Upload
deniz-mostarac
View
63
Download
0
Embed Size (px)
DESCRIPTION
ppt on enzymes
Citation preview
1
ENZIMI SU KATALIZATORI BIOLOKOG PORJEKLA
SA ANORGANSKIM KATALIZATORIMA IMAJU BROJNE SLINOSTI:
AKTIVNI U MINIMALNIM KOLIINAMA
NE ULAZE U SASTAV PRODUKATA
NE MJENJAJU KONSTANTU RAVNOTEE REAKCIJE
UBRZAVAJU HEMIJSKE REAKCIJE
ALI I BROJNE RAZLIKE:
MNOGO SU EFIKASNIJI
POKAZUJU ODREENU SPECIFINOST PREMA SUPSTRATU I VRSTI REAKCIJE
POTO SU PROTEINI, PODLONI SU DENATURACIJI
IMAJU POLUIVOT
NJIHOVA AKTIVNOST OVISI O BROJNIM KONTROLNIMMEHANIZMIMA I O DRUGIM FIZIKO HEMIJSKIM UVJETIMA (pH, temperatura, inhibitori, aktivatori, koncentr. supstrata i produkata itd.)
2
M.M. ENZIMA= 9 1000 kDa
AMINOKISELINSKI SASTAV ENZIMA JE ISTI KAO I KOD DRUGIH PROTEINA, A KOLIINA POJEDINH A.K. POKAZUJE VELIKE VARIJACIJE OD ENZIMA DO ENZIMA TO UKAZUJE O RAZLIITOM PORJEKLU POJEDINIH ENZIMA.
ENZIMI IMAJU PRIMARNU, SEKUNDARNU, TERCIJARNU (posebno vanu), A NEKI I KVATERNARNU I SUPRAKVATERNARNU STRUKTURU
ENZIMI SU PROTEINI KOJI U SVOJOJ STRUKTURI IMAJU AKTIVNI CENTAR (JEDNOKOMPONENTNI ENZIM) ILI DODATAK PROTEINSKOM DIJELU KOJI SE ZOVE AKTIVNA GRUPA KOENZIM ( DVOKOMPONENTNI ENZIM).
AKTIVNI CENTAR
AKTIVNI CENTAR PREDSTAVLJA DIO ILI VIE DIJELOVA POLIPEPTIDNOG LANCA KOJI STUPAJU U INTERAKCIJU SA SUPSTRATOM
AKTIVNI CENTAR JE TRODIMENZIONALNI ENTITET KOJI SVOJU FUNKCIJU MOE DA ISPOLJI TEK PO USPOSTAVLJANJU MINIMALNO TERCIJALRNE STRUKTURE ENZIMA
LOKACIJA AKTIVNOG CENTRA MORA BITI NA POVRINI ILI BLIZU POVRINE ENZIMA, DA BI MOGLO DOI DO INTERAKCIJE SA SUPSTRATOM
3
AMINOKISELINE KOJE ULAZE U SASTAV AKTIVNOG CENTRA IMAJU VIE ULOGA:
KONTAKTNA (vezuju supstrat za enzim)
KATALITIKA (imaju reakcione skupine koje djeluju prikatalizi)
ODRAVANJE KARAKTERISTINE STRUKTURE AKTIVNOG CENTRA I ENZIMA DA BI SUPSTRAT MOGAO SJESTI
STOGA BILO KOJA PROMJENA U REDOSLJEDU A.K. U POLIPEPTIDNOM LANCU ENZIMA (mutacije) MOE DOVESTI DO SMANJENE AKTIVNOSTI ENZIMA ILI DO NJEGOVE INAKTIVACIJE
AMINOKISELINE I NJIHOVE FUNKCIONALNE GRUPE KOJE NAJEE ULAZE U SASTAV AKTIVNOG CENTRA:
HISTIDIN (imidazolov prsten)
LIZIN ( - NH2)
GLUTAMAT (karboksilna grupa)
TRIPTOFAN (indolov prsten)
ASPARTAT (karboksilna grupa)
CISTEIN ( -SH grupa)
SERIN , TREONIN ( OH grupa)
4
VEZE IZMEU SUPSTRATA I AKTIVNOG CENTRA SU:
VODIKOVE
JONSKE
ELEKTROSTATSKE INTERAKCIJE
HIDROFOBNE INTERAKCIJE
van der WAALES-ove SILE
PRIVREMENE KOVALENTNE VEZE
VEZE SE USPOSTAVLJAJU PO PRINCIPU KLJU - BRAVA
AKTIVNA GRUPA - KOENZIM
KOENZIMI PREDSTAVLJAJU NEPROTEINSKI DIO DVOKOMPONENTNOG ENZIMA, KOJI IMAJU MALU MOLEKULSKU MASU I SLOENU STRUKTURU. PROTEINSKI DIO ENZIMA SE ZOVE APOENZIM.
VEZE IZMEU APOENZIMA I KOENZIMA MOGU BITI LABAVE ILI JAKE
APOENZIM POKAZUJE SPECIFINOST PREMA ODREENOM SUPSTRATU, DOK KOENZIM JE TAJ KOJI KATALIZIRA ODGOVARAJUU REAKCIJU
5
STOGA U ZAVISNOSTI OD VRSTE VEZE IZMEU KOENZIMA I APOENZIMA , KOENZIM SVOJU KATALITIKU AKTIVNOST MOE PRIMJENITI NA SAMO JEDNOM SUPSTRATU (jaka veza) ILI NA VIE NJIH (labava veza)
PREMA HEMIJSKOJ GRAI SVI KOENZIMI MOGU SE SVRSTATI U DVIJE GRUPE:
KOENZIMI VITAMINSKE PRIRODE
KOENZIMI NEVITAMINSKE PRIRODE
KOENZIMI VITAMINSKE PRIRODE
NAZIV DERIVAT
VITAMINA CILJNA GRUPA REAKCIJA
TIAMIN PIROFOSFAT (TPP)
NIKOTINAMID ADENIN DINUKLEOTID (NAD)
B1 CC
H+
DEKARBOKSILACIJA, TRANSFERACIJA
OKSIDO - REDUKCIJA NIACIN
NIKOTINAMID ADENIN DINUKLEOTID FOSFAT(NADP) H
+ OKSIDO - REDUKCIJA NIACIN
FLAVIN MONONUKLEOTID (FMN) H
+ OKSIDO - REDUKCIJA RIBOFLAVIN
FLAVIN ADENIN DINUKLEOTID (FAD) H
+, e OKSIDO - REDUKCIJA RIBOFLAVIN
LIPONSKA KISELINA H+ OKSIDO - REDUKCIJA
PIRIDOKSAL FOSFAT (PLP)
CC, NH2
DEKARBOKSILACIJA TRANSAMINACIJA
B6
KOKARBOKSILAZA III CO2 KARBOKSILACIJA BIOTIN
KOENZIM A (CoA) MASNE KISELINE TRANSACILIRANJE PANTOTENSKA
KISELINA TETRAHIDROFOLAT (H4F)
ILI KOENZIM F C1
( FORMILNA GRUPA) TRANSFORMILACIJA FOLNA KISELINA
CH METILIRANJE
LIPONSKA KISELINA
6
KOENZIMI NEVITAMINSKE PRIRODE
NAZIV CILJNA GRUPA REAKCIJA
HEM
URIDIN DIFOSFAT (UDP)
H2O2, e , O2
EERI, URONSKE KISELINE
OKSIDO - REDUKCIJA
TRANSGLIKOLIZACIJA IZOMERIZACIJA
CITIDIN DIFOSFAT (CDP) FOSFORIL HOLIN SINTEZA FOSFATIDA
KOENZIM Q (UBIKINON) e OKSIDO - REDUKCIJA
S- ADENOZIL METIONIN (SAM) C1 TRANSMETILIRANJE
FOSFO ADENOZIL FOSFO SULFAT (PAPS) SO4
2- TRANSSULFATACIJA
ADENOZID TRIFOSFAT (ATP) GUANOZID TRIFOSFAT (GTP)
TRANS -FOSFORILACIJA
URIDIN TRIFOSFAT (UTP) CITIDIN TRIFOSFAT (CTP) HPO4
2-, AMP TRANS
-FOSFORILACIJA
KOSUPSTRATI
HPO42-, AMP
FAKTORI KOJI UTIU NA AKTIVNOST ENZIMA
AKTIVNOST ENZIMA PREDSTAVLJA KOLIINU SUPSTRATA KOJA SE POD UTICAJEM ENZIMA RAZGRADI U JEDINICI VREMENA NA PRODUKTE PRI OPTIMALNIM USLOVIMA (nkat nanokatal, U internacionalna jedinica; 1U = 16,67 nkat)
FAKTORI KOJI UTIU NA AKTIVNOST ENZIMA SU:
KONCENTRACIJA ENZIMA KONCENTRACIJA SUPSTRATA pH TEMPERATURA AKTIVATORI I INHIBITORI ENZIMATSKE REAKCIJE
7
8
KONCENTRACIJA ENZIMA
BR
ZIN
A R
EA
KC
IJE
KONCENTRACIJA SUPSTRATA
BR
ZIN
A
RE
AK
CIJ
E
V max
V max/2
Km
V max- MAKSIMALNA BRZINA REAKCIJE
K m- MICHAELIS-MENTEN KONSTANTA
9
Koncentracija supstrata pri kojoj je brzina reakcije
jednaka maksimalne brzine reakcije (polovica enzima
zasiena supstratom) naziva se Michaelis-Menten konstanta.
Praktini znaaj konstante ogleda se u:
neovisnosti o koncentraciji enzima
omoguuje raunanje koncentracije supstrata koja je potrebna
za postizanje maksimalne brzine reakcije
Presudna je za otkrivanje inhibicije enzima
Mjera je za afinitet enzima prema supstratu
TEMPERATURA
BR
ZIN
A R
EA
KC
IJE
10
VRIJEME
BR
ZIN
A R
EA
KC
IJE
T1
T2 T3
T1 OPTIMALNA TEMPERATURA REAKCIJE
T2 5C VIA TEMPERATURA REAKCIJE
T3 10C VIA TEMPERATURA REAKCIJE
pH
BR
ZIN
A R
EA
KC
IJE
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
ARGINAZA
TRIPSIN
- AMILAZA
PEPSIN
11
AKTIVATORI ENZIMSKE REAKCIJE
AKTIVATORI KOJI DEMASKIRAJU AKTIVNI CENTAR
(alosteriki aktivatori, enteropetidaze, proteinkinaze)
AKTIVATORI KOJI DEINHIBICIJOM AKTIVIRAJU ENZIM(glutation diglutation, cistein, svjetlost , koenzimi)
Ca2+- lipazu, kreatin fosfokinaza
Cl- - amilaza
Fe2+ - sukcinat DH, aldehid oksidaza
JONI METALA
Zn2+ - alkohol DH, karboksipeptidaza, glutamat DH,
Mg2+- kreatin fosfokinaza, fosfogluko mutaza, kinaze
Mn2+- kreatin fosfokinaza, fosfogluko mutaza, arginazu, aminopeptidazu
12
INHIBITORI ENZIMSKE REAKCIJE
PROTEINI (antitripsin, antitrombin, antipepsin i sl.)
JONI METALA (Hg2+, Na+, Li+, Ca2+)
NESPECIFINI INHIBITORI (kiseline, baze, visokatemperatura)
ALOSTERIKI INHIBITORI (SUPSTRAT, PRODUKT,LIJEKOVI I DRUGI METABOLITI)
PODJELA INHIBICIJA
IREVERZIBILNA INHIBICIJA (uspostavlja sekovalentna veza izmeu inhibitora i funkcionalnih grupa enzima, tako da dolazi do promjene u hemijskoj strukturi enzima koja se ne moe reparirati otklanjanjem inhibitora- organofosforna jedinjenja, F-, As, monojod siretna kis.
REVERZIBILNA INHIBICIJA
13
KONKURETNA INHIBICIJA (inhibitor se vezuje za aktivni centar enzima jer je slian, po grai, supstratu- ALOPURINOL, L- TARTARAT, FORMALDEHID)
NEKONKURETNA INHIBICIJA (inhibitor se vee za enzim mimo aktivnog centra mijenjajui prostornu konfiguraciju enzima-ALOSTERIKI INHIBITORI, EDTA, Ca2+,)
REVERZIBILNA INHIBICIJA
AKONKURETNA INHIBICIJA (inhibitor se vee za kompleks enzim supstrat ne dozvoljavajui njihovo razdvajanje tj. prevoenje supstrata u produkt) MJEOVITA INHIBICIJA ( inhibitor ima sposobnost da na isti enzim ispolji bar dvije od gore navedenih inhibicija)
14
REVERZIBILNOST ENZIMSKE REAKCIJE
U PRINCIPU ENZIMSKE REAKCIJE SU URAVNOTEENE (REVERZIBILNE). POTO ENZIMI NE MJENJAJU KONSTANTU HEMIJSKE RAVNOTEE VE REAKCIJU SAMO UBRZAVAJU ONDA KAEMO DA RAVNOTEA REAKCIJE OVISI OD DRUGIH FAKTORA; KONCENTRACIJE I ENERGETSKOG NIVOA SUPSTRATA I PRODUKATA HEMIJSKE REAKCIJE
SMJER ENZIMSKE REAKCIJE UVJEK JE OKRENUT KA RAZGRADNJI KOMPONENTE KOJE IMA U VEOJ KONCENTRACIJI
IAKO ENZIMI KATALIZIRAJU HEMIJSKE REAKCIJE U OBA PRAVCA, ESTO SE DEAVA DA ZBOG VELIKE RAZLIKE U ENERGETSKIM NIVOIMA SUPSTRATA I PRODUKATA REAKCIJA MOE II SAMO U JEDNOM SMJERU (ireverzibilna reakcija)
ZBOG OVOG JE, ZA ODVIJANJE ODREENIH REAKCIJA U OBA SMJERA, POTREBNO PRISUSTVO DVA ILI VIE ENZIMA
GLUKOZA GLUKOZO-6-P GLUKOKINAZA + ENERGIJA
GLUKOZO 6 FOSFATAZA
15
REGULACIJA ENZIMSKE AKTIVNOSTI
POSTTRANSLACIJSKA REGULACIJA (KRATKOTRAJ-NA)
PROMJENA U BRZINI SINTEZE I RAZGRADNJEENZIMA MEHANIZMI INDUKCIJE I REPRESIJE (DUGOTRAJNA)
POSTTRANSLACIJSKA REGULACIJA MOE BITI :
ALOSTERIJSKA ( feed back regulation)
KOVALENTNA ( promjena funkcije i strukture enzima ugradnjom odreene hemijske grupe u enzim fosforilaza b fosfofosforilaza a)
OGRANIENA PROTEOLIZA (pepsinogen pepsin, tripsinogen tripsin)
ASOCIJACIJA I DISOCIJACIJA SUBJEDINICA (glutamat DH aktivna u formi od 8 subjedinica, a neaktivna u pojedinanim subjedinicama)
PROMJENA KONCENTRACIJE METABOLITA ( supstrat, produkt, lijekovi i drugi inhibitori i aktivatori)
16
KLASIFIKACIJA I NOMENKLATURA ENZIMA
NOMENKLATURA - SVAKOM ENZIMU PRIDODAT JE ODREENI ENZIMSKI BROJ KOJI SADRI ETIRI CIFRE KOJE SU MEUSOBNO ODVOJENE TAKAMA.
1. 1. 2. 15.
KLASA ENZIMA GRUPA
ENZIMA
PODGRUPA ENZIMA
INDIVIDUALNI BROJ ENZIMA
Naziv enzima sastoji se od tri dijela:
prvi dio oznauje supstrat na koji enzim
djeluje; drugi se dio odnosi na vrstu
reakcije koja je svojstvena tom enzimu; a
trei je dio sufiks -aza.
Meunarodnim dogovorom enzimi su
razvrstani (klasificirani) u est skupina
(klasa) prema nainu njihovog djelovanja.
17
U KOJU E KLASU BITI SVRSTAN NEKI ENZIM ZAVISIE O HEMIJSKOJ REAKCIJI KOJU TAJ ENZIM KATALIZIRA
POSTOJE 6 KLASA:
1. OKSIDOREDUKTAZE
2. TRANSFERAZE
3. HIDROLAZE
4. LIAZE
5. IZOMERAZE
6. LIGAZE
U SVAKOJ KLASI POSTOJI NEKOLIKO GRUPA KOJE SU NAINJENE NA OSNOVU HEMIJSKE VEZE KOJA SE TRANSFORMIE tj. NA OSNOVU HEMIJSKOG OSTATKA KOJI SLUI KAO DONOR
SVAKA GRUPA SE SASTOJI OD NEKOLIKO PODGRUPA KOJE SE FORMIRAJU NA OSNOVU HEMIJSKE PRIRODE AKCEPTORA tj. HEMIJSKOG OSTATKA KOJI UESTVUJE U REAKCIJI
18
oksidoreduktazeoksidoreduktazeoksidoreduktazeoksidoreduktaze prenose elektrone ili protone,
npr. alkohol-dehidrogenaza, laktat-dehidrogenaza,
glukoza oksidaza,
transferazetransferazetransferazetransferaze prenose metil-, hidroksimetil-, formil-,
karboksil-, karbamoil-, acil-, glukozil- i amino-
skupinu,
hidrolazehidrolazehidrolazehidrolaze razdvajaju esterske, eterske, peptidne i
glikozidne veze, zatim kiselinske anhidride, pa
veze -C-C- i -C-N i to tako da unose H+ i OH~ iz
vode,
lijazelijazelijazelijaze nehidrolitiki razdvajaju skupine, npr.
piruvat-dekarboksilaza, karboanhidraza
izomerazeizomerazeizomerazeizomeraze kataliziraju reakciju izomerizacije; to
su racemaze, epimeraze, cis-trans-izomeraze,
intramolekularne oksidoreduktaze; i
ligazeligazeligazeligaze koje kataliziraju vezanje dvaju supstrata uz
potrosak energijom bogatih spojeva; to su enzimi
aktivacije aminokiselina, kao glutamin-sintetaza i
acetil-CoA-karboksilaza.
19
OK
SID
OR
EDUK
TAZE
1.
DJELUJU NA ALKOHOLNU GRUPU DONORA
1.1.
DJELUJU NA KETO I ALDEHID GRUPU DONORA
1.2.
DJELUJU NA CH-CH GRUPU DONORA
1.3.
DJELUJU NA CH-NH2 GRUPU DONORA
1.4.
DJELUJU NA CH-NH GRUPU DONORA
1.5.
NAD/NADP 1.1.1. CITOHROM 1.1.2. O2 -1.1.3
NAD/NADP 1.2.1. CITOHROM 1.2.2. O2 -1.2.3 LIPONAT 1.2.4.
AKCEPTOR DONOR
NAD/NADP 1.3.1. CITOHROM 1.3.2. O2 - 1.3.3
NAD/NADP 1.4.1. O2 - 1.4.3
NAD/NADP 1.5.1. O2 - 1.5.3
OK
SID
OR
EDUK
TAZE
1.
DJELUJU NA NADH2 I NADPH2GRUPU DONORA
1.6.
DJELUJU NA AZOTNU GRUPU DONORA
1.7.
DJELUJU NA SH GRUPU DONORA
1.8.
DJELUJU NA HEM GRUPU DONORA
1.9.
DJELUJU NA DIFENOLE I SLINE GRUPU DONORA
1.10.
AKCEPTOR DONOR NAD/NADP 1.6.1. CITOHROM 1.6.2. S-S 1.6.4. HINON 1.6.5. AZOTNA GRUPA 1.6.6.
NAD/NADP 1.7.1. O2 - 1.7.3
NAD/NADP 1.8.1. CITOHROM 1.8.2. S-S 1.8.4. HINON 1.8.5. AZOTNA GRUPA 1.8.6.
O2 1.9.3. AZOTNA GRUPA 1.9.6.
O2 1.10.3.
20
TRAN
SFER
AZE
2.
PRENOSI C1 2.1.
PRENOSI SE KETO I ALDEHIDNU GRUPU
2.2.
ACILTRANSFERAZE 2.3.
GLIKOZILTRANSFERAZE 2.4.
PRENOS ALKILNIH I SRODNIH GRUPA
2.5.
METILTRANSFERAZE - 2.1.1. HIDROKSIMETIL I FORMIL TRANSFERAZE - 2.1.2. KARBOKSI I KARBAMIL TRANSFERAZE 2.1.3.
TRANSKETOLAZA 2.2.1.1. TRANALDOLAZE 2.2.1.2.
ACILTRANSFERAZE 2.3.1. AMINOACIL TRANSFERAZE 2.3.2.
HEKSOZIL TRANSFERAZE -2.4.1. PENTOZIL TRANSFERAZE 2.4.2.
DIMETILALILTRANSFERAZA -2.5.1. TIAMINPIRIDINILAZA - 2.5.1.2.
HID
RO
LAZE
3.
DJELUJU NA ESTERSKE VEZE DONORA
3.1.
DJELUJU NA GLIKOZILNA JEDINJENJA
3.2.
DJELUJU NA ETERE 3.3.
DJELUJU NA PEPTIDNU VEZU 3.4.
KARBOKSILNI ESTERI - 3.1.1. TIOLESTERI 3.1.2. FOSFAT MONOESTERI 3.1.3. FOSFAT DIESTERI 3.1.4. TRIFOSFAT MONOESTERI 3.1.5.SULFATNI ESTERI 3.1.6.
O - GLIKOZIDAZE - 3.2.1. N - GLIKOZIDAZE - 3.2.2.
TIOETER HIDROLAZA - 3.3.1.
AMINOACILPEPTID HIDROLAZA 3.4.1. PEPTIDIL- AMINOKISELINA HIDROLAZA 3.4.2. DIPEPTIDHIDROLAZA - 3.4.3. PEPTIDIL- PEPTIDO HIDROLAZA 3.4.4. AMINOPEPTIDAZA 3.4.11. KARBOKSIPEPTIDAZA 3.4.12.
21
LIAZ
E 4.
C-C LIAZE
4.1.
C-O LIAZE 4.2.
C-N LIAZE 4.3.
C-S LIAZA 4.4.
C- HALOID LIAZE 4.5.
KARBOKSILIAZA 4.1.1. ALDEHID LIAZA 4.1.2. LIAZE KETOKISELINA 4.1.3.
HIDROLIAZE 4.2.1.
AMONIJAK LIAZE 4.3.1. AMIDIN LIAZA -4.3.2.
CISTEIN DESULFHIDRALAZA - 4.4.1.1.
DDT- DEHIDROHLORINAZA - 4.5.1.1. DIHLORMETAN DEHALOGENAZA 4.5.1.3.
IZO
MER
AZE
5.
RACEMAZE I EPIMERAZE 5.1.
CIS-TRANS IZOMERAZE 5.2.
INTRAMOLEKULARNE OKSIDOREDUKTAZE
5.3.
INTRAMOLEKULARNE TRANSFERAZE
5.4.
INTRAMOLEKULARNE LIAZE
5.5.
DJELUJU NA HIDROKSIKISELINE 5.1.1. DJELUJU NA A.K. I NJIHOVE DERIVATE 5.1.2. DJELUJU NA EERE I NJIHOVE DERIVATE 5.1.3.
MALAT ISOMERAZA 5.2.1.1. RETINAL IZOMERAZA 5.2.1.3. RETINOL IZOMERAZA 5.2.1.7.
UZAJAMNO PRETVARANJE KETOZA U ALDOZE 5.3.1. UZAJAMNO PRETVARANJE ENOL I KETO GRUPE -5.3.2. PREMJETAJ C-C VEZE 5.3.3.
PREMJETAJU ACIL GRUPU -5.4.1. PREMJETAJU FOSFORIL GRUPU 5.4.2.
MUKONATCIKLOIZOMERAZA - 5.5.1.1 INOZITOL-3P SINTAZA - 5.5.1.4.
22
LIG
AZE
6.OBRAZUJU C- O VEZU
6.1.
OBRAZUJU C- S VEZU 6.2.
OBRAZUJU C- N VEZU 6.3.
OBRAZUJU C- C VEZU 6.4.
OBRAZUJU ESERSKU VEZU SA FOSFOROM
6.5.
LIGAZE A.K. RNK -6.1.1.
LIGAZE KISELINA TIOL 6.2.1.
LIGAZE KISELINA NH3 - 6.3.1. LIGAZE KISELINA A.K. -6.3.2. CIKLOLIGAZE 6.3.3.
PIRUVAT KARBOKSILAZA -6.4.1.1 ACETIL CoA KARBOKSILAZA - 6.4.1.2.
DNK LIGAZA (NAD+)
6.5.1.1.RNK LIGAZA 6.5.1.3.
Izraavanje enzimske aktivnosti
Katalitika aktivnost enzima moe da se izrazi u meunarodnim jedinicama (U), ili u katalima (kat), odnosno u njihovim podjedinicama nieg reda veliine (milikatalima, mikrokatalima i slino). Internacionalna jedinica (U) je ona aktivnost enzima koja omoguava transformaciju jednog mikromola supstrata u jednom minutu pod optimalnim standardnim uslovima: U = mol[S]/minut = mol min-1 Katal je ona aktivnost enzima koja transformie jedan mol supstrata u jednoj sekundi: kat = mol[S]/sek = mol sek-1 Za prevoenje internacionalnih jedinica u nanokatale potrebno je broj tih jedinica pomnoiti sa 16,67: U=mol/min=mol/60sec=1/60 mol/sec=1/60 kat=16,67 nkat Pri pretvaranju katala u internacionalne jedinice treba njihov broj da se pomnoi sa 6 107: kat= mol[S]/sec=60mol/min=60106 mol/min=6 107 U
23
OptiOptiOptiOptiki ki ki ki testtesttesttest
Mnogi enzimi koji prenose vodik trebaju NAD+ ili
NADP+ kao koenzim. Od dva atoma supstrata vodika (2H)
hidridni ion se prenosi na molekulu NAD+ ili NADP+ pa
nastaju NADH ili NADPH dok drugi atom vodika ide u
okoli kao H+. NADH i NADPH apsorbiraju svjetlo valne
duljine 340 nm pa se mjerenje pri toj valnoj duljini vrlo
esto primjenjuje za praenje aktivnosti enzima, jer je
promjena optike gustoe u jedinici vremena izravna
mjera za brzinu reakcije i time katalitike aktivnosti
enzima.
24
25
26
27
28
29
30
31
IzoenzimiIzoenzimiIzoenzimiIzoenzimi (ili izozimiizozimiizozimiizozimi) su enzimi koji imaju
razliite sekvence aminokiselina ali kataliziraju
istu hemijsku reakciju. Ovi enzimi obino imaju
razliite kinetike parametre (npr.
razliite KM vrijednosti), ili razliita regulatorna svojstva. Postojanje izoenzima omoguava fino
podeavanje metabolizma kako bi bio prilagoen
potrebama datog tkiva ili razvojnog doba (na
primjer laktat dehidrogenaza (LDH)).
32
33
34
35
36
37
38
Pseudoholinesteraza (holinesteraza) se nalazi u serumu, jetri, pankreasu i bijeloj masi mozga. Spada u tzv. plazma specifine enzime, jer se sintetie u hepatocitima, a svoju bioloku funkciju vri u krvnoj plazmi. Smatra se da holinesteraza ima detoksikacionu ulogu u krvnoj plazmi, poto razlae toksine estre holina.
39
Ispitivanje aktivnosti holinesteraze u serumu ima veliki znaaj za blagovremeno postavljanje dijagnoze trovanja preparatima koji se koriste kao insekticidi. Takoe, analiza aktivnosti ovog enzima je korisna za procjenu sintetske funkcije hepatocita. Kod izvjesnih osoba moe da bude prisutna tzv. atipina holinesteraza koja slabo razlae estre holina.
Osteopetroza je rijetka nasljedna bolest, prouzrokovana insuficijencijom osteoklasta. Zbog smanjene aktivnosti osteoklasta, poremeen je proces remodeliranja kostiju i perzistira primarno kalcificiran hrskaviavi matriks.