58_Creatinina_ESP.pdf

10.007.00

BIOTÉCNICA IND.COM. LTDA. Rua Ignácio Alvarenga nº 96, Vila Verônica, Varginha MG BRASIL CEP: 37026-470 Tel/fax: +55 35 3214 4646 www.biotecnica.ind.br

Revisión: 01 - 08/2011

CREATININA

FINALIDAD Kit destinado a la determinación de la creatinina presente en el suero, plasma y orina. PRINCÍPIO DEL MÉTODO La creatinina presente en la muestra reacciona con el picrato en medio alcalino originando un complejo de color rojo-amarillento. Se mide la velocidad de formación de ese complejo utilizando una cinética de 2 puntos durante los períodos iniciales de la reacción. COMPOSICIÓN DE LOS REACTIVOS

Ácido pícrico 18 mmol/L.

Hidróxido sódico 1,8 mmol/L, Fosfato de sodio 20 mmol/L.

Azida sódica 0,095%; en concentración de Creatinina equivalente a 2 mg/dL.

La concentración obtenida para este Patrón fue determinada usando el Patrón Primario Internacional NIST 914a. CONDICIONES DE ALMACENAMIENTO Y ESTABILIDAD • Estabilidad: Estable hasta la fecha de validez del kit que está impresa en el

rótulo del envase. • No usar reactivos cuya fecha de validez haya expirado. • Conservar de 15 a 30 ºC. • Los reactivos deben permanecer fuera de la temperatura especificada sólo el

tiempo necesario para la realización de los tests. • No congelar y mantener al abrigo de la luz.

MATERIAL NECESARIO NO PROVISTO � Espectrofotómetro o fotómetro para lectura en 500 nm (490 - 510) con cubeta

termostatizada. � Baño de agua, termostatizado a 37 ºC. � Pipetas de vidrio y/o automáticas. � Reloj o Cronómetro. � Tubos de ensayo.

CUIDADOS Y PRECAUCIONES • El kit se destina sólo para uso diagnóstico in vitro. � Las muestras a ser analizadas deben ser tratadas como material

potencialmente infectivo. • Utilizar los EPI’s de acuerdo con las Buenas Prácticas de Laboratorio Clínico. • Desechar las sobras de las reacciones de acuerdo con las Buenas Prácticas

de Laboratorio Clínico (BPLC) y Programa de Gestión de Residuos de Servicio de Salud (PGRSS).

• Las informaciones de Descarte, Seguridad y Primeros Socorros están descritas en la Ficha Individual de Seguridad de Productos Químicos (FISPQ) de este producto, disponible en www.biotecnica.ind.br o por el teléfono +55 (35)-3214-4646.

• No mezclar reactivos de lotes diferentes. • No cambiar las tapas de los frascos de los reactivos, a fin de evitar

contaminación cruzada. • No usar el reactivo cuando éste presente característica visual en desacuerdo

con el especificado en la FISPQ del producto. • Evitar dejar los reactivos fuera de las condiciones de almacenamiento

especificadas, cuando los mismos no estén en uso. • Usar pipetas de vidrio y punteras desechables específicas para cada muestra,

control, patrón/calibrador y reactivo. • El nivel de agua del baño-maría debe ser superior al de los tubos de ensayo

que contienen las reacciones.

MUESTRA - PREPARO Y ESTABILIDAD • Suero y plasma (heparina, citrato, EDTA, oxalato y fluoruro): La creatinina es estable por 4 días de 2 a 8 ºC.

• Orina: Utilizar muestra cogida en el período de 24 horas, no habiendo necesidad de añadir conservantes.

- Mezclar cuidadosamente la orina, medir el volumen y separar una muestra alrededor de 20 mL. - Centrifugar por 10 minutos a 3000 rpm. - Diluir una alícuota de la orina centrifugada en la proporción de 1:50 con agua purificada (cuando necesario, la dilución de la orina deberá ser alterada para obtenerse resultado dentro del intervalo operacional del método).

La creatinina es estable por 4 días de 2 a 8 ºC. PROCEDIMIENTO TÉCNICO A) PREPARACIÓN DE LOS REACTIVOS Reactivo de trabajo Mezclar en la proporción: 1 parte de Reactivo 1 + 1 parte del Reactivo 2. Mezclar suavemente.

La estabilidad del reactivo de trabajo, es de 03 se manas, conservado en frasco plástico tapado y protegido de la luz en heladera a 2-8°C. B) PROCEDIMIENTO 1. Precalentar el Reactivo durante tres minutos a 37 ºC. 2. Pipetar en un tubo de ensayo:

Volumen Reactivo Trabajo 1,0 mL Muestra o Patrón 100 µL

3. Mezclar cuidadosamente e inserir en el puerta-cubetas termostatizado. 4. Medir la absorbancia a 500 nm (490 - 510) a los 30 seg. (A1) y a los 90 seg. (A2). PROCEDIMIENTO DE CALIBRACIÓN/CÁLCULOS Cálculo para Suero:

Creatinina (mg/dL) = (A2 - A1 de la Muestra) x Concentración Patrón (mg/dL) (A2 - A1 del Patrón)

Ejemplo:

Concentración del Patrón = 2,0 mg/dL Absorbancia A1 de la Muestra = 0,137 Absorbancia A2 de la Muestra = 0,222 Absorbancia A1 del Patrón = 0,222 Absorbancia A2 del Patrón = 0,409

Creatinina (mg/dL) = (0,222 - 0,137) x 2 = 0,91 mg/dL (0,409 - 0,222)

Con Factor de Calibración:

Factor de Calibración = Concentración Patrón (mg/dL) (A2 - A1 del Patrón)

Creatinina (mg/dL) = (A2 - A1 de la Muestra) x Factor de Calibración

Ejemplo: Factor de Calibración = 2 = 10,7 (0,409 - 0,222)

Creatinina (mg/dL) = (0,222 - 0,137) x 10,7 = 0,91 mg/dL

Cálculo para Orina:

Orina (mg/24 horas) = *mg/dL x volumen urinario (em mL) 100

* valor corregido por el factor de dilución.

Creatinina en mg/kg peso/24 horas:

Orina mg/kg peso /24 horas = Creatinina orina mg/ 24 horas Peso (kg)

Depuración de la Creatinina Endógena:

Depuración (mL/minuto) = U x VM S Donde: U = creatinina en la orina (mg/dL) - S = creatinina en el suero (mg/dL) VM = volumen minuto (Vol. Urinario de 24 h, en mL, dividido por 1440 minutos) - 1440 minutos equivale a la cantidad de minutos en 24 horas.

Atención: La depuración deberá ser corregida para la superficie corporal del paciente.

Cálculo de la Superficie Corporal sin utilización del Nomograma:

SC = P0,425 x A0,725 x 0,007184

Donde: SC = superficie corporal en m2 P = peso en Kg A = altura en cm

Determinación del Clearance: Clearance (mL/min/1,73 m2) = Depuración(mL/min) x 1,73 Superficie corporal Ejemplo: Creatinina en la orina (mg/dL) = 120 Volumen de 24 horas = 1800 mL Creatinina en el suero (mg/dL) = 0,91 Volumen/minuto = 1800/1440 = 1,25 Peso = 70 kg Altura = 170 cm Superficie corporal = 1,81 m2

Depuración (mL/min) = 120 x 1,25 = 164,83 mL/min. 0,91 Depuración (mL/min/1,73 m2) = 164,83 x 1,73 = 157,5 mL/min 1,81

A Biotécnica deja disponible en su sitio una planil la para cálculo del Clearance. Acese: www.biotecnicaltda.ind.br SENSIBILIDAD Y LINEALIDAD - Sensibilidad Metodológica: Calculado: 0,038 mg/dL Experimental: 0,041 mg/dL

- Linealidad: 12 mg/dL. Para valores superiores, diluir la muestra con NaCl 150 mM (0,9%), realizar nueva dosificación y multiplicar el resultado obtenido por el factor de dilución. LIMITACIONES DE LA TÉCNICA • Hemólisis, Ictericia y Lipemia - Hemoglobina > 180 mg/dL - Bilirrubina > 38 mg/dL - Triglicéridos > 3500mg/dL CONTROL DE LA CALIDAD Todo laboratorio clínico debe mantener un programa de control interno de la calidad que defina claramente los objetivos, procedimientos, normas y criterios para límites de tolerancia, acciones correctivas y registro de las actividades. Al mismo tiempo, debe ser mantenido un sistema definido para monitorear la variabilidad analítica que

ocurre en todo sistema de medición. El uso de controles para avaluar la imprecisión de las determinaciones debe ser práctica rutinera en el laboratorio. Se sugiere usar un control en la faja de referencia o en el nivel de decisión y otro control con valor en otra faja de significado clínico. La aplicación del sistema de reglas múltiplas de Westgard para avaluación del estado de control también es recomendable. El laboratorio debe participar de programas de control externo de calidad a fin de verificar la exactitud de sus resultados. Se tiene como ejemplo los programas ofrecidos por la SBAC (Sociedade Brasileira de Análises Clínicas) y SBPC (Sociedade Brasileira de Patologia Clínica). Para Calibración y Control Interno de Calidad de Laboratorio se recomienda el uso del suero calibrador y de los sueros controles abajo:

Suero Calibrador - Autocal H Suero Control Normal - Quantinorm Suero Control Patológico - Quantialt

13.002.00 13.003.00 13.004.00

VALORES DE REFERENCIA HOMBRES MUJERES mg/dL µmol/L mg/dL µmol/L

Suero o Plasma 0,6 - 1,2 53 - 97 0,5 - 1,0 44 - 80

Orina mg/24 horas

1000 - 2000 800 - 1800

Creatinina en la Orina

(mg/Kg/24horas)

Niños 2 - 3 anos 6 - 22 Clearance (mL/minuto/1,73 m2) Niños mayores de 3 anos 12 - 30 NIÑOS 70 a 140

Adultos - Hombres 21 - 26 Adulto HOMBRE 98 a 160 Adultos - Mujeres 16 - 22 Adulto MUJER 95 a 150

Estos valores son únicamente para orientación, siendo recomendable que cada laboratorio establezca su propio intervalo de referencia. Conversión para Unidad del Sistema Internacional (SI): µmol/L Creatinina (mg/dL) x 88,4 = Creatinina (µmol/L) CARACTERÍSTICAS DE DESEMPEÑO Repetibilidad La realización de 20 determinaciones de una misma muestra en un mismo día, con valores dentro de la faja de referencia mostró un Coeficiente de Variación de 2,56%.

Reproducibilidad

La realización de 10 determinaciones de una misma muestra, analizada en días diferentes mostró un Coeficiente de Variación de 2,92%.

Especificidad Analítica La comparación con un método similar, ya validado, mostró un coeficiente de correlación, r, igual a 0,999 a partir de muestras aleatorias obtenidas de pacientes de ambulatorio. La ecuación de regresión obtenida fue Y = 1,0111 X - 0,0574. SIGNIFICACIÓN CLÍNICA CREATININA SÉRICA Se trata de un producto metabólico formado por la descarboxilación de la creatina-fosfato en el músculo, teniendo, por tanto, una relación directa con la masa muscular. Hombres y atletas producen mayores cantidades de creatinina que niños, ancianos y mujeres en general. La disminución de la masa muscular en el anciano debe ser considerado en la interpretación de los resultados. La creatinina no es afectada normalmente por la dieta, pero, si cantidades excesivas de carnes son consumidas, los niveles séricos podrán sufrir aumento por un período de 48 horas. Con la reducción del flujo sanguíneo renal, la creatinina se eleva más lentamente que la urea. La concentración de creatinina solo se torna anormal cuando aproximadamente mitad o más de nefronas hayan sido comprometidos.

Niveles Aumentados Niveles Disminuidos Disminución del flujo sanguíneo renal: insuficiencia cardiaca congestiva, choque, deshidratación

Baja estatura

Insuficiencia renal por decrecimos de la filtración glomerular

Desnutrición

Obstrucción del trato urinario Disminución de la masa muscular

Intoxicación por metanol Enfermedad hepática severa

Terapia con metildopa, trimetoprim, hidantoína, cefalosporinas y ácido ascórbico

Embarazo

CREATININA URINARIA Es filtrada libremente por los glomérulos sólo siendo reabsorbida en ciertas condiciones clínicas, como: diabetes melittus, insuficiencia cardiaca congestiva etc. La secreción tubular de la creatinina puede ser inhibida por drogas como: cimetidina, trimetoprim y probenecide. Ejercicios severos y ingestión de altas cantidades de carne pueden causar aumentos significativos en la excreción de creatinina, mientras la disminución de la masa muscular en los ancianos provoca disminución. La determinación de la creatinina urinaria en mg/kg de peso es un parámetro indicativo del volumen correcto de la orina cogida en el período de 24 horas.

Niveles Aumentados Niveles Disminuidos Adenoma hipofisario Diabetes mellitos Enfermedades infecciosas Encefalitis Hipotiroidismo

Distrofia muscular Enfermedad muscular inflamatoria Enfermedad con disminución de la masa muscular Enfermedad renal avanzada Hipertiroidismo - Anemia - leucemia

OBSERVACIONES 1. La limpieza y secado adecuados del material usado son factores fundamentales para la estabilidad de los reactivos y obtención de resultados correctos. El agua utilizada en la limpieza del material debe ser reciente y exenta de agentes contaminantes. La limpieza de la vidriaría debe ser hecha con detergente neutro. El enjagüe debe ser exhaustivo siendo los últimos con agua destilada o deionizada.

2. El agua utilizada en el laboratorio debe tener la calidad adecuada a cada

aplicación. Así, para preparar reactivos y usar en las mediciones, el agua debe ser del Tipo II, con resistividad > 1 megaohms o conductividad < 1 micro siemens y concentración de silicatos < 0,1 mg/L. Para el enjagüe inicial de la vidriaría, el agua puede ser del Tipo III, con resistividad > 0,1 megahoms o conductividad < 10 micro siemens. En el enjagüe final, utilizar agua del Tipo II. Columna deionizadora con su capacidad saturada libera agua alcalina, varios iones y también substancias con gran poder de oxidación o reducción que deterioran los reactivos en pocos días o mismo horas, alterando de manera imprevisible los resultados. Así, es fundamental establecer un programa de control de la calidad del agua. PRESENTACIONES

Presentación 1

R1 R2

1 x 50 mL 1 x 50 mL

100 tests de 1 mL

STD 1 x 4 mL 40 cal de 100 µL

Presentación 2

R1 R2

1 x 250 mL 1 x 250 mL

500 tests de 1 mL

STD 1 x 4 mL 40 cal de 100 µL

GARANTIA DE CALIDAD Antes de ser liberados para el consumo, todos los reactivos Biotécnica son testados por el Departamento de Control de Calidad. La calidad de los reactivos es asegurada hasta la fecha de validez mencionada en el envase de presentación, desde que almacenados y transportados en las condiciones especificadas. Los datos relativos al Control de Calidad de este producto (lote impreso en las etiquetas de los frascos de reactivos) pueden ser solicitados en: [email protected] AUTOMACIÓN Este procedimiento es automatizado en la mayoría de los analizadores. Los protocolos están disponibles en www.biotecnica.ind.br SAC - SERVICIO DE ASISTENCIA AL CLIENTE Si hay dudas en la utilización del kit entrar en contacto con la Biotécnica a través del teléfono +55 35 3214 4646 o por el e-mail [email protected] REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS • JAFFÉ, M. Ueber den Niederschlag, welchen Pikrinsäure in normalem Harn

erzeugt und über eine neue reaktion des kreatinins. Z. Physiol. Chem. v.10, p.391-400, 1886.

• FABINY, D. L.; ERTINGHAUSEN, G. Automated reaction-rate method for determination of serum creatinine with the CentrifiChem. Clin. Chem. v.17, p.696-700, 1971.

• BARTELS, H.; BÖHMER, M. Micro-determination of creatinine. Clin. Chim. Acta. v.32, p.81-85, 1971.

• YOUNG, D.S. Effects of drugs on clinical laboratory tests - vol. 2 , 5 ed. Washington DC: AACC Press, 2000.

• WESTGARD, J. O. et al. A multi-rule shewhart chart quality control in clinical chemistry. Clin. Chem. v.27 p.493-501, 1981.

RESPONSABILIDAD TÉCNICA Dr. Gilson Sério Pizzo - CRF MG - 5310 MS 80027310193

TABLA DE SÍMBOLOS INTERNACIONALES

SÍMBOLO IDIOMA DEFINICIÓN

Portugués English Español

Consultar Instruções de Uso Consult instructions for use Consultar la metódica


Código Code Código


Número de lote Batch code Denominación de lote


Para uso diagnóstico in vitro For in vitro diagnostic medical device Para uso en diagnostico in vitro


Conteúdo do kit Contents of kit Contenido del estuche


Conteúdo suficiente para <n> testes Contains sufficient for <n> tests Contenido suficiente para <n> ensayos


Calibrador Calibrator Calibrador


Controle Control Control


Padrão Standard Patrón


Reagente e seu número/abreviação Reagent and its number/abbreviation Reactivo y su número/abreviación


Limite de temperatura Temperature limitation Temperatura límite


Data limite de utilização (último dia do mês) Use by (last day of the month) Estable hasta (ultimo día del mes)


Fabricado por Manufactured by Elaborado por


Risco biológico Biological risk Riesgo biológico


Corrosivo Corrosive Corrosivo


Tóxico Toxic Tóxico


Inflamável Flammable Inflamable


Nocivo / Irritante Harmful / Irritant Nocivo / Irritante


Material reciclável Recyclable material Material reciclable


Não descartar diretamente no ambiente Dispose properly Desechar adecuadamente

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