Genul Neisseria

Genul Neisseria

Definiţie; încadrare

Numele genului Neisseria Medicul german A.L.S.Neisser A descris germenul cauzator al

gonoreei

Definiţie; încadrare Genul Neisseria - speciile importante N. meningitidis (meningococul) N. gonorrhoeae (gonococul) Neisserii saprofite: N.lactamica; N.mucosa; N.flava; N.sicca;

N.subflava; N.cinerea; N.elongata; Flora normală tegumentară şi faringiană

Habitat

N. gonorrhoeae la nivelul mucoaselor genitale la

gazdele infectate N. meningitidis portajul nazal, faringian, rinofaringian sursa epidemică majoră punctul de plecare al meningitei

Habitat N.lactamica La 3-40% din persoanele sănătoase La nivel faringian sau nazal Mai frecvent la copii decât la adulţi Moraxella catarrhalis 40-50% din copiii de vârstă şcolară

sănătoşi Tract respirator superior

Implicaţii în patologie N. gonorrhoeae

Infecţii asimptomatice, manifeste şi complicate Localizări:la bărbat:uretrală,rectală,faringiană La femeie:endocervicală,anorectală, faringiană La fetiţe:vulvovaginală La nou –născut:conjunctivală Complicaţii:boala inflamatorie pelvină(salpingită,

metrită,pelviperitonită) Infecţie gonococică

diseminată(erupţie,artrite,tenosinovite,meningită,endocardită)

endoftalmită

Implicaţii în patologie

N. meningitidis Meningită cu forme clinice

benigne,moderate, severe( coagulare intravasculară diseminată

Meningită cu meningococ

Erupţie cutanată hemoragică

Conjunctivită gonococică

Uretrita gonococică: picătura matinală

Cervicită gonococică

Gonoree: leziuni cutanate

Caractere morfotinctoriale coci Gram-negativi reniformi feţele adiacente aplatizate aspect de boabă de cafea dispuşi în diplo, ocazional formează

tetrade imobili meningococ - structură capsulară

Caractere morfotinctoriale

Caractere morfotinctoriale

Caractere morfotinctoriale

Caractere morfotinctoriale

gonococ – uretrită–bărbat / Source Library: PHIL

Diagnosticul de laborator Produs patologic: Neisseria gonorrhoeae - secreţie uretrală, secreţie glande Bartholin, secreţie

vaginală, secreţie prostatică la femei se recoltează în timpul sau la sfârşitul ciclului

menstrual - secreţie faringiană - secreţie conjunctivală - urină Neisseria meningitidis - secreţie faringiană - sânge - LCR

Rezistenţa: foarte sensibili la temperatura camerei, la uscăciune => recoltarea şi însămânţarea se fac la patul bolnavului!!!

Examenul microscopic:

- coci Gram(-) sub formă de boabă de cafea, dispuşi diplo

- în infecţii acute se găsesc intracelular

- în infecţii cronice se găsesc intra şi extracelular

- coci gram (-), dispuşi diplo - sunt capsulaţi

Izolarea Izolarea: (sunt germeni foarte pretenţioşi) - se însămânţează imediat după recoltare - se încălzeşte mediul la 37 grade C - mediile de cultură utilizate: Geloză-

chocolat, PEIZER-STEFFEN, THAYER-MARTIN ,mediul HYL(selectiv prin colimicină, vancomicină)

- Incubarea se face cu CO2 obligatoriu 10% 24-48 ore la 37 grade C

Caractere de cultură strict aerobe medii de cultură îmbogăţite Gonococul - necesităţi nutritive mai mari meningococul poate cultiva şi pe geloză

sânge Neisseriile patogene nu cresc la

temperaturi sub 24 grade C spre deosebire de cele saprofite (test de diferenţiere)

Caractere de cultură Creşterea este influenţată negativ de uscăciune prezenţa acizilor graşi Temperatura optimă de incubare 35-37

grade C Atmosfera umedă suplimentată cu 3-10%

CO2 Coloniile apar în 24-48 de ore, mai rapid în cazul meningococului.

Caractere de cultură

Gonococul: colonii de tip S dimensiuni de 0,5-1 mm nepigmentate opace sau transparente

Caractere de cultură Mediul Thayer

Martin – inoculat cu secreţie cervicală– apar colonii mate date de flora normală şi colonii transparente de N. gonorrhoeae

Caractere de cultură

N. gonorrhoeae pe geloză-chocolat 24h/370C/10%CO2.

Caractere de cultură

Meningococul colonii de tip S dimensiuni de circa

1 mm transparente nepigmentate tulpinile încapsulate

(A, C) colonii de tip M

(mucoide)

N. meningitidis pe geloză-chocolat 24h/370C/10%CO2.

Caractere de cultură

Chocolate agar (Thayer-Martin agar) cu Neisseria meningitidis.

Caractere de cultură

Neisseria meningitidis on Chocolate Horse Blood Agar

Caractere de cultură

Neisseria meningitidis on Columbia Horse Blood Agar 

Identificarea

CMT (caractere morfotinctoriale)CC( caractere de cultură- col “S”

friabile, asemănătoare perlelorCaractere biochimiceCaractere antigenice

Identificarea:caractere biochimice Încadrarea în genul Neisseria: Testul oxidazei

oxidazo(+)=Neisseria Încadrarea în specie: - Testul de umflare a capsulei (+) N .meningitidis; se

stabileşte şi serogrupul acesteia Fermentarea zaharurilor: Gonococ Meningococ Neisserii

saprofite GLUCOZĂ + + + MALTOZĂ - + + ZAHAROZĂ - - + Sisteme comerciale:ex.API NH,

QuadFerm+,RIM,Minitek,Vitek 2 Compact (carduri de identificare NH)

Identificarea:caractere antigenice Meningococ Caractere antigenice:12 serotipuri

( structura lipooligozaharidului) Structura capsulară:13

serogrupuri( A,B,C,Y,W-135 Identificare direct prin produsul patologic

prin latex aglutinare, coaglutinare sau contraimunelectroforeză cu seruri polivalente anti-A,C,Y,W-135 sau monovalente anti-B;tehnici similare pentru identificarea din cultură

Identificarea:caractere antigenice Gonococ Caractere antigenice:6 serotipuri

( structura lipooligozaharidului);pot exprima simultan mai multe structuri antigenice diferite( centre de referinţă)

Identificare direct prin produsul patologic prin coaglutinare (suspensie de S.aureus tip Cowan I stabilizată si sensibilizată cu anticorpi monoclonali antiproteină I din membrana externă a gonococilor) sau printr-o tehnică imunoenzimatică( cu Ac policlonali)

Identificarea: tehnici de biologie moleculară

Apanajul laboratoarelor de referinţă

Antibiograma Obligatorie penicilina- antibioticul de elecţie în tratamentul infecţiei gonococice tulpini rezistente prin producere de β-lactamaze codificate plasmidic rezistenţă mediată cromozomal se extinde şi la tetracicline, eritromicină,

aminoglicozide necesitatea efectuării antibiogramei necesitatea tratamentului partenerilor sexuali

Antibiograma

În meningita cu meningococ penicilina G ceftriaxona cefotaximul Cloramfenicolul Rezistenţa la penicilină este rară