الكروماتوجرافا ذات الطبقه الرققه (Thin Layer Chromatography)

TLC

دكتور وسف الشرك

جروماتوجراف الرققة الطبقة•Thin-Layer chromatography

بعضها عن المكونات لفصل الطرقة هذه تستخدم•

بالستك أو زجاج لوح على التقنة هذه نفذت•

ة او . بالستك

إمتصاصة مادة من رققة بطبقة تغطتهم تم•

( السلكا جل ) السلكا أوهالمة كالسلولوز

ة الطبقة هذه تمثل حث الثبات طور االمتصاص

.التجربة هذه ف المتحرك غر

المحلول وضع وتبعها على فصلها المراد العنه توضع•

حث الفصل عملة ف المتحرك الطور مثل الذي المذب

ة بفعل تحرك ة الخاص الت المادة لحركة ونظرا الشعر

. فصلها تم مختلفة بسرعات تحللها جري

كتحدد المجاالت من العدد ف التقنة هذه تستخدم•

التفاعالت ومراقبة ، البول ف األمنة األحماض مكونات

ة، ة المبدات عن والكشف العضو الغذاء ف الحشر

الذي األلاف ف الصباغات مكونات وتحلل ، والشراب

. ما مادة مكونات على والتعرف الشرع الطب ف لزم

الكروماتوجرافا اختبار البول بواسطة الرققهالطبقه ذات

وجود نعدم السلم اإلنسان ف الطبع الوضع •

.والبالزما البول ف األمنة األحماض

؟ األض ماهو•

.هو عملة تحول الغذاء إلى طاقة واستخدامها /األض•

الوحدات من األكبر الجزء بحرق قوم الجسم ان والمعروف•

.بالتحرك القام دون الحرارة

عضل بمجهود والقام العضالت تحرك القام وعند•

طاقة إلـــى تحتاج األجسام فإن راضة وتمارن

إضافة

.النشاط درجة بإختالف الطاقة هذه كمة وتختلف•

األساسة بالوظائفه للقام الطاقة إلى الجسم حتاج•

قوم حركة كل مع كل مع الطاقة الح الكائن حرق•

بها

من الطاقة الجسم بها حرق الت السرعة وإن•

ه األساسة الحوة بالوظائف القام أجل

.(األساس باألض)ماسمى

إهم العوامل المؤثرة على سرعة األض؟ومن هذه , هناك عوامل كثرة تحدد من خاللها سرعة األض

:العوامل التالة

.حجم الجسم وحجم العضالت فه1.

.العمر2.

الجنس 3.

.مستوى النشاط 4.

.حرارة الجسم والنخاع5.وغالا ماكون األض األساس أسرع لدى الشباب منه

.لدى المتقدمن ف السن

وعلى األشخاص الذن مارسون الراضة أكثر من 6. األشخاص الذن المارسون الراضة

دلل والبالزما البول ف األمنة األحماض ارتفاع فإن إذا • . مرضة حاالت وجود على

-: الناتجة األمراض بعض على امثلة•

األمن الحمض ارتفاع عن ناتج :كتوورا فنل -1• .األنن فنل

.سستن األمن الحمض عن ناتج: ورا سستن -2•

ف السابقن المرضن عن التجربة تجرى تجرى وسوف• عن الكشف طرق عن مرض لشخص بول عنة

.الكروماتوجراف بواسطة األمنة األحماض

•Maple syrup urine disease أجزاء تحلل ستطع ال فالجسم الجنات ف وراث خلل هو•

.األض عملة أثناء البروتن من عددة

مكونات استخدام ستطع ال المرض بهذا المصاب الشخص إن• واالزولوسن اللوسن وه (امنة أحماض ) البروتن من

تناوله ولكن والتطور للنمو هامة األحماض وهذه والفالن .الدم ف الكمائة المواد هذه تراكم حدث أن مكن بكثرة

ضرر حدث أن مكن المرض هذا من الحادة الحاالت أغلب ف• وارتفاع االلتهابات مثل .للدماغ إجهاد حدوث أثناء للدماغ .طول لوقت األكل عدم أو الحرارة، درجة

.عالج لم إن الشخص حاة هدد مرض وهو •

: أعراضه• أعراضه ومن .أام 4 إلى 3ب الوالدة بعد للموالد الظهور ف األعراض تبدأ•

رائحة ،والصرع الطعام تناول ف صعوبة الغبوبة، الطعام، عن االمتناع .والخمول ،والتقوء ممزة رائحة مثل الورا

: محتملة مضاعفات •

األعصاب ف ضرر ، الوفاة ، الغبوبة •

:واالختبارات التشخص•

• Plasma amino acid test

• amino acid test

(الدم ف مستواه ارتفاع ) الدم ف حموضة و البول ف الكتون ظهور•

:العالج• األطعمة كل ف المحددة الثالثة االمنة األحماض من المتناول تحدد1.

.بهم الخاصة الرضع لألطفال أغذة استخدام ، والمشروبات

جب مرتفع االمنة األحماض هذه من المستوى كان إذا2.

الطبة الوردة المحالل ببعض الحالة هذه ف التعامل

.الخاصة

والدهون الكربوهدرات من الناتجة الطاقة من الكفاة اخذ3.

األحماض هذه على الحتوائه الحلب من قللة كمات تناول4.

.األلبان ومنتجات والمكسرات اللحوم و البض تناول ومنع

:الوقاة

تارخ وجد إن الجدد للموالد المرض بهذا الخاصة التحالل بعمل

.المرض بهذا باإلصابة عائل

األض؟ تسرع عملة ف البدن النشاط أهمة•

انواع جمع ضمنه ومن ) البدن النشاط لعب

.األض تسرع عملة ف ومهما فعاال دورا (الراضة

زادة إلى ؤدي فإنه البدن بالنشاط القام فعند

الحرارة السعرات استهالك

وما ساعة نصف لمدة المش براضة القام جب•

الصغرة الوجبات وتناول المتوازن الغذاء تناول مع

مع وجبات، ثالث من بدال وما وجبات 7 إلى 5 من .السوائل من أكواب 8 شرب

التجربة هدف

.البول عنة ف األمنة األحماض تحدد1.

ف خلل نتجة الناتجه األمراض بعض على التعرف2.

.األمنة األحماض أض

الكروماتوجرافي

الثابتالوسط

(stationary phase)

مغطاة لوح زجاج عبارة عن

بطبقة رققة من السلكاجل تستخدم للفصل

المتحرك الوسط

Mobile phase

غرفة الكروماتوجراف

المذبعلى المحتوة

حركة بأتجاه ( المذاب) فصلها المراد المواد تتحرك•

الخاصة بواسطة أعلى الى (المتحرك الوسط) المذب .الشعرة

الكروماتوجراف بواسطة الفصل على المؤثرة العوامل•

المراد المادة تتجزأ:(solubility) الذوبان درجة-1•

.متحرك ووسط ثابت وسط بن عنها الكشف

المذب حركة باتجاه تتحرك فصلها المراد المادة•

زادت المذب ف فصلها المراد الماده ذوبان زاد كلما) .(طردة عالقة وهذه) ← (الفصل سرعة

(ion exchange effect) األون التبادل تأثر .2

المختلفة الشحنات بن أرتباط الى الثابت الوسط ف األونات تؤدي•

← الفصل سرعة من تقلل الى ؤدي وذلك فصلها المراد المادة ف .(عكسة عالقة)

بعض ذوبان درجة :(temperature) الحرارة درجة3.

عامل الحرارة ان أي الحرارة درجة بازداد تزداد المواد

.المواد بعض ذوبانة ف تحكم مهم

:molecular weight)) الجزئ الوزن4.

عملة على ؤثر فصلها المراد للمادة الجزئ الوزن•

.الفصل سرعة قلت الجزئ الوزن زاد فكلما الفصل

:(adsorption) االدمصاص5.

للوسط فصلها المراد المادة ادمصاص درجة زادة

تعاق سوف المذب حركة ان الى ؤدي الثابت

فصلها المراد المادة فصل سرعة ستقل بالتال

:المذب مكونات6.

المذبات بع ف وابانها درجة تكون المواد بعض

له المستخدم المذب فالخلط وعله األخرى من أكبر .الفصل عملة على تأثر

طرقة العملبواسطة القلم الرصاص خط بعد رسم 1.

رسم الخط بحذر )عن القاعدة سم 2 (حتى ال خدش السطح

نقاط المسافة بنهما 4حدد على الخط 2. بالتساوي

العنات بواسطة األنبوبة الشعرة تضع 3.عنة على النقطة بحث تكون كل

المحددة لها بحث ال تجاوز قطر العنة ملم 2

حجرة الكروماتجراف وضع اللوح ف 4. . دققة 60إلى 30لمدة من

من حجرة الكروماتوجرافخرج اللوح 5.

المذب سران نهاة لتحدد خط وضع6.

لتجف ترك7.

←) ننهدرن بكاشف رش8.(Ninhydrinبنفسجا لونا عط الذي.

لتجف ترك9.

م°110 حرارته درجة الفرن ف وضع10. دقائق خمس لمدة

ملونه كبقع األمنة األحماض تظهر11.

اللوح على العنات حركة انتهاء عند• RF النسب بالسران ماسمى قاس

(relative flow) .