Dott. Giorgio Portera

Dip. di Biotecnologie Mediche e Medicina Traslazionale

Università degli Studi di Milano

““““Biologia e genetica di popolazioni in ambito Biologia e genetica di popolazioni in ambito Biologia e genetica di popolazioni in ambito Biologia e genetica di popolazioni in ambito forense, dalla traccia biologica alle ultime forense, dalla traccia biologica alle ultime forense, dalla traccia biologica alle ultime forense, dalla traccia biologica alle ultime

metodiche per lo studio dei polimorfismi STR'smetodiche per lo studio dei polimorfismi STR'smetodiche per lo studio dei polimorfismi STR'smetodiche per lo studio dei polimorfismi STR's””””

www.biologiaforense.itwww.biologiaforense.itwww.biologiaforense.itwww.biologiaforense.it

Laboratorio di Biologia ForenseLaboratorio di Biologia ForenseLaboratorio di Biologia ForenseLaboratorio di Biologia Forense

• Ispezione: ricerca tracce (sangue, saliva, sperma,capelliIspezione: ricerca tracce (sangue, saliva, sperma,capelliIspezione: ricerca tracce (sangue, saliva, sperma,capelliIspezione: ricerca tracce (sangue, saliva, sperma,capelli………….).).).)

• Estrazione (resine magnetiche, colonnine, fenolo/cloroformio)Estrazione (resine magnetiche, colonnine, fenolo/cloroformio)Estrazione (resine magnetiche, colonnine, fenolo/cloroformio)Estrazione (resine magnetiche, colonnine, fenolo/cloroformio)

• Quantificazione (rtQuantificazione (rtQuantificazione (rtQuantificazione (rt----pcr)pcr)pcr)pcr)

• Amplificazione (multiplex)Amplificazione (multiplex)Amplificazione (multiplex)Amplificazione (multiplex)

• Tipizzazione (310Tipizzazione (310Tipizzazione (310Tipizzazione (310----3130XL)3130XL)3130XL)3130XL)

PROFILI GENOTIPICI PER LA RICOSTRUZIONE DELLA PROFILI GENOTIPICI PER LA RICOSTRUZIONE DELLA PROFILI GENOTIPICI PER LA RICOSTRUZIONE DELLA PROFILI GENOTIPICI PER LA RICOSTRUZIONE DELLA DINAMICA DELITTUOSADINAMICA DELITTUOSADINAMICA DELITTUOSADINAMICA DELITTUOSA

Tipologia di repertiTipologia di repertiTipologia di repertiTipologia di reperti

Vestiti con evidenti Vestiti con evidenti Vestiti con evidenti Vestiti con evidenti tracce ematichetracce ematichetracce ematichetracce ematiche

Vestiti con minime Vestiti con minime Vestiti con minime Vestiti con minime tracce ematichetracce ematichetracce ematichetracce ematiche

Ricerca di tracce ematiche da reperti Ricerca di tracce ematiche da reperti Ricerca di tracce ematiche da reperti Ricerca di tracce ematiche da reperti ripuliti dopo il crimineripuliti dopo il crimineripuliti dopo il crimineripuliti dopo il crimine

Indumenti usati per Indumenti usati per Indumenti usati per Indumenti usati per travisare il viso,investigati travisare il viso,investigati travisare il viso,investigati travisare il viso,investigati per la ricerca di saliva e per la ricerca di saliva e per la ricerca di saliva e per la ricerca di saliva e

residui epitelialiresidui epitelialiresidui epitelialiresidui epiteliali

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Ricostruzioni parentali daRicostruzioni parentali daRicostruzioni parentali daRicostruzioni parentali da

resti cadaverici o osseiresti cadaverici o osseiresti cadaverici o osseiresti cadaverici o ossei

TEST GENERICI E DI SPECIETEST GENERICI E DI SPECIETEST GENERICI E DI SPECIETEST GENERICI E DI SPECIE

Utili nellUtili nellUtili nellUtili nell’’’’identificazione del tipo di fluido biologico identificazione del tipo di fluido biologico identificazione del tipo di fluido biologico identificazione del tipo di fluido biologico

TEST GENERICITEST GENERICITEST GENERICITEST GENERICI

• combur test combur test combur test combur test ���� sangue (test colorimetrico)sangue (test colorimetrico)sangue (test colorimetrico)sangue (test colorimetrico)

• amilasi amilasi amilasi amilasi ���� saliva (test colorimetrico)saliva (test colorimetrico)saliva (test colorimetrico)saliva (test colorimetrico)

• psa psa psa psa ���� sperma (immunocromatografico)sperma (immunocromatografico)sperma (immunocromatografico)sperma (immunocromatografico)

TEST DI SPECIE TEST DI SPECIE TEST DI SPECIE TEST DI SPECIE

• obti test: specifico per sangue di primate obti test: specifico per sangue di primate obti test: specifico per sangue di primate obti test: specifico per sangue di primate (immunocromatografico)(immunocromatografico)(immunocromatografico)(immunocromatografico)

• semelogenina: specifico per sperma umano (proteina secreta in semelogenina: specifico per sperma umano (proteina secreta in semelogenina: specifico per sperma umano (proteina secreta in semelogenina: specifico per sperma umano (proteina secreta in

vescicole seminali, immunocromatografico)vescicole seminali, immunocromatografico)vescicole seminali, immunocromatografico)vescicole seminali, immunocromatografico)

COMBUR TEST COMBUR TEST COMBUR TEST COMBUR TEST ---- ComburComburComburCombur3333 TestTestTestTest®®®®EEEE (ROCHE)(ROCHE)(ROCHE)(ROCHE)

Commercializzato per la diagnosi clinica delle urine, Commercializzato per la diagnosi clinica delle urine, Commercializzato per la diagnosi clinica delle urine, Commercializzato per la diagnosi clinica delle urine,

saggio colorimetrico per il livello di glucosio, proteine saggio colorimetrico per il livello di glucosio, proteine saggio colorimetrico per il livello di glucosio, proteine saggio colorimetrico per il livello di glucosio, proteine

e eritrocitie eritrocitie eritrocitie eritrociti

sostanza: tetrametilbenzidinasostanza: tetrametilbenzidinasostanza: tetrametilbenzidinasostanza: tetrametilbenzidina

il tampone reagisce colorandosi di verde in presenza il tampone reagisce colorandosi di verde in presenza il tampone reagisce colorandosi di verde in presenza il tampone reagisce colorandosi di verde in presenza

di attivitdi attivitdi attivitdi attivitàààà perossidasica dellperossidasica dellperossidasica dellperossidasica dell’’’’emoglobinaemoglobinaemoglobinaemoglobina

FALSI POSITIVI: perossidasi vegetali,FALSI POSITIVI: perossidasi vegetali,FALSI POSITIVI: perossidasi vegetali,FALSI POSITIVI: perossidasi vegetali,

ruggine, ossidanti vari, ecc.ruggine, ossidanti vari, ecc.ruggine, ossidanti vari, ecc.ruggine, ossidanti vari, ecc.

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COMBUR TEST COMBUR TEST COMBUR TEST COMBUR TEST ---- ComburComburComburCombur3333 TestTestTestTest®®®®EEEE (ROCHE)(ROCHE)(ROCHE)(ROCHE)

AMILASI TESTAMILASI TESTAMILASI TESTAMILASI TEST

test per diagnosi clinica della pancreatite acutatest per diagnosi clinica della pancreatite acutatest per diagnosi clinica della pancreatite acutatest per diagnosi clinica della pancreatite acuta

• sostanza: 2sostanza: 2sostanza: 2sostanza: 2----clorocloroclorocloro----4444----nitrofenolo legato a nitrofenolo legato a nitrofenolo legato a nitrofenolo legato a

maltotrioso indicatore colorimetrico che reagisce maltotrioso indicatore colorimetrico che reagisce maltotrioso indicatore colorimetrico che reagisce maltotrioso indicatore colorimetrico che reagisce

con lcon lcon lcon l’’’’α----amilasi della saliva,in presenza di saliva si amilasi della saliva,in presenza di saliva si amilasi della saliva,in presenza di saliva si amilasi della saliva,in presenza di saliva si

colora di giallocolora di giallocolora di giallocolora di giallo

• FALSI POSITIVI: sudore, urina, altri fluidi corporeiFALSI POSITIVI: sudore, urina, altri fluidi corporeiFALSI POSITIVI: sudore, urina, altri fluidi corporeiFALSI POSITIVI: sudore, urina, altri fluidi corporei

AMILASI TESTAMILASI TESTAMILASI TESTAMILASI TEST

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PSA TESTPSA TESTPSA TESTPSA TEST

• test per diagnosi clinica del tumore alla prostata, delltest per diagnosi clinica del tumore alla prostata, delltest per diagnosi clinica del tumore alla prostata, delltest per diagnosi clinica del tumore alla prostata, dell’’’’iperplasia iperplasia iperplasia iperplasia

prostatica benigna (bph) e delle infezioni alla prostata; saggioprostatica benigna (bph) e delle infezioni alla prostata; saggioprostatica benigna (bph) e delle infezioni alla prostata; saggioprostatica benigna (bph) e delle infezioni alla prostata; saggio

immunologico semiquantitativo per la determinazione dellimmunologico semiquantitativo per la determinazione dellimmunologico semiquantitativo per la determinazione dellimmunologico semiquantitativo per la determinazione dell’’’’antigene antigene antigene antigene

specifico prostatico nel sangue, siero e plasmaspecifico prostatico nel sangue, siero e plasmaspecifico prostatico nel sangue, siero e plasmaspecifico prostatico nel sangue, siero e plasma

•sostanza: anticorpi anti antigene psa coniugati a oro colloidalesostanza: anticorpi anti antigene psa coniugati a oro colloidalesostanza: anticorpi anti antigene psa coniugati a oro colloidalesostanza: anticorpi anti antigene psa coniugati a oro colloidale

utilizzato per identificare tracce di spermautilizzato per identificare tracce di spermautilizzato per identificare tracce di spermautilizzato per identificare tracce di sperma

•falsi positivi: in donne utilizzatrici di pillole anticoncezionafalsi positivi: in donne utilizzatrici di pillole anticoncezionafalsi positivi: in donne utilizzatrici di pillole anticoncezionafalsi positivi: in donne utilizzatrici di pillole anticoncezionalililili

OBTI TESTOBTI TESTOBTI TESTOBTI TEST: anticorpi anti hb umani coniugati a particelle anticorpi anti hb umani coniugati a particelle anticorpi anti hb umani coniugati a particelle anticorpi anti hb umani coniugati a particelle

cromogene (blu)cromogene (blu)cromogene (blu)cromogene (blu)

utilizzato per la diagnosi specie utilizzato per la diagnosi specie utilizzato per la diagnosi specie utilizzato per la diagnosi specie ---- specifico per il sangue dei primati specifico per il sangue dei primati specifico per il sangue dei primati specifico per il sangue dei primati

superiori.superiori.superiori.superiori.

TEST PER SEMELOGENINA: specifico per sperma umano (TEST PER SEMELOGENINA: specifico per sperma umano (TEST PER SEMELOGENINA: specifico per sperma umano (TEST PER SEMELOGENINA: specifico per sperma umano (α-

semelogeninasemelogeninasemelogeninasemelogenina ,proteina secreta in vescicole seminali)proteina secreta in vescicole seminali)proteina secreta in vescicole seminali)proteina secreta in vescicole seminali)

TEST SPECIFICI TEST SPECIFICI TEST SPECIFICI TEST SPECIFICI

LAMPADA CRIMESCOPELAMPADA CRIMESCOPELAMPADA CRIMESCOPELAMPADA CRIMESCOPELAMPADA CRIMESCOPELAMPADA CRIMESCOPELAMPADA CRIMESCOPELAMPADA CRIMESCOPElampada con luce monocromatica a lunghezza lampada con luce monocromatica a lunghezza lampada con luce monocromatica a lunghezza lampada con luce monocromatica a lunghezza

dddd’’’’onda variabile (415onda variabile (415onda variabile (415onda variabile (415----650 nm)650 nm)650 nm)650 nm)

Principio: differente assorbimento/emissione tra Principio: differente assorbimento/emissione tra Principio: differente assorbimento/emissione tra Principio: differente assorbimento/emissione tra fluidi biologici e substratifluidi biologici e substratifluidi biologici e substratifluidi biologici e substrati

SLIP con tracce di SLIP con tracce di SLIP con tracce di SLIP con tracce di spermaspermaspermasperma

FODERA di una giacca FODERA di una giacca FODERA di una giacca FODERA di una giacca con tracce di sudorecon tracce di sudorecon tracce di sudorecon tracce di sudore

22R

22 O

22Q

22N

22P

22I

22L

22M

Esempio di un reperto con numerose aree Esempio di un reperto con numerose aree Esempio di un reperto con numerose aree Esempio di un reperto con numerose aree luminescentiluminescentiluminescentiluminescenti

LuminolLuminolLuminolLuminolLuminolLuminolLuminolLuminolreazione di chemioluminescenza: lreazione di chemioluminescenza: lreazione di chemioluminescenza: lreazione di chemioluminescenza: l’’’’energia energia energia energia

proviene dallproviene dallproviene dallproviene dall’’’’ossidazione dellossidazione dellossidazione dellossidazione dell’’’’emoglobina emoglobina emoglobina emoglobina

Le reazioni di chemioluminescenza del luminolo che Le reazioni di chemioluminescenza del luminolo che Le reazioni di chemioluminescenza del luminolo che Le reazioni di chemioluminescenza del luminolo che avvengono in una soluzione basica generano un avvengono in una soluzione basica generano un avvengono in una soluzione basica generano un avvengono in una soluzione basica generano un intermedio energeticamente ricco con conseguente intermedio energeticamente ricco con conseguente intermedio energeticamente ricco con conseguente intermedio energeticamente ricco con conseguente emissione di luce da parte dellemissione di luce da parte dellemissione di luce da parte dellemissione di luce da parte dell’’’’acido 3acido 3acido 3acido 3----aminoftalico . aminoftalico . aminoftalico . aminoftalico .

Per ottenere chemioluminescenza dal luminolo in una Per ottenere chemioluminescenza dal luminolo in una Per ottenere chemioluminescenza dal luminolo in una Per ottenere chemioluminescenza dal luminolo in una soluzione acquosa serve un reagente ossidante come il soluzione acquosa serve un reagente ossidante come il soluzione acquosa serve un reagente ossidante come il soluzione acquosa serve un reagente ossidante come il perossido di idrogenoperossido di idrogenoperossido di idrogenoperossido di idrogeno

La CATALISI avviene con la presenza di ioni metallici del tipo: Fe (III) o Cu (II), …o da enzimi come la perossidasi

ReazioneReazioneReazioneReazione

Ferro emoglobinaFerro emoglobinaFerro emoglobinaFerro emoglobina

08 Agosto 1997 Omicidio di Sergio CAFASSO 19

Impronte di piedi rilevate con il luminolImpronte di piedi rilevate con il luminol

Comparazione di un’ impronta di piede insanguinato con quella di uno dei due indagati

Internal part of carInternal part of carInternal part of carInternal part of car

Car trunkCar trunkCar trunkCar trunk

Spare tireNEGATIVE

Internal part of car trunkNEGATIVE

Metal area of car trunk with luminol

C.S. reconstruction

( car trunk cover was changed by coachworker!!!)

ESTRAZIONE DEL DNAESTRAZIONE DEL DNAESTRAZIONE DEL DNAESTRAZIONE DEL DNA

• RESINE AGLI OSSIDI DI SILICIO SU COLONNA RESINE AGLI OSSIDI DI SILICIO SU COLONNA RESINE AGLI OSSIDI DI SILICIO SU COLONNA RESINE AGLI OSSIDI DI SILICIO SU COLONNA –––– DNA affine alla DNA affine alla DNA affine alla DNA affine alla resina, rimane legato nella membrana della colonna, resina, rimane legato nella membrana della colonna, resina, rimane legato nella membrana della colonna, resina, rimane legato nella membrana della colonna, successivamente viene eluitosuccessivamente viene eluitosuccessivamente viene eluitosuccessivamente viene eluito

• RESINE AGLI OSSIDI DI SILICIO SU BIGLIE MAGNETICHE RESINE AGLI OSSIDI DI SILICIO SU BIGLIE MAGNETICHE RESINE AGLI OSSIDI DI SILICIO SU BIGLIE MAGNETICHE RESINE AGLI OSSIDI DI SILICIO SU BIGLIE MAGNETICHE –––– stessa stessa stessa stessa chimica del precedente metodo, ma la resina chimica del precedente metodo, ma la resina chimica del precedente metodo, ma la resina chimica del precedente metodo, ma la resina èèèè libera in soluzione. libera in soluzione. libera in soluzione. libera in soluzione. Viene poi recuperata con un magnete e il DNA eluitoViene poi recuperata con un magnete e il DNA eluitoViene poi recuperata con un magnete e il DNA eluitoViene poi recuperata con un magnete e il DNA eluito

• RESINE SINTETICHE AFFINI AL DNA PER CARICA RESINE SINTETICHE AFFINI AL DNA PER CARICA RESINE SINTETICHE AFFINI AL DNA PER CARICA RESINE SINTETICHE AFFINI AL DNA PER CARICA ELETTROSTATICA: il DNA si lega alla resina al variare del pH delELETTROSTATICA: il DNA si lega alla resina al variare del pH delELETTROSTATICA: il DNA si lega alla resina al variare del pH delELETTROSTATICA: il DNA si lega alla resina al variare del pH della la la la soluzionesoluzionesoluzionesoluzione

ESTRAZIONE CON ESTRAZIONE CON ESTRAZIONE CON ESTRAZIONE CON RESINA MAGNETICARESINA MAGNETICARESINA MAGNETICARESINA MAGNETICA

• metodo di estrazione del DNA che metodo di estrazione del DNA che metodo di estrazione del DNA che metodo di estrazione del DNA che ne sfrutta la carica negativane sfrutta la carica negativane sfrutta la carica negativane sfrutta la carica negativa

• metodica veloce e modulabile a metodica veloce e modulabile a metodica veloce e modulabile a metodica veloce e modulabile a seconda del tipo di traccia seconda del tipo di traccia seconda del tipo di traccia seconda del tipo di traccia ((((possibilitpossibilitpossibilitpossibilitàààà di aumentare il numero di aumentare il numero di aumentare il numero di aumentare il numero dei lavaggi, estrazione da diversi dei lavaggi, estrazione da diversi dei lavaggi, estrazione da diversi dei lavaggi, estrazione da diversi volumivolumivolumivolumi) ) ) )

• estrazione estrazione estrazione estrazione automatizzabileautomatizzabileautomatizzabileautomatizzabile

resina +resina +resina +resina +

DNA DNA DNA DNA ----

resina resina resina resina ----DNA DNA DNA DNA ----

QUANTIFICAZIONEQUANTIFICAZIONEQUANTIFICAZIONEQUANTIFICAZIONE

• fase fondamentale per la traccia forense (spesso priva di storia) COSA SI È ESTRATTO e QUANTO DNA USARE per amplificare;

• anche test per la DIAGNOSI DI SPECIE, viene amplificata una sonda specifica umana, come alfa-satellite del chr. 17 per metodo QUANTIBLOT o h-tert transcrittasi inversa per QUANTIFILER Human in real-time. DNA batterico non determina errori di valutazione perché non viene rilevato

• valutazione di una eventuale inibizione attraverso l’amplificazione contemporanea di 2 DNA: templato (FAM) dell’estratto e IPC (internal pcr control, VIC);

• possibilità di quantificare usando una sonda genomica umana (h-TERT, human telomerase reverse transcriptase su chr. 5) ed una sonda umana maschile (SRY, sex reversal, utile per violenze sessuali)

QUANTIFICAZIONE CON REAL TIMEQUANTIFICAZIONE CON REAL TIMEQUANTIFICAZIONE CON REAL TIMEQUANTIFICAZIONE CON REAL TIME

I campioni vengono quantificati con STANDARD con DNA noto e privo di inibizione

importanza dell’IPC nella lettura della quantificazione dei campioni per valutare la qualità del DNA estratto (eventuale PURIFICAZIONE)

INIBIZIONE: non èpossibile valutare la

presenza o assenza di DNA. PURIFICAZIONE

Real Real Real Real ----TimeTimeTimeTime

IPC dei campioni e standard, curva molto simile

IPC inibito

• Amplificare e tipizzare lAmplificare e tipizzare lAmplificare e tipizzare lAmplificare e tipizzare l’’’’intero genoma sarebbe improponibile intero genoma sarebbe improponibile intero genoma sarebbe improponibile intero genoma sarebbe improponibile per costi e tempoper costi e tempoper costi e tempoper costi e tempo

• Studi di popolazioni hanno permesso di individuare marcatori Studi di popolazioni hanno permesso di individuare marcatori Studi di popolazioni hanno permesso di individuare marcatori Studi di popolazioni hanno permesso di individuare marcatori con le seguenti caratteristiche:con le seguenti caratteristiche:con le seguenti caratteristiche:con le seguenti caratteristiche:

1.1.1.1. POLIMORFICI POLIMORFICI POLIMORFICI POLIMORFICI anche in popolazioni isolate (lo stesso marcatore deve presentare diverse varianti nella popolazione)

2.2.2.2. STABILISTABILISTABILISTABILI alle mutazioni (importanza della scelta dei primers)

3.3.3.3. EQUILIBRIOEQUILIBRIOEQUILIBRIOEQUILIBRIO con la legge di Hardy-Weinberg

4.4.4.4. INDIPENDENTIINDIPENDENTIINDIPENDENTIINDIPENDENTI

AMPLIFICAZIONE AMPLIFICAZIONE AMPLIFICAZIONE AMPLIFICAZIONE caratteristiche di un marcatore forense

Microsatelliti STR (Short Tandem Repeat)Microsatelliti STR (Short Tandem Repeat)Microsatelliti STR (Short Tandem Repeat)Microsatelliti STR (Short Tandem Repeat)

•GATA è la sequenza del core-repeat

•Il microsatellite in questione è un tetranucleotidico

•Le varianti (allelialleliallelialleli) hanno un numero diverso di repeat

...ACAGAT GATA GATA GATA GATA GATA GATA GATA GATA TGT...

8 ripetizioni

...ACAGAT GATA GATA GATA GATA GATA GATA GATA GATA GATA TGT...

9 ripetizioni

...ACAGAT GATA GATA GATA GATA GATA GATA GATA GATA GATA GATA TGT...

10 ripetizioni

STRUTTURA DI UN STRSTRUTTURA DI UN STRSTRUTTURA DI UN STRSTRUTTURA DI UN STR

...ACAGATGATAGATAGATAGATAGATAGATAGATAGATAGATAGATAGATAGATATGT..

Per convenzione gli alleli degli STR vengono chiamati in base al numero di repeat

NOME DEL MARCATORE

POTENZIALI ALLELI; IDENTIFICATI CON IL NUMERO DI RIPETIZIONI DEL CORE REPEAT

SCELTA DEGLI STRSCELTA DEGLI STRSCELTA DEGLI STRSCELTA DEGLI STR

Studi di genetica di popolazione hanno permesso di isolare 13 Studi di genetica di popolazione hanno permesso di isolare 13 Studi di genetica di popolazione hanno permesso di isolare 13 Studi di genetica di popolazione hanno permesso di isolare 13 specifici marcatori STR, denominati Loci Codis specifici marcatori STR, denominati Loci Codis specifici marcatori STR, denominati Loci Codis specifici marcatori STR, denominati Loci Codis

CSF1PO

D5S818

D21S11

TH01

TPOX

D13S317

D7S820

D16S539 D18S51

D8S1179

D3S1358

FGA

VWA

AMEL

AMEL

Studi di popolazione 13 Loci CodisStudi di popolazione 13 Loci CodisStudi di popolazione 13 Loci CodisStudi di popolazione 13 Loci Codis

MULTIPLEX

• I 13 loci Codis vengono amplificati in un’unica reazione di PCR, spesso con aggiunta di altri loci per aumentarne il potere discriminante

• gli attuali kit di amplificazione caratterizzano contemporaneamente 15 loci STR (Multiplex)

• le attuali multiplex permettono di amplificare concentrazioni di estratto inferiori ai 50 pg/µl

• DNA nucleare cellula diploide ~ 6 pg, 50/6= 8 cellule/µl

20 cellule x reazione!!!20 cellule x reazione!!!20 cellule x reazione!!!20 cellule x reazione!!!

TIPIZZAZIONE

I frammenti vengono separati e caratterizzati tramite elettroforesi capillare utilizzando un sequenziatore automatico

(310, 3100, 3130XL), leggendo i segnali dei diversi DYE che discriminano i frammenti overlappanti

RAW DATA – DATO GREZZO

PROFILO GENETICO ELABORATOPROFILO GENETICO ELABORATOPROFILO GENETICO ELABORATOPROFILO GENETICO ELABORATO

•un profilo secondo gli standard FBI (codis) e’ formato da 13 marcatori

•poniamo che ogni marcatore presenti alleli la cui frequenza e’ pari a 0,1

nella popolazione di riferimento

•poniamo che ogni marcatore presenti lo stesso allele su entrambi i

cromosomi (omozigosi)

•la probabilita’ di ottenere la combinazione data per ogni marcatore e’ pari a

0,1*0,1=0,01

•la probabilita’ di ottenere la combinazione data per tutto il profilo e’

0,01*0,01*…0,01 (13 volte) ovvero 10-26, 1 su miliardi di miliardi di

individui……..

DIMOSTRAZIONE D’IDENTITA’’’’

IL PROFILO PUO’ ESSERE RITENUTO UNICO

indiziato

vittima

sperma vestaglia

tampone vaginale

tampone vaginale

indiziato

vittima

vestaglia

tampone vaginale

indiziato

vittima

vestaglia

tampone vaginale

indiziato

vittima

vestaglia

INTERPRETAZIONE DI UN PROFILO MISTO CON CONTRIBUTO DI INTERPRETAZIONE DI UN PROFILO MISTO CON CONTRIBUTO DI INTERPRETAZIONE DI UN PROFILO MISTO CON CONTRIBUTO DI INTERPRETAZIONE DI UN PROFILO MISTO CON CONTRIBUTO DI TRE SOGGETTITRE SOGGETTITRE SOGGETTITRE SOGGETTI

VITTIMAVITTIMAVITTIMAVITTIMA

PRIMO INDIVIDUOPRIMO INDIVIDUOPRIMO INDIVIDUOPRIMO INDIVIDUO

SECONDO INDIVIDUOSECONDO INDIVIDUOSECONDO INDIVIDUOSECONDO INDIVIDUO

Test di PaternitTest di PaternitTest di PaternitTest di Paternitàààà

L.R.= 99,9999%L.R.= 99,9999%L.R.= 99,9999%L.R.= 99,9999%www.biologiaforense.it

Test di paternità= storie di vita!

- richieste test paternità da padri, che a seguito di tradimento scoperto o crisi famigliare mettono in dubbio propria paternità

- richieste test paternità da madri con dubbio partner

- richieste test paternità da figli.

Compatibilità parziale tra profilo tracce

e proprietario appartamento

Compatibilità parziale tra profilo tracce

e proprietario appartamento

Compatibilità parziale tra profilo tracce

e proprietario appartamento

LABORATORIO DI DATTILOSCOPIA FORENSE

IDENTITA’ CON 18 PUNTICONFRONTO IN B/N

BPA : Bloodstain Pattern AnalysisSTUDIO DELLE TRACCE EMATICHE

-morfologia

-quantità

-posizione

-direzione

-distribuzione

ricostruzione della scena del crimine

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Studio delle quantita’ e delle direzioni d’impatto

ANALISI DI LABORATORIO DEI DATI RACCOLTI

Punto di convergenza Punto d’origine

Dott. Giorgio PorteraDott. Giorgio PorteraDott. Giorgio PorteraDott. Giorgio Portera

giorgioportera@libero.it