Bao Cao Co Van-protase

8/3/2019 Bao Cao Co Van-protase

http://slidepdf.com/reader/full/bao-cao-co-van-protase 1/35

5/1/2012 Protease từ vi sinh vật 1

TÌM HIỂU QUY TRÌNH SẢN XUẤT PROTEASE TỪ VI SINH VẬT

Sinh viên thực hiện: Trần Viết Đoàn, Trần Thị Kim Dung,

Bùi Bá Hân, Phạm Thị Hậu, Nguyên Thị Kim Hòa, Võ Trực Hoài,

Ngô Thị Thanh Hương, Võ Quốc Hướng và Nguyễn Thị Thu Hà.

Lớp: 11SHLTGiáo viên bộ môn:

Th.S Ngô Thái Bích Vân

Đà Nẵng, 11/2011




Nội dung báo cáo

• Mở đầu • Giới thiệu chung về protease

• Các ứng dụng của protease• Quy trình sản xuất protease từ nấm mốc

• Kết luận




Mở đầu




Mở đầu • Protease được sản xuất nhiều và sử dụng nhiều trong các lĩnh vực khác nhau.• Có nhiều nguồn cung cấp protease khácnhau.

• Nguồn vi sinh vật được sử dụng nhiều nhất trong công nghiệp

• Đa dạng chủng loại • Năng suất lớn • Phương pháp đơn giản, dễ thự hiện • Thực hiện được ở quy mô công nghiệp




Giới thiệu chung về

protease




• Xúc tác quá trình thuỷ phân liên kết liên

kết peptit trong phân tử protein, polypeptitđến sản phẩm cuối cùng là các acid amine.

• Ngoài ra, nhiều protease cũng có khả

năng thuỷ phân liên kết este và vận chuyển axit amin.

ProteinProtease

Polypeptide Peptide Acid amineProtease Protease

1. Chức năng




2. Phân loại

Hình 1. Sơ đồ phân loại cơ bản của protease




3. Nguồn thu nhận

• Động vật

• Tụy tạng (nguồn lâu đời) : pepsin, tripsin • Dạ dày bê : renin…

• Thực vật • Bromalian : chồi, vỏ dứa

• Papain : nhựa lá, thân, quả cây đu đủ • Ficin : nhựa cây cọ

• Vi sinh vật

• Vi khuẩn : Bacillus subtilis • Xạ khuẩn : Streptomyces fracdiac

• Nấm mốc : Aspergillus oryzae




3. Nguồn thu nhận

Hình 2. Sơ đồ thu nhận protease từ các nguồn khác nhau




Ứng dụng của protease




Ứng dụng của protease

1. Công nghiệp chế biến thịt 2. Công nghiệp chế biến thủy sản

3. Công nghiệp sữa và bánh

4. Công nghiệp sản xuất bia

5. Công nghiệp da

6. Các ngành công nghiệp khác




1. Công nghệ chế biến thịt

• Protease làm mềm và tăng hương vị chothịt bằng cách :

Ngâm thịt vào dinh dưỡng protease thíchhợp;

Tẩm hỗn hợp làm mềm thịt (enzyme, muối, bột ngọt);

Tiêm dung dịch enzyme vào thịt.




2. Công nghệ chế thủy sản

• Chế phẩm protease rút ngắn được thời gian và cải thiện hương vị của nước mắm.

• Nguồn sử dụng

Thực vật : bromalain, papain… Vi sinh vật :

- Hệ vi sinh vật trong nội tạng thủy sản

- Bổ sung chế phẩm enzyme




3. Công nghệ chế biến sữa và bánh

• Sản xuất phomat, phomai, bơ…

• Sản xuất bánh mì, bánh quy…

Làm giảm thời gian trộn;

Tăng độ dẻo và nhàm nhuyễn bột;

Tạo độ xốp và độ nở tốt.

• Nguồn thu nhận : Vi sinh vật

Chế phẩm enzyme




4. Công nghệ sản xuất bia

• Tăng đồ bền bia và rút ngắn được thời gian lọc.

• Protease của A.oryzae dùng thủy phân

protein trong hạt ngũ cốc tạo điều kiện xử lý bia tốt hơn.

• Nguồn thu nhận : vi sinh vật trong nấm

men lên men bia




5. Công nghệ da

• Protease được sử dụng để làm mềm daloại bỏ khỏi da các chất nhớt nhờ thủy phân một phần protein.

• Nguồn thu nhận :

Vi sinh vật

Chế phẩm enzyme




6. Các ứng dụng công nghiệp khác

• Điều chế dịch đạm thủy phân;

• Thức ăn gia súc;

• Điều chế môi trường dinh dưỡng để sản

xuất các loại vaccine;• Sản xuất keo động vật, chất tẩy rửa để tẩy chất bẩn có bản chất là protein và mỹ

phẩm.




Quy trình sản xuất

protease từ nấm mốc




Quy trình sản suất protease...

1. Giới thiệu chung về A. oryzase

2. Phương pháp phân lập, sản xuất mốc giống và nuôi cấy tạo sinh khối

3. Thu nhận protease

4. Thiết bị

5. Xác định hoạt tính protease




1. Giới thiệu chung về A. oryzase

• Thuộc bộ Plectascales , lớp Ascomycetes

• Đa dạng về loại enzyme

• Enzyme nội bào và ngoại bào

• Địa điểm :

Kho nguyên liệu, thùng chứa đựng gạo…

Cặn bã bia, bã rượu, lõi ngô, bã sắn…

• Dễ phát tán, dễ thích nghi




2. Phân lập, nhân giống và tạo sinh… a. Môi trường

KH2PO4 : 1,4

MgSO4.7H2O : 0,1

NH4NO3 : 10FeSO4.7H2O : 0,01

pH : 6,5

KCl : 0,5

Hồ tinh bột : 20

Nước : 1 lít

Môi trường phân lập (g/l) Môi trường nhân giống (g/l) Bột ngô : 20

Glucose : 10

Pepton : 10Cao Nấm men : 4

Nước : 1 lít

pH : 6.5




2. Phân lập, nhân giống và tạo sinh… b. Phân lập

• Phân lập trong môi trường tự nhiên

• Phân lập trong điều kiện sản xuất

• Phân lập trong môi trường đã hỏng c. Chuẩn bị mốc giống

• Trong ống thạch nghiêng (b.quản giống) • Trong bình tam giác (nhân giống nhỏ)

• Trong sàn, khay (nhân giống lớn)




2. Phân lập, nhân giống và tạo sinh…

d. Nuôi cấy tạo sinh khối

• Tuyệt đối thuần khiết

• Không được lẫn lộn bất kỳ một VSV nào

• Môi trường đảm bảo đầy đủ dinh dưỡng đ. Quy trình công nghệ sản xuất

• Sinh trưởng và tổng hợp • Thu nhận và tinh chế




2. Phân lập, nhân giống và tạo sinh…

đ. Quy trình công nghệ sản xuất Nuôi cấy

Thu nhận chếphẩm enzyme thô

Nghiền mịn

Trích ly

Lọc

Kết tủa enzyme Thu nhận kết tủa Sấy kết tủa

Tính chế kết tủa

Thu nhận chế phẩmenzyme tinh khiết

Enzyme tinh khiết

Phối trộn phụ gia

Enzyme thành phẩm

Lọc

Thức ăn chăn nuôi

Cồn/ sunfate amone





a. Phá vỡ cấu trúc của tế bào :• Nghiền nhỏ với cát, thủy tinh, nghiền bi;

• Siêu âm, tạo áp suất thẩm thấu cao;

• Trích ly bằng dung môi;

• Bằng enzyme phân hủy màng;



5/1/2012Protease từ vi sinh vật

26


b. Tinh sạch protease :

• Sắc ký trao đổi ion, lọc gel, ái lực…

• Ly tâm siêu tốc

• Điện di

đ. Chế phẩm protease thu được :

• Chế phẩm protease kỹ thuật • Chế phẩm protease tinh khiết




27

4. Thiết bị a. Nồi hấp khử trung môi trường

• Tiêu diệt toàn bộ vi sinh vật tạp nhiễm

• Chuyển hóa các chất phức tạp

• Điều kiện kỹ thuật Thời gian : 45-60 phút

Áp suất : 1atm

Nhiệt độ : 118-125oC




28

4. Thiết bị b. Máy nghiền búa

• Thu nhận protease nội bào

Hình 3. Máy (thiết bị) nghiền búa




29

4. Thiết bị c. Máy trích ly

• Thu nhận protease nội bào

• Thông số kỹ thuât:

Thời gian : 40-60 phút Nhiệt độ : 25oC

Hình 4. Máy (thiết bị) trích ly kiểu vít tải




30

4. Thiết bị d. Thiết bị lọc

• Loại bỏ các thành phần không cần thiết

Hình 5. Sơ đồ thiết bị lọc chân không thùng quay tác động liên tục




31

4. Thiết bị đ. Thiết bị sấy phun

• Thu nhận protease ở dạng tinh thể

Hình 6. Thiết bị sấy phun




32

5. Xác định hoạt tính của protease a. Phương pháp anson cải tiến • Dựa vào sự thủy phân protease bởi enzyme.

• Enzyme thừa và tủa protein chưa được tủa được loại bởi acid trichloracetide.

• Định lượng sản phẩm tạo thành bằng phản ứng màu với thuốc thử Foline

b. Phương pháp chuẩn độ Formol

• Dựa vào sự tăng của nhóm carbocyl hay amyltự do trong dịch thủy phân.




33

Kết luận

ế




34

Kết luận • Xác định được một số chủng VSV

• Các cách phân loại protease

• Các phương pháp thu nhận, phân lập,

nuôi cấy protease Nước là dung môi thích hợp;

Ethanol 75% để tủa;

Chiết rút và tủa ở nhiệt độ 3-5oC;

• Ý nghĩa và vai trò của protease




35

Cảm ơn

Sự theo dõi của cô và các bạn ! Thực hiện bởi

Nhóm 3_11SHLT

Đà Nẵng, 11/2011

Documents

Bao Cao Co Van-protase