UNIVERSIDAD TÉCNICA DE MACHALA

FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS Y DE LA SALUD

CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA

LABORATORIO DE TOXICOLOGÍA

Profesor: Bioq. Farm. Carlos García MSc.Alumno: Khatherine Elizabeth Cayambe AvilesCurso: Quinto Paralelo: A Grupo N03Fecha de Elaboración de la Práctica: lunes 23 de junio del 2014 Fecha de Presentación de la Práctica: lunes 30 de junio del 2014

PRÁCTICA N° 4

Título de la Práctica: INTOXICACIÓN POR ETANOL

Animal de Experimentación: Cobayo

Vía de Administración: Vía Parenteral.

OBJETIVOS DE LA PRÁCTICA

Observar que sintomatología presenta el cobayo ante la intoxicación por Etanol.

Realizar las reacciones químicas correspondientes para verificar la presencia de Etanol.

MATERIALES:

Soporte de hierro Pinza de nuez Vaso de precipitación 250ml Matraz Erlenmeyer 250ml Equipo de decisión Bisturí Mangueras Balón de destilación Agitador Mechero de alcohol Tabla de disección Panema Cronometro

Jeringa de 10ml

1010

SUSTANCIAS: Agua destilada Cloruro de fenilhidracina 4 % Nitroprusiato de sodio 2,5 % Hidróxido de sodio (NaOH) 0.1N Leche Ácido sulfúrico concentrado (H2SO4) Cloruro férrico ( Cl3Fe ) Ácido clorhídrico (HCl) Hidróxido de potasio 12 % (KOH) K3Fe(CN)6

Formol Aceite mineral Ácido tartárico

Etanol

Probeta de 50ml Refrigerante Cinta de embalaje Aro de hierro Fosforo Piola Pipetas Pinza para tubos Funda plástica Perlas de vidrio Tubos de ensayos Mandil Mascarilla Guantes de látex

PROCEDIMIENTO

1. Desinfectar el área de trabajo y previamente tener todos los materiales a utilizarse limpios y secos.

2. Preparamos la solución problema 3. Administramos 10 ml. de etanol por vía peritoneal 4. Seguidamente se coloca el cobayo en el panema.5. Observar que sintomatología presenta el cobayo ante la intoxicación por metanol y

tomar en cuenta el tiempo en que muere.6. Una vez el cobayo muerto lo trasladamos a la taba de disección previamente se

coloca una funda sobre la tabla para evitar contaminación alguna7. Se debe cuidadosamente amarar sus extremidades con ayuda de unas piolas en

los extremos de la tabla para facilitar abrir al cobayo.8. Raspamos el área donde se realizara el corte y después con cuidado se procede

abrir el cobayo .9. Observamos detenidamente todos los órganos que han sido afectados por la

intoxicación del etanol.10. Colocando las vísceras afectadas, en un vaso de precipitación, procediendo a

picar lo más fino posible11. Añadimos un acidulante, previamente preparado (2 gr AC. Tartárico 2% +50ml

H2O destilada y agitamos) en la muestra (vísceras) y en matraz colocamos 20ml NaOH 0.1N en el cual se recogió los vapores de etanol, emitidos tras la destilación efectuada.

12. Se arma el equipo de destilación correctamente.13. Abrimos la llave para que empiece el proceso de destilación por 30 minutos14. Al terminar el proceso de destilación se procede a realizar las reacciones químicas

pertinentes para la detectar etanol.15. Una vez concluida la práctica se limpia y desinfecta la área donde se trabajó ya

que puede causar contaminación debido a restos que se hayan regado durante la práctica , dejar todos los materiales limpios y los reactivos empleados bien cerrados ,ordenados donde corresponde .

Reacciones de reconocimiento:

1. Reacción de Schiff:

A una pequeña porción de la muestra, se añade 1ml de permanganato de potasio al 1% después de mezclar se adiciona unas gotas de ácido sulfúrico puro, se deja reposar por tres minutos y agregan algunas gotas de solución saturada de ácido oxálico (hasta que decolore la mezcla); la mezcla adquiere un color madera que se decolora totalmente luego de agregarle nuevamente algunas gotas de ácido sulfúrico puro. Finalmente se le añade 1ml de fushina bisulfatada (Reactivo de Schiff), con lo cual se produce un intenso color violeta en caso de positivo.

2. Reacción de Rimini

A 5 ml de destilado se agregan 10 gotas de cloruro de fenilhidracina al 4 %, 4 gotas de solución de nitroprusiato de sodio al 2.5% recién preparado y 1ml de solución de hidróxido de sodio, se produce una coloración azul intensa.

3. Con la Fenilhidracina

En un medio fuertemente acidificado con ácido clorhídrico a una pequeña cantidad de muestra se agrega un pedacito de cloruro de fenil hidracina, 2-4 gotas de solución de ferricianuro de potasio al 5 – 10% y algunas gotas de hidróxido de potasio al 12% se obtiene una coloración rojo grosella.

5. Con el Ácido Cromotrópico

Con este ácido en un medio fuertemente acidificado con ácido sulfúrico, el formaldehido produce una coloración roja después de calentarla ligeramente.

6. Reacción de Hehner

Se mezcla una gota de destilado con algunos mililitros de leche, se estratifica con ácido sulfúrico concentrado al que se le han agregado trazas de cloruro férrico (5 gotas de cloruro férrico en 500ml de ácido sulfúrico); en caso positivo, en la zona de contacto se produce un color violeta o azul violeta

GRÁFICOS:

Preparación del EtanolColocación del CobayoEn el panema

Administración del etanol primera dosis

Colocación del cobayo en el panema una vez Adm. la

primera dosis

Administración del etanol segunda dosis

Colocación del cobayo en el panema una vez Adm. la 2da

dosis

REACCIONES DE RECONOCIMIENTO:

1) Reacción de Shiff:

Muerte del cobayo a los 26 minutos

Observación de los órganos afectados por el tóxico

Trituración de las vísceras, y acidulación con Ac. tartárico

Colocación de la mezcla en el balón de destilación

Armado del equipo de destilación

Preparación de cobayo en la tabla para la disección

Disección del animal con el bisturí

Proceder a la destilación durante 30 min.

Reacción Positivo característico violeta

2) Reacción de Rimini:

Reacción positivo característico azul intenso

3) Con la fenil hidracina:

1. Reacción positivo característico Coloración rojo grosella

4) Con el ácido cromotrópico:

Reacción positivo característico rojo

5) Reacción de Hehner:

Reacción positivo característico violeta

OBSERVACIONES

Hemos observado que al administrar Etanol ( 40ml) por vía intraperitoneal al cobayo, se presentaron las siguientes manifestaciones:

Inicio de administración Etanol (5ml): Fue 8:25 am. Presentando Convulsiones leves, respiración agitada, perdida de la movilidad motora.Segunda administración Etanol (5ml) : Fue 9:00 am Respiración lenta, parpadeos, inmovilidad en sus extremidades.Tercera dosis Etanol (5ml): Inmovilidad, convulsiones fuertesCuarta dosis Etanol (5ml): Fue 9:32am Respiración lenta, inmovilidad total en sus extremidades.Quinta dosis Etanol (5ml): Fue 9:54am Respiración lentaSexta dosis Etanol (5ml): Fue 10:13am Inmovilidad, hipoxiaDeceso: 10:25 am.Duracion: 2 horas

CONCLUSIONES

Mediante esta práctica observamos cuales son las manifestaciones que se presentan ante la administración del etanol en el cobayo, que órganos afecta el toxico, los cuales fueron: hinchazón del estómago, vesícula inflamada y el tiempo en que tardo en morir

que fue de 2 horas y mediante las reacciones de reconocimientos se identificó la presencia del toxico.

RECOMENDACIONES

Conocer y aplicar todas las normas de bioseguridad en el laboratorio para evitar posteriormente accidente alguno

Al momento de administrar la dosis realizarlo en la vía correcta, para evitar de esta manera provocar embolias.

Preparar correctamente los reactivos a la concentración requerida en la práctica y así mismo utilizar pipetas o bulbos para cada reactivo.

Culminada la práctica se debe dejar el área desinfectada, para evitar contaminación con las sustancias químicas utilizadas.

CUESTIONARIO:

 ¿Cuáles son las principales características del etanol?

El alcohol etílico o etanol es un alcohol que se presenta como un líquido incoloro e inflamable con un punto de ebullición de 78 °C. Al mezclarse con agua en cualquier proporción, da una mezcla azeotrópica. Es un líquido transparente e incoloro, con sabor a quemado y un olor agradable característico. Es conocido sencillamente con el nombre de alcohol. Su fórmula química es H3C-CH2-OH , principal producto de las bebidas alcohólicas. Es el alcohol que se encuentra en bebidas como la cerveza, la sidra, el vino y el brandy. Debido a su bajo punto de congelación, ha sido empleado como fluido en termómetros para medir temperaturas inferiores al punto de congelación del mercurio, -40 °C, y como anticongelante en radiadores de automóviles. Normalmente el etanol se concentra por destilación de disoluciones diluidas. El de uso comercial contiene un 95% en volumen de etanol y un 5% de agua. Ciertos agentes deshidratantes extraen el agua residual y producen etanol absoluto. El etanol tiene un punto de fusión de -114,1°C, un punto de ebullición de 78,5°C y una densidad relativa de 0,789 a 20°C.

¿Cuál es la Toxicología del etanol?

Impide la coordinación correcta de los miembros, pérdida temporal de la visión. Puede afectar al sistema nervioso central provocando mareos, somnolencia, confusión, estados de euforia, pérdida temporal de la visión. En ciertos casos se produce un incremento en la irritabilidad del sujeto intoxicado como también en la agresividad; en otra cierta cantidad de individuos se ve afectada la zona que controla los impulsos, volviéndose impulsivamente descontrolados y frenéticos. Finalmente, conduce al coma y puede provocar la muerte.

 ¿En quienes parece ser mayor la capacidad metabólica del etanol y de que depende?

La capacidad metabólica de bebedores habituales parece ser mayor que la de personas con un menor contacto con esta sustancia. Esta diferencia parece depender de una inducción del MEOS en los primeros, como respuesta a la presencia crónica de sustrato.

¿Por qué es posible determinar la concentración sérica de alcohol etílico por medio del aliento?

El etanol accede a los pulmones desde el torrente sanguíneo y se vaporiza en el aire a una velocidad constante, siendo por ello posible determinar la concentración sérica de este alcohol desde los niveles contenidos en el aire exhalado.

GLOSARIO:

Azeótropo (o mezcla azeotrópica) es una mezcla líquida de dos o más compuestos químicos que hierven a temperatura constante y que se comportan como si estuviesen formadas por un solo componente.Sidra.- Es una bebida alcohólica de baja graduación (desde menos del 3 % en vol. en el caso de la sidra doux francesa, hasta un máximo del 8 % en vol.) fabricada con el zumo fermentado de la manzana.Frenetico.- Que muestra una exaltación violenta del ánimo.Ácido cromotrópico.- Es   un compuesto orgánico de fórmula(HO)2C10H4(SO3H)2, un derivado do naftaleno dissulfonado e diidroxilado.Concentración sérica.- La concentración es aquella que una sustancia tiene en el suero sanguíneo de un individuo. si es 60% sería que 60 gramos de sustancia hay en 100 ml de plasma.Sustrato.- Es la superficie en la que una planta o un animal vive. El sustrato puede incluir materiales bióticos o abióticos. 

BIBLIOGRAFIA:

o Sousa G. Metanol y Etanol.2009. . (Consultado el 25 de junio del 2014).

Disponible: o http://profesores.fi-b.unam.mx/l3prof/Carpeta%20energ%EDa%20y

%20ambiente/MetanolEtanol.pdfo Cardona C. Simulación de los Procesos de obtención de Etanol a partir de caña

de azúcar y maíz.2000. (Consultado el 25 de junio del 2014). Disponible: http://revistas.utp.edu.co/index.php/revistaciencia/article/viewFile/6859/4011

FIRMAS DE RESPONSABILIDAD:

DAYSI AMBULUDI ____________________

KHATHERINE CAYAMBE ___________________

NELLY CEPEDA ____________________

ANEXOS

Toxico utilizado en la práctica (ETANOL)

Animal en el cual se experimentó ( Cobayo )