第三章 血型与输血（第三章 血型与输血（ 22 ））

魏彦刚魏彦刚

菏泽医学专科学校菏泽医学专科学校

三、三、 RhRh 血型系统血型系统RhRh 阳性：阳性：含含 DD 抗原抗原的红细胞的红细胞

RhRh 阴性：阴性：不含不含 DD 抗原抗原的红细胞的红细胞

汉族人中汉族人中 RhRh 阴性率阴性率﹤﹤ 1% 1%

（一）（一） RhRh 血型系统抗体血型系统抗体1. Rh1. Rh 抗体的产生抗体的产生

RhRh 抗体绝大多数是通过抗体绝大多数是通过 RhRh 血型不合输血或妊娠产生的免血型不合输血或妊娠产生的免疫性抗体，疫性抗体，这些抗体均为这些抗体均为 IgGIgG

2. Rh2. Rh 抗体的种类抗体的种类主要有主要有 55 种，即抗种，即抗 DD 、抗、抗 EE 、抗、抗 CC 、抗、抗 cc 、抗、抗ee ，最常见的是抗，最常见的是抗 DD ，凡被检红细胞和抗，凡被检红细胞和抗 DD 血血清凝集者为清凝集者为 RhRh 阳性，不凝集为阳性，不凝集为 RhRh 阴性阴性

3. Rh3. Rh 抗体的特性抗体的特性为免疫性抗体为免疫性抗体 IgGIgG

（二）（二） RhRh 血型鉴定方法及评价血型鉴定方法及评价1. 1. 酶介质法 酶介质法 分为直接酶介质法、间接酶介分为直接酶介质法、间接酶介

质法质法2. 2. 抗球蛋白试验（抗球蛋白试验（ Coombs testCoombs test ））

分为直接抗球蛋白试验（分为直接抗球蛋白试验（ DATDAT ）和间接抗球蛋白试验）和间接抗球蛋白试验（（ IATIAT ））

3. 3. 凝聚胺试验（凝聚胺试验（ polybrene testpolybrene test ） ） 4. 4. 人源盐水介质抗人源盐水介质抗 DD 试验 试验 (( 临床应用广泛临床应用广泛 )) 5. 5. 低离子强度（盐）溶液试验 低离子强度（盐）溶液试验

在酶处理下

IgG抗体可凝集 RBC

1. 酶介质法

1. 酶介质法

离心离心看结果看结果

阳阳性性

阴阴性性

37 37 ℃℃

37℃37℃水浴水浴 3030 分钟分钟

2. 抗球蛋白（ Coombs ）试验

DATDAT （直抗）（直抗） :: 直接检测红细胞表面有无不直接检测红细胞表面有无不完全抗体吸附的试验。完全抗体吸附的试验。

IATIAT （间抗）：通过体外致敏红细胞，再检（间抗）：通过体外致敏红细胞，再检测红细胞上有无不完全抗体吸附的试验。测红细胞上有无不完全抗体吸附的试验。

在盐水介质中在盐水介质中

IgMIgM 抗抗体凝集体凝集RBCRBC 示示

意图意图

在盐水介质中、 在盐水介质中、 IgGIgG 抗体抗体不凝集不凝集 RBCRBC

抗球蛋白

2. 抗球蛋白试验

3. 凝聚胺技术原理 原理

凝聚胺（凝聚胺（ PolybrenePolybrene ），一种高价），一种高价阳离子季胺盐多聚物，溶解后能产生很多阳离子季胺盐多聚物，溶解后能产生很多正电荷，可以中和红细胞表面的负电荷，正电荷，可以中和红细胞表面的负电荷，使红细胞之间距离减少，能引起正常红细使红细胞之间距离减少，能引起正常红细胞胞可逆性的非特异性可逆性的非特异性凝集。如果是凝集。如果是抗体致抗体致敏敏的红细胞被聚凝胺凝集，则凝集的红细胞被聚凝胺凝集，则凝集不可逆不可逆。。

在凝聚胺处理下

IgG抗体可凝集 RBC

4.4. 人源盐水介质试验人源盐水介质试验

原理：加入蛋白变性剂，使原理：加入蛋白变性剂，使 IgGIgG 抗抗 DD 抗体转抗体转变为类似大分子的“变为类似大分子的“ IgM”IgM” ，在盐水中发生，在盐水中发生肉眼可见的凝集反应。肉眼可见的凝集反应。

临床应用广范临床应用广范

5.LISS(5.LISS( 低离子强度溶液低离子强度溶液 )) 的原理的原理

抗原

非离子静电作用力

抗体

静电作用力 离子

抗原 抗

体

当溶液中离子增多时，抗原抗体之间的静电作用力减弱

当溶液中缺少离子时，抗原抗体之间的静电作用力较强

（三）（三） RhRh 血型鉴定的临床意义血型鉴定的临床意义1. 1. 输血前的检查 输血前的检查

2. 2. 新生儿溶血病诊断 新生儿溶血病诊断

3. 3. 协助治疗 协助治疗

医院坚持验血后输血 失血孕妇苦等医院坚持验血后输血 失血孕妇苦等 66小时逝去小时逝去

稀有血型孕妇董明霞在引产时出现大出血，稀有血型孕妇董明霞在引产时出现大出血，家属要求先输血救命并愿意承担一切后果，家属要求先输血救命并愿意承担一切后果，但医院坚持严格按照法律规定输血。经过但医院坚持严格按照法律规定输血。经过 66个多小时的焦虑等待，这位山东济阳的孕妇个多小时的焦虑等待，这位山东济阳的孕妇终于终于 99 日下午在山东大学齐鲁医院含恨死去。日下午在山东大学齐鲁医院含恨死去。（齐鲁晚报－ （齐鲁晚报－ 20082008 年年 1010 月月 1010 日） 日）

血液中心冷冻库提供的血液中心冷冻库提供的 44 个单位（个单位（ 800m800mll ）） RHRH 阴性阴性 OO 型血浆，每个单位按照常规型血浆，每个单位按照常规最快也要最快也要 33 个小时才能解冻，且不能满足需个小时才能解冻，且不能满足需要，只能临时从稀有血型志愿者中采集要，只能临时从稀有血型志愿者中采集 77 个个单位（单位（ 1400ml1400ml ）的血液，这样的血液又需）的血液，这样的血液又需要要 33 个小时的检验，待其筹足之时，抢救的个小时的检验，待其筹足之时，抢救的最佳时间已经过去 。最佳时间已经过去 。

尽管病人家属要求先输血救命并愿意承担一尽管病人家属要求先输血救命并愿意承担一切后果，但医院仍坚持严格按照法律规定等切后果，但医院仍坚持严格按照法律规定等到血液检验完毕才能输血。经过到血液检验完毕才能输血。经过 66 个多小时个多小时等待后，引产大出血的济阳患者董明霞最终等待后，引产大出血的济阳患者董明霞最终于于 99 日下午不幸去世 日下午不幸去世

一个省会所在的大医院，为什么自己不备有一个省会所在的大医院，为什么自己不备有RHRH 阴性阴性 OO 型等稀有血浆？为什么不建立稀型等稀有血浆？为什么不建立稀有血型志愿者队伍？在紧急情况下，为什么有血型志愿者队伍？在紧急情况下，为什么不及时组织稀有血志愿者紧急采集 ？不及时组织稀有血志愿者紧急采集 ？

四、红细胞血型系统交叉配血试验四、红细胞血型系统交叉配血试验

交叉配血试验的原理 交叉配血试验的原理

交叉配血试验中红细胞血型抗原与交叉配血试验中红细胞血型抗原与相应抗体的凝集反应，可用盐水配血相应抗体的凝集反应，可用盐水配血试验、酶介质试验 、抗球蛋白试验、试验、酶介质试验 、抗球蛋白试验、凝聚胺试验、低离子强度溶液试验及凝聚胺试验、低离子强度溶液试验及微柱凝胶试验进行观察。微柱凝胶试验进行观察。

盐水介质配血方法盐水介质配血方法

患者

献血者

主侧次侧

离心离心看结果看结果

阳阳性性

阴阴性性

交叉配血试验（盐水配血法）交叉配血试验（盐水配血法）原理 ：完全抗体分子链较长，在电解质学液中，能克原理 ：完全抗体分子链较长，在电解质学液中，能克服红细胞表面电荷排斥力，与相对应的抗原结合，使服红细胞表面电荷排斥力，与相对应的抗原结合，使红细胞凝集，从而发现配血不合，有对应抗原抗体存红细胞凝集，从而发现配血不合，有对应抗原抗体存在。在。

方法：方法：11 、自被检者静脉采血、自被检者静脉采血 2~32~3ml,ml, 分离血清，并配制分离血清，并配制 5%5%

红细胞悬液。红细胞悬液。22 、主侧：病人血清、主侧：病人血清 ++献血员红细胞献血员红细胞 次侧：献血员血清次侧：献血员血清 ++ 病人红细胞病人红细胞混匀，混匀， 10001000 转转 // 分，然后观察结果。分，然后观察结果。

报告方式报告方式：： 交叉配合试验（交叉配合试验（ **** 法）法）受血者受血者 ****** （（ ** ）型血清）型血清 +***+*** （（ ** ）型红细胞不凝集，无溶血。）型红细胞不凝集，无溶血。受血者受血者 ****** 红细胞红细胞 +***+*** 血清不凝集。无溶血血清不凝集。无溶血结果判断：结果判断： 同型配血，主侧、次侧均不凝集，表示无配血禁忌，可以同型配血，主侧、次侧均不凝集，表示无配血禁忌，可以

输血；异型配血时，主侧无凝集，无溶血，次侧凝集，但效输血；异型配血时，主侧无凝集，无溶血，次侧凝集，但效价价 <1<1 ：： 6464 ，无溶血，可以输给少量，如次侧不凝集时，应，无溶血，可以输给少量，如次侧不凝集时，应追查原因。追查原因。

大量交叉配血大量交叉配血

献血员之间应进行交叉配备献血员之间应进行交叉配备如：献如：献 11 血清血清 ++ 献献 22 红细胞红细胞 献献 11 红细胞红细胞 ++ 献献 22 血清血清

抗球蛋白配血方法抗球蛋白配血方法

患患者者

献献血血者者

主主侧侧次次侧侧

37 37 ℃℃

37℃37℃水浴水浴 3030 分钟分钟 三洗三洗

抗球蛋白方法配血方法抗球蛋白方法配血方法

加加抗抗球球蛋蛋白白

离心离心看结果看结果

阳阳性性

阴阴性性

酶介质配血方法酶介质配血方法

主次侧主次侧均加酶均加酶

患患者者

献献血血者者

主主侧侧次次侧侧

酶介质配血方法

离心离心看结果看结果

阳阳性性

阴阴性性

37 37 ℃℃

37℃37℃水浴水浴 3030 分钟分钟

凝聚胺技术

原 理 原 理 凝聚胺（凝聚胺（ PolybrenePolybrene ），一种高），一种高

价离子季胺盐多聚物，溶解后能产生很多正电价离子季胺盐多聚物，溶解后能产生很多正电荷，可以中和红细胞表面的负电荷，使红细胞荷，可以中和红细胞表面的负电荷，使红细胞之间距离减少，能引起之间距离减少，能引起正常正常红细胞红细胞可逆性可逆性的的非非特异性特异性凝集。如果是凝集。如果是抗体致敏抗体致敏的红细胞被聚凝的红细胞被聚凝胺凝集，则凝集胺凝集，则凝集不可逆不可逆。。

聚凝胺聚凝胺 (Polybrene)(Polybrene) 配血方法配血方法

患患者者

献献血血者者

主主侧侧次次侧侧

室温放置室温放置1 1 分钟分钟

主次侧均主次侧均加聚凝胺加聚凝胺

聚凝胺聚凝胺 (Polybrene)(Polybrene) 配血方配血方法法

离离心心 聚凝胺引起聚凝胺引起

红细胞非特红细胞非特异性凝集异性凝集

阳阳性性

阴阴性性

主次侧均主次侧均加重悬液加重悬液看结果看结果

基本操作方法基本操作方法11 、试管中加入待检血清或血浆、试管中加入待检血清或血浆 11 滴滴22 、加入用、加入用 LIMLIM 溶液配置的溶液配置的 2~32~3 的红细胞悬液的红细胞悬液 2~32~3 滴滴33 、摇匀，室温放置、摇匀，室温放置 11 分钟（时间长，效果好）分钟（时间长，效果好）44 、加聚凝胺试剂、加聚凝胺试剂 11 滴，混匀后滴，混匀后 3400rpm3400rpm 离心离心 1515 秒秒55 、轻摇观察由聚凝胺引起的红细胞非特异性凝集，、轻摇观察由聚凝胺引起的红细胞非特异性凝集，

若未见红细胞凝集则需重做试验若未见红细胞凝集则需重做试验66 、加入、加入 11 滴重悬液，轻摇观察结果滴重悬液，轻摇观察结果 由聚凝胺引起的非特异性凝集应在由聚凝胺引起的非特异性凝集应在 11 分钟内完分钟内完

全散开，若是由免疫抗体引起的凝集反应则不会散全散开，若是由免疫抗体引起的凝集反应则不会散开开

微柱凝胶介质配血法微柱凝胶介质配血法红细胞抗原与相应抗体在红细胞抗原与相应抗体在微柱凝胶介质微柱凝胶介质中发生凝集中发生凝集

发应 发应

凝胶试验使用的试剂和器材凝胶试验使用的试剂和器材

交叉配血试验的方法学评价交叉配血试验的方法学评价

方法 优点 缺点方法 优点 缺点盐水配血试验盐水配血试验 简单、快速 检不出简单、快速 检不出 IgGIgG 型抗体型抗体

酶介质试验酶介质试验 简便、经济 准确性、稳定性差简便、经济 准确性、稳定性差

抗球蛋白试验抗球蛋白试验 最准确最准确、可靠 复杂、费时、试剂贵、可靠 复杂、费时、试剂贵

凝聚胺试验凝聚胺试验 快速、准确 需特殊试剂及器材快速、准确 需特殊试剂及器材微柱凝胶试验 微柱凝胶试验 灵敏 成本高灵敏 成本高

交叉配血的质量保证交叉配血的质量保证

①① 检测前：检测前：标本、试剂及实验器材的要求标本、试剂及实验器材的要求

②② 检测中：检测中：工作态度严谨，高度责任感工作态度严谨，高度责任感

③③ 检测后：检测后：标本存放标本存放 77 天以上天以上

交叉配血的临床意义交叉配血的临床意义

① ① 保证输血安全保证输血安全② ② 发现亚型和不规则抗体 发现亚型和不规则抗体

第五节 新生儿溶血病第五节 新生儿溶血病

(( 一一 )ABO)ABO 新生儿溶血病新生儿溶血病 是由于母婴血型不合，母体的是由于母婴血型不合，母体的 IgGIgG 抗抗 A(B)A(B) 经过经过胎盘进入胎儿血循环破坏胎儿红细胞所引起。胎盘进入胎儿血循环破坏胎儿红细胞所引起。

ABOABO 溶血症溶血症

父母血型匹配，子女父母血型匹配，子女才能优生。才能优生。

如果父母血型不匹配如果父母血型不匹配，子女很可能得母婴，子女很可能得母婴血型不合血型不合溶血症溶血症。。

此种溶血症主要发此种溶血症主要发生在母亲为生在母亲为 OO 型型，婴儿为，婴儿为 AA 型或型或 BB型者。所以也叫型者。所以也叫ABOABO溶血症。溶血症。

(( 二二 ) Rh) Rh 血型引起的新生儿溶血血型引起的新生儿溶血

分娩 时胎儿 红细胞大量进入母体使母亲受到免疫分娩 时胎儿 红细胞大量进入母体使母亲受到免疫

HDN 的发病示意图

二、实验室检查（产前检查）二、实验室检查（产前检查）1. 1. 血型鉴定血型鉴定

2.2. 检查没亲血清中有无检查没亲血清中有无 IgGIgG 性质的抗体并检性质的抗体并检测其效价测其效价

3.3.羊水分析羊水分析

二、实验室检查 （患儿血标本检二、实验室检查 （患儿血标本检查）查）直接抗球蛋白试验直接抗球蛋白试验

红细胞抗体放散试验红细胞抗体放散试验 :: 与直接抗球蛋白相同，与直接抗球蛋白相同，也是检测新生儿红细胞上是否存在免疫抗体。也是检测新生儿红细胞上是否存在免疫抗体。

游离抗体试验游离抗体试验 :: 是检测新生儿血清中的血型抗是检测新生儿血清中的血型抗体。体。

三、新生儿溶血病治疗与预防三、新生儿溶血病治疗与预防

1.1. 药物治疗与血浆置换药物治疗与血浆置换2. 2. 提早分娩提早分娩3. 3. 宫内换血宫内换血4.4. 光照治疗与光照治疗与换血疗法换血疗法5.5. 预防预防

第六节 自动化血型分析技术第六节 自动化血型分析技术1.1.微柱凝胶法微柱凝胶法

2.2.微板法微板法 (( 血站较普及血站较普及 ))

3.3. 全自动血型分析仪检测法全自动血型分析仪检测法

小结小结本章节的重点内容是：本章节的重点内容是： ABOABO 血型亚型、血血型亚型、血

型的鉴定、交叉配血的方法及临床意义！型的鉴定、交叉配血的方法及临床意义！

一、名词解释一、名词解释血型 血型鉴正向定型 血型鉴反向定型 交叉配血试血型 血型鉴正向定型 血型鉴反向定型 交叉配血试

验验二、选择题二、选择题11 、、交叉配血时交叉配血时 ,,当血清和红细胞发生肉眼可见的凝集当血清和红细胞发生肉眼可见的凝集

反应反应 ,,则血清中的抗体是 则血清中的抗体是 A IgM B IgG A IgM B IgG

C IgE D C IgE D 以上均是 以上均是

课后练习课后练习

22 、、 ABOABO 新生儿溶血症可见于母亲为新生儿溶血症可见于母亲为 OO 型型 ,, 胎儿的血型可为胎儿的血型可为A AA A 型 型 B BB B 型 型 C AC A 型和型和 BB 型 型 D OD O 型型