Гистологические эффекты на дерму и подкожно-жировую клетчатку контролируемого охлаждения, применяемого совместно с вакуумной аспирацией

исследуемой зоны

•Адипоцитолизис, индуцированный охлаждением – новейший не инвазивный метод удаления подкожно- жировой ткани с клиническими доказательствами эффективности.

•На настоящий момент в мире совершено недостаточное количество исследований этого метода, поэтому механизм действия еще не полностью изучен.

Введение

Концепция

Технология индуцирующая адипоцитолизисс помощью охлаждения была разработана на базе двух научных находок:

1.Адипозная ткань более чувствительна к холоду, чем другие ткани (например, мышцы, нервы, кожа).

2.Существует возможность индуцировать запрограммированную гибель адипоцитов (Апоптоз) с помощью контролируемого охлаждения поверхности кожи.

История

С 60-х годов прошлого столетия проводятся исследования воздействия холода на жировую ткань.

Rotman H. Cold panniculitis in children. Adiponecrosis E frigore of Haxthausen. Arch Dermatol. 1966 Dec;94(6):720-1.

Duncan WC, Freeman RG, Heaton CL. Cold panniculitis. Arch Dermatol. 1966 Dec;94(6):722-4.

Epstein EH Jr, Oren ME. Popsicle panniculitis. N Engl J Med. 1970 Apr 23;282(17):966-7.

Rajkumar SV, Laude TA, Russo RM, Gururaj VJ. Popsicle panniculitis of the cheeks. A diagnostic entity caused by sucking on cold objects. Clin Pediatr (Phila). 1976 Jul;15(7):619-21.

Equestrian cold panniculitis in women. Beacham BE, Cooper PH, Buchan CS, Weary PE, Arch Dermatolo. 1980 Sep, 116(9): 1025-7.

Мишень воздействия

Подкожно-жировая клетчатка

Контролируемое селективное охлаждение жировой ткани охлаждающим воздействием через поверхности кожи

Постепенное охлаждение жировой ткани в течение определенного времени

Кристаллизация липидов адипоцита с воздействием на клеточную мембрану

Апоптоз жировых клеток

Вывод продуктов биодеградации жировых клеток лимфатической системой

Технология

Цель исследования

Оценка эффектов производимых контролируемым охлаждением совместнос применением вакуумной аспирациина подкожно-жировую клетчаткуна клеточном и гистологическом уровнях

(Гистологическое экспериментальное исследование на живой ткани)

Схема исследования

Материалы и методы1• Определение мишени воздействия• Выбор типа исследования (экспериментальное исследование на живой ткани) • Выбор метода исследования (Серия биопсий)

2•Подбор исследуемого животного (Sus Scrofa, hybrid race, Landrace-Duroc-Poland China)*

3•Получение разрешения на исследование в комитете исследований по эстетической медицине*

4•Процедура эксперимента

5•Анализ полученных образцов (патологоанатомические исследования )

6•Сравнение результатов

*При сотрудничестве с CLINOBS, Ветеринарные клинические исследования. ( www.clinobs.com)

Процедура 1

Material & Methods

Анестезия животного : Анестезирующие средства = Xylocaine (2 mg / kg) Maintenance = Tiletamine 3 mg + Zolazepam 3 mg

Проверка наличия и качества жировой ткани

Расположение защитной мембраны

Процедура 2

Материалы и методы

1. Установка манипулы

2. Начало процедуры

Время процедуры

70 минут

Интенсивность аспирации

210 Mbar

Температура - 8 ºC

COCCON, High Technology Products, Spain.

Параметры: Аппарат:

Анализ образцов

Материалы и методы

1.Забор биопсии (пункция – панч биопсия, 8 мм)Контрольные образцы биопсии брались на обрабатываемой зоне через 1 час, 4 дня и 17 дней после проведения процедуры

2.Анализ

Фиксация в формалине (3 %)Стандартная программа обработки образцовПолучение сегментов от 3 до 4 микронH&E окрашивание (Hemtaoxilina/Eosin)

3. Патолого-анатомическая оценка *

Эпидермис

Дерма

Жировая ткань

В сотрудничестве с •Dr: Carlos Barraco, Anatomic Pathology Department

Hospital del Mar, Barcelona. •Daniel Borras, veterinary Anatomic Pathology Unit,

Laboratorio Echavarne. Barcelona

Результаты Подкожно-жировая клетчатка

Контрольная 1 час 4 дня 17 дней• Подкожно-жировая

клетчатка• Средне-выраженная

неспецифическая реактивность ядер (увеличение ядер)

• Признаки воспаления: Воспалительный экссудат (преимущественно полиморфно-ядерный)

• Увеличение базофилии в образце

• Увеличение плотности клеток

• Увеличение моно-

нуклеарных клеток (гистоцитов)

• Увеличение клеточной активности в сосудистом эндотелии

• Фрагментация ядер адипоцитов с увеличением плотности ядер (признак апоптоза)

• Гиганские мультинуклеарные клетки с фагоцитозом адипоцитов. Структурные изменения адипозной ткани (маленькие и более фрагментированные адипоциты)

1 час после процедуры: •Mild nonspecific nuclear reactivity (enlarged nuclei) •Inflammatory exudate in the capillaries (predominantly polymorphonuclear)•Средне-выраженная неспецифическая реактивность ядер (увеличение ядер)

•Признаки воспаления : Воспалительный экссудат (преимущественно полиморфно-ядерный)

4 дня после процедуры •Increased basophilia of the sample•Higher cell density suggestive of an inflammatory process.

•Увеличение базофилии в образце

•Увеличение плотности клеток предположительно из за воспалительного процесса

4 дня после процедуры •Presence of mononuclear cells (histiocytes)•Increased cellular activity in vascular endothelium

•Увеличение моно-нуклеарных клеток (гистоцитов)•Увеличение клеточной активности в сосудистом эндотелии

17 дней после процедуры •Fragmentation of the nucleus of adipocytes with increasing density of the nucleus (apoptosis signs)•Фрагментация ядер адипоцитов с увеличением плотности ядер (признак апоптоза) •Гиганские мультинуклеарные клетки с фагоцитозом адипоцитов. Структурные изменения адипозной ткани (маленькие и более фрагментированные адипоциты)

•

17 дней после процедуры • Multinucleated giant cells with phagocytosis of adipocytes• Structural changes of adipose tissue (reduced size and more fragmented adipocytes)• Гигантские мультинуклеарные клетки с фагоцитозом адипоцитов.• Структурные изменения адипозной ткани (меньшего размера и более фрагментированные

адипоциты)•

Результаты

Эпидермис и дерма

Контрольная 1 час 4 дня 17 дней

Дерма и эпидермис Без значимых изменений Без значимых изменений Без значимых изменений

ВЫВОДЫ

• Наблюдаемые гистологические изменения показывают разрушение адипоцитов, которые коррелируются с данными клинических исследований, показывающих значимое уменьшение адипозной ткани.

• Гистологические характеристики воспаления окружающих тканей, наблюдаемого после процедуры позволяют предположить, что адипоциты утилизируются с помощью фагоцитоза без признаков повреждения дермы и эпидермиса

Экспертный коллектив

При участии:

•Dr. Mariano Velez, Department of Dermatology, Hospital del Mar in Barcelona.

•Dr. Carlos Barranco, Department of Anatomic pathology, Hospital del Mar in Barcelona.

•Daniel Borras, VeterinaryAnatomic Pathology unit, Laboratorio Echavarne. Barcelona

•Jaume Bosch, Clinic Unit, CLINOBS, Veterinary Clinical studies, Girona.

Компания выражает экспертному коллективу благодарность за сотрудничество и руководство.