Comment mettre en évidence la résistance aux dérivés d’artémisinine

SYLLA Malick Minkael MD

WANECAM-EDCTP-GUINEE

CNSR-Maferinyah

8ème édition du cours international sur le paludisme

À l’institut Pasteur de MadagascarÉdition 2011

Vendredi le, 08 Avril 2011

PLAN

1- Définition de la résistance des antipaludiques

2- Etats des lieux sur la résistance aux dérivés d’artémisinine

• Etude Cambodge occidental et Thaïlande du Nord-Ouest

Méthode et résultats

• Etude Cambodge occidental: Méthode et résultats

• Etude de Thai-Myanmar: Méthode et résultats

3- Discussions

Conclusion

1- Définition de la résistance

C’est la capacité du parasite à survivre et/ou à se multiplier en

dépit de l’administration et de l’absorption d’un médicament

donné à doses égales ou supérieures à celles habituellement

recommandées mais dans les limites de la tolérance du

malade.

Bruno Pradinesa,*, Jérôme Dormoia, Sébastien Briolanta, Hervé Bogreaua, Christophe

Rogiera: résistance aux antipaludiques. REVUE FRANCOPHONE DES LABORATOIRES - MAI

2010 - N°422

2- Etats des lieux sur la résistance aux dérivés d’artémisinine

les études de preuve de résistance aux dérivés d’artémisinine

Etude de Harald Noedl et alau Cambodge occidental

Méthodologie

Taille d’échantillon: 94 patients adultes dont

60 patients pour l’As à la dose de 4mg/kgp/jour

34 patients pour la quinine + tetracycicline

Criteres d’Inclusion: patient atteint de paludisme à Pf non compliqué avec une densité parasitaire de 100 à 100.000

parasites par microlitre

Temps de suivi: 28 jours

-Harald Noedl, M.D., Ph.D. : The New England Journal of Medicine;

december 11, 2008

Etude de Harald Noedl et al au Cambodge occidentalrésultats

Paramètres Artésunate

Récurence de la parasitémie

4 patients sur 60 entre J21 et J28

Résistance 2 cas

temps de clairence de la parasitémie prolongé

133h

concentration plasmatique Adequate après la 1ere dose

Persistance de la parasitémie 47,9% présentaient une persistance de la

parasitémie 48 heures après le debut du traitement

et 21,9% 72 heures après le debut du traitement

P=0,03

CI50 pour l’artemisinine(In vitro)

4 fois plus elevée que la moyenne géometrique

patients guéris (93,6%)

10 fois pour celle de la clone de reference W2

-Harald Noedl, M.D., Ph.D. : The New England Journal of Medicine;

december 11, 2008

Etude de Arjen M. Dondorp, M.D et Al: Cambodge occidental et Thaïlande du Nord-Ouest

Méthodologie:

• site d’étude: Cambodge occidental (Pailin) et Thaïlande du

Nord-Ouest (Wang Pha)

• C E; 80 patients dont 40 par site et 20 par bras

• Médicaments : AS orale donnée à la dose de 2mg/kgp/j

pendant 7js; AS orale donnée à la dose de 4mg/kgp/j

pendant 3js + Méfloquine à la dose de 15 mg/kgp J3 et 10mgp

J4

• Tests éffectués: in vivo et in vitro, réponse clinique et

parasitologique, la pharmacocinétique et les marqueurs

moléculaires de résistance

Arjen M. Dondorp, M.D. : Artemisinin Resistance in Plasmodium falciparum Malaria;

Th e new england journal o f medicine, n engl j med 361;5 nejm.org july 30, 2009

ResultatsRéponses cliniques et parasitologiques

Variables Wang Pha, Thailand

As As + Mq

Pailin, Cambodia

As As + Mq

P Value for Wang Phavs. Pailin

Artesunate

(N = 20)

Artesunate–

Mefloquine

(N = 20)

Artesunate

(N = 20)

Artesunate–

Mefloquine

(N = 20)

Parasite

clearance

time — hr

54 48 84 72 <0.001

Time to 50%

clearance of

parasite

density — hr

4 3 11 9 <0.001

Arjen M. Dondorp, M.D. : Artemisinin Resistance in Plasmodium falciparum

Malaria; Th e new england journal o f medicine; n engl j med 361;5 nejm.org july

30, 2009

ResultatsReponses cliniques et parasitologiques suite

Variables Wang Pha, Thailand

AS AS+MQ

Pailin, Cambodia

AS AS+MQ

P Value for Wang Phavs. Pailin

Time to 90% clearance of

parasite density — hr

12 11 23 21 <0.001

Recrudescence — no. (%) 2(10) 1(5) 6(30) 1(5) 0.09

Fever clearance— days 1 1 1 1 0.72

ETP 0 3 patients/40 (80%) P=0,20

EPT 2/20

(10%)

1/20

(50%)

J34

6/20 (30%)

J28

1/20

(50%) J49

0

Arjen M. Dondorp, M.D. : Artemisinin Resistance in Plasmodium falciparum Malaria; Th e new

england journal o f medicine; n engl j med 361;5 nejm.org july 30, 2009

Marqueurs moleculaires: Pfmdr1; Pfcrt; Pfserca

ResultatsSensibilité In Vitro

1,5

2,3

3,2 1,9

Arjen M. Dondorp, M.D. : Artemisinin Resistance in Plasmodium

falciparum Malaria; Th e new england journal o f medicine 30, 2009

Souche de reference 3D7= 2,7Souche de reference 3D7= 2,3

Paillin: 18 patients/40 contre

Wang pha: As=32patients/40 et 30 patients/40 pour As+Mq

Etude de Kesara à Thai-Myanmar

• Methodologie : 150 patients birmans (85 mâles et 65

femmes) âgé entre 16 et 50 ans, présence de paludisme non

complique à Pf, le bras de traitement était As=4mg/kgp et

Mq=15 mg/kgp pour J0 ;

• J2 : As=4mg/kgp et Mq=10mg/kgp ;

• J3 : As=4mg/kgp et Mq=0,6mg/kgp.

• La concentration plasmatique en médicament était

déterminée par la chromatographie liquide à haute

performance (HPLC) et la spectrométrie massive de

chromatographie liquide (LCMS), respectivement

Kesara et al: Na-Bangchang et al. Malaria Journal 2010, 9:273

Etude de Kesara Thai-Myanmarresultats

Parametres Valeurs

Recrudescence 34 cas entre J7 et J42

Taux d’éfficacité à J28 était respectivement pour les 2 sites 72.58 % et

83.06 % avec 95 % IC

clairance parasitaire et de la

fièvre

prolongée respectivement 32h et de 48h avec IC=95% ;

P<0.005

concentration plasmatique était basse après 1h de traitement 456 (215-875)

avec IC =95%

Kesara et al: Na-Bangchang et al. Malaria Journal 2010, 9:273

Discussion

• Etude de Harald Noedl et al montré un temps de clairance

prolongé pour les 2 cas de résistance à l’artemisinine. cette

résistance n’apparait pas comme un phénomène

épidémiologique répandu

• On note dans l’étude Arjen M. Dondorp et al, une réduction

de la susceptibilité à l’AS in vivo au Cambodge occidental par

rapport à la Thailande du nord-est. cette résistance est

caractérisée par une baisse de la clairance parasitaire in vivo

sans réduction conventionnelle de la susceptibilité in vitro

Arjen M. Dondorp, M.D. : Artemisinin Resistance in Plasmodium falciparum

Malaria; Th e new england journal o f medicine 30, 2009

-Harald Noedl, M.D., Ph.D. : The New England Journal of

Medicine; december 11, 2008

Discussion

• La sensibilité de 530 isolats de Pf de 3 pays ont été

investiguées avec les dérivés de l’artemisinine sur microtest

isotopique

• La CI50 de l’ Artemether élevée jusqu’à 117 et 45 nmol/L en

Guyane et au Sénégal

• Le S769N pfATPase6 mutants est noté exclusivement en

Guyane p<0.0001

.Par contre ce gène n’a pas été associé à la résistance in vivo à

l’artésunate à la frontière entre le Cambodge et la Thaïlande

Ronan Jambou MD et al: Resistance of Plasmodium falciparum The Lancet;3

December 2005

Conclusion

- Absence de marqueur moléculaire spécifique pour

l’artémisinine

- Nouveau défi à la recherche

- Mise en evidence de la resistance de l’artémisinine: test in

vivo et in vitro avec mesure réponse clinique et

parasitologique, pharmacocinétique et marqueurs

moléculaires spécifique

W. MBACHAM, N. NJIKAM: Med Trop 2007 ; 67 : 183-187

Réferences

1- Arjen M. Dondorp, M.D. : Artemisinin Resistance in Plasmodium falciparum Malaria; Th e new england journal o f medicine; n engl j med 361;5 nejm.org july 30, 2009

2- Bruno Pradinesa,*, Jérôme Dormoia, Sébastien Briolanta, Hervé Bogreaua, Christophe Rogiera: résistance aux antipaludiques. REVUE FRANCOPHONE DES LABORATOIRES - MAI 2010 -

N°422

3- Harald Noedl, M.D., Ph.D. Medical University of Vienna; A-1090 Vienna, Austriaharald.noedl@meduniwien.ac.at: The New England Journal of Medicine; n engl j med 359;24 www.nejm.org december 11, 2008

4- Ronan Jambou MD et al: Resistance of Plasmodium falciparum field isolates to in-vitro artemether and point mutations of the SERCA-type PfATPase6

The Lancet, Volume 366, Issue 9501, Pages 1960 - 1963, 3 December 2005

5- W. MBACHAM, N. NJIKAM: marqueurs moleculaires de résistance aux antipaludiques

Med Trop 2007 ; 67 : 183-187

6- Kesara Na-Bangchang1*, Ronnatrai Ruengweerayut2, Poonuch Mahamad1, KulayaRuengweerayut2,Wanna Chaijaroenkul1 : Declining in efficacy of a three-day combinationregimen of mefloquine-artesunate in a multi-drug resistance area along the Thai-Myanmar border Na-Bangchang et al. Malaria Journal 2010, 9:273

REMERCIEMENT:

Réseau International des Instituts Pasteur

Institut Pasteur de Madagascar

Partners du Cours International sur le Paludisme

Equipe d’Organisation du cours

Facilitateurs

Participants

Personnels de soutien