunyit]Kurkumin demetoksi
kurkumin
Mengembalikan kekuatan Antibiotik
Resistensi Antibiotik-Pompa Effluks amp Strategi
Jason Sello laboratorium Brown University Biotechnology Research New compound defeats drug-resistant bacteria
CCCP (inhibitor sintetik) ~ Toksik
inhibitor dari bahanalam [aman]
Skrining Bakteri
S Typhi
Penentuan aktivitas inhibitor pompa efluks
menumbuhkan isolat S Typhi dengan 3 antibakteri kloramfenikol (30microg) tetrasiklin (30microg) sulfametoksazol-
trimetoprim (75microg)metode difusi-Agar
Bahan amp Metode
qRT-PCR (primer dan kondisi PCR sesuai Tabel 1) ~mengukur ekspresi pompa efluks AcrB sebelum amp
setelah + CCCP 100microM (inhibitor pompa efluks sintetik)
Zona Hambat
aktivitas antibakteri ditentukan berdasarkan standar breakpoint zona
hambat menurut EUCAST
Kontrol
Media ~MHA ~ inkubasi pada suhu 37ordmC selama 24 jam
Pengujian selanjutnya dilakukan dengan cara yang sama tetapi ditambahkan ekstrak rimpang kunyit mulai konsentrasi 01 025 05 075 dan 1
Hasil
acrB
[ρgmL]
Uji aktivitas Inhibitor PompaEfluks ekstrak kunyit (Curcuma
domestica L) pada S Typhiresisten
Uji aktivitas Inhibitor PompaEfluks ekstrak kunyit (Curcuma
domestica L) pada S Typhiresisten
Uji aktivitas Inhibitor PompaEfluks ekstrak kunyit (Curcuma
domestica L) pada S Typhiresisten
Pembahasanbull Pada penelitian ini isolat-uji S Typhi terbukti memiliki
mekanisme resistensi akibat pompa efluks aktif Hal ini ditandai dengan penurunan ekspresi pompa efluks AcrB sekitar 3x lipat (rata-rata dari 993075 menjadi 708729 ρgmL) setelah penambahan CCCP
bull Pengujian aktivitas awal dari ketiga antibakteri-uji menunjukkan bahwa S Typhi telah resisten terhadap kloramfenikol dan tetrasiklin akan tetapi masih sensitif terhadap sulfametoksazol-trimetoprim dengan diameter zona hambat masing-masing75 93 dan 286mm Pengujian aktivitas dengan penambahan ekstrak kunyit mulai dari konsentrasi 01 ndash1 menunjukkan peningkatan zona hambat pada Kloramfenikol (Tabel 2) dan Tetrasiklin (Tabel 3) serta sulfametoksazol-trimetoprim (Tabel 4)
Pembahasanbull Resistensi S Typhi melalui pompa efluks (PE) aktif terbukti sudah
menjadi mekanisme resistensi utama pada bakteri ini101118 dan juga didapatkan dari isolat klinik di Makassar-Indonesia yang dibuktikan pada penelitian ini sehingga diperlukan strategi untuk mengatasi hal tersebut Ekstrak rimpang kunyit (Curcuma domestica L) memperlihatkan potensi sebagai inhibitor pompa efluks (IPE) karena setelah ditumbuhkan bersama antibakteri-uji terlihat adanya peningkatan kekuatan (sensitivitas) Hal ini terlihat pada zona hambat Kloramfenikol yang semula resisten menjadi sensitif seiring peningkatan konsentrasi Pada pengujian tetrasiklin terlihat peningkatan zona hambat walaupun masih kategori intermediat berdasarkan standar EUCAST17
Pembahasanbull Potensi IPE pada ekstrak kunyit diduga dari zat aktif kurkuminnya
Kurkumin dan demetoksi kurkumin telah dibuktikan oleh Kourtesi (2013) dan Lechner (2009) sebagai IPE dari bahan alam meskipun zat aktif tersebut diekstraksi dari Curcuma longa L dan diuji bersama isoniazid pada Mycobacterium14 Mekanisme kerja IPE diduga antara lain (1) mengubah struktur molekul pompa efluks sehingga afinitas obat berkurang (2) menekan ekspresi gen pompa efluks (3) menurunkan energi pompa efluks (4) menjadi substrat kompetitif maupun non kompetitif terhadap pompa efluks16 Pemberian ekstrak kunyit bersama sulfametoksazol-trimetoprim ternyata ada kecenderungan justru menurunkan kekuatan antibakteri ini Hal ini kemungkinan disebabkan oleh karena S Typhi masih sensitif terhadap obat ini dan fenomena ini masih perlu dipelajari lebih lanjut
Daftar Pustaka1 de Jong HK Parry CM van der Poll T Wiersingamail WJ HostndashPathogen Interaction in Invasive Salmonellosis PLoSPathog 2012 October 8(10)p1
2 Zaki and Karande Multidrug-resistant typhoid fever J Infect Dev Ctries 2011 5(5)324-337
3 Al-Sanouri TM Paglietti B Haddadin A Murgia M Bacciu D Youssef M Rubino S Emergence of plasmid-mediated multidrug resistance in epidemic and non-epidemic strains of Salmonella enterica serotype Typhi from Jordan J Infect Dev Ctries 20082 295-301
4 Kothari A Pruthi A Chugh TD The Burden of Enteric Fever J Infect Dev Ctries 20082 253-259
5 Nagshetty K Channappa ST Gaddad SM Antimicrobial susceptibility of Salmonella Typhi in India J Infect Dev Ctries 20104 70-73
6 Hatta M Ratnawati Enteric fever in endemic areas of Indonesia an increasing problem of resistance J Infect Developing Countries 2008 2(4) 279-282
7 Nikaido H Pagegraves JM Broad-specificity efflux pumps and their role in multidrug resistance of gram-negative bacteria FEMS Microbiol Rev 2012 Mar36(2) 340-63
8 Ughachukwu PO and Unekwe PC1 Efflux Pump-Mediated resistance in Chemotherapy Annals of Medical and Health Sciences Research 20122 2 191-198
9 Baucheron S Tyler S Boyd D Mulvey MR Chaslus-Dancla E Cloeckaert A AcrAB-TolC Directs Efflux-Mediated Multidrug Resistance in Salmonella enterica Serovar Typhimurium DT104 Antimicrob Agents Chemother 2004 Oct48(10)3729-35
10 Yamasaki S Nagasawa S Fukushima A Nishino MA Nishino K Cooperation of the multidrug efflux pump and lipopolysaccharides in the intrinsic antibiotic resistance of Salmonella enterica serovar Typhimurium J Antimicrob Chemother 2013 681066-1070
11 Stavri M Piddock LJV and Gibbons S Bacterial efflux pump inhibitors from natural sources J Antimicro Chemother 200759 1247-1260
12 Xian-Zhi Li Hiroshi Nikaido Efflux-Mediated Drug Resistance in Bacteria Drugs 20096912 1555-1623
13 Baugh S Phillips CR Ekanayaka AS Piddock LJ Webber MA Inhibition of multidrug efflux as a strategy to prevent biofilm formation J Antimicrob Chemother 2013
14 Rana T Singh S Kaur N Pathania K Farooq U A Review on Efflux Pump Inhibitors of Medically Important Bacteria from Plant Sources Int J Pharm Sci Rev Res 201426(2) 101-111
15 Ricci V Blair JMA and Piddock LJV RamA which controls expression of the MDR efflux pump AcrAB-TolC is regulated by the Lon protease J Antimicrob Chemother 2013 1-8
16 Sumithra T G Chaturvedi V K Susan Cherian Binsila B Krishnan and Siju Susan Jacob Efflux Pump Inhibitors For Antibacterial Therapy Indian Veterinary Research Institute Izatnagar UP JIVA 2012101 69-75
17 EUCAST The European Committee on Antimicrobial Susceptibility Testing Breakpoint tables for interpretation zone diameters Version 40 2014 httpwwweucastorg
18 Baucheron S Coste F Canepa S et al Binding of the RamR repressor to wild-type and mutated promoters of the ramA gene involved in efflux-mediated multidrug resistance in Salmonella enteric serovar Typhi murium Anti microb Agents Chemother 201256942-8
TERIMA KASIH
Outline Presentasi
bull Bahan amp Metode
bull Hasil
bull Pembahasan
bull Pendahuluan
bull Kesimpulan
bull Daftar Pustaka
Prevalensi DemamTifoid
S Typhi
Resistensi
diperparah munculnyaMDR-TF [Lini pertama]
Mekanisme Resistensi
kloramfenikol Tetrasiklin Cotrimoksazol Ciprofloxacin
Pompa Efluks Aktif
Isolat S Typhi terkarakterisasi
AcrB
Inhibitor Pompa Efluks
Inhibitor Pompa Efluks Alami
Latar belakang216 juta kasus 250000
kematian tahun1234 Sekitar 70-80 kasus dan kematian di
Asia5 termasuk Indonesia6
CCCP PaβN ~ Toksik ~ in vitro
Zingiberaceae
Adjuvan Antibiotik
klorpromazin reserpin verapamil omeprazole ~ ES tinggi
Curcuma domestica L [Kunyit]Kurkumin demetoksi
kurkumin
Mengembalikan kekuatan Antibiotik
Resistensi Antibiotik-Pompa Effluks amp Strategi
Jason Sello laboratorium Brown University Biotechnology Research New compound defeats drug-resistant bacteria
CCCP (inhibitor sintetik) ~ Toksik
inhibitor dari bahanalam [aman]
Skrining Bakteri
S Typhi
Penentuan aktivitas inhibitor pompa efluks
menumbuhkan isolat S Typhi dengan 3 antibakteri kloramfenikol (30microg) tetrasiklin (30microg) sulfametoksazol-
trimetoprim (75microg)metode difusi-Agar
Bahan amp Metode
qRT-PCR (primer dan kondisi PCR sesuai Tabel 1) ~mengukur ekspresi pompa efluks AcrB sebelum amp
setelah + CCCP 100microM (inhibitor pompa efluks sintetik)
Zona Hambat
aktivitas antibakteri ditentukan berdasarkan standar breakpoint zona
hambat menurut EUCAST
Kontrol
Media ~MHA ~ inkubasi pada suhu 37ordmC selama 24 jam
Pengujian selanjutnya dilakukan dengan cara yang sama tetapi ditambahkan ekstrak rimpang kunyit mulai konsentrasi 01 025 05 075 dan 1
Hasil
acrB
[ρgmL]
Uji aktivitas Inhibitor PompaEfluks ekstrak kunyit (Curcuma
domestica L) pada S Typhiresisten
Uji aktivitas Inhibitor PompaEfluks ekstrak kunyit (Curcuma
domestica L) pada S Typhiresisten
Uji aktivitas Inhibitor PompaEfluks ekstrak kunyit (Curcuma
domestica L) pada S Typhiresisten
Pembahasanbull Pada penelitian ini isolat-uji S Typhi terbukti memiliki
mekanisme resistensi akibat pompa efluks aktif Hal ini ditandai dengan penurunan ekspresi pompa efluks AcrB sekitar 3x lipat (rata-rata dari 993075 menjadi 708729 ρgmL) setelah penambahan CCCP
bull Pengujian aktivitas awal dari ketiga antibakteri-uji menunjukkan bahwa S Typhi telah resisten terhadap kloramfenikol dan tetrasiklin akan tetapi masih sensitif terhadap sulfametoksazol-trimetoprim dengan diameter zona hambat masing-masing75 93 dan 286mm Pengujian aktivitas dengan penambahan ekstrak kunyit mulai dari konsentrasi 01 ndash1 menunjukkan peningkatan zona hambat pada Kloramfenikol (Tabel 2) dan Tetrasiklin (Tabel 3) serta sulfametoksazol-trimetoprim (Tabel 4)
Pembahasanbull Resistensi S Typhi melalui pompa efluks (PE) aktif terbukti sudah
menjadi mekanisme resistensi utama pada bakteri ini101118 dan juga didapatkan dari isolat klinik di Makassar-Indonesia yang dibuktikan pada penelitian ini sehingga diperlukan strategi untuk mengatasi hal tersebut Ekstrak rimpang kunyit (Curcuma domestica L) memperlihatkan potensi sebagai inhibitor pompa efluks (IPE) karena setelah ditumbuhkan bersama antibakteri-uji terlihat adanya peningkatan kekuatan (sensitivitas) Hal ini terlihat pada zona hambat Kloramfenikol yang semula resisten menjadi sensitif seiring peningkatan konsentrasi Pada pengujian tetrasiklin terlihat peningkatan zona hambat walaupun masih kategori intermediat berdasarkan standar EUCAST17
Pembahasanbull Potensi IPE pada ekstrak kunyit diduga dari zat aktif kurkuminnya
Kurkumin dan demetoksi kurkumin telah dibuktikan oleh Kourtesi (2013) dan Lechner (2009) sebagai IPE dari bahan alam meskipun zat aktif tersebut diekstraksi dari Curcuma longa L dan diuji bersama isoniazid pada Mycobacterium14 Mekanisme kerja IPE diduga antara lain (1) mengubah struktur molekul pompa efluks sehingga afinitas obat berkurang (2) menekan ekspresi gen pompa efluks (3) menurunkan energi pompa efluks (4) menjadi substrat kompetitif maupun non kompetitif terhadap pompa efluks16 Pemberian ekstrak kunyit bersama sulfametoksazol-trimetoprim ternyata ada kecenderungan justru menurunkan kekuatan antibakteri ini Hal ini kemungkinan disebabkan oleh karena S Typhi masih sensitif terhadap obat ini dan fenomena ini masih perlu dipelajari lebih lanjut
Daftar Pustaka1 de Jong HK Parry CM van der Poll T Wiersingamail WJ HostndashPathogen Interaction in Invasive Salmonellosis PLoSPathog 2012 October 8(10)p1
2 Zaki and Karande Multidrug-resistant typhoid fever J Infect Dev Ctries 2011 5(5)324-337
3 Al-Sanouri TM Paglietti B Haddadin A Murgia M Bacciu D Youssef M Rubino S Emergence of plasmid-mediated multidrug resistance in epidemic and non-epidemic strains of Salmonella enterica serotype Typhi from Jordan J Infect Dev Ctries 20082 295-301
4 Kothari A Pruthi A Chugh TD The Burden of Enteric Fever J Infect Dev Ctries 20082 253-259
5 Nagshetty K Channappa ST Gaddad SM Antimicrobial susceptibility of Salmonella Typhi in India J Infect Dev Ctries 20104 70-73
6 Hatta M Ratnawati Enteric fever in endemic areas of Indonesia an increasing problem of resistance J Infect Developing Countries 2008 2(4) 279-282
7 Nikaido H Pagegraves JM Broad-specificity efflux pumps and their role in multidrug resistance of gram-negative bacteria FEMS Microbiol Rev 2012 Mar36(2) 340-63
8 Ughachukwu PO and Unekwe PC1 Efflux Pump-Mediated resistance in Chemotherapy Annals of Medical and Health Sciences Research 20122 2 191-198
9 Baucheron S Tyler S Boyd D Mulvey MR Chaslus-Dancla E Cloeckaert A AcrAB-TolC Directs Efflux-Mediated Multidrug Resistance in Salmonella enterica Serovar Typhimurium DT104 Antimicrob Agents Chemother 2004 Oct48(10)3729-35
10 Yamasaki S Nagasawa S Fukushima A Nishino MA Nishino K Cooperation of the multidrug efflux pump and lipopolysaccharides in the intrinsic antibiotic resistance of Salmonella enterica serovar Typhimurium J Antimicrob Chemother 2013 681066-1070
11 Stavri M Piddock LJV and Gibbons S Bacterial efflux pump inhibitors from natural sources J Antimicro Chemother 200759 1247-1260
12 Xian-Zhi Li Hiroshi Nikaido Efflux-Mediated Drug Resistance in Bacteria Drugs 20096912 1555-1623
13 Baugh S Phillips CR Ekanayaka AS Piddock LJ Webber MA Inhibition of multidrug efflux as a strategy to prevent biofilm formation J Antimicrob Chemother 2013
14 Rana T Singh S Kaur N Pathania K Farooq U A Review on Efflux Pump Inhibitors of Medically Important Bacteria from Plant Sources Int J Pharm Sci Rev Res 201426(2) 101-111
15 Ricci V Blair JMA and Piddock LJV RamA which controls expression of the MDR efflux pump AcrAB-TolC is regulated by the Lon protease J Antimicrob Chemother 2013 1-8
16 Sumithra T G Chaturvedi V K Susan Cherian Binsila B Krishnan and Siju Susan Jacob Efflux Pump Inhibitors For Antibacterial Therapy Indian Veterinary Research Institute Izatnagar UP JIVA 2012101 69-75
17 EUCAST The European Committee on Antimicrobial Susceptibility Testing Breakpoint tables for interpretation zone diameters Version 40 2014 httpwwweucastorg
18 Baucheron S Coste F Canepa S et al Binding of the RamR repressor to wild-type and mutated promoters of the ramA gene involved in efflux-mediated multidrug resistance in Salmonella enteric serovar Typhi murium Anti microb Agents Chemother 201256942-8
TERIMA KASIH
Prevalensi DemamTifoid
S Typhi
Resistensi
diperparah munculnyaMDR-TF [Lini pertama]
Mekanisme Resistensi
kloramfenikol Tetrasiklin Cotrimoksazol Ciprofloxacin
Pompa Efluks Aktif
Isolat S Typhi terkarakterisasi
AcrB
Inhibitor Pompa Efluks
Inhibitor Pompa Efluks Alami
Latar belakang216 juta kasus 250000
kematian tahun1234 Sekitar 70-80 kasus dan kematian di
Asia5 termasuk Indonesia6
CCCP PaβN ~ Toksik ~ in vitro
Zingiberaceae
Adjuvan Antibiotik
klorpromazin reserpin verapamil omeprazole ~ ES tinggi
Curcuma domestica L [Kunyit]Kurkumin demetoksi
kurkumin
Mengembalikan kekuatan Antibiotik
Resistensi Antibiotik-Pompa Effluks amp Strategi
Jason Sello laboratorium Brown University Biotechnology Research New compound defeats drug-resistant bacteria
CCCP (inhibitor sintetik) ~ Toksik
inhibitor dari bahanalam [aman]
Skrining Bakteri
S Typhi
Penentuan aktivitas inhibitor pompa efluks
menumbuhkan isolat S Typhi dengan 3 antibakteri kloramfenikol (30microg) tetrasiklin (30microg) sulfametoksazol-
trimetoprim (75microg)metode difusi-Agar
Bahan amp Metode
qRT-PCR (primer dan kondisi PCR sesuai Tabel 1) ~mengukur ekspresi pompa efluks AcrB sebelum amp
setelah + CCCP 100microM (inhibitor pompa efluks sintetik)
Zona Hambat
aktivitas antibakteri ditentukan berdasarkan standar breakpoint zona
hambat menurut EUCAST
Kontrol
Media ~MHA ~ inkubasi pada suhu 37ordmC selama 24 jam
Pengujian selanjutnya dilakukan dengan cara yang sama tetapi ditambahkan ekstrak rimpang kunyit mulai konsentrasi 01 025 05 075 dan 1
Hasil
acrB
[ρgmL]
Uji aktivitas Inhibitor PompaEfluks ekstrak kunyit (Curcuma
domestica L) pada S Typhiresisten
Uji aktivitas Inhibitor PompaEfluks ekstrak kunyit (Curcuma
domestica L) pada S Typhiresisten
Uji aktivitas Inhibitor PompaEfluks ekstrak kunyit (Curcuma
domestica L) pada S Typhiresisten
Pembahasanbull Pada penelitian ini isolat-uji S Typhi terbukti memiliki
mekanisme resistensi akibat pompa efluks aktif Hal ini ditandai dengan penurunan ekspresi pompa efluks AcrB sekitar 3x lipat (rata-rata dari 993075 menjadi 708729 ρgmL) setelah penambahan CCCP
bull Pengujian aktivitas awal dari ketiga antibakteri-uji menunjukkan bahwa S Typhi telah resisten terhadap kloramfenikol dan tetrasiklin akan tetapi masih sensitif terhadap sulfametoksazol-trimetoprim dengan diameter zona hambat masing-masing75 93 dan 286mm Pengujian aktivitas dengan penambahan ekstrak kunyit mulai dari konsentrasi 01 ndash1 menunjukkan peningkatan zona hambat pada Kloramfenikol (Tabel 2) dan Tetrasiklin (Tabel 3) serta sulfametoksazol-trimetoprim (Tabel 4)
Pembahasanbull Resistensi S Typhi melalui pompa efluks (PE) aktif terbukti sudah
menjadi mekanisme resistensi utama pada bakteri ini101118 dan juga didapatkan dari isolat klinik di Makassar-Indonesia yang dibuktikan pada penelitian ini sehingga diperlukan strategi untuk mengatasi hal tersebut Ekstrak rimpang kunyit (Curcuma domestica L) memperlihatkan potensi sebagai inhibitor pompa efluks (IPE) karena setelah ditumbuhkan bersama antibakteri-uji terlihat adanya peningkatan kekuatan (sensitivitas) Hal ini terlihat pada zona hambat Kloramfenikol yang semula resisten menjadi sensitif seiring peningkatan konsentrasi Pada pengujian tetrasiklin terlihat peningkatan zona hambat walaupun masih kategori intermediat berdasarkan standar EUCAST17
Pembahasanbull Potensi IPE pada ekstrak kunyit diduga dari zat aktif kurkuminnya
Kurkumin dan demetoksi kurkumin telah dibuktikan oleh Kourtesi (2013) dan Lechner (2009) sebagai IPE dari bahan alam meskipun zat aktif tersebut diekstraksi dari Curcuma longa L dan diuji bersama isoniazid pada Mycobacterium14 Mekanisme kerja IPE diduga antara lain (1) mengubah struktur molekul pompa efluks sehingga afinitas obat berkurang (2) menekan ekspresi gen pompa efluks (3) menurunkan energi pompa efluks (4) menjadi substrat kompetitif maupun non kompetitif terhadap pompa efluks16 Pemberian ekstrak kunyit bersama sulfametoksazol-trimetoprim ternyata ada kecenderungan justru menurunkan kekuatan antibakteri ini Hal ini kemungkinan disebabkan oleh karena S Typhi masih sensitif terhadap obat ini dan fenomena ini masih perlu dipelajari lebih lanjut
Daftar Pustaka1 de Jong HK Parry CM van der Poll T Wiersingamail WJ HostndashPathogen Interaction in Invasive Salmonellosis PLoSPathog 2012 October 8(10)p1
2 Zaki and Karande Multidrug-resistant typhoid fever J Infect Dev Ctries 2011 5(5)324-337
3 Al-Sanouri TM Paglietti B Haddadin A Murgia M Bacciu D Youssef M Rubino S Emergence of plasmid-mediated multidrug resistance in epidemic and non-epidemic strains of Salmonella enterica serotype Typhi from Jordan J Infect Dev Ctries 20082 295-301
4 Kothari A Pruthi A Chugh TD The Burden of Enteric Fever J Infect Dev Ctries 20082 253-259
5 Nagshetty K Channappa ST Gaddad SM Antimicrobial susceptibility of Salmonella Typhi in India J Infect Dev Ctries 20104 70-73
6 Hatta M Ratnawati Enteric fever in endemic areas of Indonesia an increasing problem of resistance J Infect Developing Countries 2008 2(4) 279-282
7 Nikaido H Pagegraves JM Broad-specificity efflux pumps and their role in multidrug resistance of gram-negative bacteria FEMS Microbiol Rev 2012 Mar36(2) 340-63
8 Ughachukwu PO and Unekwe PC1 Efflux Pump-Mediated resistance in Chemotherapy Annals of Medical and Health Sciences Research 20122 2 191-198
9 Baucheron S Tyler S Boyd D Mulvey MR Chaslus-Dancla E Cloeckaert A AcrAB-TolC Directs Efflux-Mediated Multidrug Resistance in Salmonella enterica Serovar Typhimurium DT104 Antimicrob Agents Chemother 2004 Oct48(10)3729-35
10 Yamasaki S Nagasawa S Fukushima A Nishino MA Nishino K Cooperation of the multidrug efflux pump and lipopolysaccharides in the intrinsic antibiotic resistance of Salmonella enterica serovar Typhimurium J Antimicrob Chemother 2013 681066-1070
11 Stavri M Piddock LJV and Gibbons S Bacterial efflux pump inhibitors from natural sources J Antimicro Chemother 200759 1247-1260
12 Xian-Zhi Li Hiroshi Nikaido Efflux-Mediated Drug Resistance in Bacteria Drugs 20096912 1555-1623
13 Baugh S Phillips CR Ekanayaka AS Piddock LJ Webber MA Inhibition of multidrug efflux as a strategy to prevent biofilm formation J Antimicrob Chemother 2013
14 Rana T Singh S Kaur N Pathania K Farooq U A Review on Efflux Pump Inhibitors of Medically Important Bacteria from Plant Sources Int J Pharm Sci Rev Res 201426(2) 101-111
15 Ricci V Blair JMA and Piddock LJV RamA which controls expression of the MDR efflux pump AcrAB-TolC is regulated by the Lon protease J Antimicrob Chemother 2013 1-8
16 Sumithra T G Chaturvedi V K Susan Cherian Binsila B Krishnan and Siju Susan Jacob Efflux Pump Inhibitors For Antibacterial Therapy Indian Veterinary Research Institute Izatnagar UP JIVA 2012101 69-75
17 EUCAST The European Committee on Antimicrobial Susceptibility Testing Breakpoint tables for interpretation zone diameters Version 40 2014 httpwwweucastorg
18 Baucheron S Coste F Canepa S et al Binding of the RamR repressor to wild-type and mutated promoters of the ramA gene involved in efflux-mediated multidrug resistance in Salmonella enteric serovar Typhi murium Anti microb Agents Chemother 201256942-8
TERIMA KASIH
Resistensi Antibiotik-Pompa Effluks amp Strategi
Jason Sello laboratorium Brown University Biotechnology Research New compound defeats drug-resistant bacteria
CCCP (inhibitor sintetik) ~ Toksik
inhibitor dari bahanalam [aman]
Skrining Bakteri
S Typhi
Penentuan aktivitas inhibitor pompa efluks
menumbuhkan isolat S Typhi dengan 3 antibakteri kloramfenikol (30microg) tetrasiklin (30microg) sulfametoksazol-
trimetoprim (75microg)metode difusi-Agar
Bahan amp Metode
qRT-PCR (primer dan kondisi PCR sesuai Tabel 1) ~mengukur ekspresi pompa efluks AcrB sebelum amp
setelah + CCCP 100microM (inhibitor pompa efluks sintetik)
Zona Hambat
aktivitas antibakteri ditentukan berdasarkan standar breakpoint zona
hambat menurut EUCAST
Kontrol
Media ~MHA ~ inkubasi pada suhu 37ordmC selama 24 jam
Pengujian selanjutnya dilakukan dengan cara yang sama tetapi ditambahkan ekstrak rimpang kunyit mulai konsentrasi 01 025 05 075 dan 1
Hasil
acrB
[ρgmL]
Uji aktivitas Inhibitor PompaEfluks ekstrak kunyit (Curcuma
domestica L) pada S Typhiresisten
Uji aktivitas Inhibitor PompaEfluks ekstrak kunyit (Curcuma
domestica L) pada S Typhiresisten
Uji aktivitas Inhibitor PompaEfluks ekstrak kunyit (Curcuma
domestica L) pada S Typhiresisten
Pembahasanbull Pada penelitian ini isolat-uji S Typhi terbukti memiliki
mekanisme resistensi akibat pompa efluks aktif Hal ini ditandai dengan penurunan ekspresi pompa efluks AcrB sekitar 3x lipat (rata-rata dari 993075 menjadi 708729 ρgmL) setelah penambahan CCCP
bull Pengujian aktivitas awal dari ketiga antibakteri-uji menunjukkan bahwa S Typhi telah resisten terhadap kloramfenikol dan tetrasiklin akan tetapi masih sensitif terhadap sulfametoksazol-trimetoprim dengan diameter zona hambat masing-masing75 93 dan 286mm Pengujian aktivitas dengan penambahan ekstrak kunyit mulai dari konsentrasi 01 ndash1 menunjukkan peningkatan zona hambat pada Kloramfenikol (Tabel 2) dan Tetrasiklin (Tabel 3) serta sulfametoksazol-trimetoprim (Tabel 4)
Pembahasanbull Resistensi S Typhi melalui pompa efluks (PE) aktif terbukti sudah
menjadi mekanisme resistensi utama pada bakteri ini101118 dan juga didapatkan dari isolat klinik di Makassar-Indonesia yang dibuktikan pada penelitian ini sehingga diperlukan strategi untuk mengatasi hal tersebut Ekstrak rimpang kunyit (Curcuma domestica L) memperlihatkan potensi sebagai inhibitor pompa efluks (IPE) karena setelah ditumbuhkan bersama antibakteri-uji terlihat adanya peningkatan kekuatan (sensitivitas) Hal ini terlihat pada zona hambat Kloramfenikol yang semula resisten menjadi sensitif seiring peningkatan konsentrasi Pada pengujian tetrasiklin terlihat peningkatan zona hambat walaupun masih kategori intermediat berdasarkan standar EUCAST17
Pembahasanbull Potensi IPE pada ekstrak kunyit diduga dari zat aktif kurkuminnya
Kurkumin dan demetoksi kurkumin telah dibuktikan oleh Kourtesi (2013) dan Lechner (2009) sebagai IPE dari bahan alam meskipun zat aktif tersebut diekstraksi dari Curcuma longa L dan diuji bersama isoniazid pada Mycobacterium14 Mekanisme kerja IPE diduga antara lain (1) mengubah struktur molekul pompa efluks sehingga afinitas obat berkurang (2) menekan ekspresi gen pompa efluks (3) menurunkan energi pompa efluks (4) menjadi substrat kompetitif maupun non kompetitif terhadap pompa efluks16 Pemberian ekstrak kunyit bersama sulfametoksazol-trimetoprim ternyata ada kecenderungan justru menurunkan kekuatan antibakteri ini Hal ini kemungkinan disebabkan oleh karena S Typhi masih sensitif terhadap obat ini dan fenomena ini masih perlu dipelajari lebih lanjut
Daftar Pustaka1 de Jong HK Parry CM van der Poll T Wiersingamail WJ HostndashPathogen Interaction in Invasive Salmonellosis PLoSPathog 2012 October 8(10)p1
2 Zaki and Karande Multidrug-resistant typhoid fever J Infect Dev Ctries 2011 5(5)324-337
3 Al-Sanouri TM Paglietti B Haddadin A Murgia M Bacciu D Youssef M Rubino S Emergence of plasmid-mediated multidrug resistance in epidemic and non-epidemic strains of Salmonella enterica serotype Typhi from Jordan J Infect Dev Ctries 20082 295-301
4 Kothari A Pruthi A Chugh TD The Burden of Enteric Fever J Infect Dev Ctries 20082 253-259
5 Nagshetty K Channappa ST Gaddad SM Antimicrobial susceptibility of Salmonella Typhi in India J Infect Dev Ctries 20104 70-73
6 Hatta M Ratnawati Enteric fever in endemic areas of Indonesia an increasing problem of resistance J Infect Developing Countries 2008 2(4) 279-282
7 Nikaido H Pagegraves JM Broad-specificity efflux pumps and their role in multidrug resistance of gram-negative bacteria FEMS Microbiol Rev 2012 Mar36(2) 340-63
8 Ughachukwu PO and Unekwe PC1 Efflux Pump-Mediated resistance in Chemotherapy Annals of Medical and Health Sciences Research 20122 2 191-198
9 Baucheron S Tyler S Boyd D Mulvey MR Chaslus-Dancla E Cloeckaert A AcrAB-TolC Directs Efflux-Mediated Multidrug Resistance in Salmonella enterica Serovar Typhimurium DT104 Antimicrob Agents Chemother 2004 Oct48(10)3729-35
10 Yamasaki S Nagasawa S Fukushima A Nishino MA Nishino K Cooperation of the multidrug efflux pump and lipopolysaccharides in the intrinsic antibiotic resistance of Salmonella enterica serovar Typhimurium J Antimicrob Chemother 2013 681066-1070
11 Stavri M Piddock LJV and Gibbons S Bacterial efflux pump inhibitors from natural sources J Antimicro Chemother 200759 1247-1260
12 Xian-Zhi Li Hiroshi Nikaido Efflux-Mediated Drug Resistance in Bacteria Drugs 20096912 1555-1623
13 Baugh S Phillips CR Ekanayaka AS Piddock LJ Webber MA Inhibition of multidrug efflux as a strategy to prevent biofilm formation J Antimicrob Chemother 2013
14 Rana T Singh S Kaur N Pathania K Farooq U A Review on Efflux Pump Inhibitors of Medically Important Bacteria from Plant Sources Int J Pharm Sci Rev Res 201426(2) 101-111
15 Ricci V Blair JMA and Piddock LJV RamA which controls expression of the MDR efflux pump AcrAB-TolC is regulated by the Lon protease J Antimicrob Chemother 2013 1-8
16 Sumithra T G Chaturvedi V K Susan Cherian Binsila B Krishnan and Siju Susan Jacob Efflux Pump Inhibitors For Antibacterial Therapy Indian Veterinary Research Institute Izatnagar UP JIVA 2012101 69-75
17 EUCAST The European Committee on Antimicrobial Susceptibility Testing Breakpoint tables for interpretation zone diameters Version 40 2014 httpwwweucastorg
18 Baucheron S Coste F Canepa S et al Binding of the RamR repressor to wild-type and mutated promoters of the ramA gene involved in efflux-mediated multidrug resistance in Salmonella enteric serovar Typhi murium Anti microb Agents Chemother 201256942-8
TERIMA KASIH
Skrining Bakteri
S Typhi
Penentuan aktivitas inhibitor pompa efluks
menumbuhkan isolat S Typhi dengan 3 antibakteri kloramfenikol (30microg) tetrasiklin (30microg) sulfametoksazol-
trimetoprim (75microg)metode difusi-Agar
Bahan amp Metode
qRT-PCR (primer dan kondisi PCR sesuai Tabel 1) ~mengukur ekspresi pompa efluks AcrB sebelum amp
setelah + CCCP 100microM (inhibitor pompa efluks sintetik)
Zona Hambat
aktivitas antibakteri ditentukan berdasarkan standar breakpoint zona
hambat menurut EUCAST
Kontrol
Media ~MHA ~ inkubasi pada suhu 37ordmC selama 24 jam
Pengujian selanjutnya dilakukan dengan cara yang sama tetapi ditambahkan ekstrak rimpang kunyit mulai konsentrasi 01 025 05 075 dan 1
Hasil
acrB
[ρgmL]
Uji aktivitas Inhibitor PompaEfluks ekstrak kunyit (Curcuma
domestica L) pada S Typhiresisten
Uji aktivitas Inhibitor PompaEfluks ekstrak kunyit (Curcuma
domestica L) pada S Typhiresisten
Uji aktivitas Inhibitor PompaEfluks ekstrak kunyit (Curcuma
domestica L) pada S Typhiresisten
Pembahasanbull Pada penelitian ini isolat-uji S Typhi terbukti memiliki
mekanisme resistensi akibat pompa efluks aktif Hal ini ditandai dengan penurunan ekspresi pompa efluks AcrB sekitar 3x lipat (rata-rata dari 993075 menjadi 708729 ρgmL) setelah penambahan CCCP
bull Pengujian aktivitas awal dari ketiga antibakteri-uji menunjukkan bahwa S Typhi telah resisten terhadap kloramfenikol dan tetrasiklin akan tetapi masih sensitif terhadap sulfametoksazol-trimetoprim dengan diameter zona hambat masing-masing75 93 dan 286mm Pengujian aktivitas dengan penambahan ekstrak kunyit mulai dari konsentrasi 01 ndash1 menunjukkan peningkatan zona hambat pada Kloramfenikol (Tabel 2) dan Tetrasiklin (Tabel 3) serta sulfametoksazol-trimetoprim (Tabel 4)
Pembahasanbull Resistensi S Typhi melalui pompa efluks (PE) aktif terbukti sudah
menjadi mekanisme resistensi utama pada bakteri ini101118 dan juga didapatkan dari isolat klinik di Makassar-Indonesia yang dibuktikan pada penelitian ini sehingga diperlukan strategi untuk mengatasi hal tersebut Ekstrak rimpang kunyit (Curcuma domestica L) memperlihatkan potensi sebagai inhibitor pompa efluks (IPE) karena setelah ditumbuhkan bersama antibakteri-uji terlihat adanya peningkatan kekuatan (sensitivitas) Hal ini terlihat pada zona hambat Kloramfenikol yang semula resisten menjadi sensitif seiring peningkatan konsentrasi Pada pengujian tetrasiklin terlihat peningkatan zona hambat walaupun masih kategori intermediat berdasarkan standar EUCAST17
Pembahasanbull Potensi IPE pada ekstrak kunyit diduga dari zat aktif kurkuminnya
Kurkumin dan demetoksi kurkumin telah dibuktikan oleh Kourtesi (2013) dan Lechner (2009) sebagai IPE dari bahan alam meskipun zat aktif tersebut diekstraksi dari Curcuma longa L dan diuji bersama isoniazid pada Mycobacterium14 Mekanisme kerja IPE diduga antara lain (1) mengubah struktur molekul pompa efluks sehingga afinitas obat berkurang (2) menekan ekspresi gen pompa efluks (3) menurunkan energi pompa efluks (4) menjadi substrat kompetitif maupun non kompetitif terhadap pompa efluks16 Pemberian ekstrak kunyit bersama sulfametoksazol-trimetoprim ternyata ada kecenderungan justru menurunkan kekuatan antibakteri ini Hal ini kemungkinan disebabkan oleh karena S Typhi masih sensitif terhadap obat ini dan fenomena ini masih perlu dipelajari lebih lanjut
Daftar Pustaka1 de Jong HK Parry CM van der Poll T Wiersingamail WJ HostndashPathogen Interaction in Invasive Salmonellosis PLoSPathog 2012 October 8(10)p1
2 Zaki and Karande Multidrug-resistant typhoid fever J Infect Dev Ctries 2011 5(5)324-337
3 Al-Sanouri TM Paglietti B Haddadin A Murgia M Bacciu D Youssef M Rubino S Emergence of plasmid-mediated multidrug resistance in epidemic and non-epidemic strains of Salmonella enterica serotype Typhi from Jordan J Infect Dev Ctries 20082 295-301
4 Kothari A Pruthi A Chugh TD The Burden of Enteric Fever J Infect Dev Ctries 20082 253-259
5 Nagshetty K Channappa ST Gaddad SM Antimicrobial susceptibility of Salmonella Typhi in India J Infect Dev Ctries 20104 70-73
6 Hatta M Ratnawati Enteric fever in endemic areas of Indonesia an increasing problem of resistance J Infect Developing Countries 2008 2(4) 279-282
7 Nikaido H Pagegraves JM Broad-specificity efflux pumps and their role in multidrug resistance of gram-negative bacteria FEMS Microbiol Rev 2012 Mar36(2) 340-63
8 Ughachukwu PO and Unekwe PC1 Efflux Pump-Mediated resistance in Chemotherapy Annals of Medical and Health Sciences Research 20122 2 191-198
9 Baucheron S Tyler S Boyd D Mulvey MR Chaslus-Dancla E Cloeckaert A AcrAB-TolC Directs Efflux-Mediated Multidrug Resistance in Salmonella enterica Serovar Typhimurium DT104 Antimicrob Agents Chemother 2004 Oct48(10)3729-35
10 Yamasaki S Nagasawa S Fukushima A Nishino MA Nishino K Cooperation of the multidrug efflux pump and lipopolysaccharides in the intrinsic antibiotic resistance of Salmonella enterica serovar Typhimurium J Antimicrob Chemother 2013 681066-1070
11 Stavri M Piddock LJV and Gibbons S Bacterial efflux pump inhibitors from natural sources J Antimicro Chemother 200759 1247-1260
12 Xian-Zhi Li Hiroshi Nikaido Efflux-Mediated Drug Resistance in Bacteria Drugs 20096912 1555-1623
13 Baugh S Phillips CR Ekanayaka AS Piddock LJ Webber MA Inhibition of multidrug efflux as a strategy to prevent biofilm formation J Antimicrob Chemother 2013
14 Rana T Singh S Kaur N Pathania K Farooq U A Review on Efflux Pump Inhibitors of Medically Important Bacteria from Plant Sources Int J Pharm Sci Rev Res 201426(2) 101-111
15 Ricci V Blair JMA and Piddock LJV RamA which controls expression of the MDR efflux pump AcrAB-TolC is regulated by the Lon protease J Antimicrob Chemother 2013 1-8
16 Sumithra T G Chaturvedi V K Susan Cherian Binsila B Krishnan and Siju Susan Jacob Efflux Pump Inhibitors For Antibacterial Therapy Indian Veterinary Research Institute Izatnagar UP JIVA 2012101 69-75
17 EUCAST The European Committee on Antimicrobial Susceptibility Testing Breakpoint tables for interpretation zone diameters Version 40 2014 httpwwweucastorg
18 Baucheron S Coste F Canepa S et al Binding of the RamR repressor to wild-type and mutated promoters of the ramA gene involved in efflux-mediated multidrug resistance in Salmonella enteric serovar Typhi murium Anti microb Agents Chemother 201256942-8
TERIMA KASIH
Hasil
acrB
[ρgmL]
Uji aktivitas Inhibitor PompaEfluks ekstrak kunyit (Curcuma
domestica L) pada S Typhiresisten
Uji aktivitas Inhibitor PompaEfluks ekstrak kunyit (Curcuma
domestica L) pada S Typhiresisten
Uji aktivitas Inhibitor PompaEfluks ekstrak kunyit (Curcuma
domestica L) pada S Typhiresisten
Pembahasanbull Pada penelitian ini isolat-uji S Typhi terbukti memiliki
mekanisme resistensi akibat pompa efluks aktif Hal ini ditandai dengan penurunan ekspresi pompa efluks AcrB sekitar 3x lipat (rata-rata dari 993075 menjadi 708729 ρgmL) setelah penambahan CCCP
bull Pengujian aktivitas awal dari ketiga antibakteri-uji menunjukkan bahwa S Typhi telah resisten terhadap kloramfenikol dan tetrasiklin akan tetapi masih sensitif terhadap sulfametoksazol-trimetoprim dengan diameter zona hambat masing-masing75 93 dan 286mm Pengujian aktivitas dengan penambahan ekstrak kunyit mulai dari konsentrasi 01 ndash1 menunjukkan peningkatan zona hambat pada Kloramfenikol (Tabel 2) dan Tetrasiklin (Tabel 3) serta sulfametoksazol-trimetoprim (Tabel 4)
Pembahasanbull Resistensi S Typhi melalui pompa efluks (PE) aktif terbukti sudah
menjadi mekanisme resistensi utama pada bakteri ini101118 dan juga didapatkan dari isolat klinik di Makassar-Indonesia yang dibuktikan pada penelitian ini sehingga diperlukan strategi untuk mengatasi hal tersebut Ekstrak rimpang kunyit (Curcuma domestica L) memperlihatkan potensi sebagai inhibitor pompa efluks (IPE) karena setelah ditumbuhkan bersama antibakteri-uji terlihat adanya peningkatan kekuatan (sensitivitas) Hal ini terlihat pada zona hambat Kloramfenikol yang semula resisten menjadi sensitif seiring peningkatan konsentrasi Pada pengujian tetrasiklin terlihat peningkatan zona hambat walaupun masih kategori intermediat berdasarkan standar EUCAST17
Pembahasanbull Potensi IPE pada ekstrak kunyit diduga dari zat aktif kurkuminnya
Kurkumin dan demetoksi kurkumin telah dibuktikan oleh Kourtesi (2013) dan Lechner (2009) sebagai IPE dari bahan alam meskipun zat aktif tersebut diekstraksi dari Curcuma longa L dan diuji bersama isoniazid pada Mycobacterium14 Mekanisme kerja IPE diduga antara lain (1) mengubah struktur molekul pompa efluks sehingga afinitas obat berkurang (2) menekan ekspresi gen pompa efluks (3) menurunkan energi pompa efluks (4) menjadi substrat kompetitif maupun non kompetitif terhadap pompa efluks16 Pemberian ekstrak kunyit bersama sulfametoksazol-trimetoprim ternyata ada kecenderungan justru menurunkan kekuatan antibakteri ini Hal ini kemungkinan disebabkan oleh karena S Typhi masih sensitif terhadap obat ini dan fenomena ini masih perlu dipelajari lebih lanjut
Daftar Pustaka1 de Jong HK Parry CM van der Poll T Wiersingamail WJ HostndashPathogen Interaction in Invasive Salmonellosis PLoSPathog 2012 October 8(10)p1
2 Zaki and Karande Multidrug-resistant typhoid fever J Infect Dev Ctries 2011 5(5)324-337
3 Al-Sanouri TM Paglietti B Haddadin A Murgia M Bacciu D Youssef M Rubino S Emergence of plasmid-mediated multidrug resistance in epidemic and non-epidemic strains of Salmonella enterica serotype Typhi from Jordan J Infect Dev Ctries 20082 295-301
4 Kothari A Pruthi A Chugh TD The Burden of Enteric Fever J Infect Dev Ctries 20082 253-259
5 Nagshetty K Channappa ST Gaddad SM Antimicrobial susceptibility of Salmonella Typhi in India J Infect Dev Ctries 20104 70-73
6 Hatta M Ratnawati Enteric fever in endemic areas of Indonesia an increasing problem of resistance J Infect Developing Countries 2008 2(4) 279-282
7 Nikaido H Pagegraves JM Broad-specificity efflux pumps and their role in multidrug resistance of gram-negative bacteria FEMS Microbiol Rev 2012 Mar36(2) 340-63
8 Ughachukwu PO and Unekwe PC1 Efflux Pump-Mediated resistance in Chemotherapy Annals of Medical and Health Sciences Research 20122 2 191-198
9 Baucheron S Tyler S Boyd D Mulvey MR Chaslus-Dancla E Cloeckaert A AcrAB-TolC Directs Efflux-Mediated Multidrug Resistance in Salmonella enterica Serovar Typhimurium DT104 Antimicrob Agents Chemother 2004 Oct48(10)3729-35
10 Yamasaki S Nagasawa S Fukushima A Nishino MA Nishino K Cooperation of the multidrug efflux pump and lipopolysaccharides in the intrinsic antibiotic resistance of Salmonella enterica serovar Typhimurium J Antimicrob Chemother 2013 681066-1070
11 Stavri M Piddock LJV and Gibbons S Bacterial efflux pump inhibitors from natural sources J Antimicro Chemother 200759 1247-1260
12 Xian-Zhi Li Hiroshi Nikaido Efflux-Mediated Drug Resistance in Bacteria Drugs 20096912 1555-1623
13 Baugh S Phillips CR Ekanayaka AS Piddock LJ Webber MA Inhibition of multidrug efflux as a strategy to prevent biofilm formation J Antimicrob Chemother 2013
14 Rana T Singh S Kaur N Pathania K Farooq U A Review on Efflux Pump Inhibitors of Medically Important Bacteria from Plant Sources Int J Pharm Sci Rev Res 201426(2) 101-111
15 Ricci V Blair JMA and Piddock LJV RamA which controls expression of the MDR efflux pump AcrAB-TolC is regulated by the Lon protease J Antimicrob Chemother 2013 1-8
16 Sumithra T G Chaturvedi V K Susan Cherian Binsila B Krishnan and Siju Susan Jacob Efflux Pump Inhibitors For Antibacterial Therapy Indian Veterinary Research Institute Izatnagar UP JIVA 2012101 69-75
17 EUCAST The European Committee on Antimicrobial Susceptibility Testing Breakpoint tables for interpretation zone diameters Version 40 2014 httpwwweucastorg
18 Baucheron S Coste F Canepa S et al Binding of the RamR repressor to wild-type and mutated promoters of the ramA gene involved in efflux-mediated multidrug resistance in Salmonella enteric serovar Typhi murium Anti microb Agents Chemother 201256942-8
TERIMA KASIH
acrB
[ρgmL]
Uji aktivitas Inhibitor PompaEfluks ekstrak kunyit (Curcuma
domestica L) pada S Typhiresisten
Uji aktivitas Inhibitor PompaEfluks ekstrak kunyit (Curcuma
domestica L) pada S Typhiresisten
Uji aktivitas Inhibitor PompaEfluks ekstrak kunyit (Curcuma
domestica L) pada S Typhiresisten
Pembahasanbull Pada penelitian ini isolat-uji S Typhi terbukti memiliki
mekanisme resistensi akibat pompa efluks aktif Hal ini ditandai dengan penurunan ekspresi pompa efluks AcrB sekitar 3x lipat (rata-rata dari 993075 menjadi 708729 ρgmL) setelah penambahan CCCP
bull Pengujian aktivitas awal dari ketiga antibakteri-uji menunjukkan bahwa S Typhi telah resisten terhadap kloramfenikol dan tetrasiklin akan tetapi masih sensitif terhadap sulfametoksazol-trimetoprim dengan diameter zona hambat masing-masing75 93 dan 286mm Pengujian aktivitas dengan penambahan ekstrak kunyit mulai dari konsentrasi 01 ndash1 menunjukkan peningkatan zona hambat pada Kloramfenikol (Tabel 2) dan Tetrasiklin (Tabel 3) serta sulfametoksazol-trimetoprim (Tabel 4)
Pembahasanbull Resistensi S Typhi melalui pompa efluks (PE) aktif terbukti sudah
menjadi mekanisme resistensi utama pada bakteri ini101118 dan juga didapatkan dari isolat klinik di Makassar-Indonesia yang dibuktikan pada penelitian ini sehingga diperlukan strategi untuk mengatasi hal tersebut Ekstrak rimpang kunyit (Curcuma domestica L) memperlihatkan potensi sebagai inhibitor pompa efluks (IPE) karena setelah ditumbuhkan bersama antibakteri-uji terlihat adanya peningkatan kekuatan (sensitivitas) Hal ini terlihat pada zona hambat Kloramfenikol yang semula resisten menjadi sensitif seiring peningkatan konsentrasi Pada pengujian tetrasiklin terlihat peningkatan zona hambat walaupun masih kategori intermediat berdasarkan standar EUCAST17
Pembahasanbull Potensi IPE pada ekstrak kunyit diduga dari zat aktif kurkuminnya
Kurkumin dan demetoksi kurkumin telah dibuktikan oleh Kourtesi (2013) dan Lechner (2009) sebagai IPE dari bahan alam meskipun zat aktif tersebut diekstraksi dari Curcuma longa L dan diuji bersama isoniazid pada Mycobacterium14 Mekanisme kerja IPE diduga antara lain (1) mengubah struktur molekul pompa efluks sehingga afinitas obat berkurang (2) menekan ekspresi gen pompa efluks (3) menurunkan energi pompa efluks (4) menjadi substrat kompetitif maupun non kompetitif terhadap pompa efluks16 Pemberian ekstrak kunyit bersama sulfametoksazol-trimetoprim ternyata ada kecenderungan justru menurunkan kekuatan antibakteri ini Hal ini kemungkinan disebabkan oleh karena S Typhi masih sensitif terhadap obat ini dan fenomena ini masih perlu dipelajari lebih lanjut
Daftar Pustaka1 de Jong HK Parry CM van der Poll T Wiersingamail WJ HostndashPathogen Interaction in Invasive Salmonellosis PLoSPathog 2012 October 8(10)p1
2 Zaki and Karande Multidrug-resistant typhoid fever J Infect Dev Ctries 2011 5(5)324-337
3 Al-Sanouri TM Paglietti B Haddadin A Murgia M Bacciu D Youssef M Rubino S Emergence of plasmid-mediated multidrug resistance in epidemic and non-epidemic strains of Salmonella enterica serotype Typhi from Jordan J Infect Dev Ctries 20082 295-301
4 Kothari A Pruthi A Chugh TD The Burden of Enteric Fever J Infect Dev Ctries 20082 253-259
5 Nagshetty K Channappa ST Gaddad SM Antimicrobial susceptibility of Salmonella Typhi in India J Infect Dev Ctries 20104 70-73
6 Hatta M Ratnawati Enteric fever in endemic areas of Indonesia an increasing problem of resistance J Infect Developing Countries 2008 2(4) 279-282
7 Nikaido H Pagegraves JM Broad-specificity efflux pumps and their role in multidrug resistance of gram-negative bacteria FEMS Microbiol Rev 2012 Mar36(2) 340-63
8 Ughachukwu PO and Unekwe PC1 Efflux Pump-Mediated resistance in Chemotherapy Annals of Medical and Health Sciences Research 20122 2 191-198
9 Baucheron S Tyler S Boyd D Mulvey MR Chaslus-Dancla E Cloeckaert A AcrAB-TolC Directs Efflux-Mediated Multidrug Resistance in Salmonella enterica Serovar Typhimurium DT104 Antimicrob Agents Chemother 2004 Oct48(10)3729-35
10 Yamasaki S Nagasawa S Fukushima A Nishino MA Nishino K Cooperation of the multidrug efflux pump and lipopolysaccharides in the intrinsic antibiotic resistance of Salmonella enterica serovar Typhimurium J Antimicrob Chemother 2013 681066-1070
11 Stavri M Piddock LJV and Gibbons S Bacterial efflux pump inhibitors from natural sources J Antimicro Chemother 200759 1247-1260
12 Xian-Zhi Li Hiroshi Nikaido Efflux-Mediated Drug Resistance in Bacteria Drugs 20096912 1555-1623
13 Baugh S Phillips CR Ekanayaka AS Piddock LJ Webber MA Inhibition of multidrug efflux as a strategy to prevent biofilm formation J Antimicrob Chemother 2013
14 Rana T Singh S Kaur N Pathania K Farooq U A Review on Efflux Pump Inhibitors of Medically Important Bacteria from Plant Sources Int J Pharm Sci Rev Res 201426(2) 101-111
15 Ricci V Blair JMA and Piddock LJV RamA which controls expression of the MDR efflux pump AcrAB-TolC is regulated by the Lon protease J Antimicrob Chemother 2013 1-8
16 Sumithra T G Chaturvedi V K Susan Cherian Binsila B Krishnan and Siju Susan Jacob Efflux Pump Inhibitors For Antibacterial Therapy Indian Veterinary Research Institute Izatnagar UP JIVA 2012101 69-75
17 EUCAST The European Committee on Antimicrobial Susceptibility Testing Breakpoint tables for interpretation zone diameters Version 40 2014 httpwwweucastorg
18 Baucheron S Coste F Canepa S et al Binding of the RamR repressor to wild-type and mutated promoters of the ramA gene involved in efflux-mediated multidrug resistance in Salmonella enteric serovar Typhi murium Anti microb Agents Chemother 201256942-8
TERIMA KASIH
Uji aktivitas Inhibitor PompaEfluks ekstrak kunyit (Curcuma
domestica L) pada S Typhiresisten
Uji aktivitas Inhibitor PompaEfluks ekstrak kunyit (Curcuma
domestica L) pada S Typhiresisten
Uji aktivitas Inhibitor PompaEfluks ekstrak kunyit (Curcuma
domestica L) pada S Typhiresisten
Pembahasanbull Pada penelitian ini isolat-uji S Typhi terbukti memiliki
mekanisme resistensi akibat pompa efluks aktif Hal ini ditandai dengan penurunan ekspresi pompa efluks AcrB sekitar 3x lipat (rata-rata dari 993075 menjadi 708729 ρgmL) setelah penambahan CCCP
bull Pengujian aktivitas awal dari ketiga antibakteri-uji menunjukkan bahwa S Typhi telah resisten terhadap kloramfenikol dan tetrasiklin akan tetapi masih sensitif terhadap sulfametoksazol-trimetoprim dengan diameter zona hambat masing-masing75 93 dan 286mm Pengujian aktivitas dengan penambahan ekstrak kunyit mulai dari konsentrasi 01 ndash1 menunjukkan peningkatan zona hambat pada Kloramfenikol (Tabel 2) dan Tetrasiklin (Tabel 3) serta sulfametoksazol-trimetoprim (Tabel 4)
Pembahasanbull Resistensi S Typhi melalui pompa efluks (PE) aktif terbukti sudah
menjadi mekanisme resistensi utama pada bakteri ini101118 dan juga didapatkan dari isolat klinik di Makassar-Indonesia yang dibuktikan pada penelitian ini sehingga diperlukan strategi untuk mengatasi hal tersebut Ekstrak rimpang kunyit (Curcuma domestica L) memperlihatkan potensi sebagai inhibitor pompa efluks (IPE) karena setelah ditumbuhkan bersama antibakteri-uji terlihat adanya peningkatan kekuatan (sensitivitas) Hal ini terlihat pada zona hambat Kloramfenikol yang semula resisten menjadi sensitif seiring peningkatan konsentrasi Pada pengujian tetrasiklin terlihat peningkatan zona hambat walaupun masih kategori intermediat berdasarkan standar EUCAST17
Pembahasanbull Potensi IPE pada ekstrak kunyit diduga dari zat aktif kurkuminnya
Kurkumin dan demetoksi kurkumin telah dibuktikan oleh Kourtesi (2013) dan Lechner (2009) sebagai IPE dari bahan alam meskipun zat aktif tersebut diekstraksi dari Curcuma longa L dan diuji bersama isoniazid pada Mycobacterium14 Mekanisme kerja IPE diduga antara lain (1) mengubah struktur molekul pompa efluks sehingga afinitas obat berkurang (2) menekan ekspresi gen pompa efluks (3) menurunkan energi pompa efluks (4) menjadi substrat kompetitif maupun non kompetitif terhadap pompa efluks16 Pemberian ekstrak kunyit bersama sulfametoksazol-trimetoprim ternyata ada kecenderungan justru menurunkan kekuatan antibakteri ini Hal ini kemungkinan disebabkan oleh karena S Typhi masih sensitif terhadap obat ini dan fenomena ini masih perlu dipelajari lebih lanjut
Daftar Pustaka1 de Jong HK Parry CM van der Poll T Wiersingamail WJ HostndashPathogen Interaction in Invasive Salmonellosis PLoSPathog 2012 October 8(10)p1
2 Zaki and Karande Multidrug-resistant typhoid fever J Infect Dev Ctries 2011 5(5)324-337
3 Al-Sanouri TM Paglietti B Haddadin A Murgia M Bacciu D Youssef M Rubino S Emergence of plasmid-mediated multidrug resistance in epidemic and non-epidemic strains of Salmonella enterica serotype Typhi from Jordan J Infect Dev Ctries 20082 295-301
4 Kothari A Pruthi A Chugh TD The Burden of Enteric Fever J Infect Dev Ctries 20082 253-259
5 Nagshetty K Channappa ST Gaddad SM Antimicrobial susceptibility of Salmonella Typhi in India J Infect Dev Ctries 20104 70-73
6 Hatta M Ratnawati Enteric fever in endemic areas of Indonesia an increasing problem of resistance J Infect Developing Countries 2008 2(4) 279-282
7 Nikaido H Pagegraves JM Broad-specificity efflux pumps and their role in multidrug resistance of gram-negative bacteria FEMS Microbiol Rev 2012 Mar36(2) 340-63
8 Ughachukwu PO and Unekwe PC1 Efflux Pump-Mediated resistance in Chemotherapy Annals of Medical and Health Sciences Research 20122 2 191-198
9 Baucheron S Tyler S Boyd D Mulvey MR Chaslus-Dancla E Cloeckaert A AcrAB-TolC Directs Efflux-Mediated Multidrug Resistance in Salmonella enterica Serovar Typhimurium DT104 Antimicrob Agents Chemother 2004 Oct48(10)3729-35
10 Yamasaki S Nagasawa S Fukushima A Nishino MA Nishino K Cooperation of the multidrug efflux pump and lipopolysaccharides in the intrinsic antibiotic resistance of Salmonella enterica serovar Typhimurium J Antimicrob Chemother 2013 681066-1070
11 Stavri M Piddock LJV and Gibbons S Bacterial efflux pump inhibitors from natural sources J Antimicro Chemother 200759 1247-1260
12 Xian-Zhi Li Hiroshi Nikaido Efflux-Mediated Drug Resistance in Bacteria Drugs 20096912 1555-1623
13 Baugh S Phillips CR Ekanayaka AS Piddock LJ Webber MA Inhibition of multidrug efflux as a strategy to prevent biofilm formation J Antimicrob Chemother 2013
14 Rana T Singh S Kaur N Pathania K Farooq U A Review on Efflux Pump Inhibitors of Medically Important Bacteria from Plant Sources Int J Pharm Sci Rev Res 201426(2) 101-111
15 Ricci V Blair JMA and Piddock LJV RamA which controls expression of the MDR efflux pump AcrAB-TolC is regulated by the Lon protease J Antimicrob Chemother 2013 1-8
16 Sumithra T G Chaturvedi V K Susan Cherian Binsila B Krishnan and Siju Susan Jacob Efflux Pump Inhibitors For Antibacterial Therapy Indian Veterinary Research Institute Izatnagar UP JIVA 2012101 69-75
17 EUCAST The European Committee on Antimicrobial Susceptibility Testing Breakpoint tables for interpretation zone diameters Version 40 2014 httpwwweucastorg
18 Baucheron S Coste F Canepa S et al Binding of the RamR repressor to wild-type and mutated promoters of the ramA gene involved in efflux-mediated multidrug resistance in Salmonella enteric serovar Typhi murium Anti microb Agents Chemother 201256942-8
TERIMA KASIH
Uji aktivitas Inhibitor PompaEfluks ekstrak kunyit (Curcuma
domestica L) pada S Typhiresisten
Uji aktivitas Inhibitor PompaEfluks ekstrak kunyit (Curcuma
domestica L) pada S Typhiresisten
Pembahasanbull Pada penelitian ini isolat-uji S Typhi terbukti memiliki
mekanisme resistensi akibat pompa efluks aktif Hal ini ditandai dengan penurunan ekspresi pompa efluks AcrB sekitar 3x lipat (rata-rata dari 993075 menjadi 708729 ρgmL) setelah penambahan CCCP
bull Pengujian aktivitas awal dari ketiga antibakteri-uji menunjukkan bahwa S Typhi telah resisten terhadap kloramfenikol dan tetrasiklin akan tetapi masih sensitif terhadap sulfametoksazol-trimetoprim dengan diameter zona hambat masing-masing75 93 dan 286mm Pengujian aktivitas dengan penambahan ekstrak kunyit mulai dari konsentrasi 01 ndash1 menunjukkan peningkatan zona hambat pada Kloramfenikol (Tabel 2) dan Tetrasiklin (Tabel 3) serta sulfametoksazol-trimetoprim (Tabel 4)
Pembahasanbull Resistensi S Typhi melalui pompa efluks (PE) aktif terbukti sudah
menjadi mekanisme resistensi utama pada bakteri ini101118 dan juga didapatkan dari isolat klinik di Makassar-Indonesia yang dibuktikan pada penelitian ini sehingga diperlukan strategi untuk mengatasi hal tersebut Ekstrak rimpang kunyit (Curcuma domestica L) memperlihatkan potensi sebagai inhibitor pompa efluks (IPE) karena setelah ditumbuhkan bersama antibakteri-uji terlihat adanya peningkatan kekuatan (sensitivitas) Hal ini terlihat pada zona hambat Kloramfenikol yang semula resisten menjadi sensitif seiring peningkatan konsentrasi Pada pengujian tetrasiklin terlihat peningkatan zona hambat walaupun masih kategori intermediat berdasarkan standar EUCAST17
Pembahasanbull Potensi IPE pada ekstrak kunyit diduga dari zat aktif kurkuminnya
Kurkumin dan demetoksi kurkumin telah dibuktikan oleh Kourtesi (2013) dan Lechner (2009) sebagai IPE dari bahan alam meskipun zat aktif tersebut diekstraksi dari Curcuma longa L dan diuji bersama isoniazid pada Mycobacterium14 Mekanisme kerja IPE diduga antara lain (1) mengubah struktur molekul pompa efluks sehingga afinitas obat berkurang (2) menekan ekspresi gen pompa efluks (3) menurunkan energi pompa efluks (4) menjadi substrat kompetitif maupun non kompetitif terhadap pompa efluks16 Pemberian ekstrak kunyit bersama sulfametoksazol-trimetoprim ternyata ada kecenderungan justru menurunkan kekuatan antibakteri ini Hal ini kemungkinan disebabkan oleh karena S Typhi masih sensitif terhadap obat ini dan fenomena ini masih perlu dipelajari lebih lanjut
Daftar Pustaka1 de Jong HK Parry CM van der Poll T Wiersingamail WJ HostndashPathogen Interaction in Invasive Salmonellosis PLoSPathog 2012 October 8(10)p1
2 Zaki and Karande Multidrug-resistant typhoid fever J Infect Dev Ctries 2011 5(5)324-337
3 Al-Sanouri TM Paglietti B Haddadin A Murgia M Bacciu D Youssef M Rubino S Emergence of plasmid-mediated multidrug resistance in epidemic and non-epidemic strains of Salmonella enterica serotype Typhi from Jordan J Infect Dev Ctries 20082 295-301
4 Kothari A Pruthi A Chugh TD The Burden of Enteric Fever J Infect Dev Ctries 20082 253-259
5 Nagshetty K Channappa ST Gaddad SM Antimicrobial susceptibility of Salmonella Typhi in India J Infect Dev Ctries 20104 70-73
6 Hatta M Ratnawati Enteric fever in endemic areas of Indonesia an increasing problem of resistance J Infect Developing Countries 2008 2(4) 279-282
7 Nikaido H Pagegraves JM Broad-specificity efflux pumps and their role in multidrug resistance of gram-negative bacteria FEMS Microbiol Rev 2012 Mar36(2) 340-63
8 Ughachukwu PO and Unekwe PC1 Efflux Pump-Mediated resistance in Chemotherapy Annals of Medical and Health Sciences Research 20122 2 191-198
9 Baucheron S Tyler S Boyd D Mulvey MR Chaslus-Dancla E Cloeckaert A AcrAB-TolC Directs Efflux-Mediated Multidrug Resistance in Salmonella enterica Serovar Typhimurium DT104 Antimicrob Agents Chemother 2004 Oct48(10)3729-35
10 Yamasaki S Nagasawa S Fukushima A Nishino MA Nishino K Cooperation of the multidrug efflux pump and lipopolysaccharides in the intrinsic antibiotic resistance of Salmonella enterica serovar Typhimurium J Antimicrob Chemother 2013 681066-1070
11 Stavri M Piddock LJV and Gibbons S Bacterial efflux pump inhibitors from natural sources J Antimicro Chemother 200759 1247-1260
12 Xian-Zhi Li Hiroshi Nikaido Efflux-Mediated Drug Resistance in Bacteria Drugs 20096912 1555-1623
13 Baugh S Phillips CR Ekanayaka AS Piddock LJ Webber MA Inhibition of multidrug efflux as a strategy to prevent biofilm formation J Antimicrob Chemother 2013
14 Rana T Singh S Kaur N Pathania K Farooq U A Review on Efflux Pump Inhibitors of Medically Important Bacteria from Plant Sources Int J Pharm Sci Rev Res 201426(2) 101-111
15 Ricci V Blair JMA and Piddock LJV RamA which controls expression of the MDR efflux pump AcrAB-TolC is regulated by the Lon protease J Antimicrob Chemother 2013 1-8
16 Sumithra T G Chaturvedi V K Susan Cherian Binsila B Krishnan and Siju Susan Jacob Efflux Pump Inhibitors For Antibacterial Therapy Indian Veterinary Research Institute Izatnagar UP JIVA 2012101 69-75
17 EUCAST The European Committee on Antimicrobial Susceptibility Testing Breakpoint tables for interpretation zone diameters Version 40 2014 httpwwweucastorg
18 Baucheron S Coste F Canepa S et al Binding of the RamR repressor to wild-type and mutated promoters of the ramA gene involved in efflux-mediated multidrug resistance in Salmonella enteric serovar Typhi murium Anti microb Agents Chemother 201256942-8
TERIMA KASIH
Uji aktivitas Inhibitor PompaEfluks ekstrak kunyit (Curcuma
domestica L) pada S Typhiresisten
Pembahasanbull Pada penelitian ini isolat-uji S Typhi terbukti memiliki
mekanisme resistensi akibat pompa efluks aktif Hal ini ditandai dengan penurunan ekspresi pompa efluks AcrB sekitar 3x lipat (rata-rata dari 993075 menjadi 708729 ρgmL) setelah penambahan CCCP
bull Pengujian aktivitas awal dari ketiga antibakteri-uji menunjukkan bahwa S Typhi telah resisten terhadap kloramfenikol dan tetrasiklin akan tetapi masih sensitif terhadap sulfametoksazol-trimetoprim dengan diameter zona hambat masing-masing75 93 dan 286mm Pengujian aktivitas dengan penambahan ekstrak kunyit mulai dari konsentrasi 01 ndash1 menunjukkan peningkatan zona hambat pada Kloramfenikol (Tabel 2) dan Tetrasiklin (Tabel 3) serta sulfametoksazol-trimetoprim (Tabel 4)
Pembahasanbull Resistensi S Typhi melalui pompa efluks (PE) aktif terbukti sudah
menjadi mekanisme resistensi utama pada bakteri ini101118 dan juga didapatkan dari isolat klinik di Makassar-Indonesia yang dibuktikan pada penelitian ini sehingga diperlukan strategi untuk mengatasi hal tersebut Ekstrak rimpang kunyit (Curcuma domestica L) memperlihatkan potensi sebagai inhibitor pompa efluks (IPE) karena setelah ditumbuhkan bersama antibakteri-uji terlihat adanya peningkatan kekuatan (sensitivitas) Hal ini terlihat pada zona hambat Kloramfenikol yang semula resisten menjadi sensitif seiring peningkatan konsentrasi Pada pengujian tetrasiklin terlihat peningkatan zona hambat walaupun masih kategori intermediat berdasarkan standar EUCAST17
Pembahasanbull Potensi IPE pada ekstrak kunyit diduga dari zat aktif kurkuminnya
Kurkumin dan demetoksi kurkumin telah dibuktikan oleh Kourtesi (2013) dan Lechner (2009) sebagai IPE dari bahan alam meskipun zat aktif tersebut diekstraksi dari Curcuma longa L dan diuji bersama isoniazid pada Mycobacterium14 Mekanisme kerja IPE diduga antara lain (1) mengubah struktur molekul pompa efluks sehingga afinitas obat berkurang (2) menekan ekspresi gen pompa efluks (3) menurunkan energi pompa efluks (4) menjadi substrat kompetitif maupun non kompetitif terhadap pompa efluks16 Pemberian ekstrak kunyit bersama sulfametoksazol-trimetoprim ternyata ada kecenderungan justru menurunkan kekuatan antibakteri ini Hal ini kemungkinan disebabkan oleh karena S Typhi masih sensitif terhadap obat ini dan fenomena ini masih perlu dipelajari lebih lanjut
Daftar Pustaka1 de Jong HK Parry CM van der Poll T Wiersingamail WJ HostndashPathogen Interaction in Invasive Salmonellosis PLoSPathog 2012 October 8(10)p1
2 Zaki and Karande Multidrug-resistant typhoid fever J Infect Dev Ctries 2011 5(5)324-337
3 Al-Sanouri TM Paglietti B Haddadin A Murgia M Bacciu D Youssef M Rubino S Emergence of plasmid-mediated multidrug resistance in epidemic and non-epidemic strains of Salmonella enterica serotype Typhi from Jordan J Infect Dev Ctries 20082 295-301
4 Kothari A Pruthi A Chugh TD The Burden of Enteric Fever J Infect Dev Ctries 20082 253-259
5 Nagshetty K Channappa ST Gaddad SM Antimicrobial susceptibility of Salmonella Typhi in India J Infect Dev Ctries 20104 70-73
6 Hatta M Ratnawati Enteric fever in endemic areas of Indonesia an increasing problem of resistance J Infect Developing Countries 2008 2(4) 279-282
7 Nikaido H Pagegraves JM Broad-specificity efflux pumps and their role in multidrug resistance of gram-negative bacteria FEMS Microbiol Rev 2012 Mar36(2) 340-63
8 Ughachukwu PO and Unekwe PC1 Efflux Pump-Mediated resistance in Chemotherapy Annals of Medical and Health Sciences Research 20122 2 191-198
9 Baucheron S Tyler S Boyd D Mulvey MR Chaslus-Dancla E Cloeckaert A AcrAB-TolC Directs Efflux-Mediated Multidrug Resistance in Salmonella enterica Serovar Typhimurium DT104 Antimicrob Agents Chemother 2004 Oct48(10)3729-35
10 Yamasaki S Nagasawa S Fukushima A Nishino MA Nishino K Cooperation of the multidrug efflux pump and lipopolysaccharides in the intrinsic antibiotic resistance of Salmonella enterica serovar Typhimurium J Antimicrob Chemother 2013 681066-1070
11 Stavri M Piddock LJV and Gibbons S Bacterial efflux pump inhibitors from natural sources J Antimicro Chemother 200759 1247-1260
12 Xian-Zhi Li Hiroshi Nikaido Efflux-Mediated Drug Resistance in Bacteria Drugs 20096912 1555-1623
13 Baugh S Phillips CR Ekanayaka AS Piddock LJ Webber MA Inhibition of multidrug efflux as a strategy to prevent biofilm formation J Antimicrob Chemother 2013
14 Rana T Singh S Kaur N Pathania K Farooq U A Review on Efflux Pump Inhibitors of Medically Important Bacteria from Plant Sources Int J Pharm Sci Rev Res 201426(2) 101-111
15 Ricci V Blair JMA and Piddock LJV RamA which controls expression of the MDR efflux pump AcrAB-TolC is regulated by the Lon protease J Antimicrob Chemother 2013 1-8
16 Sumithra T G Chaturvedi V K Susan Cherian Binsila B Krishnan and Siju Susan Jacob Efflux Pump Inhibitors For Antibacterial Therapy Indian Veterinary Research Institute Izatnagar UP JIVA 2012101 69-75
17 EUCAST The European Committee on Antimicrobial Susceptibility Testing Breakpoint tables for interpretation zone diameters Version 40 2014 httpwwweucastorg
18 Baucheron S Coste F Canepa S et al Binding of the RamR repressor to wild-type and mutated promoters of the ramA gene involved in efflux-mediated multidrug resistance in Salmonella enteric serovar Typhi murium Anti microb Agents Chemother 201256942-8
TERIMA KASIH
Pembahasanbull Pada penelitian ini isolat-uji S Typhi terbukti memiliki
mekanisme resistensi akibat pompa efluks aktif Hal ini ditandai dengan penurunan ekspresi pompa efluks AcrB sekitar 3x lipat (rata-rata dari 993075 menjadi 708729 ρgmL) setelah penambahan CCCP
bull Pengujian aktivitas awal dari ketiga antibakteri-uji menunjukkan bahwa S Typhi telah resisten terhadap kloramfenikol dan tetrasiklin akan tetapi masih sensitif terhadap sulfametoksazol-trimetoprim dengan diameter zona hambat masing-masing75 93 dan 286mm Pengujian aktivitas dengan penambahan ekstrak kunyit mulai dari konsentrasi 01 ndash1 menunjukkan peningkatan zona hambat pada Kloramfenikol (Tabel 2) dan Tetrasiklin (Tabel 3) serta sulfametoksazol-trimetoprim (Tabel 4)
Pembahasanbull Resistensi S Typhi melalui pompa efluks (PE) aktif terbukti sudah
menjadi mekanisme resistensi utama pada bakteri ini101118 dan juga didapatkan dari isolat klinik di Makassar-Indonesia yang dibuktikan pada penelitian ini sehingga diperlukan strategi untuk mengatasi hal tersebut Ekstrak rimpang kunyit (Curcuma domestica L) memperlihatkan potensi sebagai inhibitor pompa efluks (IPE) karena setelah ditumbuhkan bersama antibakteri-uji terlihat adanya peningkatan kekuatan (sensitivitas) Hal ini terlihat pada zona hambat Kloramfenikol yang semula resisten menjadi sensitif seiring peningkatan konsentrasi Pada pengujian tetrasiklin terlihat peningkatan zona hambat walaupun masih kategori intermediat berdasarkan standar EUCAST17
Pembahasanbull Potensi IPE pada ekstrak kunyit diduga dari zat aktif kurkuminnya
Kurkumin dan demetoksi kurkumin telah dibuktikan oleh Kourtesi (2013) dan Lechner (2009) sebagai IPE dari bahan alam meskipun zat aktif tersebut diekstraksi dari Curcuma longa L dan diuji bersama isoniazid pada Mycobacterium14 Mekanisme kerja IPE diduga antara lain (1) mengubah struktur molekul pompa efluks sehingga afinitas obat berkurang (2) menekan ekspresi gen pompa efluks (3) menurunkan energi pompa efluks (4) menjadi substrat kompetitif maupun non kompetitif terhadap pompa efluks16 Pemberian ekstrak kunyit bersama sulfametoksazol-trimetoprim ternyata ada kecenderungan justru menurunkan kekuatan antibakteri ini Hal ini kemungkinan disebabkan oleh karena S Typhi masih sensitif terhadap obat ini dan fenomena ini masih perlu dipelajari lebih lanjut
Daftar Pustaka1 de Jong HK Parry CM van der Poll T Wiersingamail WJ HostndashPathogen Interaction in Invasive Salmonellosis PLoSPathog 2012 October 8(10)p1
2 Zaki and Karande Multidrug-resistant typhoid fever J Infect Dev Ctries 2011 5(5)324-337
3 Al-Sanouri TM Paglietti B Haddadin A Murgia M Bacciu D Youssef M Rubino S Emergence of plasmid-mediated multidrug resistance in epidemic and non-epidemic strains of Salmonella enterica serotype Typhi from Jordan J Infect Dev Ctries 20082 295-301
4 Kothari A Pruthi A Chugh TD The Burden of Enteric Fever J Infect Dev Ctries 20082 253-259
5 Nagshetty K Channappa ST Gaddad SM Antimicrobial susceptibility of Salmonella Typhi in India J Infect Dev Ctries 20104 70-73
6 Hatta M Ratnawati Enteric fever in endemic areas of Indonesia an increasing problem of resistance J Infect Developing Countries 2008 2(4) 279-282
7 Nikaido H Pagegraves JM Broad-specificity efflux pumps and their role in multidrug resistance of gram-negative bacteria FEMS Microbiol Rev 2012 Mar36(2) 340-63
8 Ughachukwu PO and Unekwe PC1 Efflux Pump-Mediated resistance in Chemotherapy Annals of Medical and Health Sciences Research 20122 2 191-198
9 Baucheron S Tyler S Boyd D Mulvey MR Chaslus-Dancla E Cloeckaert A AcrAB-TolC Directs Efflux-Mediated Multidrug Resistance in Salmonella enterica Serovar Typhimurium DT104 Antimicrob Agents Chemother 2004 Oct48(10)3729-35
10 Yamasaki S Nagasawa S Fukushima A Nishino MA Nishino K Cooperation of the multidrug efflux pump and lipopolysaccharides in the intrinsic antibiotic resistance of Salmonella enterica serovar Typhimurium J Antimicrob Chemother 2013 681066-1070
11 Stavri M Piddock LJV and Gibbons S Bacterial efflux pump inhibitors from natural sources J Antimicro Chemother 200759 1247-1260
12 Xian-Zhi Li Hiroshi Nikaido Efflux-Mediated Drug Resistance in Bacteria Drugs 20096912 1555-1623
13 Baugh S Phillips CR Ekanayaka AS Piddock LJ Webber MA Inhibition of multidrug efflux as a strategy to prevent biofilm formation J Antimicrob Chemother 2013
14 Rana T Singh S Kaur N Pathania K Farooq U A Review on Efflux Pump Inhibitors of Medically Important Bacteria from Plant Sources Int J Pharm Sci Rev Res 201426(2) 101-111
15 Ricci V Blair JMA and Piddock LJV RamA which controls expression of the MDR efflux pump AcrAB-TolC is regulated by the Lon protease J Antimicrob Chemother 2013 1-8
16 Sumithra T G Chaturvedi V K Susan Cherian Binsila B Krishnan and Siju Susan Jacob Efflux Pump Inhibitors For Antibacterial Therapy Indian Veterinary Research Institute Izatnagar UP JIVA 2012101 69-75
17 EUCAST The European Committee on Antimicrobial Susceptibility Testing Breakpoint tables for interpretation zone diameters Version 40 2014 httpwwweucastorg
18 Baucheron S Coste F Canepa S et al Binding of the RamR repressor to wild-type and mutated promoters of the ramA gene involved in efflux-mediated multidrug resistance in Salmonella enteric serovar Typhi murium Anti microb Agents Chemother 201256942-8
TERIMA KASIH
Pembahasanbull Resistensi S Typhi melalui pompa efluks (PE) aktif terbukti sudah
menjadi mekanisme resistensi utama pada bakteri ini101118 dan juga didapatkan dari isolat klinik di Makassar-Indonesia yang dibuktikan pada penelitian ini sehingga diperlukan strategi untuk mengatasi hal tersebut Ekstrak rimpang kunyit (Curcuma domestica L) memperlihatkan potensi sebagai inhibitor pompa efluks (IPE) karena setelah ditumbuhkan bersama antibakteri-uji terlihat adanya peningkatan kekuatan (sensitivitas) Hal ini terlihat pada zona hambat Kloramfenikol yang semula resisten menjadi sensitif seiring peningkatan konsentrasi Pada pengujian tetrasiklin terlihat peningkatan zona hambat walaupun masih kategori intermediat berdasarkan standar EUCAST17
Pembahasanbull Potensi IPE pada ekstrak kunyit diduga dari zat aktif kurkuminnya
Kurkumin dan demetoksi kurkumin telah dibuktikan oleh Kourtesi (2013) dan Lechner (2009) sebagai IPE dari bahan alam meskipun zat aktif tersebut diekstraksi dari Curcuma longa L dan diuji bersama isoniazid pada Mycobacterium14 Mekanisme kerja IPE diduga antara lain (1) mengubah struktur molekul pompa efluks sehingga afinitas obat berkurang (2) menekan ekspresi gen pompa efluks (3) menurunkan energi pompa efluks (4) menjadi substrat kompetitif maupun non kompetitif terhadap pompa efluks16 Pemberian ekstrak kunyit bersama sulfametoksazol-trimetoprim ternyata ada kecenderungan justru menurunkan kekuatan antibakteri ini Hal ini kemungkinan disebabkan oleh karena S Typhi masih sensitif terhadap obat ini dan fenomena ini masih perlu dipelajari lebih lanjut
Daftar Pustaka1 de Jong HK Parry CM van der Poll T Wiersingamail WJ HostndashPathogen Interaction in Invasive Salmonellosis PLoSPathog 2012 October 8(10)p1
2 Zaki and Karande Multidrug-resistant typhoid fever J Infect Dev Ctries 2011 5(5)324-337
3 Al-Sanouri TM Paglietti B Haddadin A Murgia M Bacciu D Youssef M Rubino S Emergence of plasmid-mediated multidrug resistance in epidemic and non-epidemic strains of Salmonella enterica serotype Typhi from Jordan J Infect Dev Ctries 20082 295-301
4 Kothari A Pruthi A Chugh TD The Burden of Enteric Fever J Infect Dev Ctries 20082 253-259
5 Nagshetty K Channappa ST Gaddad SM Antimicrobial susceptibility of Salmonella Typhi in India J Infect Dev Ctries 20104 70-73
6 Hatta M Ratnawati Enteric fever in endemic areas of Indonesia an increasing problem of resistance J Infect Developing Countries 2008 2(4) 279-282
7 Nikaido H Pagegraves JM Broad-specificity efflux pumps and their role in multidrug resistance of gram-negative bacteria FEMS Microbiol Rev 2012 Mar36(2) 340-63
8 Ughachukwu PO and Unekwe PC1 Efflux Pump-Mediated resistance in Chemotherapy Annals of Medical and Health Sciences Research 20122 2 191-198
9 Baucheron S Tyler S Boyd D Mulvey MR Chaslus-Dancla E Cloeckaert A AcrAB-TolC Directs Efflux-Mediated Multidrug Resistance in Salmonella enterica Serovar Typhimurium DT104 Antimicrob Agents Chemother 2004 Oct48(10)3729-35
10 Yamasaki S Nagasawa S Fukushima A Nishino MA Nishino K Cooperation of the multidrug efflux pump and lipopolysaccharides in the intrinsic antibiotic resistance of Salmonella enterica serovar Typhimurium J Antimicrob Chemother 2013 681066-1070
11 Stavri M Piddock LJV and Gibbons S Bacterial efflux pump inhibitors from natural sources J Antimicro Chemother 200759 1247-1260
12 Xian-Zhi Li Hiroshi Nikaido Efflux-Mediated Drug Resistance in Bacteria Drugs 20096912 1555-1623
13 Baugh S Phillips CR Ekanayaka AS Piddock LJ Webber MA Inhibition of multidrug efflux as a strategy to prevent biofilm formation J Antimicrob Chemother 2013
14 Rana T Singh S Kaur N Pathania K Farooq U A Review on Efflux Pump Inhibitors of Medically Important Bacteria from Plant Sources Int J Pharm Sci Rev Res 201426(2) 101-111
15 Ricci V Blair JMA and Piddock LJV RamA which controls expression of the MDR efflux pump AcrAB-TolC is regulated by the Lon protease J Antimicrob Chemother 2013 1-8
16 Sumithra T G Chaturvedi V K Susan Cherian Binsila B Krishnan and Siju Susan Jacob Efflux Pump Inhibitors For Antibacterial Therapy Indian Veterinary Research Institute Izatnagar UP JIVA 2012101 69-75
17 EUCAST The European Committee on Antimicrobial Susceptibility Testing Breakpoint tables for interpretation zone diameters Version 40 2014 httpwwweucastorg
18 Baucheron S Coste F Canepa S et al Binding of the RamR repressor to wild-type and mutated promoters of the ramA gene involved in efflux-mediated multidrug resistance in Salmonella enteric serovar Typhi murium Anti microb Agents Chemother 201256942-8
TERIMA KASIH
Pembahasanbull Potensi IPE pada ekstrak kunyit diduga dari zat aktif kurkuminnya
Kurkumin dan demetoksi kurkumin telah dibuktikan oleh Kourtesi (2013) dan Lechner (2009) sebagai IPE dari bahan alam meskipun zat aktif tersebut diekstraksi dari Curcuma longa L dan diuji bersama isoniazid pada Mycobacterium14 Mekanisme kerja IPE diduga antara lain (1) mengubah struktur molekul pompa efluks sehingga afinitas obat berkurang (2) menekan ekspresi gen pompa efluks (3) menurunkan energi pompa efluks (4) menjadi substrat kompetitif maupun non kompetitif terhadap pompa efluks16 Pemberian ekstrak kunyit bersama sulfametoksazol-trimetoprim ternyata ada kecenderungan justru menurunkan kekuatan antibakteri ini Hal ini kemungkinan disebabkan oleh karena S Typhi masih sensitif terhadap obat ini dan fenomena ini masih perlu dipelajari lebih lanjut
Daftar Pustaka1 de Jong HK Parry CM van der Poll T Wiersingamail WJ HostndashPathogen Interaction in Invasive Salmonellosis PLoSPathog 2012 October 8(10)p1
2 Zaki and Karande Multidrug-resistant typhoid fever J Infect Dev Ctries 2011 5(5)324-337
3 Al-Sanouri TM Paglietti B Haddadin A Murgia M Bacciu D Youssef M Rubino S Emergence of plasmid-mediated multidrug resistance in epidemic and non-epidemic strains of Salmonella enterica serotype Typhi from Jordan J Infect Dev Ctries 20082 295-301
4 Kothari A Pruthi A Chugh TD The Burden of Enteric Fever J Infect Dev Ctries 20082 253-259
5 Nagshetty K Channappa ST Gaddad SM Antimicrobial susceptibility of Salmonella Typhi in India J Infect Dev Ctries 20104 70-73
6 Hatta M Ratnawati Enteric fever in endemic areas of Indonesia an increasing problem of resistance J Infect Developing Countries 2008 2(4) 279-282
7 Nikaido H Pagegraves JM Broad-specificity efflux pumps and their role in multidrug resistance of gram-negative bacteria FEMS Microbiol Rev 2012 Mar36(2) 340-63
8 Ughachukwu PO and Unekwe PC1 Efflux Pump-Mediated resistance in Chemotherapy Annals of Medical and Health Sciences Research 20122 2 191-198
9 Baucheron S Tyler S Boyd D Mulvey MR Chaslus-Dancla E Cloeckaert A AcrAB-TolC Directs Efflux-Mediated Multidrug Resistance in Salmonella enterica Serovar Typhimurium DT104 Antimicrob Agents Chemother 2004 Oct48(10)3729-35
10 Yamasaki S Nagasawa S Fukushima A Nishino MA Nishino K Cooperation of the multidrug efflux pump and lipopolysaccharides in the intrinsic antibiotic resistance of Salmonella enterica serovar Typhimurium J Antimicrob Chemother 2013 681066-1070
11 Stavri M Piddock LJV and Gibbons S Bacterial efflux pump inhibitors from natural sources J Antimicro Chemother 200759 1247-1260
12 Xian-Zhi Li Hiroshi Nikaido Efflux-Mediated Drug Resistance in Bacteria Drugs 20096912 1555-1623
13 Baugh S Phillips CR Ekanayaka AS Piddock LJ Webber MA Inhibition of multidrug efflux as a strategy to prevent biofilm formation J Antimicrob Chemother 2013
14 Rana T Singh S Kaur N Pathania K Farooq U A Review on Efflux Pump Inhibitors of Medically Important Bacteria from Plant Sources Int J Pharm Sci Rev Res 201426(2) 101-111
15 Ricci V Blair JMA and Piddock LJV RamA which controls expression of the MDR efflux pump AcrAB-TolC is regulated by the Lon protease J Antimicrob Chemother 2013 1-8
16 Sumithra T G Chaturvedi V K Susan Cherian Binsila B Krishnan and Siju Susan Jacob Efflux Pump Inhibitors For Antibacterial Therapy Indian Veterinary Research Institute Izatnagar UP JIVA 2012101 69-75
17 EUCAST The European Committee on Antimicrobial Susceptibility Testing Breakpoint tables for interpretation zone diameters Version 40 2014 httpwwweucastorg
18 Baucheron S Coste F Canepa S et al Binding of the RamR repressor to wild-type and mutated promoters of the ramA gene involved in efflux-mediated multidrug resistance in Salmonella enteric serovar Typhi murium Anti microb Agents Chemother 201256942-8
TERIMA KASIH
Daftar Pustaka1 de Jong HK Parry CM van der Poll T Wiersingamail WJ HostndashPathogen Interaction in Invasive Salmonellosis PLoSPathog 2012 October 8(10)p1
2 Zaki and Karande Multidrug-resistant typhoid fever J Infect Dev Ctries 2011 5(5)324-337
3 Al-Sanouri TM Paglietti B Haddadin A Murgia M Bacciu D Youssef M Rubino S Emergence of plasmid-mediated multidrug resistance in epidemic and non-epidemic strains of Salmonella enterica serotype Typhi from Jordan J Infect Dev Ctries 20082 295-301
4 Kothari A Pruthi A Chugh TD The Burden of Enteric Fever J Infect Dev Ctries 20082 253-259
5 Nagshetty K Channappa ST Gaddad SM Antimicrobial susceptibility of Salmonella Typhi in India J Infect Dev Ctries 20104 70-73
6 Hatta M Ratnawati Enteric fever in endemic areas of Indonesia an increasing problem of resistance J Infect Developing Countries 2008 2(4) 279-282
7 Nikaido H Pagegraves JM Broad-specificity efflux pumps and their role in multidrug resistance of gram-negative bacteria FEMS Microbiol Rev 2012 Mar36(2) 340-63
8 Ughachukwu PO and Unekwe PC1 Efflux Pump-Mediated resistance in Chemotherapy Annals of Medical and Health Sciences Research 20122 2 191-198
9 Baucheron S Tyler S Boyd D Mulvey MR Chaslus-Dancla E Cloeckaert A AcrAB-TolC Directs Efflux-Mediated Multidrug Resistance in Salmonella enterica Serovar Typhimurium DT104 Antimicrob Agents Chemother 2004 Oct48(10)3729-35
10 Yamasaki S Nagasawa S Fukushima A Nishino MA Nishino K Cooperation of the multidrug efflux pump and lipopolysaccharides in the intrinsic antibiotic resistance of Salmonella enterica serovar Typhimurium J Antimicrob Chemother 2013 681066-1070
11 Stavri M Piddock LJV and Gibbons S Bacterial efflux pump inhibitors from natural sources J Antimicro Chemother 200759 1247-1260
12 Xian-Zhi Li Hiroshi Nikaido Efflux-Mediated Drug Resistance in Bacteria Drugs 20096912 1555-1623
13 Baugh S Phillips CR Ekanayaka AS Piddock LJ Webber MA Inhibition of multidrug efflux as a strategy to prevent biofilm formation J Antimicrob Chemother 2013
14 Rana T Singh S Kaur N Pathania K Farooq U A Review on Efflux Pump Inhibitors of Medically Important Bacteria from Plant Sources Int J Pharm Sci Rev Res 201426(2) 101-111
15 Ricci V Blair JMA and Piddock LJV RamA which controls expression of the MDR efflux pump AcrAB-TolC is regulated by the Lon protease J Antimicrob Chemother 2013 1-8
16 Sumithra T G Chaturvedi V K Susan Cherian Binsila B Krishnan and Siju Susan Jacob Efflux Pump Inhibitors For Antibacterial Therapy Indian Veterinary Research Institute Izatnagar UP JIVA 2012101 69-75
17 EUCAST The European Committee on Antimicrobial Susceptibility Testing Breakpoint tables for interpretation zone diameters Version 40 2014 httpwwweucastorg
18 Baucheron S Coste F Canepa S et al Binding of the RamR repressor to wild-type and mutated promoters of the ramA gene involved in efflux-mediated multidrug resistance in Salmonella enteric serovar Typhi murium Anti microb Agents Chemother 201256942-8
TERIMA KASIH
TERIMA KASIH