-
LAKTOFERIN PADA SUSUKelompok F
Muhammad
Gozali111710101014Alfisyahrica111710101036Istiqomah111710101048Edvienne
Y.111710101060Eko Dhuhur 111710101088
-
*
-
Komponen susu, termasuk juga susu kambing mengandung beberapa
komponen bioaktif laktoferin diantaranya yang memiliki efek
kesehatan karena mengandung sistem imunitas, antihipertensi,
antibakteri dan antikanker (Ferrer et al., 2000).Rahman et al.
(2007) menyatakan laktoferin merupakan sub-fraksi protein whey yang
telah dilaporkan sebagai antiviral, antibakteri, antikanker dan
modulasi kekebalan. Pemanfaatan laktoferin
banyak diaplikasikan dalam suplemen nutrisizat besi (Fe),
kosmetik, minuman dan juga produk fermentasi susu
(Steijns,2004).
-
Kefir merupakan susu fermentasi menggunakan kefir grain, yang
terdiri atas bakteri dan khamir. Kefir adalah salah satu produk
makanan fungsional karena mengandung komponen bioaktif, sehingga
berpotensi menjaga kesehatan tubuh. Anemi gizi (kekurangan zat
besi) merupakan salah satu masalah gizi utama di Indonesia dan
sangat umum dijumpai, terutama di kalangan bayi, balita, serta ibu
hamil dan menyusui(Husaini dan Karyadi, 1982).Susu formula bayi
merupakan salah satu alternatif untuk memenuhi kebutuhan zat besi.
Laktoferin merupakan zat besi
yang berikatan dengan glikoprotein dari famili transferin yang
secara jelas ditemukan pada kolustrum dan ASI mamalia(Teraguchi et
al.,1994).
-
Untuk mendapatkan dan memberikan informasi mengenai
identifikasi, isolasi, dan purifikasi laktoferin secara mudah,
sederhana dan memperoleh hasil maksimal. Untuk mengevaluasi
availabilitas zat besi laktoferin, mengkaji peran laktoferin
terhadap oksidasi lemak dalam tubuh dan mempelajari pengaruh
laktoferin terhadap peningkatan Escherichia coli.
Tujuan
*
-
Freeze drying whey Pemurnian Lactoferin Penentuan Protein
TerlarutBerat Molekul Lactoferin secara ElektoforesisPurifikasi
Laktoferin Kefir
Metode Isolasi Lactoferin
*
-
*
-
Metode filtrasi gel merupakan salah satu metode untuk isolasi
dan pemurnian protein, termasuk didalamnya adalah laktoferin
menggunakan sephadex G-100.
-
Metode elektroforesis SDS-PAGE, terdeteksi komponen laktalbumin,
-laktoglobulin, serum albumin dan laktoferin. Berat molekul
laktoferin-a adalah 84 kDa dan laktoferinb 80 kDa.Pemurnian
laktoferin pada suhu pasteurisasi 65oC selama 30 menit, hasil
pemisahan sephadex G-100 menghasilkan dua puncak absorbansi 280 nm.
Kedua puncak absorbansi pada fraksi tersebut berdasarkan hasil
elektroforesis menunjukkan
pita protein dengan berat molekul 84 kDa dan 80 kDa.
-
Pengujian secara biologis biasanya menggunakan hewan percobaan
untuk membantu menjalakan penelitian-penelitian yang tidak bisa
secara langsung dilakukan dalam tubuh manusia dengan asumsi semua
jaringan, sel-sel penyusun tubuh, serta enzim-enzim ada dalam tubuh
hewan percobaan tersebut memiliki kesamaan dengan manusia. Contoh :
tikus Diaram alir yang disajikan merupakan tahap awal/ persiapan
yang dilakukan selama 20-22 hari.Dilakukan pengadaptasian terhadap
tikus selma 1 minggu.
-
*
-
*
-
kelompok FEAN : ASI induk tikus secara tak terbatas/ad libitum
dan susu formula dengan FeSO4 7H2O sebagai sumber zat besi
anorganikkelompok FEOR : ASI induk tikus secara tak terbatas/ad
libitum dan susu formula dengan laktoferin sebagai sumber zat besi
organikkelompok FECAMP : ASI induk tikus secara tak terbatas/ad
libitum dan susu formula dengan campuran FeSO4 7H2O dan laktoferin
sebagai sumber zat besi anorganik dan organickelompok KONTROL : ASI
induk tikus secara tak terbatas/ad libitum dan susu formula tanpa
penambahan zat besikelompok PLACEBO : ASI induk tikus secara tak
terbatas/ad libitum dan tambahan air.
*
-
HASIL UJI IN VIVOKadar Hemoglobin Dalam Darah Anak Tikus
Kadar hemoglobin pada perlakuan dengan pemberian susu formula
dengan penambahan zat besi anorganik dan organik (FECAMP) tertinggi
Fenomena tersebut mungkin disebabkan oleh laktoferin yang mengikat
zat besi pada sisi yang satu sedangkan sisi yang lain bertindak
sebagai pengikat (chelat), sehingga mengakibatkan meningkatnya
absorbsi zat besi dari usus ke hemoglobin darah (Nagasako, et al.
1993).
Hasil TBARS Pada Serum dan Hati Anak Tikus
Penentuan TBARS dimaksudkan untuk mengetahui sejauh mana
suplementasi laktoferin dapat menghambat terjadinya oksidasi
lemakFEAN mempunyai nilai yang tertinggi Zat besi anorganik
berfungsi sebagai katalisator dalam proses oksidasi lemakPengaruh
suplementasi laktoferin dalam penelitian ini ternyata dapat
menghambat terjadinya proses oksidasi lemak. Dimana zat besi
organik bertindak sebagai antioksidan
PerlakuanTBARS Serum * ( mol/l)TBARS Hati * ( mol/l)FEAN318,76
a2952,34 aFEOR274,51 b2748,79 bFECAMP284,66 b2815,28
abKontrol259,62 c2729,31 bPlasebo265,01 bc2639,76 b
-
Kadar Total Zat Besi Pada Serum dan Hati Anak Tikus
Hasil perhitungan kadar total zat besi pada serum anak tikus
menunjukkan bahwa semua perlakuan tidak beda nyata.FECAMP dan FEOR
menunjukkan berbeda sangat nyata dengan perlakuan yang lain Hal ini
menunjukkan bahwa perlakuan dengan penambahan laktoferin ternyata
akan mempengaruhi zat besi yang tersimpan dalam hati.
Total Escherichia coli Pada Usus Anak Tikus
penambahan zat besi anorganik (FEAN) mempunyai rata- rata E.
coli yang tertinggi menurut Arnold et al., (1980) mengatakan bahwa
hubungan secara langsung antara laktoferin dan permukaan bakteri,
mengindikasikan bahwa laktoferin dapat merusakkan membran bagian
luar dari bakteri Gram Negatif sehingga menyebabkan terlepasnya
lipopolisakarida dari sel bakteri, dengan cara demikian
sensitifitas sel berfungsi sebagai antibiotik (Dionysius et al.,
1993).
-
Anti Bakteri (Bakteriostatik)
Laktoferin yang diproduksi makrofag, neutrofil dan epitel
kelenjar payudara bersifat bakteriostatik, dapat menghambat
pertumbuhan bakteri, karena merupakan glikoprotein yang dapat
mengikat besi yang dibutuhkan untuk pertumbuhan sebagian besar
bakteri aerobik seperti stafilokokus dan E. coli. Laktoferin dapat
mengikat dua molekul besi ferri yang bersaing dengan enterokelin
kuman yang juga mengikat besi. Kuman yang kekurangan besi ini
pembelahannya akan terhambat sehingga berhenti memperbanyak
diri.Sifat Fungsional dan Mekanisme Aksinya
*
-
Antioksidan
Laktoferin sebagai antioksidan mencegah zat besi menjadi
katalisator dalam proses pembentukan radikal bebas (hidroksil) dan
peroksidasi lemak.Laktoferin dapat mengikat zat besi pada satu
sisi. Sedangkan yang lain dapat mengikat (chelat) kemungkinan pada
permukaan molekul laktoferin.Mekanisme Aksi
*
-
Purifikasi laktoferin menggunakan kromatografi kolom sephadex
G-100Proses pasteurisasi dan fermentasi cenderung mengakibatkan
terjadinya penurunan konsentrasi laktoferin susu kambing dan kefir.
Lama penyimpanan kefir cenderung menyebabkan penurunan konsentrasi
laktoferinHasil penelitian secara in vivo, menunjukkan bahwa
suplementasi laktoferin pada susu formula bayi dalam bentuk FECAMP
paling efektifSuplementasi laktoferin pada susu formula dalam
bentuk FEOR yang lebih efektif untuk menurunkan oksidasi lemak pada
serum dan hati serta total Esherichia coliEfek fungsional
laktoferin yaitu sebagai antibakteri dan antioksidan
*
-
*
*
*
*
*
*
*
*
*
*
