Le dépistage néonatalLe dépistage néonatalde la drépanocytosede la drépanocytose

Rolande DUCROCQ Rolande DUCROCQ

Département de GénétiqueDépartement de GénétiqueLaboratoire de dépistage des hémoglobinopathies / INSERM Laboratoire de dépistage des hémoglobinopathies / INSERM U763U763Hôpital Robert Debré, ParisHôpital Robert Debré, Paris

- Maladie génétique autosomique récessive

- à révélation précoce : premiers mois de vie

- grave : espérance de vie <15 ans en 1970

- et fréquente (près de 300 cas/an en France)

La drépanocytose

Steinberg M.H., N Engl J Med 1999; 340:1021-1030Globules rouges normaux Globules rouges drépanocytaires

Mortalité dans les SDM

• Énorme en l’absence de mesures préventives 15-30% avant 5 ans

• PrécocePic de fréquence entre 6 et 18 mois

• Évitable – Prophylaxie précoce à l’Oracilline – Vaccinations précoces (anti-pneumococcique)– Éducation parentale précoce

• Ramenée à 2-5% avant l’âge de 5 ans grâce au dépistage néonatal

Dépistage néonatal de la drépanocytose en France

métropolitaine • National (ministère santé; CNAM; AFDPHE )

• Début en 1995

• Réalisé à j3 en même temps que les autres tests:

• Phénylcétonurie

• Hypothyroïdie

• Hyperplasie congénitale des surrénales

• Mucoviscidose• 4 laboratoires de dépistage en métropole

• 1 à Marseille, 1 à Lille• 2 en Ile de France (88.000 tests/an;170.000 naissances)

Organisation : ensemble des acteurs

Maternités Associations régionales

Laboratoires spécialisés

Pédiatres de suivi

Pédiatres référents

PMI

Dépistage néonatal « ciblé »« ciblé »

Origine géographique des populations concernées par la Drépanocytose

 

Pays d’Afrique Sub-SaharienneAntilles-Guyane

Pays d’Afrique du nordAfro-américainsBrésilItalie sud SicileGrèceTurquieMoyent-OrientÎles de l’Océan IndienPéninsule arabiqueInde

11%

10%

7.4%

2.2%

6%

7%

8.3%

8%

10%

11%

12%

11%

24%23%

19%

17%22%

46.2% 52%

Métropole

variations régionales des populations à risque/nombre de naissances

Prélèvement de sang capillaire sur papier Güthrie

Comment dépiste-t-on ?

Méthodes :

1. Isoélectrofocalisation en 1ere

intention

2. CLHP en 2eme intention

(Wheathehall; 2001)

Hémoglobine normaleHémoglobine normale

FŒTUS et NOUVEAU-NE ADULTEHbF Fraction majeure HbA Fraction majeure

HbA et HbF1 mineure HbF et HbA2 mineure

Profils d’ Isoélectrofocalisation

–

+

F (fraction majeure)

Formes dégradées

C, E, Oarab

S, D

A

SC SS AS AA Témoin

FASC

F1

F FF

Profil normal hétérozygote AS homozygote SS

Identification des fractions Hb par CLHP

Programme spécifique « dépistage néonatal »

Le dépistage identifie les enfants atteints ET les porteurs sains

Sensibilité et spécificité

Ile de France

Guadeloupe

88.000

7.600

1.652

275

200

25

1/460(1/1.050)

(1/304)

170.000

Nombre de bébés

testés/an(780.000

naissances/an)

2.040

Nombre total de SDM dépistés

(1995-2005)

1/734(1/3.390)

fréquence SDM

/testés

/naissances

260Métropole

Nombre de SDM

dépistés/an

(2005)

Nombres de cas dépistés

0

20

40

60

80

100

120

1995 1997 1999 2001 2003 2005

SDM

SS

SC

Sbthal

915 SDM dépistés en 12 ans 1/460 dépistés 1/1060 naissances

En France métropolitaine 1/3400 naissances

Nombre de SDM dépistés/an dans Nord-Francilien

(427 246 tests en 12 ans)

Risque et profil épidémiologique des Risque et profil épidémiologique des SDM SDM variables selon les variables selon les régionsrégions

Ces différences sont :

quantitatives : importance du risque

qualitatives : variabilité des génotypes

Elles résultent de la disparité des populations à risque :

• en Ile de France originaires d'Afrique sub-saharienne

• en région Sud populations méditerranéennes

fréquence plus faible du gène S mais plus élevée des gènes -thal

non pathologiques : pathologiques :

Association régionale Médecin spécialisé Maternités Association régionale

Médecin référent

Rendu des Rendu des résultatsrésultats

Annonce de la Annonce de la maladiemaladie

• 1er contact capital• Différences culturelles et religieuses • Problèmes linguistiques

médiateur culturelmédiateur culturel

• Aide aux parents construire un avenir pour le bébé atteint

• Transmission génétique expliquer sans culpabiliser

nécessité d’un personnel nécessité d’un personnel spécialiséspécialisé

Prise en charge précoce Prise en charge précoce mortalité, mortalité, morbiditémorbidité

Prévention des risques infectieux et anémiques :

• Antibio-prophylaxie• Vaccination anti-pneumococcique

• Education parentale

Suivi régulier :

• Infections• Anémie• AVC • CVO

Efficacité du dépistage et difficultés rencontrées

• Ciblage : Décision politiquePlus la population est mélangée, plus le

ciblage est difficileFormation permanente du personnel de

maternitéRisque de faux-négatifs dans les populations

brassées• Méthodologie : spécificité et sensibilité éviter les faux-négatifs

et faux- positifs• Prise en charge : - Centre hospitalier (centre de la Drépanocytose)

- Nécessité d’un personnel soignant spécialisé - Nécessité d’organiser des réseaux de soins

- Harmonisation des protocoles de soins• Difficultés inhérentes :- à la précarité socio-économique des familles immigrées et à leur mouvance (perdus de vue)

- à la faiblesse des moyens alloués

En terme de santé publique

• Disparité du poids de la prise en charge selon les différentes régions du territoire national

• Redéfinition des stratégies de dépistage

- dépistage systématique ou ciblé ?- dépistage systématique ou ciblé ?

ConclusionConclusion

 

 

Optimal strategy for sickle cell newborn screening

IEF

R. Ducrocq, R. Debré, Paris

Normal profiles abnormal or illegible profiles

Results (90%) CE-HPLC, Sickle cell short

program

AA, AS, AC, AE, AD, AO arab SS-like profiles S>A; SD; SX profiles profiles

Results CE-HPLC, HbA1c program

SS or S thal profiles

Results

SHopeRP-HPLC or reverse dot blot

Results

Les anomalies de l’hémoglobine

Anomalies quantitatives

Thalassémies (type α ou β)

Anomalies qualitatives Production d’une Hb anormale

Mutants de l'hémoglobine

HbC, HbD, HbE, HbOarab…

HbS le plus fréquent Drépanocytose

– +

S/C like

FASC

IEF HPLC (prog. Sickle cell)

S Oarab

F

Diagnosis of a compound heterozygous S/Oarab

R. Ducrocq, R. Debré, Paris

thal major ou preterm baby ?

+ –

FASC

F

absence of HbA

Diagnosis of a -thalassaemia major IEF HPLC (prog. Sickle cell)

R. Ducrocq, R. Debré, Paris

Syndromes drépanocytaires majeurs (SDM) Homozygotes S/S (β6 Glu Val)

Hétérozygotes composites

S/C (β6 Glu Lys) S/β°thal ou S/ β

+thal S/D Punjab (β121 Glu Gln) S/O Arab (β121 Glu Lys) S/E (β26 Glu Lys)

Quand l’Hb S entraîne-t-elle une pathologie ?

Remarques :

• Hétérozygote A/S = porteur sain du trait drépanocytaireA/S Antilles ou A/S Oman = SDM • Faux positifs asymptomatiques ex : S/D Korle Bu, S/Hope

Symptômes et Conséquences

• Douleur

• Anémie hémolytique chronique

• Crises Vaso-occlusives

• Syndrome Thoracique Aïgu

• Séquestration splénique

• Infections (Rate) Pneumopathie,Ostéomyélite, Méningites et septicémies • Sévérité variable

Réglage du plan avant coulage du gel

Méthode de première intention : IEF

Coulage du gel

Méthode de première intention : IEF

Dépôt des échantillons