260110140039 Iflakhatul Ulfa Modul 4

7/26/2019 260110140039 Iflakhatul Ulfa Modul 4

1/11

Penentuan Kadar Paracetamol dan Kafein dalam Campuran Tablet Paracetamol Kafein

Menggunakan Metode Spektrofotometri Derivatif

Iflakhatul Ulfa

Jurusan Farmasi, Fakultas Farmasi, Universitas Padjadjaran, Jatinangor, Sumedang

Abstrak

Spektrofotometri UV-VIS dengan menggunakan metode zero crossing merupakan metode

alternatif dalam mengatasi penetapan kadar campuran dua komponen atau lebih senyawa yang

spektrumnya saling tumpang tindih. Dalam penelitian ini dilakukan dengan menentukan zero

crossing paracetamol dan kafein, pembuatan kurva baku, dan penetapan kadar sampel

paracetamol dan kafein dalam tablet campuran. Parasetamol merupakan metabolit fenasetin

dengan efek analgetik ringan sampai sedang, dan antipiretik yang ditimbulkan oleh gugusaminobenzen, sedangkan kafein adalah basa lemah yang memiliki gugus metil dan berefek

stimulasi susunan saraf pusat dan memperkuat efek analgesic. Hasil pada praktikum kali ini yaitu

zero crossing paracetamol dan kafein yaitu sebesar 275 nm dan 290 nm. Kadar paracetamol

dan kafein dalam tablet campuran yang didapat yaitu 123,78 % dan 23,43 %.

Kata kunci: Spektrofotometri UV-VIS derivative, zero crossing, paracetamol, kafein, kadar,

Determination of Paracetamol and Caffeine Levels in Mix Caffeine Tablets Paracetamol

Method Using Spectro Derivatives

Abstract

UV-VIS spectrophotometry using zero crossing method is an alternative method to overcome the

assay mixture of two or more compounds that are components of the spectrum overlap. In this

study conducted by determining the zero crossing paracetamol and caffeine, manufacture

standard curve and the assay samples of paracetamol and caffeine in tablet mix. Paracetamol is a

metabolite of phenacetin with mild to moderate analgesic effect and antipyretic posed by cluster

aminobenzen, while caffeine is a weak base which has a methyl group and affect the central

nervous system stimulation and strengthening the analgesic effect. The results of the lab this time

is zero crossing paracetamol and caffeine is equal to 275 nm and 290 nm. Levels of

paracetamol and caffeine in tablet mixture is obtained which is 123.78% and 23.43%.

Keywords: UV-VIS spectrophotometry derivative, zero crossing, paracetamol, caffeine, levels,


2/11

PENDAHULUAN

Parasetamol (asetaminofen) merupa-

kan obat analgetik non narkotik dengan cara

kerja menghambat sintesis prostaglandin

terutama di Sistem Syaraf Pusat (SSP).

Parasetamol digunakan sebagai analgetik-

antipiretik maupun kombinasi dengan obat

lain dalam sediaan obat flu, melalui resep

dokter atau yang dijual bebas(1)

.

Senyawa kafein mempunyai sifat

fisik berupa serbuk putih atau bentuk jarum

mengkilat putih, biasanya menggumpal,

tidak berbau, dan berasa pahit seperti

alkaloid pada umumnya. Kafein sukar larut

dalam eter, agak sukar larut dalam air dan

etanol, serta mudah larut dalam kloroform(2)

.

Berbagai sediaan obat yang terdapat

di pasaran mengkombinasikan dua atau

lebih zat aktif dalam satu sediaan, salah

satunya adalah obat analgesik. Analgesik

merupakan obat yang meredakan rasa nyeri

tanpa mengakibatkan kehilangan kesadaran.

Kombinasi analgesik yang banyak di-

temukan adalah parasetamol dengan kafein.

Penambahan kafein bertujuan untuk

meningkatkan efikasi dari analgesik(3)

.

Campuran parasetamol dan kafein

banyak ditemukan dalam produk anti

influenza dengan berbagai merek dagang.

Parasetamol merupakan metabolit fenasetin

dengan efek analgetik ringan sampai sedang,

dan antipiretik yang ditimbulkan oleh gugus

aminobenzen, sedangkan kafein adalah basa

lemah yang merupakan turunan xantin,

memiliki gugus metil dan berefek stimulasi

susunan saraf pusat serta dapat memperkuat

efek analgetik parasetamol(4,5)

.

Metode spektrofotometri derivatif

atau metode kurva turunan adalah salah satu

metode spektrofotometri yang dapat diguna-

kan untuk analisis campuran beberapa zat

secara langsung tanpa harus melakukan pe-

misahan terlebih dahulu walaupun dengan

panjang gelombang yang berdekatan(6)

.

Beberapa keuntungan dari spektrum

derivative antara lain: spektrum derivatif

memberikan gambaran struktur yang terinci

dari spektrum serapan dan gambaran ini

makin jelas dari spektra derivative pertama

ke derivatif keempat. Selain itu, dapat

dilakukan analisis kuantitatif suatu

komponen dalam campuran dengan bahan

yang panjang gelombangnya saling

berdekatan(7)

.

Metode spektrofotometri derivative

yang digunakan yaitu metode zero crossing.

Metode zero crossing adalah metode

kuantitatif dari spectrum derivative dimana

dA/d sudah satu senyawa dari campuran

sampel memiliki nol absorbansi sehingga

kadar senyawa lainnya dapat ditentukan


3/11

dengan menghitung absorbansi total sampel

dan panjang gelombang tersebut(8)

.

Tujuan praktikum kali ini yaitu

menghitung kadar zat aktif paracetamol dan

kafein dalam senyawa campuran serta

mengetahui cara menentukan zero crossing

daru suatu spectra.

METODE

Alat yang digunakan dalam

percobaan adalah beaker glass, corong,

Erlenmeyer, labu ukur, mortar dan stemper,

neraca analitik, pipet mikro, pipet tetes, dan

spektrofotometri UV-VIS.

Bahan yang digunakan dalam

percobaan adalah etanol, kafein standar,

paracetamol standar, serta sampel obat

kombinasi paracetamol dan kafein.

Prosedur pertama dalam percobaan

kali ini yaitu pembuatan larutan stok

paracetamol dan kafein. Paracetamol 500

ppm dibuat dengan ditimbang paracetamol

baku 50 mg dan dimasukkan ke dalam labu

ukur 10 mL. lalu ditambahkan etanol hingga

tanda batas. Sama seperti paracetamol,

kafein dibuat dalam konsentrasi 500 ppm

yaitu dengan ditimbang 50 mg kafein lalu

dimasukkan ke dalam labu ukur 10 mL dan

ditambahkan etanol hingga tanda batas.

Penentuan zero crossing paracetamol

dilakukan dengan cara dipipet1 mL larutan

stok paracetamol 500 ppm lalu dimasukkan

ke dalam labu ukur 10 mL dan ditambahkan

etanol hingga tanda batas. Diperoleh

konsentrasi paracetamol 50 ppm. Kemudian

dipipet 2 mL dari larutan paracetamol 50

ppm dan dimasukkan ke dalam labu ukur 10

mL. ditambahkan etanol hingga tanda batas.

Akan diperoleh konsentrasi paracetamol 10

ppm. Selanjutnya diukur pada spektrofoto-

metri UV-VIS pada panjang gelombang 200

nm- 400 nm. Dilakukan penentuan zero

crossing paracetamol.

Penentuan zero crossing kafein sama

dengan paracetamol yaitu dilakukan dengan

cara dipipet1 mL larutan stok kafein 500

ppm lalu dimasukkan ke dalam labu ukur 10

mL dan ditambahkan etanol hingga tanda

batas. Diperoleh konsentrasi kafein 50 ppm.

Kemudian dipipet 2 mL dari larutan kafein

50 ppm dan dimasukkan ke dalam labu ukur

10 mL. ditambahkan etanol hingga tanda

batas. Akan diperoleh konsentrasi kafein 10

ppm. Selanjutnya diukur pada spektrofoto-

metri UV-VIS pada panjang gelombang 200

nm-400 nm. Dilakukan penentuan zero

crossing kafein.

Pembuatan kurva baku paracetamol

dilakukan dengan dipipet 2 mL dari larutan

stok paracetamol 500 ppm lalu dimasukkan

ke dalam labu ukur 20 mL dan dimasukkan

etanol hingga tanda batas sehingga akan


4/11

diperoleh konsentrasi paracetamol 50 ppm.

Kemudian dibuat variasi konsentrasi

paracetamol menjadi 5 konsentrasi sebagai

berikut:

Konsentrasi

Paracetamol (ppm)

Konsentrasi Kafein

(ppm)

8 5

10 5

14 5

16 5

ditambahkan kafein 5 ppm sama banyak ke

dalam masing-masing labu ukur. Kemudian

diukur absorbansi pada zero crossing

kafein. akan diperoleh kurva baku parace-

tamol.

Pembuatan kurva baku kafein

dilakukan dengan dipipet 2 mL dari larutan

stok kafein 500 ppm lalu dimasukkan ke

dalam labu ukur 20 mL dan dimasukkan

etanol hingga tanda batas sehingga akan

diperoleh konsentrasi kafein 50 ppm.

Kemudian dibuat variasi konsentrasi kafein

menjadi 6 konsentrasi sebagai berikut:

Konsentrasi Kafein

(ppm)

Konsentrasi

Paracetamol (ppm)

10 5

12 5

14 5

16 5

18 5

ditambahkan paracetamol 5 ppm sama

banyak ke dalam masing-masing labu ukur.

Kemudian diukur absorbansi pada zero

crossing paracetamol. akan diperoleh kurva

baku kafein.

Penetapan Kadar tablet campuran

Paracetamol dan Kafein dilakukan dengan

ditimbang sebanyak 20 tablet dengam rata-

rata bobotnya 0,64094 gram (640,94 mg).

tablet diserbukkan dengan cara digerus. Lalu

ditimbang serbuk tersebut setara dengan 25

mg. Serbuk tersebut dimasukkan kedalam

labu ukur dan ditambahkan 10 mL etanol

(2500 ppm). Diambil 1 mL larutan sampel

konsentrasi 2500 ppm dan ditambah etanol

hingga tanda batas labu ukur 10 mL

sehingga diperoleh konsentrasi sampel 250ppm. Diambil 0,56 mL larutan sampel 250

ppm dan di tambah etanol hingga tanda

batas labu ukur 10 mL sehingga diperoleh

konsentrasi 14 ppm. Selanjutnya diukur

dalam spektrofotometri UV-VIS pada

panjang gelombang 200 nm-400 nm. Kadar

paracetamol dan kafein dalam tablet

campuran dihitung dengan persen kadar.

HASIL

1. Pembuatan Larutan Stok Parasetamol

dan Kafein (500 ppm)


5/11

a. Parasetamol (500 ppm)

b.

Kafein (500 ppm)

2. Penentuan max (200-400)nm

a. Parasetamol (50 ppm)

Parasetamol (10 ppm)

b.

Kafein (50 ppm)

Kafein (10 ppm)

3. Zero Crossing Parasetamol dan Kafein

zero crossing kafein : f = 246, 275

nm ( maks = 275 nm)

zero crossing parasetamol : f = 226,

230, 290 nm ( maks = 249 nm)

4. Kurva Baku Parasetamol dan Kafein

(dari 50 ppm)

Kurva Baku Parasetamol pada zero

crossing kafein (275 nm)

Konsentrasi

PCT (ppm)

Konsentrasi

Kafein

f(275

nm)

8 ppm 5 ppm -0,0040

10 ppm 5 ppm -0,0049

14 ppm 5 ppm -0,0076

16 ppm 5 ppm -0,0083

Campuran Larutan

8 ppm1,6 ml larutanparasetamol + 1 ml larutan kafein

(add etanol 10 ml)

10 ppm -> 2 ml larutan

parasetamol+ 1 ml larutan kafein

(add etanol 10 ml)

14 ppm -> 2,8 ml larutan

parasetamol+ 1 ml larutan kafein

(add etanol 10 ml)

16ppm-> 3,2 ml larutan

parasetamol +1 ml larutan kafein

(add etanol 10 ml)


6/11

Kurva Baku Parasetamol

Kurva Baku Kafein pada Zero

crossing parasetamol (290 nm)

Konsentrasi

Kafein (ppm)

Konsentrasi

Parasetamol

f(290

nm)

10 ppm 5 ppm -0,0260

12 ppm 5 ppm -0,0340

14 ppm 5 ppm -0,0365

16 ppm 5 ppm -0,0421

18 ppm 5 ppm -0,0471

Campuran Larutan

10 ppm -> 2 ml larutan kafein + 1

ml larutan parasetamol (add

etanol 10 ml)

12 ppm -> 2,4 ml larutan kafein +

1 ml larutan parasetamol (add

etanol 10 ml)



etanol 10 ml)



etanol 10 ml)



etanol 10 ml)

Kurva Baku Kafein

5. Pembuatan larutan Sampel Tablet

Campuran

- Bobot rata-rata 20 tablet = 0,64094

gram (640,94 mg)

- Ditimbang sebanyak 25 mg (2500

ppm)

8 ppm

+ 5

ppm

10

ppm +

5 ppm

14

ppm +

5 ppm

16

ppm +

5 ppm

275nm -0.004 -0.0049 -0.0076 -0.0083

-0.01

-0.008

-0.006

-0.004

-0.002

0

Absorbansi

Kurva Baku Parasetamol

y = -0.00057x +

0.00058

10

ppm +

5 ppm

12

ppm +

5 ppm

14

ppm +

5 ppm

16

ppm +

5 ppm

18

ppm

5 pp

290nm -0.026 -0.034 -0.0365 -0.0421 -0.04

-0.05

-0.04

-0.03

-0.02

-0.01

0

Absorbansi

Kurva Baku Kafein

y = -0.00252x -

0.00193

r2= 0.98


7/11

Pengenceran Larutan sampel (250

ppm)

Pengenceran Larutan sampel (14

ppm)

6. Perhitungan Kadar Sampel Parasetamol

dan Kafein

a. Data Absorbansi Parasetamol dan

Kafein pada konsentrasi sampel 14

ppm

b. Persentase kadar Parasetamol

- 14 ppm:

c. Persentase kadar Kafein

- 14 ppm

PEMBAHASAN

Praktikum kali in bertujuan untuk

menghitung kadar zat aktif paracetamol dan

kafein dalam senyawa campuran serta me-ngetahui cara menentukan zero crossing dari

suatu spectra. Metode spektrofotometri

derivatif dapat digunakan untuk analisis

kuantitatif zat dalam campuran yang

spektrumnya mungkin tersembunyi dalam

suatu bentuk spektrum besar yang saling

tumpang tindih dengan mengabaikan proses

pemisahan zat yang bertingkat-tingkat. Hal

ini dilakukan karena serapan maksimum dari

parasetamol dan kafein berada pada panjang

gelombang yang berdekatan yaitu 249 nm

dan 275 nm. Sehingga terjadi tumpang

Konsentrasi Absorbansi

Parasetamol

(f= 275 nm)

Absorbansi

Kafein

(f= 290 nm)

14 ppm -0,0093 -0,0102


8/11

tindih (overlapping) spektrum secara total.

Spektrum yang tumpang tindih menyebab-

kan kesulitan dalam penetapan kadar kedua

senyawa ini.

Pada pembuatan larutan stok para-

cetamol dan kafein dibuat dengan

konsentrasi awal 500 ppm baik paracetamol

maupun kafein. Larutan dibuat dalam labu

ukur 10 mL. labu ukur digunakan karena

merupakan suatu alat ukur yang kuantitatif

dan memiliki ketelitian lebih tinggi dari

pada gelas ukur dan gelas beker.

Selanjutnya dilakukan penetapan

zero crossing untuk paracetamol dan kafein.

Penentuan zero crossing dilakukan dengan

cara dipipet 1 mL dari larutan stok parace-

tamol 500 ppm dan kafein 500 ppm lalu

dimasukkan ke dalam labu ukur 10 mL dan

ditambahkan etanol hingga tanda batas (50

ppm). Larutan diencerkan lagi menjadi

konsentrasi 10 ppm. Selanjutnya diukur

pada spektrofotometri UV-VIS pada panjang

gelombang 200 nm-400 nm. Dilakukan

penentuan zero crossing paracetamol dan

kafein.

Prinsip dasar Spektrofotometri UV-

Vis adalah serapan cahaya. Bila cahaya

jatuh pada senyawa, maka sebagian dari

cahaya diserap oleh molekul-molekul sesuai

dengan struktur dari molekul senyawa

tersebut. Serapan cahaya oleh molekul

dalam daerah spektrum UV-Vis tergantung

pada struktur elektronik dari molekul.

Spektra UV-Vis dari senyawa-senyawa

organik yang berkaitan erat dengan transisi-

transisi diantara tingkatan-tingkatan tenaga

elektronik. Radiasi ultraviolet dan sinar

tampak diabsorpsi oleh molekul organik

aromatik, molekul yang mengandung

electron- terkonjugasi dan atau atom yang

mengandung elektron-n, menyebabkan tran-

sisi elektron di orbital terluarnya dari tingkat

energi elektron tereksitasi ke tingkat lebih

tinggi. Besarnya serapan radiasi tersebut

sebanding dengan banyaknya molekul analit

yang mengabsorpsi sehingga dapat diguna-

kan untuk analisis kuantitatif.

Pemilihan spektrofotometer UV-Vis

adalah karena spektrofotometer merupakan

instrument analisis yang tidak rumit,

selektif, serta kepekaan dan ketelitiannya

tinggi. Selain itu, senyawa parasetamol dan

kafein yang akan dianalisis memiliki gugus

kromofor pada strukturnya berupa ikatan

rangkap terkonjugasi dan juga merupakan

senyawa aromatik karena memiliki gugus

aromatik sehingga memenuhi syarat

senyawa yang dapat dianalisis menggunakan

spektrofotometri UV-Vis.

Hasil panjang gelombang zero

crossing paracetamol dan kafein yaitu f =

226, 230, 290 nm ( maks = 249 nm) dan f


9/11

= 246, 275 nm ( maks = 275 nm). Panjang

gelombang serapan maksimum pada suatu

senyawa akan menjadi panjang gelombang

zero crossing pada spectrogram derivatif

pertama, panjang gelombang tersebut tidak

mempunyai serapan atau dA/d = 0. Metode

zero crossing memisahkan campuran biner

dari spectrum derivatifnya pada panjang

gelombang pada saat komponen pertama

tidak ada sinyal. Pengukuran pada zero-

crossing tiap komponen dalam campuran

merupakan fungsi tunggal konsentrasi dari

yang lainnya.

Pada pembuatan kurva baku parace-

tamol dan kafein dilakukan dengan dipipet 2

mL dari larutan stok paracetamol 500 ppm

dan kafein 500 ppm lalu dibuat dalam

konsentrasi 50 ppm. Untuk penentuan kurva

baku paracetamol dilakukan variasi

konsentrasi paracetamol menjadi 4 konsen-

trasi yaitu 8, 10, 14, 16 ppm dan konsentrasi

tetap kafein 5 ppm. Kemudian diukur

absorbansi pada zero crossing kafein. akan

diperoleh kurva baku paracetamol dengan

persamaan garis y= -0.00057x + 0.00058

dan r2= 0,98984. Untuk penentuan kurva

baku kafein dilakukan variasi konsentrasi

kafein menjadi 5 konsentrasi yaitu 10, 12,

14, 16, 18 ppm dan konsentrasi tetap parace-

tamol 5 ppm. Kemudian diukur absorbansi

pada zero crossing paracetamol. akan

diperoleh kurva baku kafein dengan

persamaan garis y = -0.00252x - 0.00193

dan r2= 0.98.

Masing-masing komponen harus

ditentukan panjang gelombang maksimum-

nya terlebih dahulu. Alasan penggunaan

panjang gelombang maksimum ( maks)

yakni maksmemiliki kepekaan maksimal

karena terjadi perubahan absorbansi yang

paling besar serta pada panjang gelombang

maksimum bentuk kurva absorbansi meme-

nuhi hukum Lambert-Beer. Dari percobaan

ini diperoleh panjang gelombang maksimum

untuk paracetamol adalah 275 nm, dan

kafein 290 nm.

Penggunaan etanol sebagai pelarut

dikarenakan sampel parasetamol dan kafein

hanya sedikit larut dalam air. Seperti

diketahui bahwa sampel tersebut terdiri dari

gugus polar dan gugus nonpolar dimana

apabila dilarutkan dengan air maka hanya

bagian polar yang dapat larut. Oleh

karenanya maka digunakan pelarut etanol

karena etanol memiliki gugus polar dan non

polar sama halnya seperti sampel. Sehingga

bagian yang polar akan melarutkan bagian

polar pada sampel dan bagian nonpolar akan

melarutkan bagian nonpolar pada sampel.

Setelah persamaan garis diperoleh

maka kadar parasetamol dan kafein masing-


10/11

masing dapat dihitung. Pengukuran

konsentrasi tablet dalam sampel berdasarkan

hukum lambert-beer. Hukum Lambert-Beer

menyatakan hubungan linieritas antara

absorban dengan konsentrasi larutan analit

dan berbanding terbalik dengan transmitan.

Dalam hukum Lambert-Beer tersebut ada

beberapa pembatasan, yaitu : Sinar yang

digunakan dianggap monokromatis; penye-

rapan terjadi dalam suatu volume yang

mempunyai penampang yang sama;

senyawa yang menyerap dalam larutan ter-

sebut tidak tergantung terhadap yang lain

dalam larutan tersebut; tidak terjadi

fluorensensi atau fosforisensi ; serta indeks

bias tidak tergantung pada konsentrasi

larutan. Hasil perhitungan yaitu untuk kadar

parasetamol dalam tablet campuran adalah

123,78 % dan kadar kafein dalam campuran

sebesar 23,43 %.

SIMPULAN

Berdasarkan tujuan praktikum kali

ini dapat disimpulkan bahwa zero crossing

paracetamol dan kafein dapat ditentukan

dengan menggunakan spektrofotometri UV-

VIS yaitu sebesar 275 nm untuk paracetamol

dan 290 nm untuk kafein. Kadar

paracetamol dan kafein dapat ditentukan

dalam tablet campuran dengan

menggunakan metode spektrofotometri

derivative. Kadar paracetamol yang didapat

yaitu 123,78 % dan kadar kafein sebesar

23,43 %.

DAFTAR PUSTAKA

1. Lusiana, Darsono. 2002. Diagnosis dan

Terapi Intoksikasi Salisilat dan Parase-

tamol. Bandung: Universitas Kristen

Maranatha.

2. Depkes RI. 1995. Farmakope

Indonesia. Edisi IV. Jakarta: Depkes RI.

3.

Tjay, Tan Hoan dan Kirana Rahardja.

2007. Obat-obat Penting Khasiat, Peng-

gunaan dan Efek-efek Sampingnya Edisi

Keenam. Jakarta: Elex Media Komput-

indo.

4. Ganiswarna, SG. 1995. Farmakologi

dan Terapi. Edisi. 5. Jakarta: Bagian

Farmakologi, Fakultas Kedokteran,

Universitas lndonesia.

5. Sudjadi dan Rahman, A. 1994. Analisis

Obat dan Makanan. Yogyakarta:

Pustaka Pelajar.

6. El-Sayed AA, El-Salem NA. Recent

development of derivative spectro-

photometry and their analytical applica-

tions. Anal Sci. 2005. 21:595-614.

7. Munson JW. 1991. Analisis farmasi

metode modern. Parwa B. diterjemah-

kan oleh Harjana. Surabaya: Airlangga

University Press.


11/11

8. Hayun, Haryanto dan Yenti. 2006.

Penetapan Kadar Tripolidina Hidro-

klorida dan Pseudoefedrina Hidro-

klorida dalam Tablet Antiinfluenza

secara Spektrofotometri Derivatif.

Majalah Ilmu Kefarmasian Vol. 3 No.2

http://jurnal.farmasi.ui.ac.id/pdf/2006/V

o3no2/hayun0302.pdf (diakses pada

tanggal 13 Mei 2016).
http://jurnal.farmasi.ui.ac.id/pdf/2006/Vo3no2/hayun0302.pdfhttp://jurnal.farmasi.ui.ac.id/pdf/2006/Vo3no2/hayun0302.pdfhttp://jurnal.farmasi.ui.ac.id/pdf/2006/Vo3no2/hayun0302.pdfhttp://jurnal.farmasi.ui.ac.id/pdf/2006/Vo3no2/hayun0302.pdfhttp://jurnal.farmasi.ui.ac.id/pdf/2006/Vo3no2/hayun0302.pdf

Documents

260110140039 Iflakhatul Ulfa Modul 4