KROMATOGRAFIA

Biochemistry 1

KROMATOGRAFIA

Biochemistry 2

Kromatografia

Biochemistry 3

Kromatografia: Instrumentet për punë në kromatografi

Eluent- Fluidi që hynë në kolon.

Eluate- Fluidi që del nga kolona.

Elution- Procesi i kalimit gjatë fazës mobile në kolon.

Flow rate(prurja)- Sa faza mobile kanë kaluar/ në min (ml/min).

Linear velocity (shpejtësia lineare)- Distanca e kaluar nga faza

mobile për 1 min në kolonën (cm/min).

Principet e Kromatografisë

Biochemistry 5

Klasifikimi i kromatografisë

Biochemistry of Medics 6

Ekzistojnë dy mënyra për të klasifikuar metodologjitë në kromatografi:

1) Bazuar në lidhjet mes komponentëve të mostrës dhe fazës

stacionare.

Biochemistry 7

Klasifikimi i Kromatografisë (vazhdim)

Biochemistry 8

Kromatografia

Shtresë të

hollë

Në letër Në kolonë Gas

LLOJET E KROMATOGRAFISË

Kromatografia në letër

Biochemistry 9

Kromatografia në letër (vazhdim)

Biochemistry 11

Procedura e Kromatografisë në letër

Biochemistry 12

Procedura e Kromatografisë në letër

Biochemistry 13

Kromatografia gjatë ngjitjes dhe uljes në letër.

Biochemistry 14

Biochemistry 15

distanca earritur nga pika e substancës

distanca earritur meballinë (lëvizje) të tretësitfR

Kromatografia dy dimensionale

Biochemistry 16

Rëndësia e Kromatografisë në letër

Biochemistry 17

Kromatografia në shtresë të hollë (TLC)

Biochemistry 18

TLC- Procedura

Biochemistry of Medics 19

Vështrimi -TLC

Biochemistry of Medics 20

Rëndësia e TLC

Biochemistry 21

Përparësia e TLC-së ndaj Kromatografinë letër

Biochemistry 22

2) Kromatografia Adsorbimit

Biochemistry 23

2) Kromatografia adsorbuse-Elution

Biochemistry 24

Kromatografia adsorbuese

Biochemistry 25

Substanca adsorbente me afërsi të mesme stacionare vjen në pjesë e mëparshme.

Kromatografia Jon- këmbyese

Biochemistry 26

Kromatografia Jon- këmbyese

Biochemistry 27

Procedurat e Kromatografisë Jon- këmbyese

Biochemistry 28

Procedurat e Kromatografisë Jon- këmbyese (vazhdim)

Biochemistry 29

Një vështrim mbi Kromatografin Jon –

Këmbyese

Biochemistry of Medics 30

5) Afiniteti Kromatografikë

Biochemistry 31

Rëndësia e Afinitetit kromatografikë

Biochemistry 32

Rëndësia e Afinitetit kromatografikë

33

Duke përdorur antitrupat dhe antigjenet mund të ndahet më lehtë. Në anën

tjetër, antitrupat mund të pastrohet duke kaluar nëpër një kolonë që

përmbajnë antigjenin.

Antitrupat specifik lidhen me një antigjen specifik të cilëve ju bashkangjesim

medium stacionare dhe antitrupat e mbetura të dala nga fraksionet e

mëparshme.

Kolona e fazës stacionare ndahet në:

» Të ngurta

» Të lëngëta

PRINCIPI

◊ Adsorbimi

Përzierja e komponentëve në gjendje të lënget të cilat treten futen në kolonë.

Këto komponente lëvizin në varësi ngjashmërisë se tyre të përafërt.

1.FAZA STACIONARE

Adsorbentet në kromatografinë në kolonë duhet të plotësojnë

kushtet vijuese:

◘ Forma sferike

◘ Stabiliteti mekanike duhet të jetë i lartë

◘ Ajo nuk duhet të reagojë kimikisht

◘ Ajo është e rëndësishme për ndarjen e shumë komponimeve.

◘ Ajo duhet të jetë lirshëm në dispozicion dhe e lirë.

Ajo vepron si:

▫ Tretës

▫ Zhvillues

▫ Eluent

◊ KARAKTERISTIKAT E KOLONAVE

Kolona - Qelqi Neutral

Dimensionet kolonë - gjatësia dhe diametri janë në raport (10:1,30:1 ose

100:1)

» Pjesa bazë e kolonës - mbushet me lesh xhami apo pambuku e cila

poashtu mund të përmbajnë mbushje asbesti.

» Adsorbenti i lartpërmendur është i mbushur

» Pas paketimit, disku letër mbahet në maje.

Dy lloje të teknikave të paketimit.

1. Paketimi i ngurtë

2. Paketimi i lëngët.

adsorbenti është i mbushur në kolonë në formë të ngurtë.

Tretësi plotësohet, deri sa të arrihet ekuilibri.

E META e kësaj teknike: flluskat e ajrit janë të zëna keqë b / w F.M dhe

F.S → E çara shfaqet në shtresën adsorbentit.

Teknika kimike e paketimit të lëngët

» Është teknikë e zakonshme dhe ideale.

Adsorbent + F.M në një gotë derdhen në kolonë.

◊ F.S ka vendosje uniforme dhe nuk zbërthehet në kolonën e adsorbentit.

» Çdo lloj e përzierjes mund të ndahet

» Çdo sasi e përzierjes mund të ndahet.

» Ka përparësi ndaj F.M.

» Automatizimi është e mundur.

Dobësitë e K.K

» Kërkon kohë më të gjatë se F.B

»Automatizimi bën teknikën më të ndërlikuar dhe më të

shtrenjtë.

6) Gas Kromatografia

Biochemistry 45

Kromatografia e Gazit të lëngët (vazhdim)

Biochemistry 46

-Aparatura-

Biochemistry of Medics 47

Përmbledhja

Biochemistry 48

Ju faleminderit!