Espectrofotometría de Espectrofotometría de Absorción Molecular UV/VISAbsorción Molecular UV/VIS

50 MPR/100 /300

Varian Ibérica

NUEVA GAMA CARYNUEVA GAMA CARY

Cubre el rango completo de aplicaciones espectrofotométricas:

• Cary 50 Rutina y cinéticas rápidas

• Cary 100 Doble haz de prestaciones medias

• Cary 300 Altas prestaciones, cinéticas.

Espectrofotómetro de barrido ultra rápido.

CARY 50CARY 50Calidad Cary a buen precioCalidad Cary a buen precio

• Ganador de numerosos premios de diseño

• Premio a la Excelencia en Ingeniería

• Premio a la Innovación Revista R&D

• Premio al mejor desarrollo instrumental IBO

Cary 50Cary 50La revoluciónLa revolución

• Un instrumento que permite barrer de 190 a 1100 nm en menos de 3 segundos. (24.000 nm /min).

• Completamente inmune a la luz ambiental.• Haz muy estrecho para microcubetas.• Especialmente recomendado para cinéticas ultra rápidas:

• Permite la adquisición de hasta 80 puntos por segundo• Ideal para acoplar a Fibra Óptica• Un estándar de la espectrofotometría, con gran número de

unidades instaladas.• Robustez y fiabilidad ampliamente comprobadas.

Cary 50Cary 50Diseño ópticoDiseño óptico

• Lámpara de Xe • Alta intensidad• Totalmente fría• “Eterna”• Sólo ilumina en la medida

• Corrección de referencia (Doble Haz)

• Resolución 1,5 nm• Elimina la fotodegradación de

muestras• Cumple con 21CFR P-11

Cary 50 Cary 50 Accesorios de Fibra ópticaAccesorios de Fibra óptica

• Acopladores de Fibra óptica– Cuantificación sin cubeta

– Cinéticas en medios complejos

– Mínima pérdida de sensibilidad

– Sin mantenimiento

– Amplia gama de fibras disponible

– Máxima productividad                            

Cinéticas RápidasCinéticas Rápidas

Reacciones que se producen en pocos segundos

Requiere muy alta velocidad de medida.

Control de temperatura preciso y rápido

El CARY 50 aporta las características necesarias:• Hasta 80 puntos / segundo

• Lámpara fria sin calentamiento

• Compartimento abierto para adición de reactivos

• Sistema “STOP-FLOW” SFA-20

Cary 50:Cary 50:Accesorios multicubetasAccesorios multicubetas

• Accesorio automático 18 cubetas• A temperatura ambiente

• Termostatizado mediante baño externo peltier

• Permite la medida de 18 cinéticas inatendidas

• Paquete con espectrofotómetro muy competitivo

• Totalmente automático                                                                  

Cary 50Cary 50Gama de AccesoriosGama de Accesorios

• Gama completa de accesorios para muestras sólidas y líquidas

CARY 50 TRAYCELLCARY 50 TRAYCELL

•Wavelength range: 220-750nm•Pathlength: 0.2mm or 1.0mm

CARY 50 TRAYCELLCARY 50 TRAYCELL

•260nm peak of DNA

•WinUV DNA/RNA Application

•Cary 50 + Traycell

•4ul DNA

•Reproducibility +/-0.29%RSD

•260nm peak of DNA

•WinUV DNA/RNA Application

•Cary 50 + Microcell

•400ul DNA

•Reproducibility +/-0.17%RSD

CARY 50 MPRCARY 50 MPR

CARY 50 MPRCARY 50 MPR

• El lector de microplacas Varian CARY 50 combina la alta capacidad de rendimiento de un lector de microplacas con la flexibilidad y grado de desarrollo de un espectrofotómetro.

• Soluciones de medida para trabajos de rutina e investigación en el laboratorio.

• Las mayores prestaciones en precisión de temperatura para aplicaciones cinéticas.

• WinUV Microplate Reader Software que incluye metodos para aplicaciones bioquímicas.

CARY 50 MPR CARY 50 MPR especificacionesespecificaciones

Specifications  

Source High intensity Xenon flashlamp

Detectors Silicon photodiode

Wavelength range 190-1100 nm

Wavelength selection Czerny-Turner 0.25 m monochromator

Wavelength data interval 0.15–5.0 (nm)

UV/VIS limiting wavelength resolution < 1.5 nm

Wavelength accuracy ± 0.5 nm at 541.9 nm

Wavelength reproducibility ± 0.1 nm

Maximum scan rate(single well) 24,000 nm/min

Maximum data collection rate (single well)

80 points/sec

Photometric range 0.0-2.5 Abs

Temperature range Ambient + 4.0 to 45.0 °C set in 0.1 °C increments

Temperature uniformity +/- 0.5 °C

Microplate compatibility 6, 12, 24, 48, 96, 384 wells

Time to read 96 wells < 50 s

Time to read 384 wells < 100 s

Operating system Windows XP PRO

Recommended PC requirements As discussed

Cary 100/300Cary 100/300

Instrumentos de máximas prestaciones en el rango medio.

Cary 100/300Cary 100/300Diseño ÓpticoDiseño Óptico

Barrido conFase de NoMedida

Doble hazDoble Chopper

OpticaRecubiertade Cuarzo

RendijaVariable

Haz DobleReal

CARY 100 UV/VISCARY 100 UV/VISCaracterísticasCaracterísticas

• Reproducibilidad de barridos a distintas velocidades• Sistema óptico de doble haz real• Rendija Variable contínua de 0.2 a 4 nm a intervalos

de 0.1 nm• Rango fotométrico hasta 3.7 Abs• Luz difusa a 220nm (%T) 0.0074• Estabilidad fotométrica < 0.0003 Abs/hr• Exactitud de long. de onda ± 0.02 nmm @ 656.1 nm• Excelente estabilidad para cinéticas• Amplio rango de accesorios

CARY 300 UV/VISCARY 300 UV/VISCaracterísticasCaracterísticas

• Reproducibilidad de barridos a distintas velocidades• Sistema óptico de doble haz real• Premonocromador• Rendija Variable contínua de 0.2 a 4 nm a intervalos de

0.1 nm• Rango fotométrico hasta 5.0 Abs• Luz difusa a 220nm (%T) 0.00008• Estabilidad fotométrica < 0.0003 Abs/hr• Exactitud de long. de onda ± 0.02 nmm @ 656.1 nm• Excelente estabilidad para cinéticas• Amplio rango de accesorios

¿Qué es una cinética?¿Qué es una cinética?

• Seguimiento de un proceso de reacción.

• Sigue la formación de uno o varios productos.

• Midiendo la absorción de los mismos frente al tiempo.

• Permite estudiar los mecanismos de reacción.

Control de TemperaturaControl de Temperatura

• En todos los casos es necesario termostatizar.

• Normalmente se utilizan multicubetas.

• Sistema Peltier control preciso y programable

• Baño termostático para Tª Constante.

• Sistema Peltier con rampa de hasta ± 0.06 º C/min

Cinéticas de BarridoCinéticas de Barrido

• Para monitorizar especies desconocidas.

• Realiza gran número de barridos.

• Obtención directa de la cinética a cualquier longitud de onda

• Monitorización de varias longitudes de onda simultáneas

Cinéticas; cálculo de Cinéticas; cálculo de resultadosresultados

• En todos los casos se necesita ajustar la curva a una determinada función.

• Esta función nos indicará el orden de reacción, y el mecanismo de la misma.

• El Software Cary realiza estas operaciones automáticamente

Cinéticas EncimáticasCinéticas Encimáticas

Caso especial de reacciones catalizadas por encimas

Trabajan con un mecanismo de “llave”.E + S ES E + P

• Solamente se produce la reacción si se combina la Encima (E) con el sustrato apropiado (S).

• Máxima selectividad. La mayoría de reacciones biológicas se producen de esta forma

Importancia de la actividad Importancia de la actividad encimáticaencimática

Díagnóstico Clínico:• La mayoría de enfermedades afectan a la actividad

encimática normal.

• Tras un ataque al corazón, el nivel de CPK aumenta rápidamente hasta un máximo entre las 16 a 36 horas volviendo a valores normales en 3 días.

• Hay una relación directa entre la actividad encimática y la severidad de la gravedad del ataque.

• Se suele medir en hígado, corazón, pancrea, músculo, hueso, etc...

Actividad encimáticaActividad encimática

Investigación Bioquímica y farmacéutica:• La mayoría de drogas actúan sobre las encimas.

–La aspirina actúa inhibiendo la actividad de la encima que cataliza la síntesis de prostaglandinas causantes del dolor.

–La potencia, y especificidad del medicamento.

• En investigación pura:

–Clasificación y síntesis posterior de encimas. Cálculo de Km y Vmax en distintos sustratos

–Investigación de mecanismos metabólicos

Mecanismos EncimáticosMecanismos Encimáticos

• Definidos por la ecuación de Michaelis/Menten

v = Vmax[S]/[S]+Km

• Cada par E/S, se caracteriza por su Km y Vmax

• El software Cary permite el cálculo directo y automático de éstos valores.

Cálculo automáticoCálculo automático

• A 260 nm absorben fuertemente ARN/ADN.

• A 280 nm absorben proteinas y contaminantes.

260/280= 1.8 ADN PURO

260/280= 2.0 ARN PURO• Valores menores indican

contaminación

Warburg-ChristianWarburg-Christian11

• Permite medir la concentración de ADN y ARN en mg/mL

• Introduce factores para cada longitud de onda

• Corrige el fondo a 320 nm• También mide la

concentración de proteinas

1. Warburg, O. and Christian, W. (1942) Biochem. Z., 310, 384.

Análisis TérmicoAnálisis Térmico

• Proceso de Denaturalización/renaturalización de la doble hélice del ADN.

• La hipercromaticidad provoca que la cadena simple de ADN absorba más a 260 nm que la cadena doble.

• Monitorizando Abs (260) vs. Temp. Permite hallar la Tm (Temperatura a la altura media)

• El valor de Tm es característico de la cadena ADN y permite caracterizar la muestra.

• Al dismunir la temperatura lentamente la cadena se renaturaliza sin destruir la muestra.

Análisis Térmico de ADNAnálisis Térmico de ADN

• Requiere un control muy preciso de la temperatura.

• Disponible con el accesorio Peltier en los Cary 100/300/400

• Sondas de temperatura para el control preciso

• Rampas menores de 0.5ºC/min

Análisis TérmicoAnálisis Térmico

• El software automático del Cary permite:

• Cálculo de derivadas• Hipercromaticidad• Parámetros termodinámicos• Delta S, Delta G, Delta H• %GC (Guanina-Citosina)• Cálculo de Tm teóricas• Corrección de la expansión

térmica• Normalización a T dada

Análisis Térmico Análisis Térmico (Instrumentación)(Instrumentación)

•Requiere un CARY 100/300•Sistema multiceldas 6*6 peltier•Controlador de temperatura Peltier•Sondas de temperatura•Microceldas

CARY UV/VISCARY UV/VIS¿Validación Sencilla?¿Validación Sencilla?

El Software Cary Win-UV incorpora, una serie de ayudas a la validación, incluyendo todos los test de las normas internacionales:

• Farmacopea US

• Farmacopea Británica

• Normas de Buena Fabricación (GMP)

• Tests instrumentales

• Protocolos de acceso GLP.

Resúmen y ConclusionesResúmen y Conclusiones

La espectrofotometría UV/VIS es una herramienta imprescindible en el trabajo bioquímico.

Requiere unas características ópticas especiales según el tipo de análisis.

Además es necesario disponer de accesorios para control de temperatura y multi-cubetas.

Requiere un software especializado al tipo de trabajo habitual en el laboratorio bioquímico

Resúmen y ConclusionesResúmen y Conclusiones

La Gama CARY soluciona todos los requerimientos para el laboratorio bioquímico

• Excelentes características ópticas

• Máxima precisión en el control de Temperatura

• Software enfocado al trabajo bioquímico

• Facilidad de operación y potencia de cálculo

• Numerosas herramientas de validación

• Rango de precios adaptable a sus necesidades