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 Género Bordetella Prof. Aurico Sousa Fonseca Cátedra de Microbiología e Inmunología Departamento de Patología Veterinaria F.C.V.-U.C.V.

5 bordetella

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Género

BordetellaProf. Aurico Sousa Fonseca

Cátedra de Microbiología e InmunologíaDepartamento de Patología Veterinaria

F.C.V.-U.C.V.

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CLASIFICACIÓN CIENTÍFICA

Reino: BacteriaFilo: Proteobacteria

Clase: Beta ProteobacteriaOrden: BurkholderialesFamilia: Alcaligenaceae

Género: Bordetella Moreno-López 1952 Especies

B. ansorpii B. avium, B. bronchiseptica, B. hinzii, B. holmesii, B. parapertussis, B. pertussis, B. petrii, B. trematum 

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CARACTERÍSTICAS DEL GÉNERO Bordetella

• Bacterias agrupadas en un género, diferenciado en 9 especies,cuatro de las cuales son patógenos importantes en humanos y

animales: – Bordetella pertussis (especie tipo), Bordetella parapertussis,

Bordetella bronchiseptica y Bordetella avium; (Sapian; 1991)

• Todas estas especies están asociadas con infecciones de lasvías respiratorias;

 – Bordetella pertussis y Bordetella parapertussis son patógenosexclusivamente de humanos y las dos especies restantes, lo sonpara animales fundamentalmente (Hallander, Storsaeter andMollby, 1991).

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HABITAT

Comensales de las membranas mucosas del tracto respiratoriosuperior de humanos y animales.

Solo sobreviven tiempos cortos en el ambienteB. pertussis y B. parapertussis son patógenos humanos que

causan tos ferina y una forma leve de tosferina

B. Bronchiseptica: Tracto respiratorio superior de porcinos,caninos, felinos, conejos, conejillos de indias, ratas,caballos y posiblemente otros animales.

B. Avium: Tracto respiratorio de aves de corral, principalmentepavos

Las infecciones en mamíferos son transmitidas principalmentepor aerosoles pero en los pavos la propagación indirectavía agua y desechos puede ocurrir

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Diferenciación entreB. bronchyseptica y B. avium

• Bordetella avium debe ser diferenciadade Alcaligenes faecalis, el cual no espatogénico

• Ambas producen colonias pálidas nofermentadoras de lactosa enMacConkey

• Agar Smith Baskerville: Azul debromotimol

La actividad hemaglutinante unatributo poco común en las bacterias seproduce en las cepas virulentas deambas especies

Agar MacConkey

Agar Smith Baskerville

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Morfología y características diferencialesde Bordetella bronchiseptica.

• Bacilo corto, pleomórfico de 0.4- 0.5 m mde diámetro y 1.5-2 µm de longitud que

presenta formas cocoides y bacilares• Puede agruparse en parejas o cadenas pero

por lo general se presenta como bacteriasaisladas

• Móvil gracias a sus flagelos peritrícos.• No forma esporas ni produce cápsula.• Crece óptimamente en aerobiosis

 – Temperatura de 37 +/-2 °C – pH entre 7.0 y 7.2 – Medios enriquecidos con tejido o plasma.

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• Debido a la lentitud de la fijación de lasafranina utilizada en la tinción de

Gram, es característica la coloraciónpálida. – Resulta útil que la contra-coloración de

la safranina permanezca en el frotisdurante dos minutos completos

• En cultivos antiguos o en cultivos en

medios que contienen antibióticos, lascélulas son pleomórficas y puedentener filamentos filiformes y formasbacilares gruesas.

Examen microscópico

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Características de la especie Bordetellabronchiseptica.

• Agar Sangre – Pequeñas colonias grises circulares

parecidas a gotas de rocío• En Agar Mac Conkey

 – Colonias pequeñas incoloras.

• En medios líquidos – Produce turbidez uniforme, dando

un sedimento granular, pero sinformar película en la superficie.

• Cuando el cultivo envejece, alagitarse toma forma de látigo.

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Control y muerte deBordetella bronchiseptica

• Este bacilo muere en 20 minutos a

la temperatura de 55 °C lo que lohace menos resistente al calor queotros bacilos Gram negativos noesporulados.

• Es sensible a la luz, la desecación y

a los desinfectantes ordinarios ymuere por congelación (Merchantand Parker, 1973; Michel, 1982).

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CARACTERÍSTICAS DE LA ESPECIE Bordetellabronchiseptica.

• Falta de acción fermentativa sobre loscarbohidratos

• Rápida acción sobre algunos sustratoscomo la urea, la cual descompone enmenos de 4 horas a 37°C, gracias a lafuerte acción de la enzima ureasa

• Esta bacteria no produce indol•

Puede o no reducir los nitratos a nitritosen dependencia de la cepa en cuestión(Griffith, Brasky and Lang, 1997).

Citrato

Agar Urea

Indol

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Características Diferenciales del Género Bordetella. 

PRUEBAS Bordetella

 pertussis Bordetella

 parapertussis Bordetella

bronchiseptica Bordetella

avium Catalasa  +  +  +  + Oxidasa  +  -  +  + 

Crec: Agar Mac ConKey  -  +  +  + Reducción del Nitrato  -  -  +  - 

Motilidad  -  -  +  + Indol  -  -  -  - 

Citrato de Simmons  - 

Urea  -  +  + (4 h)  - Glucosa  +  -  -  - Lactosa  +  -  -  - 

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Factores de Patogenicidad

• Los factores de patogenicidad comunesentre Bordetella bronchiseptica y 

Bordetella pertussis son: – La Hemoaglutinina filamentosa (HAF) – La presencia de aglutinógenos

(fimbrias), – La enzima adenilato ciclasa, – Las hemolisinas, – La endotoxina (LPS) y la – toxina termolábil, lo cual demuestra

aún más la similitud antigénica deestas dos especies (Burns et al, 1993).

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Factores de Patogenicidad

• La infección ocurre en dos etapas: – PRIMERA ETAPA (colonización), ocurre la

activación de los genes de producción de laHemoaglutinina Filamentosa (HAF), la cual enunión con las fimbrias actúan permitiendo lacolonización de la bacteria en el hospedero

 – SEGUNDA ETAPA (daño celular) ocurre laexpresión de otros genes como los de lasendotoxinas, la citotoxina traqueal y laenzima adenilato ciclasa, los cuales son loscausantes de los daños sistémicos en el tractorespiratorio.

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PRINCIPALES FACTORES DE PATOGENICIDAD DE Bordetella bronchiseptica.MECANISMOS DE ACCIÓN

Factores de virulencia  Mecanismo de acción  Referencia 

Hemoaglutinina

Filamentosa 

Adherencia a las células epiteliales y

macrófagos (Adhesina)  Locht et al, 1993; Burns et al,

1993; Keil and Fenwick, 2000 

Fimbrias Adherencia a las células ciliadas (adhesina)  Locht et al, 1993; Burns et al,

1993; Keil and Fenwick, 2000 

Enzima adenilato ciclasa Impide la acción fagocítica (enzima

extracitoplasmática)  Locht et al, 1993; Burns et al,

1993; Keil and Fenwick, 2000 

Proteína 68 kDalton Impide la acción fagocítica (proteína de

membrana externa)  Novotny et al, 1985; Keil and

Fenwick, 2000 

Citotoxina traqueal Enzima que provoca daño celular

(ciliostasis)  Locht et al, 1993; Burns et al,

1993; Keil and Fenwick, 2000 Toxina termolábil  Produce vasoconstricción  Locht et al, 1993; Burns et al,

1993; Keil and Fenwick, 2000 Endotoxina 

Provoca pirogenicidad, mitogenicidad y

shock. Locht et al, 1993; Burns et al,

1993; Keil and Fenwick, 2000 

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Incidencia de Bordetella bronchiseptica 

• Parásito del tracto respiratorio de diversasespecies de animales. – M’Gowan en 1911 describió el hallazgo en hurón, mono,

cabra, cobayo, conejo, gato, perro y humano. – En 1943, Phillips logra cultivos puros a partir de exudados

bronquiales de cerdos.

• La prevalencia de infección ha sido especialmente altaen cerdos, perros y curieles (Winsser, 1960, Smith,Baskerwille y Bronthwell, 1982).

• Afecta otras especies como ratas, ratones, conejos y

otros (Good and May, 1971; Deeb et al, 1990).• Afecciones respiratorias en personas

inmunodeprimidas y convalecientes y humanos quehan mantenido un contacto estrecho con animalesenfermos

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PROCEDIMIENTOS DIAGNÓSTICOS

• Las muestras para los exámenes de laboratorioincluyen hisopados nasales, aspirados traqueales yexudados

• Bordetella se cultiva sobre agar sangre y agarMacConkey o en un medio selectivo

• Las placas se incuban a 37°C por 24 a 48 horas• Criterios de identificación de los aislados

 – Aspectos de las colonias en agar sangre y agar selectivo – Crecimiento sobre el MacConkey –

Perfil bioquímico – Prueba de hemaglutinación en lamina correlaciona con la

virulencia del aislado

• Las pruebas serológicas desarrolladas poseen unvalor diagnóstico limitado

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Cultivos de B. bronchiseptica 

• La infección se diagnostica mejor con

muestras de hisopos orofaríngeos ocon muestras de secreción nasal.• Las muestras deberían obtenerse

con hisopos de alginato de calcioestérilizados y colocados en un

medio de transporte de carbón antesde colocarse sobre un medioselectivo como Agar Bordet-Gengou(BG) o Agar Smith Baskerville (SB)

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Diferenciación de las especies de Bordetella y Alcaligenes faecalis

CARACTERÍSTICA B. bronchiseptica B. avium Alcaligenes faecalis

Característica colonial

Agar sangre ovina Hemólisis No hemólisis No hemólisis

Agar MacConkey Rosado pálido Rosado pálido Pálido

Medio selectivo

Smith and Baskerville

Pequeña, azul Pequeña, azul verdosa

Producción Oxidasa + + +

Producción Catalasa + + +

Producción Ureasa + - -

Utilización de carbono exclusivamente

Citrato + + +

Malonato - - +

Reducción de Nitratos + - -

Motilidad + + +

Actividad de

hemaglutinación

cepas virulentas

Aglutinación de los

eritrocitos ovinos y

bovinos

Aglutinación de los

eritrocitos de los

conejillos de indias

-

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INFECCIONES CLÍNICAS

• Los signos clinicos asociados con Bordetella se encuentran usualmente asociados a

infecciones del tracto respiratorio superior.• Los animales jóvenes son más susceptibles a

las infecciones y en los adultos son leves osubclínicas.

• Factores predisponentes contribuyen a losbrotes de campo de la enfermedad: – Tales como el stress o infecciones

concurrentes.

• Aunque la morbilidad puede ser alta, lamortalidad es baja

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ESPECIES DE Bordetella CON IMPORTANCIA VETERINARIA Y CONDICIONESDE LA ENFERMEDAD CON LA QUE ESTÁN ASOCIADAS.

B. bronchiseptica Cerdos

Caninos

Gatos

CaballosConejos

laboratorio

Roedores

Rinitis atrófica

Traqueo-bronquitis infecciosa canina

Neumonía

Infecciones respiratoriasInfecciones del tracto respiratorio superior

Bronconeumonía

B. avium Pavos Coriza

B. parapertussis Corderos neumonía

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PATÓGENOS MICROBIANOS IMPLICADOS EN LA

TRAQUEOBRONQUITIS INFECCIOSA CANINA

(TOS DE LAS PERRERAS)

Bordetella bronchiseptica Adenovirus canino 2

Parainfluenzavirus canino 2

Virus del moquillo canino

Adenovirus canino 1

Herpesvirus canino 1

Reovirus 1,2 y 3

Micoplasma spp

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