Upload
reza-zam-zami
View
237
Download
0
Embed Size (px)
Citation preview
8/16/2019 Laporan Tetap Biokimia Umum (Kelompok 17).pdf
1/94
i
LAPORAN TETAPPRAKTIKUM BIOKIMIA UMUM
Oleh :KELOMPOK XVII
PROGRAM STUDI ILMU DAN TEKNOLOGI PANGANFAKULTAS TEKNOLOGI PANGAN DAN AGROINDUSTRI
UNIVERSITAS MATARAM2015
8/16/2019 Laporan Tetap Biokimia Umum (Kelompok 17).pdf
2/94
ii
8/16/2019 Laporan Tetap Biokimia Umum (Kelompok 17).pdf
3/94
iii
KATA PENGANTAR
Puji syukur kita panjatkan kehadirat Tuhan Yang Maha Esa yang telah
memberikan kesempatan kepada penulis untuk menyusun Laporan Tetap
Praktikum Biokimia, sehingga dapat terselesaikan tepat waktu. Laporan tetap
praktikum Biokimia ini disusun sebagai syarat untuk menyelesaikan mata kuliah
Biokimia Umum di Fakultas Teknologi Pangan dan Agroindustri Universitas
Mataram. Semoga laporan tetap ini menjadi bukti penanggung jawaban kami
terhadap tugas-tugas yang di berikan
Tidak lupa kami ucapkan terimakasih kami kepada Co. Assisten Praktikum
yang telah membimbing kami selama melakukan praktikum Biokimia dengan
penuh tanggung jawab. Ucapan terimakasih pula kami sampaikan kepada semua
pihak yang telah terlibat secara langsung maupun tidak langsung dalam
pengerjaan laporan tetap praktikum Biokimia umum.
Laporan ini masih jauh dari sempurna, oleh karena itu diharapkan kritik
dan saran yang menunjang dalam penyempurnaan laporan ini selanjutnya.
Akhirnya kami berharap agar laporan ini dapat menjadi sumbangan ilmu
pengetahuan bagi rekan-rekan yang lain dan juga dapat menambah ilmu
pengetahuan kita.
Mataram, 23 Desember 2015
Penyusun.
iii
8/16/2019 Laporan Tetap Biokimia Umum (Kelompok 17).pdf
4/94
iv
DAFTAR ISI
HALAMAN JUDUL .................................................................................. i
HALAMAN PENGESAHAN ..................................................................... ii
KATA PENGANTAR .............................................................................. iii
DAFTAR ISI ........................................................................................ iv
DAFTAR TABEL ................................................................................... vi
ACARA I PENGENALAN ALAT DAN BAHAN PRKATKUMPendahuluan ...........................................................................1Tinjauan Pustaka .....................................................................3Pelaksanaan Praktikum ............................................................6Hasil Pengamatan.....................................................................7Pembahasan .........................................................................12Kesimpulan ............................................................................17
ACARA II LARUTAN BUFFER Pendahuluan .........................................................................18Tinjauan Pustaka ...................................................................20Pelaksanaan Praktikum ..........................................................22Hasil Pengamatan...................................................................24Pembahasan .........................................................................25Kesimpulan ............................................................................28
ACARA III UJI KARBOHIDRAT
Pendahuluan .........................................................................29Tinjauan Pustaka ...................................................................31Pelaksanaan Praktikum ..........................................................33Hasil Pengamatan...................................................................35Pembahasan .........................................................................37Kesimpulan ............................................................................40
ACARA IV PENGUJIAN PROTEINPendahuluan .........................................................................41Tinjauan Pustaka ...................................................................43Pelaksanaan Praktikum ..........................................................46Hasil Pengamatan...................................................................48Pembahasan .........................................................................49Kesimpulan ............................................................................54
ACARA V PENGUJIAN LEMAK
Pendahuluan .........................................................................55
Tinjauan Pustaka ...................................................................57
iv
8/16/2019 Laporan Tetap Biokimia Umum (Kelompok 17).pdf
5/94
v
Pelaksanaan Praktikum ..........................................................59Hasil Pengamatan ..................................................................61
Pembahasan .........................................................................62Kesimpulan ............................................................................64
ACARA VI PENGUJIAN ENZIMPendahuluan .........................................................................65Tinjauan Pustaka ...................................................................67Pelaksanaan Praktikum ..........................................................69Hasil Pengamatan...................................................................71Pembahasan .........................................................................72Kesimpulan ............................................................................75
ACARA VII SPEKTROFOTOMETER Pendahuluan .........................................................................76Tinjauan Pustaka ...................................................................78Pembahasan .........................................................................82Kesimpulan ............................................................................86
DAFTAR PUSTAKA
v
8/16/2019 Laporan Tetap Biokimia Umum (Kelompok 17).pdf
6/94
vi
DAFTAR TABEL
Tabel 1.1 Hasil Pengamatan Alat-alat Praktikum............................................. 7Tabel 1.2 Hasil Pengamatan Analisa MSDS ....................................................10Tabel 2.1 Perubahan pH Larutan HCL 0,1 M dengan Penambahan 0,01 N ........24Tabel 2.2 Perubahan pH Larutan H3PO4 0,05 M dengan Penambahan NaOH
0,05N. .........................................................................................24Tabel 3.1 Hasil Uji Molisch............................................................................35Tabel 3.2 Hasil Pengamatan Uji Seliwanoff ....................................................35Tabel 3.3 Hasil Pengamatan Uji Benedict.......................................................36Tabel 3.4 Hasil Pengamatan Uji Iodin............................................................36Tabel 4.1 Hasil Pengamatan Uji Kualitatif Asam Amino dengan Uji Ninhidrin .....48
Tabel 4.2 Hasil Pengamatan Uji Kualitatif Peptida dengan Uji Biuret.................48Tabel 4.3 Hasil Pengamatan Uji Sulfur Beberapa Jenis Larutan ........................48Tabel 4.4 Hasil Pengamatan Uji Sifat Isoelektrik Protein..................................48Tabel 5.1 Hasil Pengamatan Jenis Pelarut Terhadap Kehidupan Lemak ............61Tabel 5.2 Hasil Pengamatan Uji Ketidakjenuhan Dua Jenis Minyak...................61Table 5.3 Hasil Pengamatan Sifat Penyabunan dari Dua Jenis Garam Asam
Lemak..........................................................................................61Tabel 6.1 Hasil Pengamatan Penentuan Aktivitas Amilase Air Liur ....................71Tabel 6.2 Hasil Pengamatan Pengaruh pH terhadap Aktivitas Enzim.................71
vi
8/16/2019 Laporan Tetap Biokimia Umum (Kelompok 17).pdf
7/94
1
ACARA IPENGENALAN ALAT DAN BAHAN PRAKTIKUM
PENDAHULUAN
Latar Belakang
Pengenalan alat merupakan langkah pertama sebelum melakukan
percobaan atau penelitian. Mengenal alat, praktikan dapat mengetahui fungsi
masing-masing bagian dari alat tersebut serta cara penggunaan alat yang akan
digunakan dalam percobaan. Mengetahui fungsi dan cara penggunaan alat-alat
yang akan digunakan akan memperlancar jalannya suatu percobaan. Sehingga,
dengan berbekal pengetahuan pemahaman akan fungsi alat tersebut akan
memperoleh hasil penelitian yang maksimal. Penggunaan alat tidak terjadi
kesalahan yang begitu fatal (Coudhary, 2008).
Penggunaan alat-alat laboratorium haruslah dalam keadaan steril.
Sterilisasi dapat mencegah adanya kontaminasi sehingga alat-alat dapat
digunakan dengan aman. Selain itu, pengetahuan bahan-bahan praktikum juga
penting karena bahan-bahan tersebut memiliki sifat yang berbeda. Bahan-bahan
kimia dapat menimbulkan bahaya apabila tidak dikenali sifat dan jenis bahan
tersebut. Jika praktikan tidak mengetahui bahan-bahan praktikum dan tidak
berhati-hati maka dapat menimbulkan kecelakaan kerja.
Dalam percobaan biasanya menggunakan alat-alat yang ada di
Laboratorium. Setiap alat-alat praktikum memiliki fungsi yang berbeda, sehingga
perlu pengenalan alat-alat praktikum. Selain itu, pengenalan alat-alat praktikum
juga sangat penting karena dalam laboratorium terdapat beragam bahan-bahan
yang sangat berbahaya. Apabila alat-alat praktikum salah digunakan dan bahan-
Nama : Risa Intan SartikaNIM : J1A014105
8/16/2019 Laporan Tetap Biokimia Umum (Kelompok 17).pdf
8/94
2
bahan praktikum tidak berhati-hati saat penggunaannya dapat menyebabkan
bahaya bagi diri sendiri maupun orang lain disekitarnya. Oleh karena itu,
pengenalan alat dan bahan praktikum sangat diperlukan guna memperlancar
kegiatan praktikum dan mencegah terjadinya hal-hal yang tidak diinginkan
(Manruw, 2010).
Tujuan Praktikum
Adapun tujuan dari praktikum ini adalah untuk mengetahui nama serta
fungsi dari alat-alat dan mengetahui nama, sifat, serta penanganan pertama
pada bahan-bahan yang ada di Laboratorium.
8/16/2019 Laporan Tetap Biokimia Umum (Kelompok 17).pdf
9/94
3
TINJAUAN PUSTAKA
Pekerjaan dalam laboratorium biasanya sering menggunakan beberapa
alat gelas. Penggunaan alat ini dengan tepat penting untuk diketahui agar
pekerja tersebut dapat berjalan dengan baik. Keadaan yang aman dalam suatu
laboratorium dapat tercipta apabila ada kemauan dari pekerja, pengguna,
maupun kelompok kerja laboratorium untuk menjaga dan melindungi diri.
Diperlukan kesadaran bahwa kecelakaan yang terjadi dapat berakibat pada
dirinya sendiri maupun orang lain disekitarnya. Tujuan dari praktiikum
pengenalan alat ini adalah untuk mengenal beberapa macam alat gelas yang
sering digunakan dalam laboratorium dan penggunaannya (Setiawati, 2002).
Pengenalan alat-alat ini meliputi macam-macam alat, mengetahui nama-
namanya, memahami bentuk, fungsi serta cara kerja alat tersebu. Setiap alat
dirancang atau dibuat dengan bahan-bahan yang berbeda-beda satu sama lain
dan mempunyai fungsi yang sangat spesifik. Kebanyakan peralatan untuk
percobaan di dalam laboratorium terbuat dari gelas. Meskipun peralatan tersebut
telah siap dipakai, tetapi dalam pemasangan suatu alat untuk suatu percobaan
kadang kala diperlukan sambungan-sambungan dengan gelas atau membuat
peralatan khusus sesuai kebutuhan. Hal ini dilakukan karena dalam percobaan
diperlukan berbagai macam alat-alat tertentu (Imamkhasani, 2000).
Peranan laboratorium dalam mempelajari ilmu kimia yaitu untuk
memberikan kelengkapan bagi pelajaran teori yang telah diterima sehingga
antara teori dan praktek bukan merupakan kedua hal yang terpisah melinkan
satu kesatuan. Keduanya saling mengkaji dan saling mencari dasar, memberikan
keterampilan kerja ilmiah bagi praktikan dan juga memupuk keberanian untuk
8/16/2019 Laporan Tetap Biokimia Umum (Kelompok 17).pdf
10/94
4
mencari kebenaran ilmiah suatu objek dalam lingkungan alam dan sosial.
Sebagai alat untuk menambah keterampilan dalam mempergunakan alat media
yang tersedia untuk menentukan kebenaran. Membina rasa ingin tahu dan rasa
percaya diri sebagai keterampilan yang diperoleh penemuan yang didapat dalam
proses kegiatan kerja laboratorium (Rohman, 2010).
Sifat-sifat bahan kimia dalam laboratorium, dapat dibagi menjadi
beberapa macam anatara lain yaitu bahan kimia beracun adalah bahan kimia
yang dapat menyebabkan bahaya terhadap kesehatan manusia atau
menyebabkan kematian apabila terserap kedalam tubuh karena tertelan, lewat
pernafasan atau kontak lewat kulit. Bahan kimia korosit adalah bahana kimia
yang karena ada reaksi kimia dapat menyebabkan kerusakan apabila kontak
dengan jaringan tubuh atau bahan lain. Bahan kimia mudah terbakar adalah
bahan kimia yang mudah bereaksi dengan oksigen dan dapat menimbulkan
kebakaran. Reaksi kebakaran yang amat cepat juga menimbulkan ledakan.
Bahan kimia peledak adalah suatu zat padat atau cair atau campuran keduanya
yang karena suatu reaksi kimia dapat menghasilkan gas dalam jumlah dan
tekanan yang besar serta suhu yang tinggi sehingga menimbulkan kerusakan
disekelilingnya. Bahan kimia reaktif terhadap asam adalah bahan kimia yang
mudah bereaksi dengan asam menghasilkan panas dan gas yang mudah
terbakar atau gas yang beracun dan korosif (Baker, 2010).
Praktikum merupakan salah satu metode pembelajaran yang mampu
menumbuhkembangkan rasa ingin tahu, aktif, kreatif, inovatif dan memiliki
kejujuran dalam menghadapi suatu masalah dalam realita kehidupan. Melalui
praktikum, mahasiswa memperoleh kemampuan konkrit untuk melengkapi teori
8/16/2019 Laporan Tetap Biokimia Umum (Kelompok 17).pdf
11/94
5
yang diperoleh di kelas yang bersifat verbalistik, melatih keterampilan ilmiah,
menanamkan dan menumbuhkan sikap ilmiah serta meningkatkan motivasi
belajar. Laborataorium dan berbagai sarana prasarananya berperan penting
dalam proses praktikum (Udaibah, 2014).
8/16/2019 Laporan Tetap Biokimia Umum (Kelompok 17).pdf
12/94
6
PELAKSANAAN PRAKTIKUM
Waktu dan Tempat Praktikum
Praktikum ini dilaksanakan pada hari Kamis, 05 November 2015 di
Laboratorium Kimia dan Biokimia Pangan Fakultas Teknologi Pangan dan
Agroindustri Universitas Mataram.
Alat dan Bahan Praktikum
a. Alat-alat praktikum
Adapun alat-alat yang digunakan dalam praktikum ini adalah alat-alat
seperti tabung reaksi, pipet tetes, gelas kimia, gelas ukur, erlenmeyer,
timbangan analitik, rak tabung reaksi, spektrofotometer, lemari pendingin,
dan hot plate
b. Bahan-bahan praktikum
Adapun bahan-bahan yang digunakan dalam praktikum ini adalah
Natrium Klorida (NaCl), Natrium Hidroksida (NaOH), Asam Klorida (HCl),
Asam Sulfat (H₂SO₄) dan Asam Sitrat (HNO₃).
8/16/2019 Laporan Tetap Biokimia Umum (Kelompok 17).pdf
13/94
7
HASIL PENGAMATAN
Tabel 1.1 Hasil Pengamatan Alat-alat Praktikum
No. Nama Alat Gambar Fungsi
1. Tabung Reaksi Sebagai alat untuk mereaksikan
dua zat atau lebih, menyimpan
zat serta untuk pemanasan
suatu larutan.
2. Gelas Kimia Sebagai tempat mereaksikan
bahan kimia, membuat larutan,
menampung bahan kimia
berupa larutan, padatan atau
pasta, melarutkan dan
memanaskan bahan.
3. Erlenmeyer Sebagi tempat mereaksikan
bahan, untuk menempatkan
larutan yang akan dititrasi.
8/16/2019 Laporan Tetap Biokimia Umum (Kelompok 17).pdf
14/94
4. Pipet Tetes
5. Gelas Ukur
6. Timbangan
Analitik
7. Bulb pipet
Untuk m
suatu w
lain dala
Untuk m
dengan
tidak m
tingkat ti
Berfungsi
bahan y
pada
ketelitian
Berfungsi
dalam
dalam pi
8
mindahkan cairan dari
dah ke wadah yang
jumlah sedikit
ngukur sutau larutan
olume tertentu yang
emerlukan ketelitian
ggi.
untuk menimbang
nag akan digunakan
praktikum dengan
yang tinggi.
untuk membantu di
engisian laruan ke
et
8/16/2019 Laporan Tetap Biokimia Umum (Kelompok 17).pdf
15/94
9
8. Rak Tabung
Reaksi
Digunakan sebagai wadah
untuk meletakkan atau
menyimpan tabung reaksi.
9. Lemari
Pendingin
Sebagai tempat penyimpanan
enzim agar tidak terjadi
denaturasi, segabai tempat
penyimpanan bahan makanan
sehingga mencegah terjadinya
pembusukan.
10. Hot Plate Untuk menghomogenkan suatu
campuran dari dua atau lebih
zat sehingga tercampur dan
bersifat homogeny.
8/16/2019 Laporan Tetap Biokimia Umum (Kelompok 17).pdf
16/94
10
Tabel 1.2 Hasil Pengamatan Bahan-Bahan Praktikum
No. Nama BahanNamaKimia
Sifat Bahaya Penanganan Pertama
1. Garam Dapur NaCl Bersifat korosif dan
mudah larut dalam air
Dapat menyebabkan
gangguan pernafasan, iritasi
mata dan kulit jika terjadi
kontak langsung.
- Jika terkena mata, segera siram dengan
dengan air ± 15 menit
- Jika terkena kulit segera basuh dengan air
dan tutupi dengan sesuatu yang lunak
- Jika terhirup, maka segera pindah ke
tempat yang udaranya terbuka
2. Asam Klorida HCl Bau menyengat, tidak
mudah terbakar dan
sangat korosif
Dapat menyebabkan iritasi
dan luka bakar
- Bila terkena mata, bilas dengan air mengalir
±15 menit
- Bila terkena kulit, cuci dengan air sebanyak-
banyaknya
- Jika tertelan, beri minum 1-2 gelas untuk
pengenceran
- Bila terhirup, segera pindah ke tempat yang
udaranya lebih segar
8/16/2019 Laporan Tetap Biokimia Umum (Kelompok 17).pdf
17/94
11
3. Natrium
Hidroksida
NaOH Solid, berbau, mudah
larut dalam air dingin,
dan dapat merusak
logam
Dapat menyebabkan luka
bakar dapat menyebabkan
kerusakan pada jaringan jika
terkena kulit
- Gunakan sarung tangan saat praktikum
- Jika terkena mata, segera bilas dengan air
beberapa menit
- Basuh dengan air jika terkena kulit
4. Asam Sulfat H₂SO₄ Bersifat korosif dan
tidak mudah terbakar
Menyebabkan iritasi dan luka
bakar, berbahaya jika
tertelan dan terhirup
- Jika terkena kulit, cuci daerah yang terkena
dengan sabun dan air
- Jika terkena mata, segera bilas dengan air
±15 menit
- Jika terhirup, maka segera ke tempat yang
udaranya lebih segar
5. Asam Sitrat HNO₃ Bersifat korosif dan
merupakan asam yang
beracun
Dapat menyebabkan
iritasi dan luka bakar,
- Jika terkena kulit, lepas pakaian yang
terkontaminasi
- Jika terkena mata, basuh dengan air
secara hati-hati
- Jika terhirup, segera mencari udara
yang segar
8/16/2019 Laporan Tetap Biokimia Umum (Kelompok 17).pdf
18/94
12
PEMBAHASAN
Larutan didefinisikan sebagai campuran homogen antara dua atau lebih
zat yang terdispersi baik sebagai molekul, atom maupun ion yang komposisinya
dapat bervariasi. Larutan dapat berupa gas, cairan atau padatan. Larutan encer
adalah larutan yang mengandung sejumlah kecil solute , relative terhadap jumlah
pelarut. Sedangkan larutan pekat adalah larutan yang mengandung sebagian
besar solute . Solute adalah zat terlarut, sedangkan solvent adalah pelarutnya.
Pembuatan larutan adalah suatu cara mempelajari cara pembuatan larutan dari
bahan cair atau padat dengan konsentrasi tertentu. Untuk menyatakan
kepekatan atau konsentrasi suatu larutan dapat dilakukan berbagai cara
tergantung pada tujuan penggunaannya. Langkah-langkah dalam membuat
larutan adalah yang pertama membaca detail resep larutan yang ingin dibuat.
Kalau ada yang perlu dihitung, siapkan perhitungan dulu. Kedua, kumpulkan
bahan kimia yang akan dipakai dan letakkan dekat dengan timbangan digital.
Ketiga, siapkan alat lain yang dibutuhkan, seperti kertas, sendok, tisu, beaker ,
sarung tangan dan sebaginya. Keempat, baru kemudian mengukur jumlah bahan
kimia yang dibutuhkan dengan hati-hati. Ketika semua bahan kimia diukur,
rapikan dan bersihkan alat timbang dan peralatan disekitarnya. Kelima, tuangkan
aquades secukupnya kedalam beaker dan letakkan stir bar dengan ukuran yang
sesuai kedalamannya. Pakailah alat otomatik stirrer dengan kecepatan sedang
untuk mengencerkan bahan kimia.
Jenis-jenis larutan berdasarkan kejenuhannya yaitu pertama larutan tak
jenuh adalah larutan yang mengandung solute kurang dari yang diperlukan
untuk membuat larutan jenuh. Larutan tak jenuh terjadi apabila hasil kali
8/16/2019 Laporan Tetap Biokimia Umum (Kelompok 17).pdf
19/94
13
konsentrasi ion lebih kecil dari Ksp berarti larutan belum jenuh. Kedua, larutan
jenuh adalah suatu larutan yang mengandung sejumlah solute yang larut dan
mengadakan kesetimbangan dengan solute padatnya. Larutan jenuh terjadi
apabila hasil konsentrasi ion sama dengan Ksp berarti larutan tepat jenuh.
Ketiga, larutan sangat jenuh adalah suatu larutan yang mengandung lebih
banyak solute daripada yang diperlukan untuk larutan jenuh. Larutan sangat
jenuh terjadi apabila hasil kali konsentrasi ion lebih besar dari Ksp berarti larutan
lewat jenuh (mengendap). Berdasarkan banyak sedikitnya zat terlarut, larutan
dibedakan menjadi larutan pekat yaitu larutan yang mengandung relative lebih
banyak solute dibanding solvent. Larutan tidak pekat (encer) yaitu larutan yang
relative lebih sedikit solute dibandingkan solvent. Berdasarkan kemampuan
mengahntarkan listrik, larutan dibagi menjadi larutan elektrolit yaitu larutan yang
dapat menghantarkan listrik dengan baik dan larutan non elektrolit yaitu larutan
yang tidak dapat menghantarkan listrik.
Hasil pengamatan alat-alat praktikum yaitu diketahui terdapat alat-alat
yang termasuk glassware yang meliputi tabung reaksi yaitu sebuah tabung yang
terbuat dari kaca yang dapat menahan temperatur dan tahan terhadap reaksi
kimia. Tabung reaksi berfungsi untuk mereaksikan bahan kimia. Gelas kimia yaitu
tempat untuk melarutkan zat yang tidak butuh ketelitian tinggi, misalnya
pereaksi atau reagen untuk analisis kimia kuantitatif atau pembuatan larutan
standar sekunder analisis titrimetri atau volumetri. Pipet tetes yaitu jenis pipet
yang berupa pipa kecil terbuat dari kaca dengan ujung bawahnya meruncing
serta ujung atasnya ditutupi karet. Alat ini berfungsi untuk mengambil larutan
dalam jumlah sedikit. Erlenmeyer yaitu alat berupa gelas diameternya semakin
8/16/2019 Laporan Tetap Biokimia Umum (Kelompok 17).pdf
20/94
14
atas semakin kecil dengan skala disepanjang dindingnya. Alat ini berfungsi untuk
mereaksikan bahan atau menampung hasil titrasi. Gelas ukur yaitu alat yang
digunakan untuk mengukur volume larutan dari 10 hingga 2000 ml. alat ini
memiliki bentuk seperti pipa dengan bawah agak sedikit lebar sebagai kaki atau
penyangganya. Terdapat juga alat-alat nonglassware seperti timbangan analitik
yaitu timbangan yang digunakan untuk menimbang suatu yang bersifat halus
dan tidak bias menggunakan timbangan biasa. Timbangan analitik dimulai dari
dua angka dibelakang koma sampai lima angka dibelakang koma. Rak tabung
reaksi yaitu dinakan sebagai tempat meletakkan atau menyimpan tabung reaksi
yang kosong maupun yang berisi. Biasanya rak tabung reaksi terbuat dari kayu
atau plastik dan terdapat 12 lubang. Lemari pendingin yaitu sebagai tempat
untuk menyimpan bahan makanan agar terhindar dari pembusukan serta
menyimpan enzim agar enzim tidak mengalami denaturasi. Hot plate yaitu
berfungsi menghomogenkan larutan dengan pengadukan. Plate yang terdapat
pada alat ini dapat dipanaskan sehingga mempercepat homogenisasi.
Bahan yang digunakan dalam membuat larutan pada prkatikum ini adalah
HCl. Pertama-tama, HCl yang dikonsentrasikan memiliki berat massa 36,5 gr/mol,
HCl memiliki kerapatan 1,19 gr/ml dengan persen berat sebanyak 37% dari berat
HCl. Berapa ml asam konsentrat tersebut yang harius dilarutkan dalam satu liter
air untuk membuat larutan 0,1 M ini?
Untuk membuat larutan HCl, terlebih dahulu dihitung jumlah HCl yang
dibutuhkan.
Diketahui : • Volume Larutan = 1 liter
• % berat = 47%
8/16/2019 Laporan Tetap Biokimia Umum (Kelompok 17).pdf
21/94
15
• Berat Massa = 36,5 gr/mol
• Konsentrasi = 0,1 m
• Kerapatan = 1,19 gr/m
Ditanya : volume asam konsentrasi ?
gram HCl yang dibutuhkan = 1 liter air x 0,1 m/liter x 36,5 gr/mol = 36,5 gram.
Setelah didapatkan jumlah HCl yang dibutuhkan kemudian dicari sejumlah HCl
dalam ini :
gr HCl/ml = rapat massa x % berat
= 1,19 x 0,37
= 0,44 gr/ml
Dari hasil perhitungan yang telah dilakukan, maka dapat diketahui jumlah ml
asam konsentrat dalam 1 liter air yakni :
Volume asam konsentrat =gr HCl yang dibutuhkan
gr HCl per ml air
=36,5 gr
0,44 gr/ml
= 8,3 ml
Jadi, dapat disimpulkan bahwa jumlah volume asam konsentrat adalah
8,3 ml. sehingga, cara pembuatan larutan HCL 0,1 M sebanyak 1 liter air adalah
mengisi labu takar ukuran 1 liter dengan aquades sebanyak 250 ml, lalu
ditambahkan dengan 8,3 ml asam konsentrat secara perlahan kemudian di kocok
dan ditambahkan aquades sampai 1 liter atau 1000 ml sehingga, pada proses
akhir didapatkan jumlah konsentrasi asam asetat yang dibutuhkan adalah 0,1 M.
8/16/2019 Laporan Tetap Biokimia Umum (Kelompok 17).pdf
22/94
16
Cara-cara yang digunakan untuk membuat larutan NaOH 0,1 M dengan
volume sebanyak 50 ml aquades, sehingga akan didapatkan jumlah mol NaOH
sebanyak 2 mol. Adapun yang diketahui pertama kali adalah :
M = 0,1 m
V = 50 ml = 0,05 liter
Kemudian dimasukkan ke rumus molaritas :
Molaritas =n
V
0,1 M =n
0,05 liter
n = 5 x 10-3 M/liter
n =gr
Mr
5 x 10-3 =gr
40
gr = 0,2 gram
Sehingga untuk membuat larutan NaOH 0,1 M dibutuhkan 0,2 gr NaOH
yang dilarutkan dalam 50 ml aquades pada gelas ukur, kemudian dikocok
sehingga didapatkan proses akhir jumlah konsentrasinya 0,1 m.
8/16/2019 Laporan Tetap Biokimia Umum (Kelompok 17).pdf
23/94
17
KESIMPULAN
Berdasarkan hasil pengamatan dan pembahasan maka dapat ditarik
beberapa kesimpulan sebagai berikut :
1. Alat-alat praktikum terbagi menjadi dua yaitu glassware yang meliputi tabung
reaksi, gelas kimia, gelas ukur, pipet tetes, Erlenmeyer dan nonglassware
meliputi rak tabung reaksi, hot plate, lemari pendingin, spektrofotometer, dan
timbangan analitik.
2. Larutan merupakan campuran homogen antara dua atau lebih zat yang
terdispersi baik sebagai atom, molekul atau ion.
3. Berdasarkan kejenuhannya larutan dibagi menjadi larutan jenuh dan tidak
jenuh, berdasarkan banyak sedikitnya zat terlarut dibagi menjadi larutan
pekat dan tidak pekat, sedangkan berdasarkan kemampuan menghantarkan
listrik larutan dibagi menjadi larutan elektrolit dan non elektrolit.
4. Pembuatan larutan 0,1 M asam konsentrat yang harus dilarutkan dalam 1
liter air yaitu sebanyak 8,3 ml.
5. Pembuatan larutan NaOH 0,1 M dengan volume 50 ml dibutuhkan NaOH
sebanyak 0,2 gram.
8/16/2019 Laporan Tetap Biokimia Umum (Kelompok 17).pdf
24/94
18
ACARA IILARUTAN BUFFER
PENDAHULUAN
Latar Belakang
Larutan penyangga atau larutan buffer adalah larutan yang dapat
mempertahankan pH tertentu terhadap usaha mengubah pH, seperti
penambahan asam, basa, ataupun pengenceran. Dengan kata lain pH larutan
penyangga tidak akan berubah walaupun pada larutan tersebut diencerkan.
Sebenarnya penambahan sedikit asam, basa atau pengenceran pada larutan
penyangga menimbulkan sedikit perubahan pH, sehingga pH larutan diangga
tidak bertambah atau pH tetap pada kisarannya. Namun jika asam atau basa
ditambahkan kelarutan bukan penyangga maka perubahan larutan pH akan
sangat mencolok (Milady, 2010).
Larutan penyangga mempunyai beberapa fungsi, salah satunya dalam
bidang kesehatan. Dalam bidang farmasi (obat-obatan), banyak zat aktif yang
harus berada dalam keadaan pH yang stabil. Perubahan pH akan menyebabkan
zat aktif tersebut berkurang atau hilang sama sekali. Untuk obat suntik atau obat
tetes mata, pH obat-obatan tersebut harus disesuaikan dengan pH cairan tubuh.
Obat tetes mata harus sesuai dengan pH air mata agar tidak menimbulkan ritasi
yang menyebabkan iritasi pada mata. Begitu juga dengan obat suntik harus
disesuaikan dengan pH darah agar tidak menimbulkan alkolosis atau asidosis
pada darah (Padmono, 2007).
Sifat dari larutan buffer yaitu pH larutan tidak berubah dan jika
diencerkan tidak berubah pula jika ditambahkan kedalamnya sedikit asam atau
Nama : Rangga MahendraNIM : J1A014101
8/16/2019 Laporan Tetap Biokimia Umum (Kelompok 17).pdf
25/94
19
basa. Pada dasarnya suatu larutan penyangga yang tersusun dari asam lemah
dan basa konjugasi merupakan suatu sistem kesetimbangan ion dalam air, yang
melibatkan adanya kesetimbangan airdan kestimbangan asam lemah. Disamping
itu, terdapat ion basa konjugasi yang berasal dari garam atau hasil reaksi antara
asam lemah tersebut dengan basa kuat. Buffer dapat didefinisikan sebagai asam
basa lemah dengan garamnya. Fungsi buffer adalah untuk mempertahankan pH
larutan saat ditambah asam-basa lemah dalam jumlah yang relatif sedikit.
Kapasitas buffer adalah parameter kuantitatif yang menunjukkan kekuatan
(resistensi) untuk mempertahankan pH (Mulyasa, 2009). Oleh karena itu,
dilakukannya percobaan pH dan larutan buffer agar kita mengetahui fungsi dan
kegunaan dari larutan buffer serta manfaatnya dibidang kesehatan.
Tujuan Praktikum
Adapun tujuan dari praktikum ini adalah untuk membandingkan tampilan
perubahan pH asam kuat dengan asam lemah yang dititrasi dengan NaOH.
8/16/2019 Laporan Tetap Biokimia Umum (Kelompok 17).pdf
26/94
20
TINJAUAN PUSTAKA
Larutan penyangga atau larutan buffer merupakan suatu larutan yang
dapat mempertahankan nilai pH tertentu. Adapun sifat yang paling menonjol dari
larutan penyangga ini seperti pH larutan penyangga hanya berubah sedikit pada
penambahan sedikit asam kuat. Disamping itu larutan penyangga merupakan
larutan yang dibentuk oleh reaksi suatu asam lemah dengan basa konjugasinya
ataupun dengan basa lemah dengan basa konjugasinya. Reaksi ini disebut
dengan reaksi asam-basa konjugasi. Disamping itu mempunyai sifat yang
berbeda dengan komponen-komponen pembentuknya (Chang. R, 2006).
Sifat dari larutan buffer yaitu pH larutan tidak berubah jika diencerkan
dan tidak berubah pula jika ditambahkan kedalamnya, sedikit asam atau basa.
Pada dasarnya suatu larutan penyangga yang tersusun dari asam lemah dan
basa konjugasi merupakan suatu sistem kesetimbangan ion dalam air, yang
melibatkan adanya kesetimbangan dalam air dan kesetimbangan asam lemah.
Disamping itu, terdapat ion basa konjugasi yang berasal dari garam atau hasil
reaksi antara asam lemah tersebut dengan basa kuat (Sudarmo, 2005).
Senyawa-senyawa organik yang dapat digunakan sebagai indikator dalam
titrasi mempunyai karakteristik yaitu senyawa memberikan perubahan warna
terhadap suasana pH larutan. Perubahan warna dapat terjadi melalui proses
kesetimbangan bentuk molekul dan ion dari senyawa indikator tersebut. Sebagai
contoh senyawa fenolftalein merupakan indikator asam lemah-basa kuat
(Nuryanti, 2010).
Faktor-faktor yang mempengaruhi pH larutan buffer adalah penambahan
garam-garam netral kedalam larutan dapat mengubah pH larutan dengan
8/16/2019 Laporan Tetap Biokimia Umum (Kelompok 17).pdf
27/94
21
berubahnya kekuatan ion. Perubahan kekuatan ion dan pH larutan buffer dapat
pula disebabkan oleh pengenceran. Penambahan air dalam jumlah cukup, jika
tidak mengubah pH dapat mengakibatkan penyimpangan positif atau negatif
sekalipun kecil sekali. Karena air selain dapat mengubah niali koefisien
kereaktifan dapat juga bertindak sebagai asam lemah atau basa lemah (Martin,
1990).
Kelarutan buffer terkadang menyulitkan karena hampir setiap analisa
membutuhkan kondisi pH tertentu yang relatif stabil, karena banyaknya macam
dan jenis buffer. Pemilihan buffer yang akan digunakan menjadi masalah
tersendir. Dalam memilih buffer, yang harus diperhatikan adalah pH optimum
serta sifat-sifat biologisnya. Banyak jenis buffer yang mempunyai dampak
terhadap sistem biologis, aktivitas enzim, substrat, ataupun kofaktor
(Krisbiantoro, 2008).
8/16/2019 Laporan Tetap Biokimia Umum (Kelompok 17).pdf
28/94
22
PELAKSANAAN PRAKTIKUM
Waktu dan Tempat Praktikum
Praktikum ini dilaksanakan pada hari kamis, 12 November 2015 di
Laboratorium Kimia dan Biokimia Pangan Fakultas Teknologi Pangan dan
Agroindustri Universitas Mataram.
Alat dan Bahan Praktikum
a. Alat-alat praktikum
Adapun alat-alat yang digunakan pada praktikum ini adalah
erlenmeyer, labu ukur, gelas piala, pipet volum, pH stik, statif, gelas ukur
dan ruber bulb .
b. Bahan –bahan praktikum
Adapun bahan-bahan yang digunakan pada praktikum ini adalah
larutan NaOH 0,01 N dan 0,05 N, larutan HCl 0,1 M, larutan H3PO4 0,05 M
dan aquades.
Prosedur Kerja
a. Titrasi Larutan HCl
Disiapkan HCl 0,1 M, aquades, NaOH 0,01 M
Diambil 2 ml HCl 0,1 M, dimasukkan dalam gelas piala 18 ml aquades
Diaduk rata
Diukur pH dengan pH stik
Dititrasi dengan NaOH 0,01 M (50 ml)
Diukur pH dengan pH stik dengan selang pengukuran 5 ml sambil diaduk
Digambar kurva titrasi hubungan antara perubahan pH dan volume larutan
8/16/2019 Laporan Tetap Biokimia Umum (Kelompok 17).pdf
29/94
23
b. Titrasi Larutan H3PO4
Disiapkan H3PO4 , NaOH 0,05 N
Diambil 20 ml H3PO4 0,05 M, dimasukkan dalam gelas piala
Diaduk rata
Diukur pH dengan pH stik
Dititrasi dengan NaOH 0,01 N (30 ml)
Diukur pH dengan pH stik dengan selang pengukuran 5 ml sambil diaduk
Digambar kurva titrasi hubungan antara perubahan pH dan volume larutan
8/16/2019 Laporan Tetap Biokimia Umum (Kelompok 17).pdf
30/94
24
HASIL PENGAMATAN
Tabel 2.1 Perubahan pH Larutan HCL 0,1 M dengan Penambahan 0,01 N
Volume NaOH 0,01 N (ml) yang ditambahkan
0 5 10 15 20 25 30
pH larutan HCL 2 2 3 3 3 4 4
Tabel 2.2 Perubahan pH Larutan H3PO4 0,05 M dengan Penambahan NaOH0,05N.
Volume NaOH 0,05 N (ml) yang ditambahkan
0 5 10 15 20 25 30
pH larutan HCL 2 2 2 2 3 3 3
Kurva titrasi hubungan antara perubahan pH dengan volume NaOH
a. Perubahan pH HCl
b. Perubahan pH H3PO4
0
1
2
3
4
5
5 10 15 20 25 30
p H
volume NaOH
perubahan pH
HCl
0
0.5
1
1.5
22.5
3
3.5
5 10 15 20 25 30
p H
volume NaOH
perubahan pH
HCl
8/16/2019 Laporan Tetap Biokimia Umum (Kelompok 17).pdf
31/94
25
PEMBAHASAN
Larutan buffer adalah larutan yang berfungsi menahan perubahan pH
yang ekstrim pada saat terjadi penambahan jumlah ion H dan OH dalam
larutan. Buffer tersusun atas asam lemah dengan basa konjugasinya atau
dengan basa lemah dengan asam konjugasinya. Reaksi antara kedua komponen
penyusun ini disebut dengan reaksi asam-basa konjugasi. Larutan penyangga
yang bersifat asam akan mempertahankan pH pada daerah asam (pH < 7),
sedangkan larutan penyangga yang bersifat basa akan mempertahankan pH
pada daerah basa (pH > 7) (Anonim, 2013).
Praktikum ini ada dua uji yang dilakukan yaitu uji titrasi HCl dan uji titrasi
H3PO4. Dimana praktikum ini dilakukan untuk membandingkan perubahan pH
pada asam kuat dan basa lemah dengan dilakukan titrasi dengan menggunakan
NaOH yang konsentrasinya 0,01 N (ml) dan 0,05 N (ml). Pada uji titrasi HCL
yang dilakukan dengan menitrasi NaOH yang memiliki konsentrasi 0,01 N (ml) pH
larutan ini adalah 2, setelah ditambahkan 5 ml pertama NaOH diperoleh pH 2,
pada 10 ml didapatkan pH 3. Kemudian pada 15 ml larutan didapatkan pH 3,
pada 20 ml larutan didapatkan pH 3 dan pada larutan 25 dan 30 ml didapatkan
pH 4. Berdasarkan hasil pengamatan tersebut didapatkan kurva yang meningkat,
sehingga dapat disimpulkan bahwa larutan penyangga ini bersifat asam lemah
karena dapat mempertahankan pH > 7. Walaupun pada larutan dari 0 sampai 30
ml pH larutan tersebut meningkat, tetapi tidak melebihi pH yang ditetapkan.
Praktikum pada uji kedua yaitu pengujian larutan H3PO4 menggunakan
NaOH dengan konsentrasi 0,05 N (ml). Sebelum ditambahkan NaOH pada 5 ml
pertama pH larutan adalah 2, setelah ditambahkan 5 ml kedua yaitu 10 ml
8/16/2019 Laporan Tetap Biokimia Umum (Kelompok 17).pdf
32/94
26
larutan didapatkan pH 2, pada larutan ke 15 pH 2. Dan pada larutan ke 20, 25
dan 30 didapatkan pH masing-masing pada setiap larutan. Berdasarkan data
tersebut larutan penyangga ini bersifat asam lemah karena pH nya > 7.
Penambahan asam (H ) akan menggeser kesetimbangan kekiri. Dimana
ion H yang ditambahkan bereaksi dengan ion CH3COŌ untuk membentuk
molekul CH3COO. Jika ditambahkan larutan basa maka ion OH dari basa itu
akan bereaksi dengan ion H maka dapat membentuk air (H2O). Hal ini akan
menyebabkan kesetimbangan bergeser kekanan sehingga konsentrasi ion
H dapat dipertahankan. Jadi, penambahan basa menyebabkan berkurangnya
kompinen asam. Penambahan NaOH akan menghancurkan ion OH sehingga pH
menjadi naik.
Reaksi-reaksi kimia pada tubuh makhluk hidup hanya berlangsung pada
pH tertentu. Oleh karena itu, cairan tubuh harus merupakan larutan penyangga
agar pH selalu konstan ketika metabolisme berlangsung, karena sistem buffer
akan mempertahankan pH tubuh agar tetap selalu normal.
Asam klorida (HCl) adalah asam kuat, dan terbuat dari aton hodrogendan
klorin. Atom hidrogen dan kolin berpartisipasi dalam ikatan kovalen, yang berarti
bahwa hidrogen akan berbagi sepasang elektron dengan klorin. Ikatan kovalen
hadir sampai air ditambahkan ke HCl. Setelah ditambahkan kedalam air, HCl
akan terpisah menjadi ion yang positif dan akan melekat pada air (ion hidrogen)
dan ion negatif (ion klorida). HCl bening dan tidak berwarna ketika ditambahkan
kedalam air. Namun, asam klorida memiliki bau yang kuat, dan mengandung
rasa asam yang khas dari kebanyakan asam. Asam klorida mudah larut dalam air
8/16/2019 Laporan Tetap Biokimia Umum (Kelompok 17).pdf
33/94
27
pada semua konsentrasi, dan memiliki titik didih sekitar 100ºC. HCL juga bersifat
korosif yang akan merusak dan mengikis jaringan biologis jika tersentuh.
NaOH berwarna putih, membentuk pellet, serpihan atau batang dan
bentuk lain. Sangat basa, keras, rapuh dan menunjukkan pecahan hablur. Bila
dibiarkan keudara akan cepat menyerap CO2 dan lembab. Mudah larut dalam air,
dan etanol tetapi tidak larut dalam eter. NaOH membentuk basa kuat bila
dilarutakan dalam air. Sedangkan H3PO4 bersifat asam lemah.
Faktor-faktor yang mempengaruhi larutan buffer adalah penambahan
garam-garam netral kedalam larutan dapar mengubah pH larutan dengan
berubahnya kekuatna ion. Perubahan kekuatan ion dan pH dapar, dapat pula
disebabkan oleh pengenceran. Penambahan air dalam jumlah cukup, jika tidak
mengubah pH dapat mengakibatkan penyimpangan positif atau negatif sekalipun
skala kecil.
8/16/2019 Laporan Tetap Biokimia Umum (Kelompok 17).pdf
34/94
28
KESIMPULAN
Berdasarkan hasil pengamatan dan pembahasan maka dapat disimpulkan
sebagai berikut :
1. Lartan buffer adalah larutan yang berfungsi menahan perubahan pH yang
ekstrim pada saat terjadi penambahan jumlah ion H dan OH dalam larutan
2. Penambahan basa (OH ), jika bereaksi dengan ion H akan membentuk
molekul air (H2O).
3. HCL bersifat bening dan tidak berwarna ketika ditambahkan H2O. Namun,
HCL memiliki bau yang kuat dan bersifat asam kuat.
4. NaOH berwarna putih, berbentuk serpihan tau batang, sangat basa, keras,
serta rapuh dan bersifat basa kuat.
5. Faktor-faktor yang mempengaruhi larutan buffer adalah penambahan
garam-garam netral dan larutan dapar mengubah larutan pH dengan
berubahnya kekuatan ion.
8/16/2019 Laporan Tetap Biokimia Umum (Kelompok 17).pdf
35/94
29
ACARA IIIUJI KARBOHIDRAT
PENDAHULUAN
Latar belakang
Energi merupakan salah asatu hal utama yang dibutuhkan oleh manusia
dalam melakukan aktivitas sehari-hari. Energi dapat diperoleh dari makanan yang
mengandung senyawa organik seperti karbohidrat. Makanan yang mengandung
karbohidrat bersal dari biji-bijian dan sayuran. Karbohidrat adalah senyawa
organik yang terdiri dari unsur karbon, hidrogen dan oksigen. Unsur tersebut
sangat dibutuhkan oleh manusia dalam melangsungkan hidupnya (Haris, 2014).
Selain sebagai sumber enegri, karbohidrat juga berfungsi sebagi
cadangan makanan. Pati, sukrosa dan glukosa merupakan senyawa karbohidrat
yang penting dalam kehidupan. Hal ini menunjukkan bahwa kandungan
karbohidrat dalam tiap bahan pangan berbeda. Penting bagi kita untuk
mengetahui berbagai jenis karbohidrat yang terdapat pada bahan pangan. Ada
beberapa cara yang dapat digunakan untuk menganalisis karbohidrat antara lain
uji Molisch , uji Seliwanoff , uji Benedict , dan uji iodin.
Karbohidrat pada umumnya merupakan zat padat berwarna putih yang
sukar larut dalam pelarutorganik tetapi larut dalam air. Berdasarkan monomernya
karbohidrat dibagi menjadi tiga yaitu monosakarida, oligisakarida, dan
polisakarida. Monosakarida merupakan senyawa karbohidrat paling sederhana.
Oligosakarida merupakan kelompok karbohidrat yang terdiri dari 2 sampai 10
monosakarida sedangkan polisakarida adalah karbohidrat dengan rantai yang
Nama : Nurul Yeni SafitriNIM : J1A014095
8/16/2019 Laporan Tetap Biokimia Umum (Kelompok 17).pdf
36/94
30
panjang. Oleh karena itu, praktikum ini perlu dilakukan untuk mengetahui
macam-macam uji karbohidrat.
Tujuan Praktikum
Adapun tujuan dari praktikum ini adalah untuk mengidentifikasi berbagai
jenis karbohidrat berdasarkan terbentuknya furfural, sifat preduksinya, dan
perubahan warna iodin yang terikat pada molekul polisakarida sebelum dan
sesudah terhidrolisis.
8/16/2019 Laporan Tetap Biokimia Umum (Kelompok 17).pdf
37/94
31
TINJAUNA PUSTAKA
Uji iodin bertujuan untuk mengidentifikasi polisakarida. Reagen yang
digunakan dalah iodin yang merupakan terlarut dalam potasium iodin. Reaksi
antara polisakarida umumnya membentuk rantai heliks, sehingga dapat berikatan
dengan iodin, sedangkan karbohidrat berantai pendek seperti disakarida dan
monosakarida tidak membentuk struktur heliks sehingga tidak dapat berikatan
dengan iodin. Amilum dengan iodin dapat membentuk komplek biru, amilopektin
dengan iodine akan memberi warna merah ungu sedangkan dengan glikogen
dan dekstrin akan membentuk merah coklat (Haris, 2014).
Karbohidrat adalah komponen bahan pangan yang tersusun oleh tiga
unsur utama, yaitu karbon (C), hidrogen (H), dan oksigen (O). Susunan atom-
atom tersebut dan ikatannya membedakan karbohidrat yang satu dengan yang
lainnya sehingga ada karbohidrat yang masuk kedalam kelompok struktur
sederhana seperti monosakrida dan disakarida dengan struktur komplek atau
polisakarida seperti pati, glikogen, dan hemiselulosa. Analisis kualitatif
karbohidrat umumnya didasarkan atas reaksi-reaksi warna yang dipengaruhi oleh
produk-produk hasil penguraian senyawa organik, sifat mereduksi dan gugus
karboksil dan sifat oksidasi dari gugusan hidroksil yang berdekatan. Reaksi
dengan asam kuat seperti asam sulfat, hidroklorat dan fosfat pada karbohidrat
menghasilkan pembentukan produk terurai yang berwarna. Beberapa analisis
kualitatif karbohidrat yang sering dilakukan adalah uji molisch, uji seliwanoff, uji
antone, dan uji fenol (Kusbandari, 2015).
Disakarida adalah produk kondensasi dua unit monosakarida, ada empat
jenis disakarida yaitu, sukrosa, maltosa, laktosa dan triholosa. Kedua
8/16/2019 Laporan Tetap Biokimia Umum (Kelompok 17).pdf
38/94
32
monosakarida yang saling mengikat berupa ikatan glikosidik melalui satu atom
oksigen, ikatan glikosidik ini biasanya terjadi antara atom C nomor 1 dengan
atom C nomor 4 dan membentuk ikatan dengan melepas satu molekul. Hanya
karbohidrat yang unit monosakaridanya terikat dalam bentuk alfa dapat dicerna.
Disakarida dapat di pecah kembali menjadi dua molekulmonosakarida melalui
hidrolisi. Glukosa terdapat pada empat jenis disakarida, monosakarida lainnya
adalah fruktosa dan galaktosa (Almaitser, 2010).
Karbohidrat merupakan senyawa yang terdiri atas unsur karbon, hidrogen
dan oksigen. Tepung atau amilum merupakan salah satu bentuk dari karbohidrat
yang merupakan bagian utama dari bahan makanan seperti gandum, jagung,
kentang, ubi da lain-lain. Keberadaan amilum didalam bahan makanan diuji
dengan pemberian larutan yodium. Larutan yodium menyebabkan amilum
berubah warnanya menjadi biru tua. Bahan makanan yang mengandung amilum
jika ditetesi larutan yodium akan berubah warnanya menjadi biru keunguan atau
biru kehitaman (Yunaida, 2014).
Karbohidrat merupakan senyawa metabolit primer selain protein dan lipid.
Karbohidrat mempunyai peranan yang penting dalam kehidupan manusia, antara
lain adalah sebagai sumber tenaga dan penghasil panas tubuh. Adanya
karbohidrat dapat diidentifikasi dengan mengguanakan berbagai metode. Salah
satu metode yang paling umum digunakan adalah uji molisch. Uji molisch sangat
efektif untuk senyawa-senyawa yang dapat didehidrasi oleh asam pekat menjadi
senyawa furfural yang tersubstitusi warna yang disebabkan oleh kondensasi
furfural dengan alfa-naftol menghasilkan senyawa kompleks berwarna merah
ungu (Muddinjafar, 2013).
8/16/2019 Laporan Tetap Biokimia Umum (Kelompok 17).pdf
39/94
33
PELAKSANAAN PRAKTIKUM
Waktu dan Tempat Praktikum
Praktikum ini dilaksanakan pada hari Kamis, 19 November 2015 di
Laboratorium Kimia dan Biokimia Pangan Fakultas Teknologi Pangan dan
Agroindustri Universitas Mataram.
Alat dan Bahan Praktikum
a. Alat-alat praktikum
Adapun alat-alat yang digunakan dalam praktikum ini adalah tabung
reaksi, hot plate , stopwatch , penjepit, gelas kimia, botol, rak tabung, rubber
bulb , dan pipet volume.
b. Bahan-bahan Praktikum
Adapun bahan-bahan yang digunakan dalam praktikum ini adalah
glukosa 1%, pati 1%, fruktosa 1%, maltosa 1%, larutan H2SO4, larutan
Molisch , larutan seliwanoff , larutan Benedict , larutan iodin dan HCl.
Prosedur Kerja
a. Uji Molisch
Disiapkan 5 tabung reaksi
Diisi masing-masing 1 ml larutan berturut-turut yaitu glukosa 1%, amilum 1%,sukrosa 1%, fruktosa 1%, maltose 1%
Ditambahkan 2 – 3 tetes pereaksi Molisch
Ditambahkan 1 ml larutan H2SO4 padat secara perlahan melalui dindingtabung etanol
Diamati apakah terbentuk cincin berwarna ungu
8/16/2019 Laporan Tetap Biokimia Umum (Kelompok 17).pdf
40/94
34
b. Uji Seliwanoff
Disiapkan 5 tabung reaksi
Diisi masing-masing 1 ml larutan berturut-turut yaitu glukosa 1%, amilum 1%,sukrosa 1%, fruktosa 1%, maltose 1%
Ditambahkan 2 – 3 tetes pereaksi Seliwanoff dan digojog
Dipanaskan pada perangas air selama 5 menit
Diamati perubahan warna yang terjadi setiap 1 menit
c. Uji Benedict
Disiapkan 5 tabung reaksi
Diisi masing-masing 1 ml larutan berturut-turut yaitu glukosa 1%, amilum 1%,sukrosa 1%, fruktosa 1%, maltose 1%
Ditambahkan 2 – 3 tetes pereaksi Benedict
Dipanaskan pada perangas air selama 5 menit
Diamati perubahan warna yang terjadi
d. Uji Iodin
Disiapkan 5 tabung reaksi
Diisi masing-masing 1 ml larutan berturut-turut yaitu glukosa 1%, amilum 1%,sukrosa 1%, fruktosa 1%, maltose 1%
Ditambahkan 2 ml larutan iodium
Diamati dan dicatat warna dari masing-masing tabung
Ditambahkan 3 – 5 tetes larutan HCl encer pada masing-masing tabungdan digojok
Dipanaskan pada perangas air selama 5 – 10 menit
Diamati dan dicatat perubahan warna yang terjadi
8/16/2019 Laporan Tetap Biokimia Umum (Kelompok 17).pdf
41/94
35
HASIL PENGAMATAN
Tabel 3.1 Hasil Pengamatan Uji Kualitatif Berbagai Jenis Karbohidrat Berdasarkan Terbentuknya Furfural (Uji Molisch)
Jenis Karbohidrat Terjadinya Pembentukan Cincin
Glukosa 1% Tidak terbentuk cincin ungu
Pati 1% Tidak terbentuk cincin ungu
Sukrosa 1% Tidak terbentuk cincin ungu
Fruktosa 1% Tidak terbentuk cincin ungu
Maltosa 1% Tidak terbentuk cincin ungu
Tabel 3.2 Hasil Pengamatan Uji Kualitatif Berbagai Jenis Karbohidrat Berdasarkan Terbentuknya Furfural (Uji Seliwanoff)
Jenis Karbohidrat
Perubahan Warna
SebelumDipanaskan
Sesudah Dipanaskan
1 2 3 4 5
Glukosa 1% Kuning Bening Kuning Bening Kuning Bening Kuning Bening Kuning Bening Kuning Bening
Pati 1% Kuning Bening Kuning Bening Kuning Bening Kuning Bening Kuning Bening Kuning Bening
Sukrosa 1% Kuning Bening Kuning Bening Orange Bening Orange Kemerahan Merah Bata Merah Bara
Fruktosa 1% Kuning Bening Kuning Bening Orange Bening Orange Orange Kemerahan Orange Kemerahan
Maltosa 1% Kuning Bening Kuning Bening Kuning Bening Kuning Bening Kuning Bening Kuning Bening
8/16/2019 Laporan Tetap Biokimia Umum (Kelompok 17).pdf
42/94
36
Tabel 3.3 Hasil Pengamatan Uji Kualitatif Berbagai Jenis KarbohidratBerdasarkan Sifat Pereduksinya (Uji Benedict)
Jenis KarbohidratPerubahan Warna
Sebelum DipanaskanSesudah Dipanaskan
5 Menit
Glukosa 1% Biru Muda Merah Bata
Pati 1% Biru Muda Biru Keruh
Sukrosa 1% Biru Muda Biru Muda
Fruktosa 1% Biru Muda Merah Bata
Maltosa 1% Biru Muda Merah
Tabel 3.4 Hasil Pengamatan Uji Kualitatif Berbagai Jenis KarbohidratBerdasarkan Perubahan Warna Iodin (Uji Iodin)
Jenis KarbohidratWarna Setelah Ditetesi
Iodin
Warna SetelahDitambahkan
HCl+Dipanaskan
Glukosa 1% Biru Pekat Kuning Bening
Pati 1% Kuning KecoklatanKuning Bening
dengan Butiran Ungu
Sukrosa 1% Kuning Kecoklatan Bening
Fruktosa 1% Kuning Kecoklatan Bening
Maltosa 1% Kuning Kecoklatan Kuning Bening Pekat
8/16/2019 Laporan Tetap Biokimia Umum (Kelompok 17).pdf
43/94
37
PEMBAHASAN
Karbohidrat merupakan senyawa yang terdiri atas unsur karbon, hidrogen
dan oksigen. Fungsi utama karbohidrat adalah sebagi sumber energi yang
dibutuhkan oleh manusia dalam melakukan segala aktivitasnya. Karbohidrat
banyak terdapat pada bahan panagan seperti biji-bijian dan sayuran. Untuk
mengetahui jenis-jenis karbohidrat dalam berbagai jenis bahan panagan
dilakukan berbagai uji. Pada praktikum ini pengujian karbohidrat dilakukan
dengan menggunakan empat uji, yaitu uji Molisch, uji Seliwanoff, uji Benedict,
dan uji Iodin. Uji Molisch digunakan untuk mengidentifikasi berbagai jenis
karbohidrat berdasarkan terbentuknya furfural begitu juga pengujian Seliwanoff.
Uji Benedict bertujuan untuk mengidentifikasi berbagai jenis karbohidrat
berdasarkan sifat preduksinya dan uji iodin digunakan untuk mengidentifikasi
karbohidrat berdasarkan perubahan warna iodinnya. Bahan-bahan yang
digunakan dalam pengujian karbohidrat adalah glukosa 1%, pati 1%, fruktosa
1% dan maltosa1%.
Berdasarkan hasil pengamatan pada uji Molisch semua jenis karbohidrat
yang diujikan tidak membentuk cincin ungu. Hal ini kemungkinan disebabkan
karena adanya kesalahan oleh praktikan selama pengujian. Uji Seliwanoff ada 2
jenis karbohidrat yang berubah warna pada tiap menitnya selain itu tidak ada
yang berubah yaitu sukrosa dan fruktosa. Sebelum dipanaskan keduanya
berwana kuning bening setelah mulai berubahan menjadi orange, kemerahan
dan merah bata. Hal tersebut menunjukkan bahwa adanya kandungan ketosa
dalam karbohidrat jenis monosakarida itu. Sedangkan jenis karbohidrat sebelum
dan sesudah dipanaskan tidak mengalami perubahan warna. Uji ketiga yaitu uji
8/16/2019 Laporan Tetap Biokimia Umum (Kelompok 17).pdf
44/94
38
benedict yang dilakukan untuk membuktikan adanya gula preduksi. Hasilnya
adalah glukosa, fruktosa dan maltosa mengalami perubahn warna sebelum
dipanaskan dan setelah dipanaskan selama 5 menit. Sebelum dipanaskan ketiga
jenis karbohidrat tersebut berwarna biru muda namun setelah 5 menit
dipanaskan warnanya berubah menjadi merah dan merah bata. Hal ini
menunjukkan adanya kandungan gula preduksi pada ketiga jenis karbohidrat
tersebut. Sedangkan pati dan sukrosa tidak mengalamu perubhan warna baik
sebelum dan sesudah dipanaskan warnanya tetap biru muda.
Sedangkan pada uji Iodin, warna setelah ditetesi iodin adalah pada
glukosa warnanya biru pekat, sedangkan pada pati, sukrosa, fruktosa dan
maltosa warnanya kuning kecoklatan. Sedangkan setelah ditambahkan larutan
HCl dan dipanaskan semua jenis karbohidrat tersebut mengalami perubahan
warna. Glukosa berwarna kuning bening, pati berwarna kuning bening dengan
butiran ungu, sukrosa dan fruktosa berwarna bening dan maltosa berwarna
kuning bening yang pekat. Hasil tersebut hanya glukosa yang menandakan
adanya kandungan polisakarida karena setelah ditetesi larutan iodin warnanya
biru pekat.
Terbentuknya cincin ungu pada uji molisch disebabkan karna terjadi
reaksi dehidrasi karbohidrat oleh asam sulfat. Reaksi positif terjadi ditandai
dengan adanya cincin ungu yang terbentuk antara lapisan asam dan lapisan
sampel. Namun, pada praktikum ini molisch menghasilkan data yang negatif
pada semua jenis karbohidrat. Hal ini berbeda dengan hasil pengamatan yang
dilakukan oleh Nurani (2014), dimana pada hasil pengamatannya glukosa,
sukrosa, maltosa dan pati membentuk cincin ungu. Warna kuning pada uji
8/16/2019 Laporan Tetap Biokimia Umum (Kelompok 17).pdf
45/94
39
Seliwanoff menunjukkan adanya kandungan ketosa adalah fruktosa dan sukrosa.
Hasil ini sama dengan hasil percobaan yang dilakukan Nurani.
Uji Benedict bertujuan untuk mengetahui kandungan gula preduksi pada
berbagai jenis karbohidrat. Ada tidaknya kandungan gula preduksi pada suatu
karbohidrat ditandai dengan adanya perubahan warna zat sebelum dan sesudah
dipanaskan menjadi warna merah bata. Terbentuknya warna merah bata ini
merupakan hasil dari reduksi ion Cu2+ menjadi Cu+ oleh suatu gugus aldehida
yang terkandung dalam gula reduksi yang berlangsung dalam suasana basa.
Penambahan iodin pada suatu karbohidrat akan membentuk warna ungu sampai
merah. Hanya pati yang menunjukkan adanya polisakarida karena setelah
ditetesi iodin warnanya biru pekat, hasil ini sama dengan literatur (Nurani, 2014).
8/16/2019 Laporan Tetap Biokimia Umum (Kelompok 17).pdf
46/94
40
KESIMPULAN
Berdasarkan hasil pengamatan dan pembahasan maka dapat disimpulkan
sebagai berikut :
1. Karbohidrat merupakan senyawa yang terdiri atas unsur karbon, hidrogen
dan oksigen.
2. karbohidrat berdasarkan monomernya dibagi menjadi tiga, yaitu
monosakarida, oligosakarida dan polisakarida.
3. Terbentuknya cincin ungu pada uji Molisch disebabkan karena terjadinya
reaksi dehidrasi karbohidrat oleh asam sulfat.
4. Uji Seliwanoff jiaka sampel berwarna merah bata maka menunjukkan adanya
kandungan ketosa pada sampel tersebut.
5. Uji Benedict bertujuan untuk mengetahui adanya kandungan gula pereduksi
pada karbohidrat.
8/16/2019 Laporan Tetap Biokimia Umum (Kelompok 17).pdf
47/94
41
ACARA IV UJI PROTEIN
PENDAHULUAN
Latar Belakang
Protein merupakan makromolekul yang menyusun lebih dari sepuluh
bagian dari sel. Protein menentukan ukuran dan struktur sel, komponen utama
dari sistem komunikasi antara sel serta sebagai katalis berbagai reaksi biokimia
dalam sel. Karena itulah sebagian besar aktivitas penelitian biokimia bertujuan
pada protein khususnya hormon, antibodi dan enzim. Setiap jenis protein
mempunyai jumlah dan urutan asam amino yang khas. Didalam sel, protein
terdapat baik pada membran plasma maupun membran internal yang menyusun
organel sel seperti mitokondria, retikulum endoplasma, nukleus dan badan golgi
dengan fungsi yang berbeda-beda tergantung tempatnya (Yunarso,2007).
Protein-protein yang terlibat dalam reaksi biokimia sebagian besar berupa
enzim banyak terdapat dalam sitoplasma dan sebagian terdapat pada
kompartemen dari organel sel. Protein merupakan kelompok biomakromolekul
yang sangat heterogen. Ketika berada diluar bagi semua makhluk hidup
termasuk mikroorganisme, hewan dan tumbuhan. Protein merupakan rangkaian
gabungan 22 jenis asam amino. Protein ini memainkan berbagai peranan dalam
benda hidup dan bertanggung jawab untuk fungsi dan ciri-ciri benda hidup
(Vandef, 2009).
Protein yang terdapat dalam makanan berfungsi sebagai sumber zat utama
dalam pembentukan sel-sel tubuh dan sebagai sumber energi. Protein terlibat
dalam sistem kekebalan sebagai antibody . Proses kimia yang berlangsung dalam
Nama : Padu Nawazul ImamNIM : J1A014097
8/16/2019 Laporan Tetap Biokimia Umum (Kelompok 17).pdf
48/94
42
tubuh adanya enzim yang merupakan suatu protein yang berfungsi sebagai
biokatalis. Mengingat banyaknya fungsi dan manfaat protein bagi kehidupan kita,
serta pentingnya kita untuk mengetahui berbagai jenis protein. Oleh karena itu,
perlu dilakukannya percobaan mengenai pengujian protein secara kimia dengan
mengenal sifat pengendapan dan perubahan warrna yang terjadi bila protein
tersebut ditambahkan senyawa tertentu.
Tujuan Praktikum
Adapun tujuan dari praktikum ini adalah untuk mengidentifikasi adanya
gugus asam amino bebas pada suatu bahan, mengidentifikasi gugus R asam
amino yang mengandung sulfur, mengidentifikasi adanya ikatan peptida suatu
larutan dan megidentifikasi titik isoelektrik kasein.
8/16/2019 Laporan Tetap Biokimia Umum (Kelompok 17).pdf
49/94
43
TINJAUAN PUSTAKA
Protein adalah makromolekul yang tersusun dari bahan dasar asam
amino. Asam amino yang menyusun protein ada 20 macam. Protein terdapat
dalam sistem hidup semua organisme baik yang berada pada tingkat rendah
maupun organisme tingkat tinggi. Protein memiliki fungsi utama yang kompleks
di dalam semua proses biologi. Protein berfungsi sebagai katalisator, sebagai
pengangkut dan penyimpan molekul lain seperti oksigen, mendukung secara
mekanis sistem kekebalan (imunitas) tubuh, menghasilkan pergerakan tubuh,
sebagai transmitor gerakan syaraf dan mengendalikan pertumbuhan dan
perkembangan (Katili,2009).
Protein merupakan polimer heterogen dari molekul asam amino. Protein
sangat penting bagi tubuh kita terutama utuk pertumbuhan dan pergantian sel-
sel tubuh yang rusak karena itu metabolisme protein sangat penting untuk
dialami dan karena hal ini banyak melibatkan enzim proteolitik yaitu enzim yang
dapat menguraikan atau memcah protein. Protein dalam bahan pangan yang
konsumsi manusia akan diseap oleh usus dalam bentuk asam amino. Kadang-
kadan beberapa asam amino yang merupakan peptide dan molekul-molekul
protein dapat juga diserap melalui dinding usus masuk kedalam pembuuh darah
(Winarno, 2007).
Protein dapat memerankan fungsi sebagai bahan strutural karena seperti
halnya polimer lain, protein memiliki rantai yang panjang da juga dapat
mengalami crosswking dan lain-lain. Selain itu juga dapat berperan sebagai
biokatalis untuk reaksi-reaksi kimia dalam sistem makhluk hidup, makromolekul
ini memindahkan jalur dan waktu metabolisme yang kompleks untuk menjaga
8/16/2019 Laporan Tetap Biokimia Umum (Kelompok 17).pdf
50/94
44
kelangsungan hidup suatu organisme . Suatu sistem metabolisme terganggu bila
biokatalis yang berperan di dalamnya mengalami kerusakan (Vandef, 2009).
Pada umumnya, protein sangat terhadap pengaruh-pengaruh fisik dan zat
kimia sehingga mudah mengalami perubahan bentuk. Perubahan atau modifksi
pada struktur molekul protein disebut debaturasi. Sifat fisik kimia protein berbeda
satu sama lainnya, tergantung pada komposisi dan jenis asam amino
penyusunnya. Sebagian besar protein bila dilarutkan dalam air akan berbentuk
dipersi koloid dan tidak dapat berdifasi bila dilewatkan melalui membran
semifermiable. Beberapa protein mudah larut dalam air, tetapi adapula yang
sukar larut. Namun, semua protein tidak dapat laru dalam pelarut organik seperti
eter, kloroform atau butena (Najamudin, 2011).
Uji protein dengan menggunakan pereaksi biuret ditandai dengan
perubahan warna larutan ungu violet dalam larutan basa. Reaksi uji protein
dengan menggunakan pereaksi biuret memberikan hasil yang positif jika warna
yang dihasilkan ungu. Hal ini akibat pembentukan senyawa kompleks Cu2+ gugus
–CO- dan –NH dari rantai peptida dalam suasana basa. Pereaksi Ninhidrin
digunakan untuk mengetahui adanya asam amino prolin. Hasil positif ditunjukkan
dengan hasil akhir berupa warna kuning. Hal ini disebabkan adanya satu gugus
karboksil dan asam amino prolin dan hidroksi prolin bereaksi dengan Ninhidrin
(triketohidrindenahidrat) menghasilkan warna kuning (Marzuki, 2011).
Hidrolisis protein ikatan peptida yang membangun rantai polipeptida dalam
protein dapat dihidrolisis menggunakan asam, basa atau enzim pemecah. Ikatan
peptida dalam kondisi asam kuat merupakan proses hidrolisiskimia dan pemecah
ikaan peptida menggunkan enzim merupakan proses hidrolisis biokimia. Reaksi
8/16/2019 Laporan Tetap Biokimia Umum (Kelompok 17).pdf
51/94
45
hidrolisis peptida akan mnghasilkan produk reaksi yang berupa satu molekul
dengan gugus karboksil dan molekul lainnya memiliki gugus amino (Yunarso,
2013).
8/16/2019 Laporan Tetap Biokimia Umum (Kelompok 17).pdf
52/94
46
PELAKSANAAN PRAKTIKUM
Waktu dan Tempat Praktikum
Praktikum ini dilaksanakan pada hari Kamis, 26 November 2015 di
Laboraturium Kimia dan Biokimia Pangan Fakultas Teknologi Pangan dan
Agroindustri Univesitas Mataram.
Alat dan Bahan Praktikum
a. Alat-alat Praktikum
Adapun alat-alat yang digunakan pada praktikum kali ini adalah tabung
reaksi, hot plate, pipet volume, ruber bulb, gelas kimia, botol, rak tabung
reaksi erlenmeyer, stopwatch, penjepit dan karet gelang.
b. Bahan-bahan Praktikum
Adapun bahan-bahan yang digunakan pada praktikum ini adalah
aquades,albumin, glisin, larutan Na asetat, larutan Ninhidrin, Pb-asetat,
larutan CuSO4 0,5%, larutan NaOH 10%, susu segar dan asam asetat.
Prosedur Kerja
a. Uji Ninhidrin
Disiapkan aquades, albumin, glisin (1 mL)
3 tabung reaksi
Ditambahkan 2 mL larutan Na-asetat
Ditambahkan 1 mL larutan Ninhidrin
Dipanaskan dengan penangas air selama 5 menit (1000C)
Diamati perubahan warna yang terjadi
8/16/2019 Laporan Tetap Biokimia Umum (Kelompok 17).pdf
53/94
47
b. Uji Biuret
Disiapkan aquades, albumin, glisin (1 mL)
3 tabung reaksi
Ditambahkan 2 mL larutan Na-asetat
Ditambahkan 1 ml larutan CuSO4 0,5% dan 1 ml larutan NaOH 1%
Dipanaskan selama 5 menit dengan suhu 100ºC
Diamati perubahan warna yang terjadi
c. Uji Sulfur
Disiapkan glisin, albumin (0,5 mL)
2 tabung reaksi
Ditambahkan 2,5 mL aquades
Ditambahkan 1 tetes larutan NaOH 10%
Diaduk rata
Ditambahkan 2 tetes Pb-asetat (perubahan warna)
Dipanaskan selama 5 menit dengan suhu 100ºC
Diamati perubahan warna yang terjadi
d. Uji Sifat Isoelektrik Protein
6 tabung reaksi
Ditambahkan 1 ml susu segar
Tabung 1,2,3 Tabung 4,5,6
Ditambah masing-masing larutan2ml, 4ml, 5ml aquades
Ditambah masing-masing larutan1ml, 3,5ml, 3,7ml aquades
Ditambahkan masing-masing 4ml,2ml, 1ml larutan asetat 0,1 ml
Ditambahkan masing-masing 5ml,2,5ml, 1,5ml larutan asetat 0,1 ml
Diaduk Diaduk
Diamati endapat yang terbentuk Diamati endapat yang terbentuk
8/16/2019 Laporan Tetap Biokimia Umum (Kelompok 17).pdf
54/94
48
HASIL PENGAMATAN
Tabel 4.1 Hasil Uji Kualitatif Asam Amino dengan Uji Ninhidrin
Jenis LarutanPerubahan Warna
Sebelum dipanaskan Setelah dipanaskan
Aquades Bening kekuningan Kuning Bening
Albumin Kuning Bening Merah Keunguan
Glisin Bening Kekuningan Kuning bening
Tabel 4.2 Hasil Uji Kualitatif Peptida dengan Uji Biuret
Jenis Larutan
Perubahan Warna
Sebelumdipanaskan
Setelah dipanaskan
+ CuSO4 0,5% + NaOH 10%
Aquades Bening Bening Kebiruan Biru
Albumin Kuning Bening Hijau Toska Ungu
Glisin 1 % Bening Biru Bening Biru Bening
Tabel 4.3 Hasil Uji Sulfur Beberapa Jenis Larutan
Jenis LarutanPerubahan Warna
Sebelum dipanaskan Setelah dipanaskan
Glisin Bening Bening
Albumin Bening Kuning Bening
Tabel 4.4 Hasil Pengamatan Uji Sifat Isoelektrik Protein
JenisLarutan
Nomor tabung reaksi
1 2 3 4 5 6
pH
4,1 4,4 4,8 5,1 5,4 5,7
Jumlahendapan
3 3 3 2 2 2
Keterangan : 1 = Tidak ada endapan
2 = Sedikit endapan
3 = Banyak endapan
8/16/2019 Laporan Tetap Biokimia Umum (Kelompok 17).pdf
55/94
49
PEMBAHASAN
Protein adalah makromolekul yang tersusun dari bahan dasar asam
amino. Asam amino yang menyusun protein ada 20 macam. Analisis kuantitatif
asam amino dan protein dapat dilakukan bedasarkan reaksi perubahan warna.
Reaksi perubahan warna untuk mengidentifikasi asam amino dan protein
mencakup : reaksi Biuret, Ninhidrin, Xantho protein, Milon, Diazo, Fohldan
Sakaguchi (Katili, 2009). Pada praktikum ini dilakukan empat jenis pengujian,
yaitu uji Ninhidrin, Uji Biuret, Uji Sulfur dan sifat Isoelektrik Protein.
Uji Ninhidrin bertujuan untuk mengidentifikasi adanya gugus asam amino
bebas pada suatu bahan. Dalam percobaan kali ini menggunakan bahan
aquades, albumin (putih telur) dan glisin 1%. Dengan percobaan ini dapat
diketahui sampel mana yang positif mengandung protein dilihat dari ada atau
tidaknya kandungan asam aminonya. Berdasarkan hasil pengamatan,
menunjukkan larutan aquades sebelum ditambahkan larutan Ninhidrin berwarna
bening, kemudian setelah ditambahkan larutan Ninhidrin berubah warna menjadi
kuning bening. Sedangkan pada larutan albumin setelah ditambahkan larutan
Ninhidrin dan dipanaskan warnanya berubah dari kuning bening menjadi merah
keunguan. Adapun pada larutan glisin tidak mengalami perubahan warna, tetap
berwarna kuning bening. Hal ini menunjukkan bahwa larutan Albumin positif
mengandung asam amino, sedangkan larutan aquades dan glisin hasilnya negatif
karena setelah dipanaskan warnanya tidak berubah menjadi ungu atau merah
violet. Sehingga dari hasil pengamatan tersebut diperoleh hasil yang sama
dengan literatur yang mengatakan pada prinsip kerja ninhidrin, mengujji ada
atau tidaknya protein dalam suatu senyawa dengan penambahan reagen
8/16/2019 Laporan Tetap Biokimia Umum (Kelompok 17).pdf
56/94
50
Ninhidrin untuk mengetahui jumlah kadar asam amino bebas yang terkandung
didalamnya, dimana asam amino bebas akan bereaksi dengan Ninhidrin dan
membentuk senyawa kompleks berwarna ungu (Hamid, 2007).
Uji Biuret merupakan uji umum bentuk protein yang spesifik untuk ikatan
peptida. Dalam percobaan ini, setiap bahan (aquades, albumin, dan glisin)
ditambahkan masing-masing 1 ml CuSO4 0,5% dan 1ml dan NaOH 10%
kemudian dipanaskan pada suhu 1000C selama 5 menit. Pada data hasil
pengamatan, warna larutan pada aquades setelah ditambahkan CuSO4 0,5% dan
NaOH 10% berwarna biru bening dari yang sebelumnya berwarna bening. Pada
larutan Albumin warna berubah menjadi ungu dari berwarna kuning bening.
Adapun larutan Glisin mengalami perubahan warna menjadi biru dari warna
bening. Pada prinsip kerja Biuret, yaitu menguji ada atau tidaknya protein dalam
suatu senyawa dengan penambahan reagen NaOH dan CuSO4 berdasarkan
adanya ikatan peptida (ikatan peptida harus 2 atau lebih). Dimana ion Cu 2+ (dari
pereaksi biuret) dalam suasana basa akan bereaksi dengan polipeptida yang
menyusun protein dan membentuk senyawa kompleks berwara biru hingga ungu
(Azhar, 2010). Data percobaan tersebut, ketiga larutan positif memiliki ikatan
peptida karena setelah direaksikan dengan reagen pada permukaannya warna
berubah menjadi biru hingga ungu. Membuktikan adanya peptida dalam protein
dilakukan dengan penambahan larutan NaOH yang bersifat basa, larutan
tersebut akan bereaksi dengan polipeptida. Prinsipnya sama dengan
penambahan larutan CuSO4. Warna ungu yang dihasilkan menunjukkan bahwa
ikatan peptidanya sangat kuat, jika ikatan peptidanya lemah maka warna
ungunya akan berubah saat digojok.
8/16/2019 Laporan Tetap Biokimia Umum (Kelompok 17).pdf
57/94
51
Uji Sulfur atau reaksi Fohl bertujuan untuk mengidentifiasi gugu R asam
amino yang mengandung sulfur. Pada percobaan uji sulfur kali ini digunakan
sampel glisin dan albumin. Berdasarkan hasil pengamatan, ada glisin tidak
mengalami perubahan warna sebelum dan sesudah dipanaskan, sedangkan pada
Albumin setelah dipanaskan berubah menjadi kuning bening. Sesuai dengan
literatur yang menyatakan bahwa pemanasan larutan protein bersifat basa akan
berbentuk Na2S jika larutan protein itu mengandung asam amino bersulfur,
seperti sistein, sistin atau metionin. Jika Na2S yang terbentuk direaksikan lebh
lanjut dengan Pb-asetat akan terbentuk endapan berwarna coklat dari PbS
(Ophart, 2003).
Sifat isoelektrik protein bertujuan untuk mnegndentifikasi titik isoelektrik
kasein. Pada percobaan kali ini menggunakan susu segar. Adanya gugus amino
bebas pada gugus karboksil bebas pada ujung-ujung rantai molekul protein
menyebabkan protein bersifat amfoter yaitu dapat bereaksi dengan asam
maupun basa. pH tertentu muatan gugus amino dan karboksilat saling
mentralkan sehingga molekul protein tidak bermuatan. Nilai pH dimana molekul
protein tidak bermuatan disebut titik isoelektrik. Jika pH berada pada kondisi
dibawah titik isoelektrik, maka muatan partiket koloid akan bermuatan positif.
Sebaliknya jika pH berada diatas titik isoelektik maka muatan koloid akan
berubah menjadi netral atau bahkan menjadi negatif. Terjadinya endapan
menandakan bahwa gugus amino dan karboksilatnya tidak saling menetralkan
(Murray, 2006). Berdasarkan hasil pengamatan, pada tabung 1,2,3 memiliki nilai
pH berkisar antara 4,1-4,8 dan membentuk banyak endapan, sedangkan pada
tabung reaksi 4,5,6 dengan nilai pH kisaran 5,1 – 5,7 membentuk sedikit
8/16/2019 Laporan Tetap Biokimia Umum (Kelompok 17).pdf
58/94
52
endapan. Titik isoelektrik dapat ditentukan berdasarkan kekeruhan dan endapan
yang terbentuk karena pada titik dekat isoelektrik akan terjadi gaya tolak
menolak elektrostatik. Gaya tolak menolak tersebut akan menyebabkan kelauan
menjadi minimum lalu terbentuk keruh. Setiap jenis protein memiliki titik
Isoelektrik yang berbeda-beda. Jadi pada tabung 1,2,3 telah mencapai titik
isoelektrik. Jenis buffer yang digunakan pada uji ini adalah buffer asam yaitu
larutan Na-asetat karena dapat mempengaruhi terjadinya denaturasi. Denaturasi
adalah proses terputusnya ikatan peptida protein dan perubahan sifat kimia
gugus samping (-R) rantai asam amino. Pengaruh asam terhadap denaturasi
ialah adanya ion H+ menyebabkan sebagian ikatan peptida terputus. Ion H+ akan
bereaksi dengan gugus COO- membentuk COOH. Sedangkan sisanya (asam)
berikatan dengan gugus amina membentuk ikatan, sehingga apabila larutan
peptida dalam keadaan isoelektrik diberi asam akan menyebabkan bertambahnya
gugus bermuatan yang membentuk afinitas terhadap air dan kelarutan air
meningkat.
Kelarutan protein dalam suatu cairan, sesungguhnya sangat dipengaruhi
oleh beberapa faktor antara lain pH, suhu, kekuatan ionik dan konstanta
dielektrik pelarutnya. Adapun pada uji pengendapan, struktur protein menjadi
tidak stabil karena mudah mengalami denaturasi. Faktor-faktor yang
menyebabkan denaturasi adalah pH, panas, pelarut, kekuatan ion terlarut dan
radiasi. Pemanasan merupakan salah satu faktor yang menyebabkan perubahan
pada struktur protein. Pemanasan akan membuat protein bahan terdenaturasi
sehingga kemampuan mengikat airnya menurun. Hal ini terjadi karena energi
panas akan mangakibatkan terputusnya interaksi non-kovalen yang ada pada
8/16/2019 Laporan Tetap Biokimia Umum (Kelompok 17).pdf
59/94
53
struktur alami protein tetapi tidak memutuskan ikatan kovalennya yang berupa
ikatan peptida. Proses ini biasanya berlangsung pada kisaran suhu yang sempit.
8/16/2019 Laporan Tetap Biokimia Umum (Kelompok 17).pdf
60/94
54
KESIMPULAN
Berdasarkan hasil pengamatan dan pembahasan, dapat disimpulkan
sebagai berikut :
1. Protein adalah makromolekul yang tersusun dari bahan dasar asam amino.
2. Pada uji Ninhidrin, albumin positif mengandung asam amino, sedangkan
larutan glisin dan aquades negatif, karena setelah dipanaskan warnanya tidak
berubah moenjadi ungu atau merah violet.
3. Pada Uji Biuret, aquades hasil ujinya negatif, sedangkan glisin dan albumin
positif memiliki ikatan peptida karena setelah direaksikan dengan reagen ada
permukaan warnanya berubah menjadi biru tua dan ungu.
4. Penambahan larutan NaOH dan CuSO4 pada uji Biuret berfungsi untuk
membuktikan adanya peptida dalam protein; Pb-asetat pada uji sulfur
berfungsi untuk membantu terbentuknya endapan pada larutan; dan
penggunaan larutan Na-asetat pada uji sifat Isoelektrik berfungsi untuk
mempengaruhi terjadinya denaturasi.
5. Faktor utama yang mempengaruhi struktur protein yaitu pemanasan, adapun
faktor lain seperti pH, suhu, pelarut, kekuatan ion, konstanta dielektrik dan
radiasi.
8/16/2019 Laporan Tetap Biokimia Umum (Kelompok 17).pdf
61/94
55
ACARA V PENGUJIAN LEMAK
PENDAHULUAN
Latar Belakang
Lemak adalah ester dari asam lemak dengan gliserol. Satu molekul
gliserol akan mengikat tiga molekul asam lemak. Lemak umumnya tidak larut
dalam air, tetapi dapat larut dalam pelarut non polar seperti kloroform, eter dan
benzena. Lemak dari tumbuhan dinamakan lemak nabati sedangkan lemak dari
hewan dinamakan lemak hewani (Handito, 2015).
Lemak sangat penting bagi tubuh dan mempunyai banyak peranan.
Lemak atau lipid berfungsi sebagai sumber energi, komponen strukturan
membran, pelindung dan sebagai zat bahan penting yang dibutuhkan tubuh.
Lipid yang banyak di alam adalah lemak dan trigliserida. Berdasarkan sifat
kimianya lipid dikelompokkan menjadi dua yaitu, lipid yang dapat disabunkan dan
lipid yang tidak dapat disabunkan. Contoh dari lipid tersebut adalah asam lemak
dan steroid.
Dalam bidang pangan lipid sangat banyak digunakan, yaitu minyak
goreng. Minyak dapat diperoleh dari hwan maupun tumbuhan. Minyak digunakan
untuk menggoreng berbagai macam produk pangan. Seperti kerupuk, gorengan
dan sebagainya. Oleh karena itu, praktikum ini dilakukan untuk mengetahui jenis
pelarut terhadap sifat kelarutan lemak dan untuk mengetahui tingkat
ketidakjenuhan berbagai jenis lemak serta, mengetahui sifat penyabunan dua
jenis garam asam lemak.
Nama : Putri Jannatin SalehaNIM : J1A014099
8/16/2019 Laporan Tetap Biokimia Umum (Kelompok 17).pdf
62/94
56
Tujuan Praktikum
Adapun tujuan dai praktikum ini adalah untuk mengetahui jenis pelarut
terhadap sifat kelarutan lemak dan untuk mengetahui tingkat ketidakjenuhan
berbagai jenis lemak serta, mengetahui sifat penyabunan dua jenis garam asam
lemak.
8/16/2019 Laporan Tetap Biokimia Umum (Kelompok 17).pdf
63/94
57
TINJAUAN PUSTAKA
Lemak dibagi menjadi tiga yaitu lemak sederhana, lemak majemuk, dan
lemak turunan. Lemak sederhana yaitu apabila dihidrolisis akan menghasilkan
alcohol biasanya berupa gliserol dan asam lemak. Lemak majemuk yaitu apabila
dihidrolisis akan menghasilkan alkohol, asam lemak dan senyawa lainnya seperti
fosfat, asam amino, dan lain-lain. Lemak turunan adalah berbagai jenis senyawa
yang diperoleh dari hidrolisis kedua jenis lemak. Kelompok jenis turunan lemak
adalah gliserol dan berbagai alkohol lain yang ikut menyusun lemak (Sistiawan,
2011).
Lemak dan minyak termasuk dalam satu golongan lipid, yaitu lipid netral.
Lemak dan minyak dapat diperoleh dari hewan dan tumbuhan dapat dikonsumsi.
Lemak dalam tubuh berfungsi sebagai sumber energi dan cadangan makanan.
Wujud lemak berkaitan dengan asam lemak pembentuknya. Lemak yang
berbentuk cair banyak mengandung asam lemak tidak jenuh sedangkan lemak
yang berbentuk padat lebih banyak mengandung asam lemak jenuh (Riawan,
2010).
Berdasarkan kerangka dasarnya, lipida atau lemak dibedakan menjadi
lipida kompleks dan lipida sederhana. Golongan pertama dapat dihidrolisis
sedangkan golongan kedua tidak dapat dihidrolisis. Asam lemak dapat dibedakan
berdasaran tingkat esensialitasnya, yakni linoleat dan linolenat. Asam lemak tidak
jenuh yang (rangkap) kalau hanya sebuah terdapat pada atom nomor 9, bila
terdapat lebih dari satu, maka ikatan atom C rangkap berikutnya terjadi antara 3
buah atom C (Martoharsono, 2012).
8/16/2019 Laporan Tetap Biokimia Umum (Kelompok 17).pdf
64/94
58
Lemak adalah garam yang terbentuk dari penyatuan asam lemak dengan
alcohol organik yang disebut gliserol atau gliserin. Lemak yang dapat mencair
dalam temperatur biasa disebut minyak, sedangkan dalam berbentuk padatan
disebut lemak. Lemak tersusun dari molekul karbon, hidrogen dan oksigen. Sifat-
sifat lemak antara lain mengapung pada permukaan air, tidak larut dalam air dan
dapat melarutkan vitamin A, D, E dan K. Manfaat lemak dalam tubuh adalah
sebagai sumber energi, pelarut vitamin dan sebagai cadangan makanan (Putri,
2015).
Lemak adalah salah satu komponen makanan multifungsi yang sangat
penting untuk kehidupan. Selain memiliki sisi positif, lemak juga mempuyai sisi
negatif terhadap kesehatan. Fungsi lemak dalam tubuh adalah antara lain
sebagai sumber energi , bagian dari membrane sel, pelindung organ-organ tubuh
serta pelarut vitamin A, D, E, dan K. Penambahan lemak dalam makanan
memberikan efek rasa lezat dan tekstur makanan menjadi lembut serta gurih. Di
dalam tubuh, lemak menghasilkan energi dua kali lebih banyak dibandingkan
dengan rotein dan karbohidrat (Sartika, 2008).
8/16/2019 Laporan Tetap Biokimia Umum (Kelompok 17).pdf
65/94
59
PELAKSANAAN PRAKTIKUM
Waktu dan Tempat Praktikum
Praktikum ini dilaksanakan pada hari Kamis, 03 Desember 2015 di
Laboraturium Kimia dan Biokimia Pangan Fakultas Teknologi Pangan dan
Agroindustri Univesitas Mataram.
Alat dan Bahan Praktikum
a. Alat-alat praktikum
Adapun alat-alat yang digunakan dalam praktikum ini adalah tabung
reaksi, pipet ukur, gelas beaker , bubble bulb, rak tabung reaksi, pipet tetes,
kertas label, tisu, dan erlenmeyer.
b. Bahan-bahan Praktikum
Adapun bahan-bahan yang digunakan dalam praktikum ini adalah
kloroform, etanol, aquades, minyak curah, minyak komersial, sabun,
deterjen, CaCl2 0,5%, MgCl2 0,5%, FeCl3 0,5%, minyak hewani, NaOH 0,05
M, HCl 0,05M, benzene, dan iodine.
Prosedur Kerja
a. Uji Sifat Kelarutan Lemak
Disiapkan 5 tabung reaksi
Ditambahkan 2 ml pelarutTabung 1 : kloroformTabung 2 : benzenaTabung 3 : etanolTabung 4 : NaOH 0,05MTabung 5 : HCl 0,05M
Ditambahkan 2 ml minyak nabati
8/16/2019 Laporan Tetap Biokimia Umum (Kelompok 17).pdf
66/94
60
Digojog
Diulangi untuk minyak hewani
b. Uji Tingkat Kejenuhan Lemak
Disiapkan 4 tabung reaksi
Ditambahkan 1 ml campuran kloroform dan etanol
Tabung 1: 0,5 ml aquadesTabung 2: 0,5 ml minyak hewani
Tabung 3: 0,5 ml minyak nabati (komersial)
Tabung 4: 0,5 ml minyak nabati (curah)
Digojog
Ditambahkan tetes demi tetes larutan wijs sampai berbentuk warna coklat
c. Uji Sifat Penyabunan Lemak Disapkan 8 gelas piala
Tabung 1-4 ditambahkan sabun 1% 25mlTabung 5-8 ditambahkan deterjen 1% 25ml
Ditambahkan 5ml larutan CaCl2 0,5% (tabung 1 dan 5)
Ditambahkan 5ml larutan MgCl2 0,5% (tabung 2 dan 6)
Ditambahkan 5ml larutan FeCl3 0,5% (tabung 3 dan 7)
Ditambahkan minyak nabati (tabung 4 dan 8) (komersial)
Diaduk rata
8/16/2019 Laporan Tetap Biokimia Umum (Kelompok 17).pdf
67/94
61
HASIL PENGAMATAN
Tabel 5.1 Hasil Pengamatan Jenis Pelarut Terhadap Kehidupan Lemak
Jenis Pelarut
Jenis Lemak
Minyak NabatiMinyak Hewani
Curah Komersial
Kloroform Larut (non polar) Larut (non polar) Tidak larut (polar)
Benzena Larut (non polar) Larut (non polar) Sedikit larut (semi polar)
Etanol Tidak larut (polar) Tidak larut (polar) Larut (non polar)
NaOH 0,05 M Tidak larut (polar) Larut (non polar) Larut (non polar)
HCl 0,05 M Tidak larut (polar) Larut (non polar) Larut (non polar)
Tabel 5.2 Hasil Pengamatan Uji Ketidakjenuhan Dua Jenis Minyak
Sampel Jumlah Tetesan Larutan Iodin
Minyak Hewani 25 tetes
Minyak Nabati (curah) 25 tetes
Minyak Nabati (komersial) 30 tetes
Aquades (control) 45 tetes
Table 5.3 Hasil Pengamatan Sifat Penyabunan Dari Dua Jenis Garam AsamLemak
Larutan uji Sabun Deterjen
CaCl2 0,5% ++ +++MgCl2 0,5% +++ +++
FeCl3 0,5% ++ ++
Minyak Nabati ++ +
Keterangan : + : sedikit gelembung
++ : agak banyak gelembung
+++ : banyak gelembung
8/16/2019 Laporan Tetap Biokimia Umum (Kelompok 17).pdf
68/94
62
PEMBAHASAN
Lemak adalah ester dari asam lemak dengan gliserol. Satu molekul
gliserol akan mengikat tiga molekul asam lemak. Lemak umumnya tidak larut
dalam air, tetapi dapat larut dalam pelarut non polar seperti kloroform, eter dan
benzena. Lemak dari tumbuhan dinamakan lemak nabati sedangkan lemak dari
hewan dinamakan lemak hewani. Lemak sangat penting bagi tubuh dan
mempunyai banyak peranan. Lemak atau lipid berfungsi sebagai sumber energi,
komponen strukturan membran, pelindung dan sebagai pra zat bahan penting
yang dibutuhkan tubuh. Lipid yang banyak di alam adalah lemak dan trigliserida.
Berdasarkan sifat kimianya lipid dikelompokkan menjadi dua yaitu, lipid yang
dapat disabunkan dan lipid yang tidak dapat disabunkan (Handito, 2015).
Praktikum kali ini membahas tentang pengujian lemak yang terdiri dari 3
jenis uji. Antara lain uji sifat kelarutan lemak, uji tingkat ketidakjenuhan lemak
dan uji sifat penyabunan lemak. Pada praktikum ini menggunakan beberapa
bahan utama yaitu minyak nabati komersial dan curah serta minyak hewani pada
uji sifat kelarutan lemak dan uji tingkat kejenuhan , sedangkan pada uji sifat
penyabunan menggunakan sabun dan deterjen 1%. Pada uji pertama yaitu uji
sifat kelarutan lemak yang berfungsi untuk mengetahui pengaruh jenis pelarut
terhadap sifat kelarutan lemak menggunakan lima jenis pelarut yang berbeda.
Pada minyak nabati komersial maupun curah larut pada larutan kloroform dan
benzena, karena kedua larutan tersebut bersifat non polar. Sedangkan pada
etanol NaOH 0,05 M dan HCl 0,05 M minyak nabati curah tidak larut diebabkan
larutan tersebut bersifat polar. Beda halnya dengan minyak nabati komesial,
larutan etanol, NaOH 0,05M dan HCl 0,05M larut bersama minyak karena
8/16/2019 Laporan Tetap Biokimia Umum (Kelompok 17).pdf
69/94
63
keduanya bersifat non polar. Sedangkan pada minyak hewani pada larutan
kloroform minyak tidak larut, pada larutan benzena hanya sedikit yang larut. Hal
ini disebabkan karena minyak hewani bersifat semi polar. Sedangkan pada
larutan etanol, NaOH 0,05M dan HC