Practica 1 Dx. de

Enteroparasitosis

Asucena FloresArely GómezOmar RamírezUlises Vega 4CM14

PROFS:• Q.B.P. JAIME ISRAEL FALCÓN ACOSTA• Q.B.P. NANCY CALDERÓN MAGALLÁN• M. en C. ALEJANDRA TAVERA TAPIA

PARÁSITO Organismo que vive a expensas de otro

(su hospedero), del cual obtiene fundamentalmente alimento, puede

provocar daño.

CLASIFICACIÓN GENERAL DE PARASITOS

PROTOZOARIO

HELMINTOS

ECTOPARÁSITOS

PROTOZOARIO REINO PROTISTA AGUA MOVIMIENTO

› Pseudópodos › Flagelos › Cilios 

CICLO DE VIDA› Trofozoito nutrición y crecimiento› Quiste:

Resistente a diferentes condiciones ambientales

Fase importante para la dispersión

HELMINTOSNEMATODOS

(gusanos redondos)

Cestodos o Tenias

Trematodos (gusanos planos)

ENTAMOEBA HYSTOLITICA

EJEMPLO DE ENTEROPARASITOSIS

TAENIA SOLIUM

ENTAMOEBA HYSTOLITCA Fisiología y estructura

  Entamoeba histolytica

Tamaño (diámetro;µm)

 

Trofozoíto 12-50 µm Quiste 10-20 µm

Patrón de cromatina nuclear periférica

Anillo fino y disperso

Cariosoma Central, nítido

Eritrocitos ingeridos Presentes

Estructura quística  Nº de núcleos 1-4

Barras cromatoideas Extremos redondeados

TA

EN

IA S

OLIU

M

 Gusano plano en forma de cinta dividido en segmentos o proglótidos.

Color amarillo blanquecino; Vive anclado a la pared mediante un escólex (cabeza) piriforme con cuatro ventosas y un róstelo con una doble corona de ganchos, el tamaño del escólex es similar al de una cabeza de alfiler

Órganos masculinos y femeninos bien diferenciados, otorgándole el fenotipo de hermafrodita.

No tiene aparato digestivo y se alimenta por absorción a través de la piel. 

COPROPARASITOSCOPICO (CPS)

Estudio que se realiza bajo sospecha de presencia parasitaria: larvas, o huevos de diferentes familias de helmintos, amebas,

tenias ,protozoos.

EXPRESIÓN NUMÉRICA

CUALITATIVO CUANTITATIVO ESPECIALES

EN FRESCO CONCENTRACIÓN (FERREIRA)

TAMIZADO

CENTRIFUGADO FLOTACIÓN (FAUST)

MÉTODO DE GRAHAM

SEDIMENTACIÓN (RITCHIE)

SONDEO DUODENAL

EXAMEN DIRECTO: consiste en observar la consistencia de la muestra, presencia de sangre, moco, gusanos adultos y si tamizamos(*) las heces es

posible observar proglótidos o helmintos pequeños.

EXAMEN EN FRESCO: Colocar en un porta objetos con ayuda de una pipeta Pasteur una gota de solución salina y otra de yodo, tomar un fragmento de las heces picando con el asa de platino, homogenizamos y observamos en el microscopio. Podemos observar en un paciente parasitado trofozoitos, quistes, coccidias, esporas de microsporido, huevos y larvas de helmintios y células del huésped como leucocito y eritrocitos.

ETAPA PREANALÍTICA

TOMA DE MUESTRAS FECALES

Recogerse en contenedor limpioNo deberá contaminarse con tierra ,agua u orinaNo deberá contener : Bario, Bismuto,aceite mineral, antibióticosLlevar al laboratorio dentro de las dos primeras horas posteriores a su evacuaciónHeces líquidas :llevar al laboratorio en 30 minutosHeces blandas: deben examinarse antes de una hora de su expulsiónLas muestras deberán colocarse en sustancias conservadoras comoMIF(folmaldehído-merthiolate-yodado)PVA(alcohol polivinilico)Refrigerarla a 4 grados centigrados

ETAPA ANALÍTICA

TÉCNICA DE FAUSTFue descrito en 1938 basada en:

• La flotación con salmuera originalmente dada por Bass en 1906 usada para la recuperación de huevos de helmintos.

• En 1910, el mismo Bass introdujo la centrifugación en su técnica de flotación con salmuera.

• En 1924, Lane ideó un refinamiento para la técnica combinada de centrifugación-flotación con salmuera que consistió en realizar el lavado del sedimento antes de centrifugar con la salmuera.

• Faust y Cols posteriormente realizaron pruebas donde combinaron los principios de flotación y gravitación. Se basa en la densidad del sulfato de zinc que es de 1.18º Baumé, que por tener mayor peso que algunas formas parasitarias ocasiona que éstas floten, además no produce deformación de los mismos

PROCEDIMIENTO• Se hace una suspensión homogénea con aproximadamente 1 g

de materia fecal y 10 ml de agua. En caso de utilizar conservador: la suspensión puede ser mantenida a temperatura ambiente por tiempo prolongado.

• Se filtra la suspensión a través de la coladera colocada en el embudo, colectando el filtrado directamente en el tubo.

• Se centrifugan los tubos a 2,000 rpm durante un minuto.

• Se decanta el sobrenadarte y se re suspende el sedimento con agua. Se centrífuga nuevamente. Se repite la misma operación hasta que el sobrenadarte se observe limpio.

• Se decanta el sobrenadarte, se agrega 2 ó 3 ml de solución de sulfato de zinc 1.18º Baumé, resuspender todo el sedimento, se completa todo el volumen con más solución de sulfato y se centrífuga a 2,000 rpm durante un minuto.

• Con el asa recién flameada se recoge la muestra de la película superficial que se encuentra en el menisco y se deposita en el portaobjetos; que previamente tenía una gota de lugol parasitológico, se mezcla con un ángulo de cubreobjetos y se recubra con el mismo.

• La preparación se observa con objetivos de 10X y 40X.

LIMITACIONES

En los casos de huevos más pesados como los de Taenia sp., trematodos y de Ascaris infértiles, frecuentemente falla, por lo que se debe recurrir a métodos desedimentación.

TÉCNICA DE RITCHIE

UTILIDAD• Es muy sencilla y nos permite observar diferentes parásitos

en una muestra de materia fecal.

• La mezcla normal en el tracto intestinal por lo general no asegura una distribución uniforme de trofozoitos de protozoarios móviles, huevos de helmintos y larvas de nematodos. Sin embargo el examen de materia fecal directo o en fresco puede revelar o no parásitos, dependiendo de la intensidad de la infección.

FUNDAMENTO

• Aumentar el número de parásitos en el volúmen de heces.

• La solución salina isotónica da las condiciones adecuadas para que la célula se mantenga viva.

• El medio ideal para todo tipo de parásito que pueda encontrarse en las muestras de heces, en cualquier etapa de su desarrollo, es la solución salina fisiológica, y el lugol en la práctica ha demostrado su eficacia para la tinción e identificación de parásitos intestinales.

VOLÚMEN Y ELECCIÓN

• En heces sólidas o líquidas se utiliza el equivalente al tamaño de una aceituna.

• En heces líquidas, en general se utiliza todo el volúmen

• Se prestará especial atención a la presencia de moco, pus o sangre, en tal caso se procederá a seleccionar dichas zonas para procesar

HOMOGENEIZADO

• Se agrega al recipiente de la muestra solución fisiológica al 0.85%.

• En una proporción 1 vól. De materia fecal y 9 vól. De sol. Salina.

• En heces de consistencia blanda es suficiente agitar con una varilla de vidrio para obtener una suspensión homogénea.

• En heces de consistencia sólida, se disgregan las heces con varilla de vidrio, hasta obtener una suspensión homogénea.

• En heces líquidas no es necesario agregar SF, se agita el recipiente que contiene la muestra y se procede a la filtración.

FLITRACIÓN

• Se filtra la suspensión a través de una gasa doble colocada en un embudo.

• La suspensión se recoge en tubo cilíndrico- cónico (15 ml) para centrifuga, ayudándonos con la varilla de vidrio.

• El tubo se llena hasta 2 cm del borde superior.

• Tener presente que en heces grasas o con moco, éstos pueden quedar atrapados en la gasa, por lo tanto puede que sea innecesario la utilización de la misma, se debe valorar según las características físicas de las heces.

CENTRIFUGACIÓN

LAVADOS

• Se descarta el sobrenadante.

• Se agrega 5 ml de SF.

• Se tapa el tubo.

• Se resuspende el sobrenadante.

• Se completa el vól. Con SF hasta 2 cm del borde sup. Del tubo.

• Se tapan y se tara.

• Se vuelve a centrifugar.

• Se descarta el sobrenadante.

• Este procedimineto puede realizarse 1 vez más.

• HASTA 3 LAVADOS

FIJACIÓN• Se descarta el sobrenadante.

• Se agrega 5ml de formol al 10%.

• Tapar el tubo y resuspender el sobrenadante.

• Tapar el tubo y agitar.

• Se completan 10ml con formol al 10%.

• Dejar actuar 5 minutos.

• Adicionar 3 ml de éter sulfúrico o acetato de etilo, tapar el tubo y agitar (el éter quita las grasas).

• Centrifugar.

LIMPIEZA FINAL

• Se descarta el sobrenadante con un golpe seco.

• Con el tubo invertido y con un hisopo de algodón se limpia y seca el 1/3 sup. De la superficie interna del tubo.

• Con el fin de evitar que restos adheridos a las paredes se deslicen hacia el fondo y se mezclan con el sedimento.

• Se procede a la visualización microscópica.

LIMITACIONES

• Las preparaciones con lugol, pueden destruir las formas sensibles como los trofozoitos.

• La muestra utilizada es tan pequeña que es poco representativa.

• Si se emplean heces preservadas, el formol sirve de diluyente.

MÉTODO CUANTITATIVO DE FERREIRA

• Es un método de concentración de una

suspensión de materia fecal , que tiene de

característica considerarse como

cuantitativo

Forma de reportarEl total de huevecillos o larvas encontradas se multiplica por

5:Se obtiene el número de

huevos o larvas por gramo de heces

Es muy útil para el diagnóstico de Nematodos como:

Áscaris lumbricoides, unciariasis

estrongiloidosis

TAMIZADO CONSIDERADO UN MÉTODO MECÁNICO DE SEPARACIÓN , UTILIZADO PARA LA RECUPERACIÓN DE PARÁSITOS ADULTOS Y/O SEGMENTOS DE ELLOS .

MÉTODO:

UTILIZANDO TAMICES DE DIFERENTES TAMAÑOS DE MAYAS, EN UN ORDEN DE MAYOR A MENOR , SE COLOCA UNA MUESTRA BIOLÓGICA (HECES FECALES), A LA CUAL SE LE DEJA CAER AGUA Y CON AYUDA DE UN ABATELENGUA Y MOVIMIENTOS LENTOS SE DISUELVE, PERMITIENDO QUE LA MATERIA FECAL SEA ELIMINADA .QUEDANDO POR CONSIGUIENTE LAS ESTRUCTURAS PARASITARIAS.UTILIDAD:

RECUPERACIÓN DE:•ASCARIS LUMBRICOIDES •TRICHURIS TRICHURIA•TAENIA SPP.

MÉTODO DE GRAHAM

TOMA DE MUESTRA POR LA MAÑANA ANTES DE DEFECAR Y DEL BAÑO

MATUTINO

UTILIDAD:

ENTEROBIUS VERMICULARIS A.LUMBRICOIDES TAENIA SPP.

SONDEO DUODENAL/CAPSULA DE BEAL

MÉTODO:ES USADA EN CASO DE QUE EL CPS ES NEGATIVO

EL PACIENTE INGIERE EN AYUNAS UNA CAPSULA DE GELATINA QUE CONTIENE 90 CM DE HILO DE NYLON Y UN CONTRA PESO AL FINAL DE ESTE , EL EXTREMO DEL HILO QUE PERMANECE FUERA DEL CUERPO ES SUJETADO A LA MEJILLA DEL PACIENTE CON CINTA ADHESIVA. Y EN UN PERIODO APROXIMADO DE 4 HRS. DESPUÉS DE QUE LA CAPSULA SEA DESINTEGRADA EN EL ESTOMAGO Y EL HILO HAYA PASADO AL DUODENO, EL HILO SERA EXTRAÍDO Y EL LIQUIDO QUE SE ENCUENTRE IMPREGNÁNDOLO SERA DEPOSITADO CON UNA TÉCNICA DE EXPRIMIDO EN UNA CAJA DE PETRI, PARA SU POSTERIOR OBSERVACIÓN EN BUSCA DE TROFOZOITOS (MEDIANTE MICROSCOPIA)

ETAPA POTSANALÍTICA

INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS E INFORME

AL MEDICO

REPORTE DE LA FASE

PARASITARIA ENCONTRADA, ASÍ COMO EL GENERO Y LA

ESPECIE