Upload
al-khansa
View
217
Download
0
Embed Size (px)
Citation preview
8/10/2019 Aktivitas Biokimia Dari Mikroorganisme i
1/18
BIO 30271 PTA
PRAKTIKUM MIKROBIOLOGI 2011/2012
Dra. SITARESMI, M.Sc. FMIPA UI
Drs. IMAN SANTOSO, M.Ph!.
LAPORAN PRAKTIKUM MIKROBIOLOGI
AKTI"ITAS BIOKIMIA DARI MIKROORGANISME I
NAMA # MU$AMAD K$AERULLO$
NPM # 0%0&&32%'3
KELOMPOK # III (TIGA) B
TANGGAL PRAKTIKUM # 30 NO"EMBER 2011
ASISTEN # FAT$IA NO"A
SA"ITR* PANDU +IA*A
UNI"ERSITAS INDONESIA
FAKULTAS ,MATEMATIKA DAN ILMU PENGETA$UAN ALAM
DEPARTEMEN BIOLOGI
DEPOK
2011
8/10/2019 Aktivitas Biokimia Dari Mikroorganisme i
2/18
1
AKTI"ITAS BIOKIMIA DARI MIKROORGANISME I
I. TUUAN
1. Mengetahui dan memahami perbedaan aktivitas biokimi antar
mikroorganisme.
2. Mempelajari hubungan aktivitas mikroorganisme dengan enzim.
3. Mengetahui dan memahami mikroorganisme melalui sifat biokimi.
II. TEORI
Mikroorganisme, seperti juga mahluk hidup lainnya, memerlukan energi
untuk kelangsungan hidupnya. Energi tersebut dapat diperoleh dari lingkungan
sekitarnya dalam bentuk senyawa kimia tertentu yang dapat diurai. emampuan
mikroorganisme untuk mengurai senyawa tertentu dan mensintesis senyawa yang
baru merupakan sifat khas masing!masing mikroorganisme. "emua aktivitas
metabolisme tersebut berlangsung dengan bantuan enzim tertentu. #asil reaksi
metabolisme tersebut hampir semuanya dapat diamati, bahkan dapat diukur
kekuatannya. $eaksi!reaksi metabolisme tersebut berbeda untuk setiap
mikroorganisme, sehingga hal tersebut merupakan sifat yang sangat penting untuk
mengidentifikasi mikroorganisme %&andjar dkk. 1''2( )'*.
eseluruhan dari rekasi kimia dalam mikroorganisme didefinisikan sebagai
metabolisme selular, dan transformasi biokimia yang terjadi di dalam dan luar sel
dipengaruhi oleh katalis biologikal yang disebut enzim %+appuino - "herman
1''( 131*. Enzim merupakan unit fungsional dari metabolisme sel. erja enzim
menurut aturan tertentu yang teratur. Enzim mengkatalisis reaksi penyimpanan
dan mengubah energi kimia. "pesifikasi enzim amat tinggi terhadap substrat dan
enzim memperepat reaksi kimia spesifik tanpa pembentukan produk sampingan %
/ehninger 1''0( 230*.
Enzim ekstraseluler atau eksoenzim adalah enzim yang dihasilkan oleh
bakteri dan disekresikan ke lingkungan %enzim yang aktivitasnya di luar sel*.
"ebagian besar substansi dengan berat molekul yang besar tidak dapat melewati
8/10/2019 Aktivitas Biokimia Dari Mikroorganisme i
3/18
2
membran sel. leh karena itu, substansi seperti polisakarida substansi seperti
polisakarida, lipid dan protein harus didegradasi terlebih dahulu menjadi bahan
dengan berat molekul yang rendah sebelum ditransportasikan ke dalam sel,
Eksoenzim terutama enzim hidrolitik dapat mereduksi bahan dengan molekul
tinggi ke dalam blok!blok pembangunnya dengan penambahan air pada molekul.
Eksoenzim sangat berguna untuk hidrolisis pati, hidrolisis lipid, hidrolisis kasein
dan hidrolisis gelatin %+appuino - "herman 1''( 132*.
Endoenzim berfungsi di dalam sel dan berperan dalam sintesis
protoplasma baru yang diperlukan dan produksi energi selular dari asimilasi
bahan. emampuan sel untuk bekerja pada substrat bernutrisi menembus
membran sel mengindikasikan adanya eksoenzim yang dapat merubah substrat
yang spesifik seara kimiawi menjadi bahan yang penting. erubahan tersebut
diperlukan untuk ketahanan dan fungsi sel, dan merupakan dasar dari metabolisme
selular. Endoenzim berperan dalam fermentasi karbohidrat, reaksi litmus susu,
produksi #2", reduksi nitrat, reaksi katalase, tes urease, tes oksidase, tes M4+
dan tes triple sugar-iron%+appuino - "herman 1''( 132*.
A. $-r!ss P!saar-a
olisakarida adalah karbohidrat yang memilki berat molekul tinggi,
polimer panjang yang terdiri dari ratusan atau ribuan unit monomer gula, yang
satu dengan lainnya digabungkan dengan ikatan glikosida. &lukosa adalah
monosakarida yang paling banyak digunakan untuk pembentukan polisakarida
yaitu pada komponen pati dan selulosa %5rok - Madigan 1''6( )7*.
arbohidrase mengkatalis hidrolisis karbohidrat untuk membentuk gula
yang lebih sederhana dan lebih dapat larut. #idrolisa dari pati pada mulanya akanmenghasilkan polimer rantai pendek yang disebut dekstrin, kemudian disakarida
maltosa dan terakhir menghasilkan glukosa. Enzim yang paling berguna dalam
sakarifikasi pati adalah !amilase, !amilase, glukoamilase, glukosa isomerase,
pululanase dan isomilase. !amilase adalah enzim ekstraselular yang
menghidrolisis ikatan !1,) glikosida. $eaksi hidrolisis pada pati adalah sebagai
berikut(
!amilase 8 pati 9 dekstrin 8 !maltosa
8/10/2019 Aktivitas Biokimia Dari Mikroorganisme i
4/18
3
!amilase 8 pati 9 maltosa
%"alle 1'6( 267*.
B. $-r!ss Pr
rotein merupakan makromolekul yang paling berlimpah di dalam sel dan
menyusun lebih dari setengah berat kering pada hampir semua organisme. rotein
terdiri dari rantai polipeptida panjang, yang disusun oleh 1::!!1::: unit asam
amino yang disatukan oleh ikatan peptida. rotein sederhana hanya menghasilkan
asam amino dengan hidrolisis; protein konyugasi mengandung beberapa
komponen tambahan lain, suatu ion logam atau gugus prostetik organik.
5eberapa protein berbentuk serabut dan bersifat tidak larut, yang lain berbentuk
globular dengan rantai peptida yang berlipat!lipat %/ehninger 1''0( 1:*.
#idrolisis protein didefinisikan sebagai suatu aksi proteinase pada protein,
yang menghasilkan kerusakan molekul ke dalam fraksi yang tersebar. roteinase
atau protease menghidrolisis protein menjadi asam amino dan peptida. roteinase
memiliki kemampuan untuk memisahkan ikatan #= dengan
penambahan air, dan menghasilkan pengeluaran karboksil bebas %!+#* dan
kelompok amino bebas %!>#2*. roteinase adalah enzim ekstraselular. ?ungsinya
adalah mengubah protein yang padat menjadi peptida yang tersebar dan dipeptida
yang dapat memasuki sel mikroorganisme. roteinase menyerang protein dan
peptida dengan berbagai maam kondisi %"alle 1'6( 303*.
asein, protein susu yang paling banyak, adalah suatu makromolekul yang
tersusun atas subunit asam amino yang saling berikatan dan dihubungkan oleh
ikatan peptida, +=>#. asein pada peptonisasi susu dihidrolisisis oleh enzim
renin menjadi parakasein dan pepton!pepton terlarut. eptonisasi adalah
perubahan dari bentuk tidak larut menjadi bentuk larut pada bermaam!maam
protein, dan menunjukkan adanya pemeahan protein menjadi pepton %@utono dkk.
1'63( 12:*.
. Fr4as Kar5h-ra
rganisme menggunakan karbohidrat seara berbeda, tergantung dari
enzim yang dimilikinya. 5eberapa organisme dapat menfermentasikan gula
8/10/2019 Aktivitas Biokimia Dari Mikroorganisme i
5/18
)
seperti glukosa seara anaerob, dan mikroorganisme lainnya menggunakannya
pada jalur aerob %+appuino - "herman 1''( 1)'*.
?ermentasi dapat didefinisikan sebagai oksidasi tidak lengkap yang
dihasilkan oleh mikroorganisme dalam suatu senyawa yang kebanyakan
merupakan karbohidrat. ?ermentasi dapat dibagi dalam dua tahap(
1. emisahan rantai glukosa menjadi asam piruvat dengan menghilangkan
pasangan atom hidrogen.
2. $eduksi asam piruvat atau turunnya oleh atom hidrogen dari tahap pertama.
%"alle 1'6( 3*.
"ubstrat seperti karbohidrat dan alkohol pada proses fermentasi akan
melakukan disimilasi anaerob dan menghasilkan asam organik, ontohnya( asam
laktat, asam format atau asam asetat, dengan disertai gas seperti hidrogen atau
karbondioksida. Anaerob fakultatif biasanya dinamakan fermenter pada
karbohidrat. ?ermentasi dapat digambarkan dengan degradasi glukosa dengan
menggunakan ara Embden!Meyerhof, yang juga dikenal dengan jalur glikolitik
%+appuino - "herman 1''( 1)'*.
Beteksi fermentasi karbohidrat selalu melalui reaksi asam yang dapat
ditunjukkan dengan indikator yang dimasukkan dalam medium. roduksi gas
dapat ditunjukkan dengan menggunakan tabung yang diletakkan dalam posisi
terbalik dalam medium %"alle 1'6( 37)*.
D. Pr-6s $2S
#2" diproduksi oleh beberapa jenis bakteri melalui pemeahan asam
amino yang mengandung unsur belerang %"* seperti sistein dan metionin. #2"
dapat juga diproduksi melalui reduksi senyawa!senyawa belerang anorganik,misalnya( tiosulfat, sulfit, atau sulfat. #2" yang terjadi dapat diamati dengan
menambahkan garam!garam logam berat ke dalam medium. #2" akan bereaksi
dengan senyawa!senyawa tersebut membentuk logam sulfida berwarna hitam
%&andjar dkk.1''2( 01*.
roduksi #2" oleh beberapa mikroorganisme dapat terjadi melalui dua
jalur, yaitu(
8/10/2019 Aktivitas Biokimia Dari Mikroorganisme i
6/18
0
1. &as #2" diproduksi dengan reduksi %hidrogenasi* sulfur organik yang terdapat
pada asam amino sistein, yang terdapat komponen!komponen pepton di dalam
medium. epton tersebut didegradasi oleh enzim mikroba terhadap asam
amino, termasuk asam amino sistein yang mengandung belerang. Asam
amino yang didalamnya terdapat sistein desulfurase akan kehilangan atom
sulfur, dan kemudian direduksi dengan penambahan hidrogen dari air dan
membentuk gas hidrogen sulfida.
2. &as #2" juga dapat diproduksi dengan reduksi senyawa sulfur anorganik
seperti tiosulfat %"23C*, sulfat %")
C* dan sulfit %"3C*. Medium berisi sodium
tiosulfat dan beberapa mikroorganisme dapat mereduksi sulfit dengan
pelepasan hidrogen sulfida. Atom sulfur bertindak sebagai aseptor hidrogen
selama oksidasi bahan anorganik seperti reaksi berikut(
3"23C 8 )#8e thiosulfat reduktase 2"3
!8 2#2"
Diosulfat "ulfit gas #2"
%+appuino - "herman 1''( 1'*.
E. Pcara G!a
&elatin merupakan suatu jenis protein yang tidak mengandung triptofan
dan hanya sedikit mengandung asam!asam amino penting lain. enairan gelatin
oleh mikroorganisme dapat terjadi dengan adanya enzim gelatinase yang bersifat
proteolitik %&andjar dkk.1''2( 02*.
alaupun nilai gelatin sebagai sumber nutrisi masih dipertanyakan, gelatin
sangat berguna di dalam mengidentifikasi spesies bakteri. &elatin adalah suatu
protein yang diproduksi dari hidrolisis kolagen, komponen utama dalam jaringan
penghubung dan otot manusia dan hewan lainnya. ada temperatur di bawah20+, gelatin bersifat padat dan membentuk gel, sedangkan pada temperatur di
atas 20+, gelatin bersifat air %+appuino - "herman 1''( 1)0*.
enairan gelatin oleh bakteri dilakukan oleh enzim proteolitik yang
dikenal sebagai gelatinase. Adanya gelatinase dapat dilihat dengan memasukkan
kultur ke dalam lemari pendingin. Apabila gelatin tetap air, menunjukkan bahwa
mikroorganisme tersebut mensekresi gelatinase ke dalam medium %"alle 1'6(
30)*.
8/10/2019 Aktivitas Biokimia Dari Mikroorganisme i
7/18
F. U Kaa!as
etika melakukan respirasi aerob, mikroorganisme menghasilkan hidrogen
peroksida dan beberapa superoksida toksik. Akumulasi substansi itu dapat
menimbulkan kematian pada organisme jika substansi itu tidak didegradasi seara
enzimatis. "ubstansi tersebut diproduksi ketika organisme aerob, anaerob
fakultatif dan mikroaerofil menggunakan jalur respirastori aerob, yang
membutuhkan oksigen bebas sebagai aseptor elektron terakhir, selama degradasi
karbohidrat untuk menghasilkan energi. rganisme yang dapat memproduksi
katalase atau peroksidase dapat mendegradasi hidrogen peroksida seara epat,
reaksinya sebagai berikut(
2 #22katalase 2 #2 8 2
eroksidase
#idrogen peroksida Air ksigen bebas
%+appuino - "herman 1''( 176*.
"uperoksida dismutase adalah enzim yang bertanggung jawab untuk
degradasi superoksida toksik pada organisme aerob katalase negatif.
etidakmampuan mikroorganisme untuk mensintesis katalase, peroksidase atau
superoksida dismutase dapat menjelaskan bahwa oksigen beraun untuk
mikroorganisme tersebut. leh karena enzim tidak ada, konsentrasi #22yang
bersifat toksik tidak dapat didegradasi ketika organisme itu ditumbuhkan pada
kondisi yang ada oksigennya. roduksi katalase dapat ditentukan dengan
penambahan substrat #22pada kultur trypticase soy agar. @ika terdapat katalase,
reaksi kimia yang terjadi diindikasikan dengan adanya gelembung gas oksigen
bebas %+appuino - "herman 1''( 176*.
G. U Os-as
Enzim oksidase memiliki peranan yang penting dalam proses sistem
transport elektron selama respirasi aerob. "itokrom oksidase mengkatalis oksidasi
sitokrom oleh molekul oksigen %2*, sebagai hasil dari pembentukan #2 atau
#22. 5akteri aerob, juga anaerob fakultatif dan mikroaerofil terlibat dalam
aktivitas oksidasi. Des oksidasi berguna di dalam diferensiasi pada kelompok
8/10/2019 Aktivitas Biokimia Dari Mikroorganisme i
8/18
6
NeisseriadanPseudomonas, yang bersifat oksidasi positif dan Enterobateriaeae
yang bersifat oksidasi negatif %+appuino - "herman 1''( 1'1*.
emampuan bakteri untuk menghasilkan sitokrom oksidase dapat
ditentukan dengan penambahan reagen tetrametil-p-penilendiamin dihidroklorida
pada koloni yang ditambahkan pada awan petri. $eagen warna merah muda
tersebut bertindak sebagai substrat buatan, yang memberikan elektron dan
teroksidasi menjadi senyawa berwarna hitam dengan keberadaan oksidase dan
oksigen bebas %+appuino - "herman 1''( 1'1*.
III. $ASIL PENGAMATAN
Dabel pengamatan dapat dilihat di lampiran.
I". PEMBA$ASAN
A. $-r!ss P!saar-a
erobaan hidrolisis polisakarida menggunakan mediumstarch agaruntuk
mengamati aktivitas enzim amilase. Medium tersebut tersusun atas nutrien agar
yang diberi suplemen pati, yang bekerja sebagai substrat polisakarida. 5akteri
yang diinokulasikan pada perobaan adalahEscherichia colidanBacillus subtilis.
Fji amilase dilakukan dengan meneteskan larutan iodin ke dalam medium
yang berisistarch agar. Fji tersebut bertujuan untuk membedakan bakteri yang
memberikan reaksi positif terhadap hidrolisis polisakarida. $eaksi positif
tersebut ditandai dengan terbentuknya zona bening disekitar biakan. #al tersebut
disebabkan pati pada medium dapat dihidrolisis oleh bakteri yang menghasilkan
enzim amilase %+appuino - "herman 1''( 13)*. enguraian polisakarida oleh
enzim amilase akan menghasilkan produk akhir monosakarida, yaitu glukosa.
&lukosa merupakan monomer yang mudah diserap dan dapat melewati dinding
sel %elzar dkk.1'07( 1:2*.
#asil pengamatan setelah 2) jam menunjukkan bahwa hanyaB.subtilis
yang dapat mendegradasi pati. >amun, pada pengamatan )7 jam menunjukkan
bahwa baik biakanE. coli maupun biakanB. subtilisdapat mendegradasi pati.
#al tersebut dapat dibuktikan dengan terbentuknya zona bening di sekitar biakan.
8/10/2019 Aktivitas Biokimia Dari Mikroorganisme i
9/18
7
Derbentuknya zona bening di sekitar kedua biakan disebabkan karena kedua
bakteri tersebut menghasilkan enzim amilase yang dapat menghidrolisis
polisakarida. >amun, Gona bening yang terbentuk di sekitarE. colitidak selebar
zona beninya di sekitarB. Subtilis. #al tersebut mengindikasikan bahwa enzim
pemisah polisakarida pada biakanE. oli lebih sedikit sehingga hanya sedikit pati
yang terhidrolisis olehE. oli. "ementara pada biakanBacillus subtilispati
sudah terhidrolisis lebih banyak, sehingga zona beningnya akan berwarna
keoklatan dan menunjukkan hasil yang positif .
B. $-r!ss Pr
erobaan hidrolisis protein bertujuan untuk mengamati aktivitas enzim
protease yang dihasilkan oleh mikroorganisme. 5akteri yang digunakan pada
perobaan tersebut adalah E. colidanB. subtilis yang berumur )7 jam.
erobaan tersebut menggunakan medium Skim Milk Agar yang mengandung
mengandung protein.
"etelah diinokulasi dan diinkubasi, mikroorganisme yang mensekresi
protease akan menampakan zona proteolisis yaitu zona bening di sekitar
pertumbuhan mikroorganisme tersebut. #al itu merupakan hasil dari reaksi
hidrolitik yang menghasilkan asam amino terlarut dan menggambarkan suatu
reaksi yang positif %+appuino - "herman 1''( 1)1*.
#asil pengamatan setelah )7 jam, terlihat adanya zona bening pada
medium yang ditumbuhi oleh kedua biakan, tetapi pada medium yang ditumbuhi
Escherichia coliterdapat zona bening yang lebih luas dan epat. Adanya zona
bening di sekitar biakanmenunjukkan bahwa mikroorganisme tersebut memiliki
enzim protease yang dapat menghidrolisis protein %"alle 1'6( 3:6*.
. Fr4as Kar5h-ra
erobaan fermentasi karbohidrat bertujuan kemampuan mikroorganisme
untuk mendegradasi dan menfermentasi karbohidrat. 5akteri yang diuji pada
perobaan tersebut adalahE.coli,Alcaligenessp., danB.subtilis. erobaan
8/10/2019 Aktivitas Biokimia Dari Mikroorganisme i
10/18
'
tersebut menggunakan mediumNutrien Brothdan mengandung berbagai jenis
gula yaitu Glukose Phenol Red,actose Phenol Red, Sucrose Phenol Red.
erobaan fermentasi karbohidrat menggunakan tabung Burham yang
diletakkan di dalam tabung reaksi. Dabung Burham adalah suatu tabung keil
untuk mendeteksi produksi gas. erobaan tersebut juga menggunakanphenol
red sebagai indikator, yang akan berwarna merah pada p# netral %6* dan berubah
warnanya pada p# asam %,7* %+appuino - "herman 1''( 1)'*.
#asil pengamatan pada medium yang berisi biakanE.coli! B.subtilis! dan
Alcaligenessp. menunjukkan adanya perubahan warna indikator dari merah
menjadi kuning dan tidak terlihat adanya gelembung udara yang banyak pada
tabung Burham, baik pada medium glukosa, laktosa dan sukrosa. #al tersebut
menunjukkan bahwa ketiga biakan tersebutdapat memfermentasi karbohidrat
dengan dihasilkannya asam walaupun tidak menghasilkan gas.
#asil pengamatan yang diperoleh sesuai dengan teori yang menyatakan
bahwa setelah diinkubasi, karbohidrat yang telah difermentasi akan memproduksi
buangan yang bersifat asam yang dapat menyebabkan perubahan warna merah
padaphenolredmenjadi kuning, sehingga mengindikasikan reaksi yang positif.
produksi asam seringkali disertai dengan pengeluran gas %+2* yang dapat terlihat
sebagai gelembung pada tabung Burham. ultur biakan yang tidak dapat
memfermentasi karbohidrat tidak menampakkan perubahan warna pada indikator
dan tidak terjadi gelembung. #al itu merupakan reaksi negatif %+appuino -
"herman 1''( 101*.
D. Pr-6s $2S
Fji produksi #2" bertujuan untuk mengetahui kemampuan
mikroorganisme dalam memproduksi #2" melalui pemeahan asam amino yang
mengandung unsur belerang %"* seperti sistein dan metionin %&andjar 1''2( 01*.
5iakan yang digunakan adalah solat BD2dan solat ?D1 yang ditanam dalam
medium"riple Sugar #ron Agar%D"A*. Medium D"A mengandung senyawa!
senyawa yang terdiri dari pepton kasein dan daging, meat e$tract! yeast e$tract!
>a+l, laktosa, sukrosa, B%8*glukosa, Amonium besi %* sitrat >a2"o3, ?enol red,
agar dan aHuades %&andjar dkk.1''2( 71*. #asil engamatan 2), )7, dan 12: jam
8/10/2019 Aktivitas Biokimia Dari Mikroorganisme i
11/18
1:
menunjukkan pada kedua biakanterdapat warna hitam disepanjang daerah
inokulasi pada medium. #al tersebut membuktikan bahwa solat BD2dan solat
?D1memproduksi #2". #asil pengamatan yang diperoleh sesuai dengan teori
yang menyatakan bahwa bakteri yang mampu memproduksi #2" yang ditandai
dengan terbentuknya warna hitam pada medium %+owan - "teel 1'6)( 67*.
#2" yang dihasilkan dapat diamati karena adanya reaksi antara #2" dengan
ferros ammonium sulfat yang terdapat pada medium membentuk ferrosulfida yang
berwarna hitam %+appuino - "herman 1''( 106*. $eaksi yang terjadi(
?e")9 ?e288 ")
2!
?e 288 #2" 9 ?e" 8 #2")
Enzim sistein desulfurase adalah enzim yang dimiliki oleh solat BD2dan
solat ?D1 yang berfungsi membantu mereduksi asam amino yang mengandung
unsur " %"alle 1'6( 3)*.
E. Pcara G!a
erobaan perairan gelatin mengunakan bakteriE. coli danB. subtilis
yang diinokulasikan pada medium gelatin yang ditempatkan pada lemari
pendingin. &elatin pada suhu rendah akan membeku. @ika dihidrolisis dengan
gelatinase, medium tersebut akan kehilangan sifat solidifikasi. "emakin air,
aktivitas proteolitik akan semakin tinggi. enairan gelatin dilakukan oleh enzim
proteolitik yang dikenal sebagai gelatinase. Adanya enzim tersebut dapat dilihat
dengan menginokulasi tabung berisi medium gelatin dengan mikroorganisme
yang diamati dan diinkubasi. Medium diletakkan pada lemari pendingin. Apabila
gelatin tetap menair menunjukkan bahwa organisme yang ada mensekresi
gelatinase ke dalam medium %"alle 1'6( )21*.
5erdasarkan hasil pengamatanB. subtilismemiliki enzim gelatinase yang
dapat menghidrolisis gelatin. #al tersebut terlihat dari gelatin yang menair
setelah diinkubasi selama 2) jam, sedangkan penairan gelatin tidak terlihat pada
medium yang ditumbuhi olehE. coli. B. subtilisdapat menghidrolisis gelatin
dengan bantuan enzim gelatinase, sedangkanE. colitidak dapat menghidrolisis
gelatin karena tidak mempunyai enzim gelatinase. #al tersebut sesuai dengan
8/10/2019 Aktivitas Biokimia Dari Mikroorganisme i
12/18
11
teori yang menyatakan bahwaE. colimemberikan hasil negatif pada penairan
gelatin %+lifton 1'07( 1)*.
F. U Kaa!as
Fji katalase dapat dilihat dengan menetesi hidrogen peroksida %#22* pada
biakan mikroorganisme yang diletakkan pada kaa objek. Mikroorganisme yang
digunakan adalahBacillus subtilisdanEscherichia coli. @ika terdapat enzim
katalase, reaksi kimia yang terjadi diindikasikan dengan terbentuknya gelembung
gas oksigen bebas %2*.
#asil pengamatan menunjukkan bahwa kedua bakteri yang digunakan
menunjukkan adanya reaksi yang positif terhadap uji katalase. B.subtilis!danE.
coli memperlihatkan adanya gelembung 2ketika ditetesi oleh #22, namun
waktu yang dibutuhkan sampai terlihat adanya gelembung gas pada setiap bakteri
adalah berbeda!beda. B. Subtilis memerlukan waktu sekitar 1' detik, sedangkan
E. coli membutuhkan waktu sekitar ' detik. emampuan kedua biakan tersebut
menghasilkan enzim katalase yang dapat memeah hidrogen peroksida menjadi
air dan oksigen sesuai dengan literatur yang menyebutkan bahwa kedua bakteri
tersebut memberikan uji terhadap uji katalase %#olt dkk. 1'')( 16'*.
G. U Os-as
#asil pengamatan pada biakan solat BD2 dan solat ?D1 menunjukkan
pertumbuhan yang ukup baik pada tabung yang berisi mediumNutrient Broth.
#al tersebut terlihat karena adanya perubahan warna medium dari kuning menjadi
biru. #asil pengamatan tersebut mengindikasikan bahwa solat BD2 dan solat?D1dapat mengunakan karbohidrat dengan ara oksidasi %aerob*. #al tersebut
sesuai dengan literatur yang menyatakan bahwa bakteri tersebut merupakan
mikroorganisme yang bersifat aerob obligat, yang membutuhkan oksigen dalam
proses respirasinya %#olt dkk. 1'')( 032*
". KESIMPULAN
8/10/2019 Aktivitas Biokimia Dari Mikroorganisme i
13/18
12
1. "etiap mikroorganisme memiliki kemampuan aktivitas biokimia yang
berbeda!beda untuk mendapatkan energi dan nutrisi.
2. Mikroorganisme sangat membutuhkan enzim dalam melakukan
metabolismenya, enzim yang digunakan antara lain katalase, gelatinase,
amylase, proitenase, dan lain!lain.
3. "etiap mikroorganisme mempunyai sifat biokimia yang identik.
"I. DAFTAR AUAN
5rok, D. B. - M.D. Madigan. 1''6. Biology o% Microorganisms. Ed. e!7.
rentie!#all, n., >ew @ersey( Ii 8 '7 hlm.
+appuino, @.&. - >. "herman. 1''.Microbiology&Alaboratorymanual.
ddison!esley ublishing, $eading( Iiii 8 ) him.
+lifton, +. E. 1'07. #ntroduction to the bacteria. Ed. ke!2. M&raw #ill 5ook
+ompany, n., >ew Jork( Iiv 8 007 hlm.
+owan, ". D. %rev*. 1'6). 'o(an and Steel)s manual %or the identi%ication o%
medical bacteria. Ed. ke!2. +ambrigde Fniversity ress, /ondon( Iii 8 237
hlm.
&andjar, l., l. $. oentjoro, . Mangunwardoyo,- /. "oebagya. 1''2.Pedoman
praktikummikrobiologidasar.@urusan 5iologi ?MA Fl, Bepok( vii 8 76
hlm.
#olt, @. &., >. $. neg, . #. A. "neath, @. D. "taley, - ". D. illiams. 1'').
Bergey)s manual o% determinati*e bacteriology. Ed. e!'. illiams -
ilkins, 5altimore( Iviii 8 676 hlm.
8/10/2019 Aktivitas Biokimia Dari Mikroorganisme i
14/18
13
@utono, @., ". "oedarsono, ". #artadi, ". abirun, "uhadi, - "usanto. 1'63.
Pedoman praktikum mikrobiologi umum. Bepartemen Mikrobiologi
?akulas ertanian F&M, Jogyakarta( Iii 8 232 hlm.
/ehninger, A. /. 1''0. +asar-dasar biokimia. Derj. dariPrinciples o%
biochemistry, oleh Dhenawidjaja, M. enerbit Erlangga, @akarta( Iv 8
3' hlm.
elzar, M.@., $. $eid - E.+.". +han. 1'07.Microbiology. )th ed. M&raw!#ill
5ook +ompany, >ew york( vii 8 '02 hlm.
"alle, A. @. 1'6. ,undamental principles o% bacteriology. Ed. e!0. M&raw
#ill 5ook +ompany, n., >ew Jork( viii 8 712 hlm.
LAMPIRAN
Dabel 1. #asil pengamatan hidrolisis polisakarida
8/10/2019 Aktivitas Biokimia Dari Mikroorganisme i
15/18
1)
Dabel 2. #asil pengamatan hidrolisis protein
Dabel 3. #asil pengamatan fermentasi karbohidrat
Dabel ). #asil pengamatan produksi #2"
Dabel 0. #asil pengamatan penairan gelatin
8/10/2019 Aktivitas Biokimia Dari Mikroorganisme i
16/18
10
Dabel . #asil pengamatan uji katalase
Dabel 6. #asil pengamatan oksidase
8/10/2019 Aktivitas Biokimia Dari Mikroorganisme i
17/18
1
&amabar 1.
engamatan ?ermentasi
arbohidrat
K"umber( Bokumentasi pribadiL
&ambar 2. engamatan roduksi #2"
K"umber( Bokumntasi pribadiL
8/10/2019 Aktivitas Biokimia Dari Mikroorganisme i
18/18
16
&ambar 3. engamatan #idrolisis olisakarida
K"umber( Bokumentasi pribadiL
&ambar ). engamatan enairan &elatin
K"umber( Bokumentasi pribadiL
&ambar 0. /arutan Alpha neftol - ksalat
K"umber( Bokumentasi pribadiL