การสงเคราะหและการศกษาสมบตทางชวภาพของไอโซควโนลนอลคาลอยด อะพอรฟนอลคาลอยด ออกโซอะพอรฟนอลคาลอยด และอลคาลอยดทเกยวของ

โดย

นางสาวชลธชา เปรมปรด

วทยานพนธนเปนสวนหนงของการศกษาตามหลกสตรปรญญาวทยาศาสตรมหาบณฑต สาขาวชาเคมอนทรย

ภาควชาเคม บณฑตวทยาลย มหาวทยาลยศลปากร

ปการศกษา 2556 ลขสทธของบณฑตวทยาลย มหาวทยาลยศลปากร

สำนกหอ

สมดกลาง

การสงเคราะหและการศกษาสมบตทางชวภาพของไอโซควโนลนอลคาลอยด อะพอรฟนอลคาลอยด ออกโซอะพอรฟนอลคาลอยด และอลคาลอยดทเกยวของ

โดย นางสาวชลธชา เปรมปรด

วทยานพนธนเปนสวนหนงของการศกษาตามหลกสตรปรญญาวทยาศาสตรมหาบณฑต สาขาวชาเคมอนทรย

ภาควชาเคม บณฑตวทยาลย มหาวทยาลยศลปากร

ปการศกษา 2556 ลขสทธของบณฑตวทยาลย มหาวทยาลยศลปากร

สำนกหอ

สมดกลาง

SYNTHESES AND BIOLOGICAL ACTIVITY STUDIES OF ISOQUINOLINE, APORPHINE, OXOAPORPHINE AND RELATED ALKALOIDS

By Miss Cholthicha Prempree

A Thesis Submitted in Partial Fulfillment of the Requirements for the Degree Master of Science Program in Organic Chemistry

Department of Chemistry Graduate School, Silpakorn University

Academic Year 2013 Copyright of Graduate School, Silpakorn University

สำนกหอ

สมดกลาง

บณฑตวทยาลย มหาวทยาลยศลปากร อนมตใหวทยานพนธเรอง “การสงเคราะหและการศกษาสมบตทางชวภาพของไอโซควโนลนอลคาลอยด อะพอรฟนอลคาลอยด ออกโซอะพอรฟนอลคาลอยด และอลคาลอยดทเกยวของ” เสนอโดย นางสาวชลธชา เปรมปรด เปนสวนหนงของการศกษาตามหลกสตรปรญญาวทยาศาสตรมหาบณฑต สาขาวชาเคมอนทรย

…….…….......................................................... (ผชวยศาสตราจารย ดร.ปานใจ ธารทศนวงศ)

คณบดบณฑตวทยาลย วนท..........เดอน.................... พ.ศ........... อาจารยทปรกษาวทยานพนธ ผชวยศาสตราจารย ดร.กนกอร ระยานล คณะกรรมการตรวจสอบวทยานพนธ .................................................... ประธานกรรมการ (อาจารย ดร.โอภา บางเจรญพรพงค) ............/......................../.............. .................................................... กรรมการ (รองศาสตราจารย ดร.วรชย พทธวงศ) ............/......................../.............. .................................................... กรรมการ (ผชวยศาสตราจารย ดร.กนกอร ระยานล) ............/......................../.............

สำนกหอ

สมดกลาง

ง

54302201: สาขาวชาเคมอนทรย ค าส าคญ : microwave-assisted direct arylation / อะพอรฟน / ฟแนนทรน / โฮโมอะพอรฟน /

azafluoranthene / piperazine-2,5-dione / biological activity ชลธชา เปรมปรด : การสงเคราะหและการศกษาสมบตทางชวภาพของไอโซควโนลนอลคาลอยด อะพอรฟนอลคาลอยด ออกโซอะพอรฟนอลคาลอยด และอลคาลอยดทเกยวของ. อาจารยทปรกษาวทยานพนธ : ผศ.ดร.กนกอร ระยานล. 192 หนา. อลคาลอยดทสงเคราะหขนในงานวจยนเปนกลมยอยของ isoquinoline alkaloids ประกอบไปดวย aporphine, phenanthrene, homoaporphine และ azafluoranthene alkaloids โดยท าการสงเคราะหอลคาลอยดทงหมด 20 ตว แบงเปนอลคาลอยดทพบในธรรมชาต 16 ตว และอลคาลอยดทไมพบในธรรมชาต 4 ตว ส าหรบความถกตองของโครงสรางของอลคาลอยดทพบในธรรมชาตทง 16 ตวทมผเสนอไวกอนหนานไดรบยนยนจากงานวจยน การสงเคราะหอลคาลอยดเหลานมขนตอนทส าคญคอ การปดวงแหวน C โดยอาศยปฏกรยา microwave-assisted direct biaryl coupling ซงใหปรมาณผลผลตทสง (71% - 96%) จากนนน าอลคาลอยดทสงเคราะหได 13 ตว ไปทดสอบฤทธตานจลชพ อลคาลอยด 4 ตวไปทดสอบฤทธตานเชอมาลาเรยและอลคาลอยด 17 ตวไปทดสอบการออกฤทธตานเซลลมะเรง 3 ชนด คอ เซลลมะเรงปอด (NCI-H187) เซลลมะเรงเตานม (MCF7) และเซลลมะเรงชองปาก (KB) พบวา uthongine (113) และ dehydrocrebanine (111b) มความสามารถในการตานเซลลมะเรงเตานมชนด MCF7 โดยมคา IC50 เทากบ 3.05 และ 10.34 μM ตามล าดบ ซงดกวา positive control ซงไดแก doxorubicin และ tamoxifen ทมคา IC50 เทากบ 15.23 และ 20.83 μM ตามล าดบ นอกจากนยงไดท าการสงเคราะหสารในกลม piperazine-2,5-diones โดยใชทงหมด 4 ขนตอน และมปฏกรยา aldol condensation เปนปฏกรยาส าคญ ไดท าการทดสอบฤทธตานการอกเสบ (anti-inflammatory activity) ของสารทสงเคราะหขนทงหมด 9 ตว พบวาสาร 199 และ 200 มความสามารถในการตานการอกเสบในระดบทด

ภาควชาเคม บณฑตวทยาลย มหาวทยาลยศลปากรลายมอชอนกศกษา........................................ ปการศกษา 2556ลายมอชออาจารยทปรกษาวทยานพนธ........................................

สำนกหอ

สมดกลาง

จ

54302201: MAJOR: ORGANIC CHEMISTRY KEY WORDS: MICROWAVE-ASSISTED DIRECT ARYLATION / APORPHINE /

PHENANTHRENE / HOMOAPORPHINE / AZAFLUORANTHENE / PIPERAZINE-2,5-DIONE / BIOLOGICAL ACTIVITY

CHOLTHICHA PREMPREE: SYNTHESES AND BIOLOGICAL ACTIVITY STUDIES OF ISOQUINOLINE, APORPHINE, OXOAPORPHINE AND RELATED ALKALOIDS. THESIS ADVISOR: ASSIST. PROF. KANOK-ON RAYANIL, Ph.D. 192 pp. Aporphine, phenanthrene, homoaporphine and azafluoranthene alkaloids are subgroups of isoquinoline alkaloids. We hereby report the syntheses of twenty alkaloids sixteen of which have been found in Nature and the remaining four alkaloids have not been found in Nature. The structures of these 16 naturally-occurring alkaloids have therefore been confirmed by our syntheses. The key step of the syntheses involved formation of the ring C by a microwave-assisted direct biaryl coupling cyclisation which was achieved in high yields (71%-96%). Thirteen alkaloids were tested for anti-bacterial activity, four alkaloids were tested for anti-malarial activity and seventeen alkaloids were tested for anti-cancer activity against three human cancer cell lines (NCI-H187, MCF7 and KB). Uthongine (113) and dehydrocrebanine (111b) were found to be more active against MCF7 (IC50 of 3.05 and 10.34 μM, respectively) compared with doxorubicin and tamoxifen (IC50 of 15.23 and 20.83 μM, respectively) which were used as positive controls. In addition we report the syntheses of piperazine-2,5-dione derivatives by varying the C-3 benzene substituents in order to evaluate their biological activities. Compounds 199 and 200 have been shown to possess anti-inflammatory activity. The syntheses of piperazine-2,5-dione derivatives were completed in four steps using the aldol condensation reaction as a key step.

Department of Chemistry Graduate School, Silpakorn University Student's signature........................................ Academic Year 2013 Thesis Advisor's signature........................................

สำนกหอ

สมดกลาง

ฉ

กตตกรรมประกาศ

ในการท าวจยครงนขาพเจาขอกราบขอบพระคณ ผศ. ดร. กนกอร ระยานล อาจารยทปรกษาวทยานพนธ ทไดกรณาใหโอกาส ใหค าปรกษา ใหค าแนะน าทงในดานการเรยนและการด าเนนชวต ตลอดจนตรวจทานและแกไขขอบกพรองตาง ๆ ในการท าวทยานพนธจนส าเรจลงไดอยางสมบรณ ขอขอบพระคณ อาจารย ดร.โอภา บางเจรญพรพงค ประธานกรรมการตรวจสอบวทยานพนธ และรองศาสตราจารย ดร.วรชย พทธวงศ กรรมการตรวจสอบวทยานพนธ ทไดกรณาใหค าแนะน าและตรวจทานแกไขขอบกพรองในวทยานพนธฉบบน ขอขอบพระคณ รองศาสตราจารย ดร. สรชย นมจรวฒน ทกรณาใหค าแนะน า ใหขอคด ตรวจทานและแกไขขอบกพรองตาง ๆ ตลอดจนความเมตตาในอกหลาย ๆ เรองจนท าใหการท าวทยานพนธประสบผลส าเรจ ขอขอบพระคณ อาจารย ดร.พลลภ คนธยงค ทกรณาใหค าแนะน าและตรวจทานแกไขขอบกพรองในวทยานพนธฉบบน ขอขอบคณ ผ แทนบณฑตวทยาลยทกรณาตรวจทาน ใหค าแนะน า และแกไขขอบกพรองของวทยานพนธใหมความสมบรณมากยงขน รวมทงเจาหนาทบณฑตวทยาลยทใหค าแนะน า ตลอดจนแจงขอมลขาวสารตาง ๆ ในระหวางการศกษาจนประสบผลส าเรจ ขอขอบคณ ภาควชาจลชววทยา คณะวทยาศาสตร มหาวทยาลยศลปากร ทชวยทดสอบฤทธตานการอกเสบและทดสอบฤทธตานจลชพ ขอบขอบคณ อาจารยและเจาหนาทภาควชาเคม คณะวทยาศาสตร มหาวทยาลยศลปากรรวมทงผเกยวของทกทาน ทกรณาใหความชวยเหลอและอ านวยความสะดวกในดานเครองมอ อปกรณ และสารเคม ตลอดจนค าแนะน าตาง ๆ ทเปนประโยชน สดทายขอกราบขอบพระคณ พอและแม รวมทงนองสาวทเปนก าลงใจ และใหการสนบสนนในทก ๆ เรองจนท าใหวทยานพนธฉบบนส าเรจลงดวยด

สำนกหอ

สมดกลาง

ช

สารบญ หนา บทคดยอภาษาไทย ……………………………………………………………………….. ง บทคดยอภาษาองกฤษ …………………………………………………………………..... จ กตตกรรมประกาศ ………………………………………………………………………… ฉ สารบญตาราง ……………………………………………………………………………... ญ สารบญรป ………………………………………………………………………………… ฏ สารบญแผนภาพ …………………………………………………………………………... ด บทท 1 การสงเคราะหและการศกษาสมบตทางชวภาพของอลคาลอยด ………………….... 1 1.1 บทน า ……………………………………………………………………... 1 1.2 ฤทธทางชวภาพของอลคาลอยด ………………………………………...… 3 1.3 โครงสรางและการจ าแนกประเภทของอลคาลอยด ……………………….. 9 1.4 ไอโซควโนลนอลคาลอยด (Isoquinoline alkaloids) …………………..….. 11 1.5 สารในกลม Isoquinoline alkaloids ……………………………………….. 12 1.5.1 Aporphine alkaloids ………………………………………………. 12 1.5.2 Phenanthrene alkaloids …………………………………………… 14 1.5.3 Homoaporphine alkaloids ………………………………………… 15 1.5.4 Azafluoranthene alkaloids ………………………………………... 16 1.6 งานวจยทเกยวของส าหรบการสงเคราะหอลคาลอยด ……………………. 17 1.6.1 Phenolic oxidative coupling/ nonphenol oxidative coupling …….. 17 1.6.2 Pschorr cyclisation ……………………………………………….. 19 1.6.3 Photochemical cyclisation ………………………………………... 21 1.6.4 Intramolecular arylation …………………………………………... 23 1.6.5 Radical cyclisation ………………………………………………... 24 1.6.6 Metalation-cross coupling ………………………………………... 25 1.6.7 Oxidative biaryl coupling ………………………………………… 26 1.6.8 Microwave-assisted direct biaryl coupling ……………….............. 27 1.7 แนวเหตผล ทฤษฎส าคญ และสมมตฐาน ……………………………........ 28 1.8 วตถประสงคของการวจย …………………………………………………. 29

สำนกหอ

สมดกลาง

ซ

หนา บทท 1.9 ผลการทดลองและวจารณผลการทดลอง………………………………….. 29 1.9.1 การสงเคราะห Phoebine (110a), Crebanine (110b) และ อลคาลอยดอนทเกยวของ ……………………………..................... 39 1.9.2 การสงเคราะห Dehydrophoebine (111a) และ Dehydrocrebanine (111b) …………………………………………. 44 1.9.3 การสงเคราะห Oxophoebine (112a'), Oxocrebanine (112b') และ Uthongine (113) ……………………………………………... 45 1.9.4 การสงเคราะห Thalihazine (115a), Secophoebine (115a'), 8-Methoxyuvariopsine (115b), Uvariopsamine (115c) และ Noruvariopsamine (115c') …………………………………… 46 1.9.5 การสงเคราะห 8-Hydroxystephenanthrine (118) …………………. 48 1.9.6 การสงเคราะห 11-Methoxylettowianthine (130) …………............. 48 1.9.7 การสงเคราะห Homoaporphine alkaloids ………………………… 50 1.9.8 การสงเคราะห Azafluoranthene alkaloids ………………………… 55 1.10 การทดสอบฤทธทางชวภาพของอลคาลอยดและการประเมนผล ……….. 59 1.11 บทสรป ………………………………………………………………….. 63 2 การสงเคราะหและการศกษาสมบตทางชวภาพของ Piperazine-2,5-dione derivatives ......................................................................................................... 65 2.1 บทน า ……………………………………………………………………... 65 2.2 การอกเสบ (Inframmatory) ……………………………………………….. 65 2.2.1 ยาตานการอกเสบชนดสเตยรอยด …………………………………. 66 2.2.2 ยาตานการอกเสบชนดไมใชสเตยรอยด …………………………… 66 2.3 โครงสรางของ Piperazinediones …………………………………………. 68 2.4 ฤทธทางชวภาพของ Piperazine-2,5-dione derivatives ………………....... 69 2.5 การสงเคราะห Piperazine-2,5-dione derivatives …………………………. 71 2.6 แนวเหตผล ทฤษฎส าคญ และสมมตฐาน ………………………………… 75 2.7 วตถประสงคของการวจย …………………………………………………. 75 2.8 ผลการทดลองและวจารณผลการทดลอง …………………………………. 75

สำนกหอ

สมดกลาง

ฌ

หนา บทท 2.9 การทดสอบฤทธตานการอกเสบและการประเมนผล …………………….. 78 2.10 บทสรป ……………………………………………………………......... 80 3 การทดลอง ………………………………………………………………………… 81 3.1 เครองมอและสารเคม …………………………………………………...... 81 3.2 การสงเคราะหอลคาลอยด (Alkaloids) ………………………………........ 81 3.3 การสงเคราะห Piperazine-2,5-dione derivatives ……………………........ 132 รายการอางอง ………………………………………………………………………........... 139 ภาคผนวก …………………………………………………………………………………. 148

ภาคผนวก ก ค ายอและสญลกษณ ……………………………………….…...... 149 ภาคผนวก ข Supporting information …………………………………….......... 154

ผลงานทเผยแพร ……………………………………………………………………........... 191 ประวตผวจย …………………………………………………………………………......... 192

สำนกหอ

สมดกลาง

ญ

สารบญตาราง ตารางท หนา 1.1 แสดงการสงเคราะห isoboldine (41) จาก reticuline (40) โดยใช oxidizing reagents ทหลากหลาย ……………………………………………………… 18 1.2 Photolysis ของ 1-(2-halophenyl)-3,4-dihydro-6,7-dimethoxyisoquinolines 73, 74 ……………………………………………………………………….. 23 1.3 แสดง PIFA-Mediated Oxidative Biaryl Coupling ………………………………. 26 1.4 Thermal และ microwave-assisted cyclisation ของ 99 …………………………... 27 1.5 แสดงการสงเคราะห homoaporphine โดยเกด microwave-assisted direct arylation …………………………………………………………….............. 52 1.6 แสดงการสงเคราะห azafluoranthene โดยเกด microwave-assisted direct arylation …………………………………………………………….............. 58 1.7 ตารางแสดงความเปนพษตอเซลลมะเรงชองปาก (oral cavity cancer-KB) เซลลมะเรงเตานม (breast cancer-MCF7) เซลลมะเรงปอด (small cell lung cancer-NCI-H187) และเชอมาลาเรย (anti-malaria; Plasmodium falciparum) ของอลคาลอยดทสงเคราะหได ในงานวจยน ………………………………………………………………… 61 1.8 ตารางแสดงฤทธตานจลชพ (antimicrobial activity) ของอลคาลอยด ทสงเคราะหได ……………………………………………………………… 63

สำนกหอ

สมดกลาง

ฎ

สารบญรป

รปท หนา

1.1 รปแสดงโครงสรางทางเคมของ atropine (1), ephedrine (2), strychnine (3) และแหลงของพชทพบอลคาลอยดเหลาน ………………………………....... 2 1.2 รปแสดงโครงสรางทางเคมของ morphine (4) และ ตนฝน (Papaver somniferum) ……………………………………………………… 2 1.3 รปแสดงโครงสรางทางเคมของ paclitaxel (5), vinblastine (6) และ vincristine (7) รวมทงตน Pacific Yew และ Catharanthus roseus N. Don ………………… 3 1.4 รปแสดงโครงสรางทางเคมของ tubocurarine (8) และ aconitine (9) …………...... 3 1.5 รปแสดงโครงสรางทางเคมของ liriodenine (10) และกระดงงา (Cananga odorata)………………………………………………………….. 4 1.6 รปแสดงโครงสรางทางเคมของ jatrorrhizine (11), magnoflorine (12) และ Mahonia aquifolium ………………………………………………………… 4 1.7 รปแสดงโครงสรางทางเคมของ boldine (13), apomorphine (14) และ peumus boldus ……………………………………………………………… 5 1.8 รปแสดงโครงสรางทางเคมของ bidebiline E (15), codamine (16), laudanidine (17) และตนกระเจยน (Polyalthia cerasoides)…………………. 6 1.9 รปแสดงโครงสรางทางเคมของ (R)-roemerine (18), N-methylasimilobine (19) และตนบวหลวง (Nelumbo nucifera) ………………………………………. 6 1.10 รปแสดงโครงสรางทางเคมของ norruffscine (20) และ Pericampylus glaucus ………………………………………………………. 7 1.11 รปแสดงโครงสรางทางเคมของ crebanine (21), dehydrocrebanine (22), oxostephanine (23), thailandine (24) และตนกระทอมเลอด (Stephania venosa)………………………………………………………….. 8 1.12 รปแสดงโครงสรางทางเคมของ aristololactam GII (25) และ Fissistigma oldhamii ……………………………………………………….. 8 1.13 รปแสดงโครงสรางพนฐานของ true alkaloids และตวอยางโครงสรางของ true alkaloids ไดแก nicotine (26), ergotamine (27) และ coniine (28) ……... 10 1.14 รปแสดงตวอยางโครงสรางของ protoalkaloids ไดแก mescaline (29), homoveratrylamine (30) และ tryamine (31) ……………………………….. 10

สำนกหอ

สมดกลาง

ฏ

รปท หนา

1.15 รปแสดงตวอยางโครงสรางของ polyamines alkaloids ไดแก putrescine (32), spermidine (33) และ spermine (34) ………………………………………... 10 1.16 รปแสดงตวอยางโครงสรางของ pseudoalkaloids ไดแก ephedrine (2), cathinone (35), solanidine (36) และ tomatidine (37) ………………………. 11 1.17 รปแสดงโครงสรางพนฐานของ isoquinoline, tetrahydroisoquinoline และ dihydroisoquinoline alkaloids ……………………………………………… 11 1.18 รปแสดงโครงสรางพนฐานของ aporphine alkaloids ……………………………. 12 1.19 รปแสดงโครงสรางพนฐานของ oxoaporphine และ dioxoaporphine alkaloids …. 13 1.20 รปแสดงโครงสรางพนฐานของ noraporphine และ quaternary aporphine salts alkaloids ……………………………………….. 13 1.21 รปแสดงตวอยางของ aporphine alkaloids ……………………………………….. 14 1.22 รปแสดงโครงสรางพนฐานของ phenanthrene alkaloids ………………………… 15 1.23 รปแสดงตวอยางของ phenanthrene alkaloids …………………………………….. 15 1.24 รปแสดงโครงสรางพนฐานของ homoaporphine alkaloids ……………………… 16 1.25 รปแสดงตวอยางของ homoaporphine alkaloids …………………………………. 16 1.26 รปแสดงโครงสรางพนฐานของ azafluoranthene alkaloids ……………………… 17 1.27 รปแสดงตวอยางของ azafluoranthene alkaloids …………………………………. 17 1.28 รปแสดงโครงสรางทางเคมของอลคาลอยดทสงเคราะหเลยนแบบธรรมชาต ……. 31 1.29 รปแสดงโครงสรางทางเคมของอลคาลอยดทสงเคราะหซงไมพบในธรรมชาต ….. 31 1.30 รปแสดงโครงสรางทางเคมของ phoebine (110a) และ Phoebe valeriana Standl. …………………………………………………… 32 1.31 รปแสดงใบและล าตนใตดนของตนสบเลอด (Stephania venosa (Blume) Spreng) และโครงสรางทางเคมของ crebanine (110b) ………………………………. 32 1.32 รปแสดงโครงสรางทางเคมของ dehydrophoebine (111a) ……………………….. 33 1.33 รปแสดงโครงสรางทางเคมของ dehydrocrebanine (111b) ………………………. 33 1.34 รปแสดงโครงสรางทางเคมของ oxophoebine (112a') รวมทงรปแสดง Xylopia aethiopica (ภาพ a) และ Aquilegia ecalcarata (ภาพ b) …………... 34 1.35 รปแสดงโครงสรางทางเคมของ oxocrebanine (112b') รวมทง Fissistigma glaucescens และ Artabotrys zeylanicus ……………………….. 34

สำนกหอ

สมดกลาง

ฐ

รปท หนา

1.36 รปแสดงโครงสรางทางเคมของ uthongine (113) และ Stephania venosa Spreng. …………………………………………………... 35 1.37 รปแสดงโครงสรางทางเคมของ thalihazine (115a) และ Thalictrum simplex …………………………………………………………. 35 1.38 รปแสดงโครงสรางทางเคมของ secophoebine …………………………………… 36 1.39 โครงสรางทางเคมของ 8-methoxyuvariopsine (115b) และ Uvariopsis guineensis ………………………………………………………. 36 1.40 รปแสดงโครงสรางทางเคมของ uvariopsamine (115c) และ Greenwayodendron oliveri ………………………………………………… 37 1.41 รปแสดงโครงสรางทางเคมของ noruvariopsamine (115c') ……………………… 37 1.42 รปแสดงโครงสรางของ 8-hydroxystephenanthrine (118) และ Monocyclanthus vignei ……………………………………………………... 38 1.43 รปแสดงโครงสรางทางเคมของ 11-methoxylettowianthine (130) และ อลคาลอยดในกลมของ telisatin-type ………………………………………. 38 1.44 รปแสดง Lettowianthus stellatus Diels ………………………………………….. 39 1.45 รปแสดงโครงสรางทางเคมของ triclisine (147) …………………………………. 39 1.46 รปแสดงโครงสรางทางเคมของ homoaporphine alkaloids ……………………… 51 1.47 รปแสดงโครงสรางทางเคมของ azafluoranthene alkaloids บางชนด ……………. 55 1.48 รปแสดงโครงสรางทางเคมของอลคาลอยดทน ามาทดสอบความเปนพษ ตอเซลลมะเรงและความเปนพษตอเชอมาลาเรยในมนษย (cytotoxic activities against human cancer cell lines and Plasmodium falciparum)…………………………………………………….. 60 2.1 รปแสดงโครงสรางทางเคมของ lansai C (151) และ lansai D (152) …………….. 65 2.2 รปแสดงโครงสรางทางเคมของยาในกลม steroidal anti-inflammatory drugs ไดแก prednisolone acetate (153) และ dexamethasone (154) ……………… 66 2.3 รปแสดงโครงสรางยาในกลม Nonselective NSAIDs ไดแก piroxicam (155), ibuprofen (156), aspirin (157), indometacin (158) และ diclofenac (159) …………………………………... 67 2.4 รปแสดงโครงสรางยาในกลม Selective NSAIDs เชน celecoxib (160) …………. 68

สำนกหอ

สมดกลาง

ฑ

รปท หนา

2.5 รปแสดงโครงสรางพนฐานของ piperazinediones ……………………………….. 69 2.6 รปแสดงโครงสรางทางเคมของ XR5118 (161) ………………………………….. 69 2.7 รปแสดงโครงสรางทางเคมของ plinabulin (162) ………………………………... 70 2.8 แสดงโครงสรางทางเคมของ gliocladride (163) …………………………………. 70 2.9 รปแสดงรากอากาศของตนไทร (Ficus benjamina) จากคณะวทยาศาสตร ม.ศลปากร วทยาเขตพระราชวงสนามจนทร จ. นครปฐม ………………….. 70 2.10 รปแสดงโครงสรางทางเคมของ lansai A-lansai D ………………………………. 71 2.11 รปแสดงโครงสรางทางเคมของ albonoursin (166) ……………………………… 71 2.12 แผนภมแสดงการสราง nitrite โดย murine leukaemic monocyte macrophage cells ซงถกกระตนเปนเวลา 24 ชวโมง ดวย LPS อยางเดยว (control) และ ดวยสารสงเคราะห 199, 200 ทความเขมขนตางๆ (1.25-5.00 μg/ml) พรอม ทงเปรยบเทยบกบยาทใชในปจจบน (indometacin) ………………………... 79 2.13 แผนภมแสดงการรอดของเซลลปกต (viability) ส าหรบ 199 และ 200 ………….. 79 ภาพผนวก ข.1 สเปกตรม 1H-NMR ของ Phoebine, 110a ……………………………... 155 ภาพผนวก ข.2 สเปกตรม 13C-NMR ของ Phoebine, 110a …………………………...... 155 ภาพผนวก ข.3 สเปกตรม 1H-NMR ของ Crebanine, 110b ……………………………. 156 ภาพผนวก ข.4 สเปกตรม 13C-NMR ของ Crebanine, 110b …………………………… 156 ภาพผนวก ข.5 สเปกตรม 1H-NMR ของ 1,2,8,9-Tetramethoxyaporphine, 110c ……... 157 ภาพผนวก ข.6 สเปกตรม 13C-NMR ของ 1,2,8,9-Tetramethoxyaporphine, 110c …….. 157 ภาพผนวก ข.7 สเปกตรม 1H-NMR ของ Norphoebine, 110a' ………………………... 158 ภาพผนวก ข.8 สเปกตรม 13C-NMR ของ Norphoebine, 110a' ……………………….. 158 ภาพผนวก ข.9 สเปกตรม 1H-NMR ของ Norcrebanine, 110b' ……………………….. 159 ภาพผนวก ข.10 สเปกตรม 13C-NMR ของ Norcrebanine, 110b' ………………………. 159 ภาพผนวก ข.11 สเปกตรม 1H-NMR ของ Dehydrophoebine, 111a ……………………. 160 ภาพผนวก ข.12 สเปกตรม 13C-NMR ของ Dehydrophoebine, 111a …………………… 160 ภาพผนวก ข.13 สเปกตรม 1H-NMR ของ Dehydrocrebanine, 111b ………………….... 161 ภาพผนวก ข.14 สเปกตรม 13C-NMR ของ Dehydrocrebanine, 111b …………………... 161 ภาพผนวก ข.15 สเปกตรม 1H-NMR ของ Oxophoebine, 112a' ………………………... 162 ภาพผนวก ข.16 สเปกตรม 13C-NMR ของ Oxophoebine, 112a' ……………………….. 162

สำนกหอ

สมดกลาง

ฒ

รปท หนา

ภาพผนวก ข.17 สเปกตรม 1H-NMR ของ Oxocrebanine, 112b' ……………………….. 163 ภาพผนวก ข.18 สเปกตรม 13C-NMR ของ Oxocrebanine, 112b' ………………………. 163 ภาพผนวก ข.19 สเปกตรม 1H-NMR ของ Uthongine, 113 ……………………………... 164 ภาพผนวก ข.20 สเปกตรม 13C-NMR ของ Uthongine, 113 …………………………….. 164 ภาพผนวก ข.21 สเปกตรม 1H-NMR ของ Thalihazine, 115a …………………………... 165 ภาพผนวก ข.22 สเปกตรม 13C-NMR ของ Thalihazine, 115a ………………………….. 165 ภาพผนวก ข.23 สเปกตรม 1H-NMR ของ 8-Methoxyuvariopsine, 115b ……………..... 166 ภาพผนวก ข.24 สเปกตรม 13C-NMR ของ 8-Methoxyuvariopsine, 115b ……………… 166 ภาพผนวก ข.25 สเปกตรม 1H-NMR ของ Uvariopsamine, 115c ……………………..... 167 ภาพผนวก ข.26 สเปกตรม 13C-NMR ของ Uvariopsamine, 115c ………………………. 167 ภาพผนวก ข.27 สเปกตรม 1H-NMR ของ Secophoebine, 115a' ……………………….. 168 ภาพผนวก ข.28 สเปกตรม 13C-NMR ของ Secophoebine, 115a' ………………………. 168 ภาพผนวก ข.29 สเปกตรม 1H-NMR ของ Noruvariopsamine, 115c' ………………....... 169 ภาพผนวก ข.30 สเปกตรม 13C-NMR ของ Noruvariopsamine, 115c' ………………….. 169 ภาพผนวก ข.31 สเปกตรม 1H-NMR ของ Fibrecisine, 116 …………………………...... 170 ภาพผนวก ข.32 สเปกตรม 13C-NMR ของ Fibrecisine, 116 …………………………..... 170 ภาพผนวก ข.33 สเปกตรม 1H-NMR ของ 8-hydroxystephenanthrine, 118 …………….. 171 ภาพผนวก ข.34 สเปกตรม 13C-NMR ของ 8-hydroxystephenanthrine, 118 ……............. 171 ภาพผนวก ข.35 สเปกตรม 1H-NMR ของ 11- methoxylettowianthrine, 130 …………... 172 ภาพผนวก ข.36 สเปกตรม 13C-NMR ของ 11- methoxylettowianthrine, 130 ………….. 172 ภาพผนวก ข.37 สเปกตรม 1H-NMR ของ Debromination, 137a ………………………. 173 ภาพผนวก ข.38 สเปกตรม 13C-NMR ของ Debromination, 137a ………………………. 173 ภาพผนวก ข.39 สเปกตรม 1H-NMR ของ Debromination, 139 ………………………… 174 ภาพผนวก ข.40 สเปกตรม 13C-NMR ของ Debromination, 139 ………………………... 174 ภาพผนวก ข.41 สเปกตรม 1H-NMR ของ Homonoraporphine, 140 ……………………. 175 ภาพผนวก ข.42 สเปกตรม 13C-NMR ของ Homonoraporphine, 140 …………………… 175 ภาพผนวก ข.43 สเปกตรม 1H-NMR ของ Homoaporphine, 141 ……………………….. 176 ภาพผนวก ข.44 สเปกตรม 13C-NMR ของ Homoaporphine, 141 ………………………. 176

สำนกหอ

สมดกลาง

ณ

รปท หนา

ภาพผนวก ข.45 สเปกตรม 1H-NMR ของ Triclisine, 147 ………………………………. 177 ภาพผนวก ข.46 สเปกตรม 13C-NMR ของ Triclisine, 147 ……………………………… 177 ภาพผนวก ข.47 สเปกตรม 1H-NMR ของ 2,3-Dihydrotriclisine, 148 ……….................. 178 ภาพผนวก ข.48 สเปกตรม 13C-NMR ของ 2,3-Dihydrotriclisine, 148 ………................. 178 ภาพผนวก ข.49 สเปกตรม 1H-NMR ของ Hydroxylation aldehyde, 150a ……………... 179 ภาพผนวก ข.50 สเปกตรม 13C-NMR ของ Hydroxylation aldehyde, 150a …………….. 179 ภาพผนวก ข.51 สเปกตรม 1H-NMR ของ Cyclisation ester, 150a ……………………... 180 ภาพผนวก ข.52 สเปกตรม 13C-NMR ของ Cyclisation ester, 150a …………………….. 180 ภาพผนวก ข.53 สเปกตรม 1H-NMR ของ Ketone, 150b ……………………………….. 181 ภาพผนวก ข.54 สเปกตรม 13C-NMR ของ Ketone, 150b ………………………………. 181 ภาพผนวก ข.55 สเปกตรม 1H-NMR ของ Lansai D derivatives, 193 …………………... 182 ภาพผนวก ข.56 สเปกตรม 13C-NMR ของ Lansai D derivatives, 193 ………………….. 182 ภาพผนวก ข.57 สเปกตรม 1H-NMR ของ Lansai D derivatives, 196 …………………... 183 ภาพผนวก ข.58 สเปกตรม 13C-NMR ของ Lansai D derivatives, 196 ………………….. 183 ภาพผนวก ข.59 สเปกตรม 1H-NMR ของ Lansai D derivatives, 197 …………………... 184 ภาพผนวก ข.60 สเปกตรม 13C-NMR ของ Lansai D derivatives, 197 ………………….. 184 ภาพผนวก ข.61 สเปกตรม 1H-NMR ของ Lansai D derivatives, 198 …………………... 185 ภาพผนวก ข.62 สเปกตรม 13C-NMR ของ Lansai D derivatives, 198 ………………….. 185 ภาพผนวก ข.63 สเปกตรม 1H-NMR ของ Lansai D derivatives, 199 …………………... 186 ภาพผนวก ข.64 สเปกตรม 13C-NMR ของ Lansai D derivatives, 199 ………………….. 186 ภาพผนวก ข.65 สเปกตรม 1H-NMR ของ Lansai D derivatives, 200 …………………... 187 ภาพผนวก ข.66 สเปกตรม 13C-NMR ของ Lansai D derivatives, 200 ………………….. 187 ภาพผนวก ข.67 สเปกตรม 1H-NMR ของ Lansai D derivatives, 201…………………… 188 ภาพผนวก ข.68 สเปกตรม 13C-NMR ของ Lansai D derivatives, 201 ………………….. 188 ภาพผนวก ข.69 สเปกตรม 1H-NMR ของ Lansai D derivatives, 202 …………………... 189 ภาพผนวก ข.70 สเปกตรม 13C-NMR ของ Lansai D derivatives, 202 ………………….. 189 ภาพผนวก ข.71 สเปกตรม 1H-NMR ของ Lansai D derivatives, 203 …………………... 190 ภาพผนวก ข.72 สเปกตรม 13C-NMR ของ Lansai D derivatives, 203 ………………….. 190

สำนกหอ

สมดกลาง

ด

สารบญแผนภาพ

แผนภาพท หนา

1.1 แสดงการสงเคราะห aporphine alkaloid โดยเกดผาน phenolic oxidation ………. 18 1.2 แสดงการสงเคราะห homoaporphine (43) ……………………………………….. 19 1.3 แสดงการสงเคราะห glaucine (50) ………………………………………………. 19 1.4 แสดงการสงเคราะห nuciferine (54) ……………………………………………... 20 1.5 แสดงการสงเคราะห imeluteine (58) …………………………………………….. 20 1.6 แสดงการสงเคราะห N,O-diacetylelmerrillicine (67) ……………………………. 21 1.7 แสดงการสงเคราะห nuciferine (54) โดยผาน photochemical cyclisation ……….. 21 1.8 แสดงการสงเคราะห dioxoaporphine (72) โดยเกดผาน photochemical cyclisation ………………………………………………….. 22 1.9 แสดงการสงเคราะห non-phenolic azafluoranthene alkaloid triclisine (77) ……... 22 1.10 แสดงการสงเคราะห (±)-aporphine (83) …………………………………………. 23 1.11 แสดงการสงเคราะห nornuciferine (89) และ nuciferine (54) ……………………. 24 1.12 แสดงการสงเคราะห 5-oxoaporphine (91) ……………………………………….. 25 1.13 แสดงการเกด hydrogenolysis product …………………………………………… 25 1.14 แสดงการสงเคราะห imeluteine (58) …………………………………………….. 26 1.15 แสดงการสงเคราะห 2-methyl-triclisine (98) ……………………………………. 27 1.16 แสดงการสงเคราะหอะพอรฟน (100) ……………………………………………. 28 1.17 แสดงการสงเคราะห acid chlorides 104c, 104d และ biaryl amides 105a-105d … 40 1.18 แสดงการสงเคราะห benzylisoquinoline alkaloids 108a-108d ………………….. 41 1.19 แสดงการสงเคราะห aporphine alkaloids (109a-109d) ………………………….. 43 1.20 แสดงการสงเคราะห aporphine (110a-110d) และ noraporphine (110a', 110b') ………………………………………………... 44 1.21 แสดงการสงเคราะห dehydroaporphines (111a และ 111b) ……………………… 45 1.22 แสดงการสงเคราะห oxoaporphine (112a' 112b') ……………………………….. 45 1.23 แสดงการสงเคราะห oxoaporphinium salts (113) ………………………………... 46 1.24 แสดงการสงเคราะห phenanthrene alkaloids 115a-115c' ………………………... 47 1.25 แสดงการสงเคราะห 8-hydroxystephenanthrine (118) …………………………... 48

สำนกหอ

สมดกลาง

ต

แผนภาพท หนา

1.26 แสดงการสงเคราะห 2-iodo-3-methoxyphenylacetic acid (126) ………………… 49 1.27 แสดงการสงเคราะห 11-methoxylettowianthine (130) …………………………... 50 1.28 แสดงการสงเคราะหสารตงตนส าหรบปฏกรยา cyclisation 135a-135e ………….. 52 1.29 แสดงการสงเคราะห 139 เพอยนยนโครงสราง 137b และ 137c (entry 6 7 8 และ 9) ………………………………………………………….. 54 1.30 แสดงการสงเคราะห homonantenine (141) ………………………………………. 55 1.31 แสดงการสงเคราะห triclisine (147) โดยวธของ Pannala และ Harding เปรยบเทยบกบวธตามงานวจยน ……………………………………………. 56 1.32 แสดงการสงเคราะห phenyltetrahydroisoquinoline intermediate 146 …………… 57 2.1 แสดงการสงเคราะห albonoursin (166) ………………………………………….. 72 2.2 แสดงการสงเคราะห (3Z,6Z)-1-N-methylalbonoursin (171) …………………….. 72 2.3 แสดงการสงเคราะห (3Z,6E)-1-N-methylalbonoursin (176) …………………….. 73 2.4 การสงเคราะห monoarylidene (178) โดยเกด simple condensation ……………... 73 2.5 แสดงการสงเคราะห diarylidene (179) โดยเกด double condensation …………… 73 2.6 แสดงการสงเคราะห 1,4-phenethylpiperazine-2,5-dione (181) ………………….. 74 2.7 แสดงการสงเคราะห 3-(aminomethyl)piperazine-2,5-dione (186) ………………. 74 2.8 แสดงการสงเคราะหอนพนธของ piperazine-2,5-diones โดยเกดผาน condensation ของ benzaldehyde กอน ……………………………………… 76 2.9 แสดงการสงเคราะหอนพนธของ piperazine-2,5-diones โดยเกดผาน condensation ของ isobutyraldehyde กอน ………………………………….. 77 2.10 แสดงการสงเคราะหอนพนธของ lansai D ……………………………………….. 78

สำนกหอ

สมดกลาง

1

บทท 1 การสงเคราะหและการศกษาสมบตทางชวภาพของอลคาลอยด

1.1 บทน า อลคาลอยด (alkaloids) จดเปนสารกลมใหญทพบมากในธรรมชาตโดยเฉพาะในพชชนสงตามสวนตางๆ ของพช เชน ใบ ดอก ผล เมลด รากและเปลอก แตพบนอยในพชชนต า สตว และจลนทรย ปจจบนพบอลคาลอยดมากกวา 10000 ชนด พบมากในพชวงศตนเปด หรอ วงศไมลนทม (Apocynaceae) วงศฝน (Papaveraceae) วงศถว (Papilionaceae) วงศเขม (Rubiaceae) วงศสม (Rutaceae) วงศบอระเพด (Menispermaceae) วงศอบเชย (Lauraceae) วงศมะเขอ (Solanaceae) วงศกนเกรา (Loganiaceae) วงศพชกนแมลง (Berberidaceae) วงศทานตะวน (Compositae) และ วงศวานสทศ (Amaryllidaceae) เปนตน [1] อลคาลอยดเปนสารอนทรยกลมทมไนโตรเจนอยในโครงสราง สวนใหญมคณสมบตเปนเบส บางชนดเปนกลางหรอเปนกรดขนอยกบจ านวนของไนโตรเจน ส าหรบการเรยกชอสารในกลมอลคาลอยดมวธการเรยกชอทไมเฉพาะเจาะจง สวนใหญเตมค าลงทาย (suffix) “-ine” ตอจากชอสปชส (species name) หรอชอสกล (genus name) ของพช ตวอยางเชน atropine (1) แยกมาจาก Atropa belladonna (Solanaceae), ephedrine (2) ไดมาจากตนมาฮวง (Ephedra equisetina Bunge) (Ephedraceae) และ strychnine (3) ไดมาจากเมลดของตน strychnine (Strychnos nux-vomica L.) (Loganiaceae) ดงรปท 1.1 เปนตน

Atropa belladonna

Ephedra equisetina Bunge

2

รปท 1.1 รปแสดงโครงสรางทางเคมของ atropine (1), ephedrine (2), strychnine (3) และแหลงของพชทพบอลคาลอยดเหลาน [2]-[4]

การศกษาอลคาลอยดเรมขนในศตวรรษท 19 จากรายงานพบวา ในป ค.ศ. 1804

Friedrich Sertürner นกเคมชาวเยอรมน สามารถแยกอลคาลอยดตวแรก คอ morphine (4) ไดจากตนฝน (Papaver somniferum) (Papaveraceae) ดงรปท 1.2 [5]

รปท 1.2 รปแสดงโครงสรางทางเคมของ morphine (4) และ ตนฝน (Papaver somniferum) ในชวงครงหลงของศตวรรษท 20 อลคาลอยดบางตวมความโดดเดนอยางมาก เชน Catharanthus alkaloids และ paclitaxel (5) อลคาลอยดทงสองตวนสามารถน ามาใชเปนยาในทางการแพทยได โดย Catharanthus alkaloids ไดมาจากตนแพงพวยฝรง (Catharanthus roseus N. Don) (Apocynaceae) อลคาลอยดในกลมนทส าคญไดแก vinblastine (6) และ vincristine (7) ใชเปนยารกษาโรคมะเรงอยในปจจบน สวน paclitaxel (5) สกดมาจากเปลอกและใบของตน Pacific Yew (Taxaceae) ดงรปท 1.3 แตในปจจบนสามารถสงเคราะหไดในหองปฏบตการ เปนยาทใชรกษาโรคมะเรงไดหลายชนด

Strychnos nux-vomica L.

ตนฝน (Papaver somniferum)

3

รปท 1.3 รปแสดงโครงสรางทางเคมของ paclitaxel (5), vinblastine (6) และ vincristine (7) รวมทงตน Pacific Yew และ Catharanthus roseus N. Don [6], [7]

1.2 ฤทธทางชวภาพของอลคาลอยด คนสมยโบราณน าสวนสกดจากราก เปลอก ใบ ดอก ผล หรอแมกระทงเมลดของพชทมสารจ าพวกอลคาลอยดมาใชเปนยารกษาโรคและสรางความผอนคลายใหกบรางกาย แตอลคาลอยดบางตวกเปนสารทมพษ เชน tubocurarine (8) และ aconitine (9) ซงถกน ามาใชท าลกศรพษตงแตสมยโบราณ ดงรปท 1.4

รปท 1.4 รปแสดงโครงสรางทางเคมของ tubocurarine (8) และ aconitine (9)

ตน Pacific Yew

Catharanthus roseus

4

ดงทไดกลาวมาแลววา อลคาลอยดหลายชนดมฤทธทางชวภาพทด มงานวจยทางเภสชวทยาหลายชน รายงานฤทธทางชวภาพของอลคาลอยดทมผลตอระบบอวยวะภายในรางกาย อาท ระบบหลอดเลอดหวใจ ระบบกลามเนอเรยบ และระบบสมอง ดงตวอยางตอไปน ป 1997 Woo และคณะ [8] รายงานการออกฤทธทางชวภาพของ liriodenine (10) ซงแยกมาจากตนกระดงงา (Cananga odorata) (Annonaceae) ดงรปท 1.5 พบวาสามารถยบย งการท างานของเอนไซม topoisomerase II ซงเปนเอนไซมทมบทบาทในการตดตอสาย DNA ในกระบวนการสงเคราะห DNA ท าใหวฏจกรเซลลหยดอยในระยะทเซลลเจรญเตบโต พรอมส าหรบการแบงเซลล (G2 phase) และ ระยะสราง DNA (S phase) จะเหนยวน าใหเซลลตายผานกระบวนการ apoptosis

รปท 1.5 รปแสดงโครงสรางทางเคมของ liriodenine (10) และกระดงงา (Cananga odorata) [9]

ป 2004 Ra ková และคณะ [10] ศกษาอลคาลอยดทแยกมาจาก Mahonia aquifolium (Berberidaceae) คอ jatrorrhizine (11) และ magnoflorine (12) ซงเปน hydroxylated alkaloids ดงรปท 1.6 พบวา สารทงสองตวมฤทธตานการเกดอนมลอสระ (antiradical activity) และตานการเกดปฏกรยาออกซเดชน (antioxidant activity)

รปท 1.6 รปแสดงโครงสรางทางเคมของ jatrorrhizine (11), magnoflorine (12) และ Mahonia aquifolium [11]

Cananga odorata

Mahonia aquifolium

5

ป 2005 Leclercq และคณะ [12] รายงานฤทธทางชวภาพของ boldine (13) และ apomorphine (14) ดงรปท 1.7 ซงปจจบนทงสองตวนเปนยาทสามารถซอไดตามทองตลาด โดย boldine (13) แยกไดจากสวนใบและเปลอกของ peumus boldus (Monimiaceae) พบวามคณสมบตทดในการตานการเกดปฏกรยาออกซเดชน (antioxidant activity) และเพมปรมาณการหลงน าด สวน apomorphine (14) น ามาใชในการรกษาโรคพารกนสน (Parkinson’s disease) และรกษาโรคเสอมสมรรถภาพทางเพศในผชาย

รปท 1.7 รปแสดงโครงสรางทางเคมของ boldine (13), apomorphine (14) และ peumus boldus [13]

ป 2007 Kanokmedhakul และคณะ [14] รายงานการแยก dimeric aporphine alkaloid ไดแก bidebiline E (15) และ isoquinoline alkaloids 2 ตว ไดแก codamine (16) และ laudanidine (17) จากสวนรากของตนกระเจยน (Polyalthia cerasoides) (Annonaceae) ดงรปท 1.8 พบฤทธตานเชอทกอใหเกดโรคมาลาเรย (Plasmodium falciparum) ใน bidebiline E (15), codamine (16) และ laudanidine (17) มคา IC50 เทากบ 4.2, 4.2 และ 7.0 μg/mL ตามล าดบ นอกจากนยงพบฤทธตานเชอทกอใหเกดวณโรค (Mycobacterium tuberculosis) ใน bidebiline E (15) โดยมคา IC50 เทากบ 6.25 μg/mL ดวย

peumus boldus

6

รปท 1.8 รปแสดงโครงสรางทางเคมของ bidebiline E (15), codamine (16), laudanidine (17) และตนกระเจยน (Polyalthia cerasoides) [15]

ป 2008 Khan และคณะ [16] รายงานการออกฤทธตานเชอมาลาเรย (antimalarial activity) ของ (R)-roemerine (18) และ N-methylasimilobine (19) มคา IC50 เทากบ 0.2 และ 4.8

μg/mL ตามล าดบ รวมถงฤทธตานเชอรา (antifungal activity) ของ (R)-roemerine (18) ซงแยกไดจากใบของตนบวหลวง (Nelumbo nucifera) (Nelumbonaceae) มคา IC50 เทากบ 4.5 μg/mL และมคา MIC เทากบ 10 μg/mL ดงรปท 1.9

รปท 1.9 รปแสดงโครงสรางทางเคมของ (R)-roemerine (18), N-methylasimilobine (19) และตนบวหลวง (Nelumbo nucifera) [17]

ในปเดยวกน Chen และคณะ [18] รายงานฤทธทางชวภาพของ norruffscine (20) ซงเปน azafluoranthene alkaloid ดงรปท 1.10 ทสามารถแยกไดจากสวนเหนอดน (aerial parts) ของ Pericampylus glaucus (Menispermaceae) พบวาสามารถยบย งเชอ HIV-1 (anti-human immunodeficiency virus-1 activity) ไดโดยมคา EC50 เทากบ 10.9 μM

Polyalthia cerasoides

Nelumbo nucifera

7

รปท 1.10 รปแสดงโครงสรางทางเคมของ norruffscine (20) และ Pericampylus glaucus [19]

ป 2011 Techasakul และคณะ [20] รายงานการออกฤทธทางชวภาพของ aporphine alkaloids ทส าคญ 4 ตว คอ crebanine (21), dehydrocrebanine (22), oxostephanine (23) และ thailandine (24) ซงถกแยกมาจากสวนหวและใบของตนกระทอมเลอด (Stephania venosa) (Menispermaceae) ดงรปท 1.11 พบวามฤทธยบย งการเจรญเตบโตของเซลลมะเรงไดหลายชนด ดงน

Dehydrocrebanine (22) มฤทธยบย งเซลลมะเรงเมดเลอดขาว (promyelocytic leukemia cells, HL-60) เซลลมะเรงเมดเลอดขาวลมโฟบลาสตคชนดเฉยบพลน (acute lymphoblastic leukemia cells, MOLT-3) เซลลมะเรงทอน าด (cholangiocarcinoma cells, HuCCA-1) และ เซลลมะเรงเตานม (breast cancer cells, BC) มคา IC50 เทากบ 2.14, 3.50, 2.95 และ 3.05 μg/mL ตามล าดบ

Oxostephanine (23) มฤทธยบย งเซลลมะเรงเตานม (breast cancer cells, BC) เซลลมะเรงชองปาก (human epidermoid carcinoma in the mouth cells, KB) เซลลมะเรงตบ (hepatocarcinoma cells, HepG2) เซลลมะเรงเมดเลอดขาว (promyelocytic leukemia cells, HL-60) และเซลลมะเรงเมดเลอดขาวลมโฟบลาสตคชนดเฉยบพลน (acute lymphoblastic leukemia cells, MOLT-3) มคา IC50 เทากบ 0.24, 1.65, 1.73, 2.05 และ 0.71 μg/mL ตามล าดบ

Thailandine (24) มฤทธยบย งเซลลมะเรงปอด (lung carcinoma cells, A549) เซลลมะเรงชองปาก (human epidermoid carcinoma in the mouth cells, KB) เซลลมะเรงเมดเลอดขาว (promyelocytic leukemia cells, HL-60) และเซลลมะเรงเมดเลอดขาวลมโฟบลาสตคชนดเฉยบพลน (acute lymphoblastic leukemia cells, MOLT-3) มคา IC50 เทากบ 0.30, 0.88, 2.58 และ 1.37 μg/mL ตามล าดบ

Pericampylus glaucus

8

สวน crebanine (21) มฤทธยบย งการเจรญเตบโตของเซลลมะเรงในระดบทนอย มคา IC50 อยในชวง 15.00-47.50 μg/mL

รปท 1.11 รปแสดงโครงสรางทางเคมของ crebanine (21), dehydrocrebanine (22), oxostephanine (23), thailandine (24) และตนกระทอมเลอด (Stephania venosa)

ป 2013 Komatsu และคณะ [21] รายงานฤทธตานการอกเสบ (anti-inflammatory activity) ในระดบปานกลางของ aristololactam GII (25) ทแยกมาจากล าตนของ Fissistigma oldhamii (Annonaceae) ดงรปท 1.12 มคา IC50 เทากบ 18.98 μg/mL

รปท 1.12 รปแสดงโครงสรางทางเคมของ aristololactam GII (25) และ Fissistigma oldhamii [22]

Stephania venosa

Fissistigma oldhamii

9

1.3 โครงสรางและการจ าแนกประเภทของอลคาลอยด เมอเปรยบเทยบอลคาลอยดกบสารประกอบทางธรรมชาตกลมอนๆจะเหนวาอลคา

ลอยดมความหลากหลายทางโครงสรางทโดดเดน โดยโครงสรางของอลคาลอยดนอกจากมอะตอมของธาตคารบอน ไฮโดรเจน และไนโตรเจนแลว อาจมออกซเจน ก ามะถน และธาตอนๆ เชน คลอรน โบรมน และฟอสฟอรส รวมอยดวย ท าใหสามารถแบงอลคาลอยดตามโครงสรางทางเคมไดดงน True alkaloids เปนอลคาลอยดทมไนโตรเจนเปนสวนหนงของวง (heterocyclic alkaloids) และโครงสรางเกดมาจากกรดอะมโน (amino acid) เชน nicotine (26) นอกจากนยงรวมถงอลคาลอยดบางชนดทมองคประกอบของเพปไทด (peptide) เชน ergotamine (27) แตมขอยกเวนส าหรบบางชนดทไมไดมาจากกรดอะมโนแตกจดอยในกลมน เชน piperadine alkaloids ไดแก coniine (28) ดงรปท 1.13

โครงสรางพนฐานของ true alkaloids

Pyrrolidine Imidazole Oxazole Thiazole

Piperidine Quinolizidine Indolizidine Pyrrolizidine

Acridine Pyridine Purine Tropane

Quinoline Isoquinoline Quinazoline Indole

10

รปท 1.13 รปแสดงโครงสรางพนฐานของ true alkaloids และตวอยางโครงสรางของ true alkaloids ไดแก nicotine (26), ergotamine (27) และ coniine (28)

Protoalkaloids เปนอลคาลอยดทมไนโตรเจนอยนอกวง (non-heterocyclic alkaloids) และเกดมาจากกรดอะมโนดวย เชน mescaline (29), homoveratrylamine (30) และ tryamine (31) ดงรปท 1.14

รปท 1.14 รปแสดงตวอยางโครงสรางของ protoalkaloids ไดแก mescaline (29), homoveratrylamine (30) และ tryamine (31)

Polyamines alkaloids เปนอนพนธของ putrescine (32), spermidine (33) และspermine (34) ดงรปท 1.15

รปท 1.15 รปแสดงตวอยางโครงสรางของ polyamines alkaloids ไดแก putrescine (32), spermidine (33) และ spermine (34)

11

Pseudoalkaloids (terpenes and steroids) เปนสารประกอบทมลกษณะเหมอนอลคาลอยดแตไมไดมาจากกรดอะมโน ตวอยางของ pseudoalkaloids แสดงดงรปท 1.16

รปท 1.16 รปแสดงตวอยางโครงสรางของ pseudoalkaloids ไดแก ephedrine (2), cathinone (35),

solanidine (36) และ tomatidine (37)

ในงานวจยนสนใจศกษาอลคาลอยดในคลาส (class) ของ isoquinoline alkaloids เปนหลก ซงประกอบไปดวย aporphine, phenanthrene, homoaporphine และ azafluoranthene alkaloids ดงรายละเอยดตอไปน 1.4 ไอโซควโนลนอลคาลอยด (Isoquinoline alkaloids) ไอโซควโนลนอลคาลอยด (isoquinoline alkaloids) คอสารอนทรยทมลกษณะเปน heterocyclic aromatic compound โครงสรางแสดงดงรปท 1.17 เมอพจารณาจากโครงสรางจะเหนวาประกอบไปดวย 2 สวนทส าคญคอ วงแหวน benzene (A) ตออยกบวงแหวน pyridine (B) จากการศกษาพบวา isoquinoline ถกแยกครงแรกจากน ามนถานหน (coal tar) ในป 1885 โดย Hoogewerf และ van Drop ซงในการสงเคราะหอลคาลอยดบางตวมกจะพบอก 2 โครงสรางทเกยวของกนรวมอยดวยคอ tetrahydroisoquinoline และ dihydroisoquinoline

รปท 1.17 รปแสดงโครงสรางพนฐานของ isoquinoline, tetrahydroisoquinoline และ dihydroisoquinoline alkaloids

12

ส าหรบการสงเคราะหวงแหวน B ของ isoquinoline ท าได 2 วธ คอ วธแรกเปนวธแบบดงเดม (classical method) จะเกดการปดวงแหวน B บรเวณต าแหนง C-8a กบ C-1 ดวยปฏกรยา Bischler-Napieralski หรออกปฏกรยาหนงคอ Pictet-Gams ซงทง 2 ปฏกรยานมลกษณะคลายกน ตางกนท Bischler-Napieralski จะไดอลคาลอยดในรปของ dihydroisoquinoline กอน ซงสามารถเกดปฏกรยา dehydrogenation กลายเปน isoquinoline ได ในขณะท Pictet-Gams จะไดอลคาลอยดในรปของ isoquinoline เลย สวนวธทสองเปนวธใหม (novel method) จะเกดการปดวงแหวน B บรเวณต าแหนง C-3 กบ C-4 หรอ N-2 กบ C-3 ซงในงานวจยนคณะวจยสงเคราะหวงแหวน B ใหอยในรปของ dihydroisoquinoline กอน ดงนนจงเลอกใชปฏกรยา Bischler-Napieralski เปนหลก [23] 1.5 สารในกลม isoquinoline alkaloids

1.5.1 Aporphine alkaloids อะพอรฟนอลคาลอยด (aporphine alkaloids) มโครงสรางพนฐานประกอบไปดวยวง

เบนซนเชอมตอกน 3 วง (วง A, C และ D) โดยทวง B มลกษณะเปน heterocyclic compound มอะตอมของไนโตรเจนเปนสวนหนงของวง โครงสรางพนฐานแสดงดงรปท 1.18 aporphine alkaloids จดเปนอลคาลอยดกลมใหญทอยในคลาสของ isoquinoline alkaloids มสมาชกมากกวา 1500 ตว พบมากในพชวงศกระดงงา (Annonaceae) วงศพชกนแมลง (Berberidaceae) วงศโพกรง (Hernandiaceae) วงศอบเชย (Lauraceae) วงศจ าปา (Magnoliaceae) วงศบอระเพด (Menispermaceae) วงศบว (Nymphaeaceae) วงศฝน (Papaveraceae) และวงศพวงแกวกดน (Ranunculaceae) นอกจากนยงสามารถพบไดในพชวงศอน เชน วงศบอน (Araceae) วงศกระเชาสดา (Aristolochiaceae) วงศยางพารา (Euphorbiaceae) วงศถว (Leguminosae) วงศลลล (Liliaceae) วงศบวหลวง (Nelumbonaceae) วงศพรกไทย (Piperaceae) วงศสม (Rutaceae) และวงศผกคาวทอง (Saururaceae) เปนตน

รปท 1.18 รปแสดงโครงสรางพนฐานของ aporphine alkaloids

13

เมอพจารณาโครงสรางพนฐานของ aporphine alkaloids พบวาสามารถมหมแทนทบนวง A-D ไดในต าแหนงตางๆ หมแทนททพบสวนใหญ ไดแก หม methoxy (-OCH3), methylenedioxy (-CH2OCH2-) และ hydroxy (-OH) จงพบการรายงานอะพอรฟนอลคาลอยดทมโครงสรางหลากหลาย โดยปกตจะพบหมแทนทเปนออกซเจนทต าแหนง C-1, C-2, C-9, C-10 และ C-11 พบไดนอยทต าแหนง C-3 และ C-8 หากหมแทนทเปนหม carbonyl ในต าแหนง C-4, C-5 และ C-7 เรยกวา oxoaporphine หรอ dioxoaporphine alkaloids ดงรปท 1.19 โดยทวไปอะตอมของไนโตรเจนจะเกาะกบหม methyl 1 หม ไดเปน tertiary amine ถาหมทเกาะตรงไนโตรเจนเปน secondary amine เราเรยกอลคาลอยดกลมนวา noraporphine นอกจากนยงมอกกลมทนาสนใจ คอ quaternary aporphine salts โดยทอะตอมของไนโตรเจนมหม methyl เกาะ 2 หม ดงรปท 1.20 ส าหรบตวอยางของ aporphine alkaloids กลมตางๆแสดงดงรปท 1.21 [24]-[27]

รปท 1.19 รปแสดงโครงสรางพนฐานของ oxoaporphine และ dioxoaporphine alkaloids

รปท 1.20 รปแสดงโครงสรางพนฐานของ noraporphine และ quaternary aporphine salts alkaloids

14

ตวอยาง aporphine alkaloids

รปท 1.21 รปแสดงตวอยางของ aporphine alkaloids 1.5.2 Phenanthrene alkaloids ฟแนนทรนอลคาลอยด (phenanthrene alkaloids) เปน polycyclic aromatic hydrocarbon ทประกอบดวยวงแหวนเบนซน 3 วงตอเชอมกนกบสายโซของ 2-(methylamino)ethyl หรอ 2-(dimethylamino)ethyl ดงรปท 1.22 แมวา phenanthrene จะไมมไนโตรเจนเปนสวนหนงของวง (non-heterocyclic) แตกจดเปนอลคาลอยดประเภทหนง มกพบในพชวงศกระดงงา (Annonaceae) วงศกระเชาสดา (Aristolochiae) วงศพชกนแมลง (Berberidaceae) วงศโพกรง (Hernandiaceae) วงศบอระเพด (Menispermaceae) และวงศพวงแกวกดน (Ranunculaceae) จากการศกษาพบวา phenanthrene alkaloids เปนอนพนธของ 1-(2-aminoethyl)phenanthrene ส าหรบตวอยางของ phenanthrene alkaloids แสดงดงรปท 1.23 [28], [29]

15

รปท 1.22 รปแสดงโครงสรางพนฐานของ phenanthrene alkaloids ตวอยาง phenanthrene alkaloids

รปท 1.23 รปแสดงตวอยางของ phenanthrene alkaloids 1.5.3 Homoaporphine alkaloids โฮโมอะพอรฟนอลคาลอยด (homoaporphine alkaloids) เปนเพยงอลคาลอยดกลมเลกๆใน isoquinoline alkaloids ความแตกตางระหวางอลคาลอยดกลมนกบอลคาลอยดกลมอนๆ คอ วงแหวน C เปน 7 เหลยม (seven-membered ring) ดงรปท 1.24 โดยปกตโครงสรางจะมออกซเจนเปนหมแทนทในต าแหนง C-1, C-2, C-10, C-11 และ C-12 หมแทนทบนอะตอมไนโตรเจนมกจะเปนหม methyl (-CH3) 1 หม หรอ 2 หม

16

รปท 1.24 รปแสดงโครงสรางพนฐานของ homoaporphine alkaloids

Homoaporphine alkaloids ทพบในธรรมชาตและเปนทรจกกนในปจจบนม 17 ตว มาจากพชชนสงวงศลลล (Liliaceae) ประกอบไปดวย 7 สกล ไดแก Androcymbium, Colchicum, Kreysigia, Bulbocodium, Iphigenia, Merendera และ Gloriosa ตวอยางของอลคาลอยดกลมนแสดงดงรปท 1.25 [30] ตวอยาง homoaporphine alkaloids

รปท 1.25 รปแสดงตวอยางของ homoaporphine alkaloids

1.5.4 Azafluoranthene alkaloids Azafluoranthene alkaloids เปนอลคาลอยดกลมเลกๆใน isoquinoline alkaloids เมอพจารณาโครงสรางพนฐานดงรปท 1.26 จะเหนวาอลคาลอยดกลมนประกอบไปดวยโครงสราง

17

หลกทส าคญ คอ indeno[1,2,3-ij]isoquinoline มวงแหวน C เปนวง 5 เหลยม (five-membered ring) ตวอยางของ azafluoranthene alkaloids แสดงดงรปท 1.27 [31]

รปท 1.26 รปแสดงโครงสรางพนฐานของ azafluoranthene alkaloids

ตวอยาง azafluoranthene alkaloids ทพบในธรรมชาต

รปท 1.27 รปแสดงตวอยางของ azafluoranthene alkaloids

1.6 งานวจยทเกยวของส าหรบการสงเคราะหอลคาลอยด การสงเคราะห aporphine, phenanthrene, homoaporphine และ azafluoranthene alkaloids มปฏกรยาทส าคญ คอ ขนตอนของการปดวงแหวน C ซงจากรายงานการสงเคราะหกอนหนานสามารถสรปปฏกรยาทใชปดวงแหวน C ไดดงน

1.6.1 Phenolic oxidative coupling/ nonphenol oxidative coupling ในป 1962 Franck [32] ประสบผลส าเรจในการสงเคราะหอะพอรฟนอลคาลอยดโดย

เกดผาน phenolic oxidation ของ laudanosoline methiodide (38) กบ ferric chloride ทอณหภม 20oC เปนเวลา 20 ชวโมง ดงแผนภาพท 1.1

18

แผนภาพท 1.1 แสดงการสงเคราะห aporphine alkaloid โดยเกดผาน phenolic oxidation

นอกจาก ferric chloride แลว ยงม oxidizing reagents ตวอนทสามารถน ามาใชในการเกด phenolic oxidation ได ดงตวอยางในตารางท 1.1 ตารางท 1.1 แสดงการสงเคราะห isoboldine (41) จาก reticuline (40) โดยใช oxidizing reagents ทหลากหลาย

Reagents Base Reaction conditions Temperature Time (hr) Yield (%)

K3Fe(CN)6 8% AcONH4 -12 oC 14 0.55 K3Fe(CN)6 0.2 N KH2PO4 r.t. 3 5-6 K3Fe(CN)6 5% NaHCO3 r.t. 1 5 Ag2CO3/celite r.t. 1.5 3 MnO2/SiO2 6

ในป 1976 Kupchan และคณะ [33] รายงานการสงเคราะหผานปฏกรยา nonphenol oxidative coupling ของ phenethylisoquinolines (42) โดยใช VOF3-TFA ใหสารผลตภณฑดงแผนภาพท 1.2

19

แผนภาพท 1.2 แสดงการสงเคราะห homoaporphine (43)

แตการสงเคราะหโดยวธนยงมขอบกพรองคอ ใหเปอรเซนตผลผลตของสารผลตภณฑ homoaporphine (43) ในปรมาณทนอยมากและไดผลตภณฑชนดอนอกหลายตว 1.6.2 Pschorr cyclisation

Pschorr และ Gadamer ไดรายงานการสงเคราะหอะพอรฟนโดยเกดผาน nitration ของ benzylisoquinoline (47) ตามดวยการเกด reduction, diazotization และ Pschorr cyclisation ซงวธนน าไปสการสงเคราะห glaucine (50) เปนครงแรก [24] ดงแผนภาพท 1.3

แผนภาพท 1.3 แสดงการสงเคราะห glaucine (50)

20

ป 1972 Kupchan และคณะ [34] ไดสงเคราะห nuciferine (54) โดยเกดผาน Pschorr cyclisation ไดเปอรเซนตผลผลต 35-50% ดงแผนภาพท 1.4

แผนภาพท 1.4 แสดงการสงเคราะห nuciferine (54)

ในปเดยวกน Cava และคณะ [35] รายงานการสงเคราะหอลคาลอยดในกลม azafluoranthene alkaloids คอ imeluteine (58) ซงมโครงสรางเปน nonphenolic compound ดงแผนภาพท 1.5

แผนภาพท 1.5 แสดงการสงเคราะห imeluteine (58) ป 1976 Cleaver และคณะ [36] ไดรายงานการสงเคราะห N,O-diacetylelmerrillicine (67) ดงแผนภาพท 1.6

21

แผนภาพท 1.6 แสดงการสงเคราะห N,O-diacetylelmerrillicine (67)

ปญหาส าหรบการสงเคราะหโดยวธนคอ ใหผลผลตในปรมาณทต ามาก ยงมการแทนทออกซเจนทต าแหนงตาง ๆ เพมขนปรมาณการปดวงกลดลง รวมถงในกรณทวงแหวน D มหมแทนทขนาดใหญตรงบรเวณทจะเกดพนธะระหวางวงอะโรมาตกกใหผลผลตต าเชนกน จะใหเปอรเซนตผลผลตดพอสมควรในกรณทไมมหมแทนทอยทต าแหนง ortho กบบรเวณทจะเกด aryl-aryl bond 1.6.3 Photochemical cyclisation ปฏกรยา photochemical cyclisation ถกรายงานครงแรกโดย Cava และคณะ [37] ในป 1966 โดยฉายแสง ultraviolet ใหแก urethane 68 ในตวท าละลาย ethanol ในสภาวะทมไอโอดน (I2) และ cupric acetate (Cu(OAc)2) เปน oxidizing agent ใหสารผลตภณฑเปน dehydroaporphine urethane (70) ในปรมาณทต า (15%) ดงแผนภาพท 1.7

แผนภาพท 1.7 แสดงการสงเคราะห nuciferine (54) โดยผาน photochemical cyclisation

hѵ

22

ตอมาไดมการพฒนาการสงเคราะหโดยฉายแสง ultraviolet ใหแก chlorourethane 69 ในตวท าละลาย methanol โดยม calcium carbonate (CaCO3) เปนเบส ใหสารผลตภณฑเปน dehydroaporphine urethane (70) ในปรมาณทดพอสมควร (56%) ดงแผนภาพท 1.7 ป 1982 Castedo และคณะ [38] รายงานการปดวง dioxoaporphine (72) โดยเกดผาน photochemical cyclisation ใหเปอรเซนตผลผลตในระดบปานกลาง (60%) โดยใหสารตงตนมความเจอจางมาก (0.001 M) ในตวท าละลายเบนซน ดงแผนภาพท 1.8

แผนภาพท 1.8 แสดงการสงเคราะห dioxoaporphine (72) โดยเกดผาน photochemical cyclisation

วธนมขอจ ากดทเหนไดชดเกยวกบความสะดวกและขดความสามารถในการเพมปรมาณสารตงตนใหเยอะขน กลาวคอ ตองใชตวท าละลายปรมาณมากเพอใหสารตงตนเจอจางตามทตองการ ป 2005 Ramana และคณะ [39] รายงานการสงเคราะห triclisine (77) โดยเกดผานปฏกรยา photocyclization ของ 1-(2-halophenyl)-3,4-dihydro-6,7-dimethoxyisoquinolines (73, 74) กบ sodium thiosulfate พรอมทงฉายแสง ultraviolet ทความยาวคลนประมาณ 254 nm เกดสารผลตภณฑ 2 ตว คอ 2,3-dihydroazafluoranthene (75) และ dehalogenation 76 หลงจากนนเกด dehydrogenation ของ 75 กบ 5% Pd-C ทอณหภม 250 oC เปนเวลา 15 นาท ให triclisine (77, 52%) ดงแผนภาพท 1.9 และตารางท 1.2

แผนภาพท 1.9 แสดงการสงเคราะห azafluoranthene alkaloid triclisine (77)

hν

23

ตารางท 1.2 Photolysis ของ 1-(2-halophenyl)-3,4-dihydro-6,7-dimethoxyisoquinolines 73, 74

Entry Substrate Time (h) 75 (%) 76 (%) 1 73 12 42 19 2 74 7 40 24

การสงเคราะหอะพอรฟนโดยการฉายแสง (Photochemical cyclisation) ยงมขอจ ากด คอ ไมสามารถสงเคราะหอะพอรฟนทต าแหนง C-11 มหมแทนทเปนออกซเจนได 1.6.4 Intramolecular arylation ป 2004 Cuny [40] รายงานการสงเคราะห aporphine alkaloids โดยเกดผาน intramolecular phenol ortho-arylation ของ activated ortho-phenolate ม palladium (II) acetate เปนตวเรงปฏกรยา ดงแผนภาพท 1.10

แผนภาพท 1.10 แสดงการสงเคราะห (±)-aporphine (83)

แตวธของ Cuny ยงมขอบกพรอง คอ ใชปรมาณของตวเรงปฏกรยาทเยอะมาก (20-50%) สวนเปอรเซนตผลผลตทไดอยระดบปานกลาง (50-60%) ตอมาในปเดยวกน Fagnou และคณะ [41] รายงานการสงเคราะห aporphine alkaloids โดยวธ direct intramolecular arylation ของ unactivated arenesใหเปอรเซนตผลผลตทสง และใชตวเรงปฏกรยาในปรมาณทต ากวา ดงแผนภาพท 1.11

24

แผนภาพท 1.11 แสดงการสงเคราะห nornuciferine (89) และ nuciferine (54) 1.6.5 Radical cyclisation ป 1991 Castedo และคณะ [42] รายงานการสงเคราะห aporphine alkaloid โดยใช tributyltin hydride (Bu3SnH/AIBN) ในการเกด intramolecular radical cyclisation ของ bromobenzylisoquinolines (90) ซงเสนทางการสงเคราะห aporphine วธนถอเปนครงแรกส าหรบ total synthesis ของ 5-oxoaporphine (91)

25

แผนภาพท 1.12 แสดงการสงเคราะห 5-oxoaporphine (91) นอกจากนในป 1994 Castedo และคณะ [43] ไดศกษาอทธพลของหมแทนทบนวงแหวน A และ C พบวา เมอ precursor (92) ท าปฏกรยากบ n-Bu3SnH เกดผลตภณฑเพยงตวเดยว คอ 1-benzylisoquinoline (93) ซงเปนผลมาจากการเกด hydrogenolysis ของพนธะ C-Br สามารถอธบายไดดวยผลจากความแออดระหวางหมแทนทในต าแหนงท C-7 และ C-3' ท าใหไมไดผลตภณฑทตองการ ดงนนการปดวงอะพอรฟนดวยวธนจงมขอจ ากดในการสงเคราะห

แผนภาพท 1.13 แสดงการเกด hydrogenolysis product อกเหตผลหนงทเปนขอบกพรองของวธนคอ การใช n-Bu3SnH/AIBN จะท าใหปฏกรยาเกดแรดคลอสระ (free radical) มากมาย เปนผลใหเกด by-product ทไมตองการ 1.6.6 Metalation-cross coupling ป 1994 Snieckus และคณะ [44] รายงานการสงเคราะห imeluteine (58) โดยเกดผาน metalation-cross coupling ของ phenethylamine 94 กบ lithium diisopropylamide (LDA) ทมากเกนพอ เกดผลตภณฑเปน dihydroimeluteine (57) ในเปอรเซนตผลผลตทคอนขางต า (36%) จากนนจงท าปฏกรยา dehydrogenation ให imeluteine (58) ดงแผนภาพท 1.14

26

แผนภาพท 1.14 แสดงการสงเคราะห imeluteine (58) 1.6.7. Oxidative biaryl coupling การเกด intramolecular oxidative coupling ของ 1-benzyltetrahydroisoquinoline กบ โลหะหนก (heavy metal) หลายตวทท าหนาทเปน oxidizing reagents เชน Ru(IV), Pb(IV), V(III) และ Cr(III) เปนวธทใชบอยส าหรบการเตรยมอะพอรฟนอลคาลอยด แตการสงเคราะหวธนยงมขอบกพรองทรายแรงเกยวกบความเปนพษของ heavy-metal regents และการใชกรดทรนแรง

ดงนนในป 2007 Ruchirawat และคณะ [45] ใช hypervalent iodine ซงเปน oxidizing reagent ทมประสทธภาพในการสงเคราะห pentasubstituted aporphine alkaloids เชน N-formyl purpureine (96c) และ romucosine G (96e) ซงประสบผลส าเรจในการสงเคราะหโดยใช phenyliodine(III)bis(trifluoroacetate) (PIFA)-BF3·Et2O ใหเปอรเซนตผลผลต 72% และ 52% ตามล าดบ แตใหเปอรเซนตผลผลตนอย (29%) ในกรณของ phoebine (96b) ดงตารางท 1.3

ตารางท 1.3 แสดง PIFA-Mediated Oxidative Biaryl Coupling

Entry 95 R1 R2 R3 96 Yield (%) 1 95a CH3 OCH3 OCH3 (thalicsimidine) 96a 31 2 95b CH3 OCH2O (phoebine) 96b 29

27

Entry 95 R1 R2 R3 96 Yield (%) 3 95c CHO OCH3 OCH3 (N-formyl purpureine) 96c 72 4 95d CHO OCH2O (N-formyl aporphone) 96d 67 5 95e CO2CH3 OCH3 OCH3 (romucosine G) 96e 52

1.6.8 Microwave-assisted direct biaryl coupling/ electrocyclisation ปจจบนการฉายรงสไมโครเวฟถกน ามาใชมากขนในการสงเคราะหทางเคมอนทรย เนองจากมอตราการเกดปฏกรยาทสง มการเลอกท าปฏกรยาทด (selectivity) และเปอรเซนตผลผลตมมากกวาเมอเทยบกบสภาวะทใชความรอนปกต (thermal condition) โดยไมโครเวฟสามารถน ามาใชส าหรบวธการเกด biaryl coupling ในหลายปฏกรยา เชน ปฏกรยา Suzuki, Heck และ Negishi เปนตน โดยมรายงานในงานวจยอยางกวางขวาง ป 2009 Kaufman และคณะ [46] รายงานการสงเคราะห 2-methyl-triclisine (98) โดยใช microwave-assisted electrocyclisation ดงแผนภาพท 1.15

แผนภาพท 1.15 แสดงการสงเคราะห 2-methyl-triclisine (98)

ป 2009 Harding และคณะ [47] รายงานการสงเคราะหอะพอรฟน (100) โดยใช microwave-assisted direct biaryl coupling เปนครงแรก ไดเปอรเซนตผลผลต 90% (ตารางท 1.4, entry 5) เมอเปรยบเทยบกบ thermal condition (ตารางท 1.4, entry 1) ทไดปรมาณผลผลตปานกลาง (40%) ปฏกรยาแสดงดงแผนภาพท 1.16 ตารางท 1.4 Thermal และ microwave-assisted cyclisation ของ 99

Entry Substrate Product Solvent Ligand Yield (%) 1 99a 100a DMA A 40

28

Entry Substrate Product Solvent Ligand Yield (%) 2b 99a 100a DMA A 58 3a 99a 100a DMA A 51 4a,b 99a 100a DMA A 81 5a,b 99a 100a DMA B 90 6a,b 99b 100b DMA B 82

a Conditions: Pd(OAc)2, K2CO3, solvent, ligand, microwave 5 min b Pivalic acid ถกเตมลงไปในปฏกรยา

แผนภาพท 1.16 แสดงการสงเคราะหอะพอรฟน (100)

จากวธการเกด cyclisation ทกลาวมา พบวายงมความซบซอนและใหผลทไมดมาก แตวธทนาสนใจและมประสทธภาพทสด คอ การใชไมโครเวฟ ดงนนในงานวจยนจงวางแผนท าการสงเคราะห aporphine, phenanthrene, homoaporphine และ azafluoranthene alkaloids รวมถง alkaloids อนๆ ทเกยวของ ซงเกดผานกระบวนการปดวง (cyclisation reaction) โดยใชไมโครเวฟเปนปฏกรยาทส าคญและคนหาสภาวะทใหผลผลตสงสด 1.7 แนวเหตผล ทฤษฎส าคญและสมมตฐาน เนองจากสารในกลมอลคาลอยดแสดงฤทธทางชวภาพทหลากหลายและสารหลายตวมฤทธทางชวภาพทสง สารกลมนจงเปนสารทมความนาสนใจอยางมาก แตเนองจากการแยกอลคา

29

ลอยดจากธรรมชาตยงมขอจ ากด กลาวคอ อลคาลอยดทแยกจากธรรมชาตนนมปรมาณนอยมาก ซงไมเพยงพอตอการน าไปใชประโยชน ดงน นการสงเคราะหอลคาลอยดจงมความจ าเปนและนาสนใจเปนอยางมาก จากทไดกลาวมาแลววา อลคาลอยดมหมแทนทไดหลากหลายทางคณะผวจยจงมสมมตฐานวา การปรบเปลยนหมแทนทบนโครงสรางของอลคาลอยดทสนใจนาจะมผลตอกลไกการออกฤทธ ดวยเหตนผวจยจงท าการสงเคราะหอลคาลอยดเลยนแบบธรรมชาต รวมทงอลคาลอยดทไมไดพบในธรรมชาต หลงจากนนจะน าอลคาลอยดทสงเคราะหไดเหลานไปทดสอบฤทธทางชวภาพเพอพสจนสมมตฐานดงกลาว 1.8 วตถประสงคของการวจย

1. เพอยนยนโครงสรางของอลคาลอยดทแยกไดจากธรรมชาต 2. เพอน าอลคาลอยดทสงเคราะหไดมาทดสอบการออกฤทธทางชวภาพ ไดแก ฤทธ

ยบย งการเจรญเตบโตของเซลลมะเรง 3 ชนด คอ มะเรงชองปาก (oral cavity cancer-KB) มะเรงเตานม (breast cancer-MCF7) และมะเรงปอด (small cell lung cancer-NCI-H187) รวมทงฤทธยบย งเชอมาลาเรย (anti-malaria; Plasmodium falciparum) และฤทธตานจลชพ (antimicrobial activity) โดยมการปรบเปลยนหมแทนทภายในโครงสราง เพอศกษาวาหมแทนทมผลตอการออกฤทธทางชวภาพอยางไร

3. เพอศกษาความสมพนธระหวางโครงสรางทางเคมกบกลไกการออกฤทธ 1.9 ผลการทดลองและวจารณผลการทดลอง ในหวขอนจะกลาวถงการสงเคราะหอลคาลอยดทงหมด 20 ตว แบงเปนอลคาลอยดทพบในธรรมชาต 16 ตว และทไมพบในธรรมชาต 4 ตว โดยอลคาลอยดทพบในธรรมชาตแบงเปน 8 กลม ดงน คอ กลม aporphine alkaloids ไดแก phoebine (110a) และ crebanine (110b) กลม dehydroaporphine alkaloids ไดแก dehydrophoebine (111a) และ dehydrocrebanine (111b) กลม noraporphine alkaloid ไดแก norphoebine (110a') กลม oxoaporphine alkaloids ไดแก oxophoebine (112a') และ oxocrebanine (112b') กลม oxoaporphinium salts ไดแก uthongine (113) กลม dioxoaporphine alkaloid ไดแก 11-methoxylettowianthine (130) กลม phenanthrene alkaloids ไดแก thalihazine (115a), secophoebine (115a'), 8-methoxyuvariopsine (115b),

30

uvariopsamine (115c), noruvariopsamine (115c') และ 8-hydroxystephenanthrine (118) กลมสดทายคอ azafluoranthene alkaloid ไดแก triclisine (147) โครงสรางแสดงดงรปท 1.28 จากการศกษาเพมเตมพบวา มอลคาลอยดบางตวทถกสงเคราะหขนครงแรก (first synthesis) ในงานวจยน ไดแก norphoebine (110a'), dehydrophoebine (111a), oxophoebine (112a'), oxocrebanine (112b'), thalihazine (115a), secophoebine (115a'), 8-methoxyuvariopsine (115b), uvariopsamine (115c), noruvariopsamine (115c'), 8-hydroxystephenanthrine (118), 11-methoxylettowianthine (130) รวมทง dehydrocrebanine (111b) และ uthongine (113) ซงมรายงานเฉพาะ semisynthesis

31

รปท 1.28 รปแสดงโครงสรางทางเคมของอลคาลอยดทสงเคราะหเลยนแบบธรรมชาต สวนอลคาลอยดทไมพบในธรรมชาตแบงเปน 2 กลม ดงนคอ กลม homoaporphine alkaloids ไดแก 1,2-dimethoxy-10,11-methylenedioxyhomonoraporphine (140) และ 1,2-dimethoxy-10,11-methylenedioxyhomoaporphine (homonantenine; 141) กลม azafluoranthene alkaloids ไดแก 2,3-dihydrotriclisine (148) และ cyclisation product 149 ดงรปท 1.29

รปท 1.29 รปแสดงโครงสรางทางเคมของอลคาลอยดทสงเคราะหซงไมพบในธรรมชาต

Phoebine (110a) เปนอะพอรฟนอลคาลอยดทถกแยกมาจากสวนใบของ Phoebe valeriana Standl. (Lauraceae) ดงรปท 1.30 โดยคณะวจยของ Castro และ Lopez [48] ในป 1986 ในงานวจยครงนน Castro และ Lopez สามารถแยก pentasubstituted aporphine alkaloids ตวใหมไดหลายตวในพชชนดน เชน dehydrophoebine (111a), oxophoebine (112a') รวมถง norphoebine (110a') ทมรายงานการแยกกอนหนานแลว [24] อกท งยงสามารถแยก pentasubstituted

32

phenanthrene alkaloid ไดดวยคอ secophoebine (115a') จากการศกษาพบวาสารทมโครงสรางเปน pentasubstituted aporphine alkaloids พบไดยากกวาเมอเทยบกบ tetrasubstituted aporphines alkaloids

รปท 1.30 รปแสดงโครงสรางทางเคมของ phoebine (110a) และ Phoebe valeriana Standl. [49]

Crebanine (110b) เปนอะพอรฟนอลคาลอยดทแยกมาจากสวนใบและล าตนใตดนของตนสบเลอด (Stephania venosa (Blume) Spreng) (Menispermaceae) ดงรปท 1.31 มถนก าเนดในประเทศไทยทจงหวดประจวบครขนธ กลมวจยทแยกได คอ Techasakul และคณะ ในป 2011 [20], [50] จากการศกษาเพมเตมพบวา crebanine (110b) เปนอลคาลอยดทพบไดในพชหลายชนด เชน Stephania bancroftii (Menispermaceae) [51], Stephania yunnanensis (Menispermaceae) [52] และ Fissistigma oldhamii (Hemsl.) Merr. (Annonaceae) [53] เปนตน จากงานวจยของ Techasakul นอกจากจะแยก crebanine (110b) ไดแลวยงสามารถแยกอลคาลอยดไดอก 1 ตว คอ dehydrocrebanine (111b)

รปท 1.31 รปแสดงใบและล าตนใตดนของตนสบเลอด (Stephania venosa (Blume) Spreng) และโครงสรางทางเคมของ crebanine (110b)

Phoebe valeriana Standl.

Stephania venosa (Blume)

Spreng

33

Dehydrophoebine (111a) เปนอะพอรฟนอลคาลอยดทแยกมาจากสวนใบของ Phoebe valeriana (Lauraceae) โดย Castro และ Lopez ในป 1986 [48] เชนเดยวกบ phoebine (110a) โครงสรางแสดงดงรปท 1.32

รปท 1.32 รปแสดงโครงสรางทางเคมของ dehydrophoebine (111a)

Dehydrocrebanine (111b) ถกรายงานการแยกโดย Kunitomo และคณะ ในป 1980 [26] ดงรปท 1.33 จากรายงานการวจยพบวา Kunitomo และคณะแยก dehydrocrebanine (111b) จากล าตนใตดนและรากของ Stephania sasakii (Menispermaceae) รวมถงรายงานการสงเคราะหแบบ semisynthesis ของ dehydrocrebanine (111b) แตยงไมพบรายงานการสงเคราะหแบบ total synthesis นอกจากนในงานวจยของ Techasakul และคณะในป 2011 [20] กสามารถแยก dehydrocrebanine (111b) จาก Stephania venosa (Blume) Spreng ไดเชนกน พรอมทงรายงานฤทธยบย งการเจรญเตบโตของเซลลมะเรงหลายชนดทพบใน dehydrocrebanine (111b) ท าใหสารกลมนมความนาสนใจยงขนทจะสงเคราะหแลวน าไปทดสอบฤทธทางชวภาพทหลากหลาย

รปท 1.33 รปแสดงโครงสรางทางเคมของ dehydrocrebanine (111b)

Oxophoebine (112a') ถกแยกมาจากสวนใบของ Phoebe valeriana ตามรายงานการวจยของ Castro และ Lopez ในป 1986 [48] ซงตอมาในป 1994 Kingston และคณะ [54] รายงาน

34

การแยก oxophoebine (112a') จาก Xylopia aethiopica (Annonaceae) นอกจากน oxophoebine (112a') ยงถกแยกจาก Aquilegia ecalcarata Maxim (Ranunculaceae) โดย Xiao และคณะ ในป 2002 [55] ดงรปท 1.34

(a) (b)

รปท 1.34 รปแสดงโครงสรางทางเคมของ oxophoebine (112a') รวมทงรปแสดง Xylopia aethiopica (ภาพ a) [55] และ Aquilegia ecalcarata (ภาพ b) [57]

Oxocrebanine (112b') ถกแยกมาจากสวนเนอไมของ Fissistigma glaucescens (Annonaceae) ในป 1985 โดย Lu และคณะ [58] เชนเดยวกบ Wu และคณะ [59] ทสามารถแยก oxocrebanine (112b') จากสวนใบของ Fissistigma glaucescens (Annonaceae) ในป 2000 นอกจากน ในป 1996 Wijeratne และคณะ [26] ยงรายงานการแยก oxocrebanine (112b') จากเปลอกล าตนของ Artabotrys zeylanicus (Annonaceae) ดงรปท 1.35

รปท 1.35 รปแสดงโครงสรางทางเคมของ oxocrebanine (112b') รวมทง Fissistigma glaucescens [60] และ Artabotrys zeylanicus [61]

Artabotrys zeylanicus Fissistigma glaucescens

35

Uthongine (113) เปน N-methyloxoaporphinium salts ทมประจบวกอยในโครงสราง ในป 1981 Shamma คณะ [62] รายงานการแยกและอธบายลกษณะเฉพาะของ 4,5,6,6a-tetrahydro-N-methyl-7-oxoaporphinium salts (uthongine) (113) ขนจากรายงานการวจยพบวา uthongine (113) สามารถแยกไดจากรากสะสมอาหารของ Stephania venosa Spreng. (Menispermaceae) ทมถนก าเนดในประเทศไทย โดยในงานวจยของ Shamma พบวา uthongine (113) สามารถสลายตวไดเมอท า chromatography โดยใช silica gel ใหสารตวใหมคอ oxocrebanine (112b') ดงรปท 1.36

รปท 1.36 รปแสดงโครงสรางทางเคมของ uthongine (113) และ Stephania venosa Spreng. [63]

Thalihazine (115a) เปนฟแนนทรนอลคาลอยดทแยกไดครงแรกในป 1987 โดย Shamma และคณะ [64] จาก Thalictrum hazarica R.R.S. (Ranunculaceae) ซงตอมาในป 1996 Hesse และคณะ [28] ยงสามารถแยก thalihazine (115a) ไดจาก Thalictrum simplex (Ranunculaceae) ดงรปท 1.37

รปท 1.37 รปแสดงโครงสรางทางเคมของ thalihazine (115a) และ Thalictrum simplex [65]

Stephania venosa Spreng.

Thalictrum simplex

36

Secophoebine (115a') เปนฟแนนทรนอลคาลอยดทแยกไดครงแรกในป 1986 โดย Castro และคณะ [48] จากสวนใบของ Phoebe valeriana (Lauraceae) เชนเดยวกบ phoebine (110a) dehydrophoebine (111a) และ oxophoebine (112a') โครงสรางแสดงดงรปท 1.38

รปท 1.38 รปแสดงโครงสรางทางเคมของ secophoebine (115a')

8-Methoxyuvariopsine (115b) เปนฟแนนทรนอลคาลอยดทแยกไดครงแรกในป 1972 โดย Leboeuf และ Cavé [66] จากเปลอกของ Uvariopsis guineensis Keay (Anonaceae) นอกจากนย งสามารถแยกอลคาลอยดตวอนๆไดจากพชกลมนดวย เชน uvariopsamine (115c) noruvariopsamine (115c') และ oxocrebanine (112b') เปนตน ดงรปท 1.39

รปท 1.39 รปแสดงโครงสรางทางเคมของ 8-methoxyuvariopsine (115b) และ Uvariopsis guineensis [67]

Uvariopsamine (115c) เปนฟแนนทรนอลคาลอยดทแยกไดครงแรกในป 1972 โดย Leboeuf และ Cavé [66] จากเปลอกของ Uvariopsis guineensis Keay (Anonaceae) เชนเดยวกบ 8-methoxyuvariopsine (115b) และตอมาในป 1993 Achenbach และ Löwel [68] รายงานการแยก

Uvariopsis guineensis

37

uvariopsamine (115c) จากเปลอกล าตนของ Greenwayodendron oliveri (Annonaceae) โครงสรางแสดงดงรปท 1.40

รปท 1.40 รปแสดงโครงสรางทางเคมของ uvariopsamine (115c) และ Greenwayodendron oliveri [69]

Noruvariopsamine (115c') เปนฟแนนทรนอลคาลอยดทแยกไดครงแรกในป 1972 โดย Leboeuf และ Cavé [66] จากเปลอกของ Uvariopsis guineensis Keay (Anonaceae) เชนเดยวกบ 8-methoxyuvariopsine (115b) และ uvariopsamine (115c) ดงรปท 1.41

รปท 1.41 รปแสดงโครงสรางทางเคมของ noruvariopsamine (115c')

8-Hydroxystephenanthrine (118) เปนฟแนนทรนอลคาลอยดทแยกมาจาก Monocyclanthus vignei (Annonaceae) โดย Achenbach และคณะ ในป 1991 [70] เมอพจารณาจากโครงสรางมการรายงานวา จะปรากฏสญญาณของ H-5 ท δ H 8.58 ซง downfield ทสด โครงสรางแสดงดงรปท 1.42

Greenwayodendron oliveri

38

รปท 1.42 รปแสดงโครงสรางของ 8-hydroxystephenanthrine (118) และ Monocyclanthus vignei [71]

11-Methoxylettowianthine (130) เปนอะพอรฟนอลคาลอยดในกลมของ telisatin-type โดยทต าแหนง N-6 และ C-7 ม oxalyl group เกาะอย ซงปจจบนสารกลมนมสมาชกเพยง 5 ตว เทานนทพบในธรรมชาต ไดแก telisatin A, telisatin B, lettowianthine (หรอ annonbraine), laurodionine รวมถง 11-methoxylettowianthine (130) ดวย [72] ดงรปท 1.43 จากรายงานการวจยพบวา 11-methoxylettowianthine (130) ถกแยกมาจากเปลอกรากของ Lettowianthus stellatus Diels (Annonaceae)โดย Achenbach และคณะ ในป 2000 [73] ดงรปท 1.44

รปท 1.43 รปแสดงโครงสรางทางเคมของ 11-methoxylettowianthine (130) และอลคาลอยดในกลมของ telisatin-type

Monocyclanthus vignei

39

รปท 1.44 รปแสดง Lettowianthus stellatus Diels [74]

Triclisine (147) เปน azafluoranthene alkaloids ทแยกมาจาก triclisia gilletii (Dewild) Staner (Menispermaceae) [31] ดงรปท 1.45

รปท 1.45 รปแสดงโครงสรางทางเคมของ triclisine (147)

ในงานวจยนจะเรมจากการสงเคราะห aporphine, dehydroaporphine, oxoaporphine, phenanthrene, 8-hydroxystephenanthrine, 11-methoxylettowianthine, homoaporphine และ azfluoranthene alkaloids ตามล าดบ 1.9.1 การสงเคราะห Phoebine (110a), Crebanine (110b) และอลคาลอยดอนทเกยวของ ในการสงเคราะห phoebine (110a), crebanine (110b) และอลคาลอยดอนทเกยวของ เกดผานขนตอนทส าคญคอ การสรางวงแหวน C โดย microwave-assisted direct biaryl coupling

Lettowianthus stellatus Diels

40

ซงมรายงานการสงเคราะหครงแรกโดย Harding และคณะ [47] ในป 2009 ส าหรบการสงเคราะหอลคาลอยดเรมตนจากการเตรยม amides 105a-105d ซงเตรยมจากปฏกรยา condensation ของ amines 103a และ 103b กบ acid chloride 104c ได amides 105b และ 105c ตามล าดบ ท านองเดยวกนกบ amine 103a เกด condensation กบ acid chloride 104d ได amide 105d ในขณะท amine 101 เกด condensation กบ acid 102 ใน xylene ภายใตสภาวะ reflux เปนเวลา 2 ชวโมง ไดสาร amide 105a เนองมาจาก acid 102 มความสามารถในการละลายต าจงไมสามารถเปลยนเปน acid chloride ได ดงแผนภาพท 1.17

Reaction conditions: (A) SOCl2/benzene

Reaction conditions: (B) reflux/xylene; (C) 10% NaHCO3/chloroform

แผนภาพท 1.17 แสดงการสงเคราะห acid chlorides 104c, 104d และ amides 105a-105d จากนน amides 105a-105d ถกเปลยนใหอยในรปของ dihydroisoquinolines 106a-106d โดยปฏกรยา Bischler-Napieralski แลวน า dihydroisoquinolines 106a-106d ท าปฏกรยา reduction กบ sodium borohydride ให tetrahydroisoquinolines 107a-107d ในขนตอนตอไปจะใสหมปองกนทไนโตรเจนดวย functional groups ตางๆ ไดแก carbomethoxy, trifluoroacetyl และ formyl เรมจาก

41

น า tetrahydroisoquinolines 107a และ 107c ท าปฏกรยากบ methyl chloroformate ให carbamate 108a และ 108c ตามล าดบ เชนเดยวกนกบการสงเคราะห trifluoroacetamides 108a' และ 108b' แตใช trifluoroacetic anhydride (TFAA) ท าปฏกรยากบ tetrahydroisoquinolines 107a และ 107b สวน formamides 108b และ 108d เกดจากปฏกรยาระหวาง tetrahydroisoquinolines 107b และ 107d กบ formic acid และ N,N’-dicyclohexylcarbodiimide (DCC) ดงแผนภาพท 1.18

Reaction conditions: (D) POCl3/benzene; (E) NaBH4/ethanol; (F) ClCO2CH3, Et3N/chloroform (107a 108a, 107c 108c); (G) (CF3CO)2O, Et3N/dichloromethane (107a 108a', 107b 108b'); (H) formic acid, DCC/dichloromethane (107b 108b, 107d 108d)

แผนภาพท 1.18 แสดงการสงเคราะห benzylisoquinoline alkaloids 108a-108d

42

จากการศกษาพบวา carbamate สามารถแสดงปรากฏการณ hindered rotation รอบพนธะ amide ได [75] ดงนนเมอพจารณา carbamate 108a จะพบสญญาณโปรตอนต าแหนง ortho กบหมโบรมนใน benzyl substituent แสดงสญณาณ singlets 2 peaks ท chemical shift (δH) ตางกน คอ 7.02 และ 6.98 โดยม integration ทงหมดเทากบ 1 โปรตอน นอกจากนแลวโปรตอนตวอน ๆ บนวงอะโรมาตกกใหสญญาณ singlets 2 peaks เชนกน (δH 6.65 และ 6.56 ม integration ทงหมดเทากบ 1 โปรตอน ส าหรบต าแหนง C-6 และ δH 6.46 และ 6.29 ม integration ทงหมดเทากบ 1 โปรตอน ส าหรบ C-8) จากรายงานการวจยพบวา ต าแหนงทโดดเดนทสดคอ โปรตอนของหม CH3 จากหม methoxycarbonyl ใหสญญาณ singlets 2 peaks คอ δH 3.65 และ 3.41 ม integration ทงหมดเปน 3 โปรตอน เชนเดยวกนกบ carbamate 108c จะเหนโปรตอนของหม CH3 จากหม methoxycarbonyl ขนสญญาณ singlets 2 peaks (δH 3.58 และ 3.30 ม integration ทงหมดเปน 3 โปรตอน) ในท านองเดยวกบ trifluoroacetamides 108a' และ 108b' กจะเกดปรากฏการณนดวย โดย 108a' จะเหน aromatic proton ต าแหนงตาง ๆ แสดงสญญาณ singlet 2 peaks คอท δH 7.00 และ 6.99 ม integration ทงหมดเทากบ 1 โปรตอน ส าหรบโปรตอนต าแหนง ortho กบหมโบรมน ท δH 6.64 และ 6.54 ม integration ทงหมดเทากบ 1 โปรตอน ส าหรบต าแหนง C-6 และท δH 6.39 และ 6.29 ม integration ทงหมดเทากบ 1 โปรตอน ส าหรบ C-8 สวน 108b' จะพบสญญาณโปรตอนต าแหนง ortho กบหมโบรมน แสดงสญญาณ 2 doublets ท δH ตางกน คอ 7.23 (J = 8.7 Hz) และ 7.22 (J = 8.7 Hz) โดยม integration ทงหมดเทากบ 1 โปรตอน รวมทงโปรตอนต าแหนง meta กบหมโบรมนกใหสญญาณ 2 doublets ท δH ตางกนดวย (δH 6.73 (J = 8.7 Hz) และ δH 6.71 (J = 8.7 Hz)) ในขณะท formamides 108b และ 108d จะเหนสญญาณโปรตอนของหม formyl ปรากฏ 2 peaks ของ 2 conformers คอ δH 7.92 กบ 7.51 ส าหรบ หม formyl ของ 108b โดยม integration ทงหมด 1 โปรตอน และ δH 7.91 กบ 7.89 ส าหรบ หม formyl ของ 108d โดยม integration ทงหมด 1 โปรตอนเชนกน ขนตอนตอไปเปนการปดวงแหวน C ของ 108a, 108a', 108b, 108b', 108c และ 108d โดยใช palladium(II)acetate และ ligand B ในสภาวะทเปนเบสและมตวท าละลายเปน N,N-dimethylacetamide (DMA) เกดปฏกรยาผาน microwave-assisted direct biaryl coupling โดยใชเวลา 5 นาท ได aporphines 109a, 109a', 109b, 109b', 109c และ 109d ตามล าดบ โดยมเปอรเซนตผลผลตทสง (71% - 96%) ยกเวน 109a' ใหเปอรเซนตผลผลตต า (19%) และ 109c ใหเปอรเซนตผลผลตปานกลาง (43%) ซงขนตอนการปดวงจดเปนขนตอนทส าคญในการเกดปฏกรยาของสารกลมน แสดงดงแผนภาพท 1.19

43

Reaction conditions: (I) Pd(OAc)2, pivalic acid, ligand B, K2CO3, microwave/DMA

แผนภาพท 1.19 แสดงการสงเคราะห aporphine alkaloids 109a-109d

สญญาณใน 1H-NMR ทบงบอกวาเกดผลตภณฑส าหรบสาร 109a คอ คา δ H ท 7.90 และส าหรบสาร 109a' คอ คา δ H ท 7.91 ลกษณะเปน singlet ของโปรตอนทอยบน C-11 สวน 109b ม δ H ของ 2 conformers ลกษณะเปน doublets 2 peaks คอ 7.85 (J = 8.7 Hz) และ 7.84 (J = 8.7 Hz) ม integration ทงหมดเปน 1 โปรตอน ในท านองเดยวกนกบ 109b' และ 109c ใหสญญาณเปน doublet ทบรเวณ δ H 7.86 ( J = 8.7 Hz) และ 8.20 (J = 8.7 Hz) ตามล าดบ ตวสดทายคอ 109d แสดง 2 conformers ของโปรตอนต าแหนง C-11 ม integration ทงหมดเปน 1 โปรตอน ท δ H 7.73-7.77 ปรากฏ peak ลกษณะเปน multiplet Reduction ของ N-carbomethoxy group ใน 109a และ 109c และ formyl group ใน 109b และ 109d ดวย lithium aluminium hydride (LAH) ใหสารผลตภณฑเปน phoebine (110a), 1,2,8,9-tetramethoxyaporphine (110c), crebanine (110b) และ 8-benzyloxy-1,2-methylenedioxy aporphine (110d) ตามล าดบ สวน trifluoroacetyl group ใน 109a' และ 109b' ถกก าจดออกโดยใช sodium carbonate ไดเปน norphoebine (110a') และ norcrebanine (110b') ตามล าดบ ดงแผนภาพท 1.20 ซงขอมลสเปกตรม 1H-NMR และ 13C-NMR ของ phoebine (110a) [48], crebanine (10b) [51], norphoebine (110a') [25] และ norcrebanine (110b') ทไดจากการสงเคราะหสอดคลองกบขอมลของอลคาลอยดทแยกไดจากธรรมชาตจงเปนการยนยนวาโครงสรางทไดเสนอไวส าหรบอลคาลอยดเหลานนถกตองแลว

44

Reaction conditions: (J) LiAlH4, reflux/THF (109a, 109b, 109c, 109d 110a, 110b, 110c, 110d); (K) Na2CO3, reflux/10% MeOH-H2O (109a', 109b' 110a', 110b')

แผนภาพท 1.20 แสดงการสงเคราะห aporphine 110a-110d และ noraporphine 110a', 110b'

1.9.2 การสงเคราะห Dehydrophoebine (111a) และ Dehydrocrebanine (111b) ส าหรบการสงเคราะห dehydroaporphines เรมจากน า phoebine (110a) และ crebanine (110b) ทเตรยมไดมา reflux กบ 10% palladium-carbon เปนเวลา 2 ชวโมง ได dehydrophoebine (111a) [48] และ dehydrocrebanine (111b) [27] ตามล าดบ ในเปอรเซนตผลผลตทสง ดงแผนภาพท 1.21 จากการเปรยบเทยบขอมล 1H-NMR ของสารทไดจากการสงเคราะหกบสารทแยกไดจากธรรมชาตพบวา มความสอดคลองกน คอ มสญญาณโปรตอนบรเวณ downfield ท δ H 8.90 เปน singlet ซงเปนสญญาณของโปรตอนทต าแหนง C-11 ของ dehydrophoebine (111a) สวน dehydrocrebanine (111b) ปรากฏสญญาณของโปรตอนทต าแหนง C-10 และ C-11 เปน doublet ท δ H 7.00 (J = 9.0 Hz) และ 8.63 (J = 9.0 Hz) ตามล าดบ จงเปนการยนยนวาโครงสรางทไดเสนอไวส าหรบอลคาลอยดเหลานถกตองแลว

45

Reaction conditions: (L) 10% Pd-C/acetonitrile

แผนภาพท 1.21 แสดงการสงเคราะห dehydroaporphines (111a และ 111b) 1.9.3 การสงเคราะห Oxophoebine (112a'), Oxocrebanine (112b') และ Uthongine (113) ในการสงเคราะห oxoaporphine alkaloids ใช Fremy’s salt ซงเปน oxidizing agent ทแรงในการท าปฏกรยา เรมจากน า noraporphine 110a' และ 110b' ท าปฏกรยากบสารละลายอมตวของ Fremy’s salt (ใน 4% NaHCO3) แลวตงกวนทอณหภมหองเปนเวลา 6 ชวโมง ได oxophoebine (112a') และ oxocrebanine (112b') ตามล าดบ ดงแผนภาพท 1.22 ในเปอรเซนตผลผลตทสง จากขอมล 1H-NMR พบสญญาณของโปรตอนทต าแหนง C-5 เปน doublet ท δ H 8.93 (J = 5.4 Hz) ส าหรบ oxophoebine (112a') [48] และ δ H 8.76 (J = 5.4 Hz) ส าหรบ oxocrebanine (112b') [26]

Reaction conditions: (M) Fremy's salt/methanol

แผนภาพท 1.22 แสดงการสงเคราะห oxoaporphine (112a' และ 112b')

หลงจากนนน า oxocrebanine (112b') ท าปฏกรยากบ iodomethane เกดผลตภณฑเปน uthongine (113) ดงแผนภาพท 1.23 ในเปอรเซนตผลผลตทสง จากการเปรยบเทยบขอมล 1H-NMR

46

ของสารทไดจากการสงเคราะหกบ uthongine [62] ทแยกไดจากธรรมชาตพบวาสอดคลองกน โดยมสญญาณท δ H 4.85 เปน singlet ของ N-methyl เปนขอมลทส าคญ จงเปนการยนยนวาโครงสรางของ uthongine ทไดเสนอไวกอนหนานถกตองแลว

Reaction conditions: (N) CH3I/acetonitrile

แผนภาพท 1.23 แสดงการสงเคราะห uthongine (113)

1.9.4 การสงเคราะห Thalihazine (115a), Secophoebine (115a'), 8-Methoxyuva- riopsine (115b), Uvariopsamine (115c) และ Noruvariopsamine (115c') โครงสรางของ phenanthrene alkaloid thalihazine (115a) และ secophoebine (115a') ถกสงเคราะหขนโดยผานขนตอนทส าคญคอการสรางวงแหวน C ของ aporphine alkaloid phoebine (110a) ในท านองเดยวกน 8-methoxyuvariopsine (115b) ถกสงเคราะหโดยผาน crebanine (110b) สวน uvariopsamine (115c) และ noruvariopsamine (115c') ถกสงเคราะหโดยผาน 1,2,8,9-tetramethoxyaporphine (110c) ส าหรบการเปดวงแหวน B ของ aporphine alkaloid แบงการสงเคราะหเปน 2 เสนทาง คอ เสนทางแรกใช methyl chloroformate และเสนทางท 2 ใช trifluoroacetic anhydride (TFAA) ดงรายละเอยดตอไปน เสนทางท 1 น า aporphine alkaloids ซงไดแก phoebine (110a), crebanine (110b) และ 1,2,8,9-tetramethoxyaporphine (110c) ท าปฏกรยากบ methyl chloroformate เปนผลใหวงแหวน B ถกเปด ได N-carbomethoxyphenanthrene 114a, 114b และ 114c ตามล าดบ ในเปอรเซนตผลผลตทสง (ยกเวน 114b ใหปรมาณผลผลตปานกลาง (45%)) หลงจากนนท า reduction ของ N-carbomethoxy groups กบ lithium aluminium hydride (LAH) ไดผลตภณฑเปน thalihazine (115a) [64], 8-methoxyuvariopsine (115b) [66] และ uvariopsamine (115c) [66] ตามล าดบ ดงแผนภาพท 1.24 จากการเปรยบเทยบขอมล 1H-NMR และ 13C-NMR ของอลคาลอยดทไดจากการสงเคราะห

47

กบอลคาลอยดทแยกไดจากธรรมชาตพบวาสอดคลองกนจงเปนการยนยนวาโครงสรางทไดเสนอไวส าหรบอลคาลอยดเหลานถกตองแลว

Reaction conditions: (O) ClCO2CH3, Et3N/ dichloromethane (110a, 110b, 110c 114a, 114b, 114c); (P) (CF3CO)2O, Et3N/ dichloromethane (110a, 110c 114a', 114c'); (Q) LiAlH4, reflux/THF (114a, 114b, 114c 115a, 115b, 115c); (R) Na2CO3, 90% MeOH-H2O (114a', 114c' 115a', 115c')

แผนภาพท 1.24 แสดงการสงเคราะห phenanthrene alkaloids 115a-115c'

เสนทางท 2 น า aporphine alkaloids ซงไดแก phoebine (110a) และ 1,2,8,9-tetramethoxyaporphine (110c) มาท าปฏกรยากบ trifluoroacetic anhydride (TFAA) เกดการเปดวงแหวน B ได N-trifluroacetylphenanthrene (114a') และ (114c') ตามล าดบ ในเปอรเซนตผลผลตทสง hydrolysis ดวย sodium carbonate ใหผลตภณฑเปน secophoebine (115a') [47] และ noruvariopsamine (115c') [66] ตามล าดบ ดงแผนภาพท 1.24 จากการเปรยบเทยบขอมล 1H-NMR และ 13C-NMR ของอลคาลอยดทไดจากการสงเคราะหกบอลคาลยดทแยกไดจากธรรมชาตพบวาสอดคลองกนจงเปนการยนยนวาโครงสรางทไดเสนอไวส าหรบอลคาลอยดเหลานถกตองแลว

48

1.9.5 การสงเคราะห 8-Hydroxystephenanthrine (118) ส าหรบการสงเคราะห 8-hydroxystephenanthrine (118) เรมจาก 8-benzyloxy-1,2-methylenedioxyaporphine (110d) ทสงเคราะหไดจาก microwave-assisted direct biaryl coupling ดงทไดกลาวมาแลวขางตน น ามาท าปฏกรยากบ conc. hydrochloric acid ได fibrecisine (116) ตามดวยการเปดวงแหวน B ของ aporphine โดยท าปฏกรยากบ methyl chloroformate เกดการเขาท าปฏกรยา 2 ต าแหนง คอ ต าแหนงของไนโตรเจนและออกซเจนของฟนอล ใหผลตภณฑ N,O-dicarbomethoxyphenanthrene (117) reduction ดวย lithium aluminium hydride (LAH) ไดผลตภณฑเปน 8-hydroxystephenanthrine (118) ดงแผนภาพท 1.25 จากขอมล 1H-NMR พบสญญาณโปรตอนเปน doublet ท δ H 8.61 (J = 8.4 Hz) แสดงต าแหนง H-5 ซงใกลเคยงกบ 8-hydroxystephenanthrine ทแยกไดจากธรรมชาต (δ H 8.58) [70] จงพอสรปไดวาโครงสรางของ 8-hydroxystephenanthrine ทไดเสนอขนกอนหนานถกตองแลว

Reaction conditions: (S) Conc.HCl, reflux/EtOH; (T) ClCO2CH3, Et3N/ dichloromethane; (U) LiAlH4, reflux/THF

แผนภาพท 1.25 แสดงการสงเคราะห 8-hydroxystephenanthrine (118)

1.9.6 การสงเคราะห 11-Methoxylettowianthine (130) วธแรกส าหรบการสงเคราะหอลคาลอยดในกลม telisatin-type ถกอธบายโดย Castedo และคณะ [38] ในป 1982 ซงเกดผาน photocyclization ส าหรบในงานวจยนไดพฒนาวธการสงเคราะห 11-methoxylettowianthine (130) โดยอาศยปฏกรยา microwave-assisted direct biaryl

49

coupling เชนเดยวกบการสงเคราะหอะพอรฟนอลคาลอยดทกลาวมาแลวกอนหนาน โดยเรมจากการเตรยม 2-iodo-3-methoxyphenylacetic acid (126) กอน น า 3-hydroxybenzaldehyde (119) มาท าปฏกรยากบ mercuric acetate ได acetoxymercury aldehyde 120 ตามดวยการเกดปฏกรยากบ iodine ให iodobenzaldehyde 121 หลงจากนนท าปฏกรยากบ dimethyl sulfate ได methoxybenzaldehyde 122 reduction ของ methoxybenzaldehyde 122 ดวย sodium borohydride ให benzyl alcohol 123 ซงถกเปลยนเปน benzyl chloride 124 ดวย thionyl chloride การท าปฏกรยากบ sodium cyanide ให benzyl cyanide 125 ซงถก hydrolyse ดวย potassium hydroxide ไดผลตภณฑเปน 2-iodo-3-methoxyphenylacetic acid (126) ดงรปท 1.26

Reaction conditions: (A) Hg(OAc)2, CH3CO2H, reflux/EtOH-H2O; (B) I2, KI/H2O; (C) (CH3)2SO4, NaOH/H2O; (D) NaBH4/EtOH; (E) SOCl2, pyridine, reflux/chloroform; (F) NaCN, KI, reflux /H2O-acetone; (G) KOH, reflux /EtOH-H2O

แผนภาพท 1.26 แสดงการสงเคราะห 2-iodo-3-methoxyphenylacetic acid (126)

น า 2-iodo-3-methoxyphenylacetic acid (126) มาท าปฏกรยากบ thionyl chloride ได acid chloride ซงท าปฏกรยากบ amine 103a ได amide 127 ซงถกเปลยนเปน dihydroisoquinoline 128 ดวยปฏกรยา Bischler-Napieralski จากการศกษาพบวา 1-(2-iodophenyl)-5,6-dihydropyrrolo[2,1-a]-isoquinoline-2,3-dione (129) สามารถเตรยมไดจากปฏกรยาระหวาง dihydroisoquinoline 128 กบ oxalyl chloride ในสภาวะทม triethylamine เปนเบส [72] ขนตอนสดทายเกดการปดวงแหวน C ของ 129 โดยใช palladium(II)acetate, ligand B, potassium carbonate

50

ใน dimethylacetamide (DMA) ผาน microwave-assisted direct biaryl coupling โดยใชเวลา 5 นาท ได 11-methoxylettowianthine (130) ซงใหเปอรเซนตผลผลตคอนขางต า (26%) อาจเนองมาจากความเกะกะของหมแทนทต าแหนง C-11 ดงแผนภาพท 1.27 จากการเปรยบเทยบขอมล 1H-NMR และ 13C-NMR ของอลคาลอยดทไดจากการสงเคราะหกบอลคาลยดทแยกไดจากธรรมชาตพบวาสอดคลองกนจงเปนการยนยนวาโครงสรางทไดเสนอไวส าหรบ 11-methoxylettowianthine ถกตองแลว [73]

Reaction conditions: (H) (i) SOCl2ม reflux/benzene; (ii) 10% NaHCO3/chloroform; (I) POCl3, reflux/benzene; (J) oxalyl chloride, Et3N/CH2Cl2; (K) Pd(OAc)2, pivalic acid, ligand B, K2CO3, microwave /DMA

แผนภาพท 1.27 แสดงการสงเคราะห 11-methoxylettowianthine (130)

1.9.7 การสงเคราะห Homoaporphine alkaloids ส าหรบอลคาลอยดในกลมของ homoaporphine ถอวามความนาสนใจมากทงดานโครงสรางและความสามารถในการออกฤทธทางชวภาพ ปจจบนมเพยงคณะวจยของ Chaudhary และ Harding ทรายงานการสงเคราะหอลคาลอยดกลมนโดยเกด Pd-mediated intramolecular direct arylation ผานกระบวนการไมโครเวฟเปนครงแรกในป 2011 [76] และใช tricyclohexylphosphine tetrafluoroborate เปน ligand ซงแนวคดเรมแรกของคณะวจยเรามงหวงทจะสงเคราะห

51

homoaporphine alkaloids ขนเปนครงแรก แตเนองจากอปสรรคทางดานสารตงตนทมจ ากดและสภาวะการทดลองยงไมแนนอนจงท าใหการรายงานการสงเคราะหอลคาลอยดกลมนไดรบการตพมพกอนโดย Chaudhary และ Harding ดงทไดกลาวมาแลว ดงนนคณะวจยของเราจงท าการสงเคราะห homoaporphine โดยอางองงานวจยของ Harding พบวาไดสารผลตภณฑ 2 ตว คอ 1,2-dimethoxy-10,11-methylenedioxyhomonoraporphine (140) และ homonantenine (141) ดงรปท 1.46 ซงจะน าไปทดสอบการออกฤทธตานเซลลมะเรงชนดตางๆ

รปท 1.46 รปแสดงโครงสรางทางเคมของ homoaporphine alkaloids ส าหรบการสงเคราะหเรมตนจาก phenethylamines 103b และ 103c ท าปฏกรยากบ bromoacid 131 ให amides 132a และ 132b ตามล าดบ จากนนท าปฏกรยา Bischler-Napieralski ของ amides 132a และ 132b ไดเปน dihydroisoquinolines 133a และ 133b ซงท าปฏกรยา reduction ตอกบ sodium borohydride ได tetrahydroisoquinoline 134a และ 134b จากนนจงใสหมปองกนบนไนโตรเจนส าหรบ 134a ดวยหม trifluoroacetyl, carbomethoxy, formyl และ Boc ให 135a, 135b, 135c และ 135d ตามล าดบ สวน tetrahydroisoquinoline 134b ใชหม Boc ให 135e โดยสารสงเคราะหทงหมดถกเตรยมขนเปนสารตงตนในการท าปฏกรยา cyclisation ดงแผนภาพท 1.28

52

Reaction conditions: (A) (i) SOCl2, reflux/benzene; (ii) 10% NaHCO3/chloroform; (B) POCl3, reflux/benzene; (C) NaBH4/ethanol; (D) (CF3CO)2O, Et3N/ dichloromethane (134a 135a); (E) ClCO2CH3, Et3N/chloroform (134a 135b); (F) formic acid, DCC/dichloromethane (134a 135c); (G) (Boc)2O, DMAP/dichloromethane (134a, 134b 135d, 135e)

แผนภาพท 1.28 แสดงการสงเคราะหสารตงตนส าหรบปฏกรยา cyclisation 135a-135e ในการศกษาปฏกรยาการปดวงแหวน C ของ homoaporphine alkaloids คณะวจยพยายามท าการสงเคราะหในหลายสภาวะ (conditions) เพอใหเกดผลตภณฑปดวงทตองการในปรมาณทสง โดยเกดผาน microwave-assisted direct arylation ของสารตงตน 135 ซงมการปรบเปลยนหมแทนทต าแหนง R1, R2 และหมปองกนทไนโตรเจนต าแหนง R3 รวมถง ligand, ตวท าละลาย และเวลาทใชส าหรบเกดปฏกรยาดงตารางท 1.5 ตารางท 1.5 แสดงการสงเคราะห homoaporphine โดยเกด microwave-assisted direct arylation

Reaction conditions: (H) Pd(OAc)2, pivalic acid, ligand, K2CO3, microwave/solvent

53

Entry R1 R2 R3 Ligand Solvent Time (min)

Yield (%)

136 137 138 1 OCH3 OCH3 COCF3 B DMA 15 15 19 - 2 OCH3 OCH3 COCF3 D DMA 15 15 19 10 3 OCH3 OCH3 COCF3 A DMA 5 14 30 - 4 OCH3 OCH3 COCF3 C DMA 7 - 32 - 5 OCH3 OCH3 COCF3 E DMA 5 16 30 - 6 OCH3 OCH3 COOCH3 B DMA 7 - 58 - 7 OCH3 OCH3 COOCH3 D DMA 15 - ~100 - 8 OCH3 OCH3 COOCH3 E DMA 5 - 87 - 9 OCH3 OCH3 CHO E DMA 5 - ~100 - 10 OCH3 OCH3 BOC E DMA 5 - - 55 11 OCH3 OCH2Ph BOC D DMA 20 - - 54 12 OCH3 OCH2Ph BOC B DMA 15 - - 49 13 OCH3 OCH2Ph BOC D DMSO 15 - - ~100

จากการสงเคราะหพบวา เมอพจารณาตารางท 1.5 (entry 1) เกดสารผลตภณฑ 2 ตวททราบโครงสราง คอ ตวทปดวงแหวน C (136, 15%) และผลตภณฑทเกดจาก debromination (137a, 19%) แยกสาร 2 ตวออกจากกนโดยท า column chromatography นอกจากนยงเกด by-product ทยงไมทราบโครงสราง 1 ตว ลกษณะเปนของแขงสเหลองสม (TLC ยอมตดส Ce(SO4)2 เปนสเหลองแยกออกจาก 136 โดยการตกผลกซ าใน EtOH) หลงจากนนมการปรบเปลยน ligand ชนดตางๆ จนได condition ทเหมาะสมส าหรบการปดวงโดยใชสารตงตน 135a (entry 5) เกดการปดวงดวย ligand E (PPh3) มตวท าละลายเปน dimethylacetamide (DMA) ใชเวลา 5 นาท ผานการฉายรงสไมโครเวฟ เกดสาร 2 ตว คอ ผลตภณฑทปดวงแหวน C (136, 16%) และผลตภณฑทเกดจาก debromination (137a, 30%) ซงแยกออกจากกนโดยท า column chromatography จากขอมล

54

1H-NMR ของ 136 พบสญญาณโปรตอนปรากฏ 2 singlets ท δH 6.97 และ 6.94 ของ 2 conformers แสดงต าแหนง H-12 ม integration รวมเปน 1 โปรตอน สวน debromination product (137a) ปรากฏสญญาณโปรตอนเปน doublet ท δH 6.73 (J = 7.8 Hz) แสดงต าแหนง H-3' และ δH 6.66 (J = 7.8 Hz) แสดงต าแหนง H-2' นอกจากนคณะวจยไดลองเปลยนสารตงตนทใชเปน 135b-135e เพอก าจดการเกด debromination แตพบวา ผลตภณฑทไดจากสารตงตนทมหมปองกนไนโตรเจนเปน carbomethoxy และ formyl คอสารทเกดจาก debromination เพยงอยางเดยวในเปอรเซนตผลผลตทสง ซงจากขอมล 1H-NMR ยงใหขอมลไมชดเจนเนองจากมหม carbonyl อยในโครงสราง จงน าสาร 137b และ 137c (entry 6, 7, 8 และ 9) มาท าปฏกรยา reduction กบ lithium aluminium hydride (LAH) เพอยนยนโครงสรางกลาว ดงแผนภาพท 1.29 ซงจากขอมล 1H-NMR หลงจากเกด reduction พบวามความสอดคลองกบโครงสราง กลาวคอ ปรากฏสญญาณโปรตอนเปน doublets ท δH 6.71 (J = 7.8 Hz) ของ H-3' และ δH 6.62 (dd, J = 7.8, 1.5 Hz) ของ H-2'

Reaction conditions: (F) LiAlH4, reflux/THF แผนภาพท 1.29 แสดงการสงเคราะห 139 เพอยนยนโครงสราง 137b และ 137c (entry 6 7 8 และ 9)

ในขณะทสารตงตนทมหมปองกนไนโตรเจนเปน Boc ไมเกดปฏกรยา ซงพจารณาจาก TLC และ 1H-NMR ทเหมอนกบสารตงตน หลงจากสงเคราะห homoaporphine (ตาราง 1.5, entry 5) ไดแลว ล าดบตอไปจงน า N-trifluoroacetylhomoaporphine (136, entry 5) มาท าปฏกรยา hydrolysis ในสภาวะทมเบสให secondary amine 140 ยนยนโครงสรางจากขอมล 1H-NMR, 13C-NMR และ mass spectrometry ซง secondary amine 140 ทสงเคราะหไดสามารถน าไปสการพฒนาเสนทางการสงเคราะห homonantenine (141) โดยเกดจากปฏกรยา methylation ของ secondary amine 140 กบ formaldehyde และ sodium cyanoborohydride ใหเปอรเซนตผลผลตทสง (89%) ดงแผนภาพ 1.30 สามารถยนยนโครงสรางโดยเปรยบเทยบ 1H-NMR และ 13C-NMR กบงานวจยของ Chaudhary

55

และ Harding ในป 2011 [76] เมอพจารณา 1H-NMR ปรากฏสญญาณโปรตอนเปน singlet ของ N-methyl ท δH 2.37 ซงเสนทางการสงเคราะหทคณะวจยพฒนาขนนใหปรมาณผลผลตของ homonantenine (141) มากกวาท Chaudhary และ Harding สงเคราะหได (66%)

Reaction conditions: (F) Na2CO3, reflux/90% MeOH-H2O; (G) 37% aq. formaldehyde (HCOH), NaCNBH4/acetonitrile

แผนภาพท 1.30 แสดงการสงเคราะห homonantenine (141)

1.9.8 การสงเคราะห Azafluoranthene alkaloids Azafluoranthenes เปนอลคาลอยดกลมเลก ๆ มสมาชกทถกคนพบแรกๆ ไดแก triclisine (147) ซงแยกมาจาก triclisia gilletii (Dewild) Staner (Menispermaceae) [31] รวมทง rufescine และ imeluteine ทถกคนพบโดย Cava และคณะในป 1972 และ 1975 จาก Abuta rufescens และ Abuta imene (Menispermaceae) ตามล าดบ [44] โครงสรางแสดงดงรป 1.47

รปท 1.47 รปแสดงโครงสรางทางเคมของ azafluoranthene alkaloids บางชนด ในงานวจยนคณะวจยของเรามงหวงทจะรายงานการสงเคราะห azafluoranthene alkaloids เปนครงแรกเชนเดยวกบ homoaporphine แตเนองจากอปสรรคในดานของสารตงตนและตองใชเวลาพอสมควรเพอทจะหาสภาวะทเหมาะสม จงท าใหในป 2013 น Ponnala และ Harding

56

[77] รายงานการสงเคราะห azafluoranthene alkaloids เปนครงแรกขนมากอนโดยเกดผาน direct arylation อยางไรกตาม ในงานวจยของ Ponnala และHarding สงเคราะห triclisine (147) ใน 2 ขนตอนหลงจากเกดการปดวงแหวน C แตส าหรบคณะวจยของเราเมอเกดปฏกรยาการปดวงแหวน C แลวสามารถสงเคราะห triclisine (147) ไดเลย และยงสามารถสงเคราะห azafluoranthene ทนาสนใจไดอก 1 ตว คอ 2,3-dihydrotriclisine (148) ดงแผนภาพ 1.31 แตยงมขอบกพรองในสวนของเปอรเซนตผลผลตทต ามาก

แผนภาพท 1.31 แสดงการสงเคราะห triclisine (147) โดยวธของ Pannala และ Harding เปรยบเทยบกบวธตามงานวจยน

ส าหรบขนตอนทส าคญในการสงเคราะห azafluoranthene alkaloids คอ การปดวงแหวน C โดยใช microwave-assisted direct arylation เชนเดยวกบอลคาลอยดกลมอนทกลาวมาแลว แตจะยากกวาเพราะวงแหวน C ของ azafluoranthene เปนวง 5 เหลยม จงเปนเรองททาทายและนาสนใจ การสงเคราะหเรมจาก homoveratylamine (103b) ท าปฏกรยากบ 2-iodobenzoic acid (142) ให amide 143 จากนนเกด Bischler-Napieralski ของ amide 143 ไดเปน dihydroisoquinoline 144 ซงท าปฏกรยา reduction กบ sodium borohydride ให tetrahydroisoquinoline 145 จากนนใส

57

หมปองกนไนโตรเจนของ 145 ดวยหม formyl และ carbomethoxy ไดเปนสารตงตนส าหรบท าการปดวง 146a และ 146b ตามล าดบ ดงแผนภาพท 1.32

Reaction conditions: (A) (i) SOCl2, reflux/benzene; (ii) 10% NaHCO3/chloroform; (B) POCl3, reflux/benzene; (C) NaBH4/ethanol; (D) formic acid, DCC/dichloromethane (145 146a); (E) ClCO2CH3, Et3N/chloroform (145 146b)

แผนภาพท 1.32 แสดงการสงเคราะห phenyltetrahydroisoquinoline intermediate 146 ส าหรบสารตงตนทใชในการปดวงแหวน C ของ azafluoranthene แบงเปน 2 ตว คอ ตวแรกมหมปองกนไนโตรเจนเปน formyl (146a) ตวท 2 เปน carbomethoxy (146b) ซงจากผลการสงเคราะหโดยใชสารตงตนเปน formyl (146a) ดงตารางท 1.6 (entry 2) พบวาสภาวะการเกดปฏกรยาโดยใช ligand D ม dimethylacetamide (DMA) เปนตวท าละลายเกดผานรงสไมโครเวฟ 5 นาท ใหสารผลตภณฑ 2 ตว คอ 2,3-dihydroazafluoranthene (148) และ by-product 150 ทเกดจาก hydroxylation ในขณะทถาใชเวลาในการเกดปฏกรยา 7 นาท (entry 6) จะเกด triclisine (147) ดวย สามารถยนยนโครงสรางของ 2,3-dihydrotriclisine (148) โดย 1H-NMR, 13C-NMR, HMQC และ HMBC สวน triclisine (147) ยนยนโครงสรางโดยพจารณาจากขอมลสเปกตรม 1H-NMR และ 13C-NMR เปรยบเทยบกบงานวจยของ Ponnala และ Harding [77] พบวาสอดคลองกน ซงในงานวจยนเรามงหวงทจะสงเคราะห triclisine (147) และ 2,3-dihydrotriclisine (148) จงพยามยามปรบเปลยนสภาวะการทดลองเพอก าจด by-product 150 ออก จากตารางท 1.6 พบวาไมสามารถก าจด by-product 150 ได ดงนนสภาวะตาม entry 6 จงเหมาะสมทสด ตอมาจงท าการสงเคราะหเลยนแบบงานวจยของ Ponnala และHarding เพอศกษาดวาจะยงคงเกด by-product หรอไม โดยใชสารตงตน

58

เปน carbomethoxy 146b ท าปฏกรยาโดยใช ligand B ในตวท าละลาย dimethyl sulfoxide (DMSO, entry 10) และ dimethyl acetamide (DMA, entry 9) เกดผานรงสไมโครเวฟ 5 นาท ใหผลการทดลองทเหมอนกนคอ สามารถปดวง azafluoranthene ไดสาร 149 แตกยงคงม by-product 150b เกดขน ซงถอเปนอปสรรคส าคญในการสงเคราะหสารกลมน โดยคาดวา hydroxylation ทเกดขนนาจะมาจากความชนของสภาวะการทดลองซงตองท าการพฒนาวธการสงเคราะหตอไป ตารางท 1.6 แสดงการสงเคราะห azafluoranthene โดยเกด microwave-assisted direct arylation

Reaction conditions: (F) Pd(OAc)2, pivalic acid, ligand, K2CO3, microwave/solvent

Entry R Ligand Solvent Time (min)

Yield (%)

147 148 149 150a/150b 1 CHO B DMA 5 - 13 - 13 2 CHO D DMA 5 - 16 - 12 3 CHO A DMA 5 - 16 - 10 4 CHO C DMA 5 - 15 - 15 5 CHO E DMA 5 - 15 - 15 6 CHO D DMA 7 4 17 - 28 7 CHO B DMSO 5 - 18 - 36 8 CHO D DMSO 5 - 18 - 36 9 COOCH3 B DMA 5 - - 21 42

10 COOCH3 B DMSO 5 - - 21 42

59

1.10 การทดสอบฤทธทางชวภาพของอลคาลอยดและการประเมนผล การศกษาฤทธทางชวภาพ (bioactive activity) ของอลคาลอยดทสงเคราะหไดในงานวจยนท าการทดสอบโดยศนยพนธวศวกรรมและเทคโนโลยชวภาพแหงชาต (National Center for Genetic Engineering and Biotechnology, BIOTEC) ส าหรบฤทธยบย งการเจรญเตบโตของเซลลมะเรง 3 ชนด ไดแก มะเรงชองปาก (oral cavity cancer-KB) มะเรงเตานม (breast cancer-MCF7) และมะเรงปอด (small cell lung cancer-NCI-H187) รวมถงฤทธยบย งเชอมาลาเรย (anti-malaria; Plasmodium falciparum) สวนฤทธตานจลชพ (antimicrobial activity) ท าการทดสอบโดยภาควชาจลชววทยา คณะวทยาศาสตร มหาวทยาลยศลปากร นครปฐม ซงอลคาลอยดทน ามาท าการทดสอบความเปนพษตอเซลลมะเรงในงานวจยนมทงหมด 17 ตว และอลคาลอยดทน ามาทดสอบความเปนพษตอเชอมาลาเรยมทงหมด 4 ตว โครงสรางแสดงดงรปท 1.48

Compounds R1 R2 R3 R4 R5 R6 R7 R8 110a (Phoebine) OCH3 OCH3 OCH3 OCH2O H CH3 - 110a' (Norphoebine) OCH3 OCH3 OCH3 OCH2O H H - 110b (Crebanine) H OCH2O H OCH3 OCH3 CH3 - 111a (Dehydrophoebine) OCH3 OCH3 OCH3 OCH2O H CH3 - 111b (Dehydrocrebanine) H OCH2O H OCH3 OCH3 CH3 - 112a' (Oxophoebine) OCH3 OCH3 OCH3 OCH2O H - - 112b' (Oxocrebanine) H OCH2O H OCH3 OCH3 - - 115a (Thalihazine) OCH3 OCH3 OCH3 OCH2O H - CH3

60

Compounds R1 R2 R3 R4 R5 R6 R7 R8 115a' (Secophoebine) OCH3 OCH3 OCH3 OCH2O H - H 115b (8-Methoxyuvariopsine) H OCH2O H OCH3 OCH3 - CH3 115c (Uvariopsamine) H OCH3 OCH3 H OCH3 OCH3 - CH3 115c' (Noruvariopsamine) H OCH3 OCH3 H OCH3 OCH3 - CH3 118 (8-Hydroxystephenanthrine) H OCH2O H H OH - CH3

รปท 1.48 รปแสดงโครงสรางทางเคมของอลคาลอยดทน ามาทดสอบ ความเปนพษตอเซลลมะเรงและความเปนพษตอเชอมาลาเรยในมนษย

(cytotoxic activities against human cancer cell lines and Plasmodium falciparum )

การทดสอบความเปนพษตอเซลลมะเรงในมนษย (cytotoxic activities against human cancer cell lines) คณะวจยท าการศกษาเซลลมะเรง 3 ชนดคอ เซลลมะเรงชองปาก เซลลมะเรงเตานม และเซลลมะเรงปอด ซงจากการประเมนผลความเปนพษตอเซลลมะเรงในมนษยทง 3 ชนดของอลคาลอยดท งหมด 17 ตว ไดผลการทดสอบดงนคอ อลคาลอยดทมความเปนพษตอเซลลมะเรงชองปาก (KB) ในระดบดมาก (strong activity) ไดแก uthongine (113) dehydrocrebanine (111b) และ 8-methoxyuvariopsine (115b) มคา IC50 เทากบ 4.77, 8.63 และ 13.75 μM ตามล าดบ สวนอลคาลอยดทมความเปนพษตอเซลลมะเรงเตานม (MCF7) ในระดบดมาก ไดแก uthongine (113) และ dehydrocrebanine (111b) มคา IC50 เทากบ 3.05 และ 10.34 μM ตามล าดบ ในขณะทอลคาลอยดทมความเปนพษตอเซลลมะเรงปอด (NCI-H187) ในระดบดมาก มเพยงตวเดยว คอ dehydrocrebanine (111b) มคา IC50 เทากบ 13.04 μM รายละเอยดแสดงดงตารางท 1.7

61

ตารางท 1.7 ตารางแสดงความเปนพษตอเซลลมะเรงชองปาก (oral cavity cancer-KB) เซลลมะเรงเตานม (breast cancer-MCF7) เซลลมะเรงปอด (small cell lung cancer-NCI-H187) และเชอมาลาเรย (anti-malaria; Plasmodium falciparum) ของอลคาลอยดทสงเคราะหไดในงานวจยน

a Positive control b IC50 = ความเขมขนของสารทออกฤทธยบย งการเจรญของเชอหรอเซลลได 50%

Compounds

Cytotoxicity (IC50, μM)b KB

(oral cavity cancer)

MCF7 (breast cancer)

NCI-H187 (small cell lung

cancer)

Plasmodium falciparum

(anti-malaria) 110a (Phoebine) Inactive Inactive Inactive - 110a' (Norphoebine) 29.40 65.34 91.76 - 110b (Crebanine) Inactive Inactive 100.92 - 111a (Dehydrophoebine) 22.62 27.30 Inactive - 111b (Dehydrocrebanine) 8.63 10.34 13.04 - 112a' (Oxophoebine) Inactive Inactive Inactive - 112b' (Oxocrebanine) Inactive Inactive Inactive - 113 (Uthongine) 4.77 3.05 26.29 - 115a (Thalihazine) 38.29 Inactive 40.68 - 115a' (Secophoebine) 13.67 22.60 23.58 - 115b (8-Methoxyuvariopsine) 13.75 28.49 42.61 - 115c (Uvariopsamine) 37.87 58.68 35.46 - 115c' (Noruvariopsamine) 44.06 112.26 37.36 - 118 (8-Hydroxystephenanthrine) 24.53 42.67 - 1.07 130 (11-Methoxylettowianthine) Inactive Inactive - 21.45 140 (Homonoraporphine) Inactive Inactive - 10.58 141 (Homonantenine) Inactive Inactive - 15.99 Ellipticinea 4.30 - 7.55 - Doxorubicina 1.36 15.23 0.195 - Tamoxifena - 20.83 - - Dihydroartemisininea - - - 1.63 nM Mefloquinea - - - 0.0285

62

จากตารางท 1.7 จะเหนวา phoebine (110a), oxophoebine (112a'), oxocrebanine (112b'), 11-methoxylettowianthine (130), homonoraporphine (140) และ homonantenine (141) ไมมความเปนพษตอเซลลมะเรงทง 3 ชนด (130, 140 และ 141 ไมไดทดสอบความเปนพษตอเซลลมะเรงปอด) ในขณะท dehydrocrebanine (111b) มความเปนพษตอเซลลมะเรงทง 3 ชนดในระดบทดมาก จากการเปรยบเทยบความสามารถในการตานเซลลมะเรงทง 3 ชนดของอลคาลอยดทถกสงเคราะหขนกบ positive control (ellipticine, doxorubicin และ tamoxifen) พบวา uthongine (113) และ dehydrocrebanine (111b) มความสามารถในการตานเซลลมะเรงเตานม (breast cancer-MCF7, IC50 เทากบ 3.05 และ 10.34 μM ตามล าดบ) ไดดกวา positive control (doxorubicin และ tamoxifen ม IC50 เทากบ 15.23 และ 20.83 μM ตามล าดบ) อยางไรกตามยงไมไดมการทดสอบความเปนพษตอเซลลปกตเพอศกษาผลขางเคยง (side effect) ซงจะตองศกษาเพมเตมในล าดบตอไป นอกจากนยงไดท าการทดสอบความเปนพษตอเชอมาลาเรย (Plasmodium falciparum) ของอลคาลอยดทสงเคราะหทงหมด 4 ตว ไดแก 8-hydroxystephenanthrine (118), 11-methoxylettowianthine (130), homonoraporphine (140) และ homonantenine (141) ไดผลการทดสอบดงนคอ อลคาลอยดทมความเปนพษตอเชอมาลาเรย (Plasmodium falciparum) ในระดบดมาก (strong activity) ไดแก 8-hydroxystephenanthrine (118) และ homonoraporphine (140) โดยมคา IC50 เทากบ 1.07 และ 10.58 μM ตามล าดบ สวน 11-methoxylettowianthine (130) และ homonantenine (141) มความเปนพษตอเชอมาลาเรยในระดบปานกลาง (moderate activity) โดยมคา IC50 เทากบ 21.45 และ 15.99 μM ตามล าดบ แตจากการเปรยบเทยบความสามารถในการยบย งเชอมาลาเรยของอลคาลอยดทถกสงเคราะหขนกบ positive control (dihydroartemisinine และ mefloquine) พบวายงไมมสารตวใดทมความสามารถในการยบย งเชอมาลาเรยไดดกวา positive control (dihydroartemisinine และ mefloquine ม IC50 เทากบ 1.63 nM และ 0.0285 μM ตามล าดบ) นอกจากนแลวคณะวจยยงทดสอบฤทธตานจลชพ (antimicrobial activity) ของอลคาลอยดทงหมด 13 ตว ซงเชอจลชพททดสอบม 6 ชนด ไดแก Bacillus cereus, Bacillus subtilis, Candida albicans, Escherichia coli, Staphylococcus aureus และ Salmonella typhi ดงตารางท 1.8 พบวา secophoebine (115a') แสดงฤทธตานเชอแบคทเรย Bacillus cereus และ Bacillus subtilis ในระดบทด มคา MIC เทากบ 64 μg/ml ของทง 2 ชนด ในท านองเดยวกนกบ 8-methoxyuvariopsine (115b) ทแสดงฤทธตานเชอแบคทเรย Bacillus subtilis ในระดบทด มคา MIC

63

เทากบ 64 μg/ml และ oxophoebine (112a') แสดงฤทธตานเชอแบคทเรย Staphylococcus aureus ในระดบทด มคา MIC เทากบ 64 μg/ml เชนเดยวกน ตารางท 1.8 ตารางแสดงฤทธตานจลชพ (antimicrobial activity) ของอลคาลอยดทสงเคราะหได

Compounds Bacteria/fungi MIC (μg/ml)a

B. cereus B. subtilis C. albicans E. coli S. aureus S. typhi 110a 128 128 >512 512 512 512 110a' 128 128 >512 512 256 512 110b 512 256 >512 >512 >512 >512 111a >512 >512 >512 >512 >512 >512 111b >512 >512 >512 >512 >512 >512 112a' 512 512 >512 128 64 >512 112b' 128 512 >512 >512 512 >512 113 >512 >512 >512 >512 >512 >512 115a 128 128 >512 256 256 512

115a' 64 64 128 >512 >512 >512 115b 128 64 >512 256 512 256 115c >512 >512 >512 >512 >512 >512 115c' 512 512 >512 >512 512 >512

a MIC = ความเขมขนต าสดทออกฤทธยบย งการเจรญของเชอหรอเซลลตงแต 90% 1.11 บทสรป โดยสรปแลวในงานวจยนคณะวจยท าการสงเคราะหอลคาลอยดทงหมด 20 ตว แบงเปนอลคาลอยดทพบในธรรมชาต 16 ตว และอลคาลอยดทไมพบในธรรมชาตอก 4 ตว ความถกตองของโครงสรางของอลคาลอยดทพบในธรรมชาตทง 16 ตวซงมผเสนอไวกอนหนานจงไดรบการยนยนจากงานวจยน การสงเคราะหอลคาลอยดมขนตอนทส าคญคอ การปดวงแหวน C โดยอาศยปฏกรยา microwave-assisted direct biaryl coupling ซงใหปรมาณผลผลตทสง จากนนน าอลคาลอยดทสงเคราะหไดเหลานไปทดสอบการออกฤทธทางชวภาพ พบวา uthongine (113) และ dehydrocrebanine (111b) มความสามารถในการตานเซลลมะเรงเตานมชนด MCF7 มคา IC50 เทากบ 3.05 และ 10.34 μM ตามล าดบ ซงดกวา positive control ซงไดแก doxorubicin และ tamoxifen ทมคา IC50 เทากบ 15.23 และ 20.83 μM ตามล าดบ และจากการทดสอบฤทธตานจลชพ

64

(antimicrobial activity) พบวา oxophoebine (112a'), secophoebine (115a') และ 8-methoxy uvariopsine (115b) แสดงฤทธตานเชอแบคทเรย Staphylococcus aureus, Bacillus cereus และ Bacillus subtilis ตามล าดบ ในระดบทด มคา MIC เทากบ 64 μg/ml เหมอนกนทง 3 ตว

65

บทท 2 การสงเคราะหและการศกษาสมบตทางชวภาพของ Piperazine-2,5-dione derivatives

2.1 บทน า

ในโครงการวจยนนอกจากสนใจสารในกลมอลคาลอยดดงทไดกลาวมาแลว ยงไดท าการศกษาสารในกลม piperazine-2,5-dione ซงพบวามฤทธทางชวภาพทด จากงานวจยของ ศ.ดร.พทยา ตนตเวชวฒกล และคณะ [78] ไดท าการศกษาโครงสรางและการออกฤทธทางชวภาพของ lansai C (151) และ lansai D (152) ซงเปนอนพนธของ piperazine-2,5-dione ทแยกมาจาก Streptomyces SUC1 โดยเปน endophyte ทอยบนรากอากาศของตนไทร ดงรปท 2.1 ส าหรบการศกษาทางเภสชวทยาของ lansai C และ lansai D พบวาสารสกดทงสองมฤทธในการตานการอกเสบ (anti-inflammatory) ในระดบทด ดงนนคณะผวจยจงมความสนใจทจะท าการสงเคราะห lansai C และ lansai D หรออนพนธตวอนๆเพอน าไปทดสอบฤทธตานการอกเสบ ซงรายละเอยดจะกลาวในล าดบตอไป

รปท 2.1 รปแสดงโครงสรางทางเคมของ lansai C (151) และ lansai D (152)

2.2 การอกเสบ (inflammation) การอกเสบ (inflammation) คอ ปฏกรยาตอบสนองทซบซอนของเนอเยอตอสงกระตนทเปนอนตราย การอกเสบไมใชอาการของการตดเชอแตเปนการตอบสนองของรางกายเพอตอตานจลชพกอโรคหรอตอปจจยอนๆ หากไมมการอกเสบเชอโรคจะไมถกก าจดและแผลจะไมถกรกษาใหหายสงผลใหเนอเยอเกดความเสยหายและอาจเปนอนตรายถงชวต แตการอกเสบทมมากเกนไปสามารถท าใหเกดโรคตาง ๆได เชน ขออกเสบรมาทอยด ไทรอยด และโรคมะเรง เปนตน ดวยเหตนรางกายจงตองมกระบวนการควบคมการอกเสบเกดขน ปฏกรยาทส าคญในการอกเสบ ไดแก การเปลยนแปลงของหลอดเลอด การเคลอนตวของเซลลเมดเลอดขาว (leukocyte) ออกจาก

66

หลอดเลอดเขาสเนอเยอทอกเสบและการเปลยนแปลงในหลายระบบของรางกาย ซงการอกเสบจะเปนภาวะทท าใหเกดอาการปวด บวม แดง และรสกรอน ณ บรเวณทมการอกเสบเกดขน ส าหรบการใชยาเพอลดการอกเสบตองใชยากลมทเรยกวา “ยาตานการอกเสบ” (anti-inflammatory drug) ดงรายละเอยดตอไปน [79] ยาทใชในการรกษาและควบคมอาการอกเสบ (anti-inflammatory drugs) คอ ยาทใชลดการอกเสบตางๆ ซงจะแสดงอาการปวด บวม แดง และบางครงอาจมไขรวมดวย การอกเสบมสาเหตหลายอยาง ไดแก เกดจากโรคตดเชอ แบคทเรย สารเคม ความรอน การกระทบกระเทอนตอเนอเยอในรางกายอยางรนแรง ความผดปกตทางระบบภมคมกน โดยทวไปยาทใชรกษาอาการอกเสบในปจจบนแบงเปน 2 กลม คอ Steroidal anti-inflammatory drugs (SAIDs) และ Nonsteroidal anti-inflammatory drugs (NSAIDs) ซงมกลไกยบย งการท างานของเอนไซม cyclooxygenase (COX) ท าใหลดการสรางสารเหนยวน าตางๆทท าใหเกดการอกเสบในรางกายโดยเฉพาะ prostaglandin E2 (PGE2)

2.2.1. ยาตานการอกเสบชนดสเตยรอยด (Steroidal anti-inflammatory drugs: SAIDs) Steroidal anti-inflammatory drugs (SAIDs) ใชลดการอกเสบทไมไดเกดจากการตดเชอแบคทเรย แตเนองจากยากลมนมอาการขางเคยงมากและรนแรง ควรใชภายใตการดแลของแพทย ยาสเตยรอยดนจงถกจ ากดการใชและจดเปน “ยาควบคมพเศษ” ตามกฎหมาย เชน prednisolone acetate (153) และ dexamethasone (154) โดยโครงสรางของยาชนดดงกลาวแสดงดงรปท 2.2

รปท 2.2 รปแสดงโครงสรางทางเคมของยาในกลม steroidal anti-inflammatory drugs

ไดแก prednisolone acetate (153) และ dexamethasone (154)

2.2.2. ยาตานการอกเสบชนดไมใชสเตยรอยด (Nonsteroidal anti-inflammatory drugs: NSAIDs)

67

Nonsteroidal anti-inflammatory drugs (NSAIDs) เปนยากลมทแพทยนยมเลอกใช มคณสมบต 3 ประการคอ ลดการอกเสบ ลดไข แกปวด สามารถน ามาใชในการรกษาโรคขออกเสบหลายชนด ทส าคญและพบบอย คอ โรคขอเสอม (Osteoarthritis) โรคขออกเสบรมาทอยด (Rheumatoid arthritis) และโรคเกาต (Gout) เปนตน โดยยาในกลมนแบงออกเปน 2 ประเภท คอ Nonselective NSAIDs และ Selective NSAIDs [80], [81] 2.2.2.1 Nonselective NSAIDs Nonselective NSAIDs คอ ยาทยบย งทงเอนไซมชนด cyclooxygenase-1 (COX-1) และ เอนไซมชนด cyclooxygenase-2 (COX-2) ซงการทยาในกลมนยบย งเอนไซมไดทงสองชนด ท าใหสงผลระคายเคองตอกระเพาะอาหาร ยากลมนทส าคญ ไดแก piroxicam (155), ibuprofen (156), aspirin (157), indometacin (158) และ diclofenac (159) โครงสรางของยาชนดดงกลาวแสดงดงรปท 2.3

รปท 2.3 รปแสดงโครงสรางยาในกลม Nonselective NSAIDs ไดแก piroxicam (155), ibuprofen (156), aspirin (157), indometacin (158) และ diclofenac (159)

2.2.2.2 Selective NSAIDs

Selective NSAIDs คอ ยาทเลอกยบย งเฉพาะเอนไซมชนด cyclooxygenase-2 (COX-2) ซงจะระคายเคองตอกระเพาะอาหารนอยกวายาในกลม Nonselective NSAIDs ดงนนผปวยทมประวตโรคกระเพาะควรจะไดรบยาในกลมน ยาในกลมนทส าคญ เชน celecoxib (160) โครงสรางของยาแสดงดงรปท 2.4

68

รปท 2.4 รปแสดงโครงสรางยาในกลม Selective NSAIDs เชน celecoxib (160)

จากขอมลขางตนพบวา ยาทใชในปจจบนสงผลขางเคยงทคอนขางรนแรงตอระบบทางเดนอาหาร ระบบหวใจ ระบบหลอดเลอด ระบบสมดลเกลอแร ระบบการท างานของไต ระบบผวหนง และระบบประสาท อาการขางเคยงดงกลาวท าใหความสนใจผลตภณฑจากธรรมชาตมเพมมากขน ซงรายละเอยดจะกลาวในล าดบตอไป

2.3 โครงสรางของ Piperazinediones

Piperazinediones หรอ diketopiperazines (DKP) เปน cyclic peptides ทมโครงสรางเลกทสด จากรายงานการวจยพบวา 90% ของแบคทเรยแกรมลบ (Gram-negative bateria) จะสรางสารในกลมของ diketopiperazines ขน รวมทงยงพบวาสารกลมนสามารถแยกจากแบคทเรยแกรมบวก (Gram-positive bacteria) และเชอรา (fungi) ไดอกดวย [82] ซง diketopiperazines ถกคนพบครงแรกในป 1880 และตอมาไดมการศกษาตอโดย E. Fischer ผซงท าการสงเคราะหโมเลกลงายๆจ านวนมาก เชน cyclic dipeptide [83] ส าหรบโครงสรางพนฐานของ piperazinediones แสดงดงรปท 2.5 เมอพจารณาจากโครงสรางพนฐานจะเหนวาประกอบไปดวยไนโตรเจน 2 อะตอม ทเปนสวนของวง piperazine เชอมตอกบหม carbonyl 2 หม และจากการศกษาเพมเตมพบวา piperazinediones สามารถมโครงสรางทเปนไปได 3 ไอโซเมอร คอ piprazine-2,3-dione, piperazine-2,5-dione และ piperazine-2,6-dione ดงรปท 2.5 ซงความแตกตางของแตละไอโซเมอรอยทต าแหนงของหม carbonyl โดยมโครงสรางหลกเปนวง piperazine ส าหรบในงานวจยนคณะวจยสนใจศกษาไอโซเมอรในรปของ piperazine-2,5-dione ดงนน รายละเอยดตอไปจะกลาวถงฤทธทางชวภาพของ piperazine-2,5-dione derivatives ซงพบการรายงานฤทธทางชวภาพตางๆทนาสนใจ รวมถงฤทธตานการอกเสบในระดบทด

69

รปท 2.5 รปแสดงโครงสรางพนฐานของ piperazinediones 2.4 ฤทธทางชวภาพของ Piperazine-2,5-dione derivatives

Piperazine-2,5-dione derivatives เปนสารอกกลมหนงทมความนาสนใจอยางมากส าหรบการสงเคราะหทางเคมอนทรย เนองจากมความหลากหลายทางโครงสรางและการออกฤทธทางชวภาพ จากการศกษาทางเภสชวทยาของสารในกลม piperazine-2,5-diones พบวา สารหลายตวมฤทธทางชวภาพทด ดงตวอยางตอไปน

ป 2001 Folkes และคณะ [84] รายงานการสงเคราะห XR5118 (161) พรอมทงทดสอบฤทธยบย งการอดตนของเสนเลอด (plasminogen activator inhibitors-1, PAI-1) พบวา XR5118 (161) มความสามารถในการยบย ง PAI-1 ในระดบทด ซงมคา IC50 เทากบ 3.5 ± 0.19 μM โครงสรางแสดงดงรปท 2.6

รปท 2.6 รปแสดงโครงสรางทางเคมของ XR5118 (161)

ป 2006 Nicholson และคณะ [85] รายงานการแยก plinabulin (162) จาก Aspergillus sp. และตอมาในป 2010 Hayashi และคณะ [86] รายงานฤทธตานเซลลมะเรงใน Phase II clinical trials ของ plinabulin (162) เชนกน นอกจากนยงพบวา plinabulin (162) มความเปนพษตอเซลลมะเรงล าไสใหญชนด HT-29 มคา IC50 เทากบ 15 nM ดวย โครงสรางแสดงดงรปท 2.7

70

รปท 2.7 รปแสดงโครงสรางทางเคมของ plinabulin (162) ป 2007 Yao และคณะ [87] รายงาน piperazine-2,5-dione ตวใหมทแยกไดจาก marine fungus Gliocladium sp. คอ gliocladride (163) โครงสรางแสดงดงรปท 2.8 จากการทดสอบฤทธทางชวภาพพบวา gliocladride (163) แสดงความเปนพษตอเซลลมะเรงผวหนง (A375-S2 melanoma cell line) มคา IC50 เทากบ 3.86 μg/ml

รปท 2.8 แสดงโครงสรางทางเคมของ gliocladride (163)

ป 2008 ศ.ดร.พทยา ตนตเวชวฒกล และคณะ [78] ไดท าการศกษาโครงสรางและการออกฤทธทางชวภาพของสาร lansai A (164), lansai B (165), lansai C (151) และ lansai D (152) ซงเปนอนพนธของ piperazine-2,5-dione พบวา สารสกดทง 2 ตวมฤทธตานการอกเสบ (anti-inflammatory activity) ในระดบทด โดย lansai A-D เปนสารทแยกมาจาก Streptomyces sp. SUC1 ซงเปน endophyte ทอาศยอยในรากอากาศของตนไทร (Ficus benjamina) ดงรปท 2.9 และ 2.10

รปท 2.9 รปแสดงรากอากาศของตนไทร (Ficus benjamina) จากคณะวทยาศาสตร ม.ศลปากร วทยาเขตพระราชวงสนามจนทร จ. นครปฐม

71

รปท 2.10 รปแสดงโครงสรางทางเคมของ lansai A-lansai D ส าหรบการออกฤทธทางชวภาพอนๆของสารกลมน เชน albonoursin (166) ทแสดงฤทธยบย งการเจรญเตบโตของกอนเนองอกในหน โครงสรางแสดงดงรปท 2.11 นอกจากน piperazine-2,5-dione derivatives ยงถกใชในทางการแพทยส าหรบเปนยาปฏชวนะ (antibiotics) วคซน (vaccines) และใชในการรกษาโรคมะเรง (cancer therapy) ไดอกดวย [88]

รปท 2.11 รปแสดงโครงสรางทางเคมของ albonoursin (166) 2.5 การสงเคราะห Piperazine-2,5-dione (lansai D derivatives) ส าหรบการสงเคราะห piperazine-2,5-diones สามารถท าไดหลายวธ เชน cyclisation ของ dipeptide derivatives การเกด intramolecular ของ amine ทอยบน activated carbonyl groups cyclisation ของ N-pyruvoyl amino acid amides การเกด intramolecular Diels-Alder reaction และการสงเคราะหจาก α-haloacyl derivatives ของ amino acid esters เปนตน [88] จากการศกษาพบวามรายงานการสงเคราะหอนพนธของ lansai D รวมถงสารในกลม piperazine-2,5-diones อนๆ เปนจ านวนมากดงรายละเอยดตอไปน

72

ป 1974 Gallina และ Liberatori [89] รายงานการดดแปลงวธสงเคราะหของ Sasaki โดยใหเกดปฏกรยาทง monoarylidene และ monoalkylidene piperazine-2,5-diones ไดผลตภณฑเปน albonoursin (166) ดงแผนภาพท 2.1

แผนภาพท 2.1 แสดงการสงเคราะห albonoursin (166) ป 1987 Shin และคณะ [90] รายงานการสงเคราะห (3Z,6Z)-1-N-methylalbonoursin (172) แผนภาพท 2.2 และ (3Z,6E)-1-N-methylalbonoursin (176) แผนภาพท 2.3 โดยมสารตงตนเปน methyl 2-chloroacetylamino-2-pentenoate (169) ซง N-methylalbonoursin ถกแยกมาจากเซลลของ Streptomyces albus

แผนภาพท 2.2 แสดงการสงเคราะห (3Z,6Z)-1-N-methylalbonoursin (171)

73

แผนภาพท 2.3 แสดงการสงเคราะห (3Z,6E)-1-N-methylalbonoursin (176) ป 1990 Villemin และคณะ [91] รายงานการเกด condensation ของ 1,4-

diacetylpiperazine-2,5-dione (177) กบ benzaldehyde (168) โดยใช potassium fluoride บน alumina (Al2O3-KF) ภายใต microwave irradiation ไดผลตภณฑเปน Z-isomer ของ monoarylidene (178) ดงแผนภาพท 2.4 แตกรณนใหปรมาณผลผลตต ากวาในสภาวะ dry condensation ภายใต microwaves

แผนภาพท 2.4 แสดงการสงเคราะห monoarylidene (178) โดยเกด simple condensation และเมอใชปรมาณของ benzaldehyde (168) อยางนอย 2 equivalents พบวาจะเกด double condensation ปฏกรยาเกดการเขาทง 2 ดาน ไดผลตภณฑเปน diarylidene (179) ดงแผนภาพท 2.5 ดวย

แผนภาพท 2.5 แสดงการสงเคราะห diarylidene (179) โดยเกด double condensation

74

ป 2004 Cho และคณะ [92] รายงาน one-pot synthesis ของ 1,4-phenethylpiperazine-2,5-dione (181) โดยมสารตงตนเปน N-substituted 2-chloroamides (180) ดงแผนภาพท 2.6

แผนภาพท 2.6 แสดงการสงเคราะห 1,4-phenethylpiperazine-2,5-dione (181) ป 2009 Reymond และคณะ [93] รายงานการสงเคราะห 3-(aminomethyl)piperazine-2,5-dione (186) ซงถกสงเคราะหขนใน 4 ขนตอน เกดผาน peptide coupling ระหวาง CBz-protected L-asparagine (182) และ glycine methyl ester ให dipeptide 183 ตามดวยการเกด Oxidative Hofmann degradation ของ asparagine carboxamide side-chain โดยใช I,I-bis(trifluoroacetoxy)iodobenzene ตามดวยการเกด protection ของ primary amine ให Boc-derivative 184 หลงจากนนเกด hydrogenation และ intramolecular cyclisation ภายใตสภาวะเบส ได diketopiperazine 185 สดทายก าจดหม Boc ออกใหผลตภณฑเปน 3-(aminomethyl) piperazine-2,5-dione (186) ดงแผนภาพท 2.7

Reaction conditions: (A) EDA, HOBt, NMM, rt, 8 h/DMF-CH2Cl2 (1:1); (B) (i) I,I-bis (trifluoro- acetoxy)iodobenzene, pyridine, rt, 5 h/DMF-H2O; (ii) Boc2O, Et3N, rt, 8 h/MeOH; (C) (i) H2, Pd-C, rt, 90 min/MeOH; (ii) 5% aq NaHCO3, rt, 20 h; (D) CF3CO2H, 0 oC, 1 h

แผนภาพท 2.7 แสดงการสงเคราะห 3-(aminomethyl)piperazine-2,5-dione (186)

75

ในงานวจยนคณะวจยท าการสงเคราะห piperazine-2,5-dione derivatives โดยเกดผาน aldol condensation เปนปฏกรยาส าคญ ใชเบสเปน potassium tert-butoxide ทละลายอยใน tert-butyl alcohol ตามรายงานการวจยของ Gallina และ Liberatori [89] 2.6 แนวเหตผล ทฤษฎส าคญ หรอสมมตฐาน

จากงานวจยของ ศ.ดร.พทยา ตนตเวชวฒกลท าใหคณะวจยเลงเหนถงความนาสนใจของสารในกลม piperazine-2,5-diones ทแสดงฤทธตานการอกเสบทสงและมโครงสรางไดหลากหลาย แตการแยกสารดงกลาวจากธรรมชาตโดยตรงตองใชพชในปรมาณมาก ดงนนจงเกดแนวคดทจะท าการสงเคราะหอนพนธของ lansai D เนองจากมโครงสรางทงาย แลวน าสารสงเคราะหดงกลาวไปทดสอบฤทธตานการอกเสบพรอมทงศกษาผลขางเคยงทเกดขน ทางคณะผวจยจงมสมมตฐานวา การปรบเปลยนหมแทนทบน aromatic ring ของ lansai D derivatives นาจะมผลตอกลไกการออกฤทธตานการอกเสบ ดวยเหตนผวจยจงท าการสงเคราะหอนพนธของ lansai D โดยเกดผานปฏกรยา aldol condensation เปนปฏกรยาส าคญ ม glycine anhydride เปนสารตงตน หลงจากนนจะน าสารทสงเคราะหไดเหลานไปตรวจสอบฤทธตานการอกเสบเพอพสจนสมมตฐานดงกลาว

2.7 วตถประสงคของการวจย 1. เพอศกษาปฏกรยาส าหรบการสงเคราะหอนพนธของ piperazine-2,5-diones (lansai D derivatives)

2. เพอน า piperazine-2,5-dione derivatives ทสงเคราะหไดมาทดสอบฤทธตานการอกเสบ (anti-inflammatory activity) โดยมการปรบเปลยนหมแทนทภายในโครงสราง เพอศกษาวาหมแทนทมผลตอการออกฤทธทางชวภาพอยางไร

3. เพอศกษาความสมพนธระหวางโครงสรางทางเคมกบกลไกการออกฤทธ 2.8 ผลการทดลองและวจารณผลการทดลอง ส าหรบการสงเคราะหอนพนธของ piperazine-2,5-diones ในงานวจยนเกดผานปฏกรยา aldol condensation ซงเปนปฏกรยาทส าคญ โดยคณะวจยไดวางแผนการสงเคราะหออกเปน 2 เสนทางเพอใหไดสภาวะทเหมาะสม ดงน

76

เสนทางท 1 สงเคราะหอนพนธของ piperazine-2,5-diones โดยเรมจากปฏกรยา condensation ระหวาง glycine anhydride (187) กบ acetic anhydride เกดเปน 1,4-diacetylpiperazine-2,5-dione (188, 91.5 %) จากนนน า 188 ท าปฏกรยากบ benzaldehyde และ potassium tert-butoxide ทละลายอยใน tert-butyl alcohol (tBuOK-tBuOH) ได 1-acetyl-3-benzylidine piperazine-2,5-dione (189, 44.6%) และหากเสนทางการสงเคราะหนประสบผลส าเรจคณะวจยมแผนการสงเคราะหตอคอ น าสาร 189 ใสหมปองกนไนโตรเจนดวย Boc จากน นเกดปฏกรยา condensation ของ isobutyraldehyde ตามดวย N-methylation สดทายเกดปฏกรยา hydrolysis ดวยกรดเพอก าจดหม Boc ออก แตจากงานวจยในเสนทางน พบวา 1-acetyl-3-benzylidine piperazine-2,5-dione (189) ไมสามารถท าปฏกรยากบ di-tert-butyl dicarbonate (Boc2O) ได ดงนนในเสนทางการสงเคราะหนจงสงเคราะหไดแค สาร 189 ดงแผนภาพท 2.8 ดวยเหตนคณะวจยจงเปลยนเสนทางการสงเคราะหใหม ดงแผนภาพท 2.9

Reaction conditions: (A) Ac2O, 120-130 oC, 7 hrs.; (B) benzaldehyde, tBuOK-tBuOH/DMF; (C)

Boc2O; (D) isobutyraldehyde, tBuOK-tBuOH/DMF; (E) NaH, reflux/DMF; (F) CH3I, NaH; (G)

H+ แผนภาพท 2.8 แสดงการสงเคราะหอนพนธของ piperazine-2,5-dione โดยเกดผาน condensation

ของ benzaldehyde กอน

77

เสนทางท 2 สงเคราะหอนพนธของ piperazine-2,5-diones เรมจากปฏกรยา condensation ระหวาง

glycine anhydride (187) และ acetic anhydride เกด 1,4-diacetylpiperazine-2,5-dione (188, 91%) จากนนน า 188 ท าปฏกรยากบ isobutylaldehyde ได 4-acetyl-6-isobutylidine piperazine-2,5-dione (194, 99%) ตามดวยการเกด methylation ของ 194 กบ iodomethane ให 1-N-methyl-4-acetyl-6-isobutyridine piperazine-2,5-dione (195, 84 %) สดทายเกด aldol condensation ของสาร 195 กบ benzaldehyde ได piperazine-2,5-dione derivatives 193a และ 193b ใหเปอรเซนตผลผลต 45% และ 3% ตามล าดบ ดงแผนภาพท 2.9

Reaction conditions: (H) Ac2O, 120-130 oC, 7 h; (I) isobutyraldehyde, tBuOK-tBuOH/DMF; (J)

CH3I, NaH/DMF; (K) benzaldehyde, tBuOK-tBuOH/DMF

แผนภาพท 2.9 แสดงการสงเคราะหอนพนธของ piperazine-2,5-dione โดยเกดผาน condensation ของ isobutyraldehyde กอน

นอกจากนคณะวจยไดท าการสงเคราะหอนพนธของ piperazine-2,5-diones (lansai D derivatives) ตวอน ๆ ทมหมแทนทของ aryl groups บน C-3 ตางกน แสดงดงแผนภาพท 2.10 ซงถกเตรยมดวยวธทเหมอนเดม แตใช aromatic aldehyde ในขนตอนสดทายทตางกน

78

แผนภาพท 2.10 แสดงการสงเคราะหอนพนธของ lansai D

2.9 การทดสอบฤทธตานการอกเสบและการประเมนผล ส าหรบสารสงเคราะหในกลมของ lansai D derivatives คณะวจยน าสารอนพนธ 9 ตว (193, 196-203) ไปทดสอบการออกฤทธตานการอกเสบ (anti-inflammatory activity) พบวา 1-N-methyl-3-(3-bromo-5,6-dimethoxy benzylidine)-6-isobutylidine piperazine-2,5-dione (199) และ 1-N-methyl-3-(2-bromo-4,5-methylenedioxy benzylidine)-6-isobutylidine piperazine-2,5-dione (200) มความสามารถในการยบย งการสราง nitric oxide (NO) ใน murine leukaemic monocyte macrophage cells ซงถกกระตนดวย lipopolysaccharide (LPS) ดงแผนภมท 2.12 และเมอเพมความเขมขนจะเหนวาความสามารถในการยบย งการสราง nitric oxide (NO) กยงมมากขนสงเกตไดจากปรมาณของ nitrite ทลดลงตามล าดบ นนแสดงวา 199 และ 200 มความสามารถในการออกฤทธตานการอกเสบทด ซงเมอทดสอบเปรยบเทยบกบยาทใชในปจจบน (indometacin) ดงแผนภมท 2.12 พบวา lansai D derivatives 199 และ 200 มแนวโนมในการออกฤทธตานการอกเสบทดกวา เมอพจารณาจากโครงสรางดงแผนภมท 2.12 จะเหนวาสาร 199 และ 200 มหมโบรมนอยในโครงสราง จงคาดวาการออกฤทธตานการอกเสบของสารกลม lansai D derivatives ในงานวจยนนาจะเกยวของกบหมโบรมน ซงการยนยนเหตผลดงกลาวคงตองท าการศกษาตอไป

79

0102030405060

Nitri

te (μM

)

Lansai D derivatives (199, 200) (μg/ml)

Nitrite

แผนภมท 2.12 แผนภมแสดงการสราง nitrite โดย murine leukaemic monocyte macrophage cells ซงถกกระตนเปนเวลา 24 ชวโมง ดวย LPS อยางเดยว (control) และดวยสารสงเคราะห 199, 200 ทความเขมขนตางๆ (1.25-5.00 μg/ml) พรอมทงเปรยบเทยบกบยาทใชในปจจบน (indometacin)

020406080

100120

%Surv

ival

lansai D derivatives (199, 200) (μg/ml)

Viability

แผนภมท 2.13 แผนภมแสดงการรอดของเซลลปกต (viability) ส าหรบ199 และ 200

นอกจากนแลวย งไดท าการศกษาการมชวตรอดของเซลล (viability) หรอศกษาผลขางเคยง (side effect) ตอเซลลปกต พบวา lansai D derivatives 199 และ 200 รวมถงอนพนธตว

80

อนทสงเคราะหขนไมมความเปนพษตอเซลลปกต แสดงดงแผนภมท 2.13 ซงจากแผนภมท 2.13 จะเหนวาการรอดชวตของเซลลปกตอยในระดบเทยบเทากบ blank ซงไมท าลายเซลลปกตคอ ม %survival ประมาณ 100 % จงสรปวาสารสงเคราะหไมมความเปนพษตอเซลลปกต 2.10 บทสรป ส าหรบกระบวนการสงเคราะห lansai D derivatives (193, 196-203) เกดผานทงหมด 4 ขนตอน จากสารตงตนคอ glycine anhydride โดยใชปฏกรยา aldol condensation เปนปฏกรยาส าคญ ซงโมเลกลของ lansai D derivatives ทสงเคราะหขนทงหมด 9 ตวไดท าการทดสอบฤทธตานการอกเสบ (anti-inflammatory activity) และพบวา lansai D derivatives 199 และ 200 มความสามารถในการตานการอกเสบในระดบทด

81

บทท 3 การทดลอง

3.1 เครองมอและสารเคม จดหลอมเหลววดดวยเครอง Stuart Scientific SMP 1 โดยมไดปรบคา (uncorrected) Ultraviolet spectra วดจากสารละลายใน methanol ดวยเครอง Perkin Elmer Lambda 35 UV-VIS spectrophotometer Infrared spectra วดดวยเครอง Perkin Elmer Spectrum GX FT-IR spectrophotometer ในรป CH2Cl2-films, nujol และ KBr 1H-NMR และ 13C-NMR spectra วดดวยเครอง Bruker AVANCE 300 spectrometer (ทความถ 300 MHz ส าหรบ 1H-NMR และ 75 MHz ส าหรบ 13C-NMR) โดยใช CDCl3, CD3OD และ DMSO-d6 ในบางกรณเปนตวท าละลาย และใช tetramethylsilane (TMS) เปน internal standard Mass spectra วดดวยเครอง Hewlett Packard 5973 mass spectrometer 3.2 การสงเคราะห alkaloids 3.2.1 การสงเคราะห Aporphine alkaloids

2-(2-Bromo-4,5-methylenedioxyphenyl)-N-(2,3,4-trimethoxyphenethyl)acetamide (105a). A solution of 102 (17.30 g, 66.78 mmol) and 101 (14.70 g, 69.58 mmol) in xylene (150 ml) was refluxed for 2 hours with water removal with a Dean-Stark trap. The xylene was then removed under reduced pressure to give a residue which was dissolved in chloroform (200 ml). The

82

chloroform layer was washed with 5% hydrochloric acid (3x200 ml), water (300 ml), 10% sodium carbonate (3x200 ml) and then dried over anhydrous sodium sulfate. Removal of the solvent under reduced pressure gave a residue which was recrystallized from ethanol to give 105a as white crystals (14.90 g, 49%), mp 136-137 oC. IR (CH2Cl2-film) cm-1: 3318, 2940, 1650, 1602, 1495, 1481, 1233, 1100, 1036, 924, 799, 674. 1H-NMR (CDCl3) δ: 7.02 (1H, s, ArH), 6.78 (1H, s, ArH), 6.75 (1H, d, J = 8.4 Hz, ArH), 6.57 (1H, d, J = 8.4 Hz, ArH), 5.99 (2H, s, OCH2O), 5.82 (1H, br s, NH), 3.85 and 3.83 (9H, 2s, 3xOCH3), 3.57 (2H, s, CH2), 3.43 (2H, apparent q, J = 6.6 Hz, CH2), 2.72 (2H, t, J = 6.6 Hz, CH2).

13C-NMR (CDCl3) δ: 169.65, 152.55, 151.73, 147.73, 147.59, 142.15, 127.72, 124.65, 124.47, 115.34, 112.76, 111.04, 107.36, 101.89, 60.89, 60.67, 55.94, 43.70, 40.77, 29.47.

2-(6-Bromo-2,3-dimethoxyphenyl)-N-(3,4-methylenedioxyphenethyl)acetamide (105b). A mixture of thionyl chloride (13.30 g, 111.79 mmol) and 104a (12.33 g, 44.82 mmol) in benzene (70 ml) was refluxed for 1 hour. Romoval of the solvent under reduced pressure gave a residue which was dissolved in ethanol-free chloroform (150 ml) and added to a mixture of 103a (7.40 g, 44.80 mmol) in ethanol-free chloroform (35 ml) and 15% sodium hydrogen carbonate (150 ml). The mixture was stirred at room temperature for 2 hours. The chloroform layer was washed with 10% sodium hydrogen carbonate (3x200 ml), water (3x200 ml), 10% hydrochloric acid (3x200 ml) and water (3x200 ml), then dried over anhydrous sodium sulfate. Removal of the solvent under reduced pressure gave a residue which was recrystallized from ethanol to give 105b as a pale yellow solid (13.84 g, 87%), mp 164-166 oC. IR (CH2Cl2-film) cm-1: 3282, 2881, 1636, 1546, 1472, 1246, 1007, 924, 799, 595. 1H-NMR (CDCl3) δ: 7.28 (1H, d, J = 8.7 Hz, ArH), 6.76 (1H, d, J = 8.7 Hz, ArH), 6.65 (1H, d, J = 7.8 Hz, ArH), 6.58 (1H, d, J = 1.5 Hz, ArH), 6.51 (1H, dd, J =

83

7.8, 1.5 Hz, ArH), 5.91 (2H, s, OCH2O), 5.51 (1H, br s, NH), 3.86 (3H, s, OCH3), 3.80 (3H, s, OCH3), 3.75 (2H, s, CH2), 3.41 (2H, apparent q, J = 6.6 Hz, CH2), 2.66 (2H, t, J = 6.6 Hz, CH2). 13C-NMR (CDCl3) δ: 169.44, 152.31, 148.32, 147.69, 146.04, 132.56, 129.41, 127.97, 121.65, 115.79, 112.76, 109.08, 108.25, 100.81, 60.86, 55.88, 40.87, 38.23, 35.26.

2-(6-Bromo-2,3-dimethoxyphenyl)-N-(3,4-dimethoxyphenethyl)acetamide (105c). By the same procedure used to prepare 105b, 105c was obtained in 93% yield as a white solid, mp 132-134 oC. IR (CH2Cl2-film) cm-1: 3290, 2939, 1645, 1516, 1472, 1261, 1140, 1070, 1005, 937, 798. 1H-NMR (CDCl3) δ: 7.26 (1H, d, J = 8.7 Hz, ArH), 6.75 (1H, d, J = 8.7 Hz, ArH), 6.73 (1H, d, J = 8.4 Hz, ArH), 6.64 (1H, s, ArH), 6.63 (1H, d, J = 8.4 Hz, ArH), 5.52 (1H, br s, NH), 3.85 (6H, s, 2xOCH3), 3.84 (3H, s, OCH3), 3.79 (3H, s, OCH3), 3.75 (2H, s, CH2), 3.45 (2H, apparent q, J = 6.9 Hz, CH2), 2.70 (2H, t, J = 6.9 Hz, CH2).

13C-NMR (CDCl3) δ: 169.53, 152.22, 148.93, 148.35, 147.52, 131.40, 129.40, 127.79, 120.60, 115.73, 112.73, 111.93, 111.42, 60.79, 55.89, 55.84, 55.78, 40.85, 38.04, 35.07.

2-(2-Benzyloxy-6-bromophenyl)-N-(3,4-methylenedioxyphenethyl)acetamide (105d). By the same procedure used to prepare 105b, 105d was obtained in 81% yield as a white solid, mp 120-

84

124 oC. IR (CH2Cl2-film) cm-1: 3401, 3293, 2917, 1645, 1444, 1247, 1038, 930, 731. 1H-NMR (CDCl3) δ: 7.40-7.30 (5H, m, PhH), 7.21 (1H, dd, J = 8.1, 0.9 Hz, ArH), 7.10 (1H, t, J = 8.1 Hz, ArH), 6.88 (1H, d, J = 8.1 Hz, ArH), 6.61 (1H, d, J = 7.8 Hz, ArH), 6.52 (1H, d, J = 1.8 Hz, ArH), 6.43 (1H, dd, J = 7.8, 1.8 Hz, ArH), 5.89 (2H, s, OCH2O), 5.43 (1H, br s, NH), 5.05 (2H, s, OCH2Ph), 3.83 (2H, s, CH2), 3.37 (2H, apparent q, J = 6.6 Hz, CH2), 2.59 (2H, t, J = 6.6 Hz, CH2).

13C-NMR (CDCl3) δ: 169.54, 157.43, 147.65, 146.02, 136.19, 132.60, 129.30, 128.69, 128.17, 127.12, 126.44, 125.45, 124.41, 121.52, 111.16, 109.03, 108.25, 100.80, 70.55, 40.78, 38.02, 35.21.

1-(2-Bromo-4,5-methylenedioxybenzyl)-5,6,7-trimethoxy-3,4-dihydroisoquinoline (106a). A solution of 105a (22.60 g, 49.97 mmol) and phosphorus oxychloride (67.80 g, 442.18 mmol) in benzene (770 ml) was refluxed for 3 hours. The excess reagent and solvent were removed under reduced pressure and the residue was dissolved in chloroform (770 ml). The mixture was basified by addition of solid sodium carbonate followed by dropwise addition of water. The chloroform layer was washed with water (300 ml), then dried over anhydrous sodium sulfate. Removal of the solvent under reduced pressure gave a yellow solid which was recrystallized from ethanol to give 106a as yellow crystals (15.70 g, 72%), mp 135-137 °C. IR (CH2Cl2-film) cm-1: 2942, 1675, 1613, 1478, 1238, 1119, 1037, 949, 789, 605. 1H-NMR (CDCl3) δ: 7.02 (H, s, ArH), 6.83 (1H, s, ArH), 6.79 (1H, s, ArH), 5.93 (2H, s, OCH2O), 4.20 (2H, s, ArCH2), 3.91 (3H, s, OCH3), 3.84 (3H, s, OCH3), 3.81 (3H, s, OCH3), 3.64 (2H, t, J = 7.2 Hz, CH2), 2.73 (2H, t, J = 7.2 Hz, CH2). 13C-NMR (CDCl3) δ: 163.97, 151.86, 151.27, 149.95, 147.62, 145.01, 132.98, 124.41, 121.71, 114.13, 113.32, 111.03, 106.99, 102.56, 60.97, 60.64, 60.35, 56.19, 47.93, 18.46.

85

1-(6-Bromo-2,3-dimethoxybenzyl)-6,7-methylenedioxy-3,4-dihydroisoquinoline (106b). By the same procedure used to prepare 106a, 106b was obtained in 96% yield as a yellow solid, mp 84-86 oC. IR (CH2Cl2-film) cm-1: 2940, 1637, 1601, 1473, 1268, 1007, 935, 737. 1H-NMR (CDCl3) δ: 7.27 (1H, d, J = 8.7 Hz, ArH), 7.12 (1H, s, ArH), 6.73 (1H, d, J = 8.7 Hz, ArH), 6.68 (1H, s, ArH), 5.98 (2H, s, OCH2O), 4.23 (2H , s, ArCH2), 3.83 (3H, s, OCH3), 3.79 (3H, s, OCH3), 3.58 (2H, t, J = 7.2 Hz, CH2), 2.62 (2H, t, J = 7.2 Hz, CH2).

13C-NMR (CDCl3) δ: 163.97, 152.05, 148.96, 148.41, 146.39, 133.25, 132.25, 127.50, 123.33, 116.17, 111.99, 107.86, 105.59, 101.28, 60.77, 55.74, 46.71, 36.79, 26.32.

1-(2-Bromo-5,6-dimethoxybenzyl)-6,7-dimethoxy-3,4-dihydroisoquinoline (106c). By the same procedure used to prepare 106a, 106c was obtained in 94% yield as a pale yellow solid, mp 130-134 oC. IR (CH2Cl2-film) cm-1: 2938, 1604, 1573, 1512, 1471, 1356, 1273, 1229, 1143, 1076, 1009, 859, 810, 596. 1H-NMR (CDCl3) δ: 7.27 (1H, d, J = 8.7 Hz, ArH), 7.12 (1H, s, ArH), 6.71 (1H, d, J = 8.7 Hz, ArH), 6.70 (1H, s, ArH), 4.24 (2H, s, ArCH2), 3.91 (3H, s, OCH3), 3.89 (3H, s, OCH3), 3.83 (3H, s, OCH3), 3.78 (3H, s, OCH3), 3.60 (2H, t, J = 7.2 Hz, CH2), 2.62 (2H, t, J = 7.2 Hz, CH2).

13C-NMR (CDCl3) δ: 163.98, 152.14, 150.59, 148.45, 147.37, 132.52, 131.58, 127.63, 122.19, 116.22, 111.92, 110.24, 108.66, 60.75, 56.22, 55.94, 55.75, 47.15, 37.36, 25.80.

86

1-(2-Benzyloxy-6-bromobenzyl)-6,7-methylenedioxy-3,4-dihydroisoquinoline (106d). By the same procedure used to prepare 106a, 106d was obtained in 74% yield as a brown solid, mp 80-86 oC. IR (CH2Cl2-film) cm-1: 2935, 2895, 1571, 1484, 1445, 1375, 1265, 1239, 1038, 933, 864, 735, 697. 1H-NMR (CDCl3) δ: 7.30-7.26 (5H, m, PhH), 7.21 (1H, dd, J = 8.1, 0.9 Hz, ArH), 7.12 (1H, s, ArH), 7.06 (1H, t, J = 8.1 Hz, ArH), 6.86 (1H, d, J = 8.1 Hz, ArH), 6.65 (1H, s, ArH), 5.97 (2H, s, OCH2O), 5.06 (2H, s, OCH2Ph), 4.24 (2H, s, CH2), 3.52 (2H, t, J = 7.5 Hz, CH2), 2.50 (2H, t, J = 7.5 Hz, CH2).

13C-NMR (CDCl3) δ: 163.73, 157.56, 148.75, 146.26, 136.73, 133.21, 128.35, 127.66, 127.37, 126.92, 126.38, 125.09, 123.45, 111.09, 107.73, 105.58, 101.16, 70.37, 46.74, 36.66, 26.20.

1-(2-Bromo-4,5-methylenedioxybenzyl)-5,6,7-trimethoxy-1,2,3,4-tetrahydroisoquinoline (107a). Sodium borohydride (2.00 g, 52.86 mmol) was added portionwise to a stirred solution of 106a (16.20 g, 37.30 mmol) in ethanol (560 ml) and the mixture was refluxed for 1 hour. Removal of the ethanol under reduced pressure gave a residue which was shaken with water (500 ml) and chloroform (500 ml). The chloroform layer was washed with brine, then dried over anhydrous sodium sulfate. Removal of the solvent gave a yellow solid which was recrystallized from ethanol to give 107a as a yellow solid (7.40 g, 46%), mp 130-131 oC. IR (CH2Cl2-film) cm-1: 3319, 2939,

87

1603, 1476, 1238, 1117, 1037, 930, 837. 1H-NMR (CDCl3) δ: 7.05 (1H, s, ArH), 6.79 (1H, s, ArH), 6.62 (1H, s, ArH), 5.98 (2H, s, OCH2O), 4.19 (1H, d, J = 9.9 Hz, H-1), 3.88 and 3.84 (9H, 2s, 3xOCH3), 3.30-3.20 (2H, m, CH2), 3.01-2.68 (4H, m, 2xCH2).

13C-NMR (CDCl3) δ: 151.41, 151.13, 147.30, 147.15, 140.49, 134.14, 131.66, 121.58, 114.84, 112.83, 111.30, 105.57, 101.72, 60.81, 60.36, 56.00, 55.35, 42.70, 39.64, 23.77.

1-(6-Bromo-2,3-dimethoxybenzyl)-6,7-methylenedioxy-1,2,3,4-tetrahydroisoquinoline (107b). By the same procedure used to prepare 107a, 107b was obtained in 94% yield as a yellow solid, mp 103-105 oC. IR (CH2Cl2-film) cm-1: 3332, 2938, 1648, 1471, 1247, 1079, 1039, 1010, 934, 800, 737, 612. 1H-NMR (CDCl3) δ: 7.29 (1H, d, J = 8.7 Hz, ArH), 6.86 (1H, s, ArH), 6.73 (1H, d, J = 8.7 Hz, ArH), 6.56 (1H, s, ArH), 5.89 (2H, s, OCH2O), 4.25 (1H, dd, J = 10.5, 2.4 Hz, H-1), 3.85 (3H, s, OCH3), 3.83 (3H, s, OCH3), 3.66-2.62 (6H, m, 3xCH2).

13C-NMR (CDCl3) δ: 152.18, 148.64, 145.93, 145.71, 133.17, 131.91, 128.26, 128.00, 115.78, 112.00, 108.66, 106.82, 100.58, 60.67, 55.83, 55.54, 39.33, 37.09, 29.83.

1-(6-Bromo-2,3-dimethoxybenzyl)-6,7-dimethoxy-1,2,3,4-tetrahydroisoquinoline (107c). By the same procedure used to prepare 107a, 107c was obtained in 95% yield as a brown solid, mp 106-

88

107 oC. IR (CH2Cl2-film) cm-1: 3329, 2937, 1610, 1572, 1513, 1468, 1412, 1263, 1225, 1110, 1078, 1010, 859, 798, 613. 1H-NMR (CDCl3) δ: 7.29 (1H, d, J = 8.7 Hz, ArH), 6.79 (1H, s, ArH), 6.73 (1H, d, J = 8.7 Hz, ArH), 6.59 (1H, s, ArH), 4.29 (1H, dd, J = 9.9, 3.6 Hz, H-1), 3.85 (6H, s, 2xOCH3), 3.82 (3H, s, OCH3), 3.80 (3H, s, OCH3), 3.38-2.64 (6H, m, 3xCH2), 2.18 (1H, br s, NH). 13C-NMR (CDCl3) δ: 152.17, 148.60, 147.46, 147.03, 133.36, 130.84, 127.81, 127.18, 115.75, 111.93, 111.65, 109.96, 60.50, 55.75, 55.11, 39.43, 37.10, 29.25.

1-(2-Benzyloxy-6-bromobenzyl)-6,7-methylenedioxy-1,2,3,4-tetrahydroisoquinoline (107d). By the same procedure used to prepare 107a, 107d was obtained in 96% yield as a yellow semisolid. IR (CH2Cl2-film) cm-1: 2924, 1588, 1569, 1483, 1445, 1263, 1038, 934, 865, 737, 698. 1H-NMR (CDCl3) δ: 7.43-7.33 (5H, m, PhH), 7.22 (1H, d, J = 8.1 Hz, ArH), 7.07 (1H, t, J = 8.1 Hz, ArH), 6.91 (1H, d, J = 8.1 Hz, ArH), 6.61 (1H, s, ArH), 6.51 (1H, s, ArH), 5.88 (2H, s, OCH2O), 5.06 (2H, d, J = 3.9 Hz, OCH2Ph), 4.28 (1H, dd, J = 10.5, 3.0 Hz, H-1), 3.39-3.10 and 2.83-2.48 (6H, 4m, 3xCH2).

13C-NMR (CDCl3) δ: 158.08, 146.12, 145.82, 136.45, 128.76, 128.49, 128.41, 128.06, 127.95, 127.84, 127.05, 126.23, 125.42, 110.94, 108.62, 107.00, 100.67, 70.82, 55.16, 39.16, 36.86, 29.41.

89

1-(2-Bromo-4,5-methylenedioxybenzyl)-2-carbomethoxy-5,6,7-trimethoxy-1,2,3,4-tetrahydroiso quinoline (108a). Methyl chloroformate (18.50 g, 195.77 mmol) was added dropwise to a stirred solution of 107a (13.30 g, 30.48 mmol) and triethylamine (26.30 g, 259.91 mmol) in chloroform (370 ml) at 0-10 oC. Stirring was continued at room temperature for 3 hours. The chloroform layer was washed with 10% hydrochloric acid (3x200 ml), water (200 ml) and brine, then dried over anhydrous sodium sulfate. Removal of the solvent under reduced pressure gave the crude product which was recrystallized from ethanol to give 108a as pale yellow crystals (9.50 g, 63%), mp 131-132 oC. IR (CH2Cl2-film) cm-1: 2940, 1698, 1604, 1477, 1408, 1245, 1230, 1112, 1037, 929, 838, 653. 1H-NMR (CDCl3) δ: 7.02 and 6.98 (total 1H, 2s, ArH of both conformers), 6.65 and 6.56 (total 1H, 2s, ArH of both conformers), 6.46 and 6.29 (total 1H, 2s, ArH of both conformers), 5.94 (2H, s, OCH2O), 5.34-5.31 (1H, m, H-1), 4.32-4.24 and 3.97-3.90 (total 1H, m, H-3α), 3.86 and 3.85 (6H, 2s, 2xOCH3), 3.80 and 3.72 (total 3H, 2s, OCH3 of both conformers), 3.65 and 3.41 (total 3H, 2s, CO2CH3 of both conformers), 3.48-2.67 (5H, m, H-3β, 2xCH2).

13C-NMR (CDCl3) δ: (both conformers) 155.98, 155.78, 151.77, 151.61, 151.06, 150.78, 147.13, 140.89, 131.76, 130.74, 130.65, 120.74, 120.52, 115.50, 115.24, 112.49, 112.36, 111.13, 110.87, 106.33, 105.87, 101.67, 101.61, 60.85, 60.58, 60.52, 55.99, 55.92, 55.03, 54.14, 52.59, 52.27, 42.47, 41.77, 38.42, 37.20, 22.31, 22.26.

1-(6-Bromo-2,3-dimethoxybenzyl)-2-carbomethoxy-6,7-dimethoxy-1,2,3,4-tetrahydroisoquino line (108c). By the same procedure used to prepare 108a, 108c was obtained in 87% yield as a white solid, mp 107-110 oC. IR (CH2Cl2-film) cm-1: 2943, 1698, 1611, 1574, 1519, 1469, 1448, 1413, 1361, 1258, 1225, 1103, 1077, 1012, 857, 797, 611. 1H-NMR (CDCl3) :δ 7.24 (1H, d, J = 8.7 Hz, ArH), 6.70 (1H, d, J = 8.7 Hz, ArH), 6.67 (1H, s, ArH), 6.62 (1H, s, ArH), 5.61-5.57 and

90

5.49-5.44 (total 1H, 2m, H-1 of both conformers), 4.30-4.25 and 4.10-4.05 (total 1H, 2m, H-3α of both conformers), 3.86 (3H, s, OCH3), 3.84 (3H, s, OCH3), 3.81 (3H, s, OCH3), 3.79 (3H, s, OCH3), 3.58 and 3.30 (total 3H, 2s, CO2CH3 of both conformers), 3.66-2.69 (5H, m, H-3β, 2xCH2).

13C-NMR (CDCl3) δ: 155.78, 151.97, 148.82, 147.88, 147.34, 132.19, 128.62, 127.08, 126.44, 116.13, 112.19, 111.45, 109.84, 60.48, 55.92, 55.76, 53.70, 51.96, 37.82, 28.07.

2-Trifluoroacetyl-1-(2-bromo-4,5-methylenedioxybenzyl)-5,6,7-trimethoxy-1,2,3,4-tetrahydro isoquinoline (108a'). Trifluoroacetic anhydride (24.00 g, 114.60 mmol) was added dropwise to a stirred mixture of 107a (5.00 g, 11.46 mmol) and triethylamine (6.96 g, 68.76 mmol) in dichloromethane (130 ml) at 0-10 oC. Stirring was continued at room temperature for 3 hours. Dichloromethane (100 ml) was added and the dichloromethane layer was washed with 10% sodium hydrogen carbonate (3x100 ml), water (100 ml), 10% hydrochloric acid (3x100 ml) and water (100 ml), then dried over anhydrous sodium sulfate. Removal of the solvent gave a red-brown viscous oil which recrystallized from ethanol to give 108a' as a pale yellow solid (2.75 g, 45%), mp 126-127 oC. IR (CH2Cl2-film) cm-1: 2940, 1690, 1604, 1478, 1351, 1232, 1196, 1142, 1122, 1038, 933, 846, 660. 1H-NMR (CDCl3) δ: 7.00 and 6.99 (total 1H, 2s, ArH of both conformers), 6.64 and 6.54 (total 1H, 2s, ArH of both conformers), 6.39 and 6.29 (total 1H, 2s, ArH of both conformers), 5.95 (total 2H, 2s, OCH2O of both conformers), 5.73-5.68 (1H, m, H-1), 4.08-3.62 (2H, m, CH2), 3.88 (3H, s, OCH3), 3.86 (3H, s, OCH3), 3.77 (3H, s, OCH3), 3.34-2.73 (4H, m, 2xCH2).

13C-NMR (CDCl3) δ: 156.03, 155.56, 152.33, 150.86, 147.52, 147.42, 141.19, 130.17, 129.42, 119.40, 118.43, 115.52, 114.61, 112.68, 110.62, 106.11, 101.83, 60.88, 60.60, 56.01, 54.15, 41.45, 39.85, 39.80, 23.44.

91

2-Trifluoroacetyl-1-(2-bromo-5,6-dimethoxybenzyl)-6,7-methylenedioxy-1,2,3,4-tetrahydroiso quinoline (108b'). By the same procedure used to prepare 108a', 108b' was obtained in 42% yield as pale yellow crystals, mp 140-141 oC. IR (CH2Cl2-film) cm-1: 2943, 1690, 1483, 1472, 1280, 1238, 1196, 1140, 1080, 1039, 1009, 940, 864, 799, 752, 651. 1H-NMR (CDCl3) δ: 7.23 and 7.22 (total 1H, 2d, J = 8.7 Hz, ArH of both conformers), 6.81 (1H, s, ArH), 6.73 and 6.71 (total 1H, 2d, J = 8.7 Hz, ArH of both conformers), 6.58 (1H, s, ArH), 5.94 and 5.93 (total 2H, 2s, OCH2O of both conformers), 5.87 (1H, dd, J = 10.8, 3.6 Hz, H-1), 3.90 (3H, s, OCH3), 3.84 (3H, s, OCH3), 4.04-3.83 (2H, m, CH2), 3.42-2.75 (4H, m, 2xCH2).

13C-NMR (CDCl3) δ: 155.98, 155.51, 151.80, 149.03, 146.84, 146.54, 130.69, 128.82, 127.39, 126.13, 116.02, 113.06, 108.27, 107.08, 101.05, 60.74, 55.98, 53.59, 40.04, 36.50, 29.39.

1-(2-Bromo-5,6-methoxybenzyl)-2-formyl-6,7-methylenedioxy-1,2,3,4-tetrahydroisoquinoline (108b). A solution of N,N’-dicyclohexylcarbodiimide (8.23 g, 39.89 mmol) in dichloromethane (88 ml) was added to a stirred solution of 107b (14.57 g, 35.86 mmol) and formic acid (1.80 g, 39.11 mmol) in dichloromethane (220 ml), the mixture was then stirred for 2 hours. The mixture was filtered and the filtrate was washed with 5% hydrochloric acid (3x250 ml), water (3x250 ml), 5% sodium hydrogen carbonate (3x250 ml), water (250 ml) and then dried over anhydrous

92

sodium sulfate. Removal of the solvent gave a brown viscous oil which was recrystallized from ethanol to give 108b as a pale yellow solid (7.00 g, 45%), mp 134-136 oC. IR (CH2Cl2-film) cm-1: 2941, 2840, 1669, 1483, 1471, 1273, 1240, 1217, 1078, 1037, 1008, 931, 801, 643. 1H-NMR (CDCl3) δ: 7.92 and 7.51 (total 1H, 2s, CHO of both conformers), 7.26 (1H, d, J = 8.7 Hz, ArH), 6.83 (1H, s, ArH), 6.74 (1H, d, J = 8.7 Hz, ArH), 6.60 (1H, s, ArH), 5.93 (2H, s, OCH2O), 4.80 (1H, dd, J = 10.8, 2.4 Hz, H-1), 4.37-4.43 (1H, m, H-3α), 3.85 (3H, s, OCH3), 3.84 (3H, s, OCH3), 3.44-2.71 (5H, m, H-3β, 2xCH2).

13C-NMR (CDCl3) δ: 161.13, 160.82, 152.13, 148.73, 146.82, 146.33, 130.85, 128.95, 127.76, 127.42, 115.41, 112.82, 108.66, 106.56, 101.02, 60.62, 56.77, 55.89, 37.44, 34.71, 28.22.

1-(2-Benzyloxy-6-bromobenzyl)-2-formyl-6,7-methylenedioxy-1,2,3,4-tetrahydroisoquinoline (108d). By the same procedure used to prepare 108b, 108d was obtained in 70% yield as a yellow solid, mp 98-100oC. IR (CH2Cl2-film) cm-1: 2927, 2881, 1670, 1569, 1483, 1444, 1263, 1217, 1037, 935, 736, 699. 1H-NMR (CDCl3) δ: 7.91 and 7.89 (total 1H, 2s, CHO of 2 conformers), 7.46-7.37 (5H, m, PhH), 7.22 (1H, dd, J = 8.1, 0.9 Hz, ArH), 7.11 (1H, t, J = 8.1 Hz, ArH), 6.92 (1H, d, J = 8.1 Hz, ArH), 6.65 (1H, s, ArH), 6.54 (1H, s, ArH), 5.92 (2H, s, OCH2O), 5.04 (2H, s, OCH2Ph), 4.71 (1H, dd, J = 10.8, 2.4 Hz, H-1), 4.24-4.18 (1H, m, H-3α), 3.49-2.55 (5H, m, H-3β, 2xCH2).

13C-NMR (CDCl3) δ: 161.09, 160.52, 157.86, 146.62, 146.17, 136.03, 129.09, 128.83, 128.60, 128.38, 128.05, 127.22, 126.01, 125.91, 125.22, 124.81, 110.69, 108.41, 106.49, 100.85, 70.83, 56.42, 37.03, 34.66, 28.06.

93

Methyl 1,2,3-Trimethoxy-9,10-methylenedioxynoraporphine-6-carboxylate (109a). To a solution of 108a (100.0 mg, 0.20 mmol), in DMA (4 ml) were added palladium(II)acetate (4.5 mg, 0.02 mmol), ligand B (9.9 mg, 0.04 mmol), potassium carbonate (82.9 mg, 0.60 mmol) and pivalic acid (6.1 mg, 0.06 mmol). The mixture was irradiated in a microwave reactor for 5 min with the power level at 850 W under an argon atmosphere. After cooling to room temperature, the reaction mixture was filtered over Celite and the solvent was removed under reduced pressure to give the crude product which was purified by column chromatography with 25% ethyl acetate-hexane to give 109a as a white solid (80.1 mg, 96%), mp 184-185 oC. IR (CH2Cl2-film) cm-1: 2940, 1700, 1459, 1414, 1338, 1236, 1197, 1150, 1092, 1038, 933, 877. 1H-NMR (CDCl3) δ: 7.90 (1H, s, H-11), 6.76 (1H, s, H-8), 5.98 (2H, AB q, J = 0.9 Hz, OCH2O), 4.65-4.71 (1H, m, H-6a), 4.41-4.45 (1H, m, H-5α), 3.95 (3H, s, OCH3), 3.89 (3H, s, OCH3), 3.76 (3H, s, OCH3), 3.73 (3H, s, CO2CH3), 3.01-2.50 (5H, m, H-5β, 2xCH2).

13C-NMR (CDCl3) δ: 155.88, 149.84, 149.60, 146.56, 146.29, 145.38, 130.61, 128.87, 125.07, 123.66, 123.38, 108.63, 108.56, 100.93, 61.06, 60.89, 60.43, 52.70, 51.88, 38.59, 34.88, 23.80.

1,2,3-Trimethoxy-9,10-methylenedioxy-6-trifluoroacetylnoraporphine (109a'). By the same procedure used to prepare 109a, 109a' was obtained in 19% yield as a white solid, mp 184-185

94

oC. IR (CH2Cl2-film) cm-1: 2944, 1689, 1461, 1415, 1340, 1237, 1187, 1144, 1094, 1046, 921, 758. 1H-NMR (CDCl3) δ: 7.91 (1H, s, H-11), 6.75 (1H, s, H-8), 5.98 (2H, AB q, J = 1.2 Hz, OCH2O), 4.98 (1H, dd, J = 13.8 and 4.2 Hz, H-6a), 4.20-4.24 (1H, m, H-5α), 3.96 (3H, s, OCH3), 3.91 (3H, s, OCH3), 3.75 (3H, s, OCH3), 3.30-2.57 (5H, m, H-5β, 2xCH2).

13C-NMR (CDCl3) δ: 156.07, 155.60, 150.42, 149.46, 146.82, 146.55, 145.70, 129.62, 127.23, 124.73, 123.49, 122.35, 118.26, 114.45, 108.83, 108.54, 101.04, 61.07, 60.98, 60.47, 52.41, 40.97, 40.92, 33.27, 24.17.

6-Formyl-8,9-dimethoxy-1,2-methylenedioxynoraporphine (109b). By the same procedure used to prepare 109a, 109b was obtained in 94% yield as a white solid, mp 133-134 oC. IR (CH2Cl2-film) cm-1: 2959, 2875, 1645, 1492, 1408, 1278, 1239, 1180, 1078, 1034, 933, 810. 1H-NMR (CDCl3) δ: 8.41 and 8.28 (total 1H, 2s, CHO of both conformers), 7.85 and 7.84 (total 1H, 2d, J = 8.7 Hz, H-11 of both conformers), 6.92 and 6.89 (total 1H, 2d, J = 8.7 Hz, H-10 of both conformers), 6.58 and 6.55 (total 1H, 2s, H-3 of both conformers), 6.09 and 5.97 (total 2H, 2s, OCH2O of both conformers), 4.98 (total 1H, dd, J = 13.8, 4.2 Hz, H-6a of both conformers), 4.56-4.48 (total 1H, m, H-5α of both conformers), 3.92 and 3.91 (total 3H, 2s, OCH3 of both conformers), 3.85 and 3.82 (total 3H, 2s, OCH3 of both conformers), 3.66-2.40 (total 5H, m, H-5β, 2xCH2 of both conformers). 13C-NMR (CDCl3) δ: (both conformers) 162.15, 162.05, 152.37, 152.46, 147.24, 146.96, 146.31, 142.74, 129.79, 128.92, 126.47, 124.14, 124.04, 123.58, 123.44, 117.54, 110.77, 110.47, 107.22, 106.86, 100.91, 60.72, 55.79, 49.24, 42.10, 30.98, 26.90.

95

8,9-Dimethoxy-1,2-methylenedioxy-6-trifluoroacetylnoraporphine (109b'). By the same procedure used to prepare 109a (but the reaction mixture was recrystallized from ethanol), 109b' was obtained in 71% yield as a white solid, mp 198-199 oC. IR (CH2Cl2-film) cm-1: 2900, 1679, 1461, 1272, 1188, 1083, 915, 817, 650. 1H-NMR (CDCl3) δ: 7.86 (1H, d, J = 8.7 Hz, H-11), 6.90 (1H, d, J = 8.7 Hz, H-10), 6.57 (1H, s, H-3), 6.10 and 5.98 (2H, 2s, OCH2O), 5.05 (1H, dd, J = 13.5, 3.9 Hz, H-6a), 4.22 (1H, m, H-5α), 3.91 (3H, s, OCH3), 3.86 (3H, s, OCH3), 3.56 (1H, dd, J = 14.4, 4.2 Hz, H-5β), 3.40-2.49 (4H, m, 2xCH2).

13C-NMR (CDCl3) δ: 156.10, 155.63, 152.56, 147.11, 146.34, 142.84, 129.35, 126.37, 123.83, 123.55, 118.31, 117.44, 114.49, 110.65, 106.71, 101.01, 60.81, 55.78, 52.31, 41.42, 30.37, 26.34.

Methyl 1,2-dimethoxy-8,9-methylenedioxynoraporphine-6-carboxylate (109c). By the same procedure used to prepare 109a, 109c was obtained in 43% yield as a white solid, mp 203-204 oC. IR (CH2Cl2-film) cm-1: 2939, 1698, 1594, 1492, 1447, 1404, 1355, 1248, 1200, 1085, 1023, 958, 807. 1H-NMR (CDCl3) δ: 8.20 (1H, d, J = 8.7 Hz, H-11), 6.90 (1H, d, J = 8.7 Hz, H-10), 6.64 (1H, s, H-3), 4.64 (1H, m, H-6a), 4.47 (1H, m, H-5α), 3.93 (3H, s, OCH3), 3.89 (3H, s, OCH3), 3.85 (3H, s, OCH3), 3.76 (1H, s, OCH3), 3.65 (3H, s, CO2CH3), 3.43 (1H, m, H-5β), 3.05-2.44 (4H, m, 2xCH2).

13C-NMR (CDCl3) δ: 156.01, 152.05, 152.02, 145.61, 145.16, 131.38, 129.54,

96

127.65, 125.58, 125.14, 124.90, 110.81, 110.13, 60.67, 59.86, 55.92, 55.64, 52.62, 51.58, 38.88, 30.23, 28.06.

6-Formyl-8-benzyloxy-1,2-methylenedioxynoraporphine (109d). By the same procedure used to prepare 109a, 109d was obtained in 75% yield as a pale brown solid, mp 176-177 oC. IR (CH2Cl2-film) cm-1: 2917, 1666, 1575, 1478, 1419, 1238, 1040, 941, 790, 735, 697. 1H-NMR (CDCl3) δ: 8.35 and 8.26 (total 1H, 2s, CHO of both conformers), 7.77-7.73 (total 1H, m, H-11 of both conformers), 7.46-7.22 (total 6H, m, H-10 of both conformers, PhH of both conformers), 6.93 and 6.89 (total 1H, d, J = 8.1 Hz, H-9 of both conformers), 6.59 and 6.56 (total 1H, 2s, H-3 of both conformers), 6.00 (total 2H, 2s, OCH2O of both conformers), 5.10 (total 2H, s, OCH2Ph of both conformers), 5.06-2.38 (total 7H, m, H-6a, 3xCH2 of both conformers). 13C-NMR (CDCl3) δ: (both conformers) 162.16, 162.07, 155.90, 155.52, 147.30, 147.03, 143.34, 137.18, 136.83, 131.78, 131.63, 128.65, 128.53, 128.05, 127.77, 127.71, 127.44, 127.27, 127.25, 126.37, 124.69, 124.29, 124.09, 123.48, 120.12, 119.94, 117.52, 117.10, 111.72, 111.68, 107.93, 107.56, 101.02, 100.93, 70.42, 70.28, 53.12, 49.15, 42.08, 36.08, 30.98, 30.02, 29.74, 26.21.

1,2,3-Trimethoxy-9,10-methylenedioxyaporphine (Phoebine, 110a). A mixture of 109a (0.94 g, 2.27 mmol) and lithium aluminium hydride (0.78 g, 20.48 mmol) in dry tetrahydrofuran (50 ml)

97

was refluxed for 2 hours. Water (15 ml) was added dropwise followed by dilute ammonium hydroxide (5 ml). The pale yellow granular residue was filtered off and washed with chloroform. The organic phase was separated and then dried over anhydrous sodium sulfate. Removal of the solvent under reduced pressure gave a pale brown solid which was chromatograped over silica gel using ethyl acetate as eluent to give 110a as a yellow solid (0.71 g, 84%), mp 91-92 oC. UV (MeOH) λmax/nm (log ε) 220.7 (4.55), 282.2 (4.12), 313.8 (4.14). IR (CH2Cl2-film) cm-1: 2936, 1485, 1458, 1413, 1373, 1338, 1241, 1096, 1043, 936, 877. 1H-NMR (CDCl3) δ: 7.81 (1H, s, H-11), 6.74 (1H, s, H-8), 5.96 (2H, AB q, J = 1.2 Hz, OCH2O), 3.94 (3H, s, OCH3), 3.89 (3H, s, OCH3), 3.73 (3H, s, OCH3), 2.52 (3H, s, NCH3), 3.10-2.78 and 2.46-2.38 (7H, 2m, H-6a, 3xCH2). 13C-NMR (CDCl3) δ: 149.71, 149.39, 146.48, 145.98, 145.20, 130.82, 130.08, 125.43, 122.80, 122.56, 108.37, 108.22, 100.73, 62.77, 60.92, 60.58, 60.38, 52.95, 44.01, 34.78, 23.75. MS m/z: 370 (M+H+).

8,9-Dimethoxy-1,2-methylenedioxyaporphine (Crebanine, 110b). By the same procedure used to prepare 110a, 110b was obtained in 97% yield as a yellow-brown solid, mp 114-115 oC. UV (MeOH) λmax/nm (log ε) 217.6 (4.62), 242.5 (4.21), 279.3 (4.44), 291.0 (4.37), 322.2 (3.77). IR (CH2Cl2-film) cm-1: 2927, 1601, 1496, 1413, 1282, 1236, 1129, 1073, 1036, 987, 937, 818. 1H-NMR (CDCl3) δ: 7.81 (1H, d, J = 8.7 Hz, H-11), 6.88 (1H, d, J = 8.7 Hz, H-10), 6.52 (1H, s, H-3), 5.99 (2H, AB q, J = 0.9 Hz, OCH2O), 3.90 (3H, s, OCH3), 3.81 (3H, s, OCH3), 3.68 (1H, dd, J = 14.7, 4.2 Hz, H-6a), 3.18-2.25 (6H, m, 3xCH2), 2.58 (3H, s, NCH3).

13C-NMR (CDCl3) δ: 151.97, 146.53, 145.80, 142.03, 129.73, 126.55, 126.49, 124.61, 123.13, 116.46, 110.21, 106.77, 100.57, 61.87, 60.61, 55.67, 53.59, 43.94, 29.16, 26.91. MS m/z: 340 (M+H+).

98

1,2,8,9-Tetramethoxyaporphine (110c). By the same procedure used to prepare 110a, 110c was obtained in 92% yield as a yellow-brown semisolid, IR (CH2Cl2-film) cm-1: 2930, 1594, 1494, 1372, 1280, 1082, 1006, 816, 707. 1H-NMR (CDCl3) δ: 8.12 (1H, d, J = 9.0 Hz, H-11), 6.87 (1H, d, J = 9.0 Hz, H-10), 6.59 (1H, s, H-3), 3.91 (3H, s, OCH3), 3.87 (3H, s, OCH3), 3.82 (3H, s, OCH3), 3.65 (3H, s, OCH3), 3.20-2.16 (7H, m, H-6a, 3xCH2), 2.57 (3H, s, NCH3).

13C-NMR (CDCl3) δ: 151.92, 151.73, 145.27, 144.66, 130.81, 128.60, 127.34, 126.92, 125.52, 124.62, 110.57, 110.07, 62.23, 60.74, 60.04, 55.82, 55.63, 53.31, 44.01, 29.17, 26.97.

8-Benzyloxy-1,2-methylenedioxyaporphine (110d). By the same procedure used to prepare 110a, 110d was obtained in 76% yield as a yellow viscous oil, IR (CH2Cl2-film) cm-1: 2917, 2849, 2787, 1578, 1449, 1256, 1224, 1045, 942, 788, 735, 696. 1H-NMR (CDCl3) δ: 7.72 (1H, d, J = 8.1 Hz, ArH), 7.42-7.29 (5H, m, PhH), 7.22 (1H, t, J = 8.1 Hz, ArH), 6.86 (1H, d, J = 8.1 Hz, ArH), 6.52 (1H, s, H-3), 6.00 and 5.85 (2H, 2s, OCH2O), 5.09 (2H, s, OCH2Ph), 3.77 (1H, dd, J = 15.0, 4.2 Hz, H-6a), 3.17-2.21 (6H, m, 3xCH2), 2.52 (3H, s, NCH3).

13C-NMR (CDCl3) δ: 155.37 146.59, 142.66, 137.31, 132.27, 128.50, 127.75, 127.05, 126.38, 124.43, 119.88, 116.48, 111.67, 107.52, 100.59, 70.45, 61.71, 53.52, 43.81, 29.02, 26.17.

99

1,2,3-Trimethoxy-9,10-methylenedioxynoraporphine (Norphoebine, 110a'). 109a' (0.14 g, 0.31 mmol) was dissolved in 90% methanol-water (10 ml). Sodium carbonate (0.067 g, 0.63 mmol) was added and then the mixture was refluxed for 2 hours, the solvent was removed under reduced pressure. The resulting residue was shaken with water (20 ml), 10% sodium carbonate (20 ml) and extracted with dichloromethane (3x20 ml), then dried over anhydrous sodium sulfate. Removal of the solvent under reduced pressure gave crude norphoebine which was chromatograped over silica gel using ethyl acetate as eluent to give 110a' as a purple-brown solid (0.12 g, quantitative yield), mp 112-113 oC. UV (MeOH) λmax/nm (log ε) 219.8 (4.54), 238.7 (4.27), 282.4 (4.12), 309.9 (4.12). IR (CH2Cl2-film) cm-1: 3313, 2936, 1734, 1619, 1462, 1411, 1337, 1241, 1199, 1133, 1094, 1039, 934, 878. 1H-NMR (CDCl3) δ: 7.84 (1H, s, H-11), 6.70 (1H, s, H-8), 5.94 (2H, s, OCH2O), 3.93 (3H, s, OCH3), 3.89 (3H, s, OCH3), 3.73 (3H, s, OCH3),

3.76-3.70 (1H, m, H-6a), 3.40-3.34 (1H, m, H-5α), 2.95-2.57 (5H, m, H-5β, 2xCH2).

13C-NMR (CDCl3) δ: 150.18, 149.47, 146.52, 146.03, 145.44, 131.34, 129.72, 125.50, 122.83, 122.41, 108.47, 108.16, 100.84, 60.96, 60.63, 60.39, 53.98, 42.73, 37.10, 23.67. MS m/z: 356 (M+H+).

8,9-Dimethoxy-1,2-methylenedioxynoraporphine (Norcrebanine, 110b'). By the same procedure used to prepare (but the mixture was refluxed for 6.5 hours and the product was purified by recrystallization from ethanol), 110b' was obtained in 99% yield as yellow crystals, 101-102 oC.

100

UV (MeOH) λmax/nm (log ε) 218.0 (4.55), 243.8 (4.18), 279.8 (4.39), 289.8 (4.34), 321.4 (3.74). IR (CH2Cl2-film) cm-1: 3302, 2956, 1602, 1495, 1413, 1272, 1233, 1059, 939, 836, 713. 1H-NMR (CDCl3) δ: 7.78 (1H, d, J = 8.7 Hz, H-11), 6.82 (1H, d, J = 8.7 Hz, H-10), 6.47 (1H, s, H-3), 5.92 (2H, AB q, J = 1.2 Hz, OCH2O), 3.86 (3H, s, OCH3), 3.79 (3H, s, OCH3), 3.82-2.31 (7H, m, H-6a, 3xCH2), 2.17 (1H, br s, NH). 13C-NMR (CDCl3) δ: 152.03, 146.66, 145.71, 141.93, 129.31, 127.02, 126.43, 124.61, 123.23, 116.12, 110.19, 107.21, 100.53, 60.61, 55.67, 53.07, 43.15, 29.37, 29.02. MS m/z: 326 (M+H+).

1,2,3-Trimethoxy-9,10-methylenedioxydehydroaporphine (Dehydrophoebine, 111a). To a solution of 110a (0.11 g, 0.30 mmol) in acetonitrile (10 ml) was added 10% palladium on carbon (0.088 g, 0.83 mmol). The mixture was heated to reflux for 2 hours under an argon atmosphere. The reaction mixture was filtered and the filtrate was concentrated under reduced pressure to give the crude product which was recrystallized from ethanol to give 111a as a green solid (0.099 g, 90%), mp 155-156 oC. UV (MeOH) λmax/nm (log ε) 216.4 (4.55), 241.9 (4.76), 256.2 (4.85), 271.1 (4.74), 297.9 (4.29), 335.4 (4.16). IR (CH2Cl2-film) cm-1: 2936, 1597, 1458, 1402, 1337, 1219, 1141, 1091, 1042, 940, 853, 796. 1H-NMR (CDCl3) δ: 8.90 (1H, s, H-11), 7.03 (1H, s, H-8), 6.60 (1H, s, H-7), 6.01 (2H, s, OCH2O), 4.06 (3H, s, OCH3), 3.93 (6H, s, OCH3), 3.27-3.21 (4H, m, 2xCH2), 3.02 (3H, s, NCH3).

13C-NMR (CDCl3) δ: 150.14, 147.30, 146.77, 145.73, 145.09, 142.19, 130.61, 122.27, 121.15, 120.33, 119.15, 105.42, 103.95, 103.49, 100.71, 61.19, 60.77, 60.24, 49.88, 40.45, 24.21. MS m/z: 368 (M+H+).

101

8,9-Dimethoxy-1,2-methylenedioxydehydroaporphine (Dehydrocrebanine, 111b). By the same procedure used to prepare 111a, 111b was obtained in quantitative yield as a brown solid, mp 139-140 oC. UV (MeOH) λmax/nm (log ε) 214.1 (4.25), 247.4 (4.19), 271.0 (4.58), 335.2 (3.87). IR (CH2Cl2-film) cm-1: 2940, 2831, 1604, 1492, 1400, 1303, 1278, 1219, 1105, 1059, 1038, 985, 821, 743. 1H-NMR (CDCl3) δ: 8.63 (1H, d, J = 9.0 Hz, H-11), 7.00 (1H, d, J = 9.0 Hz, H-10), 6.86 (1H, s, H-3), 6.84 (1H, s, H-7), 6.16 (2H, s, OCH2O), 3.97 (3H, s, OCH3), 3.96 (3H, s, OCH3), 3.34 (2H, t, J = 6.0 Hz, CH2), 3.18 (2H, d, J = 6.0 Hz, CH2), 3.11 (3H, s, NCH3).

13C-NMR (CDCl3) δ: 150.18, 145.14, 144.10, 141.59, 141.51, 129.46, 127.52, 123.37, 118.61, 118.27, 117.43, 108.53, 106.74, 100.83, 93.84, 60.49, 56.17, 50.53, 40.47, 30.82. MS m/z: 338 (M+H+).

1,2,3-Trimethoxy-9,10-methylenedioxy-7-oxoaporphine (Oxophoebine, 112a'). A saturated solution of Fremy’s salt in 4% sodium bicarbonate was added dropwise to a solution of 110a' (0.11 g, 0.31 mmol) in methanol (10 ml) and the mixture was stirred at room temperature for 6 hours. Dichloromethane (20 ml) was added to the mixture followed by extraction with water. The organic phase was separated and then dried over anhydrous sodium sulfate. Removal of the solvent under reduced pressure gave a red viscous oil which was recrystallized from ethanol to give 112a' as a red amorphous solid (92.2 mg, 81%), UV (MeOH) λmax/nm (log ε) 210.9 (4.39),

102

250.6 (4.22), 278.0 (4.38), 319.9 (3.84). IR (CH2Cl2-film) cm-1: 2923, 1644, 1582, 1463, 1402, 1363, 1268, 1116, 1031, 955, 897. 1H-NMR (CDCl3) δ: 8.93 (1H, d, J = 5.4 Hz, H-5), 8.56 (1H, s, H-11), 8.17 (1H, d, J = 5.4 Hz, H-4), 7.93 (1H, s, H-8), 6.12 (2H, s, OCH2O), 4.19 (3H, s, OCH3), 4.08 (3H, s, OCH3), 4.07 (3H, s, OCH3).

13C-NMR (CDCl3) δ: 180.60, 156.17, 153.24, 148.22, 147.89, 147.46, 144.88, 144.03, 131.28, 131.07, 127.74, 121.91, 119.03, 115.71, 107.50, 107.08, 102.10, 61.85, 61.49, 61.07. MS m/z: 366 (M+H+).

8,9-Dimethoxy-1,2-methylenedioxy-7-oxoaporphine (Oxocrebanine, 112b'). By the same procedure used to prepare 112a', 112b' was obtained in 86% yield as an orange solid, mp 101-102 oC. UV (MeOH) λmax/nm (log ε) 207.4 (4.40), 249.5 (4.38), 272.5 (4.30), 375.2 (3.55). IR (CH2Cl2-film) cm-1: 2934, 1651, 1567, 1463, 1243, 1037, 968, 833. 1H-NMR (CDCl3) δ: 8.76 (1H, d, J = 5.4 Hz, H-5), 8.22 (1H, d, J = 9.0 Hz, H-11), 7.61 (1H, d, J = 5.4 Hz, H-4), 7.11 (1H, d, J = 9.0 Hz, H-10), 6.98 (1H, s, H-3), 6.29 (2H, s, OCH2O), 4.00 (3H, s, OCH3), 3.93 (3H, s, OCH3).

13C-NMR (CDCl3) δ: 180.94, 153.44, 152.28, 150.84, 146.90, 144.71, 143.32, 135.92, 126.25, 124.87, 123.92, 121.66, 117.23, 107.92, 102.73, 101.97, 61.27, 56.14. MS m/z: 336 (M+H+).

103

4,5,6,6a-Tetradehydro-N-methyl-7-oxoaporphinium salt (Uthongine, 113). 112b' (48.3 mg, 0.14 mmol) was dissolved in acetonitrile (5 ml). Iodomethane (20.5 mg, 0.14 mmol) was added and then the mixture was refluxed for 6 hours. The solvent was removed under reduced pressure. The resulting residue was shaken with water (50 ml) and dichloromethane (50 ml). Removal of the water under reduced pressure gave a purple solid which was washed from dichloromethane to give 113 as a purple amorphous solid (44.8 mg, 91%), UV (MeOH) λmax/nm (log ε) 219.1 (4.37), 261.0 (4.23), 291.6 (4.14), 382.1 (3.57). IR (CH2Cl2-film) cm-1: 2925, 1667, 1594, 1492, 1404, 1271, 1032, 985, 844. 1H-NMR (CDCl3) δ: 9.16 (1H, d, J = 6.0 Hz, H-5), 8.53 (1H, d, J = 6.0 Hz, H-4), 8.44 (1H, d, J = 8.4 Hz, H-11), 7.57 (1H, s, H-3), 7.44 (1H, m, H-10), 6.64 (2H, s, OCH2O), 4.85 (3H, s, NCH3), 4.08 (3H, s, OCH3), 4.04 (3H, s, OCH3).

13C-NMR (CDCl3) δ: 178.37, 157.42, 154.49, 150.60, 150.20, 141.09, 139.59, 126.44, 125.30, 124.09, 123.71, 123.11, 118.85, 109.24, 104.84, 102.81, 61.71, 56.40, 48.93. MS m/z: 350 (M)+. 3.2.2 การสงเคราะห Phenanthrene alkaloids

1-(N-Carbomethoxy-N-methylamino)ethyl-2,3,4-trimethoxy-6,7-methylenedioxyphenanthrene (114a). Methyl chloroformate (0.20 ml) was added dropwise to a stirred mixture of 110a (0.08 g, 0.22 mmol) and triethylamine (0.18 ml) in dichloromethane (5 ml) at 0-10 oC. Stirring was continued at room temperature for 2 hours. Dichloromethane (10 ml) was added and the combined dichloromethane layer was washed with water (20 ml), 5% sodium carbonate (20 ml), 10% hydrochloric acid (20 ml), water (20 ml), and brine then dried over anhydrous sodium sulfate. Removal of the solvent under reduced pressure gave 114a as a pale yellow solid (0.09 g, 96%), mp 143-144 oC. IR (CH2Cl2-film) cm-1: 2937, 1704, 1586, 1464, 1401, 1242, 1205, 1143,

104

1087, 1058, 1039, 979, 879, 771. 1H-NMR (CDCl3) δ: 9.05 (1H, s, H-5), 7.99 and 7.81 (total 1H, 2br s, H-9 of both conformers), 7.60 (1H, d, J = 9.3 Hz, H-10), 7.19 (1H, s, H-8), 6.08 (2H, s, OCH2O), 4.06 (3H, s, OCH3), 4.00 (3H, s, OCH3), 3.96 (3H, s, OCH3), 3.74 (3H, s, CO2CH3), 3.46 (2H, m, CH2), 3.33 (2H, m, CH2), 2.96 (3H, br s, NCH3).

13C-NMR (CDCl3) δ: (both conformers) 156.92, 150.72, 150.36, 147.89, 146.66, 145.71, 128.68, 128.06, 126.78, 125.75, 123.19, 121.81, 120.89, 120.58, 105.64, 105.35, 101.20, 61.37, 61.15, 60.31, 52.58, 50.21, 49.44, 35.05, 24.74, 24.32.

1-(N-Carbomethoxy-N-methylamino)ethyl-7,8-dimethoxy-3,4-methylenedioxyphenanthrene (114b). By the same procedure used to prepare 114a (but purification was by chromatography over silica gel using 15% ethyl acetate-hexane), 114b was obtained in 45% yield as a gray solid, mp 119-120 oC. IR (CH2Cl2-film) cm-1: 2954, 1701, 1594, 1475, 1376, 1278, 1205, 1062, 1034, 988, 817, 771. 1H-NMR (CDCl3) δ: 8.82 (1H, d, J = 9.3 Hz, H-5), 7.98 (1H, s, H-2), 7.96 and 7.86 (total 1H, 2br d, H-10 of both conformers), 7.29 (1H, d, J = 9.3 Hz, H-6), 7.06 (1H, br d, Hz, H-9), 6.21 (2H, s, OCH2O), 4.02 and 4.01 (6H, 2s, 2xOCH3), 3.74 (3H, s, CO2CH3), 3.52 (2H, br s, CH2), 3.26 (2H, br s, CH2), 2.92 and 2.82 (3H, 2br s, NCH3).

13C-NMR (CDCl3) δ: (both conformers) 156.90, 149.99, 145.03, 143.28, 141.95, 129.91, 129.69, 127.46, 125.40, 123.77, 123.61, 123.16, 122.92, 118.67, 117.07, 112.69, 110.13, 100.99, 61.30, 56.31, 52.65, 51.26, 50.38, 35.28, 35.03, 32.55, 31.95.

105

1-(N-Carbomethoxy-N-methylamino)ethyl-3,4,7,8-tetramethoxyphenanthrene (114c). By the same procedure used to prepare 114a (but purification was by chromatography over silica gel using 50% ethyl acetate-hexane), 114c was obtained in 96% yield as a pale brown solid, mp 115-116 oC. IR (CH2Cl2-film) cm-1: 2940, 1699, 1593, 1470, 1280, 1201, 1104, 1019, 822, 772. 1H-NMR (CDCl3) δ: 9.46 (1H, d, J = 9.6 Hz, H-5), 8.07-7.92 (1H, m, H-10), 8.04 (1H, s, H-2), 7.35 (1H, d, J = 9.6 Hz, H-6), 7.16 (1H, br d, H-9), 4.05, 4.04 and 4.02 (9H, 3s, 3xOCH3), 3.92 (3H, s, OCH3), 3.74 (3H, br d, CO2CH3), 3.59 (2H, br s, CH2), 3.32 (2H, br s, CH2), 2.91 (3H, 2br s, NCH3).

13C-NMR (CDCl3) δ: (both conformers) 156.80, 150.91, 149.60, 145.55, 142.97, 131.92, 128.38, 125.31, 125.13, 124.81, 124.64, 122.85, 122.66, 118.84, 114.17, 112.69, 61.13, 59.57, 56.44, 56.07, 52.52, 50.90, 50.03, 35.10, 34.80, 32.65, 32.00.

1-(N-Trifluoroacetyl-N-methylamino)ethyl-2,3,4-trimethoxy-6,7-methylenedioxyphenanthrene (114a'). Trifluoroacetic anhydride (1.06 ml) was added dropwise to a stirred mixture of 110a (0.41 g, 1.10 mmol) and triethylamine (0.92 ml) in dichloromethane (15 ml). Stirring was continued at room temperature for 2 hours. Dichloromethane (30 ml) was added and the dichloromethane layer was washed with 10% sodium hydrogen carbonate (3x30 ml), water (3x30 ml), 10% hydrochloric acid (3x30 ml) and brine then dried over anhydrous sodium sulfate. Removal of the solvent under reduced pressure gave 114a' as pale yellow crystals (0.38 g, 75%),

106

mp 108-109 oC. IR (CH2Cl2-film) cm-1: 2939, 1693, 1586, 1503, 1464, 1401, 1243, 1192, 1141, 1097, 1057, 979, 855, 649. 1H-NMR (CDCl3) δ: 9.04 (1H, s, H-5), 7.91 (1H, d, J = 9.3 Hz, H-10), 7.60 (1H, d, J = 9.3 Hz, H-9), 7.17 (1H, s, H-8), 6.07 (2H, s, OCH2O), 4.05 (3H, s, OCH3), 4.02 and 4.01 (3H, 2s, OCH3), 3.96 (3H, s, OCH3), 3.66-3.61 (2H, m, CH2), 3.40-3.35 (2H, m, CH2), 3.15 and 3.09 (3H, 2s, NCH3).

13C-NMR (CDCl3) δ: (both conformers) 157.23, 156.75, 151.32, 151.11, 150.51, 150.44, 148.16, 148.01, 146.86, 146.77, 145.71, 145.66, 128.77, 128.63, 128.10, 127.73, 127.24, 127.16, 125.48, 125.75, 122.23, 121.89, 121.33, 120.57, 119.71, 118.63, 118.47, 114.81, 114.66, 105.61, 105.43, 105.40, 101.32, 101.26, 61.35, 61.22, 60.33, 50.71, 35.64, 35.06, 23.15.

1-(N-Trifluoroacetyl-N-methylamino)ethyl-3,4,7,8-tetramethoxyphenanthrene (114c'). By the same procedure used to prepare 114a', 114c' was obtained in quantitative yield as a brown semisolid (0.25 g, quantitative yield). IR (CH2Cl2-film) cm-1: 2942, 1686, 1575, 1470, 1280, 1196, 1139, 1019, 800, 721. 1H-NMR (CDCl3) δ: 9.44 (1H, d, J = 9.6 Hz, H-5), 8.05 (1H, d, J = 9.6 Hz, H-10), 7.92 (1H, d, J = 9.6 Hz, H-9), 7.33 (1H, d, J = 9.6 Hz, H-6), 7.12 (1H, s, H-2), 4.02 and 4.00 (9H, 2s, 3xOCH3), 3.90 (3H, s, OCH3), 3.72 (2H, t, J = 7.8 Hz, CH2), 3.36 (2H, t, J = 7.8 Hz, CH2), 3.09 and 2.91 (3H, 2s, NCH3).

13C-NMR (CDCl3) δ: (both conformers) 157.09, 156.73, 151.00, 149.77, 145.90, 143.07, 130.87, 128.44, 125.34, 125.22, 124.82, 124.74, 122.46, 119.30, 118.40, 114.59, 114.25, 112.89, 61.23, 59.69, 56.42, 56.17, 51.50, 36.06, 36.01, 30.87.

107

Thalihazine (115a). A mixture of 114a (0.102 g, 0.24 mmol) and lithium aluminium hydride (0.082 g, 2.16 mmol) in dry tetrahydrofuran (20 ml) was refluxed for 30 min. Water (10 ml) was added dropwise followed by dilute ammonium hydroxide (5 ml). The pale yellow granular residue was filtered and washed with dichloromethane. The organic phase was separated and then dried over anhydrous sodium sulfate. Removal of the solvent under reduced pressure gave crude thalihazine which was chromatograped over silica gel using ethyl acetate as eluent to give thalihazine (115a) as a pale yellow semisolid (0.054 g, 59%), UV (MeOH) λmax/nm (log ε) 220.1 (4.27), 261.8 (4.88), 284.1 (4.37), 303.0 (4.01), 315.1 (3.96), 343.5 (3.46), 360.7 (3.49). IR (CH2Cl2-film) cm-1: 2937, 1586, 1463, 1400, 1243, 1204, 1086, 1041, 980, 856, 646. 1H-NMR (CDCl3) δ: 9.06 (1H, s, H-5), 7.78 (1H, d, J = 9.0 Hz, H-10), 7.57 (1H, d, J = 9.0 Hz, H-9), 7.19 (1H, s, H-8), 6.09 (2H, s, OCH2O), 4.06 (3H, s, OCH3), 3.99 (3H, s, OCH3), 3.96 (3H, s, OCH3), 3.31-3.25 (2H, m, CH2), 2.58-2.54 (2H, m, CH2), 2.41 (6H, s, N(CH3)2).

13C-NMR (CDCl3) δ: 150.53, 150.14, 147.89, 146.65, 145.80, 128.66, 127.83, 126.65, 125.84, 124.24, 121.88, 120.80, 105.67, 105.32, 101.19, 61.45, 61.13, 60.28, 59.95, 45.22, 24.30. MS m/z: 384 (M+H+).

8-Methoxyuvariopsine (115b). By the same procedure used to prepare 115a, 115b was obtained in quantitative yield as a brown solid, mp 93-94 oC. UV (MeOH) λmax/nm (log ε) 226.1 (4.41), 259.9 (4.55), 276.3 (4.48), 296.7 (4.27), 330.0 (4.01), 354.4 (3.38), 372.5 (3.02). IR (CH2Cl2-

108

film) cm-1: 2941, 1594, 1474, 1447, 1375, 1278, 1191, 1063, 1036, 988, 817, 745. 1H-NMR (CDCl3) δ: 8.78 (1H, d, J = 9.0 Hz, H-5), 7.92 (1H, d, J = 9.3 Hz, H-10), 7.82 (1H, d, J = 9.3 Hz, H-9), 7.25 (1H, d, J = 9.0 Hz, H-6), 7.05 (1H, s, H-2), 6.16 (2H, s, OCH2O), 3.99 and 3.98 (6H, 2s, 2xOCH3), 3.18 (2H, t, J = 8.4 Hz, CH2), 2.60 (2H, t, J = 8.4 Hz, CH2), 2.35 (6H, s, N(CH3)2).

13C-NMR (CDCl3) δ: 149.87, 144.97, 143.20, 141.62, 131.10, 127.34, 125.04, 123.74, 123.15, 121.87, 118.35, 117.00, 112.57, 111.02, 109.86, 100.89, 61.24, 61.09, 56.23, 45.40, 31.95. MS m/z: 354 (M+H+).

Uvariopsamine (115c). By the same procedure used to prepare 115a, 115c was obtained in 70% yield as a brown viscous oil (0.12 g, 70%), UV (MeOH) λmax/nm (log ε) 225.7 (4.00), 264.3 (4.19), 271.74 (4.18), 291.8 (3.82), 307.6 (3.65), 319.9 (3.63), 348.9 (2.99), 366.7 (2.92). IR (CH2Cl2-film) cm-1: 2939, 1592, 1469, 1279, 1104, 1019, 822. 1H-NMR (CDCl3) δ: 9.43 (1H, d, J = 9.3 Hz, H-5), 8.00 (1H, d, J = 9.6 Hz, H-10), 7.86 (1H, d, J = 9.6 Hz, H-9), 7.31 (1H, d, J = 9.3 Hz, H-6), 7.16 (1H, s, H-2), 4.01 (6H, 2s, 2xOCH3), 4.00 (3H, s, OCH3), 3.89 (3H, s, OCH3), 3.25 (2H, t, J = 8.4 Hz, CH2), 2.66 (2H, t, J = 8.4 Hz, CH2), 2.38 (6H, s, N(CH3)2).

13C-NMR (CDCl3)

δ: 150.92, 149.58, 145.32, 142.99, 133.34, 128.38, 125.19, 125.15, 124.93, 124.71, 122.97, 118.69, 114.01, 112.68, 61.23, 61.06, 59.63, 56.48, 56.16, 45.45, 32.48. MS m/z: 370 (M+H+).

109

Secophoebine (115a'). 114a' (30.4 mg, 0.065 mmol) was dissolved in 90% methanol-water (10 ml). Sodium carbonate (13.9 mg, 0.13 mmol) was added and then the mixture was refluxed for 2 hours, the solvent was removed under reduced pressure. The resulting residue was shaken with water (10 ml), 10% sodium carbonate (10 ml) and extracted with dichloromethane (3x10 ml), then dried over anhydrous sodium sulfate. Removal of the solvent under reduced pressure gave crude secophoebine which was chromatograped over silica gel using ethyl acetate as eluent to give secophoebine (115a') as a pale yellow semisolid (13.8 mg, 58%), UV (MeOH) λmax/nm (log ε) 219.5 (4.32), 261.9 (4.85), 283.8 (4.40), 304.2 (4.05), 315.4 (4.00), 344.9 (3.56), 361.3 (3.59). IR (CH2Cl2-film) cm-1: 3323, 2935, 1586, 1463, 1399, 1242, 1203, 1086, 1039, 979, 880, 647. 1H-NMR (CDCl3) δ: 9.06 (1H, s, H-5), 7.79 (1H, d, J = 9.0 Hz, H-9), 7.52 (1H, d, J = 9.0 Hz, H-10), 7.14 (1H, s, H-8), 6.04 (2H, s, OCH2O), 4.05 (3H, s, OCH3), 3.98 (3H, s, OCH3), 3.95 (3H, s, OCH3), 3.29 (2H, t, J = 7.8 Hz, CH2), 2.87 (2H, t, J = 7.8 Hz, CH2), 2.49 (3H, s, NCH3), 1.89 (1H, br s, NH). 13C-NMR (CDCl3) δ: 150.45, 150.25, 147.85, 146.61, 145.75, 128.63, 127.92, 126.46, 125.79, 124.44, 121.83, 120.94, 105.62, 105.27, 101.16, 61.33, 61.08, 60.22, 52.69, 36.43, 26.54. MS m/z: 370 (M+H+).

Noruvariopsamine (115c'). By the same procedure used to prepare 115a', 115c' was obtained in 67% yield as a pale yellow semisolid, UV (MeOH) λmax/nm (log ε) 225.7 (4.47), 264.4 (4.72), 271.2 (4.71), 291.5 (4.27), 307.0 (4.08), 319.9 (4.08), 349.2 (2.64), 366.4 (1.51). IR (CH2Cl2-film) cm-1: 2938, 1593, 1470, 1374, 1279, 1230, 1103, 1018, 823, 797. 1H-NMR (CDCl3) δ: 9.45 (1H, d, J = 9.0 Hz, H-5), 8.00 (1H, d, J = 9.3 Hz, H-10), 7.88 (1H, d, J = 9.3 Hz, H-9), 7.32 (1H, d, J = 9.0 Hz, H-6), 7.18 (1H, s, H-2), 4.02 (9H, s, 3xOCH3), 3.90 (3H, s, OCH3), 3.27 (2H, t, J = 6.6 Hz, CH2), 2.96 (2H, t, J = 6.6 Hz, CH2), 2.46 (3H, s, NCH3).

13C-NMR (CDCl3) δ: 150.81,

110

149.58, 145.33, 142.96, 133.03, 128.37, 125.22, 125.16, 124.88, 124.70, 122.99, 118.58, 114.11, 112.65, 61.22, 59.62, 56.45, 56.14, 53.00, 36.49, 34.41. MS m/z: 356 (M+H+). 3.2.3 การสงเคราะห 8-Hydroxystephenanthrine

8-Hydroxy-1,2-methylenedioxyaporphine (Fibrecisine, 116). A mixture of 110d (0.16 g, 0.42 mmol) and conc. hydrochloric acid (8 ml) in ethanol (8 ml) was refluxed for 1.5 hours. The mixture was cooled to room temperature and the solvent was removed under reduced pressure. Water was added and the residue was basified with conc. ammonia solution. The residue was extracted with chloroform (40 ml). The chloroform layer was separated and then dried over anhydrous sodium sulfate. Removal of the solvent under reduced pressure gave 116 as a brown amorphous solid (0.11 g, 89%), IR (CH2Cl2-film) cm-1: 3412, 2911, 2846, 1641, 1577, 1454, 1260, 1225, 1059, 927, 793. 1H-NMR (CH3OD) δ: 7.63 (1H, d, J = 7.8 Hz, H-11), 7.15 (1H, t, J = 7.8 Hz, H-10), 6.80 (1H, d, J = 7.8 Hz, H-9), 6.56 (1H, s, H-3), 6.07 and 5.92 (2H, 2s, OCH2O), 3.65 (1H, dd, J = 14.7, 4.8 Hz, H-6a), 3.23-3.07 and 2.70-2.21 (6H, m, 3xCH2), 2.60 (3H, s, NCH3).

13C-NMR (CH3OD) δ: 153.71 147.01, 142.94, 132.12, 127.28, 126.38, 126.04, 121.57, 118.86, 116.97, 114.90, 107.46, 100.84, 62.01, 53.56, 43.47, 28.63, 25.91.

1-(N-Carbomethoxy-N-methylamino)ethyl-8-O-carbomethoxy-3,4-methylenedioxyphenan- threne (117). Methyl chloroformate (0.20 ml) was added dropwise to a stirred mixture of 116

111

(89.5 mg, 0.30 mmol) and triethylamine (0.18 ml) in dichloromethane (10 ml) at 0-10 oC. Stirring was continued at room temperature for 1 hour. Dichloromethane (10 ml) was added and the combined dichloromethane layer was washed with water (20 ml), 5% sodium carbonate (3x20 ml), water (20 ml), 10% hydrochloric acid (3x20 ml) and water (20 ml), then dried over anhydrous sodium sulfate. Removal of the solvent under reduced pressure gave a residue which was recrystallized from ethanol to give 112 as a brown solid (101.3 mg, 82%), mp 147-149 oC. IR (CH2Cl2-film) cm-1: 2956, 2893, 1764, 1701, 1597, 1450, 1263, 1235, 1052, 940, 769. 1H-NMR (CDCl3) δ: 8.91 (1H, d, J = 8.1 Hz, H-5), 7.72-8.02 (2H, m, H-10, 9), 7.54 (1H, t, J = 8.1 Hz, H-6), 7.42 (1H, d, J = 7.5 Hz, ArH), 7.02 (1H, br d, H-7), 6.12 (2H, s, OCH2O), 3.97 (3H, s, NCH3), 3.70 (3H, br d, CO2CH3), 3.43 (2H, br s, CH2), 3.16 (2H, br s, CH2), 2.82 (3H, br d, CO2CH3). 13C-NMR (CDCl3) δ: 156.83 154.46, 146.65, 145.26, 142.32, 130.04, 125.85, 125.49, 124.81, 123.84, 123.50, 118.87, 117.21, 116.48, 111.12, 101.19, 55.62, 52.60, 51.12, 50.17, 35.15, 34.86, 32.28, 31.78.

8-Hydroxystephenanthrine (118). A mixture of 117 (145.8 mg, 0.35 mmol) and lithium aluminium hydride (121.0 mg, 3.19 mmol) in dry tetrahydrofuran (20 ml) was refluxed for 1 hour. Water (10 ml) was added dropwise followed by dilute ammonium hydroxide (5 ml). The pale yellow granular residue was filtered and washed with dichloromethane. The organic phase was separated and then dried over anhydrous sodium sulfate. Removal of the solvent under reduced pressure gave 8-hydroxystephenanthrine (118) as a pale brown solid (83.6 mg, 77%), mp 189-190 oC. UV (MeOH) λmax/nm (log ε) 218.1 (4.35), 240.9 (4.40), 248.1 (4.48), 254.8 (4.59), 298.1 (4.14), 315.6 (3.99), 327.8 (4.02), 356.6 (3.55), 375.2 (3.58). IR (CH2Cl2-film) cm-1: 3400, 2923, 2854, 1592, 1441, 1365, 1283, 1045, 936, 806, 754. 1H-NMR (CDCl3) δ: 8.61 (1H, d, J = 7.8 Hz, H-5), 8.07 (1H, d, J = 9.3 Hz, H-10), 7.78 (1H, d, J = 9.3 Hz, H-9), 7.42 (1H, t, J = 7.8

112

Hz, H-6), 7.11 (1H, s, H-2), 7.02 (1H, d, J = 7.8 Hz, H-7), 6.20 (2H, s, OCH2O), 3.25 (2H, t, J = 8.4 Hz, CH2), 2.70 (2H, t, J = 8.4 Hz, CH2), 2.44 (6H, s, NCH3).

13C-NMR (CDCl3) δ: 152.70, 144.65, 142.34, 129.92, 129.71, 126.51, 126.15, 122.03, 120.99, 119.02, 118.72, 117.12, 110.89, 110.51, 100.86, 60.49, 44.76, 31.13. MS m/z: 310 (M+H+). 3.2.4 การสงเคราะห 11-Methoxylettowianthine

2-Acetoxymercury-3-hydroxybenzaldehyde (120). A solution of 119 (70.00 g, 573.20 mmol), mercuric acetate (182.00 g, 571.11 mmol) and acetic acid (8.4 ml) in ethanol (280 ml) and water (280 ml) was refluxed for 12 hours. About 25% of the solvent was removed under vacuum and the mixture was left to cool to room temperature. The precipitate was filtered off and dried in air to give 120 as a pale yellow solid (134.10 g, 62%), mp 171-173 oC. IR (Nujol) cm-1: 3429, 1643, 1556, 1414, 667. 1H-NMR (DMSO-d6) δ: 10.06 (1H, s, CHO), 7.49 (1H, d, J = 7.2 Hz, ArH), 7.40 (1H, t, J = 7.2 Hz, ArH), 7.20 (1H, d, J = 7.2 Hz, ArH), 1.96 (3H, s, OCH3).

13C-NMR (DMSO-d6) δ: 195.05, 175.27, 161.91, 141.87, 130.67, 126.53, 122.42, 23.61.

3-Hydroxy-2-iodobenzaldehyde (121). A mixture of 120 (60.00 g, 157.58 mmol), iodine (79.20 g, 312.05 mmol) and potassium iodide (126.40 g, 761.43 mmol) in water (200 ml) was stirred at room temperature for 15 hours. Excess sodium thiosulfate was added to bleach of the iodine. The precipitate was filtered off and dried in air and then recrystallized from benzene to give 121 as a yellow solid (28.10 g, 72%), mp 155-157 oC. IR (CH2Cl2-film) cm-1: 3148, 1665, 1564, 1455,

113

1293, 1219, 1018, 784, 720, 685. 1H-NMR (DMSO-d6) δ: 10.39 (1H, br s, OH), 10.12 (1H, s, CHO), 7.32 (1H, dd, J = 7.5, 1.8 Hz, ArH), 7.24 (1H, t, J = 7.5 Hz, ArH), 7.19 (1H, dd, J = 7.5, 1.8 Hz, ArH). 13C-NMR (DMSO-d6) δ: 196.38, 157.37, 136.37, 129.21, 121.01, 120.58, 91.48.

2-Iodo-3-methoxybenzaldehyde (122). A mixture of 121 (10.00 g, 40.32 mmol), dimethyl sulfate (15.14 g, 120.03 mmol) and sodium hydroxide (18.00 g, 450.03mmol) in water (16 ml) was stirred at room temperature for 2.5 hours. Water was added, the precipitate was filtered off and dried in air and then recrystallized from ethanol to give 122 as a pale yellow solid (5.26 g, 50%), mp 82-84 oC. IR (Nujol) cm-1: 2728, 1667, 1562, 1377, 1268, 1239, 1013, 787, 722, 683. 1H-NMR (CDCl3) δ: 10.20 (1H, s, CHO), 7.50 (1H, dd, J = 7.8, 1.5 Hz, ArH), 7.39 (1H, t, J = 7.8 Hz, ArH), 7.05 (1H, dd, J = 7.8, 1.5 Hz, ArH), 3.95 (3H, s, OCH3).

13C-NMR (CDCl3) δ: 196.47, 158.26, 136.69, 129.48, 122.26, 116.03, 93.91, 56.84.

2-Iodo-3-methoxybenzyl alcohol (123). Sodium borohydride (1.07 g, 28.28 mmol) was added portionwise to a solution of 122 (5.06 g, 19.31 mmol) in ethanol (23 ml) and the mixture was stirred for 1 hour. Removal of the ethanol under reduced pressure gave a residue which was shaken with water (3x20 ml) and chloroform (23 ml). The chloroform layer was washed with brine, then dried over anhydrous sodium sulfate. Removal of the solvent gave 123 as a white solid (4.90 g, 96%), mp 73-75 oC. IR (CH2Cl2-film) cm-1: 3411, 2937, 1567, 1466, 1267, 1043, 773, 594. 1H-NMR (CDCl3) δ: 7.32 (1H, t, J = 8.1 Hz, ArH), 7.09 (1H, d, J = 8.1 Hz, ArH), 6.78 (1H, d, J = 8.1 Hz, ArH), 4.72 (2H, d, J = 6.3 Hz, CH2), 3.90 (3H, s, OCH3).

13C-NMR (CDCl3) δ: 157.80, 144.53, 129.34, 120.75, 110.03, 89.29, 69.55, 56.54.

114

2-Iodo-3-methoxybenzyl chloride (124). A mixture of 123 (14.18 g, 53.70 mmol), thionyl chloride (16.00 g, 134.49 mmol) and pyridine (4.3 ml) in chloroform (50 ml) was refluxed for 1 hour. After cooling to room temperature, the mixture was poured into ice-water and 5N hydrochloric acid (52 ml). The chloroform layer was washed with water (3x45 ml), 10% sodium carbonate (3x45 ml) and water (3x45 ml), then dried over anhydrous sodium sulfate. Removal of the solvent under reduced pressure gave 124 as a pale yellow solid (14.71 g, 97%), mp 59-61 oC. IR (CH2Cl2-film) cm-1: 2966, 2836, 1570, 1467, 1276, 1065, 930, 722. 1H-NMR (CDCl3) δ: 7.31 (1H, t, J = 7.8 Hz, ArH), 7.12 (1H, dd, J = 7.8, 1.2 Hz, ArH), 6.77 (1H, dd, J = 7.8, 1.2 Hz, ArH), 4.75 (2H, s, CH2), 3.90 (3H, s, OCH3).

13C-NMR (CDCl3) δ: 158.45, 141.64, 129.50, 122.56, 110.67, 92.06, 56.65, 51.53.

2-Iodo-3-methoxybenzyl cyanide (125). A mixture of 124 (9.28 g, 32.85 mmol), sodium cyanide (6.92 g, 141.20 mmol) and potassium iodide (3.28 g, 19.76 mmol) in water (24 ml) and acetone (100 ml) was refluxed for 16 hours. The solvent was removed under reduced pressure. The residue was extracted with chloroform (40 ml) and the chloroform layer was washed with water (3x100 ml), then dried over anhydrous sodium sulfate. Removal of the solvent under reduced pressure gave 125 as a orange-yellow viscous oil (8.62 g, 96%). IR (CH2Cl2-film) cm-1: 2939, 2838, 2249, 1713, 1570, 1467, 1268, 1066, 769. 1H-NMR (CDCl3) δ: 7.33 (1H, t, J = 8.1 Hz, ArH), 7.14 (1H, d, J = 8.1, Hz, ArH), 6.78 (1H, d, J = 8.1 Hz, ArH), 3.89 (3H, s, OCH3), 3.86 (2H, s, CH2).

13C-NMR (CDCl3) δ: 158.35, 134.89, 129.68, 121.19, 117.30, 110.25, 91.42, 56.60, 30.34.

115

2-Iodo-3-methoxyphenylacetic acid (126). A mixture of 125 (54.73 g, 200.42 mmol) and potassium hydroxide (80.01 g, 1.43 mol) in ethanol (350 ml) and water (154 ml) was refluxed for 16 hours. The solvent was removed under reduced pressure to give a residue which was poured into ice-water (77 ml) and acidified with conc. hydrochloric acid. After cooling to room temperature. The precipitate was filtered off and dried in air to give 126 as a brown solid (34.59 g, 59%), mp 117-119 oC. IR (CH2Cl2-film) cm-1: 3429, 2961, 2835, 1694, 1467, 1268, 1072, 764.

1H-NMR (CDCl3) δ: 7.27 (1H, t, J = 8.1 Hz, ArH), 6.92 (1H, d, J = 8.1 Hz, ArH), 6.74 (1H, d, J = 8.1 Hz, ArH), 3.92 (2H, s, CH2), 3.88 (3H, s, OCH3).

13C-NMR (CDCl3) δ: 176.37, 158.43, 138.99, 129.20, 123.16, 109.71, 93.56, 56.55, 46.41.

2-(2-Iodo-3-methoxyphenyl)-N-(3,4-methylenedioxyphenethyl)acetamide (127). Thionyl chloride (31.41 g, 264.02 mmol) was added to a solution of 126 (23.13 g, 79.19 mmol) in benzene (50 ml) and the solution was refluxed for 1 hour. Romoval of the solvent under reduced pressure gave the acid chloride which was dissolved in ethanol-free chloroform (100 ml) and added to a mixture of 103a (10.86 g, 65.74 mmol) in ethanol-free chloroform (200 ml) and 10% sodium hydrogen carbonate (200 ml). The mixture was stirred at room temperature for 2 hours. The chloroform layer was washed with 10% sodium carbonate (2x100 ml), 5% hydrochloric acid (2x100 ml) and water (2x100 ml), then dried over anhydrous sodium sulfate. Removal of the solvent under reduced pressure gave a residue which was recrystallized from ethanol to give 127 as a pale yellow solid (22.44 g, 78%), mp 118-120 oC. IR (CH2Cl2-film) cm-1: 3288, 2939, 2882, 1650, 1567, 1488, 1442, 1247, 1068, 1037, 929, 809, 762 1H-NMR (CDCl3) δ: 7.28 (1H, t, J = 8.1

116

Hz, ArH), 6.92 (1H, dd, J = 8.1, 1.2 Hz, ArH), 6.74 (1H, dd, J = 8.1, 1.2 Hz, ArH), 6.64 (1H, d, J = 7.8 Hz, ArH), 6.56 (1H, d, J = 1.5 Hz, ArH), 6.49 (1H, dd, J = 7.8, 1.5 Hz, ArH), 5.93 (2H, s, OCH2O), 5.39 (1H, br s, NH), 3.92 (3H, s, OCH3), 3.77 (2H, s, CH2), 3.42 (2H, apparent q, J = 6.6 Hz, CH2), 2.66 (2H, t, J = 6.6, CH2).

13C-NMR (CDCl3) δ: 169.47, 158.54, 147.68, 146.04, 140.12, 132.34, 129.54, 123.17, 121.61, 109.58, 109.00, 108.20, 100.81, 93.60, 56.52, 49.01, 40.81, 35.08.

1-(2-Iodo-3-methoxybenzyl)-6,7-methylenedioxy-3,4-dihydroisoquinoline (128). A solution of 127 (15.39 g, 39.24 mmol) and phosphorus oxychloride (53.45 g, 348.59 mmol) in benzene (150 ml) was refluxed for 2 hours. The excess reagent and solvent were removed under reduced pressure. The resulting brown residue was shaken with chloroform (200 ml). The mixture was basified by addition of solid sodium carbonate followed by dropwise addition of water. The chloroform layer was separated and then dried over anhydrous sodium sulfate. Removal of the solvent under reduced pressure gave 128 as a brown solid (14.34 g, 87%), mp 124-126 oC. IR (CH2Cl2-film) cm-1: 2898, 1636, 1504, 1485, 1466, 1265, 1037, 934, 733. 1H-NMR (CDCl3) δ: 7.18 (1H, t, J = 7.8 Hz, ArH), 6.88 (1H, s, ArH), 6.80 (1H, d, J = 7.8 Hz, ArH), 6.67 (1H, d, J = 7.8 Hz, ArH), 6.66 (1H, s, ArH), 5.93 (2H, s, OCH2O), 4.14 (2H, s, CH2), 3.88 (3H, s, OCH3), 3.66 (2H, t, J = 7.5 Hz, CH2), 2.65 (2H, t, J = 7.5 Hz, CH2).

13C-NMR (CDCl3) δ: 165.62, 158.29, 149.35, 146.45, 142.63, 133.53, 129.05, 122.75, 122.01, 108.97, 107.96, 106.38, 101.33, 93.64, 56.47, 47.83, 46.72, 26.29.

117

1-(2-Iodo-3-methoxy)-5,6-dihydro-8,9-methylenedioxypyrrolo[2,1-a]-3,4-isoquinoline-2,3-dione (129). Oxalyl chloride (6.67 ml) was added dropwise to a stirred solution of 128 (15.56 g, 36.94 mmol) and triethylamine (11.1 ml) in dichloromethane (150 ml). Stirring was continued at room temperature for 3 hours and the dichloromethane (50 ml) was added to a mixture. The dichloromethane layer was washed with 5% hydrochloric acid (3x100 ml) and water (2x100 ml), then dried over anhydrous sodium sulfate. Removal of the solvent under reduced pressure gave a residue which was chromatograped over silica gel using 30% ethyl acetate-hexane to give 129 as a red solid (8.60 g, 49%), mp 249-251 oC. IR (CH2Cl2-film) cm-1: 2916, 1742, 1679, 1560, 1464, 1394, 1263, 1036, 947, 867, 734. 1H-NMR (CDCl3) δ: 7.37 (1H, t, J = 7.8 Hz, ArH), 6.85 (1H, d, J = 7.8 Hz, ArH), 6.84 (1H, d, J = 7.8 Hz, ArH), 6.78 (1H, s, ArH), 6.54 (1H, s, ArH), 5.98 (2H, s, OCH2O), 3.92 (3H, s, OCH3), 3.86 (2H, t, J = 6.3 Hz, CH2), 3.07 (2H, t, J = 6.3 Hz, CH2).

13C-NMR (CDCl3) δ: 181.73, 159.19, 157.99, 157.25, 152.31, 147.32, 137.83, 134.94, 130.09, 123.74, 118.25, 112.00, 110.70, 109.23, 108.73, 102.15, 93.89, 56.56, 36.16, 29.30.

11- methoxylettowianthine (130). To a solution of 129 (103.0 mg, 0.22 mmol), in DMA (4 ml) were added palladium(II)acetate (5.4 mg, 0.02 mmol), ligand B (11.9 mg, 0.05 mmol), potassium carbonate (99.8 mg, 0.72 mmol) and pivalic acid (7.4 mg, 0.07 mmol). The mixture was irradiated in a microwave reactor for 5 min with the power level at 850 W under an argon atmosphere. After cooling to room temperature, the reaction mixture was filtered over Celite and the solvent was evaporated under reduced pressure to give the crude product which was purified by silica gel column chromatography with 50% ethyl acetate-hexane to give 11- methoxylettowianthrine (130) as a purple amorphous solid (19.8 mg, 26%). UV (MeOH) λmax/nm (log ε) 212.3 (4.36), 262.3 (4.31), 297.7 (4.01), 351.2 (3.95). IR (CH2Cl2-film) cm-1: 2916, 2848, 1744, 1698, 1620, 1581, 1527, 1411, 1278, 1054, 949, 767. 1H-NMR (CDCl3) δ: 8.22 (1H, dd, J = 8.1, 0.9 Hz, ArH), 7.59 (1H, t, J = 8.1 Hz, ArH), 7.11 (1H, s, ArH), 7.01 (1H, d, J = 8.1 Hz, ArH), 6.24 (2H, s, OCH2O),

118

4.04 (3H, s, OCH3), 3.95 (2H, t, J = 6.6 Hz, CH2), 3.32 (2H, t, J = 6.6 Hz, CH2). 13C-NMR

(CDCl3) δ: 179.46, 160.39, 157.87, 154.09, 152.26, 143.80, 130.40, 129.79, 129.05, 122.72, 118.29, 115.72, 113.22, 112.67, 109.15, 107.83, 101.20, 55.76, 36.35, 27.63. MS m/z: 370 (M+Na+). 3.2.5 การสงเคราะห Homoaporphine alkaloids

3-(2-Bromo-4,5-methylenedioxyphenyl)-N-(3,4-dimethoxyphenethyl)propanamide (132a). Thionyl chloride (5.80 g, 48.75 mmol) was added to a solution of 131 (5.34 g, 19.55 mmol) in benzene (30 ml) and the solution was then refluxed for 1 hour. Romoval of the solvent under reduced pressure gave the acid chloride which was dissolved in ethanol-free chloroform (80 ml) and added to a mixture of homoveratylamine (103b) (3.54 g, 19.53 mmol) in ethanol-free chloroform (30 ml) and 15% sodium hydrogen carbonate (50 ml). The mixture was stirred at room temperature for 2 hours. The chloroform layer was washed with 10% sodium hydrogen carbonate (3x30 ml), water (3x30 ml), 10% hydrochloric acid (3x30 ml), water (3x30 ml), then dried over anhydrous sodium carbonate. Removal of the solvent under reduced pressure gave a yellow solid which was recrystallized from ethanol to give 132a as white crystals (6.40 g, 75%), mp 149-151 oC. IR (CH2Cl2-film) cm-1: 3268, 2942, 2832, 1634, 1515, 1479, 1236, 1146, 1029, 926, 850, 806, 765, 666. 1H-NMR (CDCl3) δ: 6.96 (1H, s, ArH), 6.79 (1H, d, J = 8.1 Hz, ArH), 6.74 (1H, s, ArH), 6.69 (1H, s, ArH), 6.66 (1H, d, J = 8.1 Hz, ArH), 5.93 (2H, s, OCH2O), 5.56 (1H, br s, NH), 3.86 (6H, s, 2xOCH3), 3.47 (2H, apparent q, J = 6.6 Hz, CH2), 2.96 (2H, t, J = 7.2 Hz, CH2), 2.72 (2H, t, J = 6.6 Hz, CH2), 2.39 (2H, t, J = 7.2 Hz, CH2).

13C-NMR (CDCl3) δ:

119

171.65, 149.04, 147.68, 147.38, 146.95, 133.03, 131.32, 120.62, 114.16, 112.65, 111.81, 111.32, 110.29, 101.65, 55.91, 55.86, 40.72, 36.72, 35.27, 32.07.

1-(2-(2-Bromo-4,5-methylenedioxyphenyl)ethyl)-6,7-dimethoxy-3,4-dihydroisoquinoline (133a). A solution of 132a (5.85 g, 13.41 mmol) and phosphorus oxychloride (11.30 g, 73.70 mmol) in benzene (40 ml) was refluxed for 3 hours. The precipitate was filtered off under reduced pressure and dissolved in dichloromethane (100 ml). The mixture was basified by addition of solid sodium carbonate followed by dropwise addition of water. The chloroform layer was separated and then dried over anhydrous sodium sulfate. Removal of the solvent under reduced pressure gave a yellow solid which was recrystallized from ethanol to give 133a as pale yellow crystals (4.64 g, 83%), mp 133-134 °C. IR (CH2Cl2-film) cm-1: 2937, 2832, 1571, 1475, 1356, 1235, 1163, 1036, 928, 856, 734, 669. 1H-NMR (CDCl3) δ: 7.05 (1H, s, ArH), 6.98 (1H, s, ArH), 6.75 (1H, s, ArH), 6.70 (1H, s, ArH), 5.93 (2H, s, OCH2O), 3.92 (3H, s, OCH3), 3.89 (3H, s, OCH3), 3.66 (2H, t, J = 7.5 Hz, CH2), 3.05-2.90 (4H, m, 2xCH2), 2.63 (2H, t, J = 7.5 Hz, CH2).

13C-NMR (CDCl3) δ: 165.94, 150.78, 147.49, 147.40, 146.83, 134.17, 131.45, 121.90, 114.12, 112.62, 110.30, 108.67, 101.59, 56.26, 55.97, 46.90, 36.19, 34.22, 25.89.

120

1-(2-(2-Bromo-4,5-methylenedioxyphenyl)ethyl)-6,7-dimethoxy-1,2,3,4-tetrahydroisoquinoline (134a). Sodium borohydride (0.94 g, 24.85 mmol) was added portionwise to a stirred solution of 133a (4.00 g, 9.56 mmol) in ethanol (50 ml) and the mixture was stirred at room temperature for 3 hours. Removal of the ethanol under reduced pressure gave a residue which was shaken with water (3x50 ml) and chloroform (50 ml). The chloroform layer was washed with brine, then dried over anhydrous sodium sulfate. Removal of the solvent under reduced pressure gave 134a as yellow crystals (3.82 g, 95%), mp 179-181 oC. IR (CH2Cl2-film) cm-1: 3419, 2916, 1514, 1475, 1231, 1113, 1036, 933, 858, 734. 1H-NMR (CDCl3) δ: 6.97 (1H, s, ArH), 6.79 (1H, s, ArH), 6.62 (1H, s, ArH), 6.60 (1H, s, ArH), 5.93 (2H, s, OCH2O), 4.08 (1H, t, J = 6.0 Hz, H-1), 3.84 (6H, s, 2xOCH3), 3.36-3.29 (1H, m, CH2), 3.10-3.02 (1H, m, CH2), 2.91-2.71 (4H, m, 2xCH2), 2.12-2.05 (2H , m, CH2).

13C-NMR (CDCl3) δ: 147.82, 147.61, 147.56, 146.92, 134.13, 129.13, 126.48, 114.16, 112.75, 111.86, 110.16, 109.38, 101.78, 56.09, 55.92, 55.05, 40.61, 36.25, 32.67, 28.32.

2-Trifluoroacetyl-1-(2-(2-Bromo-4,5-methylenedioxyphenyl)ethyl)-6,7-dimethoxy-1,2,3,4-tetra hydroisoquinoline (135a). Trifluoroacetic anhydride (51.10 g, 243.30 mmol) was added dropwise to a stirred mixture of 134a (17.04 g, 40.54 mmol) and triethylamine (32.80 g, 324.14 mmol) in dichloromethane (180 ml) at 0-10 oC. Stirring was continued at room temperature for 3 hours. Dichloromethane (100 ml) was added and the dichloromethane layer was washed with 10% sodium hydrogen carbonate (3x150 ml), water (3x150 ml), 10% hydrochloric acid (3x150 ml) and water (3x150 ml), then dried over anhydrous sodium sulfate. Removal of the solvent under reduced pressure gave 135a as a brown semisolid (18.87 g, 90%), IR (CH2Cl2-film) cm-1: 2937, 2837, 1686, 1519, 1477, 1232, 1198, 1038, 921, 858, 737, 657. 1H-NMR (CDCl3) δ: 6.97 (1H, s, ArH), 6.76 (1H, s, ArH), 6.60 (2H, s, ArH) 5.92 (2H, s, OCH2O), 5.58 (1H, dd, J = 9.6, 4.5 Hz, H-1), 3.85 (6H, s, 2xOCH3), 3.03-2.64 (6H, 2m, 3xCH2), 2.21-1.99 (2H, m, CH2).

13C-NMR

121

(CDCl3) δ: 156.53, 156.06, 148.15, 147.91, 147.45, 146.85, 133.36, 127.73, 124.37, 118.57, 114.76, 113.94, 112.68, 111.20, 110.00, 109.83, 101.63, 56.00, 55.89, 53.66, 42.32, 36.83, 33.11, 28.73.

1-(2-(2-Bromo-4,5-methylenedioxyphenyl)ethyl)-2-carbomethoxy-6,7-dimethoxy-1,2,3,4-tetrahy droisoquinoline (135b). By the same procedure used to prepare 108a, 135b was obtained in 97% yield as a yellow solid, mp 143-145 oC. IR (CH2Cl2-film) cm-1: 2917, 2849, 1694, 1519, 1476, 1256, 1234, 1112, 1102, 1036, 932, 858, 734. 1H-NMR (CDCl3) δ: 6.96 (1H, s, ArH), 6.78 and 6.72 (1H, 2s, ArH), 6.57 (2H, s, ArH), 5.93 (2H, s, OCH2O), 5.15 (1H, br d, H-1), 4.31-3.16 (2H, m, CH2),

3.84 (6H, s, 2xOCH3), 3.76 (3H, s, COOCH3), 3.04-1.83 (6H, m, 3xCH2). 13C-NMR

(CDCl3) δ: (both conformers) 156.28, 147.72, 147.41, 147.34, 146.63, 134.25, 133.97, 129.53, 129.16, 126.06, 125.71, 114.12, 112.69, 111.54, 111.43, 110.06, 109.94, 109.80, 101.56, 56.00, 55.88, 54.28, 52.71, 38.07, 37.64, 37.02, 33.37, 28.04, 27.70.

1-(2-(2-Bromo-4,5-methylenedioxyphenyl)ethyl)-2-formyl-6,7-dimethoxy-1,2,3,4-tetrahydroiso quinoline (135c). By the same procedure used to prepare 108b, 135c was obtained in 88% yield as a yellow semisolid. IR (CH2Cl2-film) cm-1: 2934, 2849, 1666, 1519, 1477, 1256, 1232, 1115, 1036, 931, 859, 733. 1H-NMR δ: 8.28 and 8.27 (total 1H, 2s, CHO of both conformers), 6.98 and 6.95 (total 1H, 2s, ArH of both conformers), 6.78 and 6.70 (total 1H, 2s, ArH of both

122

conformers), 6.59 and 6.58 (total 1H, 2s, ArH of both conformers), 6.57 and 6.57 (total 1H, 2s, ArH of both conformers), 5.95 and 5.93 (total 2H, 2s, OCH2O of both conformers), 5.45-5.40 (1H, m, H-1), 4.57-1.87 (total 8H, m, 4xCH2 of both conformers), 3.86, 3.85 and 3.84 (total 6H, 2xOCH3 of both conformers). 13C-NMR δ: (both conformers) 161.88, 161.53, 148.19, 147.92, 147.85, 147.67, 147.51, 147.40, 146.94, 146.74, 133.90, 132.99, 128.18, 125.70, 124.62, 114.18, 114.00, 112.91, 112.69, 111.65, 111.40, 110.13, 109.87, 109.75, 109.47, 101.70, 101.60, 56.07, 56.01, 55.91, 55.89, 50.51, 40.24, 37.03, 33.90, 24.92.

1,2,-Dimethoxy-10,11-methylenedioxy-6-trifluoroacetylhomonoraporphine (136). To a solution of 135a (139.4 mg, 0.27 mmol), in DMA (4 ml) were added palladium(II)acetate (6.74 mg, 0.03 mmol), triphenyl phosphine (15.7 mg, 0.06 mmol), potassium carbonate (112.0 mg, 0.81 mmol) and pivalic acid (8.2 mg, 0.08 mmol). The mixture was irradiated in a microwave reactor for 5 min with the power level at 850 W under an argon atmosphere. After cooling to room temperature, the reaction mixture was filtered over Celite and the solvent was removed under reduced pressure to give the crude product which was purified by silica gel column chromatography with 10% ethyl acetate-hexane to give 136 as white crystals (17.9 mg, 16%), mp 214-216 oC. IR (CH2Cl2-film) cm-1: 2941, 1687, 1590, 1487, 1227, 1189, 1141, 1038, 922, 851, 737, 655. 1H-NMR δ: 6.97 and 6.94 (1H, 2s, H-12), 6.75 and 6.69 (1H, s, H-9), 6.67 (1H, 2s, H-3), 6.02-5.98 (2H, m, OCH2O), 5.03 (1H, dd, J = 11.4, 7.2 Hz, H-6a), 4.71-4.65 and 4.56-4.51 and 3.65-3.55 (1H, m, H-5α), 4.13-4.05 (1H, m, H-5β), 3.89 (3H, s, OCH3), 3.51 (3H, s, OCH3), 3.09-2.79 (2H, m, CH2), 2.58-2.00 (4H, m, 2xCH2).

13C-NMR δ: 154.77, 152.14, 147.30, 146.12, 144.85, 132.33, 128.10, 127.39, 127.00, 124.95, 118.40, 114.58, 111.26, 111.00, 108.36, 101.01, 60.50, 55.91, 50.50, 39.25, 39.20, 36.23, 30.10, 29.46.

123

1-(2-(3,4-Methylenedioxyphenyl)ethyl)-6,7-dimethoxy-2-trifluoroacetyl-1,2,3,4-tetrahydroiso quinoline (137a). The crude product which was purified by silica gel column chromatography with 10% ethyl acetate-hexane to give 137a was obtained in 30% yield as a yellow viscous oil. IR (CH2Cl2-film) cm-1: 2936, 2860, 1686, 1611, 1519, 1444, 1253, 1196, 1142, 1039, 922, 812, 736, 657. 1H-NMR δ: 6.73 (1H, d, J = 7.8 Hz, ArH), 6.70 (1H, s, ArH), 6.66 (1H, d, J = 7.8 Hz, ArH), 6.58 (1H, s, ArH), 6.54 (1H, s, ArH), 5.91 (2H, s, OCH2O), 5.55 (1H, dd, J = 9.3, 5.4 Hz, H-1), 4.08-4.02 (1H, m, H-3α), 3.85 (3H, s, OCH3), 3.84 (H, s, OCH3), 3.68-3.58 (1H, m, H-3β), 3.08-2.51 (4H, m, 2xCH2), 2.24-2.04 (2H, m, CH2).

13C-NMR δ: 156.48, 156.01, 148.14, 147.89, 147.67, 145.82, 134.88, 127.94, 124.32, 121.05, 118.55, 114.73, 111.14, 109.86, 108.72, 108.25, 100.84, 56.03, 55.93, 53.73, 39.56, 39.51, 38.34, 32.18, 28.74.

1-(2-(3,4-Methylenedioxyphenyl)ethyl)-2-carbomethoxy-6,7-dimethoxy-1,2,3,4-tetrahydroisoqui noline (137b). By the same procedure used to prepare 136, 137b was obtained in 87% yield as a yellow viscous oil. IR (CH2Cl2-film) cm-1: 2929, 2851, 1697, 1518, 1476, 1447, 1256, 1234, 1123, 1103, 1036, 932, 856, 765. 1H-NMR δ: 6.96 (1H, s, ArH), 6.75 and 6.57 (4H, br d and s, ArH), 5.93 (2H, s, OCH2O), 5.21-5.06 (1H, m, H-1), 4.30-4.11 (1H, m, H-3α), 3.84 (3H, s, OCH3), 3.76 (3H, s, OCH3), 3.36-3.27 (1H, m, H-3β), 2.91-2.61 (4H, m, 2xCH2), 2.12-1.94 (2H, m, CH2).

13C-NMR δ (both conformers): 161.84, 161.49, 147.73, 147.45, 147.37, 146.66, 132.15, 132.02, 128.61, 128.45, 121.05, 112.73, 111.58, 111.42, 109.77, 109.48, 108.83, 108.16, 101.58, 56.03, 55.91, 54.31, 52.73, 38.11, 37.67, 37.04, 33.40, 28.07, 27.74.

124

1-(2-(3,4-Methylenedioxyphenyl)ethyl)-2-formyl-6,7-dimethoxy-1,2,3,4-tetrahydroisoquinoline (137c). By the same procedure used to prepare 136, 137c was obtained in quantitative yield as a yellow viscous oil. IR (CH2Cl2-film) cm-1: 2931, 2850, 1663, 1519, 1442, 1254, 1114, 1037, 925, 860, 729. 1H-NMR δ: 8.29 and 8.27 (1H, 2s, CHO of both conformers), 6.96 (total 1H, d, J= 9.0 Hz, ArH of both conformers), 6.78 (total 1H, s, ArH of both conformers), 6.70 (total 1H, s, ArH of both conformers), 6.57 (total 1H, d, J = 9.0 Hz, ArH of both conformers), 6.58 (total 1H, s, ArH of both conformers), 5.94 and 5.92 (total 2H, 2s, OCH2O of both conformers), 5.46-5.41 (total 1H, m, H-1 of both conformers), 4.57-4.47 (total 1H, m, H-3α of both conformers), 3.85 (total 3H, s, OCH3 of both conformers), 3.76 (total 3H, s, OCH3 of both conformers), 3.80-3.14 (total 1H, m, H-3β of both conformers), 2.98-2.60 (total 4H, m, 2xCH2 of both conformers), 2.17-2.00 (total 2H, m, CH2 of both conformers). 13C-NMR δ (both conformers) 161.79, 161.61, 148.27, 148.01, 147.94, 147.74, 146.03, 135.50, 134.21, 128.50, 125.78, 124.66, 121.20, 121.07, 111.77, 111.49, 110.03, 109.58, 108.83, 108.61, 108.41, 108.20, 100.94, 100.79, 56.27, 56.16, 56.07, 55.94, 50.58, 40.15, 37.07, 33.94, 24.94.

2-Methyl-1-(2-(3,4-methylenedioxyphenyl)ethyl)-6,7-dimethoxy-1,2,3,4-tetrahydroisoquinoline (139). By the same procedure used to prepare 110a, 139 was obtained in 66% yield (from 137b) and 60% yield (from 137c) as a yellow viscous oil. IR (CH2Cl2-film) cm-1: 2932, 2786, 1609, 1515, 1441, 1371, 1246, 1104, 1039, 928, 809, 735. 1H-NMR δ: 6.71 (1H, d, J = 7.8 Hz, ArH),

125

6.67 (1H, d, J = 1.5 Hz, ArH), 6.62 (1H, dd, J = 7.8, 1.5 Hz, ArH), 6.57 (1H, s, ArH), 6.54 (1H, s, ArH), 5.90 (2H, s, OCH2O), 3.85 (3H, s, OCH3), 3.83 (H, s, OCH3), 3.40 (1H, t, J = 5.4 Hz, H-1), 3.16-3.08 (1H, m, H-3α), 2.77-2.43 (5H, m, H-3β, 2xCH2), 2.46 (3H, s, CH3), 2.04-1.97 (2H, m, CH2).

13C-NMR δ: 147.47, 147.28, 147.23, 145.40, 136.77, 129.73, 126.69, 121.06, 111.28, 109.99, 108.93, 108.09, 100.68, 62.60, 55.99, 55.79, 48.11, 42.66, 37.13, 31.33, 25.42.

1,2,-Dimethoxy-10,11-methylenedioxyhomonoraporphine (140). 136 (68.4 mg, 0.16 mmol) was dissolved in 90% methanol-water (10 ml). Sodium carbonate (33.9 mg, 0.32 mmol) was added and then the mixture was refluxed for 7 hours, the solvent was removed under reduced pressure. The resulting residue was shaken with water (20 ml) and 10% sodium carbonate (20 ml), and extracted with dichloromethane (3x20 ml), then dried. Removal of the solvent under reduced pressure gave 140 as a yellow solid (55.1 mg, quantitative yield), mp 120-122 oC. UV (MeOH) λmax/nm (log ε) 216.8 (4.58), 267.9 (3.92), 294.6 (3.96). IR (CH2Cl2-film) cm-1: 3393, 2937, 1588, 1485, 1230, 1038, 936, 850, 734. 1H-NMR δ: 6.97 (1H, s, ArH), 6.74 (1H, s, ArH), 6.66 (1H, s, ArH), 5.98 (2H, d, J = 10.2 Hz, OCH2O), 3.89 (3H, s, OCH3), 3.67-2.16 (9H, m, H-6a, 4xCH2), 3.49 (3H, s, OCH3).

13C-NMR δ: 151.39, 146.72, 145.73, 144.03, 133.35, 131.82, 129.51, 128.76, 127.93, 111.83, 110.79, 108.05, 100.82, 60.40, 55.82, 50.76, 38.55, 38.18, 30.73, 29.73. MS m/z: 340 (M+H+).

126

1,2,-Dimethoxy-10,11-methylenedioxyhomoaporphine (Homonantenine, 141). To a stirred solution of 140 (25.4 mg, 0.075 mmol) and 37% aqueous formaldehyde (22.5 mg, 0.75 mmol) in acetonitrile (2 ml) was added sodium cyanoborohydride (14.5 mg, 0.23 mmol). The reaction mixture was stirred 50 min and then glacial acetic acid was added dropwise until the solution tested neutral on wet pH paper. Stirring was continued for an additional 30 min, and dichloromethane was added to the mixture. The resulting mixture was extracted with 1M potassium hydroxide. The organic phase was dried over anhydrous sodium sulfate, Removal of the solvent under reduced pressure gave 141 as a pale brown solid (22.0 mg, 89%), mp 132-134 oC. UV (MeOH) λmax/nm (log ε) 215.6 (4.58), 267.9 (3.90), 294.4 (3.94). IR (CH2Cl2-film) cm-1: 2936, 1589, 1475, 1371, 1232, 1039, 936, 849, 735. 1H-NMR δ: 6.98 (1H, s, ArH), 6.74 (1H, s, ArH), 6.67 (1H, s, ArH), 5.98 (2H, d, J = 8.4 Hz, OCH2O), 3.88 (3H, s, OCH3), 3.48 (3H, s, OCH3), 3.27-2.00 (9H, m, H-6a, 4xCH2), 2.37 (3H, s, NCH3).

13C-NMR δ: 151.33, 146.71, 145.62, 144.00, 133.31, 132.33, 128.86, 128.11, 127.79, 111.47, 110.78, 107.99, 100.82, 60.33, 57.94, 55.80, 45.06, 41.91, 34.64, 30.47, 25.88. 3.2.6 การสงเคราะห Azafluoranthene alkaloids

2-Iodo-N-(3,4-dimethoxyphenethyl)benzamide (143). Thionyl chloride (24.00 g, 201.73 mmol) was added to a solution of 142 (20.00 g, 80.64 mmol) in benzene (100 ml) and the solution was then refluxed for 1 hour. Romoval of the solvent under reduced pressure gave a residue which was dissolved in another portion of dichloromethane (100 ml) and added to a mixture of homoveratylamine (103b) (14.50 g, 80.01 mmol) in dichloromethane (200 ml) and 15% sodium hydrogen carbonate (200 ml). The mixture was stirred at room temperature for 2 hours. The dichloromethane layer was washed with 10% sodium hydrogen carbonate (3x300 ml), water (3x300 ml), 10% hydrochloric acid (3x300 ml), water (3x300 ml), then dried over anhydrous

127

sodium sulfate. Removal of the solvent under reduced pressure gave a residue which was recrystallized from ethanol to give 143 as white crystals (28.25 g, 85%), mp 142-144 oC. IR (CH2Cl2-film) cm-1: 3247, 3068, 2935, 2836, 1646, 1518, 1450, 1235, 1148, 1030, 864, 733. 1H-NMR (CDCl3) δ: 7.83 (1H, d, J = 8.1 Hz, ArH), 7.27-7.36 (2H, m, ArH), 7.06 (1H, td, J = 8.1, 2.4 Hz, ArH), 6.80 and 6.79 (3H, m, ArH), 5.92 (1H, br s, NH), 3.86 (3H, s, OCH3), 3.85 (3H, s, OCH3), 3.69 (2H, apparent q, J = 6.9 Hz, CH2), 2.90 (2H, t, J = 6.9 Hz, CH2).

13C-NMR (CDCl3) δ: 169.36, 148.73, 147.40, 142.06, 139.53, 131.27, 130.78, 127.89, 127.87, 120.68, 111.98, 111.32, 92.51, 55.79, 41.19, 34.84.

1-(2-Iodophenyl)-6,7-dimethoxy-3,4-dihydroisoquinoline (144). A solution of 143 (25.20 g, 61.28 mmol) and phosphorus oxychloride (51.73 g, 337.37 mmol) in benzene (300 ml) was refluxed for 3 hours. The excess reagent and solvent were removed under reduced pressure and the residue was dissolved in dichloromethane (200 ml). The mixture was basified by addition of solid sodium carbonate followed by dropwise addition of water (200 ml). The dichloromethane layer was washed with water (200 ml), then dried over anhydrous sodium sulfate. Removal of the solvent under reduced pressure gave 144 as a brown viscous oil (26.51 g, quantitative yield). IR (CH2Cl2-film) cm-1: 2937, 2834, 1567, 1514, 1463, 1279, 1121, 1021, 948, 865, 733, 619. 1H-NMR δ: 7.89 (1H, d, J = 7.8 Hz, ArH), 7.45 (1H, t, J = 7.5 Hz, ArH), 7.37 (1H, d, J = 7.8 Hz, ArH), 7.11 (1H, td, J = 7.5, 1.8 Hz, ArH), 6.77 (1H, s, ArH), 6.37 (1H, s, ArH), 3.97 and 3.74 (2H, 2br s, CH2), 3.94 (3H, s, OCH3), 3.65 (3H, s, OCH3), 2.80 (2H, br s, CH2).

13C-NMR δ: 168.63, 151.23, 147.43, 143.86, 139.16, 131.48, 129.90, 129.52, 128.22, 121.23, 110.78, 110.37, 96.35, 56.10, 55.99, 47.70, 25.64.

128

1-(2-Iodophenyl)-6,7-dimethoxy-1,2,3,4-tetrahydroisoquinoline (145). Sodium borohydride (24.40 g, 644.95 mmol) was added portionwise to a stirred solution of 144 (24.96 g, 63.48 mmol) in ethanol (700 ml) and the mixture was stirred at room temperature for 24 hours. Removal of the ethanol under reduced pressure gave a residue which was shaken with water (500 ml) and dichloromethane (500 ml). The dichloromethane layer was washed with brine, then dried over anhydrous sodium sulfate. Removal of the solvent gave 145 as a yellow viscous oil (19.88 g, 79%), IR (CH2Cl2-film) cm-1: 3327, 2933, 2831, 1610, 1514, 1463, 1258, 1114, 1010, 834, 749. 1H-NMR δ: 7.88 (1H, d, J = 7.5 Hz, ArH), 7.21 (1H, t, J = 7.5 Hz, ArH), 6.95 (1H, t, J= 7.5 Hz, ArH), 6.94 (1H, d, J = 7.5 Hz, ArH), 6.65 (1H, s, ArH), 6.24 (1H, s, ArH), 5.36 (1H, s, H-1), 3.88 (3H, s, OCH3), 3.67 (3H, s, OCH3), 2.99-3.14 (2H, m, CH2), 2.77-2.94 (2H, m, CH2).

13C-NMR δ: 147.74, 147.15, 146.52, 139.47, 130.64, 129.04, 128.76, 128.01, 127.91, 111.52, 110.85, 101.23, 64.14, 55.82, 55.80, 40.68, 29.21.

1-(2-Iodophenyl)-2-formyl-6,7-dimethoxy-1,2,3,4-tetrahydroisoquinoline (146a). A solution of N,N’-dicyclohexylcarbodiimide (2.68 g, 12.99 mmol) in dichloromethane (30 ml) was added to a solution of 145 (5.13 g, 12.98 mmol) and formic acid (0.60 g, 13.04 mmol) in dichloromethane (100 ml) and the mixture was then stirred for 2 hours. The mixture was filtered and the filtrate was washed with 5% hydrochloric acid (3x100 ml), water (3x100 ml), 5% sodium hydrogen carbonate (3x100 ml), water (3x100 ml) and then dried over anhydrous sodium sulfate. Removal of the solvent gave a yellow viscous residue which was chromatograped over silica gel using 50%

129

ethyl acetate-hexane as eluent to give 146a as a white solid (4.16 g, 76%), mp 142-144 oC. IR (CH2Cl2-film) cm-1: 2935, 1669, 1518, 1460, 1225, 1116, 1012, 868, 739. 1H-NMR (CDCl3) δ: 8.81 and 8.21 (1H, 2s, CHO of both conformers), 7.94 (1H, d, J = 7.8 Hz, ArH), 7.24 (1H, t, J = 7.8 Hz, ArH), 7.00 (1H, t, J = 7.8 Hz, ArH), 6.87 (1H, d, J = 7.8 Hz, ArH), 6.68 (1H, s, ArH), 6.33 (1H, s, ArH), 5.97 (1H, s, H-1), 4.35-4.39 (1H, m, H-3α), 3.90 (3H, s, OCH3), 3.73 (3H, s, OCH3), 2.92-3.10 (2H, m, 2xCH2), 2.73-2.77 (1H, m, H-3β). 13C-NMR (CDCl3) δ: 162.80, 161.62, 148.58, 147.88, 142.68, 140.40, 131.03, 129.92, 129.22, 128.24, 126.92, 126.32, 111.30, 110.16, 100.50, 63.18, 55.98, 55.88, 33.73, 27.28.

1-(2-Iodophenyl)-2-carbomethoxy-6,7-dimethoxy-1,2,3,4-tetrahydroisoquinoline (146b). Methyl chloroformate (15.04 g, 159.16 mmol) was added dropwise to a stirred solution of 145 (5.24 g, 13.26 mmol) and triethylamine (8.05 g, 79.55 mmol) in dichloromethane (150 ml) at 0-10 oC. Stirring was continued at room temperature for 3 hours. The mixture was washed with 5% sodium carbonate (3x100 ml), water (3x100 ml), 10% hydrochloric acid (3x100 ml) and water (100 ml), then dried over anhydrous sodium sulfate. Removal of the solvent under reduced pressure gave a yellow viscous residue which was chromatograped over silica gel using 35% ethyl acetate-hexane as eluent to give 146b as white crystals (4.84 g, 81%), mp 121-123 oC. IR (CH2Cl2-film) cm-1: 2951, 2833, 1702, 1518, 1443, 1396, 1256, 1097, 1011, 856, 755. 1H-NMR δ: 7.90 (1H, dd, J = 7.8, 0.9 Hz, ArH), 7.21 (1H, td, J = 7.8, 0.9 Hz, ArH), 7.01 (1H, br d, ArH), 6.92 (1H, td, J = 7.8, 0.9 Hz, ArH), 6.65 (1H, s, ArH), 6.50 (1H, s, ArH), 6.25 (1H, s, H-1), 4.21 (1H, br s, H-3α), 3.86 (3H, s, OCH3), 3.72 (3H, s, OCH3), 3.70 (3H, s, CO2CH3), 2.74-3.47 (3H, m, H-3β, CH2).

13C-NMR δ: 156.46, 148.08, 147.76, 139.99, 129.49, 128.97, 128.46, 127.31, 126.46, 111.33, 110.56, 100.21, 61.72, 55.90, 52.75, 39.63, 28.33.

130

Triclisine (147), 2,3-Dihydrotriclisine(148), Compound 150a. To a solution of 146a (374.0 mg, 0.88 mmol) in DMA (10 ml) were added palladium(II)acetate (19.8 mg, 0.09 mmol), ligand D (65.3 mg, 0.18 mmol), potassium carbonate (360.0 mg, 2.60 mmol) and pivalic acid (26.96 mg, 0.26 mmol). The mixture was irradiated in a microwave reactor for 7 min with the power level at 850 W under an argon atmosphere. After cooling to room temperature, the reaction mixture was filtered over Celite and the solvent was evaporated under reduced pressure, the crude product was purified by silica gel column chromatography with 25% ethyl acetate-hexane to give 147 as a pale yellow solid (8.4 mg, 4%), mp 135-137 oC. UV (MeOH) λmax/nm (log ε) 236.2 (4.28), 262.2 (4.32), 269.2 (4.28), 282.6 (3.88), 294.1 (3.81), 306.5 (3.52), 321.1 (3.63), 351.2 (3.58), 367.9 (3.66). IR (CH2Cl2-film) cm-1: 2932, 2849, 1586, 1474, 1283, 1237, 1131, 1024, 845, 751. 1H-NMR δ: 8.59 (1H, d, J = 6.0 Hz, ArH), 8.09-8.12 (1H, m, ArH), 8.02-8.05 (1H, m, ArH), 7.39-7.48 (3H, m, ArH), 7.01 (1H, s, ArH), 4.12 (3H, s, OCH3), 4.05 (3H, s, OCH3).

13C-NMR δ: 159.23, 147.80, 145.08, 138.89, 138.11, 130.82, 129.91, 128.45, 126.50, 124.76, 123.37, 122.16, 117.17, 104.76, 61.38, 56.41. 2,3-Dihydrotriclisine (148) was obtained as a yellow solid (39.2 mg, 17%), mp 103-105 oC. UV (MeOH) λmax/nm (log ε) 217.9 (4.38), 249.1 (4.61), 257.7 (4.74), 274.0 (4.05), 307.7 (3.62), 351.2 (3.74). IR (CH2Cl2-film) cm-1: 2935, 2842, 1655, 1625, 1496, 1323, 1270, 1125, 1039, 944, 840, 751. 1H-NMR δ: 7.86 (1H, d, J = 7.5 Hz, ArH), 7.82 (1H, d, J = 7.5 Hz, ArH), 7.43 (1H, td, J = 7.5, 0.9 Hz, ArH), 7.31 (1H, td, J = 7.5, 0.9 Hz, ArH), 6.55 (1H, s, ArH), 4.21 (2H, t, J = 8.1 Hz, CH2), 3.95 (3H, s, OCH3), 3.91 (3H, s, OCH3), 2.78 (2H, t, J = 8.1 Hz, CH2).

13C-NMR δ: 165.57, 157.54, 143.29, 141.60, 137.15, 131.44, 130.08, 129.43, 127.98, 124.01, 122.31, 121.72, 110.00, 60.63, 56.33, 50.20, 22.70.

131

Compound 150a was obtained as a yellow amorphous solid (48.1 mg, 28%), mp 180-182 oC. UV (MeOH) λmax/nm (log ε) 205.3 (4.44), 258.0 (4.65), 275.4 (4.25), 302.0 (3.50), 353.0 (3.76). IR (CH2Cl2-film) cm-1: 3429, 2878, 1650, 1501, 1394, 1250, 1112, 1022, 952, 753. 1H-NMR δ: 8.13 (1H, s, CHO), 7.84 (1H, d, J = 7.5 Hz, ArH), 7.58 (1H, d, J = 7.5 Hz, ArH), 7.48 (1H, t d, J = 7.5, 1.2 Hz, ArH), 7.27 (1H, td, J = 7.5, 0.9 Hz, ArH), 6.53 (1H, s, ArH), 6.22 (1H, br s, OH), 3.94 (6H, 2s, 2xOCH3), 3.61 (2H, apparent q, J = 6.6 Hz, CH2), 3.21 (2H, t, J = 6.6 Hz, CH2).

13C-NMR δ: 164.64, 161.41, 158.91, 143.82, 141.93, 137.70, 136.73, 135.23, 134.68, 128.81, 124.62, 123.98, 123.58, 113.40, 60.39, 56.25, 39.24, 30.79.

(149), (150b). To a solution of 146b (103.0 mg, 0.23 mmol), in DMSO (4 ml) were added palladium(II)acetate (10.2 mg, 0.05 mmol), ligand B (22.8 mg, 0.09 mmol) and potassium carbonate (63.6 mg, 0.46 mmol). The mixture was irradiated in a microwave reactor for 5 min with the power level at 850 W under an argon atmosphere. After cooling to room temperature, the reaction mixture was quenched with water (3x10 ml) and extracted with dichloromethane (10 ml). The solvents were evaporated under reduced pressure and the crude product was purified by column chromatography with 20% ethyl acetate-hexane to give 149 as a yellow semisolid (15.7 mg, 21%). UV (MeOH) λmax/nm (log ε) 212.1 (4.51), 240.6 (4.27), 261.0 (4.06), 272.5 (4.12), 311.3 (3.34). IR (CH2Cl2-film) cm-1: 2951, 1698, 1499, 1445, 1378, 1274, 1220, 1117, 979, 880, 749. 1H-NMR δ: 8.01 (1H, d, J = 7.5 Hz, ArH), 7.90 (1H, br s, ArH), 7.39 (1H, t, J = 7.5 Hz, ArH), 7.25-7.30 (1H, m, ArH), 6.66 (1H, s, ArH), 5.55 (1H, s, H-1), 4.50 (1H, br d, H-3α), 3.98 (3H, s, OCH3), 3.92 (6H, s, OCH3, CO2CH3), 2.63-2.94 (3H, m, H-3β, CH2).

13C-NMR δ: 158.38, 153.36, 147.57, 143.73, 138.98, 133.69, 131.46, 128.27, 126.97, 126.38, 123.68, 109.83, 60.63, 58.97, 56.50, 52.95, 44.78, 29.91.

132

150b was obtained as a yellow solid (32.8 mg, 42%), mp 152-153 oC. UV (MeOH) λmax/nm (log ε) 208.0 (4.42), 257.9 (4.70), 274.7 (4.31), 302.3 (3.55), 356.0 (3.83). IR (CH2Cl2-film) cm-1: 3338, 2944, 1698, 1611, 1501, 1467, 1377, 1252, 1194, 1111, 1027, 910, 841, 751. 1H-NMR δ: 7.85 (1H, d, J = 7.5 Hz, ArH), 7.60 (1H, d, J = 7.5 Hz, ArH), 7.47 (1H, t, J = 7.5 Hz, ArH), 7.25-7.30 (1H, m, ArH), 6.53 (1H, s, ArH), 5.09 (1H, br s, NH), 3.95 and 3.94 (6H, 2s, 2xOCH3), 3.64 (3H, s, CO2CH3), 3.48 (2H, apparent q, J = 6.6 Hz, CH2), 3.19 (2H, t, J = 6.6 Hz, CH2).

13C-NMR δ: 193.58, 158.67, 157.18, 143.72, 141.93, 137.84, 136.77, 135.33, 134.47, 128.76, 124.62, 123.90, 123.55, 113.45, 60.38, 56.21, 51.99, 41.82, 31.59. 3.3 การสงเคราะห Piperazine-2,5-dione derivatives

1,4-Diacetylpiperazine-2,5-dione (188). A mixture of glycine anhydride (187) (10.20 g, 89.40 mmol) and acetic anhydride (44.97 ml) was stirred under reflux for 7 hours. The acetic anhydride was removed by azeotropic distillation with methanol and toluene under reduced pressure. The residue was crystallized from ethyl acetate–ether to yield 188 as a colorless solid (91%), mp 98-100 oC. (lit [94] mp 99.0-100.5 oC). IR (KBr) cm-1: 1185, 1265, 1364, 1705, 1727. 1H-NMR (CDCl3) δ: 4.60 (4H, s, 2xCH2), 2.58 (6H, s, 2xAc). 13C-NMR (CDCl3) δ: 170.80, 165.92, 47.19, 26.76.

4-Acetyl-6-isobutylidinepiperazine-2,5-dione (194). 188 (5.19 g, 26.19 mmol) was dissolved in DMF (61.76 ml) under argon. To this solution were added dropwise isobutylaldehyde (11.47 ml)

133

and 0.5 N potassium tert-butoxide (3.46 g, 30.86 mmol) in tert-butanol (61.76 ml) over 20 minutes at 0 oC. After the pale yellow solution had been stirred at room temperature for 6 hours, it was neutralized with 30% acetic acid and poured into water. The product was extracted with CH2Cl2, dried over anhydrous sodium sulfate, and concentrated under reduced pressure to give a crude yellow syrup, which was purified on a column of silica gel with 50% ethyl acetate-hexane to yield 194 as colorless crystals (99%), mp 151-153 oC. IR (KBr) cm-1: 3192, 1687, 1650, 1635, 1360, 1142. 1H-NMR (CDCl3) δ: 9.81 (1H, s, N-H), 6.18 (1H, d, J = 10.2 Hz, CH), 4.42 (2H, s, CH2), 2.80 (1H, m, CH-Me2), 2.60 (3H, s, N-Ac), 1.10 (6H, d, J = 6.6 Hz, 2xCH3).

13C-NMR (CDCl3) δ: 172.71, 164.71, 160.34, 132.98, 124.60, 45.96, 27.09, 25.75, 22.00.

1-Methyl-4-acetyl-6-isobutyridinepiperazine-2,5-dione (195). To a suspension of 60% sodium hydride (1.21 g, 30.21 mmol) in dry DMF (143.70 ml) was added a solution of 194 (5.28 g, 25.14 mmol) in dry DMF (25.20 ml) with stirring at 0 oC. Stirring was continued at this temperature for 30 min and methyl iodide (3.14 ml, 50.34 mmol) was added dropwise, and the solution was stirred for 2 hours at 0 oC, then kept at room temperature overnight, neutralized with 30% acetic acid, poured into ice-water, and then extracted with CH2Cl2. Usual work-up of the extract gave a crude syrup which was purified on a column of silica gel with 50% ethyl acetate-hexane to yield 195 as a colorless syrup (84%), IR (neat) cm-1: 2968, 1709, 1639, 1429, 1357, 1279, 1202, 1139. 1H-NMR (CDCl3) δ: 6.16 (1H, d, J = 10.5 Hz, CH), 4.39 (2H, s, CH2), 3.27 (3H, s, N-CH3), 2.80 (1H, m, CH-Me2), 2.57 (3H, s, N-Ac), 1.15 (6H, d, J = 6.6 Hz, 2xCH3).

13C-NMR (CDCl3) δ: 171.50, 164.83, 164.00, 136.98, 131.14, 45.72, 34.86, 27.14, 26.55, 22.97.

134

1-Methyl-3-benzylidine-6-isobutylidinepiperazine-2,5-dione (193a). 195 (0.82 g, 3.66 mmol) was dissolved in DMF (7.32 ml) under argon. To this solution were added dropwise benzaldehyde (0.37 ml, 3.66 mmol) and 0.5 N potassium tert-butoxide (0.62 g, 5.49 mmol) in tert-butanol (10.98 ml) over 20 minutes at 0 oC. After the pale yellow solution had been stirred at room temperature for 6 hours, it was neutralized with 30% acetic acid and poured into water. The product was extracted with CH2Cl2, dried over anhydrous sodium sulfate, and concentrated under reduced pressure to give a crude syrup, which was purified on a column of silica gel with 50% ethyl acetate-hexane to yield 193a as a white solid (42%), mp 131-133 oC. IR (KBr) cm-1: 3170, 3027, 2966, 1688, 1620, 1402, 1366, 1098. 1H-NMR (CDCl3) δ: 8.19 (1H, br s, N-H), 7.42 (5H, m, Ph-H), 7.01 (1H, s, CH), 6.06 (1H, d, J = 11.1 Hz, CH), 3.43 (3H, s, N-CH3), 2.95 (1H, m, CH-Me2), 1.12 (6H, d, J = 6.6 Hz, 2xCH3).

13C-NMR (CDCl3) δ: 159.77, 159.12, 133.11, 132.90, 131.68, 129.44, 128.54, 127.54, 125.92, 116.64, 35.56, 27.40, 23.06.

1-Methyl-3-(2-methoxy-3,4-methylenedioxybenzylidine)-6-isobutylidinepiperazine-2,5-dione (196). By the same procedure used to prepare 193a, 196 was obtained in 29% yield as a yellow solid, mp 141-143 oC. IR (KBr) cm-1: 3343, 2965, 1689, 1619, 1470, 1392, 1350, 1077, 1050. 1H-NMR (CDCl3) δ: 8.61 (1H, br s, N-H), 6.91 (1H, s, CH), 6.80 (1H, d, J = 13.5 Hz, CH), 6.60 (1H, d, J = 7.8 Hz, CH), 6.09 (1H, d, J = 13.8 Hz, CH), 6.07 (2H, s, OCH2O), 4.02 (3H, s, OCH3), 3.42 (3H, s, N-CH3), 2.94 (1H, m, CH-Me2), 1.12 (6H, d, J = 6.6 Hz, 2xCH3).

13C-NMR (CDCl3) δ:

135

159.57, 150.10, 140.79, 131.08, 128.90, 124.45, 119.72, 113.69, 103.86, 101.62, 60.41, 35.57, 27.35, 23.09.

1-Methyl-3-(4-benzyloxy-3-methoxybenzylidine)-6-isobutylidinepiperazine-2,5-dione (197). By the same procedure used to prepare 193a, 197 was obtained in 36% yield as a yellow solid, mp 146-147 oC. IR (KBr) cm-1: 3247, 2972, 1689, 1632, 1516, 1351, 1142, 1035. 1H-NMR (CDCl3) δ: 8.07 (1H, br s, N-H), 7.34 (5H, m, Ph-H), 6.94 (1H, s, CH), 6.93 (1H, d, J = 9.6 Hz, CH), 6.89 (1H, d, J = 9.6 Hz, CH), 6.06 (1H, d, J = 11.1 Hz, CH), 5.17 (2H, s, CH2), 3.89 (3H, s, OCH3), 3.42 (3H, s, N-CH3), 2.94 (1H, m, CH-Me2), 1.13 (6H, d, J = 6.6 Hz, 2xCH3).

13C-NMR (CDCl3) δ: 159.69, 159.25, 150.17, 148.61, 136.62, 131.45, 128.72, 128.64, 128.03, 126.93, 126.24, 124.93, 120.91, 116.69, 114.21, 112.45, 70.96, 56.11, 35.53, 27.38, 23.07.

1-Methyl-3-(2-bromo-5,6-dimethoxybenzylidine)-6-isobutylidinepiperazine-2,5-dione (198). By the same procedure used to prepare 193a, 198 was obtained in 31% yield as a yellow syrup. IR (KBr) cm-1: 3269, 2966, 1687, 1632, 1468, 1391, 1361, 1297, 1081, 1003. 1H-NMR (CDCl3) δ: 8.41 (1H, br s, N-H), 7.36 (1H, d, J = 8.7 Hz, CH), 6.95 (1H, s, CH), 6.83 (1H, d, J = 8.7 Hz, CH), 6.06 (1H, d, J = 11.4 Hz, CH), 3.89 (3H, s, OCH3), 3.76 (3H, s, OCH3), 3.45 (3H, s, N-CH3), 2.94 (1H, m, CH-Me2), 1.12 (6H, d, J = 6.6 Hz, 2xCH3).

13C-NMR (CDCl3) δ: 159.51, 159.23,

136

152.60, 146.56, 131.84, 127.82, 127.08, 115.21, 113.51, 112.61, 61.48, 56.12, 35.56, 27.39, 23.04.

1-Methyl-3-(3-bromo-5,6-dimethoxybenzylidine)-6-isobutylidinepiperazine-2,5-dione (199). By the same procedure used to prepare 193a, 199 was obtained in 39% yield as a yellow semisolid. IR (KBr) cm-1: 3227, 2966, 1686, 1630, 1478, 1392, 1352, 1302, 1270, 1230, 1105, 993. 1H-NMR (CDCl3) δ: 9.04 (1H, br s, N-H), 7.03 (2H, d, J = 9.9 Hz, 2xCH), 6.82 (1H, s, CH), 6.05 (1H, d, J = 11.1 Hz, CH), 3.89 (3H, s, OCH3), 3.78 (3H, s, OCH3), 3.44 (3H, s, N-CH3), 2.95 (1H, m, CH-Me2), 1.13 (6H, d, J = 6.6 Hz, 2xCH3).

13C-NMR (CDCl3) δ: 159.41, 159.03, 153.82, 145.28, 131.48, 129.11, 127.51, 124.93, 117.03, 116.73, 111.31, 61.28, 56.21, 35.53, 27.31, 23.05.

1-Methyl-3-(2-bromo-4,5-methylenedioxybenzylidine)-6-isobutylidinepiperazine-2,5-dione (200). By the same procedure used to prepare 193a, 200 was obtained in 35% yield as a yellow syrup. IR (KBr) cm-1: 3193, 2967, 1683, 1628, 1479, 1392, 1354, 1243, 1151, 1120, 1093, 1038. 1H-NMR (CDCl3) δ: 8.27 (1H, br s, N-H), 7.08 (1H, s, CH), 6.93 (1H, s, CH), 6.85 (1H, s, CH), 6.04 (2H, s, OCH2O), 6.07 (1H, d, J = 9.0 Hz, CH), 3.43 (3H, s, N-CH3), 2.96 (1H, m, CH-Me2), 1.13 (6H, d, J = 6.6 Hz, 2xCH3).

13C-NMR (CDCl3) δ: 159.70, 158.62, 148.66, 147.73, 131.73, 128.41, 126.50, 126.05, 115.99, 113.56, 108.80, 102.37, 35.48, 27.38, 23.05.

137

1-Methyl-3-(4-benzyloxybenzylidine)-6-isobutylidinepiperazine-2,5-dione (201). By the same procedure used to prepare 193a, 201 was obtained in 30% yield as a pale yellow solid, mp 164-165 oC. IR (CH2Cl2-film) cm-1: 3243, 2968, 1689, 1619, 1509, 1349, 1250, 1178, 1094. 1H-NMR (CDCl3) δ: 7.85 (1H, br s, N-H), 7.45-7.32 (5H, m, Ph-H), 7.33 (2H, d, J = 8.7 Hz, 2xCH), 7.02 (2H, d, J = 8.7 Hz, 2xCH), 6.95 (1H, s, CH), 6.07 (1H, d, J = 10.8 Hz, CH), 5.10 (2H, s, CH2), 3.43 (3H, s, N-CH3), 2.99-2.91(1H, m, CH-Me2), 1.14 (6H, d, J = 6.3 Hz, 2xCH3).

13C-NMR (CDCl3) δ: 159.74, 158.97, 136.44, 134.35, 131.43, 130.04, 128.72, 128.67, 128.15, 127.44, 125.69, 124.61, 70.08, 35.56, 27.37, 23.05.

1-Methyl-3-(3,4-dibenzyloxybenzylidine)-6-isobutylidinepiperazine-2,5-dione (202). By the same procedure used to prepare 193a, 202 was obtained in 31% yield as a yellow solid, mp 147-148 oC. IR (KBr) cm-1: 3247, 2964, 1678, 1629, 1516, 1353, 1264, 1140, 1021. 1H-NMR (CDCl3) δ: 7.95 (1H, br s, N-H), 7.45-7.26 (10H, m, 2xPh-H), 6.93 (3H, s, 3xArH), 6.86 (1H, s, CH), 6.05 (1H, d, J = 11.1 Hz, CH), 5.18 (2H, s, CH2Ph), 5.16 (2H, s, CH2Ph), 3.40 (3H, s, N-CH3), 2.96-2.88 (1H, m, CH-Me2), 1.12 (6H, d, J = 6.6 Hz, 2xCH3).

13C-NMR (CDCl3) δ: 159.60, 159.22, 149.32, 149.22, 136.73, 131.41, 128.67, 128.61, 128.58, 127.98, 127.97, 127.33, 127.18, 126.26, 124.83, 121.73, 116.54, 115.36, 114.94, 71.25, 71.02, 35.54, 27.36, 23.04.

138

1-Methyl-3-(3-benzyloxy-4-methoxybenzylidine)-6-isobutylidinepiperazine-2,5-dione (203). By the same procedure used to prepare 193a, 203 was obtained in 29% yield as a yellow solid, mp 147-148 oC. IR (KBr) cm-1: 3216, 3033, 2965, 1682, 1625, 1513, 1351, 1266, 1139, 1022, 737. 1H-NMR (CDCl3) δ: 8.04 (1H, br s, N-H), 7.40-7.27 (5H, m, Ph-H), 7.01-6.89 (3H, m, ArH), 6.86 (1H, s, CH), 6.05 (1H, d, J = 10.8 Hz, CH), 5.15 (2H, s, CH2), 3.90 (3H, s, OCH3), 3.40 (3H, s, N-CH3), 2.97-2.89 (1H, m, CH-Me2), 1.13 (6H, d, J = 6.6 Hz, 2xCH3).

13C-NMR (CDCl3) δ: 159.69, 159.30, 150.14, 148.57, 136.60, 131.36, 128.74, 128.66, 128.03, 127.37, 125.68, 124.73, 121.73, 116.73, 114.51, 112.12, 71.05, 56.02, 35.53, 27.35, 23.05.

139

รายการอางอง [1] โครงการพฒนาศนยกลางความรแหงชาต (Thailand Knowledge Center). กระทรวงเทคโนโล

ยสารสนเทศและการสอสาร. (2013). ความรเบองตนเกยวกบพชสมนไพร. เขาถงเมอ 11 สงหาคม. เขาถงไดจาก http://www.tkc.go.th/component/content/article.html?id=1365.

[2] Stüber, K. (2004). Atropa belladonna. เขาถงเมอ 27 สงหาคม. เขาถงไดจาก

http://en.wikipedia.org/wiki/File:Atropa_bella-donna1.jpg [3] Henriette’ s Herbal Homepage. (2001). Ephedra equisetina Bunge. เขาถงเมอ 27 สงหาคม.

เขาถงไดจาก http://www.henriettesherbal.com/pictures/p05/pages/ephedra-equisetina.htm [4] ยวด อณฑสตร. (2013). Strychnos nux-vomica L. เขาถงเมอ 27 สงหาคม. เขาถงไดจาก

http://chm-thai.onep.go.th/chm/Dry/bdd_plant04.html

[5] Gilbert, S. G. (2004). A small dose of toxicology: the health effects of common chemicals. 2nd ed. Healthy World Press.

[6] ฐานขอมลพนธไม องคการสวนพฤกษศาสตร . (2013). หนงสอพนธไมตางประเทศ:

แพงพวยฝรง (Catharanthus roseus N. Don). เขาถงเมอ 27 สงหาคม. เขาถงไดจากhttp://www.qsbg.org/database/botanic_book%20full%20option/search_detail.asp?bot anic_id=2317#ad-image-0

[7] Baskauf, S. Department of Biological Sciences, Vanderbilt University, Nashville, TN. (2013). Pacific yew. เขาถงเมอ 27 สงหาคม. เขาถงไดจาก

http://www.cas.vanderbilt.edu/bioimages/image/t/tabr2-tw42586.htm [8] Woo, S.-H.; Reynolds, M. C.; Sun, N.-J.; Cassady, J. M.; Snapka, R. M. Inhibition of

topoisomerase II by liriodenine. Biochemical Pharmacology 1997, 54, 467-473. [9] กะได. (2549). กระดงงา (Cananga odorata) เขาถงเมอ 27 สงหาคม. เขาถงไดจาก

http://www.bloggang.com/mainblog.php?id=kadai&month=04-04-2006&group=3&gblog=1 [10] Ra ková, L.; Májeková, M.; Košt’álová, D.; Štefek, M. Antiradical and antioxidant activities

of alkaloids isolated from Mahonia aquifolium. Structural aspects. Bioorg. Med. Chem. 2004, 12, 4709-4715.

[11] Meggar. (2006). Mahonia aquifolium. เขาถงเมอ 27 สงหาคม. เขาถงไดจากhttp://en.wikipedia.org/wiki/File:Mahonia_aquifolium.jpg

140

[12] Stévigny, C.; Bailly, C.; Leclercq, J. Q. Cytotoxic and antitumor potentialities of aporphinoid alkaloids. Curr. Med. Chem. – Anti-Cancer Agents 2005, 5, 173-182.

[13] Simonjoan. (2005). Peumus boldus. เขาถงเมอ 27 สงหาคม. เขาถงไดจากhttp://commons.wikimedia.org/wiki/File:Peumus_boldus_leaf2.jpg

[14] Kanokmedhakul, S.; Kanokmedhakul, K.; Lekphrom, R. Bioactive constituents of the roots of Polyalthia cerasoides. J. Nat. Prod. 2007, 70, 1536-1538.

[15] Bettermann, A. (2009). Polyalthia cerasoides. เขาถงเมอ 27 สงหาคม. เขาถงไดจากhttp://herbstohealth.blogspot.com/2009_09_01_archive.html

[16] Agnihotri, V. K.; ElSohly, H. N.; Khan, S. I.; Jacob, M. R.; Joshi, V. C.; Smillie, T.; Khan I. A.; Walker, L. A. Constituents of Nelumbo nucifera leaves and their antimalarial and antifungal activity. Phytochemistry Lett. 2008, 1, 89-93.

[17] วกพเดย. สารานกรมเสร. (2013). ตนบวหลวง (Nelumbo nucifera). เขาถงเมอ 27 สงหาคม. เขาถงไดจาก http://th.wikipedia.org/wiki/%E0%B8%AA%E0%B8%81%E0%B8%B8%E0%B8%A5%E0%B8%9A%E0%B8%B1%E0%B8%A7%E0%B8%AB%E0%B8%A5%E0%B8%A7%E0%B8%87

[18] Yan, M.-H.; Cheng, P.; Jiang, Z.-Y.; Ma, Y.-B.; Zhang, X.-M.; Zhang, F.-X.; Yang, L.-M.; Zheng, Y.-T.; Chen, J.-J. Periglaucines A-D, anti-HBV and –HIV-1 alkaloids from Pericampylus glaucus. J. Nat. Prod. 2008, 71, 760-763.

[19] Mingiweng. (2007). Pericampylus glaucus. เขาถงเมอ 27 สงหาคม. เขาถงไดจากhttp://www.flickr.com/photos/mingiweng/7374483320/in/photostream/

[20] Makarasen, A.; Sirithana, W.; Mogkhuntod, S.; Khunnawutmanotham, N.; Chimnoi, N.; Techasakul, S. Cytotoxic and antimicrobial activities of aporphine alkaloids isolated from Stephania venosa (Blume) Spreng. Planta Med. 2011, 77, 1519-1524.

[21] Ge, Y.-W.; Zhu, S.; Shang, M.-Y.; Zang, X.-Y.; Wang, X.; Bai, Y.-J.; Li, L.; Komatsu, K.; Cai, S.-Q. Aristololactams and aporphines from the stems of Fissistigma oldhamii (Annonaceae). Phytochemistry 2013, 86, 201-207.

[22] Plant Image Collection. (2007). Fissistigma oldhamii. เขาถงเมอ 27 สงหาคม. เขาถงไดจาก http://plantjdx.com/fissistigma_oldhamii.htm

141

[23] Shi, J. (2006). “Isoquinoline alkaloids.” In Baran Group Meeting, 1-11, 18 october 2006. [24] Shamma, M. (1972). The Isoquinoline Alkaloids: Chemistry and Pharmacology. New

York: Academic Press. [25] Castro, O.; López, J.; Vergara, A. Aporphine alkaloids from Phoebe pittieri. Phytochemistry

1985, 24, 203-204. [26] Wijeratne, E. M. K.; Hatanaka, Y.; Kikuchi, T.; Tezura, Y.; Gunatilaka, A. A. L.

A dioxoaporphine and other alkaloids of two Annonaceous plants of Sri Lanka. Phytochemistry 1996, 42, 1703-1706.

[27] Kunitomo, J.; Murakami, Y.; Oshikata, M.; Shingu, T.; Akasu, M.; Lu, S.-T.; Chen, I.-S. The alkaloids of Stephania sasakii: structure of five new alkaloids. Phytochemistry 1980, 19, 2735-2739.

[28] Velcheva, M. P.; Petrova, R. R.; Samdanghiin, Z.; Danghaaghiin, S.; Yansanghiin, Z.; Budzikiewicz, H.; Hesse, M. Isoquinoline alkaloid N-oxides from Thalictrum simplex. Phytochemistry 1996, 42, 535-537.

[29] Castedo, L.; Tojo, G. (1972). The alkaloids volume 39: Chapter 3 Phenanthrene alkaloids. California: Academic Press.

[30] Tojo, E. The homoaporphine alkaloids. J. Nat. Prod. 1989, 52, 909-921. [31] Silveira, C. C.; Larghi, E. L.; Mendes, S. R.; Bracca, A. B. J.; Rinaldi, F.; Kaufman, T. S.

Electrocyclization-mediated approach to 2-methyltriclisine, an unnatural analog of the azafluoranthene alkaloid triclisine. Eur. J. Org. Chem. 2009, 4637-4645.

[32] ApSimom, J. (1977). The total synthesis of natural products: volume 3. Inc: John wiley & Sons.

[33] Kupchan, S. M.; Dhingra, O. P.; Kim, C.-K.; Kameswaran, V. Novel nonphenol oxidative coupling of phenethylisoquinilines. J. Org. Chem. 1976, 41, 4047-4049.

[34] Kupchan, S. M.; Kameswaran, V.; Findlay, J. W. A. Aporphine synthesis by cyclization of aminophenols. An improved synthesis of a thalicarpine precursor. J. Org. Chem. 1972, 37, 405-406.

[35] Cava, M. P.; Buck, K. T.; daRocha, A. I. Azafluoranthene alkaloids. A new structural type. J. Am. Chem. Soc. 1972, 5931.

142

[36] Cleaver, L.; Nimgirawath, S.; Ritchie, E.; Taylor, W.C. The alkaloids of Elmerrillia papuana (Magnoliaceae): Structure and synthesis of elmerrillicine. Aust. J. Chem. 1976, 29, 2003-2021.

[37] Andrade, J. G. (1978). “Organic syntheses utilizing aromatic radical cations generated with thallium trifluoroacetate.” Ph.D. dissertation, Department of Chemistry, Faculty of Princeton University, University of Microfilms international.

[38] Castedo, L.; Saá, C.; Saá, J. M.; Suau, R. Synthesis of oxoaporphines. An unusual photocyclization-photoreduction of 2,3-diaryl-Δ2-pyrroline-4,5-diones. J. Org. Chem. 1982, 47, 513-517.

[39] Ramana, M. M. V.; Sharma, R. H.; Parihar, J. A. Photocyclization of 1-(2-halophenyl)-3,4-dihydro-6,7-dimethoxyisoquinolines: a short and new synthesis of triclisine. Tetrahedron Lett. 2005, 46, 4385-4386.

[40] Cuny, G. D. Synthesis of (±)-aporphine utilizing Pictet-Spengler and intramolecular phenol ortho-arylation reactions. Tetrahedron Lett. 2004, 45, 5167-5170.

[41] Lafrance, M.; Blaquière, N.; Fagnou K. Direct intramolecular arylation of unactivated arenes: application to the synthesis of aporphine alkaloids. Chem. Commun. 2004, 2874-2875.

[42] Estévez, J. C.; Villaverde, M. C.; Estévez, R. J.; Castedo, L. Tributyltinhydride-induced intramolecular radical cyclization to aporphine and 5-oxoaporphines. Tetrahedron Lett. 1991, 32, 529-530.

[43] Estévez, J. C.; Villaverde, M. C.; Estévez, R. J.; Castedo, L. Radical cyclization to aporphines. A new, efficient total synthesis of the aporphine glaucine and the 4,5-dioxoaporphine pontevedrine, and the first total synthesis of 5-oxoaporphines. Tetrahedron 1994, 50, 2107-2114.

[44] Fu, J.–M.; Zhao, B. –P.; Sharp, M. J.; Snieckus, V. Ortho and remote metalation-cross coupling strategies. Total synthesis of the naturally occurring fluorenone dengibsinin and the azafluoranthene alkaloid imeluteine. Can. J. Chem. 1994, 72, 227-236.

[45] Pingaew, R.; Ruchirawat. S. Application of the hypervalent iodine reagent to the synthesis of some pentasubstituted aporphine alkaloids. Synlett. 2007, 15, 2363-2366.

143

[46] Silveira, C. C., Larghi, E. L.; Mendes, S. R.; Bracca, A. B. J.; Rinaldi, F.; Kaufman, T. S. (2009). "An approach to the synthesis of 2-methyl-triclisine, an un-natural Analog of triclisine, employing a microwave-assisted electrocyclization." 13th BMOS, São Pedro, Brazil, Poster.

[47] Chaudhary, S.; Pecic, S.; LeGendre, O.; Harding, W. W. Microwavw-assisted direct biaryl coupling: first application to the synthesis of aporphines. Tetrahedron Lett. 2009, 50, 2437-2439.

[48] Castro, O.; Lopez, J. New aporphine alkaloids from Phoebe valeriana. J. Nat. Prod. 1986, 49, 1036-1040.

[49] Encyclopedia of lofe (eOL). Smithsonian natural museum of natural history. (2013). Phoebe valeriana. เขาถงเมอ 23 สงหาคม. เขาถงไดจาก http://eol.org/pages/5399289/overview

[50] Duangthongyou, T.; Makarasen, A.; Techasakul, S.; Chimmoi, N.; Siripaisarnpipat, S. (-)-Crebanine. Acta Cryst. 2011, 67, 402.

[51] Blanchfield, J. T.; Sands, D. P. A.; Kennard, C. H. L.; Byriel, K. A.; Kitching, W. Characterisation of alkaloids from some Australian Stephania (Menispermaceae) species. Phytochemistry 2003, 63, 711-720.

[52] Zhang, L.-B.; Rao, G.-X. Aporphine, protoberberine and morphine alkaloids from the tubers of Stephania yunnanensis. Biochemical Systematics and Ecology 2009, 37, 622-625.

[53] Zhang, Y.-N.; Zhong, X.-G.; Zheng, Z.-P.; Hu, X.-D.; Zuo, J.-P.; Hu, L.-H. Discovery and synthesis of new immunosuppressive alkaloids from the stem of Fissistigma oldhamii (Hemsl.) Merr. Bioorg. Med. Chem. 2007, 15, 988-996.

[54] Harrigan, G. G.; Gunatilaka, A. A. L.; Kingston, D. G. I. Isolation of bioactive and other oxoaporphine alkaloids from two Annonaceous plants, Xylopia aethiopica and Miliusa cf. banacea. J. Nat. Prod. 1994, 57, 68-73.

[55] Chen, S.-B.; Gao, G.-Y.; Li, Y.-S.; Yu, S.-C.; Xiao, P.-G. Cytotoxic constituents from Aquilegia ecalcarata. Planta Med. 2002, 68, 554-556.

[56] West African Plants: A Photo Guide. (2013). Xylopia aethiopica. เขาถงเมอ 24 สงหาคม. เขาถงไดจาก

144

http://www.westafricanplants.senckenberg.de/root/index.php?page_id=14&id=1676 [57] Rob’s Plants. (2013). Aquilegia ecalcarata. เขาถงเมอ 24 สงหาคม. เขาถงไดจาก

http://www.robsplants.com/plants/AquilEcalc [58] Lu, S.-T.; Wu, Y.-C.; Leou, S.-P. Alakloids of Formosan Fissistigma and Goniothalamus.

Phytochemistry 1985, 24, 1829-1834. [59] Lo, W.-L.; Chang, F.-R.; Wu, Y.-C. Alkaloids from the leaves of Fissistigma glaucescens.

J. Chin. Chem. Soc. 2000, 47, 1251-1256. [60] Johnny; Pan, L.- C. (2011). Fissistigma glaucescens. เขาถงเมอ 24 สงหาคม. เขาถงไดจาก

http://www.flickr.com/photos/plj/5683177417/ [61] Awale, P. (2005). Artabotrys zeylanicus. เขาถงเมอ 24 สงหาคม. เขาถงไดจาก

http://www.flowersofindia.net/catalog/slides/Ceylon%20Green%20Champa.html [62] Guinaudeau, H.; Shamma, M.; Tantisewie, B.; Pharadai, K. 4,5,6,6a-Tetradehydro-N-

methyl-7-oxoaporphinium salts. J. C. S. Chem. Comm. 1981, 1118-1119. [63] ผลตภณฑสมนไพรไทย. (2012). สบเลอด (Stephania venosa Spreng.). เขาถงเมอ 24

สงหาคม. เขาถงไดจาก http://www.thaiherb.biz/?i=5&p=126 [64] Herath, W. H. M. W.; Hussain, S. F.; Guinaudeau, H.; Shamma, M. Thalihazine, a new

phenanthrene alkaloid. J. Nat. Prod. 1987, 50, 757-758. [65] Lehmuskallio, J. (2013). Thalictrum simplex. เขาถงเมอ 24 สงหาคม. เขาถงไดจาก

http://www.luontoportti.com/suomi/en/kukkakasvit/small-meadow-rue [66] Leboeuf, M.; Cavé, A. Alcaloïdes des ecorces de l’ Uvariopsis guineensis. Phytochemistry

1972, 11, 2833-2840. [67] Fauna & Flora of Liberia. (2013). Uvariopsis guineensis. เขาถงเมอ 24 สงหาคม. เขาถงได

จาก http://www.liberianfaunaflora.org/FFI/Plant.aspx?p=30&ix=711&p.. [68] Achenbach, H.; Löwel, M. Uvariopsamine from the stem bark of Greenwayodendron oliveri.

Planta Med. 1993, 59, 388. [69] Fauna & Flora of Liberia. (2013). Greenwayodendron oliveri. เขาถงเมอ 24 สงหาคม. เขาถง

ไดจาก http://www.liberianfaunaflora.org/FFI/Plant.aspx?p=30&ix=337&pid=3004&prcid=0&ppid=3004&family=&genus=&species=

145

[70] Achenbach, H.; Frey, D.; Waibel, R. 6a,7-Dehydro-2-hydroxy-4,5-dioxonoraporphine and other alkaloids from Monocyclanthus vignei: 13C-NMR studies on 4,5-dioxoaporphines. J. Nat. Prod. 1991, 54, 1331-1336.

[71] Fauna & Flora of Liberia. (2013). Monocyclanthus vignei. เขาถงเมอ 24 สงหาคม. เขาถงไดจาก http://www.liberianfaunaflora.org/FFI/Plant.aspx?p=30&ix=273&pid=3004&prcid=0&ppid=3004&family=&genus=&species=

[72] Nimgirawath, S.; Udomputtimekakul, P. Total syntheses of telisatin A, telisatin B and lettowianthine. Molecules 2009, 14, 917-924.

[73] Nkunya, M. H. H.; Jonker, S. A.; Makangara, J. J.; Waibel, R.; Achenbach, H. Aporphinoid alkaloids and other constituent from Lettowianthus stellatus. Phytochemistry 2000, 53, 1067-1073.

[74] Magnolia Thailand. (2010). แนะน าไมตางประเทศ: Lettowianthus stellatus Diels. เขาถงเมอ 24 สงหาคม. เขาถงไดจาก http://www.magnoliathailand.com/webboard/index.php?topic=4147.0

[75] Nimgirawath, S. Syntheses of (±)-romucosine and (±)-cathafiline. Songklanakarin J. Sci. Technol. 2006, 28, 1209-1215.

[76] Chaudhary, S.; Harding. W. W. Synthesis of C-homoaporphines via microwave-assisted direct arylation. Tetrahedron 2011, 67, 569-575.

[77] Ponnala, S.; Harding, W. W. A route to azafluoranthene natural products through direct arylation. Eur. J. Org. Chem. 2013, 1107-1115.

[78] Tuntiwachwuttikul, P.; Taechowisan, T.; Wanbanjob, A.; Thadaniti, S.; Taylor, W. C. Lansai A-D, secondary metabolites from Streptomyces sp. SUC1. Tetrahedron 2008, 64, 7583-7586.

[79] วกพเดย สารานกรมเสร. (2013). การอกเสบ. เขาถงเมอ 17 สงหาคม. เขาถงไดจาก http://th.wikipedia.org/wiki/การอกเสบ

[80] ทรงศกด วมลกตตพงศ. (2009). "ยาแกอกเสบ กบ ยาปฏชวนะ เหมอนหรอตางกนอยางไร." อย. Report, 2: 10.

146

[81] กองเผยแพรและควบคมโฆษณา ส านกงานคณะกรรมการอาหารและยา กระทรวงสาธารณสข. (2013). ยาตานการอกเสบทไมใชสเตยรอยด. เขาถงเมอ 17 สงหาคม. เขาถงไดจากhttp://webnotes.fda.moph.go.th/consumer/csmb/csmb2545.nsf/c8822a1b58ee742747256e60002f3b8a/f6941ea44a34aa27c7256ccd0019cb56?OpenDocument.

[82] Carvalho, M. P.; Abraham, W.-R. Antimicrobial and biofilm inhibiting diketopiperazines. Curr Med Chem. 2012, 19, 3564-3577.

[83] Lautru, S.; Gondry, M.; Genet, R.; Pernodet, J.-L. The albonoursin gene cluster of S. noursei: biosynthesis of diketopiperazine metabolites independent of nonribosomal peptide synthetases. Chemistry & Biology 2002, 9, 1355-1364.

[84] Folkes, A.; Roe, M. B.; Sohal, S.; Golec, J.; Faint, R.; Brooks, T.; Charlton, P. Synthesis and in vitro evaluation of a series of diketopiperazine inhibitors of plasminogen activator inhibitor-1. Bioorg. Med. Chem. Lett. 2001, 11, 2589-2592.

[85] Nicholson, B.; Lloyd, G. K.; Miller, B. R.; Palladino, M. A.; Kiso, Y.; Hayashi, Y.; Neuteboom, S. T. C. NPI-2358 is a tubulin-depolymerizing agent: in-vitro evidence for activity as a tumor vascular-disrupting agent. Anti-Cancer Drugs 2006, 17, 25-31.

[86] Yamazaki, Y.; Sumikura, M.; Hidaka, K.; Yasui, H.; Kiso, Y.; Yakushiji, F.; Hayashi, Y. Anti-microtubule ‘plinabulin’ chemical probe KPU-244-B3 labeled both α- and β-tubulin. Bioorg. Med. Chem. 2010, 18, 3169-3174.

[87] Yao, Y.; Tian, L.; Cao, J.-Q.; Pei, Y.-H. A new piperazine-2,5-dione from the marine fungus Gliocladium sp. Pharmazie 2007, 62, 478-479.

[88] Loughlin, W. A.; Marshall, R. L.; Carreiro, A.; Elson, K. E. Solution-phase combinatorial synthesis and evaluation of piperazine-2,5-dione derivatives. Bioorg. Med. Chem. Lett. 2000, 10, 91-94.

[89] Gallina, C.; Liberatori, A. Condensation of 1,4-diacetylpiperazine-2,5-dione with aldehydes. Tetrahedron 1974, 30, 667-673.

[90] Shin, C.-G.; Yonezawa, Y.; Ohno, H. Synthesis of (3Z,6E)-1-N-methylalbonoursin, a new metabolite from Streptomyces albus. Agric. Biol. Chem. 1987, 51, 2033-2034.

147

[91] Villemin, D.; Alloum, A. B. Potassium fluoride on alumina: Condensation of 1,4-diacetylpiperazine-2,5-dione with aldehydes. Dry condensation under microwave irradiation. Synthesis of albonursin and analogues. Synth. Commun. 1990, 20, 3325-3331.

[92] Cho, S.-D.; Song, S.-Y.; Kim, K.-H.; Zhao, B.-X.; Ahn, C.; Joo, W.-H.; Yoon, Y.-J.; Falck, J. R.; Shin, D.-S. One-pot synthesis of symmetrical 1,4-disubstituted piperazine-2,5-dione. Bull. Korean Chem. Soc. 2004, 25, 415-416.

[93] Nguyen, K. T.; Luethi, E.; Syed, S.; Urwyler, S.; Bertrand, S.; Bertrand, D.; Reymond, J.-L. 3-(Aminomethyl)piperazine-2,5-dione as a novel NMDA glycine site inhibitor from the chemical universe database GDB. Bioorg. Med. Chem. Lett. 2009, 19, 3832-3835.

[94] Marcuccio, S. M.; Elix, J. A. Pyrazine chemistry. II. Reduction of 3,6-dibenzylidenepiperazine-2,5-diones. Aust. J. Chem. 1984, 37, 1791-1794.

ภาคผนวก

ภาคผนวก ก ค ายอและสญลกษณ

150

ค ายอและสญลกษณ

ค ายอ ค าเตม Ac acetyl Ac2O acetic anhydride BIOTEC National Center for Genetic Engineering and Biotechnology Boc tert-butyloxycarbonyl br d broad doublet br s broad singlet oC degree celcius CDCl3 deuterochloroform CD3OD deuteromethanol CeSO4 cerium sulfate (CF3CO)2O trifluoroacetic anhydride CH2Cl2 dichloromethane CHCl3 chloroform CH3CN acetonitile CH3CO2H acetic acid (CH3)2SO4 dimethyl sulfate ClCO2CH3 methyl chloroformate cm-1 reciprocal centimeter (wave number) COSY correlation spectroscopy COX-1 cyclooxygenase-1 COX-2 cyclooxygenase-2 δ chemical shift relative to tetramethylsilane (TMS) d doublet DCC N,N'-dicyclohexylcarbodiimide dd doublets of doublet DKP diketopiperazine

151

DMA dimethylacetamide DMF N,N-dimethylformamide DMSO dimethyl sulfoxide E Ger., entgegen EC50 half maximal effective concentration

equiv equivalent EtOAc ethyl acetate EtOH ethanol g gram hυ light HCOH formaldehyde Hg(OAc)2 mercuric acetate HMBC heteronuclear multiple bond correlation HMQC heteronuclear multiple quantum correlation H2SO4 sulfuric acid HCl hydrochloric acid Hz hertz IC50 half maximal inhibitory concentration

IR infrared J coupling constant K2CO3 potassium carbonate KI potassium iodide LPS lipopolysaccharide LiAlH4 (LAH) lithium aluminium hydride m multiplet M molar MeOH methanol mg milligram g microgram

152

MHz megahertz MIC minimum inhibitory concentration mL milliliter mp melting point MS mass spectrometry m/z mass to charge ration mmol millimole mw microwave NaBH4 sodium borohydride NaCN sodium cyanide NaCNBH4 sodium cyanoborohydride NaHCO3 sodium hydrogen carbonate Na2CO3 sodium carbonate NaOH sodium hydroxide NMR nuclear magnetic resonance NO nitric oxide NSAIDs Nonsteroidal anti-inflammatory drugs PAI-1 plasminogen activator inhibitors-1 Pd(OAc)2 palladium(II)acetate PGE2 prostaglandin E2 POCl3 phosphorous oxychloride q quartet s singlet SAIDs Steroidal anti-inflammatory drugs SOCl2 thionyl chloride t triplet tBuOK potassium tert-butoxide tBuOH tert-butyl alcohol

THF tetrahydrofuran

153

TLC thin-layer chromatography Z Ger., zusammen

ภาคผนวก ข Supporting information

155

สเปกตรม 1H-NMR และ 13C-NMR ของอลคาลอยด

ภาพผนวก ข.1 สเปกตรม 1H-NMR ของ Phoebine, 110a

ภาพผนวก ข.2 สเปกตรม 13C-NMR ของ Phoebine, 110a

156

ภาพผนวก ข.3 สเปกตรม 1H-NMR ของ Crebanine, 110b

ภาพผนวก ข.4 สเปกตรม 13C-NMR ของ Crebanine, 110b

157

ภาพผนวก ข.5 สเปกตรม 1H-NMR ของ 1,2,8,9-Tetramethoxyaporphine, 110c

ภาพผนวก ข.6 สเปกตรม 13C-NMR ของ 1,2,8,9-Tetramethoxyaporphine , 110c

158

ภาพผนวก ข.7 สเปกตรม 1H-NMR ของ Norphoebine, 110a'

ภาพผนวก ข.8 สเปกตรม 13C-NMR ของ Norphoebine, 110a'

159

ภาพผนวก ข.9 สเปกตรม 1H-NMR ของ Norcrebanine, 110b'

ภาพผนวก ข.10 สเปกตรม 13C-NMR ของ Norcrebanine, 110b'

160

ภาพผนวก ข.11 สเปกตรม 1H-NMR ของ Dehydrophoebine, 111a

ภาพผนวก ข.12 สเปกตรม 13C-NMR ของ Dehydrophoebine, 111a

161

ภาพผนวก ข.13 สเปกตรม 1H-NMR ของ Dehydrocrebanine, 111b

ภาพผนวก ข.14 สเปกตรม 13C-NMR ของ Dehydrocrebanine, 111b

162

ภาพผนวก ข.15 สเปกตรม 1H-NMR ของ Oxophoebine, 112a'

ภาพผนวก ข.16 สเปกตรม 13C-NMR ของ Oxophoebine, 112a'

163

ภาพผนวก ข.17 สเปกตรม 1H-NMR ของ Oxocrebanine, 112b'

ภาพผนวก ข.18 สเปกตรม 13C-NMR ของ Oxocrebanine, 112b'

164

ภาพผนวก ข.19 สเปกตรม 1H-NMR ของ Uthongine, 113

ภาพผนวก ข.20 สเปกตรม 13C-NMR ของ Uthongine, 113

165

ภาพผนวก ข.21 สเปกตรม 1H-NMR ของ Thalihazine, 115a

ภาพผนวก ข.22 สเปกตรม 13C-NMR ของ Thalihazine, 115a

166

ภาพผนวก ข.23 สเปกตรม 1H-NMR ของ 8-Methoxyuvariopsine, 115b

ภาพผนวก ข.24 สเปกตรม 13C-NMR ของ 8-Methoxyuvariopsine, 115b

167

ภาพผนวก ข.25 สเปกตรม 1H-NMR ของ Uvariopsamine, 115c

ภาพผนวก ข.26 สเปกตรม 13C-NMR ของ Uvariopsamine, 115c

168

ภาพผนวก ข.27 สเปกตรม 1H-NMR ของ Secophoebine, 115a'

ภาพผนวก ข.28 สเปกตรม 13C-NMR ของ Secophoebine, 115a'

169

ภาพผนวก ข.29 สเปกตรม 1H-NMR ของ Noruvariopsamine, 115c'

ภาพผนวก ข.30 สเปกตรม 13C-NMR ของ Noruvariopsamine, 115c'

170

ภาพผนวก ข.31 สเปกตรม 1H-NMR ของ Fibrecisine, 116

ภาพผนวก ข.32 สเปกตรม 13C-NMR ของ Fibrecisine, 116

171

ภาพผนวก ข.33 สเปกตรม 1H-NMR ของ 8-hydroxystephenanthrine, 118

ภาพผนวก ข.34 สเปกตรม 13C-NMR ของ 8-hydroxystephenanthrine, 118

172

ภาพผนวก ข.35 สเปกตรม 1H-NMR ของ 11- methoxylettowianthrine, 130

ภาพผนวก ข.36 สเปกตรม 13C-NMR ของ 11- methoxylettowianthrine, 130

173

ภาพผนวก ข.37 สเปกตรม 1H-NMR ของ Debromination, 137a

ภาพผนวก ข.38 สเปกตรม 13C-NMR ของ Debromination, 137a

174

ภาพผนวก ข.39 สเปกตรม 1H-NMR ของ Debromination, 139

ภาพผนวก ข.40 สเปกตรม 13C-NMR ของ Debromination, 139

175

ภาพผนวก ข.41 สเปกตรม 1H-NMR ของ Homonoraporphine, 140

ภาพผนวก ข.42 สเปกตรม 13C-NMR ของ Homonoraporphine, 140

176

ภาพผนวก ข.43 สเปกตรม 1H-NMR ของ Homonantenine, 141

ภาพผนวก ข.44 สเปกตรม 13C-NMR ของ Homonantenine, 141

177

ภาพผนวก ข.45 สเปกตรม 1H-NMR ของ Triclisine, 147

ภาพผนวก ข.46 สเปกตรม 13C-NMR ของ Triclisine, 147

178

ภาพผนวก ข.47 สเปกตรม 1H-NMR ของ 2,3-Dihydroazafluoranthene, 148

ภาพผนวก ข.48 สเปกตรม 13C-NMR ของ 2,3-Dihydroazafluoranthene, 148

179

ภาพผนวก ข.49 สเปกตรม 1H-NMR ของ Hydroxylation aldehyde, 150a

ภาพผนวก ข.50 สเปกตรม 13C-NMR ของ Hydroxylation aldehyde, 150a

180

ภาพผนวก ข.51 สเปกตรม 1H-NMR ของ Cyclisation ester, 150a

ภาพผนวก ข.52 สเปกตรม 13C-NMR ของ Cyclisation ester, 150a

181

ภาพผนวก ข.53 สเปกตรม 1H-NMR ของ Ketone, 150b

ภาพผนวก ข.54 สเปกตรม 13C-NMR ของ Ketone, 150b

182

สเปกตรม 1H-NMR และ 13C-NMR ของ Piperazine-2,5-dione derivatives

ภาพผนวก ข.55 สเปกตรม 1H-NMR ของ Lansai D derivatives, 193

ภาพผนวก ข.56 สเปกตรม 13C-NMR ของ Lansai D derivatives, 193

183

ภาพผนวก ข.57 สเปกตรม 1H-NMR ของ Lansai D derivatives, 196

ภาพผนวก ข.58 สเปกตรม 13C-NMR ของ Lansai D derivatives, 196

184

ภาพผนวก ข.59 สเปกตรม 1H-NMR ของ Lansai D derivatives, 197

ภาพผนวก ข.60 สเปกตรม 13C-NMR ของ Lansai D derivatives, 197

185

ภาพผนวก ข.61 สเปกตรม 1H-NMR ของ Lansai D derivatives, 198

ภาพผนวก ข.62 สเปกตรม 13C-NMR ของ Lansai D derivatives, 198

186

ภาพผนวก ข.63 สเปกตรม 1H-NMR ของ Lansai D derivatives, 199

ภาพผนวก ข.64 สเปกตรม 13C-NMR ของ Lansai D derivatives, 199

187

ภาพผนวก ข.65 สเปกตรม 1H-NMR ของ Lansai D derivatives, 200

ภาพผนวก ข.66 สเปกตรม 13C-NMR ของ Lansai D derivatives, 200

188

ภาพผนวก ข.67 สเปกตรม 1H-NMR ของ Lansai D derivatives, 201

ภาพผนวก ข.68 สเปกตรม 13C-NMR ของ Lansai D derivatives, 201

189

ภาพผนวก ข.69 สเปกตรม 1H-NMR ของ Lansai D derivatives, 202

ภาพผนวก ข.70 สเปกตรม 13C-NMR ของ Lansai D derivatives, 202

190

ภาพผนวก ข.71 สเปกตรม 1H-NMR ของ Lansai D derivatives, 203

ภาพผนวก ข.72 สเปกตรม 13C-NMR ของ Lansai D derivatives, 203

191

ผลงานทเผยแพร

ผลงานตพมพ Prempree, C.; Rayanil, K. Syntheses of piperazine-2,5-dione derivatives. Pure and

Applied Chemistry Conference (PACCON) 2013, 868-870.

การน าเสนอผลงาน 1. Prempree, C.; Rayanil, K. Total syntheses of Lansai D and its derivatives.

Poster Presentation. The 6th Pure and Applied Chemistry International Conference (PACCON), January 11-13, 2012. Chiang Mai University, Chiang Mai, Thailand.

2. Prempree, C.; Rayanil, K.; Nimgirawath, S. Synthetic studies of the bioactive

isoquinoline, aporphine and oxoaporphine alkaloids. Poster Presentation. 40th Anniversary of Faculty of Science, August 15, 2012. Silpakorn University, Sanamchandra Palace campus, Nakorn Pathom, Thailand.

3. Prempree, C.; Rayanil, K. Syntheses of piperazine-2,5-dione derivatives. Poster

Presentation. The 7th Pure and Applied Chemistry International Conference (PACCON), January 23-25, 2013. Burapha University, Chonburi, Thailand.

192

ประวตผวจย ชอ-สกล นางสาวชลธชา เปรมปรด ทอย 255 หม 7 ต าบลดอนตาเพชร อ าเภอพนมทวน จงหวดกาญจนบร 71140 ประวตการศกษา

พ.ศ. 2553 ส าเรจการศกษาระดบวทยาศาสตรบณฑต สาขาวชาเคม คณะวทยาศาสตร มหาวทยาลยศลปากร

พ.ศ.2554 ศกษาตอระดบปรญญามหาบณฑต สาขาวชาเคมอนทรย คณะวทยาศาสตรมหาวทยาลยศลปากร