Webinar UHPLC Agilent 1290 Infinity · • Alarga el tiempo de vida de los sellos/ intervalos de mantenimiento (>150L) • Un solo sello para fase normal y reversa Capilares Multi-Capa

Webinar UHPLC Agilent 1290 InfinityEl sistema UHPLC con mayor rango de potencia para reducir sus tiempos de análisis sin sacrificar resolución, o aumentar resolución manteniendo tiempos.

Isidre MasanaAgilent TechnologiesEspecialista de Producto

7 Abril del 2010 11:00 a.m.

1290 Infinity UHPLCpág.: 2

Agenda1. ¿Porqué es Importante la Velocidad en UHPLC?.2. Posibilidades del 1290 Infinity UHPLC

• Ejemplos de rendimiento del nuevo sistema3. Algunas Innovaciones

Tecnológicas del 1290 Infinity UHPLC

4. Agilent 1290 InfinityUHPLC/MS

- En unos días recibirán un e-mail para poder descargarse la presentación.

The Today‘s Most PowerfulUHPLC:

Agilent 1290 Infinity

to get the best chromatography.


¿Porqué es Importante la Velocidad en UHPLC?El poder de separación de elevadas velocidades lineales

Cromatogramas con escala de tiempo alineada a primer y último picoI.D. & I.M - Waldbronn 5/2009

Columna: ZORBAX RRHD SB-C18 2.1 x 100mm 1.8 µmGradiente: ACN/H2O 30/70 a 100/0 a 40ºC Cromatogr. A: 0.5mL/min en 3.0min // B: 0.833mL/min en 1.8minInyección: 1µL (Uracilo, Fenol, Metil/Etil/Propil/Butil/Heptil-parabens).

P máx. grad. A= 590bars. B= 905 bars

A 0.5mL/m gr.. 3.0min

K‘ = (87 x F x Tg) / ( % x V0 x S)

FxTg = 0.5x3 = 0.833x1.8 = 1.5

B 0.833mL/m gr. 1.8min

3minSi el producto de Flujo x Tgrad se mantiene

constante el poder de separación no variará(utlizando la misma columna y sin variar los %

solvente orgánico)

1.8min

↑Flujo: Reduce tiempo análisis y mejora capacidad de separación en gradientes

A 0.5mL/m gr.. 3.0min

B 0.833mL/m gr. 1.8min

Columnas RRHD permiten subir el flujo para:

- Reducir tiempos (manteniendo Rs)

- Aumentar resolución (sin sacrificar tiempo)


• No perder eficacia al aumentar el flujo.

¿Qué se Requiere para Trabajar a Velocidades Lineales Elevadas?

+ EF

ICAC

IA

-

S.T.M.: Sub Two MicronsUHPLC

HEPT = A+ B/u + C u

4.6mm d.i.

UHPLC permite velocidades elevadas sin pérdida de información

• Poder trabajar a flujos y presiones elevadas.

∆P = f (η .u .L / dp2)

pág.: 51290 Infinity UHPLC

1290 Infinity

1290 Infinity UPHLC: Compatible con cualquier HPLC y UHPLC del mercado

bar

ml/min

Standard LC

Vendor A1.7µm columns

Agilent RRLC1.8µm columns

Vendor B1.9µm columns

Vendor C

Vendor D

1290 Infinity le permitirá la máxima reducción de sus tiemposde análisis y/o aumento de la resolución de sus aplicaciones

52

1200


1290 Infinity – ¿Qué aporta al mundo del UHPLC?

Page 6

1290 Infinity NO solo es un equipo capaz de proporcionar unos rangos mayores de Flujo y de Presión…

1290 Infinity es un equipo INNOVADOR

1290 Infinity incorpora grandes avances en todos sus módulos, que una vez más, marca la diferencia tecnológica.


Precision Peak 1 Peak 2 Peak 3 Peak 3 Peak 5 Peak 6 Peak 7 Peak 8 Peak 9

% RSD RT 0.016 0.0077 0.0052 0.0058 0.0058 0.0054 0.0059 0.0057 0.0080

% RSD Area0.5 µl 0.40 0.39 0.43 0.47 0.40 0.46 0.44 0.52 0.56

Page 7

RT RSD = 0.005% !!!

Phenone Standard, 10 Consecutive Runs2.1 x 50mm RRHD SB C18, 1.8µm

1.2ml/min, 0.5ul, 40C80Hz, 245/10nm, REF 360/80nm

5 - 95% ACN in 0.5min

1290 Infinity UHPLC: Precisión del Tiempode Retención en modalidad UFLC


Agilent 1290 InfinityEl más Versátil UHPLC:• Cualquier tipo de columnas:

UHPLC, LC, Solid Core, Monolitics,…• Columnas de 1 a 8 mm d.i..• Longitudes hasta 25cm x1.8µm.• UHPLC & UFLC con CH3OH.• ….• ..•.

Infinitas Posibilidades !!


Agilent 1290 Infinity UHPLCPoder de separación por unidad de tiempo.Ejemplo Repetibilidad en condiciones extremas

Columna: ZORBAX RRHD SB-C18 2.1 x 50mm 1.8 µmGradiente: ACN/H2O 30/70 a 100/0 en 30 segundos

2.4mL/min a 80ºC P.máx. Grad.= 1060 barsInyección: 1µL (Uracilo, Fenol, Metil/Etil/Propil/Butil/Heptil-parabens)

min0 0.05 0.1 0.15 0.2 0.25 0.3 0.35 0.4

mAU

0

10

20

30

40

50

60

70

80

Tiempos RSD% : 0.01 – 0.03%

Áreas RSD% : 0.03 - 0.4%(6 inyecciones de 1µL)

I.D. & I.M - Waldbronn 5/2009

DAD1 A, Sig=254,10 Ref=360,40 (1290 INFINITY\DAY3_B___ 2009-05-28 16-23-46\002-0901.D)DAD1 A, Sig=254,10 Ref=360,40 (1290 INFINITY\DAY3_B___ 2009-05-28 16-23-46\002-0902.D)DAD1 A, Sig=254,10 Ref=360,40 (1290 INFINITY\DAY3_B___ 2009-05-28 16-23-46\002-0903.D)DAD1 A, Sig=254,10 Ref=360,40 (1290 INFINITY\DAY3_B___ 2009-05-28 16-23-46\002-0904.D)DAD1 A, Sig=254,10 Ref=360,40 (1290 INFINITY\DAY3_B___ 2009-05-28 16-23-46\002-0905.D)DAD1 A, Sig=254,10 Ref=360,40 (1290 INFINITY\DAY3_B___ 2009-05-28 16-23-46\002-0906.D)

Pk Wd = 0.004-0.005min

1.5 seg.

0.4min

Condiciones Extremas:• Muy elevada velocidad

(eq. 12mL/min en col. 4.6mm d.i.)

• Elevada presión: 1060bars

• Elevada temperatura: 80ºC

• Pequeño vol. inyec.: 1µL

• Gradiente muy rápido: 30s.

• Picos solapados

• ….

*RSD en tiempos para picos K’>0


Muestra de tranquilizantesColumna: Porosa superficial

Poroshell-120 50 x 2.1mm, 2.7umFlujo 3.5ml/min, ~ 700 bar

Gradiente 2-92% ACN en 0.4minT= 80 °C

0.095sec PW

0.140secPW

Agilent 1290 Infinity UHPLC: Poder de separación con todo tipo y marcas de columnas

Columnas Superficialmente Porosas:permiten muy elevadas velocidades lineales

con elevada resolución y menor presión

0.5 s

NúcleoSólido1.7um

} 0.5µm

2.7µm


Agilent 1290 Infinity UHPLCPoder de separación con todo tipo de diámetros y flujos.Ejemplo Gradiente Agua/Metanol

Columna: ZORBAX RRHH (600bars) SB-C18 4.6 x 50mm 1.8 µmGradiente: MeOH/H2O 30/70 a 100/0 en 1.71min

3.5mL/min a 80ºC Presión. máx grad.: 590barsInyección: 5µL (Uracilo, Fenol, Metil/Etil/Propil/Butil/Heptil-parabens)

I.D. & I.M - Waldbronn 5/2009

min0 0.2 0.4 0.6 0.8 1 1.2 1.4

mAU

0

20

40

60

80

100

120

140

T0

1

2

3

4

5

6DAD1 A, Sig=254,10 Ref=360,40 (002-0501.D)DAD1 A, Sig=254,10 Ref=360,40 (002-0502.D)DAD1 A, Sig=254,10 Ref=360,40 (002-0503.D)DAD1 A, Sig=254,10 Ref=360,40 (002-0601.D)DAD1 A, Sig=254,10 Ref=360,40 (002-0602.D)DAD1 A, Sig=254,10 Ref=360,40 (002-0603.D)

min0 0.2 0.4 0.6 0.8 1 1.2 1.4

mAU

0

100

200

300

400

500

DAD1 A, Sig=254,10 Ref=360,40 (002-0501.D)

T0

1

2 3 4 5

6

PMP1, PMP1B, Pressure DAD1 A, Sig=254,10 Ref=360,40 (002-0502.D) PMP1, PMP1B, Pressure DAD1 A, Sig=254,10 Ref=360,40 (002-0503.D) PMP1, PMP1B, Pressure DAD1 A, Sig=254,10 Ref=360,40 (002-0601.D) PMP1, PMP1B, Pressure DAD1 A, Sig=254,10 Ref=360,40 (002-0602.D) PMP1, PMP1B, Pressure DAD1 A, Sig=254,10 Ref=360,40 (002-0603.D) PMP1, PMP1B, PressureTiempos RSD% : 0.01 – 0.05%

Áreas RSD% : 0.10 - 0.34%(6 inyecciones de 5µL)

6 perfiles presión

1ª iny. serie

1.4min

U.F.L.C. con columnas de

d.i. 4.6mm


Agilent 1290 Infinity UHPLC: RangoPotencia con Columnas TP 2.1mm d.i.x 1.8um

50 x 2.1 mm100 x 2.1 mm150 x 2.1 mm250 x 2.1 mm

STM = Sub-2um SP = Superficially Porous

TP = Totally Porous

H2O/ACN, 40 °C

bar

ml/min

0.45 mL/min 40ºC

50 x2.1mm x 1.8µm 40ºC

ZORBAX RRHT SB-C182.1 x 50mm x 1.8µmH2O/ACN2.4ml/minT=95 °C560bar RRLC

50 x2.1mm x 1.8µm 95ºC

1290 infinity permite usar columnas 250mm x 1.8µm

250mm40ºC

10 -50

100x2.1mm 40ºC


Algunas InnovacionesTecnológicas delAgilent 1290 InfinityUHPLC

1290 Infinityincorpora

importantes innovaciones que marcan la

diferencia tecnológica


1290 Infinity Bomba Binaria: nuevo diseño La siguiente generación en Tecnología de Bombas UHPLC

Mezclador“Jet Weaver“

µ-Desgasificador

Válvula dePurga

automática

CanalBCanal

A

Válvula de selección de 4 disolventes

Gradientes binarios

Pistones de Carburo de

Silicio

Bombas de alta resolución

Alta velocidad y resolución1200 bar @ 2.0 mL/min1000bar @ 3.5ml/min800 bar @ 5.0 mL/minVolumen muerto: 10 µl / 45 µl

Amortiguador electrónico de pulsosProcesador de doble núcleo dedicado al control de pulsosMotores de 300 picolitrospor paso (0.0003µL)

Largos intervalos de mantenimientoCorrección Automática Fugas > 150 Litros de disolvente

AutomatismoPurga automática

4 Motores de altaprecisión: independientespara cada pistón

Intercambiadorde calor

multicapa


1290 Infinity: Atenuación Activa¿Porqué 4 motores independientes? ¿Como funciona?

Atenuación activa• El menor “ripple” de

bomba con 10 µl de volumen de retardo(45 µl w. Jet Weaver)para alta sensibilidad en detección (UV/IR/…).

• La mejor precisión y reproducibilidad de tiempos de retención.

• Compensación de pequeñas fugas para optima repetibilidad y mínimos tiempos de parada.

FirmwareBombas

Inteligentes

µ-Procesador dedicado para el control del movimiento de los pistones en tiempo real.Motores independientes de alta resolución para cada pistón(300 picoL/paso, mejora x50)

Caracterización total de las propiedades del disolvente

Sintonizado (optimización en tiempo real basado en parámetros estáticos y dinámicos)

HardwareControl muy preciso de sus movimientos

+


1200 “versus” 1290 Infinity Binary Pumps- Los más bajos volumen muerto y ruido de mezcla

1200 SeriesChannel A

Passive Damper0 - 300 µl

Passive Mixer400 µl

1200 SeriesChannel B

1290 InifinityChanel A

1290 InifinityChanel B

Very Low Noise~ 800 µl

+ =Active Damping

10µlJet Weaver Mixer

35µl

Lowest Noise• min. 50% lowerDelay Volume• 10µl / 45µl• 80x / 20x lower

1290 Infinity


1290 Infinity UHPLC Binary PumpRobustez y alta capacidad de disipación de calor

Nuevo material del pistón: SSiC* (Carburo de silicio sintético). Proporciona Mejor Conductividad térmica y menor fricción para menor desgaste.

Permite una optima disipación de calor• Mayor presión x flujo (1200bar at 2 ml/min)• Alarga el tiempo de vida de los sellos/ intervalos de

mantenimiento (>150L)• Un solo sello para fase normal y reversa

Capilares Multi-Capa para unóptimo intercambio de calor entre los cabezales de las bombas.

SSiC*: Material cerámico de alta dureza formado por Carburo de Silicio sintético.


Agilent “Jet Weaver”- Una Nueva Tecnología en mezcladores

“Jet Weaver”

35 µl

Sin “Jet Weaver”

Competidor A50 µl mixer

1 ml/min2-35 % ACN/H2O (0.1 % TFA)

Prestaciones con TFA

Tecnología:-Tecnología multicapa – Placas de difusión de acero inoxidable con estructuras grabadas (Microfluidica)

La mejor eficiencia de mezcla, incluso a flujos muy bajos, con el menor

volumen de retardo (35 µl) para muy bajo ruido UV


1290 Infinity UHPLC Diode Array Detector- La necesidad de una nueva tecnología

10 mm camino óptico13 µL volumen

4.6 mm id column

+ =

Columna corta d.i. 2.1 mm

?Dispersión pico• Pérdida de resolución• Menor señal (S/N)

¿Cómo lograr celdas de menor volumen? Corto camino óptico (3 mm, 2 µL)

Alta transmisión de luz => bajo ruido Baja S/N Baja transm. de luz => elevado ruido Low S/N

Largo camino óptico (10 mm, 0.5 µL)

Guía de ondas Optofluídica• Largo camino óptico• Pequeño d.i./ volumen de celda• Alta transmisión de luz La mayor S/N

Solución:


Celda Diode Array “Max-Light Cartridge“- Guía de ondas Optofluídica

Beneficios:La más alta sensibilidad (S/N) con pequeños volúmenes de celda (mínima dispersión). Fácil selección de celdas: una para todas las aplicaciones principales.

Más fiable y robusta integración automática de picos, debido a la “quasi”NO influencia de cambios de IR y de temperatura del disolvente. Diseño en cartucho para un muy fácil intercambio y manejo de la celda.Sílice fundida libre de recubrimiento (sin efectos sobre línea de base) y sin mantenimiento.

La Solución: Fibra no recubierta (sílice fundida)

V

VmDLFr

⋅⋅⋅⋅

=24

42 πσ

~100% eficiencia transmisión de luz debido a principio de reflexión interna total (TIR).2 Versiones: 60 mm x Vol. σ : 4 µL 10 mm x σ Vol. σ : 1 µL


1290 Infinity Diode-Array Detector Mejora Sensibilidad “versus” Detectores 1200-VWD/DAD- Comparación celdas “Max-Light High Sensitivity vs 1200-VWD“

1200-VWD (10 mm x σ Vol.: 14 µL)S/N: 253

Muestra: Antraceno, 835 pg/µLCol.:: 4.6x150mm ZORBAX SB C18, 5 µm

Fase móvil: Agua/Acetonitrilo = 20/80Flujo: 1.5ml/min

Detección 251nm, PW >0.1min,Volumen inyección : 5µl

Temp. columna: 40°C

Celda “Max-Light High Sensitivity“ (60 mm x σ Vol.: 4 µL) S/N: 2944

Mayor Sensibilidad: hasta x10 vecesSin aumento de la dispersión del pico

Technical Note: 5990-5326EN

mDLFr

⋅⋅⋅⋅

=24

42 πσ V2

V


Descanso – Sesión de Preguntas Número 1

• Para preguntar en directo,Marque *1 en su teléfonoo use la “Chat Box”

1

Cierra el panel del chat

Reduce Tamaño Pantalla Presentación y Muestra

Paneles para Preguntas vía “Chat”

Muestra Panel para Preguntas

vía “Chat”


1290 Infinity AutosamplerDiseño ”Flow-Through” con Loop Variable

Este diseño proporciona una excelente repetibilidad con todo tipo de volúmenes (incluso <1µL), y sin necesidad de cambiar el “loop”.

Posición durante Análisis

Presión típica• <1.5% desde 0.5-1µL• <0.7% @ 1-2µL• <0.25% @ 2-20 µl (40 ul)

Excelente repetibilidad con muy pequeños volúmenes

Bomba

Columna


1290 Infinity Autosampler”Bypass” para toma de muestra

Este diseño* permite derivatización pre-columna, adición ISTD’s,….

Posición durante toma de Muestra

*Diseño equivalente disponible en modelos: 1090, 1050, 1100 y 1200

Dispositivo Medida

Bomba

Columna


Posición durante el lavado exterior de la aguja

1290 Infinity AutosamplerLimpieza del exterior de la aguja en el portal de lavado

Bomba Peristáltica para

lavado aguja


1290 Infinity AutosamplerMovimiento al asiento de la aguja

Posición justo antes de inyectar

Sin pérdida de muestra (se inyecta toda)

Asiento aguja


1290 Infinity AutosamplerInyección

Inyección

Mínima dispersión de la muestra; ésta no tiene que recorrer todo el sistema hidráulico (vol. 70µL).

Se puede reducir el volumen de retardo del gradientedevolviendo la válvula a posición “by pass” (cuando la

muestra ya ha salido del inyector).

Bomba

Columna


Derivatización precolumna: ejemplo 20 Aminoácidos con OPA y FMOC (18 min Agilent Series 1100)

Dosificador de MuestraUnidad

de Muestreo

deshecho

Bomba

a columna

Muestra Reactivo

VWD1 A, Wavelength=338 nm, TT (AASM0531\095-0101.D)VWD1 A, Wavelength=338 nm, TT (AASM0531\003-0201.D)VWD1 A, Wavelength=338 nm, TT (AASM0531\007-0401.D)

min0 2 4 6 8 10 12 14 16 18

mAU

0

50

100

150

200

250

300

350

ASP

GLU

SER

THR

TYRCYS-CYS

VAL

METPHE

ILEASN

TRP

ORN

ROJO: muestra AAS libres

GLY

HIS

ARG

ALA

LEULYS

PRO

DERIVATIZACION AMINOACIDOS1.-Toma 5 µl tampón Borato (vial 2)2.-Toma 1 µl reactivo OPA (vial 3)3.-Toma O µl agua (vial 1) - lavado exterior aguja4.-Toma 1 µl muestra AAS (vial X)5.-Toma O µl agua (vial 1) – lavado aguja6.-Mezclar 7 µl 6 veces – Derivatiza AAS PRIMARIOS7.-Toma O µl agua (vial 1) - lavado exterior aguja8.-Toma 1 µl reactivo FMOC (vial 3)9.-Mezclar 8 µl 3 veces – Derivatiza AAS SECUNDARIOS10.-INYECTAR

También es útil para mezclar patrones durante la puesta a punto de métodos o p.e. para automatizar la derivatización con FMOC en el análisis de Glifosato y AMPA por LC/MS

MODIFICACIONES: ELUYENTE B SIN TAMPÓN / ELUYENTE A 75 mM AcNa

Mejora separación HYS/GLYcambia orden: ARG/ALA


1290 Infinity Gama de Inyectores Automáticos a 1200bars

G4226A1290 Infinity Autosampler

G4278A1290 Infinity LC Injector HTC

G4277A1290 Infinity LC Injector HTS

• Hasta 2 well plates ó 108viales de 2ml refrigerados*.

• ~ 40 ppm tipico “carryover”• Vol. Iny.: hasta 20, 40 ó 100** μL

• Hasta 12 well plates ó 324 viales de 2ml refrigerados.

• ~40 ppm tipico “carryover”• Vol. Iny.: hasta 100 μL con DLW, hasta

5 mL*** con “Active or Fast wash”

• Hasta 24 well plates ó 648viales de 2ml refrigerados.

*Opcional ** Limite de presión 600 bar *** Requiere HW adicional


1290 Infinity Compartimento Columnas Termost.- Mejora en Facilidad de uso y Versatilidad:

New prolonged HX-carrierwith 3rd hand (not shown)

New valve drive and valve head

Nueva guía Capilares

New leak funnel

modified lowdisp HX

New door-open sensor

RFID-tag, storestype, pressure

range, valveswitches

Nuevo AislamientoTérmico:

fácil cierre del compartimento

Nuevas válvulas ALta Presión: 2PS/6PT, 2PT/10PT and 9PT/8PS. Rápido intercambiode distintas válvulas


1290 Infinity UHPLC: Infinitas Soluciones !!!- Automatización Flexible

31

Desarrollo de métodos y Multi-Métodos• Hasta 3 compartimentos de Columna

para un máximo de 8 Columnas, 26 Solventes y 6 zonas de temperatura.

• MD: ChromSword and AutoChrom• Multi-Métodos: ChemStation, EZAccess

Regeneración Automática de Columna• 2000 muestras/día con inyecciones

superpuestas y offline data analysis

Preparación de muestra “Online“• Enriquecimiento• …….


Agilent 1290 Infinity UHPLC: Infinitamente Mejor para HPLC y UHPLC (RRLC,UFLC,HRLC,…)

MásFlexible

Más Sensible

MásPotente

El mejor en su claseSensibilidad UV : 2 – 20x con celda 1 cm

8 – 80x con celda UHS de 6 cm Independiente de las condiciones.

Sensibilidad MS/MS: < 1 fg con “Jet Stream”.Contaminación cruzada: < 0.002% Clorhexidina.

Admite todo tipo de columnas analíticas SIN limitación.Permite transferir métodos DE / A cualquier (U)HPLC.Inyección flexible: “flow-through” y con “loop” fijo.La mayor capacidad de muestreo: > 2000 muestras/día.Soluciones Multi-columna y de Desarrollo Automatizado de Métodos: hasta 8 columnas, 26 disolventes y 6 zonas de temperatura.

El mejor en su clase Resolución y Velocidad: 1200 bar (2 ml/min)

800 bar (5 ml/min)20ul volumen retardo

Columnas RRHD (1.8µm / 1200bar): N=50.000 en 3min


1290 Infinity Posicionamiento del portfoliode HPLC de Agilent El máximo rendimiento y flexibilidad preservando y mejorando las características del Sistema Agilent 1200

1290 Infinity = 1200 RRLC + X1200 RRLC = 1200 HPLC + Y

1200 HPLC = 1120 HPLC + Z

1290 Infinity = 1200 RRLC + X1200 RRLC = 1200 HPLC + Y

1200 HPLC = 1120 HPLC + Z

Una solución óptima para todo tipo de necesidades y presupuestos en

HPLC y UHPLC


Agilent 1290 InfinityUHPLC/MS

La mejor capacidad de separación para mejorar sus resultados en LC/MS

Una buena separación

ayuda a minimizar la “supresión”

de Ionización en LC/MS


30:70 agua/metanol, 0.2 % ácido acético

Intensity, cps

Difenhidraminam/z 256.17

Ketoprofenom/z 255.10

Time, min

0.0

6.0e4

1.2e5

1.8e5

2.4e5

3.0e5

3.6e5

4.2e5

4.8e5

0.30 0.40 0.50 0.60 0.70 0.80 0.90 1.00 1.10 1.20 1.30 1.40

Difenhidraminam/z 256.17

0.0

6.0e4

1.2e5

1.8e5

2.4e5

3.0e5

3.6e5

4.2e5

4.8e5

Intensity, cps

0.10 0.20 0.30 0.40 0.50 0.60 0.70 0.80 0.90 1.00Time, min

Ketoprofenom/z 255.10

5:95 agua/metanol, 0.2 % ácido acético

1/7 respuesta (-85%)

Una buena cromatografía puede mejorar

considerablemente la sensibilidad y robustez de los resultados por LC/MS

La Importancia de una Buena Separación incluso con LC/MS Altamente Selectivos


1290 Infinity UHPLC + 6460 QQQ Jet StreamProductividad: Análisis 250 Pesticidas en 8 min - Dynamic MRM.Columna 100x2,1mm x 1.8µm Zorbax Eclipse Plus C18

500ppt, dynamic MRMRetention Time Window = 12 secPeak widths ~ 1 second

Zorbax Eclipse Plus C182.1 x 100mm (1.8μm)


x3 x4 x4 x3 x4 x2 x1

Cycle time

ΔRt

QqQ-DRM: “Dynamic Reaction Monitoring”

= nº Concurrent dMRM

DRM: MRM Dinámico con ventanas de monitorización

individuales creadas automáticamente a partir del tiempo de

cada compuesto


1290 Infinity/6540-UHD-QTOF: Fast UHPLC“Screening” 250 Pesticidas en 90 segundos.

4x10

0

0.2

0.4

0.6

0.8

1

1.2

1.4

1.6

1.8

2

2.2

2.4 145.06481924909

146.06893917868

Counts vs. Mass-to-Charge (m/z)145 145.5 146 146.5 147

4x10

0

0.5

1

1.5

2

2.5

3

3.5

4

4.5

5

5.5422.208059

38636

423.21126333121

424.21395629032

Counts vs. Mass-to-Charge (m/z)421.5 422 422.5 423 423.5 424 424.5 425 425.5

Fenpyroximate EMass [M+H]+ = 422.20806Resolution = 38636‐0.25ppm

1290/6540 90seg análisis250 pesticidas (125pg on-column)

MS con masa exacta

1‐naphtholMass [M+H]+ = 145.06489Resolution = 249090.06 ppm

4x10

0

0.5

1

1.5

2

2.5

3

3.5

4

4.5

5

5.5

6

6.5

7

7.5

8

8.5

9 732.46871447094

733.47226542144

734.47514735133

Counts vs. Mass-to-Charge (m/z)731 731.5 732 732.5 733 733.5 734 734.5 735 735.5 736 736.5 737 737.5 738

Spinosad AMass [M+H]+ = 732.4687 Resolution = 47094‐0.77ppm

90s

LC/MS-TOF(/QTOF):“Screening” de

cualquier compuesto ionizado

6540-QTOF Resolución

espectral: 25-47K

2.1 x 50 mm x 1.8µm Eclipse Plus C181.2 mL/min, 60 ºC


1290 Infinity/6540-UHD-QTOF: 10 ppb Pesticidasen Pimiento Rojo en 90 segundos

6x10

0

0.1

0.2

0.3

0.4

0.5

0.6

0.7

0.8

0.9

1

1.1

1.2

1.3

1.41 1

Counts vs. Acquisition Time (sec)4 6 8 10 12 14 16 18 20 22 24 26 28 30 32 34 36 38 40 42 44 46 48 50 52 54 56 58 60 62 64 66 68 70 72 74 76 78 80 82 84 86 88

2.1 x 50 mm x 1.8µm Eclipse Plus C181.2 mL/min, 60 ºC

1

Counts vs. Acquisition Time (sec)4 6 8 10 12 14 16 18 20 22 24 26 28 30 32 34 36 38 40 42 44 46 48 50 52 54 56 58 60 62 64 66 68 70 72 74 76 78 80 82 84 86 88

1a

5x10

0

0.1

0.2

0.3

0.4

0.5

0.6

0.7

0.8

0.9

1

Counts vs. Acquisition Time (sec)53.5 54 54.5 55 55.5 56 56.5 57 57.5 58 58.5 59

1b

3a 4a

4b

2a

2b

3b

Name RT Mass Mass (Tgt) Diff (Tgt, ppm) Score (Tgt)

1a tricyclazole 0.652 189.036175 189.036068 0.57 98.10

1b propazine 0.929 229.109356 229.109423 -0.29 97.50

2a diethofencarb 0.953 267.146937 267.147058 -0.45 85.49

2b cyprodinil 0.936 225.126620 225.126598 0.10 98.82

3a cyproconazole 0.925 291.114106 291.113840 0.91 97.92

3b paclobutrazol 0.923 293.129448 293.129490 -0.14 96.74

4a tetraconazole 0.972 371.021290 371.021530 -0.65 99.45

4b azoxystrobin 0.957 403.116637 403.116821 -0.45 99.19

50 pg on-columnExactitud m/z (promed. abs. ) : 0.45ppm

90s

90s

4 seg.

10 ppb’s

10 ppb’s


40

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© Agilent Technologies, Inc. 2010

Published in Spain, March 25, 2010

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