РЕСПУБЛИКА КАЗАХСТАН

(19) KZ (13) B (11) 29197 (51) C07C 35/00 (2006.01) C07D 471/02 (2006.01) A61K 31/40 (2006.01)

КОМИТЕТ ПО ПРАВАМ ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ МИНИСТЕРСТВА ЮСТИЦИИ РЕСПУБЛИКИ КАЗАХСТАН

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ПАТЕНТУ (21) 2012/0665.1 (22) 07.06.2012 (45) 17.11.2014, бюл. №11 (72) Нурмаганбетов Жангельды Сейтович; Турмухамбетов Айбек Журсунович; Сейдахметова Роза Батталовна; Жарылгасина Гульнара Темешевна; Адекенов Сергазы Мынжасарович (73) Акционерное общество "Международный научно-производственный холдинг "Фитохимия" (56) Машковский М.Д., Лекарственные средства. - Москва: Новая волна, 2007, с.959 - 960 (54) 1-МЕТИЛ-7-МЕТОКСИ-2-(2-ОКСО-2-ФЕНИЛЭТИЛ)-9Н-ПИРИДО[3,4-B]ИНДОЛ-2-ИНИЙ БРОМИД, ОБЛАДАЮЩИЙ ВЫРАЖЕННОЙ АНТИМИКРОБНОЙ АКТИВНОСТЬЮ (57) Изобретение относится к области химии природных и физиологически активных веществ, конкретно к 1-Метил-7-метокси-2-(2-оксо-2-фенилэтил)- 9Н-пиридо [3,4-b] индол-2-иний

бромиду (1), производному алкалоида индольного ряда гармина:

Целью изобретения является расширение арсенала лекарственных средств, природного происхождения на основе алкалоидов и их производных, обладающих выраженной антимикробной активностью.

На основе доступного растительного алкалоида гармина синтезировано его производное - 1-Метил-7-метокси-2-(2-оксо-2-фенилэтил)-9Н-пиридо[3,4-b]индол-2-иний бромид, обладающий выраженной антимикробной активностью в отношении грамположительного штамма Bacillus subtilis.

Экспериментально установлено, что 1-Метил-7-метокси-2-(2-оксо-2-фенилэтил)-9H-пиридо[3,4-b]индол-2-иний бромид обладает выраженной антимикробной активностью в концентрации 1 мкг/мл в отношении грамположительного штамма Bacillus subtilis и превосходит по активности препарат сравнения бензилпенициллина натриевую соль в 1.3 раза.

(19) KZ (13) B

(11) 29197

29197

2

Изобретение относится к области химии природных и физиологически активных веществ, конкретно к 1-Метил-7-метокси-2-(2-оксо-2-фенилэтил)- 9H-пиридо[3,4-b]индол-2-иний бромиду, производному алкалоида индольного ряда гармина имеющего следующую структуру (1):

Близким аналогом по гетероциклической

структуре является сангвиритрин (2) обладающий антибактериальной активностью: (Машковский М.Д., Лекарственные средства. - Москва: Новая волна, 2007. c.959-960).

Известен аналог антибактериальный препарат сангвиритрин (2) (Sanguiritrinum) растительного происхождения, в состав которого входят бисульфаты алкалоидов сангвинарина и хелетрина: (Машковский М.Д., Лекарственные средства. - Москва: Новая волна, 2007. - c.959-960). Препарат имеет существенные недостатки: вызывает аллергические реакции, диспепсию, абдоминальные боли.

Ближайшим аналогом является бензилпенициллина натриевая соль - фармакопейный препарат, который выпускается в виде порошка для приготовления раствора для инъекций (Бициллин-1, Бициллин-3, Бициллин-5) (Машковский М.Д., Лекарственные средства. - Москва: Новая волна, 2007. c.770-772). Препарат имеет существенные недостатки: аллергические реакции (гипертермия, крапивница, кожная сыпь, сыпь на слизистых оболочках, артралгия, эозинофилия, ангионевротический отек, интерстициальный нефрит, бронхоспазм); снижение насосной функции миокарда.

Целью данного изобретения является расширение арсенала лекарственных средств, природного происхождения на основе алкалоидов и их производных, обладающих выраженной антимикробной активностью.

Целевой продукт - 1-Метил-7-метокси-2-(2-оксо-2-фенилэтил)-9H-пиридо[3,4-b]индол-2-иний бромид (1) получен при взаимодействий гармина с фенацилбромидом.

Фенацилбромид растворяют в этаноле, добавляют гармин и кипятят. Выпавший осадок отфильтровывают, промывают этилацетатом и высушивают.

ИК-спектр (KBr υ, см-1): 3057, 3014, 2951, 1691, 1633, 1595, 1565, 1530, 1469, 1434, 1340, 1296, 1228, 1164, 1134, 1079, 1026, 990, 925, 811, 796, 761, 685, 632.

УФ- спектр (λмакс, нм (lg ε)): 202 (5.30), 204 (5.31), 254 (5.53), 291 (5.67), 295 (5.68), 336 (5.81), 490 (4.87).

Спектр ЯМР 1Н (300.13 МГц, DMSO-D6, δ, м.д. (J, Гц)): 2.95 (3Н, с., СН3 при С1), 3.38 (2Н, уш.с., СН2), 4.01 (3Н, с., СН3О), 7.12 (1Н, д.д., J = 8.8, 2.1, Н-6), 7.30 (1Н, д., J = 2.1, Н-8), 7.68 (2Н, м., Ph), 7.75 (1Н, м., Ph), 8.18 (1Н, д., J = 8.8, Н-5), 8.21 (2Н, м.,

2Н, Ph), 8.32 (1Н, д., J = 5.6, Н-4), 8.42 (1Н, д., J = 5.6, Н- 3), 12.65 (1Н, с., NH).

Спектр ЯМР 13С (75.47 МГц, DMSO-D6, δС, м.д.): 15.22 (к., СН3), 55.79 (к., СН3O), 62.68 (т., СН2), 94.09 (д., С-8), 125.08 (д., С-5), 113.38 (д., С-4), 114.06 (д., С-6), 114.45 (с., С-4b), 124.49 (д., С-4'), 128.51 (д., С-3',5'), 129.12 (д., С- 2',6'), 131.43 (с., С-9а), 133.52 (с., С-4а), 134.86 (с., С-1), 137.51 (д., С-3), 139.41 (с., С-1'), 147.96 (с., С-8а), 162.97 (с., С-7), 191.52 (с., С=O).

Элементный анализ: Найдено, %: С 61.72; Н 3.98; N 7.14; Вr 19.91. C21H18N2O2Br. Вычислено, %: С 61.46; Н 4.39; N 6.83; Вr 19.51.

Пример: Получение 1-Метил-7-метокси-2-(2-оксо-2-фенилэтил)9H-пиридо[3,4-b]индол-2-иний бромида.

Смесь 0.6 г (0.28 ммоль) гармина и 0.6 г (0.30 ммоль) фенацилбромида кипятят при температуре 75-80°С в 15 мл этанола 30 минут до полного растворения. Реакционную смесь упаривают наполовину, к остатку добавляют 5 мл этилацетата и охлаждают. Образовавшийся осадок отфильтровывают, получают соль в виде желтых кристаллов. Выход 0.516 г (86%), т.пл. 280°С (разл.).

Антимикробнная активность. Эффективность противомикробного средства изучалась в экспериментах in vitro. Эксперимент проводился в отношении следующих штаммов: грамположительных бактерий Staphylococcus aureus, Bacillus subtilis; грамотрицательных бактерий Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa методом диффузии в агар.

Культуры выращивают на жидкой среде pH 7.3 ± 0.2 при температуре от 30 до 35°С в течение 18-20 часов. Культуры разводят 1:1000 в стерильном 0.9% растворе натрия хлорида изотоническом, вносят по 1 мл в чашки с соответствующими элективными питательными средами для изучаемых тест- штаммов и засевают по методу «сплошного газона». После подсушивания на поверхности агара формируют лунки размером 6.0 мм, в которые вносят растворы исследуемого образца, бензилпенициллина натриевую соль. В контроле используют 96% этиловый спирт в эквиобъемных количествах. Таким образом, исследуемый образец испытывают в количестве 1 мкг, а препарат сравнения в количестве 1 мг. Посевы инкубируют при 37°С, учет растущих культур проводят через 24 часа.

Антимикробную активность исследуемого образца оценивают по диаметру зон задержки роста тест-штаммов (мм). Диаметр зон задержки роста меньше 10 мм и сплошной рост в чашке оценивают как отсутствие антимикробной активности, 10-15 мм - слабая активность, 15-20 мм - умеренно выраженная активность, свыше 20 мм - выраженная.

Установлено, что 1-Метил-7-метокси-2-(2-оксо-2-фенилэтил)-9H-пиридо[3,4-b]индол-2-иний бромид в концентрации 1 мкг/мл проявляет выраженную антимикробную активность в отношении грамположительного штамма Bacillus subtilis.

29197

3

Результаты скринингового исследования антимикробной активности приведены в таблице.

Предлагаемое средство можно эффективно использовать в качестве антимикробного средства. Оно обладает выраженным противомикробным

действием в эксперименте in vitro в отношении грамположительного штамма Bacillus subtilis и превосходит в 1.3 раза по активности фармакопейный препарат бензилпенициллина натриевую соль.

Таблица Антимикробная активность 1-Метил-7-метокси-2-(2-оксо-2-фенилэтил)-9H-пиридо[3,4-b]индол-2-иний

бромида

Наименование вещества St.aureus 505

Вас. subtilis

Е. coli М-17

Ps. aeruginosa

1 -Метил-7-метокси-2-(2-оксо-2-фенилэтил)-9H-пиридо[3,4-b]индол-

2- иний бромид 19±1 20±1 16±1 15±2

Препарат сравнения

Бензилпенициллин натриевая соль 15±1 15±1 16±1 14±2

ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ

l-Meтил-7-мeтoкcи-2-(2-oкco-2-фeнилэтил)-9Н-

пиpидo[3,4-b]индoл-2-иний бромид, с формулой:

обладающий выраженной антимикробной

активностью.

Верстка А. Сарсекеева Корректор Р. Шалабаев