ANAEROBS.clostridium

Bacterias anaerobias

Lic. Natasha Soca

Son bacterias que pueden crecer en presencia de oxígeno o no.

Esporuladas o no esporuladas

Se diferencian por:

Morfología

Ecología

Patología

Tratamiento

No esporulados :

Cocos Gram +

Bacilos Gram +

Bacilos Gram –

Esporulados :

Bacilos Gram-

• Forman parte de la Flora Normal

• Son agentes de infecciones endógenas, polimicrobianas y oportunistas

• Producen infecciones inespecíficas

Bacterias anaerobias estrictas

• Son las bacterias incapaces de crecer en presencia de oxigeno.

• Realizan respiración anaerobia o fermentación. • Para algunas el oxígeno es letal. • Los mecanismos de acción tóxica del oxígeno son

diversos (H2O2, radical superoxido, etc.).

Distintos aceptores de electrones, y sus productos

Aceptor Producto final

Nitrato Nitritos, óxidos de N y N2

Sulfato Sulfuros

Azufre Sulfuros

CO2

Ácido acético

CO2 Metano

Fumarato Succinato

Fe3+ Fe2+

Bacilos Gram positivos esporulados

• Producen infecciones endógenas y exógenas

• En forma directa

• O por la acción de las toxinas

BACILOS GRAM + ANAEROBIAS ESPORULADAS: Clostridium

• Anaerobios estrictos. • Endosporas en disposición terminal o subterminal. • Flagelos peritrico. • Sin cápsula, excepto C. perfringens • Ampliamente distribuidos en la naturaleza. • Algunos forman parte de la flora normal • Algunos son responsables de infecciones e intoxicaciones graves

por la formación de TOXINAS de naturaleza proteica, termolábiles.

WebPages/ENDOSPORA.ppt

• Ampliamente distribuidos en la naturaleza.

• Algunos son saprofíticos y otros son patógenos.

• Producen infecciones en la piel, partes blandas, intoxicación alimentaria.

• Sobreviven en condiciones adversas (esporas).

• Rápida tasa de crecimiento.

• Producción de numerosas toxinas histolíticas, neurotoxinas y enterotoxinas

Factores de patogenicidad

• Colagenasas

• Hialuronidasas

• Proteasas

• Dnasas

• Heparinasas

Clostridium perfringens

Clostridium tetani

Clostridium botulinum

Clostridium difficile

C. septicum,

C. novyi.

C.bifermentans

C. ramosum

Clasificación de Clostridium en función de su toxicidad

• Neurotóxicos: – C. tetani

– C. botulinum

• Citotoxicidad en lesiones previas: – C. perfringens (gangrena gaseosa)

– C. histolyticum, C. bifermentans, etc.

• Enterotóxicos: – C. perfringens

– C. difficile (colitis pseudomembranosa)

• Cuadros purulentos (piógenos) junto con otras bacterias anaerobias: No hay efecto tóxico. – C. ramosum, C. perfringens…

Esporas caracterìsticas

• DEFORMAN EL SOMA BACTERIANO.

• UBICACIÓN SUBTERMINAL

– Ovales: C. histolyticum, C. difficile

• UBICACIÓN TERMINAL

– Redondos: C. tetani

– Ovales: C. tertium, C. ramosu

Clostridium tetani

• Esporas esféricas, terminales con engrosamiento (en palillo de tambor)

• Hábitat: En la tierra y en el intestino del hombre y animales .

Clostridium tetani

• Bacilo Gram +, móvil esporulado con espora terminal con aspecto de palillo de tambor

• Posee una potente neurotoxina termolábil la tetanoespamina que es del tipo A-B que bloquea los neurotransmisores para la sinapsis inhibidora lo que permite la sináptica excitadora descontrolada-parálisis espástica.

• Posee una hemolisina la tetanolisina

Clostridium tetani

• Produce tres toxinas neurotóxicas (en el SNC)

• Produce el TETANOS: Caracterizado por parálisis espástica (rigidez tetánica).

• Requiere anaerobiosis: Heridas profundas.

• Periodo de incubación: 5 – 7 días

Clostridium tetani

Clostridium tetani

Clostridium tetani

PATOLOGIA

TETANOS

NEONATAL

TETANOS

LOCALIZADO

TETANOS

GENERALIZADO

Clostridium tetani

Clostridium tetani – Mecanismos de patogenecidad

• TETANOSPASMINA: RESPONSABLE DE

CUADRO DE TÉTANOS (TIPO ANTIGÉNICO

ÚNICO)

• TOXINA TIPO A+B,CODIFICADA POR

PLÁSMIDO

• TETANOLISINA: HEMOLISINA

Clostridium tetani

• TOXINA TETÁNICA

• PROTOXINA (150 KDa)

• TOXINA FORMADA POR DOS CADENAS

• CADENA PESADA - SE UNE A MEMBRANA

NEURONAL

• LOCALIZACIÓN EN VESÍCULAS DE

TERMINALES NERVIOSOS PRESI-NÁPTICOS

Clostridium tetani

• TOXINA TETÁNICA

• HIDROLIZA PROTEÍNAS DE ANCLAJE

(SINAPTOBREVINAS) DE

NEUROTRANSMISORES INHIBI-TORIOS

(GLICINA, GABA)

• FALTA DE RELAJACIÓN MUSCULAR

• CAUSA ESPASMOS MUSCULARES

Clostridium tetani Vacunación.

Clostridium botulinum • Ampliamente distribuidas:

Aire, suelo, alimentos

• En conservas (abombamiento

por metano)

• Esporas subterminales con

engrosamiento.

• Potentes neurotoxinas

(proteicas y termolábiles):

Clasificadas de la A a la G.

Causan parálisis flácida por

bloqueo de la liberación de

acetil colina en las neuronas

• PATOGENIA Botulismo


• Son bacilos Gram +.

• Esporulados.

• Anaerobios estrictos.

• No poseen cápsula.

• Se dividen en 4 grupos por el tipo de toxina que producen y su actividad proteolítica

• La enfermedad humana se asocia a los tipos I y II.

• Se conocen 8 toxinas botulínicas( A,B ,C , alfa , D ,E ,F G).



Mecanismo de acción de la toxina: Llega al tubo digestivo a través de alimentos

contaminados.

Inicialmente Toxinfección alimentaria.

Vía sanguínea y linfática

Bloquea la liberación de acetilcolina

Origina:

Visión borrosa; sequedad de boca, lengua y faringe; fotofobia; debilidad general de los músculos, incluso respiratorios.

Puede originar la muerte por fallo respiratorio y cardíaco.

Periodo de incubación: 18 – 36 horas.



Clostridium botulinum Patogenia

• La toxina botulínica es específica para los nervios colinérgicos. Bloquea la neurotransmisión en la sinapsis colinérgica periférica al impedirla liberación del neurotransmisor acetilcolina.

• También produce una toxina que altera la permeabilidad vascular


• Botulismo causado por alimentos-parálisis fláccida

• Botulismo infantil-producción in vivo de neurotoxinas.

• Botulismo de heridas


Clostridium perfringens Muy difundida en la naturaleza. Se le

puede encontrar en gran número en: Suelo

Flora intestinal

Del suelo pasa a heridas profundas produciendo la GANGRENA GASEOSA.

Produce varias toxinas: Citotoxicidad

Enterotoxina

WebPages/C_perfringens.mht


• Bacilos gram +

• Anaerobios- aero

tolerante.

• Posee cápsula.

• Inmóvil

• Produce esporas.

• Rectos

• Sacarolítico activo.

• Produce gas,CO 2 y H

2

• Produce 4 toxinas

letales





• Directo. Bacilos gram +

Con escasos LPMN debido a su destrucción por la Toxina Alfa.

- Crece en Agar sangre y Agar yema de huevo.

- Produce Lecitinasa





• Produce:Gangrena gaseosa Mecanismo de acción citotoxicidad Puerta de entrada por heridas con condiciones anaerobias.

• Efecto sobre los tejidos Rompen células y tejidos (cél. sanguíneas, endoteliales y musculares) por la acción de varias toxinas:

– Hemolisinas

– Neuraminidasa (rompe el ácido neuraminico de las membranas)

– Hialuronidasa – Proteasas.

• Originando necrosis con produciendo gas, hemorragias y edema.


Clostridium perfringens Gangrena gaseosa


Clostridium perfringens Factores de virulencia

• Toxina alfa- es una lecitinasa (fosfolipasa C ) provoca la lisis de los hematíes,plaquetas, leucocitos y células endoteliales.

• Aumenta la permeabilidad vascular con hemólisis masiva , hemorragia y destrucción tisular.

• Produce toxicidad hepática y disfunción miocárdica.



• Toxina beta- es necrotizante

• Produce catecolamina (induce la hipertensión).es responsable de la enterocolitis necrotizante.

• Toxina epsilon-es una prototoxina que es activada por enzimas proteolíticas que aumenta la permeabilidad vascular de la pared gástrica.

• Toxina iota-tiene actividad necrótica y aumenta la permeabilidad vascular


Clostridium perfringens • Enterotoxina-proteína termolábil producida en el

colon y liberada con la formación de esporas

• Toxina delta hemolítica

• Toxina teta –citolisina hemolítica

• Toxina kappa

• Colagenasa

• Gelatinasa

• Proteasa

• Dnasa

• Neuraminidasa

• Hialuronidasa



Infecciones tóxica alimentaria:

• A partir de carne contaminada con Clostridium

perfringens tipo A .

– En el intestino germinan las esporas dando

cuadros diarreicos leves.

• La ingestión de carne contaminada con

C. perfringens tipo C ( rara)

Enteritis necrotizante (cuadros diarreicos graves,

muy acuosos y sanguinolentos con vómitos y puede

llegar al estado de Shock)





• Mionecrosis –gangrena gaseosa – produce

necrosis muscular extensa con

shock,insuficiencia renal y muerte.

• Celulitis,fascitis e infecciones de partes

blandas- provoca supuración y formación de

gas .

• Intoxicación alimentaria.

• Enteritis necrotizante.

• Bacteriemia






Clostridiun difficile

• Bacilo gram +.

• Esporulado

• Anaerobio

• Móvil

• Posee cápsula

• Productor de toxina A , B

Clostridiun difficile • Productor de enterotoxina (toxina A) que induce la

producción de citocinas con hipersecreción de

líquidos y necrosis hemorrágica.

• Citotoxina (toxina B) induce la despolimerización

de la actina con pérdida del citoesqueleto celular.

• Factor de adherencia

• Se une a las células del

colon


• Puede causar colitis pseudomembranosa.

• La diarrea asociada a C. difficile es la diarrea

nosocomial infecciosa

• Suelen adquirirse en el hospital

• Pueden causar:

• Colonización intestinal asintomática

• Diarrea aguda


• Productor de enterotoxina que induce la

producción de citotoxinas con hipersecreción

de líquidos y necrosis hemorrágica.

• Citotoxina.

• Factor de adherencia – se une a las células del

cólon.

• Colitis pseudomembranosa puede ocasionar:

• perforación del colon

• sepsis

• muerte.


• La mayor parte de las infecciones por C.

difficile se adquieren nosocomialmente

Muchos pacientes permanecen asintomáticos

tras la colonización.

• El factor de riesgo más frecuente es el

tratamiento antibiótico previo,

• Los mayores responsables son clindamicina,

cefalosporinas, penicilinas y fluoroquinolonas.

C. difficile


• Toma de muestra :en condiciones de anaerobiosis utilizando medios especiales reductores del oxígeno

• Examen directo microscópico

• Examen microscópico para visualizar las esporas y ver su ubicación

• Cultivo en anaerobiosis en Agar sangre O.

Agar específico ,etc

• Identificación

• Pruebas bioquímicas:

Indol

Fermentación de azúcares

(glucosa ,lactosa, rapnosa , manitol, etc)

Digestión en medios con carne

Lecitina en - Agar yema de huevo TEST DE NAGLER

DIAGNÓSTICO.

• PRESENCIA DEL GERMEN

• PRESENCIA DE ANTÍGENOS

• Análisis de citotoxicidad

• TUBOS HERMÉTICOS PARA MUESTRAS DE

– OÍDO INTERNO

– LÍQUIDOS CORPORALES (AMNIÓTICO, ASCÍTICO, PLEURAL, SINOVIAL, ETC)

– ORINA (PUNCIÓN SUPRAPÚBICA)

– TEJIDOS

– TRACTO GENITAL FEMENINO (QUISTES DE BARTHOLIN, FONDO DE SACO, ENDOMETRIO

• Muestras inadecuadas

• LAVADO BRONQUIOALVEOLAR DESPROTEGIDO. • HISOPADO CERVICAL. • ASPIRADO ENDOTRAQUEAL. • LOQUIOS. • HISOPADO NASOFARÍNGEO / SECRECIÓN FARÍNGEA. • LÍQUIDO SEMINAL O PROSTÁTICO. • ESPUTO POR EXPECTORACIÓN O INDUCIDO. • HECES / MUESTRA RECTAL. • SECRECIÓN URETRAL / HISOPADO VAGINAL O

VULVAR. • ORINA (POR VACIADO DIRECTO O CATETERISMO

Medios de cultivo empleados

• Caldo con tioglicolato (con o sin rezasurina)

• Caldo Tarozzi

– Caldo con trozos de hígado o carne y glucosa

• Agar blando.

• Medio de Hibler (papilla de cerebro)

• Medio BHI (caldo infusión cerebro- corazón)

• Medio RCM (Reinforced Clostridial Medium)

• Agar SPS (sulfito-polimixina-sulfadiacina)

Métodos para obtener anaerobiosis

• Vacío.

• Reemplazo por gases.

- N - Gases inertes

- CO2 - Mezclas reductoras

• Sustancias reductoras atóxicas.

–Tioglicolato, glucosa

–Sulfito de Na

–Sulfoindigonato de Na

Manómetro.

Picos para realizar

reemplazo gaseoso.

Esponja catalítica.

Soporte interno para sobre

con sustancia reductora.

BACTERIAS ANAEROBIAS NO FORMADORAS DE ESPORAS Propionibacterium

• Ampliamente distribuidos en la naturaleza

• Algunos forman parte de la flora saprofita gastrointestinal, vaginal o bucal.

• Solo unas pocas son capaces de producir cuadros patógenos.

BACTERIAS ANAEROBIAS NO FORMADORAS DE ESPORAS Fusobacterium

• Bacilos Gram + no esporulados (ver siguiente DP):

– Lactobacillus

– Propionibacterium

– Bifidobacterium

• Bacilos gram – no esporulados: – Bacteroides: Flora normal intestinal vaginal y bucal.

B. fragilis es patógeno oprtunista.

– Fusobacterium: F. nucleatum es patógeno oportunista del aparato respiratorio y tracto genital femenino.

• Cocos Gram + no esporulados: – Peptococcus: No patógeno

– Algunos Streptococcus anaerobios de la flora gastrointestinal normal.

• Cocos Gram – no esporulados: – Veillonella: Flora intestinal y bucal

Bacilos gram negativos anaerobios

• GÉNERO BACTEROIDES

• Los Bacteroides son bacilos gram negativos anaerobios obligados que están presentes en gran cantidad en el intestino grueso del ser humano

Especies

• B. fragilis

• B. thetaiotamicron

• B. vulgatus,

• B. ovatus

• B. distasonis

• B. ureolyticus

• B. gracilis

Bacteroides

• Los Bacteroides se asocian a infecciones anaerobias subdiafragmáticas y genitales

• Sepsis a punto de partida de estas infecciones.

• Son resistentes a penicilinas (por producción de betalactamasas)

y cefalosporinas, con alguna excepción.

• Cocobacilos pequeños gram negativos, pleomórficos con vacuolas evidentes.

• Colonias pequeñas, bajas, convexas, de color blanco a gris, semi opacas y brillantes

• algunas pueden ser hemolíticas.

• B. fragilis aislado de muestras clínicas posee una cápsula polisacárida que puede perderse o disminuir con los cultivos sucesivos

• Abscesos peritoneales

• B. fragilis, es predominante y a menudo está acompañado por microorganismos anaerobios facultativos y por otros microorganismos

anaerobios estrictos, como Clostridium o los Estreptococos anaerobios (Peptococcus, Peptostreptococcus).

GÉNEROS PREVOTELLA Y PORPHYROMONAS

• Los bacilos productores de pigmento negro en las colonias en agar sangre ,que previamente

• Se clasificaban como subespecies de Bacteroides melaninogenicus se han reclasificado en dos nuevos géneros:

Porphyromonas

Prevotella ,este último también incluye algunas

especies no pigmentadas.

• Forman parte de la flora normal de boca, tracto genital e intestinal

• Son patógenos importantes en boca, cabeza, cuello e infecciones pleuropulmonares.

• Prevotella melaninogenica, Prevotella denticola, Prevotella loescheii, Prevotella intermedia y

• Prevotella corporis son miembros de la flora normal de la boca, vías respiratorias superiores y partes blandas subyacentes.

• . Prevotella bivia prevalece en la flora vaginal y produce vaginosis e infecciones de origen obstétrico.

• Porphyromonas endodontalis y Porphyromonas gingivalis forman parte de la flora normal de la boca

y las encías

• Porphyromonas asaccharol en la flora intestinal

GÉNERO FUSOBACTERIUM

• Fusobacterium nucleatum

• Flora normal de la boca, tracto respiratorio superior, tracto genitaly gastrointestinal.

• Es un agente causal de infecciones orales, abscesos de pulmón

• Infecciones pleuropulmonares

• Infecciones del líquido amniótico

Fusobacterium necrophorum

• Es un anaerobio muy virulento que puede causar infección ampliamente diseminadas.

• Es el agente etiológico principal de la Angina de Vincent (asociado a Borrelia),

• Angina de Vincent -Infección necrótica de amígdalas y faringe, que presenta un exudado purulento

membranoso, acompañada de mal olor.

Se halla en una variedad de infecciones subdiafragmáticas.

Hábitat - tracto gastrointestinal.

• Son bacilos largos con extremos acintados o filamentos delgados.

• Producen alfa y beta hemólisis en Agar sngre

ovina

Las colonias son translúcidas

VEILLONELLA

• Pequeños cocos gram negativos

• En diplococos o cadenas cortas y racimos Miembros de flora bucal, intestinal y genital, Se aísla de materiales clínicos, pero es dudoso su poder patógeno.

Peptoestreptococcus

• Cocos Gram + no esporulados:

– Peptococcus: No patógeno

– Algunos Streptococcus anaerobios de la flora gastrointestinal normal.

• Cocos bacilos Gram – no esporulados:

– Veillonella: Flora intestinal y bucal

BACTERIAS ANAEROBIAS NO FORMADORAS DE ESPORAS

• Bacilos Gram + no esporulados:

– Lactobacillus:

• Microaerofílicos (algunos anaerobios), no patógenos

• Flora bucal, vaginal e intestinal

• Utilidad industrial.

– Propionibacterium:

• Anaerobios y microaerofílicos.

• Pleomorficos

• Flora normal del tubo digestivo, tracto urinario y piel.

• P. acnes produce infecciones en piel

• Algunas spp se usan en fabricación de queso.

– Bifidobacterium:

• Flora intestinal. No patógeno.


• ACCIÓN PATÓGENA E INTERÉS CLÍNICO:

– La mayoría son no patógenos

– Unos pocos patógenos oportunistas:

• En Inmunodeprimidos, SIDA, en estados carenciales, desnutrición.

• En enfermedades nosocomiales: Infecciones quirurgicas, complicaciones de escaras, úlceras por decúbito, etc.


• Aislamiento, caracteres bioquímicos y diagnóstico bacteriológico: – Toma de muestras: Dependiendo del cuadro clínico:

De esputo, heces, exudado…

– Transporte en medios específicos con bajo potencial redox y atmósfera de CO2.

– Tinción de Gram: Morfología, etc.

– Aislamiento en medios de cultivo en condiciones aeróbicas, anaeróbicas y microaerofílicas.

– Si crece en el medio anaerobio, se somete a PRUEBAS BIOQUÍMICAS PARA ANAEROBIOS (baterías de identificación rápida): Gelatinasa, fermentaciónes, Indol, etc.

– Estudios de CROMATOGRAFÍA DE GASES y HPLC para detectar la producción de ácidos grasos volátiles, propios de las bacterias anaerobias.

– Técnicas serólógicas con sueros específicos.

Actynomices

Género Actinomyces

• Bacilos gram (+)

• Anaerobios o microaerofílicos

• No esporulados, del género Actinomyces.

• Se caracteriza por la formación de abscesos, fibrosis tisular y presencia de tractos fistulosos en distintas localizaciones anatómicas,

• Afecta con mayor frecuencia las regiones cervicofacial (55%), torácica (20%) y abdomino pélvica (15%).

14 especies de Actinomyces conocidas,

6 pueden ser patógenas para el hombre.

Son comensales y habitantes normales de:

orofaringe,

tracto gastro intestinal

tracto genital femenino.

• La infección tiene como puerta de entrada:

• Lesiòn de la mucosa del tracto gastrointestinal ,

• Aspiración de secreciones de la orofaringe o tracto gastrointestinal hacia el tracto respiratorio

• La presencia de dispositivo intrauterino, es también factores de riesgo importantes.

• Cara y cuello -sitios más frecuentes de infección

• La enfermedad puede manifestarse como un absceso piógeno doloroso o como un cuadro que evoluciona en forma crónica, formando masas induradas indoloras a menudo acompañadas de tractos fistulosos que descargan gránulos actinomicóticos

Diagnóstico de actinomicosis

• Aislando especies de actinomyces en medios de cultivo para anaerobios,

• Demostración de gránulos actinomicóticos (“gránulos de azufre”) en exudados y cortes histológicos sugieren fuertemente el diagnóstico.

• Es infrecuente su visualización con tinciones de uso habitual, pero esta se facilita al usar tinciones especiales como la de Grocott-Gomori

Toma de muestra para anaerobios

• En condiciones de anaerobiosis utilizando

medios especiales reductores del oxígeno.

• Debe proceder de lugares cerrados.

• Adecuada asepsia

• Elegir la forma de recolección

(Aspirado,Biopsia de Tejido)

Mobiluncus

Documents

ANAEROBS.clostridium