ENTEROBACTERIACEAE

CAMPYLOBACTER

HELICOBACTER

ÚLOHY - Enterobaktérie

SKUPINA 1 SKUPINA 2 SKUPINA 3 SKUPINA 4

Selektívne a diagnostické pôdy používané na kultiváciu enterobaktérií

Raussov fenomén Burriho tušová metóda

Určovanie biochemických vlastností enterobaktérií(Hajnova pôda, ENTEROTEST)

Dôkaz produkcie ureázyTvorba indolu

Campylobacterjejuni – všeobecná charakteristika

Campylobacterjejuni – ochorenia, laboratórna diagnostika a liečba

H. pylorivšeobecná charakteristika

H. pyloriochorenia, laboratórna diagnostika a liečba

MIKROSKOPIA

GRAM

BURRI

Escherichia coli - fakultatívne anaeróbna - gramnegatívna palička, pohyblivá

v hrubom čreve teplokrvných živočíchov. Je jedným z najdôležitejších zástupcov črevnej mikroflóry

Salmonella)- fakultatívne anaeróbna - gramnegatívna palička, pohybliváČlenenie rodu - revidované, donedávna boli jednotlivé sérotypypovažované za samostatné druhy. Genetická analýza - rod obsahuje jediný známy druh, Salmonellaenterica, ktorý sa člení na viacero poddruhov.

E. coli Proteus

Klebsiella (BURRI)

Salmonella Shigella

KULTIVÁCIA

Krvný agar

Endo agar

DC (dezoxycholátcitrátový) agar

Opuzdrené kmene tvoria hlienovité kolónie

- nepohyblivá

plazivý rast, Raussov fenomén : – koncentrický rast od jedinej kolónie

deoxycholát-citrátovom agare

Pohyblivosť P. mirabilis je možné identifikovať aj na základe Raussovho fenoménu. Vyšetrovaný kmeň sa naočkuje do stredu platne s kultivačnou pôdou (krvný agar). Počas kultivácie dochádza k postupnému plazivému narastaniu baktériovej populácie od stredu k okrajom petriho misky. Tento jav sa označuje ako Raussov fenomén.

ENDO AGAR Selektivita Endo agaru je vytvorená kombináciou siričitanu a bázického fuchsínu, ktoré potláčajú

rast gram-pozitívnych mikroorganizmov. Koliformné baktérie skvasujúce laktózu tvoria ružovo-červené až silno červené vypuklé kolónie,

v niektorých prípadoch so zlatým kovovým leskom. Rovnako sa sfarbuje médium okolo kolónií. Mikroorganizmy, ktoré laktózu nefermentujú sú bezfarebné, dobre pozorovateľné oproti

ružovému pozadiu pôdy.

DEZOXYCHOLÁT - CITRÁTOVÝ AGAR

(DEOXYCHOLATE CITRATE AGAR) Je to tuhá, selektívna pôda,

izolácia patogénnych črevných enterobaktérií

rozlišovanie Salmonell a Shigell.

Selektivita je dosiahnutá pridaním dezoxycholanu sodného a citronanov, ktorý inhibujegrampozitívne baktérie

Enterobaktérie sú diferencované skvasovaním laktózy v pôde.

Tvorba kyseliny je indikovaná neutrálnou červeňou, vznikom červeno sfarbených kolónií.

Niektoré kmene Salmonell a Proteusov (H2S pozitívne) tvoria na tejto pôde šedé až čierne stredy.

Rast E. coli je na tejto pôde čiastočne potlačený, ale niektoré vitálnejšie kmene môžu rásť ako sýtoružové až červené kolónie.

Testovanie biochemickej aktivity

HAJNOVA pôda

ENTEROTESTY

Hajnova pôda – šikmo naliata, tuhá červená pôda na stanovenie biochemických vlastností enterobaktérií.

ZLOŽENIE:

glukóza, sacharóza, laktóza, železité soli

+ farebný indikátor pH (fenolová červeň)

Zožltnutie pôdy znamená pozitívne skvasovanie.

Pôda obsahuje soli Fe, baktérie tvoriace sírovodík spôsobia sčernanie dolnej časti pôdy.

Baktérie, ktoré tvoria plyn, spôsobia trhliny, bubliny v pôde.

Pôdu očkujeme kľučkou, naočkujeme vždy iba jednu izolovanú kolóniu.

7. Sérotypizácia enterobaktérií

Na podložnom sklíčku – suspenzia s FR

1) Suspenzia + kvapka polyvalentných sér

s + poly 1,2,3 = aggl+ S+ poly 4,5,6 = aggl –

2) Suspenzia + kvapka monovalentných sér

s + mono 1 = aggl.+ s + mono 2 = aggl – s + mono 3 = aggl.–

Výsledok – testovaný kmeň je typ 1

Widalova reakcia – diagnostika brušného týfusu

kultiváciacia (priama diagnostika):

- krvi (7.-10. deň),

- stolice (od 2. týždňa),

- kostnej drene, moču (od 3. týždňa)

a

- zisťovanie aglutinínov v sére - Widalova reakcia (nepriama diagnostika)

- - protilátky proti O a H antigénom S. typhi

- štvornásobný vzostup titra protilátok

- akútne ochorenie alebo na vyhľadávanie nosičov

Znalosti klinického obrazu a patogenézy - Ochorenie začína ingesciou baktérií.Inkubačný čas je 1-2 týždne.

Pri väčšom inokule sa môže vyskytnúť akútna gastroenteritída.

Baktérie prenikajú cez mukózu tenkého čreva ( invázia) endocystózou do submukózy.

Množia sa v submukózze a sú vychytávané do lymfatických uzlín, kde sa množia v makrofágoch,

dostávajú sa do krvi (perzistujúca bakterémia) a

orgánov RES a ostatných orgánov (hemorhagie, kožná rozeola, orgánové komplikácie)

0

20

40

60

80

100

1 2 3 4 5 6 7 8

moč

stolica

sérum

krv

Campylobacter- paličkovité , G-, pohyblivé, 11 druhov ,7 poddruhov

- Vyžaduje mikroerofilné prostredie, teplotu 42*C

Campylobacter jejuni :

- gastroenteritída, u pacientov so zníženouimunitou –

- Infikuje sliznicu jejuna, ilea a colon, ktorá je edematózna, krvavá, tvorba krýpt, abscesov.Infiltrácia do lamina propria.

- enterotoxín, cytoptický toxín, endotoxín

- Hydina

Campylobacter coli - gastroenteritis,

Campylobacter fetus – septikémia, artritída, tromboflebitída, meningitida

Lab dg :

- kultivácia na selektívnych pôdach, mikroskopia, biochemická identifikácia

- Terapia: ERY

https://pdfs.semanticscholar.org/95c9/b9105222c5149f36764cba96cbb545d0b660.pdf

Helicobacter Špirálovité paličky, G-, v súvislosti s B gastritídou,

žalúdočným a duodenálnym vredom., príp. Ca –

Patogenéza

– produkcia ureázy – vytvára oblak amoniaku, ktorý chráni baktériu před účinkom žal. kyseliny,

- pohyblivosť, - tvorba mucinázy – prienik baktérie do mukóznych vrstiev

– adherencia – prichytenie baktérie na intracelulárne spoje

– zápal s infiltráciou mononukleárov v lamina propria

- uniká prítomným protilátkam IgA – svojoulokalizáciou v mukóze.

Neexistuje zvierací rezervoár – prenosinterhumánny

Terapia: ATB . Bizmutové soli, nitroimidazol a amoxicilin alebo TTC https://sk.wikipedia.org/wiki/Helicobacter_pylori#/media/S%C3%BAbor:H_pylori_virulence_facto

rs_en.png

H. pylori – laboratórna diagnostika

Zdroje:

Kompaníková Jana, Elena Nováková, Martina Neuschlová: Mikrobiológia nielen pre medikov - 2. upravené a doplnené vydanie. Multimediálna podpora výučby klinických a zdravotníckych disciplín :: Portál Jesseniovej lekárskej fakulty Univerzity Komenského [online] , [cit. 27. 10. 2020]. Dostupný z WWW: https://portal.jfmed.uniba.sk//clanky.php?aid=398. ISSN 1337-7396.

Murray, P. R., Rosenthal, K. S., & Pfaller, M. A. (2013). Medical microbiology. Philadelphia: Elsevier/Saunders.

https://www.alphamedical.sk/casopis-invitro/helicobacter-pylori