Creatinina Sp

7/23/2019 Creatinina Sp

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SIGNIFICACION CLINICA

La creatinina, compuesto sumamente difusible, se elimina

del organismo casi exclusivamente por ltracin renal. Su

determinacin en suero, as como el clearance de creatini-

na endgena constituyen parmetros importantes para el

diagnstico de diversas afecciones renales. Sin embargo,

debido a los problemas prcticos inherentes a la determi-

nacin del clea-rance (recoleccin de orina en nios, etc.),

la determinacin de creatinina srica es ms utilizada como

ndice de funcionalismo renal.

FUNDAMENTOS DEL METODO

La creatinina reacciona con el picrato alcalino en mediotamponado, previa desproteinizacin con cido pcrico,

obtenindose un cromgeno que se mide a 510 nm.

REACTIVOS PROVISTOS

A. Reactivo A:cido pcrico 41,4 mmol/l.

B. Reactivo B:buffer glicina/NaOH 1 mol/l.

S. Standard:solucin de creatinina 20 mg/l.

REACTIVOS NO PROVISTOS

Agua destilada.

INSTRUCCIONES PARA SU USO

Reactivos Provistos: listos para usar.

PRECAUCIONES

Los reactivos son para uso diagnstico "in vitro".

Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales

de trabajo en el laboratorio de anlisis clnicos.

Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de

acuerdo a la normativa local vigente.

Reactivo B:R36/38: irrita los ojos y la piel. S26/28: en caso

de contacto con los ojos y la piel, lvense inmediatamente y

abundantemente con agua y acdase a un mdico. S37/39:

usar guantes adecuados y proteccin para los ojos/la cara.

ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DEALMACENAMIENTO

Los Reactivos Provistos son estables a temperatura am-

biente hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja.

MUESTRA

Suero u orina

a) Recoleccin: obtener suero de la manera usual. Puede

emplearse tambin orina de 2 o de 24 horas. Su recolec-

cin debe efectuarse en un recipiente perfectamente limpio

mantenido en refrigerador (2-10oC) durante el tiempo d

recoleccin. Medir la diuresis, tomar una alcuota y efec

una dilucin 1:50 de la misma. En caso de que la diu

sea de 2 horas, multiplicar el volumen medido por 12

calcular la cantidad de creatinina eliminada durante 24 ho

b) Aditivos: no se requieren. No se recomienda el us

plasma pues se obtienen resultados menores en un

un 15%.

c) Sustancias interferentes conocidas: hemlisis lige

moderada no interere, pero no debe emplearse sangre

ya que aproximadamente el 60% del material Jaffe-rea

de los eritrocitos no es creatinina.

Referirse a la bibliografa de Young para los efectos ddrogas en el presente mtodo.

d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento

conveniente utilizar el suero recin obtenido. Si esto n

posible puede mantenerse hasta 24 horas en refriger

(2-10oC) sin variaciones de los resultados.

Orinas destinadas a esta determinacin pueden mante

se hasta 4 das en refrigerador (2-10oC) sin agregad

conservantes.

MATERIAL REQUERIDO(no provisto)

- Espectrofotmetro o fotocolormetro.

- Micropipetas y pipetas para medir los volmenes

cados.- Tubos.

- Reloj o timer.

CONDICIONES DE REACCION

- Longitud de onda: 510 nm en espectrofotmetro o

fotocolormetro con ltro verde (500-540 nm).

- Temperatura de reaccin: temperatura ambiente, qu

debe exceder los lmites de 15 y 30oC.

- Tiempo de reaccin: 35 minutos

- Volumen de muestra: 0,7 ml

- Volumen nal de reaccin: 3,5 ml

PROCEDIMIENTO

En caso de que la muestra a utilizar sea suero, de

efectuarse una desproteinizacin de la siguiente mane

a 0,7 ml de suero agregar 3,5 ml de Reactivo A. Mezc

por inversin. Dejar reposar 10 minutos y centrifuga

3000 r.p.m. durante 5 minutos como mnimo.

En tubos marcados B (Blanco), S (Standard), Ds y

(Desconocidos suero y orina), colocar:

CreatininaMtodo colorimtrico con desproteinizacin pa

determinacin de creatinina en suero u o


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B S Ds D

o

Desproteinizado - - 3 ml -

Standard - 0,5 ml - -

Orina diluida (1:50) - - - 0,5 ml

Agua destilada 1 ml 0,5 ml - 0,5 ml

Reactivo A 2 ml 2 ml - 2 ml

Reactivo B 0,5 ml 0,5 ml 0,5 ml 0,5 ml

Mezclar por inversin. Incubar 20 minutos a temperatura

ambiente. Luego leer en espectrofotmetro a 510 nm o

en fotocolormetro con ltro verde (500-540 nm), llevando

a cero el aparato con agua destilada.

MICROTECNICA

Si es necesario usar menos cantidad de muestra y el

aparato de lectura lo permite, pueden desproteinizarse

0,4 ml de suero con 2 ml de Reactivo A separando 1,5 ml de

sobrenadante y adicionando a ste 0,25 ml de Reactivo

B. En ambos casos el Standard y Blanco se procesan

de la forma habitual.

ESTABILIDAD DE LA MEZCLA DE REACCION FINAL

El color de la reaccin es estable durante 10 minutos

por lo que la absorbancia debe ser leda dentro de ese

lapso. El Blanco y el Standard pueden leerse hasta los

60 minutos.

CALCULO DE LOS RESULTADOS

Corregir las lecturas S y D restndoles el Blanco (B).

1) Creatinina en suero (mg/l) = Dsx f

20 mg/l

f = S

Do

2) Creatinina en orina (g/24 hs) = x V S

siendo:

V = volumen de la diuresis expresado en litros/24 horas.

La frmula surge de: D

o

Creatinina en orina (g/24 hs) = x 0,020 g/l x50 xV

S

donde:

0,020 g/l = concentracin del Standard

50 = factor de dilucin

3) Depuracin de Creatinina Endgena (D.C.E.):

Creatinina en orina (g/24 hs)D.C.E. ml/min

= x694 ml/min

Creatinina en suero (mg/l)

donde: g/24 hs 1.000 mg x 1.000 ml 1.000.000 ml694 ml/min

= = =

mg/l 1 mg x1.440 min 1.440 min

CONVERSION DE UNIDADES

Creatinina (mg/l) = Creatinina (mg/dl) x 10

Creatinina (umol/l) = Creatinina (mg/dl) x 88,4

METODO DE CONTROL DE CALIDAD

Si la muestra a ensayar es suero, procesar 2 niveles d

material de control de calidad (Standatrol S-E 2 nive

con concentraciones conocidas de creatinina, con c

determinacin. En el caso de muestras de orina, utiliza

control con base de orina.

VALORES DE REFERENCIA

Suero: 8 a 14 mg/l

Orina: 0,9 a 1,5 g/24 horas.

D.C.E.: 80 a 140 ml/min (promedio 125 ml/min)

Estos valores de D.C.E. corresponden a adultos hast

aos.

Se recomienda que cada laboratorio establezca sus pro

valores de referencia.

LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO

- Ver Sustancias interferentes conocidas en MUESTRA

- En caso de haberse comprobado la presencia de aceto

tato en la muestra, una vez agregado el Reactivo A (y a

de centrifugar en el caso de suero), colocar en bao

agua a ebullicin durante 5 minutos, con lo que se elim

casi totalmente esta interferencia. Enfriar y continuar c

se indica en PROCEDIMIENTO.

- Luego de la desproteinizacin del suero con Reactiv

pueden observarse eventualmente escasas partc

en el sobrenadante, las que no intereren en la reac

- El factor colorimtrico puede utilizarse cuando la reac

se efecta entre 20 y 25oC. De no ser as debe proces

simultneamente un standard con cada lote de dete

naciones. De todos modos la temperatura de reacci

debe exceder los lmites de 15 y 30

o

C.

PERFORMANCE

a) Reproducibilidad:procesando replicados de las mis

muestras en un mismo da se obtuvieron los siguie

resultados:

Nivel D.S. C.V.

7,4 mg/l 0,19 mg/l 2,5 %

14,1 mg/l 0,25 mg/l 1,7 %

b) Linealidad: la reaccin es lineal hasta 40 mg/l, en c

de que los resultados superen este valor, deber diluirs

solucin coloreada nal 1:2 1:4 con el Blanco de React

repetir la lectura y multiplicar el resultado por la diluefectuada.

c) Recuperacin:agregando cantidades conocida

creatinina a distintos sueros se obtuvo una recupera

entre 96 y 101%.

d) Lmite de deteccin:depende del fotocolormetro

pleado y de la longitud de onda utilizada. En espectrofot

tro con cubetas de caras paralelas de 1 cm de espesor,

un cambio de absorbancia de 0,001 D.O., el mnimo cam

de concentracin detectable ser de 0,09 mg/l.


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Wiener la2000 Rosario - Argen

MWiener Laboratorios S.A.I.C.Riobamba 29442000 - Rosario - Argentinahttp://www.wiener-lab.com.arDir. Tc.: Viviana E. CtolaBioqumicaProducto Autorizado A.N.M.A.T.Disp. N: 252/75 - 1211/00

PRESENTACION

Kit para 220 determinaciones (Cd.1260001).

BIBLIOGRAFIA

- Biggs, H.G. & Cooper, J.M. - Clin. Chem. 7/6:655 (1961).

- Martinek, R.G. - Amer. Med. Technol. 32/6:700 (1970).

- Searcy, R.L. - Diagnostic Biochemistry, Mc. Graw - Hill

Book Co. New York (1969).

- Teger-Nilsson, A.C. - Scand. J. Clin. Lab. Invest. 13:326

(1961).

- Young, D.S. - "Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests",

AACC Press, 4thed., 2001.

SIMBOLOS

Los siguientes smbolos se utilizan en todos los kit

reactivos para diagnstico de Wiener lab.

CEste producto cumple con los requerimientos prevpor la Directiva Europea 98/79 CE de productos sanitpara el diagnstico "in vitro"

P Representante autorizado en la Comunidad EuropeaV Uso diagnstico "in vitro"

X Contenido suciente para ensayos

H Fecha de caducidad

l Lmite de temperatura (conservar a)

No congelar

F Riesgo biolgico

Volumen despus de la reconstitucin

Contenido

g Nmero de lote

M Elaborado por:

NocivoXn

Corrosivo / Castico

IrritanteXi

i Consultar instrucciones de uso

Calibrador

Controlb

b Control Positivo

c Control Negativo

h Nmero de catlogo

Calibr.

Cont.

UR1

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