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PRUEBAS CRUZADAS
EQUIPO #1
El inmunólogo Karl Landsteiner descubrió que la sangre de dos personas podía ser "compatible" o
"incompatible"
Fueron introducidas por Hektoen en 1907 para detectar incompatibilidad ABO
Estos métodos se han utilizado desde entonces para elegir de forma confiable al donador.
La compatibilidad sanguínea es la posibilidad de mezcla de sangre sin que se produzcan
trastornos, tales como los fenómenos de la lisis o de la
aglutinación.
A causa de este fenómeno biológico en las transfusiones de
sangre no es suficiente con conocer que la sangre del donante
y la del receptor son del mismo grupo
Es una prueba inmunohematológica cuyo
principio es la hemaglutinación y su objetivo es evitar la
destrucción intravascular de los hematíes en un receptor.
Se basa en hacer reaccionar in vitro, en medio salino y
albuminoso, eritrocitos y plasma del donador y
receptor.
P.CR
UZA
DA MayorPrueba mayor Mezcla de
glóbulos rojos del donador con suero del receptor
MenorMezcla suero del donador
con glóbulos rojos del receptor
Autotestigo Eritrocitos del receptor más suero del receptor
Las reacciones antí geno-anti cuerpo pueden observarse invitro por:
• Hemólisis • Aglutinación
Asegurar que todos
los glóbulos rojos
transfundidos son
compatibles con los
anticuerpos en el plasma del paciente.
Evitar estimular la producción de nuevos anticuerpos contra los
glóbulos rojos en el receptor, especialmente
anti-Rh D.
Las pruebas cruzadas y la búsqueda de
anticuerpos son de suma importancia,
ya que nos ayudan a prevenir la
transfusión de sangre incompatible,
y proveen al paciente de máxima
seguridad y beneficio.
Prueba cruzada mayor:Incluye técnicas que permiten demostrar la ausencia de anticuerpos regulares e irregulares de importancia clínica en el suero del receptor contra eritrocitos del
donador.
Prueba cruzada menor:Detecta anticuerpos en el suero del receptor, particularmente cuando se
pretende transfundir sangre total proveniente de un donador con antecedentes propiciadores de
inmunización. (Embarazos o transfusiones previas).
Con estas pruebas podemos identificar fácilmente si la sangre es compatible y
segura.
3. El autotestigo: Contiene el suero y los eritrocitos del paciente (AT).
Las pruebas cruzadas se dividen en tres partes:
1. Prueba mayor: Contiene el suero del paciente y eritrocitos
del donador (D).
2. Prueba menor: Contiene el suero del donador y los
eritrocitos del paciente (R).
MATERIAL Y EQUIPO
• Tubos de 13 x 100 mm• Tubos de 10 x 75 mm• Solución salina isotónica
(0.9%)• Suero antiglobulina
humana (AGH, «suero de Coombs»)
• Albúmina bovina al 22%• Incubadora a 37°C• Centrífuga
MATERIAL biológico
Sangre del donador. Tomada
del segmento piloto de la bolsa de transfusión.
5 a 10 ml de sangre fresca del paciente (sin
anticoagulante).
Paso 1Realizar una suspensión de eritrocitos al 5% en
solución salina.
P D
Paso 2
Centrifugar 5 minutos a
3500 rpm los tubos y separar
completamente el suero //
plasma, de los eritrocitos del
coagulo.
P D
Fase 1 (Fase Salina)
+
-
At
Fase 1 (Fase Salina)
+
-
At
P D P D
Fase 1 (Fase Salina)
P D P D
+
-
At
Centrifugar un minuto.
Buscar presencia
de hemolisis o aglutinació
n.
FASE 2 (FASE ALBÚMINA)
+ - At
Centrifugar un minuto.
Buscar presencia
de hemolisis o aglutinació
n.
Fase 3 (Fase térmica)
Incubar 15 minutos.
+ - At
Fase 4 (De lavado)
+ - At
Fase 4 (De lavado)
Centrifugar un minuto.
Realizar 3 lavados a los eritrocitos.
Fase 4 (De lavado)
Decantar tras el último lavado.
-+ At
Fase 5
+ - At
Centrifugar un minuto.
Buscar presencia
de hemolisis o aglutinació
n.
PRUEBA POSITIVA:La aglutinación indica incompatibilidad ya que significa que algún Ac del suero del receptor se ha unido a los hematíes
del donante.La valoración se puede hacer con cruces, o bien se puede hacer una prueba cruzada titulada empleando diluciones
dobles progresivas.Para diferenciar aloAc de los autoAc se debe disponer de un autocontrol, y cuando éste es
negativo se sospecha la existencia de aloAc en una prueba cruzada
incompatible.Los Ac se deben identificar antes
de que el paciente reciba la transfusión.
Si el autocontrol es positivo se sospecha la presencia de autoAc.
Los aloAc producen reacciones transfusionales más graves que
los autoAc.
PRUEBA NEGATIVA:La prueba cruzada es compatible si no hay aglutinación, ya que indica que no existen aloAc eritrocitarios en el suero del receptor.No obstante hay que tener en cuenta que todas las pruebas de la antiglobulina negativas deben ser comprobadas para asegurar que la técnica se ha realizado correctamente. Para ello, se añaden hematíes sensibilizados y lavados (GR control) a todos los tubos que contienen resultado negativo.Si los resultados son correctos los hematíes control deben ser aglutinados. En cambio si no se observa aglutinación, la prueba no es válida y debe repetirse.