GRAM POZITÍV ÉS GRAM NEGATÍV

ANAEROB BAKTÉRIUMOK

GRAM POZITÍV SPÓRAKÉPZŐ PÁLCÁK

DR. Ghidán Ágoston

2014.10.13.

A humán anaerob normál flóra

• bőrön, szájüregben, hüvelyben, emésztő traktusban

Bőr

• habár állandóan levegővel érintkezik az anaerobok jelen vannak

• dominánsak az 'anaerob diphtheroidok' –propionibacteriumok

Szájüreg

• anaerobok megtalálhatóak:

– a mandulák és a nyelv kriptáiban

– gingiva tasakoban, plakkokban

– újszülöttekben is megtalálható de a számuk

akkor nő meg amikor a fogak áttörnek

A leggyakoribbak:

– Prevotella, Fusobacterium,

Peptostreptococcus, Veillonella, és néhány

anaerob Gram-pozitív pálca

Mintavétel és tenyésztés

• az anaerobok érzékenyek az oxigénre –de nem egyformán

• Bacteroides fragilis és Clostridiumperfringens 2-4 % O2

elvisel

• anaerob tenyésztésre alkalmas minta: váladékok, szövetdarabok

• mintavételkor és szállításkor kerülni kell az O2 való érintkezést

• száraz vattatampon nem megfelelő

Metronidazol: csak anaerobok ellen hatásos

- legtöbb baktérium érzékeny – növekvő rezisztencia!!!

ß-Laktám antibiotikumok

- az anaerobok penicillinre érzékenyek

- B. fragilis penicillin rezisztens – rezisztens még: ampicillin, amoxycillin, piperacillin,

- imipenem és meropenem lehet ellenük hatásos

- ß-laktamáz gátlóval kombinálva a B. fragilis ellen hatásos

Clindamycin: a legtöbb anaerob érzékeny rá

Chloramphenicol: hatásos szintén az anaerobokra

Erythromycin, co-trimoxazole, tetracyclinek:

hatásosak

Glycopeptidek, aminoglycosidek és quinolonok:

hatástalanok

Kezelés

- elhalt szövetek eltávolítása

- drainezés, tályogok megnyitása

Megelőzés: kemoprofilaxis: cefuroxime vagy

metronidazol

Anaerob baktériumok

Genus Anatómiai hely

Gram-negatív anaerob

- Gram-negatív pálca:

- Bacteroides sp. Vastagbél

- Prevotella sp. Szájüreg

- Porphyromonas sp. Szájüreg

- Fusobacterium sp. Szájüreg, vastagbél

- Gram-negatív coccus

- Veillonella Szájüreg, vastagbél

Bacteroides

• vékony pálca vagy coccobacillus

• normál bélflóra tagja

• a normál székletben 1011 B. fragilis/g

található

Betegségek: endogén eredet

• peritonitis, decubitus, tályogok

• azonosítás: biokémiai reakciók alapján,

gázkromatográfiával, MALDI-TOF

Prevotella

• keskeny pálca vagy coccobacillus

• általában felsőlégúti megbetegedésekből

izolálható

• P. bivia, P. disiens női urogenitális

traktusban megtalálható

• agytályog, tüdőtályog, empyema

Porphyromonas

• szájüreg normál flórájához tartozik

• megtalálható szájüregi tályogokban,

melltályogokban, perianális és húgyúti

infekciókban

Fusobacterium nucleatum

• szivar alakú pálcák

• kénhidrogént, vajsavat és propionsavat

termel

• szájüregi infekciókból izolálható

Akut nekrotizáló ulcerativ gingivitis

• Plaut-Vincent angina, fusospirochaetosis

• a fogíny és a bucca érintve van

• tünetek: fájdalmas, vérző fogínyek, néha

álhártyával felrakott

• bűzös lehelet

• Gram festéssel igazolható

Veillonella

• Gram-negatív coccusok

• normál szájflóra és bélflóra tagja

• hasznos baktériumnak tartják

• tejsavat gyengébb savakra bontja

Fontosabb speciesek: V. parvula, V. dispar,

V. atipyca

Gram-pozitív anaerobok

• Gram-pozitív pálcák

- Actynomyces Szájüreg

- Lactobacillus Hüvely

- Propionibacterium Bőr

- Eubacterium, Bifidobacterium,

Arachnia Szájüreg, vastagbél

- Clostridium Vastagbél, talaj

• Gram-pozitív coccus

- Peptostreptococcus Vastagbél

Actinomyces

A genus több speciest is tartalmaz:

A. bovis (állatpatogén);

A. naeslundii, A. odontolyticus, A. viscosus

- ritkán okoznak betegséget és a normál

szájflóra tagjai

A. israelii a legjelentősebb humán patogén

Morfológia, biokémiai tulajdonság:

• Gram-pozitív, karcsú pálca, gyakran fonal

alakú

• Szövetekben sárgás tőkéket képez, amely

kisebb

baktériumtömegeknek felel meg.

Anaerob baktérium, lassan szaporodik

Patogenitás:

• az actinomycosis - endogén eredetű fertőzés

• sérülés, gennyes folyamatok elősegítik

kialakulását, melynek három megjelenési

formája van:

cervicofacialis: az arcra és a nyakra lokalizálódik,

fognyak-, gyökér caries, gingivitis, caries

progresszíva, zománc demineralizáció, plakk

thoracalis: főleg tüdőfolyamatokat jelent

abdominalis: az appendix és a coecum krónikus

gyulladásaként jelentkezik

- betegség helyén a szövetek duzzadtak

- a terület deszkakemény tapintású és a

sipolyokból sűrű genny ürül

Diagnózis, terápia:

- gennyből Gram-festés, tőkék kimutatása

- sebészi feltárás mellett penicillin +

szulfonamid kombináció

Propionibacterium

• 4 species: P. acnes

P. propionicum

• Morfológia: G + pleomof pálca

• Tenyésztés : anaerob véres agar

proteáz, lipáz, hisztamin, porfirin

termelés

• Klinikai kép:** acne vulgaris

**carbunculus, phlegmone, sepsis

** dentoalveoláris infekció, dentális

plakk

• Terápia: tetracyclin, clindamycin

Eubacterium

• pleomorf baktériumok

• fontosabb speciesek: E. brachy, E.

nodatum

• a bélflórában megtalálhatóak

• tályogokból izolálhatóak

• E. yurii kukoricacső alakzatot képez

Lactobacillus acidophilus

Szájüregben normál flóra (sok species)

cukor -- tejsav -- fogzománc károsodik --

caries

Hüvelyben normál flóra (Döderlein pálca)

savi pH védelem kórokozókkal szemben

Tenyésztés: Rogosa táptalajon

Mikrobiológiai teszt a caries rizikó

felmérésére

• Lactobacillus és Streptococus mutans csíraszám

meghatározás nyálban, dentális plakk-, vagy

interdentális terület váladékában

• A minta higításainak szélesztése: Rogosa-, Mitis

- Salivarius agarra - csíraszámolás

• Magas caries hajlam:

Streptococcus mutans CFU 1,OOO.OOO/ ml

Lactobacillus CFU 1OO.OOO/ ml

Bifidobacterium

• 8 species: B. dentocariosa

• Morfológia: G+ bunkós végű pálca, láncban

• Tenyésztés: anaerob véres agar

• Előfordulás: száj-, bél-, vagina flóra, csecsemők

bélflórája---kolonizációs rezisztencia

• Klinikai kép: caries ?

perodontális betegségek?

• Probiotikum

SZÁJÜREGI INFEKCIÓK

CAPNOPHIL KÓROKOZÓI

Actinobacillus

actinomycetemcommitans

• Előfordulás: szájüreg normál flórája

• Morfológia: G- coccobacillus

• Tenyésztés: véres agar, CO2 atmoszféra

• Virulencia faktorok: leucotoxin

IgA proteáz, kollagenáz

• Klinikai kép: **agresszív parodontitis

**destruktiv periodontitis

**abscessus, osteomyelitis

Eikenella corrodens

• Morfológia: G+ karcsú, kicsi pálca

• Tenyésztés: véres agarba „süllyed „

CO2 atmoszféra

• Előfordulás: szájüreg normál flóra

• Klinikai kép: szájüregi gennyes folyamatok

Capnocytophaga

• Morfológia: G +/- pálca

• Tenyésztés: véres agar, CO2 atmoszféra

• Előfordulás: subgingivális normál flóra

• Klinikai kép: gingivitis, parodontitis, osteomyelitis

Bacillus, Clostridium

Gram-pozitív spóraképző pálcák

Aerob Anaerob

Bacillus Clostridium

B. anthracis C. botulinum

B. cereus C. perfringens

C. difficile

C. tetani

Bacillus anthracis

Morfológia:

- csilló nélküli pálca

- 4-5m hosszú

- rövid láncokat alkot (bambusznád)

- spórát képez (élő szervezetben nem)

- spóraképzés 15C-on

Tenyésztés:

• aerob

• 12-45C-on növekszik

• spórát oxigén jelenlétében

képez

• telepei sugárirányba nőnek,

medúzafőhöz hasonlítanak

• véres agaron nem hemolizál

• leves táptalajban vattaszerű

üledéket képez

Ellenálló képesség:

• spórák ellenállóak

• Gruinard szigetén (Skócia) 1942 és 1943

között spórát tatrtalmazó bombát

robbantottak – kísérleti célból (robbanástól

a spóra nem pusztul el)

• 1986-ig a spórák életképesek maradtak –

talajcserét és formaldehides

dekontaminációt végeztek

Virulencia faktorok:

• két plazmid • toxinokat kódol

• poly-D-glutaminsav tok – antifagocita hatású

• Exotoxinjai:

– letális faktor - nekrotoxin

– ödéma faktor – kalmodulindependens

adenilcikláz

– protektiv antigén

Bacillus anthracis - Epidemiológia

Patogenitás:

• spórák germinációja a bejutás helyén majd

haemorrhagias gyulladás a szövetekben

ödéma képződéssel

Patogenitás feltétele:

- tokképzés (antifagociter hatás)

- Exotoxinok termelése

Fertőzés forrása:

• főleg növényevő állatok:

kecske, juh,

szarvasmarha, antilop,

zsiráf, zebra

• dögevők, ragadozók –

nem betegszenek meg

• boncolással, nyúzással,

test darabolásával – a

spórák a környezetbe

kerülnek

• direkt kontaktus – bőranthrax

• inhalációval – tüdőanthrax

• elfogyasztással – oropharyngealis, gastrointestinalis anthrax

Toxin hatására:

• vérbőség, ödéma

Bőranthrax - pokolvar:

• bőrsérülés - papula – vesicula - pustula -ulcus - pustula maligna – nyirok - vér -halál

Oropharyngealis:

• álhártya képződés a

garatban

Bélanthrax:

• emberben: hasmenés,

mely alig véres

Immunizálás:

• Mo: csak háziállatokat, élő attenuált

baktériummal immunizálják

• USA: katonák immunizálása – alegység

vakcina – öböl szindróma?

• Kína, Oroszország: élő, attenuált

Terápia: penicillin, tetracyclin, ciprofloxacin

Szaprofita bacillusok

Ritkán okoznak emberi megbetegedést

B. cereus

Jellemzői:

• nagy pálcák láncokban

• szabálytalan szélű fénytelen telepek

• tok nincs

• véres agaron - béta-hemolizáló

• ételmérgezés (enterotoxin)

• 2 féle toxin:

– hányással járó (hőrezisztens) - 1-6 óra múlva

– hasmenéssel járó (hőérzékeny) - 1-24 óra

lappangás

Diagnosztika:

• az ételben 105/g B. cereus

Terápia:

• tüneti kezelés

• Sebfertőzés esetén: Vancomycin,

Clindamycin, Fluoroquinolon

B. stearothermophilus – hőlégsterilizáló,

autokláv működésének ellenörzése

Clostridiumok közös jellemzői

• Gram - pozitív pálcák: orsó alakú

• anaerobok

• spórások: a spóra deformálja a baktériumsejteket

• elhelyezkedésük species specifikus

• peritrich csillósak – kivéve C. perfringens(tokot termel)

• legtöbb species talajban megtalálható

• állatok, emberek bélcsatornájának normál flórájának tagjai

CLOSTRIDIUM TETANI

Bevezetés:

• 1 millió estet közöltek 1975-ben

• az újszülöttkori halálozási aránya 90%

• Heted napos halál

• Magyarországon – az 1950-es évek elején - 500 megbetegedés évente

– újszülöttekben 40%-os, idősebb korban 80%-os halálozással

– 2007-ben 3 ember halt meg tetanusban (1941 előtt születtek, és védőoltást nem kaptak)

Újszülöttkori tetanus becsült halálozási aránya (1991-ben 1000 lakosra vetítve)

kevesebb mint 1 1-5 több mint 5

Jelentett tetanusos esetek a trópusi régiókban (1990-1995)

Clostridium tetani

Morfológia:

• Gram-pozitív pálca

• végálló spóra – dobverő alak

• peritrich csillós - mozgékony

Tenyésztés:

• obligát anaerob

• Holman, Brewer táptalajon, 3-4 napig

Antigén szerkezet:

• csilló alapján 10 típus (de azonos toxin)

Exotoxinok:

• tetanospazmin

• tetanolizin

Patogenitás:

• Tetanus - merev görcs

Spóra bejutása:

• sérülésen át, köldökcsonkon át, …

Szaporodás:

• elhalt szövetekben

• toxin termelés

• nincs bakteriémia csak toxémia

• tetanopasmin - központi idegrendszer károsodik

Fertőzés módja:

• talajspórával

• szülés

• kriminális abortusz

• égési sérülés, köldökcsonk fertőzés

Terápia:

• sebkimetszés

• antitoxin HTIG

• tetanus toxoid

• penicillin, relaxánsok, nyugtatók

• mesterséges lélegeztetés

Prevenció: toxoid a DaPT vakcinában

Clostridium botulinum

Morfológia:

• Gram-pozitív pálca

• spórák subterminálisan vagy centrálisan

helyezkednek

Tenyésztés:

• véres agaron, avas szagú telepek

Antigén szerkezet:

• exotoxint termel – lysogen konverzió

• 8 típusú toxin: A-H

• A, B, E ember patogén

Patogenitás:

• botulizmus - hurkamérgezés

• spóra élelmiszerbe jut

• germináció, szaporodás és

toxintermelés

• az exotoxin neurotoxikus: gátolja az

acetilkolin felszabadulását a

szinapszisokban

• 1-2 ng már halálos - intravénásan

• petyhüdt bénulás

Tünetek:

• órák, napok múlva:

– kancsalság, kettős látás, pupillatágulat

– nyelés és beszédzavar

– szájszárazság

– légzésbénulás majd halál

– gastroenteritises tünetek lehetnek

– a beteg tudata végig tiszta – láz nincs

Csecsemőkori botulizmus

• 6 hó alatt a spórák a

bélcsatornába kerülve

elszaporodnak

• in vivo toxint termelnek

• leggyakoribb forrás: méz

Nagyon ritkán seb botulizmus

• törések során, kábítószer

bevitel: inhalációval, tűvel

Diagnosztika:

- toxin kimutatása (ételből, hányásból, serumból)

- állatoltás

- neutralizációs próba

- toxinkimutatás szérumból (agglut., RIA)

Terápia:

- polivalens savó (A, B, E)

- 80000 egység antitoxin gyorsan

- mesterséges lélegeztetés

- évente 10-20 eset

Clostridium difficile

• antibiotikum kezelés hatására a bélben élő rezidens flóra elpusztul

• C. difficile elszaporodik

Morfológia:

• Gram-pozitív pálca

• centrális spóra

Toxinokat termel:

toxin A: enterotoxin

toxin B: cytotoxin

toxin A: pseudomembranosus colitis (epithelium elhalás, microabsesusok, megacolon)

Tünetek:

• véres hasmenés

• görcsös hasi fájdalom

• láz

Diagnosztika:

• toxinkimutatás székletből (latex agglutinációval, ELISA)

Terápia:

• Metronidazol

• Vancomycin

Gázgangréna clostridiumok

C. perfringens – 90%

C. novyi

C. septicum

C. perfringens

• Gram-pozitív spórás pálca

• spóra centrálisan helyezkedik el

• csillótlan, nem mozog

• véresagaron kettős hemolítikus udvar veszi körül

Termelt toxinok és enzimek

• Major lethális toxinok– Alpha (α) – lecitináz (vvt, fvs károsít, beta (β), epsilon

(ε), iota (ι)

– Enterotoxin

• Minor lethális toxinok– Delta (δ), teta (τ), kappa (κ), lambda (λ), mu (μ), nu

(ν)

• Enzimek– Neuraminidáz, DNáz, kollagenáz, proteáz

hialuronidáz, lipáz – CO2, H2S, metán

• Típusba sorolás a toxin termelése alapján: A, B, C, D, E

Kórképek

• Gázgangréna

– endogén: bélruptúra, perforáció, appendicitis

után kerül a hasüregbe

– exogén: spórákat tartalmazó földdel

szennyeződik a seb – roncsolt sérülés

• Ételmérgezés

• Enteritis necrotisans

• Sepsis

Terápia:

• sebellátás

• antitoxin (polivalens)

• Penicillin

Ételmérgezés:

• fertőzés forrása: húskészítmények

• hőérzékeny enterotoxint termel

• A-típusú enterotoxint termelő variáns: hasmenés, hányás, láz, spontán gyógyul

Enteritis necrotisans:

• C-típus: sertés béltartalmával fertőzött hús (nem kellően hőkezelt) - bélfal necrosis, perforatio, halál