Was ist HPLC? Was ist das Besondere? Aufbau Auswertung Möglichkeiten & Varianten der HPLC Zusammenfassung
High Performance Liquid Chromatography(HPLC)
Nicolas Balcazar
Systembiologie -Methodenseminar
WS 08/09FU Berlin
10. November 2008
Nicolas Balcazar
HPLC
Was ist HPLC? Was ist das Besondere? Aufbau Auswertung Möglichkeiten & Varianten der HPLC Zusammenfassung
Gliederung
Was ist HPLC?
Was ist das Besondere?Aufgabenstellung und Lösung
AufbauAufbau eines HPLC-Systems
AuswertungWie sieht das Ergebnis einer HPLC aus?
Möglichkeiten & Varianten der HPLCNormalphase, Umkehrphase, Größenausschluss-,Ionenaustausch- und Bioaffinitäts-Chromatographie
Nicolas Balcazar
HPLC
Was ist HPLC? Was ist das Besondere? Aufbau Auswertung Möglichkeiten & Varianten der HPLC Zusammenfassung
HPLC
I High performance (pressure) liquid chromatography.I Sehr leistungsfähige chromatographische Technik zur
Auftrennung und Analyse von Stoffgemischen.I Gehört zur Gruppe der Säulen-Chromatographien.
I Stationäre Phase in Stahlsäule gepackt.I Mobile Phase durch Flüssigkeiten gebildet.
Nicolas Balcazar
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Was ist HPLC? Was ist das Besondere? Aufbau Auswertung Möglichkeiten & Varianten der HPLC Zusammenfassung
HPLC
I High performance (pressure) liquid chromatography.I Sehr leistungsfähige chromatographische Technik zur
Auftrennung und Analyse von Stoffgemischen.I Gehört zur Gruppe der Säulen-Chromatographien.
I Stationäre Phase in Stahlsäule gepackt.I Mobile Phase durch Flüssigkeiten gebildet.
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Was ist HPLC? Was ist das Besondere? Aufbau Auswertung Möglichkeiten & Varianten der HPLC Zusammenfassung
HPLC
I High performance (pressure) liquid chromatography.I Sehr leistungsfähige chromatographische Technik zur
Auftrennung und Analyse von Stoffgemischen.I Gehört zur Gruppe der Säulen-Chromatographien.
I Stationäre Phase in Stahlsäule gepackt.I Mobile Phase durch Flüssigkeiten gebildet.
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HPLC
I High performance (pressure) liquid chromatography.I Sehr leistungsfähige chromatographische Technik zur
Auftrennung und Analyse von Stoffgemischen.I Gehört zur Gruppe der Säulen-Chromatographien.
I Stationäre Phase in Stahlsäule gepackt.I Mobile Phase durch Flüssigkeiten gebildet.
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HPLC
I High performance (pressure) liquid chromatography.I Sehr leistungsfähige chromatographische Technik zur
Auftrennung und Analyse von Stoffgemischen.I Gehört zur Gruppe der Säulen-Chromatographien.
I Stationäre Phase in Stahlsäule gepackt.I Mobile Phase durch Flüssigkeiten gebildet.
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Was ist HPLC? Was ist das Besondere? Aufbau Auswertung Möglichkeiten & Varianten der HPLC Zusammenfassung
Das Prinzip ist nicht außergewöhnlich
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Was ist HPLC? Was ist das Besondere? Aufbau Auswertung Möglichkeiten & Varianten der HPLC Zusammenfassung
Aufgabenstellung und Lösung
Gliederung
Was ist HPLC?
Was ist das Besondere?Aufgabenstellung und Lösung
AufbauAufbau eines HPLC-Systems
AuswertungWie sieht das Ergebnis einer HPLC aus?
Möglichkeiten & Varianten der HPLCNormalphase, Umkehrphase, Größenausschluss-,Ionenaustausch- und Bioaffinitäts-Chromatographie
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Was ist HPLC? Was ist das Besondere? Aufbau Auswertung Möglichkeiten & Varianten der HPLC Zusammenfassung
Aufgabenstellung und Lösung
Das Problem
Für gute Auftrennung:I Lange SäuleI möglichst kleine Partikelgröße der stationären Phase
Diese Faktoren verlangsamen die Analyse
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Was ist HPLC? Was ist das Besondere? Aufbau Auswertung Möglichkeiten & Varianten der HPLC Zusammenfassung
Aufgabenstellung und Lösung
Die Lösung
Hoher Druck, um Eluent durch Säule zu pumpen.Jetzt:
I Kleinere Partikel als stationäre Phase einsetzbarI Hervorragende TrennungI Kurze SäulenI Trennung läuft schneller ab
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Aufgabenstellung und Lösung
Die Lösung
Hoher Druck, um Eluent durch Säule zu pumpen.Jetzt:
I Kleinere Partikel als stationäre Phase einsetzbarI Hervorragende TrennungI Kurze SäulenI Trennung läuft schneller ab
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Was ist HPLC? Was ist das Besondere? Aufbau Auswertung Möglichkeiten & Varianten der HPLC Zusammenfassung
Aufgabenstellung und Lösung
Die Lösung
Hoher Druck, um Eluent durch Säule zu pumpen.Jetzt:
I Kleinere Partikel als stationäre Phase einsetzbarI Hervorragende TrennungI Kurze SäulenI Trennung läuft schneller ab
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Aufgabenstellung und Lösung
Die Lösung
Hoher Druck, um Eluent durch Säule zu pumpen.Jetzt:
I Kleinere Partikel als stationäre Phase einsetzbarI Hervorragende TrennungI Kurze SäulenI Trennung läuft schneller ab
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Was ist HPLC? Was ist das Besondere? Aufbau Auswertung Möglichkeiten & Varianten der HPLC Zusammenfassung
Aufgabenstellung und Lösung
Einige Zahlen
Normale LC HPLC
Partikelgrößen � 100 – 300 µm 3 – 10 µmSäulenlänge 50 – 300 cm 5 – 30 cmSäulen � (innen) 5 – 50 mm 2 – 4 mm
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Was ist HPLC? Was ist das Besondere? Aufbau Auswertung Möglichkeiten & Varianten der HPLC Zusammenfassung
Aufbau eines HPLC-Systems
Gliederung
Was ist HPLC?
Was ist das Besondere?Aufgabenstellung und Lösung
AufbauAufbau eines HPLC-Systems
AuswertungWie sieht das Ergebnis einer HPLC aus?
Möglichkeiten & Varianten der HPLCNormalphase, Umkehrphase, Größenausschluss-,Ionenaustausch- und Bioaffinitäts-Chromatographie
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Was ist HPLC? Was ist das Besondere? Aufbau Auswertung Möglichkeiten & Varianten der HPLC Zusammenfassung
Aufbau eines HPLC-Systems
Vom Schema..
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Aufbau eines HPLC-Systems
.. zur Realität
(Foto der Firma Shimadzu)
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Aufbau eines HPLC-Systems
bei uns
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Wie sieht das Ergebnis einer HPLC aus?
Gliederung
Was ist HPLC?
Was ist das Besondere?Aufgabenstellung und Lösung
AufbauAufbau eines HPLC-Systems
AuswertungWie sieht das Ergebnis einer HPLC aus?
Möglichkeiten & Varianten der HPLCNormalphase, Umkehrphase, Größenausschluss-,Ionenaustausch- und Bioaffinitäts-Chromatographie
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HPLC
Was ist HPLC? Was ist das Besondere? Aufbau Auswertung Möglichkeiten & Varianten der HPLC Zusammenfassung
Wie sieht das Ergebnis einer HPLC aus?
I Detektor misst kontinuierlich am Ende der Säule.I Messwerte als Kurve in Funktion zur Zeit dargestellt.
↪→ Chromatogramm
I Retentionszeit↪→ Eindeutige Stoffzuordnung.
I Fläche unterm Peak proportional zur Konzentrationdes Stoffes.↪→ HPLC liefert dadurch sehr präzise quantitativeErgebnisse.
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Wie sieht das Ergebnis einer HPLC aus?
I Detektor misst kontinuierlich am Ende der Säule.I Messwerte als Kurve in Funktion zur Zeit dargestellt.
↪→ Chromatogramm
I Retentionszeit↪→ Eindeutige Stoffzuordnung.
I Fläche unterm Peak proportional zur Konzentrationdes Stoffes.↪→ HPLC liefert dadurch sehr präzise quantitativeErgebnisse.
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Wie sieht das Ergebnis einer HPLC aus?
I Detektor misst kontinuierlich am Ende der Säule.I Messwerte als Kurve in Funktion zur Zeit dargestellt.
↪→ Chromatogramm
I Retentionszeit↪→ Eindeutige Stoffzuordnung.
I Fläche unterm Peak proportional zur Konzentrationdes Stoffes.↪→ HPLC liefert dadurch sehr präzise quantitativeErgebnisse.
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Was ist HPLC? Was ist das Besondere? Aufbau Auswertung Möglichkeiten & Varianten der HPLC Zusammenfassung
Wie sieht das Ergebnis einer HPLC aus?
I Detektor misst kontinuierlich am Ende der Säule.I Messwerte als Kurve in Funktion zur Zeit dargestellt.
↪→ Chromatogramm
I Retentionszeit↪→ Eindeutige Stoffzuordnung.
I Fläche unterm Peak proportional zur Konzentrationdes Stoffes.↪→ HPLC liefert dadurch sehr präzise quantitativeErgebnisse.
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Was ist HPLC? Was ist das Besondere? Aufbau Auswertung Möglichkeiten & Varianten der HPLC Zusammenfassung
Normalphase, Umkehrphase, Größenausschluss-, Ionenaustausch- und Bioaffinitäts-Chromatographie
Gliederung
Was ist HPLC?
Was ist das Besondere?Aufgabenstellung und Lösung
AufbauAufbau eines HPLC-Systems
AuswertungWie sieht das Ergebnis einer HPLC aus?
Möglichkeiten & Varianten der HPLCNormalphase, Umkehrphase, Größenausschluss-,Ionenaustausch- und Bioaffinitäts-Chromatographie
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HPLC
Was ist HPLC? Was ist das Besondere? Aufbau Auswertung Möglichkeiten & Varianten der HPLC Zusammenfassung
Normalphase, Umkehrphase, Größenausschluss-, Ionenaustausch- und Bioaffinitäts-Chromatographie
Normalphase HPLCNP-HPLC
I Trennt Analyten nach Polarität auf.I Erste Art von HPLC, die Chemiker entwickelten.I Stationäre Phase: Polar.I Mobile Phase: nicht-polar.I Effektiv für relativ polare Analyte.
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Normalphase, Umkehrphase, Größenausschluss-, Ionenaustausch- und Bioaffinitäts-Chromatographie
Normalphase HPLCNP-HPLC
I Trennt Analyten nach Polarität auf.I Erste Art von HPLC, die Chemiker entwickelten.I Stationäre Phase: Polar.I Mobile Phase: nicht-polar.I Effektiv für relativ polare Analyte.
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Normalphase, Umkehrphase, Größenausschluss-, Ionenaustausch- und Bioaffinitäts-Chromatographie
Normalphase HPLCNP-HPLC
I Trennt Analyten nach Polarität auf.I Erste Art von HPLC, die Chemiker entwickelten.I Stationäre Phase: Polar.I Mobile Phase: nicht-polar.I Effektiv für relativ polare Analyte.
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Normalphase, Umkehrphase, Größenausschluss-, Ionenaustausch- und Bioaffinitäts-Chromatographie
Normalphase HPLCNP-HPLC
I Trennt Analyten nach Polarität auf.I Erste Art von HPLC, die Chemiker entwickelten.I Stationäre Phase: Polar.I Mobile Phase: nicht-polar.I Effektiv für relativ polare Analyte.
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Was ist HPLC? Was ist das Besondere? Aufbau Auswertung Möglichkeiten & Varianten der HPLC Zusammenfassung
Normalphase, Umkehrphase, Größenausschluss-, Ionenaustausch- und Bioaffinitäts-Chromatographie
Normalphase HPLCNP-HPLC
I Trennt Analyten nach Polarität auf.I Erste Art von HPLC, die Chemiker entwickelten.I Stationäre Phase: Polar.I Mobile Phase: nicht-polar.I Effektiv für relativ polare Analyte.
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Was ist HPLC? Was ist das Besondere? Aufbau Auswertung Möglichkeiten & Varianten der HPLC Zusammenfassung
Normalphase, Umkehrphase, Größenausschluss-, Ionenaustausch- und Bioaffinitäts-Chromatographie
Umkehrphase HPLCRP-HPLC (engl. reversed phase)
I Stationäre Phase: nicht-polar.I Mobile Phase: Wässrig, mäßig polar.I Arbeitet nach Prinzip der hydrophoben Wechselwirkungen.I Strukturelle Eigenschaften des Analyten Moleküls
beeinflussen Retentionszeit.
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Normalphase, Umkehrphase, Größenausschluss-, Ionenaustausch- und Bioaffinitäts-Chromatographie
Umkehrphase HPLCRP-HPLC (engl. reversed phase)
I Stationäre Phase: nicht-polar.I Mobile Phase: Wässrig, mäßig polar.I Arbeitet nach Prinzip der hydrophoben Wechselwirkungen.I Strukturelle Eigenschaften des Analyten Moleküls
beeinflussen Retentionszeit.
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Normalphase, Umkehrphase, Größenausschluss-, Ionenaustausch- und Bioaffinitäts-Chromatographie
Umkehrphase HPLCRP-HPLC (engl. reversed phase)
I Stationäre Phase: nicht-polar.I Mobile Phase: Wässrig, mäßig polar.I Arbeitet nach Prinzip der hydrophoben Wechselwirkungen.I Strukturelle Eigenschaften des Analyten Moleküls
beeinflussen Retentionszeit.
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Was ist HPLC? Was ist das Besondere? Aufbau Auswertung Möglichkeiten & Varianten der HPLC Zusammenfassung
Normalphase, Umkehrphase, Größenausschluss-, Ionenaustausch- und Bioaffinitäts-Chromatographie
Umkehrphase HPLCRP-HPLC (engl. reversed phase)
I Stationäre Phase: nicht-polar.I Mobile Phase: Wässrig, mäßig polar.I Arbeitet nach Prinzip der hydrophoben Wechselwirkungen.I Strukturelle Eigenschaften des Analyten Moleküls
beeinflussen Retentionszeit.
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Was ist HPLC? Was ist das Besondere? Aufbau Auswertung Möglichkeiten & Varianten der HPLC Zusammenfassung
Normalphase, Umkehrphase, Größenausschluss-, Ionenaustausch- und Bioaffinitäts-Chromatographie
Größenausschluss-HPLC
I Auch Gel-Filtrations-Chromatographie genannt.I Trennt Teilchen auf Grund der Größe.I Niedrige Auflösung→ oft für letzten „schliff“ einer
Reinigung verwendet.
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Normalphase, Umkehrphase, Größenausschluss-, Ionenaustausch- und Bioaffinitäts-Chromatographie
Größenausschluss-HPLC
I Auch Gel-Filtrations-Chromatographie genannt.I Trennt Teilchen auf Grund der Größe.I Niedrige Auflösung→ oft für letzten „schliff“ einer
Reinigung verwendet.
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Was ist HPLC? Was ist das Besondere? Aufbau Auswertung Möglichkeiten & Varianten der HPLC Zusammenfassung
Normalphase, Umkehrphase, Größenausschluss-, Ionenaustausch- und Bioaffinitäts-Chromatographie
Größenausschluss-HPLC
I Auch Gel-Filtrations-Chromatographie genannt.I Trennt Teilchen auf Grund der Größe.I Niedrige Auflösung→ oft für letzten „schliff“ einer
Reinigung verwendet.
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Was ist HPLC? Was ist das Besondere? Aufbau Auswertung Möglichkeiten & Varianten der HPLC Zusammenfassung
Normalphase, Umkehrphase, Größenausschluss-, Ionenaustausch- und Bioaffinitäts-Chromatographie
Ionenaustausch-HPLC
I Trennt Ionen (Kationen / Anionen)I Retention auf Grundlage der Anziehung zwischen gelösten
Ionen und den, mit der stationären Phase verbundenen,geladenen Seiten.
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Normalphase, Umkehrphase, Größenausschluss-, Ionenaustausch- und Bioaffinitäts-Chromatographie
Ionenaustausch-HPLC
I Trennt Ionen (Kationen / Anionen)I Retention auf Grundlage der Anziehung zwischen gelösten
Ionen und den, mit der stationären Phase verbundenen,geladenen Seiten.
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Normalphase, Umkehrphase, Größenausschluss-, Ionenaustausch- und Bioaffinitäts-Chromatographie
Bioaffinitäts-HPLC
I Trennt Biomoleküle (z. B. Enzyme, Antikörper)I Stützt sich auf die Eigenschaft, dass biologisch aktive
Substanzen, stabile, spezifische und reversible Komplexebilden.
I Beteiligung der gemeinsamen molekularen Kräfte wie:I Van-der-Waals-Wechselwirkung,I elektrostatische Wechselwirkung,I Dipol-Dipol-Wechselwirkungen,I hydrophobe Wechselwirkungen undI Wasserstoff-Brücken-Bindungen.
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Normalphase, Umkehrphase, Größenausschluss-, Ionenaustausch- und Bioaffinitäts-Chromatographie
Bioaffinitäts-HPLC
I Trennt Biomoleküle (z. B. Enzyme, Antikörper)I Stützt sich auf die Eigenschaft, dass biologisch aktive
Substanzen, stabile, spezifische und reversible Komplexebilden.
I Beteiligung der gemeinsamen molekularen Kräfte wie:I Van-der-Waals-Wechselwirkung,I elektrostatische Wechselwirkung,I Dipol-Dipol-Wechselwirkungen,I hydrophobe Wechselwirkungen undI Wasserstoff-Brücken-Bindungen.
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Normalphase, Umkehrphase, Größenausschluss-, Ionenaustausch- und Bioaffinitäts-Chromatographie
Bioaffinitäts-HPLC
I Trennt Biomoleküle (z. B. Enzyme, Antikörper)I Stützt sich auf die Eigenschaft, dass biologisch aktive
Substanzen, stabile, spezifische und reversible Komplexebilden.
I Beteiligung der gemeinsamen molekularen Kräfte wie:I Van-der-Waals-Wechselwirkung,I elektrostatische Wechselwirkung,I Dipol-Dipol-Wechselwirkungen,I hydrophobe Wechselwirkungen undI Wasserstoff-Brücken-Bindungen.
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Normalphase, Umkehrphase, Größenausschluss-, Ionenaustausch- und Bioaffinitäts-Chromatographie
Bioaffinitäts-HPLC
I Trennt Biomoleküle (z. B. Enzyme, Antikörper)I Stützt sich auf die Eigenschaft, dass biologisch aktive
Substanzen, stabile, spezifische und reversible Komplexebilden.
I Beteiligung der gemeinsamen molekularen Kräfte wie:I Van-der-Waals-Wechselwirkung,I elektrostatische Wechselwirkung,I Dipol-Dipol-Wechselwirkungen,I hydrophobe Wechselwirkungen undI Wasserstoff-Brücken-Bindungen.
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Normalphase, Umkehrphase, Größenausschluss-, Ionenaustausch- und Bioaffinitäts-Chromatographie
Bioaffinitäts-HPLC
I Trennt Biomoleküle (z. B. Enzyme, Antikörper)I Stützt sich auf die Eigenschaft, dass biologisch aktive
Substanzen, stabile, spezifische und reversible Komplexebilden.
I Beteiligung der gemeinsamen molekularen Kräfte wie:I Van-der-Waals-Wechselwirkung,I elektrostatische Wechselwirkung,I Dipol-Dipol-Wechselwirkungen,I hydrophobe Wechselwirkungen undI Wasserstoff-Brücken-Bindungen.
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Normalphase, Umkehrphase, Größenausschluss-, Ionenaustausch- und Bioaffinitäts-Chromatographie
Bioaffinitäts-HPLC
I Trennt Biomoleküle (z. B. Enzyme, Antikörper)I Stützt sich auf die Eigenschaft, dass biologisch aktive
Substanzen, stabile, spezifische und reversible Komplexebilden.
I Beteiligung der gemeinsamen molekularen Kräfte wie:I Van-der-Waals-Wechselwirkung,I elektrostatische Wechselwirkung,I Dipol-Dipol-Wechselwirkungen,I hydrophobe Wechselwirkungen undI Wasserstoff-Brücken-Bindungen.
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Normalphase, Umkehrphase, Größenausschluss-, Ionenaustausch- und Bioaffinitäts-Chromatographie
Bioaffinitäts-HPLC
I Trennt Biomoleküle (z. B. Enzyme, Antikörper)I Stützt sich auf die Eigenschaft, dass biologisch aktive
Substanzen, stabile, spezifische und reversible Komplexebilden.
I Beteiligung der gemeinsamen molekularen Kräfte wie:I Van-der-Waals-Wechselwirkung,I elektrostatische Wechselwirkung,I Dipol-Dipol-Wechselwirkungen,I hydrophobe Wechselwirkungen undI Wasserstoff-Brücken-Bindungen.
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Normalphase, Umkehrphase, Größenausschluss-, Ionenaustausch- und Bioaffinitäts-Chromatographie
Bioaffinitäts-HPLC
I Trennt Biomoleküle (z. B. Enzyme, Antikörper)I Stützt sich auf die Eigenschaft, dass biologisch aktive
Substanzen, stabile, spezifische und reversible Komplexebilden.
I Beteiligung der gemeinsamen molekularen Kräfte wie:I Van-der-Waals-Wechselwirkung,I elektrostatische Wechselwirkung,I Dipol-Dipol-Wechselwirkungen,I hydrophobe Wechselwirkungen undI Wasserstoff-Brücken-Bindungen.
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Was ist HPLC? Was ist das Besondere? Aufbau Auswertung Möglichkeiten & Varianten der HPLC Zusammenfassung
Normalphase, Umkehrphase, Größenausschluss-, Ionenaustausch- und Bioaffinitäts-Chromatographie
Elutions Möglichkeiten
Isokratische Trennung
I Zusammensetzung dermobilen Phase bleibtkonstant.
Gradiententrennung
I Zusammensetzung dermobilen Phase wirdwährend desTrennungsprozessesgeändert.
I 2. Pumpe und 2. Eluentwerden benötigt.
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Elutions Möglichkeiten
Isokratische Trennung
I Zusammensetzung dermobilen Phase bleibtkonstant.
Gradiententrennung
I Zusammensetzung dermobilen Phase wirdwährend desTrennungsprozessesgeändert.
I 2. Pumpe und 2. Eluentwerden benötigt.
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Normalphase, Umkehrphase, Größenausschluss-, Ionenaustausch- und Bioaffinitäts-Chromatographie
Elutions Möglichkeiten
Isokratische Trennung
I Zusammensetzung dermobilen Phase bleibtkonstant.
Gradiententrennung
I Zusammensetzung dermobilen Phase wirdwährend desTrennungsprozessesgeändert.
I 2. Pumpe und 2. Eluentwerden benötigt.
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HPLC
Was ist HPLC? Was ist das Besondere? Aufbau Auswertung Möglichkeiten & Varianten der HPLC Zusammenfassung
Zusammenfassung
I Die Chromatographie gehört zu den Verfahren, bei denenStoffgemische untersucht werden, indem man sie in ihreeinzelnen Bestandteile auftrennt.
I Basis der Auftrennung der Stoffe ist die unterschiedlicheVerteilung der Stoffe in zwei Phasen.
I Die mobile Phase (Flüssigkeit) bewegt sich an derI stationären Phase (Feststoff) vorbei und nimmt die Stoffe
dabei unterschiedlich schnell mit.I Bei der HPLC (allg. Säulen-Chromatographie) befindet
sich die stationäre Phase in einer Säule, durch die diemobile Phase fließt.
Nicolas Balcazar
HPLC
Was ist HPLC? Was ist das Besondere? Aufbau Auswertung Möglichkeiten & Varianten der HPLC Zusammenfassung
Zusammenfassung
I Die Chromatographie gehört zu den Verfahren, bei denenStoffgemische untersucht werden, indem man sie in ihreeinzelnen Bestandteile auftrennt.
I Basis der Auftrennung der Stoffe ist die unterschiedlicheVerteilung der Stoffe in zwei Phasen.
I Die mobile Phase (Flüssigkeit) bewegt sich an derI stationären Phase (Feststoff) vorbei und nimmt die Stoffe
dabei unterschiedlich schnell mit.I Bei der HPLC (allg. Säulen-Chromatographie) befindet
sich die stationäre Phase in einer Säule, durch die diemobile Phase fließt.
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HPLC
Was ist HPLC? Was ist das Besondere? Aufbau Auswertung Möglichkeiten & Varianten der HPLC Zusammenfassung
Zusammenfassung
I Die Chromatographie gehört zu den Verfahren, bei denenStoffgemische untersucht werden, indem man sie in ihreeinzelnen Bestandteile auftrennt.
I Basis der Auftrennung der Stoffe ist die unterschiedlicheVerteilung der Stoffe in zwei Phasen.
I Die mobile Phase (Flüssigkeit) bewegt sich an derI stationären Phase (Feststoff) vorbei und nimmt die Stoffe
dabei unterschiedlich schnell mit.I Bei der HPLC (allg. Säulen-Chromatographie) befindet
sich die stationäre Phase in einer Säule, durch die diemobile Phase fließt.
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Zusammenfassung
I Die Chromatographie gehört zu den Verfahren, bei denenStoffgemische untersucht werden, indem man sie in ihreeinzelnen Bestandteile auftrennt.
I Basis der Auftrennung der Stoffe ist die unterschiedlicheVerteilung der Stoffe in zwei Phasen.
I Die mobile Phase (Flüssigkeit) bewegt sich an derI stationären Phase (Feststoff) vorbei und nimmt die Stoffe
dabei unterschiedlich schnell mit.I Bei der HPLC (allg. Säulen-Chromatographie) befindet
sich die stationäre Phase in einer Säule, durch die diemobile Phase fließt.
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Was ist HPLC? Was ist das Besondere? Aufbau Auswertung Möglichkeiten & Varianten der HPLC Zusammenfassung
Zusammenfassung
I Die Chromatographie gehört zu den Verfahren, bei denenStoffgemische untersucht werden, indem man sie in ihreeinzelnen Bestandteile auftrennt.
I Basis der Auftrennung der Stoffe ist die unterschiedlicheVerteilung der Stoffe in zwei Phasen.
I Die mobile Phase (Flüssigkeit) bewegt sich an derI stationären Phase (Feststoff) vorbei und nimmt die Stoffe
dabei unterschiedlich schnell mit.I Bei der HPLC (allg. Säulen-Chromatographie) befindet
sich die stationäre Phase in einer Säule, durch die diemobile Phase fließt.
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HPLC
Anhang
Quellen
Michael W. Dong.Modern HPLC for Practicing Scientists.Wiley-Interscience; 1st edition (June 12, 2006).
M. Naczk, F. ShahidiPhenolics in cereals, fruits and vegetables: Occurrence,extraction and analysis.Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis, 41(2006) 1523–1542.
I www.med4you.at
I http://HPLCcourse.com
I http://www.LCresources.com/resources/getstart
Nicolas Balcazar
HPLC
Anhang
Fragen?
Nicolas Balcazar
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Anhang
Danke!
Nicolas Balcazar
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