บทท 6 อะตอมคารบอน-13 นวเคลยรแมกนทกเรโซแนนซและ
นวเคลยรแมกนทกเรโซแนนซแบบ 2 มต
ไอโซโทป (isotope) ของอะตอมคารบอน ไดแก และ ถงแมวาในธรรมชาตพบ
เพยงรอยละ 1.1 เทานน แตเนองจาก มเลขสปนควอนตม () เทากบ 0 สวน ม เทากบ 1/2 ดงนน เฉพาะไอโซโทป เทานน จะดดกลนรงสแมเหลกไฟฟาคลนวทยได ท าใหเกดการเปลยนแปลงสปนภายในนวเคลยส เรยกปรากฏการณนวา อะตอมคารบอน-13 นวเคลยรแมกนทกเรโซแนนซ โดยขอมลทไดจากสเปกตรม 13C NMR นนจะทราบจ านวนและชนดของอะตอมคารบอนในโครงสราง อยางไรกตาม ส าหรบโครงสรางบางชนดทซบซอนจ าเปนตองใชทงเทคนคโปรตอนและอะตอมคารบอน-13 นวเคลยรแมกนทกเรโซแนนซรวมกนทงแบบ 1 มต และ 2 มต เพอท าใหการพสจนโครงสรางงายยงขน ซงจะไดกลาวในบทน
หลกการเกดอะตอมคารบอน-13 นวเคลยรแมกนทกเรโซแนนซ
หลกการของนวเคลยรแมกนทกเรโซแนนซของอะตอมคารบอน-13 มหลกการเกดเหมอนกบโปรตอน กลาวคอ อเลกตรอนภายในอะตอมคารบอนเกดการหมนควงรอบแกนนวเคลยส เกดโมเมนตแมเหลก () ดงสมการ (6.1) ซงนวเคลยสของอะตอมคารบอนจะมทศทางไมเปนระเบยบ
= (6.1)
โดยท คอ อตราสวนแมกนโทไจรก (magnetogyric ratio) ส าหรบอะตอมคารบอนมคา = 6.728x107 radT-1s-1 คอ เลขสปนควอนตม ส าหรบอะตอมคารบอน มคา = 1/2 h คอ คาคงทของแพลงก เทากบ 6.625x10-34 J.s คอ คาคงท เมอนวเคลยสของอะตอมคารบอนอยในสนามแมเหลกภายนอก (B0) จะเกดการหมนควงแบบลารมอร สงผลใหเกดการจดเรยงตวเปนระเบยบมทศทางขนานกบ B0 เรยกวา สถานะแอลฟา (สภาวะสปน +1/2) และทศทางตรงขามกบ B0 เรยกวา สถานะบตา (สภาวะสปน -1/2) โดยทสถานะแอลฟา จะมนวเคลยสสวนเกนมากกวาสถานะบตาเลกนอย ทงนขนอยกบความเขมสนามแมเหลกภายนอกและ
230
ความถคลนวทย () หลงจากนน นวเคลยสสวนเกนจะดดพลงงานความถคลนวทยเขาไป สงผลใหนวเคลยสโปรตอนสวนเกนทสถานะแอลฟา (สภาวะสปน +1/2) เปลยนไปสสถานะบตาและกลบสภาวะสปนเปน -1/2 เรยกวา เรโซแนนซ โดยจะมสญญาณปรากฏขน แตเนองจากในธรรมชาตพบ
เพยงรอยละ 1.1 ของอะตอมคารบอนทงหมดเทานน และยงมอตราสวนแมกนโทไจรก () นอยกวาโปรตอนอยางมาก ความถเรโซแนนซของอะตอม 13C จะเทากบ 1/4 เทาของความถเรโซแนนซของโปรตอน 1H ดงตารางท 6.1
ตารางท 6.1 ความถเรโซแนนซของนวเคลยส 1H และ 13C ทความเขมสนามแมเหลกตาง ๆ
ความสนามแมเหลก (เทสลา)
ความถเรโซแนนซของ 1H (เมกกะเฮรตซ)
ความถเรโซแนนซของ 13C (เมกกะเฮรตซ)
1.41 60 15.087 2.34 100 22.629 4.70 200 50.288 7.05 300 75.432 11.74 500 125.744 14.09 600 150.864 17.62 750 188.580 18.79 800 201.154
ทมา (Field, Sternhell & Kalman, 2013, p. 36)
จงบอกปจจยทท าใหสญญาณเรโซแนนซแยกไดชดเจนมากขน
การจ าแนกอะตอมคารบอน
อะตอมคารบอนในโครงสรางจ าแนกตามชนดไฮบรไดเซชน ไดแก sp, sp2 และ sp3 ดงน
CCC
spsp2 sp3
ส าหรบอะตอมคารบอนชนดไฮบรไดเซชน sp3 ยงจ าแนกออกเปน 5 ชนด โดยพจาณาอะตอมคารบอนทลกศรช ( ) ดงน
231
- ถาตอกบอะตอมคารบอนจ านวน 1 อะตอม (หรออะตอมไฮโดรเจนจ านวน 3 อะตอม) เรยกวา อะตอมคารบอนชนดปฐมภม (primary (10) carbon) เรยกวา อะตอมคารบอนเมทล (methyl carbon, CH3)
- ถาตอกบอะตอมคารบอนจ านวน 2 อะตอม (หรออะตอมไฮโดรเจนจ านวน 2 อะตอม) เรยกวา อะตอมคารบอนชนดทตยภม (secondary (20) carbon) เรยกวา อะตอมคารบอนเมทลน (methylene carbon, CH2)
- ถาตอกบอะตอมคารบอนจ านวน 3 อะตอม (หรออะตอมไฮโดรเจนจ านวน 1 อะตอม) เรยกวา อะตอมคารบอนชนดตตยภม (tertiary (30) carbon) เรยกวา อะตอมคารบอนเมไทน (methine carbon, CH)
- ถาตอกบอะตอมคารบอนจ านวน 4 อะตอม (หรออะตอมไฮโดรเจนจ านวน 0 อะตอม) เรยกวา อะตอมคารบอนชนดจตรภม (quaternary (40) carbon) เรยกวา อะตอมคารบอนสธาต (quaternary carbon, C)
no of attached carbon
H3C C CH
3
H H
H3C C CH
3
H HH
3C C CH
3
H CH3
H3C C CH
3
H3C CH
3
0 1 2 3 4
CH
HH
H
no of hydrogen on carbon 4 3 2 1 0
type of carbon primary (10) secondary (20) tertiary (30) quaternary (40)methane
H3C C
H
HCCH
3
OCH
3
C CH
H
CHCH
3CH3
3
10 carbon
20 carbon
30 carbon
40 carbon
10 carbon 20 carbon
ภาพท 6.1 การจ าแนกอะตอมคารบอนชนดไฮบรไดเซชน sp3
จากหลกการพจารณาขางตนสามารถบอกชนดของคารโบแคตไอออน ประเภทแอลกอฮอล และประเภทแอลคลแฮไลดไดเชนเดยวกน
232
คาการเลอนทางเคมของอะตอมคารบอน-13 นวเคลยรแมกนทกเรโซแนนซ
คาการเลอนทางเคมของ 13C (C) อยในชวง 0-220 ppm โดยเทยบกบความถเรโซแนนซของเททระเมทลไซเลนมคาเรมตนท 0 ppm ต าแหนงสญญาณเรโซแนนซของอะตอมคารบอนตาง ๆ ดงภาพท 6.2 แตเนองจากความถเรโซแนนซของ 13C มคาเทากบ 1/4 เทาของความถเรโซแนนซของ 1H จงท าใหสญญาณเรโซแนนซของ 13C คอนขางต า ถาอะตอมคารบอนถกก าบง (shielded carbon) ดวยอเลกตรอนทมความหนาแนนมาก จะตองเพม B0 เขาไป จะปรากฏสญญาณทความถเรโซแนนซหรอ C นอยกวาอะตอมคารบอนทถกก าบงนอยกวา (deshielded carbon)
020406080100120140160180200(ppm)
C=O aldehyde, ketone
C=O carboxylic acid, amide, ester, anhydride
C=C
C C
C-Br
C-Cl
C-O
CH, C
CH2
CH3
low field or downfielddeshielded protom
high field or upfieldshielded protom
ภาพท 6.2 ต าแหนงสญญาณหรอความถเรโซแนนซของอะตอมคารบอนตาง ๆ อะตอมคารบอนทมสภาพแวดลอมเหมอนกน เรยกวา อะตอมคารบอนสมมล (equivalent carbon) จะปรากฏสญญาณทความถเรโซแนนซเดยวกน ปจจยทมตอคาการเลอนทางเคมของ 13C ดงน
1. อะตอมคารบอนชนดไฮบรไดเซชน sp3 ถามหมแทนท (-R) บนอะตอมคารบอนมากขน คาC (ppm) มแนวโนมมากขนดวย ดงน
type of carbon
C (ppm)
H3C CH
3 H3C CH
3 H3C CH
3
CH3
H3C CH
3
H3C CH
3
methyl methylene methine quaternary
0-30 15-55 25-55 30-40
233
2. ผลเหนยวน า อะตอมคารบอนทตอกบอะตอมทมสภาพไฟฟาลบสง (F>Cl>Br>I>O>N) จะท าใหอะตอมคารบอนนนถกก าบงจากอเลกตรอนนอยลง จงปรากฏสญญาณท C (ppm) มากขน ดงน
type of carbon
C (ppm)
H3C CH
3
F
methine methine methine methine
70-80 25-50 50-90 50-90
H3C CH
3
Cl
H3C CH
3
OH
H3C CH
3
NH2
CH3-F CH
3-Cl CH
3-Br CH
3-I
71.6 49.9 25.6 9.6
C (ppm)
นาสงเกตวาระยะหางระหวางอะตอมคารบอนและอะตอมทมสภาพไฟฟาลบสงจะไมท าใหเกดเรโซแนนซทความเขมสนามแมเหลกในทศทางเดยวกนเหมอนกบ 1H NMR (ธตมา รกขไชยศรกล, 2556, หนา 213) ดงน
C (ppm)
CH3-CH
2-CH
2-CH
2-CH
2-CH
2-OH
14.2 22.8 32.0 25.8 32.8 61.9 H (ppm)
CH3-CH
2-CH
2-CH
2-CH
2-CH
2-OH
0.9 1.32 1.56 3.62 1.79 3. ชนดไฮบรไดเซชน อะตอมคารบอนทมชนดไฮบรไดเซชน sp จะม C (ppm) มากกวาชนด
ไฮบรไดเซชน sp2 และ sp3 ตามล าดบ เนองจาก s-ออรบทล เทากบ 50, 33.3 และ 25 ตามล าดบ ถาอะตอมคารบอนมรอยละ s-ออรบทลมาก จะสามารถดงอเลกตรอนเขามายงอะตอมคารบอนไดมากดวย ท าใหโปรตอนถกก าบงจากอเลกตรอนนอย คาการเลอนทางเคมจะขนอยกบจ านวนและชนดหมแทนทบนพนธะคและพนธะสาม ดงน
C (ppm)
C C C C C C80-1450-60 60-100
sp3 spsp2
ส าหรบอะตอมคารบอนของหมคารบอนลซงเปนชนดไฮบรไดเซชน sp2 เหมอนแอลคน แตสญญาณเรโซแนนซปรากฏท C (ppm) มากกวาแอลคน ทงนเนองจากผลของชนดไฮบรไดเซชนและผลเหนยวน ารวมดวย ซงชวงคาการเลอนทางเคมของอะตอมคารบอนของสารประกอบคารบอนลจะแตกตางกนดงน
O O
C (ppm)
ketone 200-220
aldehyde190-200
acid halide, amide, ester 150-190
sp2
234
4. ผลเชงแมกนทกอะนโซโทรป อะตอมคารบอนของเบนซนจะถกก าบงนอยกวาแอลคน เนองจากผลเชงแมกนทกอะนโซโทรปรวมดวย ปรากฏสญญาณในชวง C (ppm) 110-170
ก าหนดโครงสราง จงบอกจ านวนสญญาณทปรากฏในสเปกตรม 13C NMR
CH3
CH3
Br CH3
F
NO2
CH3
ตวท าละลาย
การเตรยมตวอยางเพอวเคราะห 13C NMR มวธการเชนเดยวกบวเคราะห 1H NMR โดยจะใชตวท าละลายดวเทอเรยม แตสญญาณเรโซแนนซของตวท าละลายจะปรากฏทความถเรโซแนนซตางกน ดงตารางท 6.1 แตเนองจากในธรรมชาตพบไอโซโทป เพยงรอยละ 1.1 เทานน จงเกดสญญาณต า ดงนน การแยกสญญาณจะขนอยกบปรมาณสารและระยะเวลาในการวเคราะหทมากกวา 1H NMR ตารางท 6.1 สญญาณหรอความถเรโซแนนซของตวท าละลายดวเทอเรยมบางชนด
ตวท าละลาย H (ppm) จาก TMS (multiplicity)
JHD (Hz)
C (ppm) จาก TMS (multiplicity)
JCD (Hz)
ของ HOD* (ppm) จาก TMS
จดเดอด (oC)
Acetone-d6 2.05 (5) 2.2 206.68 (1) 29.92 (7)
0.9 19.4
2.8 56.5
Chloroform-d 7.24 (1) 77.23 (3) 32.0 1.5 61-62 Cyclohexane-d12 1.38 (1) 26.43 (5) 19 0.8 80.7 Dimethyl sulfoxide-d6 2.50 (5) 1.9 39.51 (7) 21.0 3.3 189 Ethanol-d6 3.56 (1) 56.96 (5) 22 78.5 1.11 (m) 17.31 (7) 19 Methanol-d4 4.78 (1) 64.7 3.31 (5) 1.7 49.15 (7) 21.4
หมายเหต *สญญาณของน าในตวท าละลาย
ทมา (Cambridge Isotope Laboratories, 2010)
235
020406080100120140160180 (ppm)
O CH3
O
H3C
75 MHz, in CDCl3
CDCl3
as solvent
ภาพท 6.3 ดวเทอโรคลอโรฟอรม ปรากฏสญญาณท C (ppm) 77.23 ตวท าละลายของเมทล-พารา-เมทลเบนโซเอต (Methyl-p-methylbenzoate)
การคควบและการไมคควบระหวาง C-H ในสเปกตรม 13C NMR
อะตอมทมเลขสปนควอนตม () ไมเทากบ 0 จะเกดการคควบระหวางสปนกบสปนได ทง 13C และ 1H ซงม เทากบ 1/2 เหมอนกน จงเกดการคควบระหวาง 13C-1H และ 13C-13C ได ในขณะทไอโซโทป 12C ม เทากบ 0 จงไมเกดการคควบได แตเนองจากในธรรมชาต 13C พบรอยละนอยมาก ดงนน การคควบระหวาง 13C-13C จะไมปรากฏสญญาณ แตในสเปกตรม 13C NMR จะพบการคควบระหวาง 13C-1H เทานน การคควบระหวาง 13C-1H สงผลใหสญญาณแยกเปนกลมพก ซงเปนไปตามกฎ N+1 โดยท N คอ จ านวนอะตอมไฮโดรเจนบนอะตอมคารบอน สญญาณจ าแนกออกเปน 4 ชนด ดงภาพท 6.4 กรณเปนอะตอมคารบอนเมทล (CH3) ม N เทากบ 3 อะตอม สญญาณแยกเปนกลมพก เทากบ 3+1 พก เรยกวา quartet สวนอะตอมคารบอนเมทลน (CH2) สญญาณเปน triplet อะตอมคารบอนเมไทน (CH) สญญาณเปน doublet และอะตอมคารบอนสธาต (C) สญญาณเปน singlet เรยกสเปกตรม 13C NMR แบบนวา สเปกตรมโปรตอนถกคควบ (proton-coupled spectrum)
โดยทวไป คาคงตวการคควบระหวาง 13C-1H ของอะตอมคารบอนชนดไฮบรไดเซชน sp3 จะมคาคงตวการคควบ (1JCH) ประมาณ 125 เฮรตซ อะตอมคารบอนชนดไฮบรไดเซชน sp2 และ sp มคา 1JCH ประมาณ 160 และ 250 เฮรตซ ตามล าดบ ส าหรบการคควบชวงไกลระหวาง13C-1H จะมคาคงตว การคควบ (2JC-C-H และ 3JC-C-C-H) นอยกวา 10 เฮรตซ ซงนอยกวา 1JC-H อยางมาก (Field, Sternhell & Kalman, 2013, pp. 71-72) สงผลใหสเปกตรม 13C NMR โปรตอนไมถกคควบ (proton-decoupled
236
spectrum) จงปรากฏสญญาณการคควบระหวาง 13C-1H เฉพาะโปรตอนบนอะตอมคารบอนมคา 1JCH เทานน ดงภาพท 6.5 (1) สเปกตรม 13C NMR ของเมทลไซโคลโพรพลคโทน (Methyl cyclopropyl ketone) มสตรโมเลกล เทากบ C5H8O จะปรากฏ 4 สญญาณ ซงการแยกสญญาณจะบงบอกชนดของอะตอมคารบอนได
doublet
tripletquartet
C CH CH2
CH3
quarternary (40) tertiary (30) secondary (20) primary (10)type of carbon
mutiplicity = N+1
singlet
ภาพท 6.4 สญญาณของการคควบระหวาง 13C-1H ในสเปกตรม 13C NMR โปรตอนถกคควบ
020(ppm)
(1) with 1H fully coupled
CH3
C=OCH
CH2
215 205 30 10
O
12
34100 MHz, in CDCl
3
(2) with 1H fully decoupled
(BB decoupling)
ภาพท 6.5 สเปกตรม 13C NMR ของเมทลไซโคลโพรพลคโทน 1) สเปกตรมโปรตอนถกคควบ และ 2) สเปกตรมโปรตอนไมถกคควบ
ทมา (Field, Sternhell & Kalman, 2013, p. 73)
ถงแมสเปกตรมโปรตอนถกคควบจะท าใหทราบชนดอะตอมคารบอนได แตถาโครงสรางซบซอน สญญาณของ 13C จะซอนทบกน ซงเกดกระบวนการ เรยกวา broad-band (BB) decoupling หลกการ คอ ใหชวงคลนความถวทยทท าใหทกโปรตอนเกดเรโซแนนซพรอมกน ท าใหไมเกดการคควบระหวาง 13C-1H จงปรากฏสญญาณเปน singlet เรยกสเปกตรมนวา สเปกตรมโปรตอนไมถกคควบ
237
(proton-decoupled spectrum) หรอเรยกเทคนคนวา “Broad-band (BB) decoupling” ดงภาพท 6.5 (2)
ขอดของเทคนค BB decoupling คอ ทราบจ านวนอะตอมคารบอนไมสมมลและสามารถเพมสญญาณของ 13C ไดถงรอยละ 200 (Field, Sternhell & Kalman, 2013, p. 41) แตเทคนคนมขอเสย คอ ไมทราบจ านวนอะตอมไฮโดรเจนบนอะตอมคารบอน ดงนน เฉพาะอะตอมคารบอนไมสมมลในโครงสรางทจะปรากฏสญญาณในสเปกตรม 13C NMR BB decoupling
ส าหรบสเปกตรม 13C NMR โปรตอนไมถกคควบของอะตอมคารบอนของวงเบนซนจะปรากฏสญญาณในชวง C (ppm) 110-150 ทงนจ านวนสญญาณจะขนอยกบจ านวนและชนดของหมแทนทบนวงเบนซน ดงตารางท 6.3 ซงรปแบบการแทนทบนวงเบนซนพจารณาไดจากจ านวนสญญาณของอะตอมคารบอนสธาต (C) โดยขอมลจะไดจากการทดลองเดปต (DEPT experiment)
การคควบระหวาง 12C-13C และ 12C-1H เกดขนไมได จงอธบาย ก ำหนดโครงสรำง จงบอกการแยกของสญญาณ (singlet, doublet, triplet หรอ quartet) ของอะตอมคารบอนทงหมด
CH3CH
2-OH CH
3COCH
2CH
3
O(CH
3)2CHNH
2(CH
3)3C-COOH
(1) (2) (3) (4) ก าหนดโครงสราง จงบอกจ านวนสญญาณทงหมดทปรากฏในสเปกตรม 13C NMR
H3CH
2C OH
O
CH3
Br
H CH3
H3C CH
3CH
3
CH3
H3C
(1) (2) (3) (4)
(5) (6) (7)
(8) (9) (10) (11)
238
ตารางท 6.3 จ านวนสญญาณของเบนซนในสเปกตรม 13C NMR
โครงสราง จ านวนสญญาณ (อะตอมคารบอนไมสมมล)
การแทนท 1 หม X1
23
4
56
4 สญญาณ (C-1, C-2 = C-6, C-3 = C-5, C-4)
การแทนท 2 หม
1
23
4
56X
Yo-
X = Y; 3 สญญาณ (C-1 = C-6, C-2 = C-5, C-3 = C-4) X ≠ Y; 6 สญญาณ (C-1, C-2, C-3, C-4, C-5, C-6)
1
23
4
56 Y
m-X
X = Y; 4 สญญาณ (C-1 = C-5, C-2 = C-4, C-3, C-6) X ≠ Y; 6 สญญาณ (C-1, C-2, C-3, C-4, C-5, C-6)
1
23
4
56 Y
p-X
X = Y; 2 สญญาณ (C-1 = C-4, C-2 = C-3 = C-5 = C-6) X ≠ Y; 4 สญญาณ (C-1, C-2 = C-6, C-3 = C-5)
การทดลองเดปต
เนองจาก 13C NMR ทโปรตอนไมถกคควบจะไมสามารถจ าแนกชนดของอะตอมคารบอนในโครงสรางได แตเมอใชการทดลองเดปต (Distortionless Enhancement by Polarization Transfer, DEPT) โดยเทยบกบสเปกตรม 13C NMR โปรตอนไมถกคควบกจะทราบ C, CH, CH2 และ CH3 ในโครงสรางได
DEPT CH2 CH
3 CH
13C NMR
DEPT 90
DEPT 135
C CH CH2
CH3
BB decoulping
ภาพท 6.6 การเปรยบเทยบสเปกตรม 13C NMR BB decoupling กบ DEPT 90 และ DEPT 135
239
การทดลองเดปตมหลายแบบ แตทนยม ไดแก DEPT 90 และ DEPT 135 ซงสญญาณของอะตอมคารบอนสธาต (C) จะไมปรากฏในสเปกตรมเดปต จากภาพท 6.6 สเปกตรม DEPT 90 จะปรากฏเฉพาะสญญาณของ CH อยดานบน (positive) สวนสเปกตรม DEPT 135 จะปรากฏสญญาณของ CH2 อยดานลาง (negative) สวน CH และ CH3 อยดานบน ทงนเมอเปรยบเทยบสเปกตรม DEPT 90 และ DEPT 135 กบสเปกตรม 13C NMR BB decoupling จะท าใหทราบจ านวนและต าแหนงสญญาณของอะตอมคารบอนสธาต (C) ภาพท 6.7 แสดงสเปกตรม 13C NMR BB decoupling ของโครงสราง 1-คลอโร-2-โพรพานอล (1-Chloro-2-propanol) มอะตอมคารบอนไมสมมล 3 อะตอม จงปรากฏ 3 สญญาณ สวนสเปกตรมเดปตจะปรากฏสญญาณของ CH และ CH3 อยดานบน และ CH2 อยดานลาง
20(ppm)
CH3
CH2
160 0406080100120140180200220
13C NMR BB decoupling
ba
c
TMSCDCl
3
DEPT 90
DEPT 135
Cl-CH2-CH-CH
3
CH
CHTMS a b c
OH
1)
2)
3)
ภาพท 6.7 สเปกตรม 13C NMR ของ 1-คลอโร-2-โพรพานอล 1) DEPT 135 2) DEPT 90 และ 3) BB decoupling
ทมา (เยนหทย แนนหนา, 2549, หนา 284)
240
ก าหนดสเปกตรม จงบอกคา c (ppm) ของอะตอมคารบอนทงหมดในโครงสรางทละลายใน
CDCl3
C CCH
3
CH3
H3C
OHH
CH3
1045 1520253035405055 5
DEPT CH2 CH
3 CH
70 60657580 0 (ppm)
13C NMR BB decouplingin CDCl
3
เทคนคการถอดคควบนอกชวงความถเรโซแนนซของโปรตอน
ถงแมวาสเปกตรม 13C NMR BB decoupling จะไดพกสญญาณของอะตอมคารบอนทไม
ซบซอน ท าใหแปลผลไดขอมลงายกตาม แตกไมทราบจ านวนอะตอมไฮโดรเจนบนอะตอมคารบอน ซงอาจเปนขอมลส าคญใชพสจนโครงสรางได จงพฒนาเทคนคการถอดคควบนอกชวงความถเรโซแนนซ ของโปรตอน (off-resonance decoupling) อธบายคราว ๆ คอ จะใหความถคลนวทยทแรงนอกชวงความถของโปรตอนทเกดเรโซแนนซ ท าใหเกดการคควบระหวาง 13C-1H เพยงบางสวนเทานน แตยงเปนไปตามกฎ N+1 โดยท N คอ จ านวนอะตอมไฮโดรเจนบนอะตอมคารบอน นนคอจะปรากฏเหมอน
สเปกตรม 13C NMR โปรตอนถกคควบ ไดแก CH3 (quartet) CH2 (triplet) CH (doublet) และ C
(singlet) แตทแตกตาง คอ คาคงตวการคควบ (1JCH) นอยกวาคาแทจรง สงผลใหพกซอนทบกนนอยลง
241
และค านวณคา c (ppm) งายขน อยางไรกตาม ควรยนยนชนดอะตอมคารบอนของแตละสญญาณดวย
การทดลองเดปตอกครง
3) DEPT CH2 CH
3 CH
2) with proton coupled
100150200 50 0 (ppm)
4) 13C NMR BB decoupling
1) off-resonance decoupling
C-8, qC-7, tC-1, s
C-2, s
C-3, d
C-4, d
C-5, d OO1 2
3 45
34
6
78
C-6, t
ภาพท 6.8 สเปกตรม 13C NMR ของเอทลฟนลอะซเทต 1) การถอดคควบนอกชวงความถเรโซแนนซ 2) โปรตอนถกคควบ 3) เทคนค DEPT และ 4) เทคนค BB decoupling
ทมา (Gross College, 2014; Mahidol University, n.d.)
242
เทคนค off-resonance decoupling ของชวงแอโรแมตกของเอทลฟนลอะซเทต (Ethyl phenyl acetate) จะเหนวาสญญาณจะแยกไดชดเจนมากขน ดงภาพท 6.8 สามารถหาคาการเลอนทางเคมของแตละอะตอมคารบอนไดโดยเฉพาะวงเบนซน แตคา 1JCH จะนอยกวาคาแทจรง และยนยนชนดอะตอมคารบอนของแตละสญญาณดวย DEPT 90 และ DEPT 135
จงบอกประโยชนของสเปกตรม 13C NMR off-resonance decoupling จงระบจ านวนสญญาณของแตละอะตอมคารบอนในโครงสรางทปรากฏในสเปกตรม 13C NMR off-resonance decoupling
OCl
CH3OCH
2COCH
3
NH2
CH3COOCH
2CH
3
OCH3O
CH3
(1) (2) (3) (4)
(5) (6) (7) (8)
ผลเชงนวเคลยรโอเวอรเฮาเซอรใน 13C NMR และ 1H NMR
สเปกตรม 13C NMR โปรตอนไมถกคควบ จะสงเกตวาความเขมสญญาณของอะตอมคารบอนจะเพมขนตามจ านวนอะตอมไฮโดรเจน ไดแก CH3 > CH2 > CH > C เนองจากผลเชงนวเคลยรโอเวอร-เฮาเซอร (Nuclear Overhauser effect หรอ NOE) อธบายคราว ๆ ดงน ทงนวเคลยส 1H และ 13C มเลขสปนควอนตม เทากบ 1/2 จงเกดเรโซแนนซและการคควบกนได ปรากฏสญญาณแยกเปนกลมพกซงเปนไปตามกฎ N+1 โดยท N คอ จ านวนอะตอมไฮโดรเจนบนอะตอมคารบอน แตเมอเพมรงสคลนความถวทยใหแกโปรตอน (1H) ทงหมดในโครงสราง สงผลใหนวเคลยสโปรตอนสวนเกนทสถานะพน (+1/2) มจ านวนมากกวาปกต เมอเกดเรโซแนนซจนกระทงอมตวแลว ท าใหสญญาณของโปรตอนหายไปและไมเกดการคควบระหวาง 13C- 1H เกดเปนสเปกตรม 13C NMR โปรตอนไมถกคควบ อกทงการใหรงสคลนความถวทยแกโปรตอนเพอใหเกดการอมตวดงกลาวนน ท าใหจ านวนโปรตอนทสถานะถกกระตน (-1/2) มากกวาปกตดวย สงผลตอนวเคลยส 13C โดยจะปรบสภาวะการเพมนวเคลยสสวนเกนทสถานะพนดวย เรยกวา cross-polarization มผลใหความเขมสญญาณของอะตอมคารบอนเพมขนไดถงรอยละ 200 (Field, Sternhell & Kalman, 2013,
243
p. 41) ทงนขนอยกบจ านวนอะตอมไฮโดรเจนบนอะตอมคารบอนและระยะทางระหวาง H และ C ซงเปนอนตรกรยาระหวางสปนกบสปนของนวเคลยสทงสองทไมผานพนธะ เมอนวเคลยสสวนเกนของอะตอมคารบอน-13 ทสภาวะพนถกกระตน จะเกดเรโซแนนซอยางตอเนอง จนกระทงนวเคลยสของทงสองสภาวะเทากน เรยกปรากฏกราณนวา การอมตว สงเกตจากสญญาณเรโซแนนซหายไป ทงนเพอใหสญญาณปรากฏอกครง จงมกระบวนการกลบคนสสภาวะพน เรยกวา การผอนคลาย โดยกระบวนการการผอนคลายจะเกดตอเนองจนกระทงเขาสสมดลโบลตแมนน (Boltzmann equilibrium)
กระบวนการการผอนคลาย ไดแก 1) การผอนคลายแบบสปน-แลตทชหรอการผอนคลายตามยาว (T1) โดยคายพลงงานในทศทางเดยวกบสนามแมเหลกภายนอก ปจจยส าคญของการผอนคลาย คอ อนตรกรยาแบบขวค-ขวค (dipole-dipole interaction) ระหวางสปนของนวเคลยสทถกกระตนกบสปนของนวเคลยสอนทอยภายในโมเลกลเดยวกนหรอระหวางโมเลกลกได และ 2) การผอนคลายแบบสปน-สปนหรอการผอนคลายตามขวาง (T2) โดยคายพลงงานใหเฉพาะสปนขางเคยงของนวเคลยสเดยวกนในทศทางตงฉากกบสนามแมเหลกภายนอก ซงไมมการเปลยนแปลงพลงงานของระบบสปน
กระบวนการการผอนคลายทส าคญในการพสจนสตรโครงสราง คอ การผอนคลายแบบสปนกบแลตทชหรอการผอนคลายตามยาว (T1) ซงจะมประสทธภาพถา 1) นวเคลยสของอะตอมคารบอนทมจ านวนโปรตอนมาก จงมผลตอความเขมสญญาณเรยงล าดบจากมากไปนอย ดงน CH3 > CH2 > CH > C และ 2) ถาโมเลกลขนาดใหญจะหมนชา เกด T1 ไดดกวาโมเลกลเลกทหมนไดเรวกวา
ส าหรบผลเชงนวเคลยรโอเวอรเฮาเซอรใน 1H NMR เกดจากใหรงสคลนความถวทยแกโปรตอนเฉพาะตวเทานน ท าใหสญญาณของโปรตอนนนหายไป และโปรตอนใกลเคยงกนหรอทเกดอนตรกรยากนผานชองวาง (space) จะมรอยละความเขมสญญาณเพมขน ดงภาพท 6.9 (A) โครงสรางมสตรโมเลกล เทากบ C10H8O3 ซงหมเมทอกซล (Methoxyl group, OCH3) บนอะตอมคารบอนต าแหนงท 7 มความนาจะเปนการจดเรยงตว 2 แบบ ซงพสจนยนยนไดโดยใชเทคนคผลเชงนวเคลยรโอเวอรเฮาเซอร
ปรากฏวาสญญาณท (ppm) 6.97 (1H, dd, J = 9.3, 2.7 Hz, H-6) หายไป ดงภาพ 6.9 (B) อกทง
โปรตอน H-5 และ OCH3 มความเขมสญญาณเพมขนรอยละ 30 และ 2.3 ตามล าดบ เมอเทยบกบความเขมสญญาณเดม ดงภาพ 6.9 (B-A) ดงนน จงสรปวาสตรโครงสรางเปนแบบ (1) มากกวาแบบ (2) เนองจากแบบ (2) หลงจากท าเทคนค NOE ของโปรตอน H-8 แลว จะมผลตอความเขมสญญาณของ OCH3 ควรจะเพมขนรอยละ 3.1
ดงนนประโยชนของผลเชงนวเคลยรโอเวอรเฮาเซอรใน 1H NMR คอ ตองการพสจนโครงสรางทมสเตอรโอไอโซเมอรและมโครงรป ดงภาพท 6.10
244
A: 13C NMR 200 MHz, in CDCl3
0123 (ppm)45678
B - A: Difference spectrum
B: irridiate at 6.97
XX
X
X
CDCl3
impure
impure
impure
impure
H-5 H-2H-6H-8 H-3
30%2.3%
O
O
OH3C
O
O
OCH
32
35
6
8
HH2.3%
30%
H3.1%
2
35
6
8
(1) (2)
NOE
NOE
ภาพท 6.9 ผลเชงนวเคลยรโอเวอรเฮาเซอรใน 1H NMR ทมา (The University of Wisconsin, 2017)
N
HH
CH3
N
HCH
3
H31% 0%
A-1 A-2
OO
CH3
H3CH
3C
HOCH
3 OO
CH3
H3C
H3C
OCH3H
12% 0%
B-1 B-2
NOE NOE
NOE
NOE
ภาพท 6.10 โครงสรางทมสเตอรโอไอโซเมอรพสจนโดยใชเทคนคผลเชงนวเคลยรโอเวอรเฮาเซอร
245
นวเคลยรแมกนทกเรโซแนนซแบบ 2 มต
โดยสวนใหญสารออกฤทธทางชวภาพทแยกจากผลตภณฑธรรมชาตมโครงสรางคอนขางซบซอน ดงภาพท 6.11 การพสจนโครงสรางจะใชเฉพาะเทคนคนวเคลยรแมกนทกเรโซแนนซแบบ 1 มต (1-Dimentional Nuclear Magnetic Resonance, 1D NMR) ไดแก 1H NMR และ 13C NMR คอนขางท าไดยาก จงจ าเปนตองใชเทคนคนวเคลยรแมกนทกเรโซแนนซแบบ 2 มต (2-Dimentional Nuclear Magnetic Resonance, 2D NMR) รวมดวย
O
OO
O
O
OOH
O
OH
Magostafeejin A(from fungus Xylaria feejeensis GM06)
Eucalypglobulusals A(from Eucalyptus globulus fruits)
OHCHO
HO
OHCOH
HO
H
O
ภาพท 6.11 โครงสรางสารออกฤทธทแยกจากผลตภณฑธรรมชาต
ลกษณะสเปกตรมนวเคลยรแมกนทกเรโซแนนซแบบ 2 มต ประกอบดวย 3 แกน คอ แกน X ( (ppm) หรอ J (Hz)) แกน Y ( (ppm) หรอ J (Hz)) และแกน Z (ความเขมสญญาณ) ดงภาพท 6.12 สเปกตรมนวเคลยรแมกนทกเรโซแนนซแบบ 2 มต พลอตได 2 แบบ คอ แบบสแตกพลอต (stacked plot) และแบบคอนทวรพลอต (contour plot) โดยจะแปลงความเขมสญญาณเปนจด ซงปจจบนนยมมากกวาแบบสแตกพลอต
inten
sity
(2) 2D NMR(1) 1D NMR
F1F
2
(ppm)012345
stacked plot
F1
F2
contour plot
ภาพท 6.12 การเปรยบเทยบลกษณะสเปกตรม NMR 1) แบบ 1 มต และ 2) แบบ 2 มต
246
เทคนคนวเคลยรแมกนทกเรโซแนนซแบบ 2 มต ใชการท าพลสและฟเรยรทรานสฟอรม ซงชนดสเปกตรมอาจเปนความสมพนธระหวางนวเคลยสอะตอมเดยวกนหรอตางชนดกน ดงน
1. การแยกคาคงตวการคควบระหวางโปรตอนกบโปรตอน (H-H J-resolved)
เมอโปรตอนถกคควบจะปรากฏสญญาณแยกเปนกลมพก มคาคงตวการคควบ (J) เทากน แตถาสญญาณจะแยกไมชดเจน เชน ไวนลโปรตอนของกรดอะครลกซงมระบบสปน ABX ดงภาพท 6.13 (1) คาคงตวการคควบค านวณไดจากสเปกตรม H-H J-resolved (2-3JHH) ดงภาพท 6.13 (2)
(ppm)
24681012
1) 1H NMR 400 MHz, in CDCl3
HX
HA
COOH
HB
H12 (s)
H6.14 (dd)
H 5.96 (dd)
H
6.52 (dd)
JXB
HX
HB H
A
JXA
JXA J
AXJAX
JAB
JBX
JBAJ
BA
0
2) H-H J-resolved
stacked plot
HX
HB
HA
contour plot
0 J (Hz)
10
20
10
20
305.86.06.26.46.6
HX
HB
HA
(ppm)
J (Hz)
(ppm)
ภาพท 6.13 สเปกตรมของกรดอะครลก 1) 1H NMR และ 2) H-H J-resolved ทมา (เยนหทย แนนหนา, 2549, หนา 304)
247
2. การแยกคาคงตวการคควบระหวางอะตอมคารบอนกบโปรตอน (C-H J-resolved)
การทราบชนดอะตอมคารบอน ไดแก CH3, CH2, CH และ C จะท าใหพสจนสตรโครงสรางไดงายขน ซงขอมลอะตอมคารบอนอาจไดมาจากสเปกตรม 13C NMR โปรตอนถกคควบ การทดลองเดปต และเทคนคการถอดคควบนอกชวงความถเรโซแนนซของโปรตอน ซงเทคนคการถอดคควบนอกชวงความถเรโซแนนซของโปรตอนจะไมไดคาคงตวการคควบทแทจรง ดงนนการแยกคาคงตวการคควบระหวางอะตอมคารบอนกบโปรตอน จงเปนวธหนงททราบชนดอะตอมคารบอนและคาคงตวการคควบ (1JCH) ทแทจรงไดอกดวย โดยสเปกตรม C-H J-resolved เปนความสมพนธระหวาง C (ppm) และ J (Hz) ดงภาพท 6.14
(ppm)
13C NMR BB decoupling
75 MHz
(ppm) 155-185
(s, C-1) and (s, C-10)
J (Hz)0
-50
-100
-150
50
100
150
2030405060708090100110
O
C-H J-resolved
contour plot
OCH3
COOCH3
OHNH
HOH2C
OHH
H3C
O H
HHO 1
2
3
4
5
6789
C-2
C-4
C-6 C-7
C-8
C-9
C-5
C-310
11
12
13C-12C-13 C-11
stacked plot
(ppm)
J (Hz)
2030405060708090100110
0
-100
100
ภาพท 6.14 สเปกตรม C-H J-resolved 1) แบบคอนทวรพลอต และ 2) แบบสแตกพลอต ทมา (Roth, n.d.)
248
ก าหนดสเปกตรม C-H J-resolved ของ 4-เมทลไพรมดน (4-Methyl pyrimidine) จงระบ C (ppm) ของแตละอะตอมคารบอน
(ppm)20304050
0
20
40
60
80
100
120
J (Hz)
HNCH
3
3. เฮตคอร (HETCOR)
เฮตคอร (HETeronuclear CORrelation, HETCOR) เปนสเปกโทรสโกปความสมพนธระหวางอะตอมคารบอนกบไฮโดรเจน เรยกชอยอวา โคซ C-H (Carbon-Hydrogen COrrelation SpectroscopY, C-H COSY) โดยอะตอม C-H หางกน 1 พนธะ (1JCH) ดงนน เฮตคอรจะทราบขอมลของโปรตอนอยบนอะตอมคารบอน จากสเปกตรมพจารณาโดยลากเสนแนวระดบเชอมจดระหวาง 13C และ 1H NMR ดงภาพท 6.15 สเปกตรม HETCOR ของ 1-โบรโมโพรเพน (1-Bromopropane) มสญญาณท C (ppm) 35.76 (C-1) สมพนธกบสญญาณท (ppm) 3.39 (t, CH2-CH2-Br) และท C (ppm) 26.36 (C-2) และ 12.99 (C-3) สมพนธกบสญญาณท (ppm) 1.87 (sextet, CH2-CH2-Br) และ 1.03 (t, CH2CH3) ตามล าดบ
249
0.51.02.0
10
15
20
25
30
35
40
45
5
(ppm)1.52.53.03.5
tripletsextet
tripletCH
3CH
2CH
2-Br
1-Bromopropane
(pp m
)
123
C-1
C-2
C-3
H-3H-1 H-2
H-3 -> C-3
H-2 -> C-2
H-1 -> C-1
ภาพท 6.15 สเปกตรม HETCOR ของ 1-โบรโมโพรเพน
จงใสจดแสดงความสมพนธ C-H ในสเปกตรม HETCOR ของ 2-โบรโมบวเทน (2-Bromobutane)
(ppm)
(p
p m)
1.0
1.5
2.0
2.5
3.0
3.5
4.0
102030405055 45 35 25 15
CH3CH
2CHCH
3
Br
250
4. เอชเอมควซ (HMQC)
เอชเอมควซ (HMQC) ยอมาจาก Heteronuclear Multiple Quantum Coherence) เปนความสมพนธระหวางอะตอมคารบอนกบไฮโดรเจนระยะหางกน 1 พนธะ (1JCH) เทคนคนไดขอมลเชนเดยวกบ HETCOR หรอ C-H COSY ดงภาพท 6.16 แตสญญาณของอะตอมคารบอนในสเปกตรม HMQC จะเหนชดเจนกวาในสเปกตรม HETCOR
(ppm)1.01.52.0
15
20
25
30
35
40
45
(p
p m)
2.53.5 3.04.0
HMQC
H-1H-2 H-3 H-4
C-4
C-1
C-3
C-2
10
50
55
(1)
(ppm)
1.0
1.5
2.0
15202530354045
(p
p m)
2.5
3.5
3.0
4.0
H-1
H-2
H-3
H-4
C-4C-1C-3C-2
105055
HETCOR
(2)
ภาพท 6.16 การเปรยบเทยบสเปกตรมระหวาง 1) HMQC และ 2) HETCOR ทมา (เยนหทย แนนหนา, 2549, หนา 308)
CH3-CH
2CH-CH
3
1234
Br
CH3-CH
2CH-CH
3
1234
Br
251
5. เอชเอสควซ (HSQC)
เทคนคทนยมใชเพอบอกวาอะตอมไฮโดรเจนอยบนอะตอมคารบอนใด โดยเฉพาะโมเลกล ทมขนาดใหญ เชน โปรตน คอ เทคนคเอชเอสควซ (Heteronuclear Single-Quantum Coherence, HSQC) เนองจากเทคนค HSQC ใหสญญาณของ 13C ชดเจนกวาเทคนค HETCOR หรอ HMQC ดงนน การแปลขอมลการคควบระหวางโปรตอนกบอะตอมคารบอน (1JCH) ในสเปกตรม HSQC จะเหมอนกบ HETCOR หรอ HMQC ดงภาพท 6.17 สเปกตรมของสทรชนน (Strychnine) แบบคอนทวรพลอต แกน X เปน (ppm) ของโปรตอน และแกน Y เปน (ppm) ของ 13C
N
O
Hb
H
Hb
Ha
H
H
NHb
Hb
HHa
Ha
Ha
Ha
Hb
OH
HbH
a
HStrychnine
12
34
8
11 1213
14
1516
1718
20
22
23
(ppm)7 35 18 26 4
40
60
80
120
100
30
70
50
130
90
110
(p
pm)
4
31
222
1223 8
1620b
18
11
14
20a
15b17
15a
13
ภาพท 6.17 สเปกตรม HSQC ของสทรชนน ทมา (Bruker Biospin, 2003)
252
6. อนอะดเควตระหวาง 13C-13C แบบ 2 มต (2D 13C-13C INADEQUATE)
เทคนคอนอะดเควต (Incredible Natural Abundance DoublE QUAantum Transfer Experiment, INADEQUATE) เปนความสมพนธระหวางอะตอมคารบอนทตดกน (1JCC) แตเนองจากอะตอมคารบอนพบในธรรมชาตเพยงรอยละ 1.1 เทานน ดงนนการเตรยมตวอยางตองใชปรมาณมาก ประมาณ 100-500 มลลกรม ตวอยางสเปกตรมดงภาพท 6.18 จากสเปกตรมอะตอมคารบอนทตดกนของ 2-โบรโมบวเทนจะปรากฏสญญาณในแนวระดบเดยวกน ดงน
อะตอมคารบอนท 1 ตดกบอะตอมคารบอนท 2 อะตอมคารบอนท 2 ตดกบอะตอมคารบอนท 1, 3 อะตอมคารบอนท 3 ตดกบอะตอมคารบอนท 2, 4 อะตอมคารบอนท 4 ตดกบอะตอมคารบอนท 3
51015
J (Hz
)
(ppm)
2030455560 50 35 2565 40
C-2C-3
C-1 C-4
CH3-CH
2CH-CH
3
1234
Br
C2-C
3C
2-C
1
C3-C
4
ภาพท 6.18 สเปกตรม INADEQUATE 2-โบรโมบวเทน ทมา (เยนหทย แนนหนา, 2549, หนา 325)
253
จงใสจดแสดงความสมพนธ C-H ในสเปกตรมอนอะดเควตของเอทลเบนซน (Ethyl benzene)
02040
J (Hz
)
(ppm)
60100140180200 160 120 80
CH2-CH
312
3
4
5 6
C-5C-6
C-1
C-3 C-2
C-4
อะตอมคารบอนท ตดกบอะตอมคารบอนท
1
2 3
4
5 6
254
7. โคซระหวางโปรตอนกบโปรตอน (H-H COSY)
เทคนคโคซ (COrrelation SpectroscopY, COSY) เปนความสมพนธนวเคลยรแมกนทก- เรโซแนนซไดทงนวเคลยสตางชนดกน เรยกวา Heteronuclear COSY ไดแก HETCOR และ HMQC หรอนวเคลยสเดยวกน เรยกวา homonuclear COSY เชน โคซระหวาง H-H (Hydrogen-Hydrogen COrrelation SpectroscopY, H-H COSY) โดยเทคนค H-H COSY ท าใหทราบโปรตอนบนอะตอมทตดกนหรอหางกน 3 พนธะ ในสเปกตรม H-H COSY ทงแกน X และแกน Y คอ (ppm) ของโปรตอน เมอลากเสนทแยงมมผานจดตาง ๆ ซงเปนโปรตอนทงหมดในโครงสราง สงเกตไดวาสเปกตรมจะสมมาตร เมอโปรตอนไมสมมลสองตวอยบนอะตอมทตดกนและเกดการคควบวซนล (3JHH) จะปรากฏสญญาณทต าแหนงพกขาม (cross peak) ซงอาจพจารณาไดจากดานใดดานหนงของสเปกตรมกได
สเปกตรม 1H NMR ของ 3-เฮปทะโนน (3-Heptanone) มโปรตอนไมสมมลจ านวน 6 โปรตอน จงปรากฏสญญาณ เทากบ 6 สญญาณ พจารณาการคควบของโปรตอนทตดกนในสเปกตรม H-H COSY เชน โปรตอน H-5 อยต าแหนงพกขามกบโปรตอน H-6 และโปรตอน H-4 ดงภาพท 6.19 แสดงวา โปรตอน H-5 คควบกบโปรตอน H-4 และโปรตอน H-6 เปนตน
(ppm)
(p
p m)
2.6
2.2
1.8
1.0
1.4
0.6
H-4H-3H-2
H-6H-1
2.8
2.0
2.4
0.8
1.6
1.2
2.6 2.2 1.8 1.01.4 0.62.8 2.02.4 0.81.6 1.2
H-H COSY
H-5
cross peak
ภาพท 6.19 สเปกตรม H-H COSY ของ 3-เฮปทะโนน ทมา (Roth, n.d.)
CH3CH
2CCH
2CH
2CH
2CH
3
O
1 2 3 4 5 6 โปรตอน คควบกบโปรตอน
H-1 H-2 H-2 H-1 H-3 H-4 H-4 H-3, H-5 H-5 H-4, H-6 H-6 H-5
255
จงระบ (ppm) ของโปรตอนทงหมดในโครงสรางของ 2-โบรโมบวเทน
(ppm)
(p
p m)
1.0
2.0
3.0
4.0
0.5
2.5
1.5
3.5
4.51.02.03.04.0 0.52.5 1.53.54.5
H-H COSY
จงใสพกขามในสเปกตรม H-H COSY และ (ppm) ของ 1-โพรพานอล (1-Propanol)
CH3CH
2CH
2-OH
H-H COSY
1 2 3
CH3CH
2CHCH
3
Br
1234
โปรตอน (ppm)
H-1
H-2
H-3
OH
256
8. โคซระหวางโปรตอนกบโปรตอนชวงไกล (H-H COSY-LR)
นอกจากโปรตอนทหางกน 3 พนธะ เกดคควบวซนล (3JHH) กนแลว โปรตอนหางกน 4 พนธะ ไดแก โปรตอนบนวงเบนซน ระบบแอลไลลก (allylic) โพรพารไจลก แอลเลนก (allenic) และโปรตอนจดเรยงตวรป “W” ดงภาพท 6.20 เกดคควบชวงไกลได เรยกเทคนคนวา โคซระหวางโปรตอนกบโปรตอนชวงไกล (Hydrogen-Hydrogen COrrelation SpectroscopY-Long Range, H-H COSY-LR) ลกษณะสเปกตรมและการพจารณาความสมพนธระหวางโปรตอนเหมอนกบ H-H COSY แตจะปรากฏพกขามเพมขนของการคควบชวงไกล ดงภาพท 6.21 สงเกตวา โปรตอน H-4 ของเมทา- ไนโทรเบนโซอกแอซด (m-Nitrobenzoic acid) จะไมปรากฏพกขามในสเปกตรม H-H COSY แสดงวาโปรตอน H-4 ไมเกดการคควบกบโปรตอน แตจะปรากฏพกขามในสเปกตรม H-H COSY-LR (3-4JHH) โดยโปรตอน H-4 จะคควบกบโปรตอน H-1 และ H-3 สวนการคควบของโปรตอนอนดงตารางท 6.4 ดงนนเทคนค H-H COSY-LR สวนใหญมประโยชนเพอยนยนโครงสราง
H H H H
"W-coupling"
allylic meta-
HH
propargylic
H H
allenic
H
H
HH
ภาพท 6.20 สวนของโครงสรางทโปรตอนเกดการคควบชวงไกล
(ppm)
8.0
7.5
8.5
8.0 7.58.5
H-H COSY-LR (3-4JHH
)
(ppm)
8.0
7.5
8.5
8.0 7.58.5
H-H COSY (3JHH
)
3 1 4 2 3 1 4 2
31
4
2
31
4
2
ภาพท 6.21 การเปรยบเทยบสเปกตรมระหวาง H-H COSY และ H-H COSY-LR ทมา (เยนหทย แนนหนา, 2549, หนา 314)
COOHH
4
NO2H
3
H2
H1
257
ตารางท 6.4 การคควบระหวางโปรตอนกบโปรตอนในของเมทา-ไนโทรเบนโซอกแอซด
โปรตอน คควบกบโปรตอน
สเปกตรม H-H COSY (3JHH) สเปกตรม H-H COSY-LR (4JHH)
H-1 H-2 H-2, H-3, H-4 H-2 H-1, H-3 H-1, H-3 H-3 H-2 H-1, H-2, H-4 H-4 - H-1, H-3
ก าหนดสเปกตรม H-H COSY-LR (3-4JHH) จงบอกการคควบระหวาง H-H ในแอนทราซน
(ppm)
7.08.0 7.58.5
H-H COSY-LR
7.0
8.0
7.5
8.5
จากตารางก าหนดการคควบระหวาง H-H จงใสพกขามลงในสเปกตรม H-H COSY-LR
(ppm)
(p
p m)
2.0
2.4
2.8
2.2
2.6
3.0
3.23.64.0 3.43.8
H-H COSY-LR
3.2
3.6
4.0
3.4
3.8
2.22.63.0 2.42.8
H1
H2 H
3
โปรตอน คควบกบโปรตอน
H-1 H-2, H-3 H-2 H-1, H-3 H-3 H-1, H-2
HOOC-CH-CH2-CH-COOH
NH2
1 2 3
258
9. โคซทงหมด (TOCSY)
เทคนคโคซทง H-H COSY (3JHH)และ H-H COSY-LR (3-4JHH)เปนความสมพนธเฉพาะระหวางสปนทเกดการคควบหางกนไมเกน 5 พนธะ แตเทคนคโคซทงหมด (TOtal Correlation SpectroscopY, TOCSY) จะแสดงความสมพนธของสปนทงหมดทอยในระบบสปนเดยวกน
สเปกตรม TOCSY จะมลกษณะเหมอนกบสเปกตรม COSY ดงภาพท 6.22 โครงสรางของ 3-เฮปทะโนนมระบบสปน 2 ระบบ เนองจากมหมคารบอนล เกดการคควบระหวางโปรตอนกบโปรตอนทงหมดในสเปกตรม TOCSY ดงตารางท 6.5
(ppm)
2.6
2.2
1.8
1.0
1.4
0.6
2.8
2.0
2.4
0.8
1.6
1.2
2.6 2.2 1.8 1.01.4 0.62.8 2.02.4 0.81.6 1.2
H-H COSY
(p
p m)
2 34 5
1 6
(ppm)
2.6
2.2
1.8
1.0
1.4
0.6
2.8
2.0
2.4
0.8
1.6
1.2
2.6 2.2 1.8 1.01.4 0.62.8 2.02.4 0.81.6 1.2
(p
p m)
2 34 5
1 6
TOCSY
ภาพท 6.22 การเปรยบเทยบสเปกตรมระหวาง TOCSY และ H-H COSY ของ 3-เฮปทะโนน ตารางท 6.5 การคควบระหวางโปรตอนกบโปรตอนของ 3-เฮปทะโนนในสเปกตรมโคซ
โปรตอน คควบกบโปรตอน
สเปกตรม H-H COSY สเปกตรม TOCSY
H-1 H-2 H-2 H-2 H-1 H-1 H-3 H-4 H-4, H-5, H-6 H-4 H-3, H-5 H-3, H-5, H-6 H-5 H-4, H-6 H-3. H-4, H-6 H-6 H-5 H-3, H-4, H-5
CH3CH
2CCH
2CH
2CH
2CH
3
O1 2 3 4 5 6
259
10. เอชเอมบซ (HMBC)
เอชเอมบซ (Heteronuclear Multi-Bond Connectivity, HMBC) เปนสเปกโทรสโกปความสมพนธระหวางอะตอมคารบอนกบไฮโดรเจนเชนเดยวกบเทคนค HMQC, HETCOR หรอ C-H COSY (1JCH) แตเทคนค HMBC เปนโคซ C-H ชวงไกล (long-range C-H COSY) ระหวางอะตอมคารบอนกบไฮโดรเจนหางกนไมเกน 3 พนธะ (2-3JCH) ดงภาพท 6.23 ขอไดเปรยบของเทคนค HMBC คอ สามารถศกษาความสมพนธระหวาง C-H รวมถงอะตอมคารบอนทไมมโปรตอนและเกดผานอะตอมออกซเจน ไนโตรเจน ซลเฟอร และหมคารบอนลได ดงภาพท 6.24
(ppm)3.0 1.04.0 2.0
20
30
5
15
35
25
0
H-1H-2 H-3
H-4HSQC (1J
CH)
C-2C-1
C-3
C-4
(ppm)3.0 1.04.0 2.0
20
30
5
15
35
25
0
H-1H-2 H-3
H-4HMBC (2-3J
CH)
C-2C-1
C-3
C-4
ภาพท 6.23 การเปรยบเทยบสเปกตรมระหวาง HMQC (1JCH) และสเปกตรม HMBC (2-3JCH) ของ
1-โบรโมบวเทน (1-Bromobutane)
CH3-CH
2-CH
2-CH
2-Br
1234
โปรตอน สมพนธกบ C H-1 C-2, C-3 H-2 C-1, C-3, C-4 H-3 C-1, C-2, C-4 H-4 C-2, C-3
260
OHBr
34
56
H3C O
O CH3
OH
OHCH
3 HMBCNN
NHNN
O
H3C
H3C
NH2
Cl
C C CH
HC X CH
HX = O, S, NH
C C CH H
OX
H
X = O, S, NH
ภาพท 6.24 โครงสรางแสดงความสมพนธ C-H (2-3JCH) เกดผานอะตอมออกซเจน ไนโตรเจน ซลเฟอร หมคารบอนล และอะตอมคารบอนทไมมโปรตอน
ในกรณระบบแอโรแมตกทงไฮโดรคารบอนและอะตอมววธพนธ เกดการคควบแบบเมทา- ไดและมคา 3JCH มาก ท าใหปรากฏพกขามความสมพนธระหวาง C-H ในสเปกตรม HMBC ชดเจนมากกวาโปรตอนและอะตอมคารบอนหางกน 2 พนธะ (2JCH) ตวอยางดงภาพท 6.25 ยกเวนเบนซนทมหมแทนทและโครงสรางสมมาตร จะไมปรากฏพกขาม 3JCH ในสเปกตรม HMBC แตเกดความสมพนธ C-H หางกน 1 พนธะเทานน ดงน
(ppm)
140
120
130
C
(pp m
)
7.5 7.0
150
110
H-3H-5 H-6 H-4
C-2
C-6
C-4
C-5C-3
C-1
ภาพท 6.25 สเปกตรม HMBC ของ 2-โบรโมฟนอล ทมา (Field, Sternhell & Kalman, 2013, p. 89)
H1
EH
1
H1
EH
1
Y
H1
EH
1
Y
H1
EH
1
H2
Z Z
Z Z
X
X
X
X
261
ก าหนดโครงสรางของ 2,4-ไดโบรโมอะนลน (2,4-Dibromoaniline) จงตอบค าถามตอไปน
3
12
4
NH2Br Br
HHH
1) จงบอกสญญาณท ( (ppm)) ของโปรตอน NH2, H-3 และ H-4
(ppm)5.0 4.05.5 4.5
110
130
150
100
140
120
(p
pm)
7.0 6.07.5 6.58.0
C-2
C-4
C-3
C-1
C-H COSY
2) จงใสจดแสดงความสมพนธ C-H (3JCH) ในสเปกตรม HMBC
(ppm)5.0 4.05.5 4.5
110
130
150
100
140
120
(p
pm)
7.0 6.07.5 6.58.0
HMBC
โปรตอน สมพนธกบอะตอมคารบอน
H-3
H-4 NH2
262
11. โนซและโรซ (NOESY and ROESY)
นวเคลยรแมกนทกเรโซแนนซแบบ 2 มต ทงเทคนคโนซ (Nuclear Overhauser Effect SpectroscopY, NOESY) และโรซ (Rotating frame Overhauser Effect SpectroscopY, ROESY) แสดงความสมพนธระหวางโปรตอนกบโปรตอนทเกดอนตรกรยาผานชองวาง เนองจากผลเชงนวเคลยรโอเวอรเฮาเซอร โดยโปรตอนสองตวทเกดอนตรกรยากนผานชองวาง จะปรากฏพกขามในสเปกตรมแบบ 2 มต ซงสเปกตรมทงสองจะมลกษณะเหมอนกน โดยทงแกน X และแกน Y เปน (ppm) ของโปรตอน
เทคนคโนซหรอเทคนคโรซจงมประโยชนเพอใชยนยนโครงสรางทมสเตอรโอไอโซเมอรมากกวาหนงไอโซเมอร เชน ซส- ทรานส- โครงสรางทมโครงรป หรอโครงสรางเปนวง เปนตน ดงภาพท 6.26 แสดงสเปกตรมโนซของเอทลเบนซน ปรากฏพกขามระหวางโปรตอนของหมเอทลกบโปรตอนบนวงเบนซน
(ppm)
7
56
3
5
1
2
6
4
3 24 17
.
.
. .
CH3
CH2A r
NOESY
ภาพท 6.26 สเปกตรม NOESY ของเอทลเบนซน ทมา (The Hebrew University of Jerusalem, n.d.)
H HHHHH
HNOE
NOE
263
ก าหนดสเปกตรม NOESY จงระบสเตอรโอไอโซเมอรของไนโทรแนฟทาลน (Nironaphalene) วาเปนโครงสราง A หรอ B
NO2 NO
2
A B
123
4567
8
(ppm)
8.6
8.28.4
7.8
8.2
7.4
7.6
8.4
8.0
7.8 7.68.0 7.48.6
H-8
บทสรป
การพสจนสตรโครงสรางดวยเทคนคอะตอมคารบอน-13 นวเคลยรแมกนทกเรโซแนนซ ซงมหลกการเกดเรโซแนนซเชนเดยวกบโปรตอน สรปไดดงน
1. สเปกตรม 13C NMR BB decoupling จะทราบจ านวนอะตอมคารบอนปรากฏสญญาณชวง C (ppm) 0-200 โดยอะตอมคารบอนสมมลจะปรากฏสญญาณทความถเรโซแนนซเดยวกน
2. ปจจยทมผลตอคาการเลอนทางเคม ไดแก ผลเชงแมกนทกอะนโซโทรป ผลเหนยวน า และชนดไฮบรไดเซชนของอะตอมคารบอน
3. สเปกตรม 13C NMR โปรตอนถกคควบ สญญาณจะแยกเปนกลมพก ตามกฎ N+1 โดยท N คอ จ านวนอะตอมไฮโดรเจนบนอะตอมคารบอน ขอมลทไดทราบชนดอะตอมคารบอน ไดแก C (s), CH (d), CH2 (t) และ CH3 (q) โดยสเปกตรมชนดนเหมาะกบการเกดสญญาณทไมซบซอน
264
4. ตวอยางจะละลายดวยตวท าละลายดวเทอเรยม จะปรากฏสญญาณในสเปกตรม 13C NMR ดวย
5. สเปกตรม DEPT จะไดขอมลชนดอะตอมคารบอนเชนเดยวกบสเปกตรม 13C NMR โปรตอนถกคควบ โดยสเปกตรม DEPT 90 จะปรากฏเฉพาะสญญาณของหม CH อยดานบน (positive) สวนสเปกตรม DEPT 135 จะปรากฏสญญาณของหม CH2 อยดานลาง (negative) และหม CH และ CH3 อยดานบน เมอเปรยบเทยบสเปกตรม DEPT 90 และ DEPT 135 กบสเปกตรม 13C NMR BB decoupling จะท าใหทราบจ านวนและต าแหนงความถเรโซแนนซของอะตอมคารบอนสธาต (C)
6. สเปกตรม DEPT จะทราบจ านวนสญญาณของอะตอมคารบอนสธาต (C) ในชวง C (ppm) 110-150 ซงเปนของอะตอมคารบอนของเบนซนนน สามารถรปแบบการแทนทบนวงเบนซนได
7. เทคนคการถอดคควบนอกชวงความถเรโซแนนซของโปรตอน สเปกตรมจะปรากฏสญญาณ
เหมอนสเปกตรม 13C NMR โปรตอนถกคควบระหวาง 13C-1H ตามกฎ N+1 โดยท N คอ จ านวน
อะตอมไฮโดรเจนบนอะตอมคารบอน จงทราบชนดอะตอมคารบอนได แตคา 1JCH นอยกวาคาแทจรง
นอกจากน โครงสรางทมความซบซอนตองใชหลายเทคนคทางสเปกโทรสโกปรวมกน โดยเฉพาะนวเคลยรแมกนทกเรโซแนนซแบบ 2 มต โดยสเปกตรมนยมแบบคอนทวรพลอตมากกวาแบบสแตกพลอต โดยแกน X และแกน Y คอ (ppm) หรอ J (Hz) และแกน Z คอ คาความเขมสญญาณ แสดงความสมพนธระหวางโปรตอนกบอะตอมคารบอน-13 ดงน
1. ความสมพนธระหวางโปรตอนกบโปรตอน 1.1 เกดผานพนธะ ไดแก เทคนคการแยกคาคงตวการคควบระหวางโปรตอนกบโปรตอน
(2-3JHH) ทราบคาคงตวการคควบ H-H และเทคนคโคซ คอ H-H COSY (3JHH) ทราบโปรตอนบนอะตอมคารบอนทตดกน เทคนค H-H COSY-LR (3-4JHH) การคควบระหวางโปรตอนกบโปรตอนชวงไกล และเทคนค TOCSY การคควบระหวางโปรตอนกบโปรตอนทงหมดในโครงสรางในระบบสปนเดยวกน
1.2 เกดผานชองวาง ไดแก เทคนค NOESY และ ROESY ความสมพนธระหวางโปรตอนกบโปรตอนทเกดอนตรกรยากน
2. ความสมพนธระหวางอะตอมคารบอนกบคารบอน ไดแก เทคนค INADEQUATE (1JCC) ทราบขอมลอะตอมคารบอนทตดกน
3. ความสมพนธระหวางโปรตอนกบอะตอมคารบอน จะเกดผานพนธะเทานน ไดแก เทคนคการแยกคาคงตวการคควบระหวางโปรตอนกบอะตอมคารบอน (1JCH) ทราบคาคงตวการคควบ C-H เทคนค HETCOR, C-H COSY, HSQC และ HMQC เกดผาน 1 พนธะ (1JCH) เชนเดยวกน สวนเทคนค HMBC จะเกดผานพนธะมากกวา 1 พนธะ (2-3JCH)
265
ค ำถำมทำยบท
1. จงบอกชนดของอะตอมคารบอนทงหมดในโครงสรางทก าหนด
H3C C
H
OHCCH
3
CH3
C CH3
H
H
1.1 1.2
2. ก าหนดโครงสราง จงบอกจ านวนสญญาณทงหมดทปรากฏในสเปกตรม 13C NMR
Cl Cl
Cl
Cl
BrBr Cl
Br
Cl
Cl
ClCl Cl
(1) (2) (3) (4)
(5) (6) (7)
123
4
5 6
123
4
5 6
123
4
5 6
123
4
5 6
12
3
45
6
123
4
5 6
12
3
45
6
3. ก าหนดโครงสราง จงเปรยบเทยบความถเรโซแนนซของอะตอม C-1 และ C-2 พรอมเหตผล
12CH
2CH
33.1
3.3CH
3CH
2CH
2CH
2CH
2OH
1 2
3.2 1
2
3.41 2
3.5
OO1
2
3.6 1 2CH
3CH
2COOCH
2CH
3
4. สเปกตรม 13C NMR ของเอทลเอสเทอรปรากฏสญญาณท C (ppm) 14.2, 41.4, 60.6, 126, 127, 129, 135 และ 179.9 จงระบ C ของแตละอะตอมคารบอน
OO
266
5. จงระบสเปกตรม 13C NMR กบสารอนทรยทก าหนดใหถกตอง
H3C CH
2CH
3
O
Br-CH2-CH
2-Br CH
3-CH-BrCH
3
4080120160200
04080120160200
0
04080120160200
50 MHz, CDCl3
50 MHz, CDCl3
50 MHz, CDCl3
(ppm)
(ppm)
(ppm)
(1)
(2)
(3)
6. จากสเปกตรม 13C NMR เปนของโครงสรางใด
CH3CH
2-C-OCH
3
OCH
3-C-CH
2-O-CH
3
O(1) (2)
20 (ppm)160 406080100120140180 0
267
7. ก าหนดสเปกตรม จงหาสตรโครงสรางของไอโซเมอรสารประกอบแอโรแมตกทมสตรโมเลกล เทากบ C9H12
20 (ppm)160 406080100120140180200 0
sovlent
DEPT CH2 CH
3 CH
proton decoupled
13C NMR 100 MHz, in CDCl3(1)
20 (ppm)160 406080100120140180200 0
sovlent
DEPT CH2 CH
3 CH
proton decoupled
13C NMR 100 MHz, in CDCl3(2)
20 (ppm)160 406080100120140180200 0
sovlent
DEPT CH2 CH
3 CH
proton decoupled
13C NMR 100 MHz, in CDCl3(3)
24 20135 130
24 20135 130 125
125
268
8. ก าหนดสเปกตรม จงหาสตรโครงสราง 8.1 สารอนทรยมสตรโมเลกล เทากบ C6H10O3
20 (ppm)160 406080100120140180200 0
sovlent
proton decoupled
13C NMR 100 MHz, in CDCl3
proton coupled
8.2 สารอนทรยมสตรโมเลกล เทากบ C6H4Br2
20 (ppm)160 406080100120140180200 0
sovlent
DEPT CH2 CH
3 CH
proton decoupled
13C NMR 100 MHz, in CDCl3
9. ก าหนดสเปกตรม 13C NMR แสดงสญญาณเฉพาะชวงของวงเบนซนปรากฏ 4 สญญาณ จงหาโครงสรางทถกตอง
(ppm)160 140 120
two peaks
CH3 CH
3 OHH
3C CH
3
(1) (2) (3)
269
10. ก าหนดสเปกตรม 13C NMR off-resonance decoupling จงระบแตละสญญาณในสเปกตรมเปนของอะตอมคารบอนใดในโครงสรางทก าหนด
(ppm)
13C NMR off-resonance couplingin TMS
020406080100120140160180
H3C C
ClCH
2Cl
Cl
11. จากสเปกตรม 13C NMR off-resonance decoupling ในขอ 10 สญญาณท C (ppm) 0 (quartet) นาจะเปนของสารใด
12. ก าหนดสเปกตรม 13C NMR จงหาโครงสรางสารอนทรยทมสตรโมเลกล เทากบ C3H5Cl3
(ppm)
13C NMR off-resonance coupling
0102030405060708090
C3H
5Cl
3
270
13. ก าหนดสเปกตรม 1H NMR วเคราะหดวยเครองความถ 300 เมกกะเฮรตซ แสดงสญญาณเฉพาะชวงแอโรแมตกของสารอนทรยมสตรโมเลกล เทากบ C13H12O2 โครงสรางประกอบดวยหมเมทอกซล ( (ppm) 3.80 (s)) หมไบฟนล ( (ppm) 6.8-7.6) และหมไฮดรอกซล ( (ppm) 5.50 (br s)) จงพสจนโครงสรางของอนทรยดวยเทคนคผลเชงนวเคลยรโอเวอรเฮาเซอร
OH OCH3
7.07.27.47.6 (ppm)7.17.37.5
irradiate at (ppm) 3.80
Hz30 20 10 0
1H NMR 300 MHz
(different)
irradiate at (ppm) 5.50(different)
2.02 2.03
0.90 0.93 0.89 1.00
6.9 14. ก าหนดโครงสราง จงบอกการคควบระหวางโปรตอนกบโปรตอนใหถกตอง
O2N NO
21
2 23
โปรตอน H-H COSY (3JHH) H-H COSY-LR (3-4JHH) TOCSY (>4JHH)
H-1
H-2 H-3
271
15. จงหาโครงสรางของสารทมสตรโมเลกล เทากบ C6H14O ไมดดกลนรงสยวตงแต 200 นาโมเมตร
100
50
0
%T
wavenumber (cm-1
)
4,000 3,000 2,000 1,500 1,000 500
(ppm)123
1H NMR coupled 400 MHz, in CDCl3
4H
2H 2H
3H
3H
(ppm)123
1H NMR decoupled
H-H J-resolved
272
16. จงหาสตรโครงสรางของสารทมสตรโมเลกล เทากบ C4H10O
(ppm)
(ppm)
0123456789
20406080100120
J (Hz)
10
1H NMR 300 MHz, in CDCl3
140160180200 0
C-H J-resolved
13C NMR BB decoupling
273
17. จงหาสตรโครงสรางสารทมสตรโมเลกล เทากบ C5H12O จากสเปกตรม 1H NMR ปรากฏสญญาณท (ppm) 0.9 (6H, d), 1.4 (2H, q), 1.6 (1H, m), 2.3 (1H, br s) และ 3.7 (2H, t) ซงโปรตอนท (ppm) 2.3 เกดการแลกเปลยนโปรตอนกบดวเทอเรยมออกไซดได
(ppm)
1.0
1.5
2.0
15202530354045
(p
p m)2.5
3.5
3.0
4.0
105055
4.5
6065 5
HMQC
(ppm)1520253035
J (Hz
)
404550556065
2D INADEQUATE
(ppm)1520253035
J (Hz
)
404550556065
C-H J-resolved
274
18. ก าหนดสเปกตรม HETCOR จงหาสตรโครงสรางของสารทมสตรโมเลกล เทากบ C5H8O2
(ppm)
0
2
4
04080
(p
p m)
6
8120160200
HETCOR
1H
3H
3H
1H
19. ก าหนดโครงสราง จงใสพกขามแสดงความสมพนธระหวางโปรตอนกบโปรตอนลงในสเปกตรม H-H COSY-LR (3-4JHH)
(ppm)
(p
p m)
H-H COSY-LR
N
NBr 1 2
346
7
9
H-1
H-9
H-6
H-4H-7
H-3
H-2
20. จงใสลกศรแสดงความสมพนธระหวาง C-H ดวยเทคนค HMBC เฉพาะหม OCH3 และ CH3
OO OCH
3
H3CO
CH3
OH
275
21. ก าหนดสเปกตรมทงแบบ 1 มต และ 2 มต ของบวทลเอทลอเทอร (Butyl ethyl ether) ใหระบ คาการเลอนทางเคมของโปรตอนและอะตอมคารบอนทงหมด โดยใชขอมลสเปกตรม H-H COSY และ C-H COSY จากนนใหวาดพกขามแสดงความสมพนธ C-H ลงในสเปกตรม HMBC
3 12 (ppm)
1H NMR, in CDCl3
(ppm)20406080
(ppm)3 12
H-H COSY
3
1
2
CH3-CH
2-CH
2-CH
2-O-CH
2-CH
3
1 2 3 4 5 6
276
(ppm)
60
40
50
70
3 12
30
10
20
HMQC
(ppm)
60
40
50
70
3 12
30
10
20
HMBC (2-3JCH
)
277
22. ก าหนดสเปกตรม NOESY จงเขยนสเตอรโอไอโซเมอรของแลกโทนวาเปนโครงสราง A หรอ B
(ppm)
4 235
4
2
3
5
m dd dd
d
23. 2-โบรโม-2-บวทน (2-Bromo-2-butene) ม 2 ไอโซเมอร ไดแก E- และ Z- มสเปกตรม 1H NMR เหมอนกน ปรากฏสญญาณท (ppm) 1.6.4 (=CH-CH3), 2.25 (=CBrCH3) และ 5.63 (CH=) แตสเปกตรม NOESY แตกตางกน จงใสพกขามของแตละไอโซเมอรในสเปกตรม NOESY
H3C
BrH
CH3
Z-
H3C
CH3
H
BrE-
6
4
5
3
2
(ppm)
6
45 3 2 6
4
5
3
2
(ppm)
6
45 3 2
OO
CH3
H
H
H
OO
H
CH3
H
H
(A)
(B)
278
24. จงหาโครงสรางสารอนทรยมสตรโมเลกล เทากบ C9H16O4
%T
wavenumber (cm-1)3,000 2,000 1,600 1,200 8004,000
1,740
0.0
0.5
1.0
1.5
Abs.
200 250 300 (nm)
solvent in ethanol
(ppm)40200 0120160 80
DEPT CH2 CH
3 CH
solvent
13C NMR BB decoupling
(ppm)15 034 2
1H NMR 300 MHz, in CDCl3
279
(ppm)134 2
H-H COSY1
3
4
2
(ppm)1
C
(pp m
)
34 2
20
60
80
40
HETCOR