高脂血症对小鼠睾丸超微结构的影响

前 言 随着环境及生活习惯的改变，男性不育症的发病率正逐年上升，

而且病因复杂。 迄今， 60% ～ 75% 的患者原因不明。

高胆固醇血症会影响睾丸功能，睾丸内精子细胞数量减少；

高脂血症很可能是男性不育症的病因之一 。

用高脂高胆固醇喂养的雄性小鼠，使雌性小鼠受孕的能力下降，胚胎植入和生育率也有降低。

本实验通过高脂饲料喂养 apolipoprotein E （ Apo E ） 基因敲除小鼠，观察其睾丸超微结构的变化特点，为探讨高脂血症对男性生殖功能的影响提供形态学依据。

目 的

材料与方法

1. 动物分组（ 12 只 C57BL/6J 雄性小鼠 ）

•对照组： 6 只野生型小鼠•实验组： 6 只 Apo E 基因敲除小鼠

2. 高脂血症模型的建立　•实验组小鼠喂饲高胆固醇饲料 ( 胆固醇 0.5% ，猪油 10% ，蛋黄粉 10% ，维持料 59.5% ，蔗糖20%) ，共 12 周；•对照组小鼠喂饲普通饲料，喂养 12 周。

3. 透射电镜标本制备 饲养 12 周后，将小鼠腹腔打开，取出睾丸组织，用双面刀片把样品切割成 1mm3 小块，置于 4℃的 2.5% 戊二醛溶液中固定过夜，常规冲洗后以 l% 锇酸后固定。在冲洗后用 50% 、 70% 、 90%和 100% 乙醇依次脱水，环氧树脂包埋，超薄切片，最后用醋酸铀及柠檬酸铅双重染色，在日产 JEM-1230 型透射电镜下，观察小鼠睾丸组织的超微结构变化特点，并摄片。

1. 血脂： 与正常组比较，高脂血症组血脂明显升高。

结 果

组 别 CHO LDD-C

对照组实验组

2.39±0.1534.86±1.30*

0.54±0.0312.28±3.59*

表 1 57BL/6J 小鼠血清中胆固醇和低密度脂蛋白浓度 (±s, mmol/L)

与正常组比较： *p＜ 0.05

2.1 生精细胞

图 1 对照组生精细胞核（★）、线粒体（△）及粗面内质网（↑）结构正常 ×15 000

图 2 实验组生精细胞线粒体空泡变性（△）、粗面内质网轻度扩张（↑）及异常结构（▲）×15 000

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2. 电镜：实验组小鼠睾丸内生精细胞、支持细胞、睾丸间质细胞、内皮细胞等超微结构呈现一系列病理变化。

2.2支持细胞

图 3 对照组支持细胞核（★）、线粒体（△）及粗面内质网（↑）结构正常 ×15 000

图 4 实验组支持细胞核（★）、线粒体空泡变性（△）、粗面内质网扩张（↑）、核膜外侧致密沉淀物（▲）及大空泡（☆） ×15 000

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2.3 生精小管基膜

图 5 对照组生精小管基膜（↑） ×20 000

图 6 实验组生精小管基膜厚薄不均，致密层明显增厚（↑） ×20 000

2.4 睾丸间质细胞

图 7 对照组睾丸间质细胞核（★）、线粒体（△）、滑面内质网（↑）及脂滴（▲） ×15 000

图 8 实验组小鼠睾丸间质细胞核（★）、线粒体减少，空泡状（△）及粗面内质网扩张（↑）×15 000

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2.5毛细血管

图 9 对照组睾丸间质毛细血管内皮细胞线粒体（△） ×20 000

图 10 实验组睾丸间质毛细血管内皮细胞线粒体空泡变性（△） ×20 000

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