Jämförelse av FISH och CISHtill bestämning av HER2 vid

bröstcancer

Helen Svensson och Dorthe Grabau, Patologisk/Cytologisk klinik, Lund

Dr.John Gregory Frances Hughes Birmingham University Histopathology Medical School, UK

Dr. Tómás García Caballero Facultad de Medicina, Universidad de Santiago de Compostela, Es

Dr Ian O. Ellis and Dr Andrew Green Division of Pathology School of Molecular Medical Sciences University of Nottingham; UK

Dr Arno Schad Johannes Gutenberg Universitätsklinikum  Institut für Pathologie; Mainz; Ger

HER2 bestämning

Normal

Gen FISH CISH

Amplifierad

HER2genen

Centromerchromosome 17

FISH x100

Hybridization of Texas Red and FITC labeled FISH-probes

CISH1. steg

Incubation with CISH Antibody Mix(Anti-Texas Red/AP-labeled Antibody and Anti-FITC/HRP-labeled Antibody)

CISH2. steg

Incubation with Red- followed by Blue Chromogen-substrate solution

CISH3. steg

HER2 genen

Centromer chromosome 17

CISH x60

FISH x100 CISH x60

Syfte

Kan CISH ersätta FISH?

Fördelar

Morfologin bevarad

Tidsbesparande

Nackdelar

Inget DAPI-filter

Material och metod

HER2 protein 0, 1+, 2+ och 3+

8 fall av värdera = 32

Kvot av FISH och CISH (röda/gröna eller blå)

i 20 kärnor

kvot 1,8-2,2 20 kärnor mer

Resultat

0

5

10

15

20

25

30

0 8 16 24 32

FISHCISH

0 1 2 3

Fall nummer

HER2 protein

Kvot

Resultat HER2 protein 0

00,20,40,60,8

11,21,41,61,8

2

1 2 3 4 5 6 7 8

FISH CISH

Fall nummer

Kvot

Resultat HER2 protein 1+

00,20,40,60,8

11,21,41,61,8

2

1 2 3 4 5 6 7 8

FISH CISH

Fall nummer

Kvot

Resultat HER2 protein 2+

0

1

2

3

4

5

1 2 3 4 5 6 7 8

FISH CISH

Fall nummer

Kvot

Resultat HER2 protein 3+

0

5

10

15

20

25

30

1 2 3 4 5 6 7 8

FISH CISH

Fall nummer

Kvot

Resultat alla

Average (KvotFISH+KvotCISH)/2

Difference (KvotFISH-KvotCISH)

-6

-4

-2

0

2

4

6

8

10

12

0 5 10 15 20 25

Resultat HER2 genen

Average (rödaFISH+rödaCISH)/2

Difference (rödaFISH-rödaCISH)

-150

-100

-50

0

50

100

150

200

0 100 200 300 400 500

Resultat chromosom 17

Average (FISH+CISH)/2

Difference (FISH-CISH)

-60

-40

-20

0

20

40

60

80

100

0 20 40 60 80 100

TidBMA

Dag 1 Dag 2

FISH 1,5-2h 1-1h 10min

CISH 1,5-2h 2h 20min

TidAvläsning

Median Range

FISH 6,0 min 3-16 min

CISH 2,5 min 2-6 min

Konklusion

CISH kan ersätta FISH