12
43 ORIGINALNI RAD / ORIGINAL PAPER * Rad primljen za štampu 27. 12. 2012. godine. ** Lužajić Tijana, Univerzitet u Beogradu, Fakultet veterinarske medicine, Katedra za patološku fiziologiju; Jelena Danilović, Državni Univerzitet u Novom Pazaru, Departman za biologiju; Marko Katić, PKB Korporacija, Beograd; dr sci. vet. med. Tatjana Božić, profesor, dr sci. vet. med. Milica Kovačević Filipović, profesor, Univerzitet u Beogradu, Fakultet veterinarske med- icine, Katedra za patološku fiziologiju DOI: 10.2298/VETGL1402043L UDK: 636.2+618.56:618.6+612.112 LEUKOGRAM U PERIPARTALNOM PERIODU KOD KRAVA SA I BEZ RETENCIJE PLACENTE* PERIPARTAL LEUKOGRAM IN COWS WITH AND WITHOUT RETAINED PLACENTA Lužajić Tijana, Danilović Jelena, Katić M, Božić Tatjana, Kovačević Filipović Milica** Cilj ovog istraživanja je bio da na osnovu promena u apsolutnom broju pojedinih vrsta leukocita u peripartalnom periodu kod krava sa i bez retencije placente utvrdi da li je zaostajanje posteljice poveza- no sa subkliničkom inflamatornom reakcijom u prepartalnom periodu. Šesnaest visokosteonih krava holštajn rase, starosti od 3 do 9 godi- na, koje nisu pokazivale kliničke znake oboljenja pre teljenja, posle porođaja je podeljeno u dve grupe: prvu grupu (n=9) činile su životi nje koje nisu imale retenciju placente, niti bilo kakvu klinički vidljivu inflamaciju posle porođaja; u drugoj grupi (n=7) bile su krave sa re- tencijom placente. Krv je uzorkovana 3 puta pre teljenja u razmaku od nedelju dana i jednom 24 sata po porođaju. Ukupan broj leukoci- ta i apsolutan broj segmentiranih i nesegmentiranih (mladih) neutro- filnih granulocita (NG), kao i broj limfocita i monocita određen je stan- darnim laboratorijskim tehnikama. Rezultati istraživanja su pokazali da je grupa krava kod koje je posle porođaja nastala retencija pla- cente, u trećoj, drugoj i u poslednjoj nedelji pred porođaj imala blago povišen broj segmentiranih NG, a podjednak broj mladih NG u odno- su na grupu kod koje se nije javila retencija. Kod obe grupe krava, 24 sata nakon porođaja, došlo je do značajnog pada ukupnog broja leu- kocita i broja segmentiranih NG, a porasta broja mladih NG. Na os- novu navedenih rezultata može se smatrati da životinje kod kojih je u prvih 24 sata dijagnostikovana retencija placente, pre porođaja ni- su imale sistemsku subkliničku inflamatornu reakciju. Dvadeset i če- tiri sata posle porođaja sve životinje su imale subkliničku sistemsku inflamatornu reakciju. Takođe, kod životinja sa retencijom placente,

leukogram u peripartalnom periodu kod krava sa i bez retencije

  • Upload
    vudung

  • View
    241

  • Download
    6

Embed Size (px)

Citation preview

Page 1: leukogram u peripartalnom periodu kod krava sa i bez retencije

43

ORIGINALNI RAD / ORIGINAL PAPER

* Rad primljen za štampu 27. 12. 2012. godine.**LužajićTijana,UniverzitetuBeogradu,Fakultetveterinarskemedicine,Katedrazapatološkufiziologiju;JelenaDanilović,DržavniUniverzitetuNovomPazaru,Departmanzabiologiju;MarkoKatić,PKBKorporacija,Beograd;drsci.vet.med.TatjanaBožić,profesor,drsci.vet.med.MilicaKovačevićFilipović,profesor,UniverzitetuBeogradu,Fakultetveterinarskemed-icine,Katedrazapatološkufiziologiju

DOI: 10.2298/VETGL1402043L UDK: 636.2+618.56:618.6+612.112

LEUKOGRAM U PERIPARTALNOM PERIODU KOD KRAVA SA I BEZ RETENCIJE PLACENTE*

PERIPARTAL LEUKOGRAM IN COWS WITH AND WITHOUT RETAINED PLACENTA

Lužajić Tijana, Danilović Jelena, Katić M, Božić Tatjana, Kovačević Filipović Milica**

Cilj ovog istraživanja je bio da na osnovu promena u apsolutnom broju pojedinih vrsta leukocita u peripartalnom periodu kod krava sa i bez retencije placente utvrdi da li je zaostajanje posteljice poveza-no sa subkliničkom inflamatornom reakcijom u prepartalnom periodu. Šesnaest visokosteonih krava holštajn rase, starosti od 3 do 9 godi-na, koje nisu pokazivale kliničke znake oboljenja pre teljenja, posle porođaja je podeljeno u dve grupe: prvu grupu (n=9) činile su životi­nje koje nisu imale retenciju placente, niti bilo kakvu klinički vidljivu inflamaciju posle porođaja; u drugoj grupi (n=7) bile su krave sa re-tencijom placente. Krv je uzorkovana 3 puta pre teljenja u razmaku od ne de lju dana i jednom 24 sata po porođaju. Ukupan broj leukoci-ta i apsolutan broj segmentiranih i nesegmentiranih (mladih) neutro-filnih gra nu locita (NG), kao i broj limfocita i monocita određen je stan-darnim laboratorijskim tehnikama. Rezultati istraživanja su pokazali da je grupa krava kod koje je posle porođaja nastala retencija pla-cente, u trećoj, drugoj i u poslednjoj nedelji pred porođaj imala blago povišen broj segmentiranih NG, a podjednak broj mladih NG u odno-su na grupu kod koje se nije javila retencija. Kod obe grupe krava, 24 sata nakon porođaja, došlo je do značajnog pada ukupnog broja leu-kocita i broja segmentiranih NG, a porasta broja mladih NG. Na os-novu navedenih rezultata može se smatrati da životinje kod kojih je u prvih 24 sata dijagnostikovana retencija placente, pre porođaja ni-su imale sistemsku subkliničku inflamatornu reakciju. Dvadeset i če-tiri sata posle porođaja sve životinje su imale subkliničku sistemsku inflamatornu reakciju. Takođe, kod životinja sa retencijom placente,

Page 2: leukogram u peripartalnom periodu kod krava sa i bez retencije

44

Vet.glasnik68(1-2)43-54(2014)LužajićTijanaisar.:Leukogramuperipartalnomperiodukodkravasaibezretencijeplacente

u prvih 24 sata posle porođaja, inflamatorna reakcija, evaluirana kroz ispitivane parametre, nije bila jačeg intenziteta u odnosu na krave kod kojih ovo patološko stanje nije postojalo.

Ključne reči: mladi neutrofili, goveda, leukocitarna formula, partus, retencija placente

Kododraslihpreživaragranulopoezaseodvijaneštosporijenegokodmono-gastričnihživotinja(rev:Taylor,2000),abelakrvnaslikasekarakterišeodnosomneutrofilailimfocita~0.5:1.Kodmonogastričnihživotinjaovajodnosjesuprotan,abrzagranulopoezaomogućavadasenekolikosatipoinflamatornomstimulusudetektujeneutrofilija,odnosnodaseurealnomvremenupratirazvojsistemskeinflamatornereakcije.Kodgoveda,tokomprvih24do72hponastankuošteće-njatkiva,zapravodolazidopadabrojaneutrofilnihgranulocita(NG)jerjenjihovapotrošnjabržaodnjihovogstvaranja.Ukoliko inflamatornistimulusnije jak,uk-upanbroj leukocitaostajeugranicama referentnihvrednosti (Kovačević-Filipo-vićisar.,2010).KadaseucirkulacijipojavemladiNG,ukupanbrojNGječes-toispodfiziološkihvrednosti.Tapojavasenazivadegenerativnilevišiftkojisamposebinijeprognostičkinepovoljanznakukolikogaposlenekolikodanasmenineutrofilija.PojavamladihNGsemožepratitipregledomkrvnograzmaza,aliurutinskojdijagnosticiinflamatornihstanjakodgoveda,ovametodaseretkokoris-tijersemladiNGpojavljujuucirkulacijiteknekolikodanaposleoštećenjatkivaizanjihovudetekcijupotrebnojeodvojitidostavremena.Osimtoga,koncentracijafibrinogenaidrugihproteinaakutnefazepredstavljapouzdanijimarkerinflamaci-jekodgoveda(Eckersallisar.,2001;Eckersallisar.,2006).Ipak,kodpojedinihpatološkihstanja,kodkojihetiopatogenezanijejošuvekupotpunostijasna,deta-ljanopispromenanaleukocitimamožedabudeodznačajazadefinisanjeuzrokaimehanizamanastankatihstanja.

Porođajsekarakterišeaktivacijomkompleksnihmehanizama,međukojimasenalazi lučenjeoksitocinaikortikotropnogrilizinghormona,ali iaktivacijene-specifičnogćelijskogimuniteta(Osmanisar.,2006;Shynlovaisar.,2013).Odlu-bljivanjeplacente,uvremeporođaja,nastajezahvaljujućirazlaganjukolagenauvezivnomtkivumatericeiplacentetokomposlednjihnedeljagraviditeta,apodde-jstvomenzimaoslobođenihizleukocita,fibroblastaimišićnihćelija(HeuweiseriGrunert,1987).Istraživanjaobavljenaposlednjihgodinauhumanojmedicini,namalimeksperimentalnimživotinjamainagovedima,svepromeneuuterusuinatkivima,kojačinekontaktuterus-placenta,definišukao lokalnu inflamaciju(vanEngelenisar.,2009;Benedictusisar.,2012;Hamiltonisar.,2012; PrinsJRisar.,2012;Shynlovaisar.,2013).Iakojejasnodaseuperipartalnomperiodurazvijalokalna inflamacija,nemadovoljnopodatakakojiukazujudaparalelnosa loka-

Uvod / Introduction

Page 3: leukogram u peripartalnom periodu kod krava sa i bez retencije

45

Vet.glasnik68(1-2)43-54(2014)LužajićTijanaisar.:Leukogramuperipartalnomperiodukodkravasaibezretencijeplacente

lnominflamacijompostoji(bezilisaretencijomplacente)sistemskainflamatornareakcijaorganizma(Kováčisar.,2009).

Retencijaplacentekodkravajepatološkostanjekojenastajeukolikoplacen-tazaostajedužeod8časovaposleporođaja(Beagleyisar.,2010).Kaonajčešćiuzrociretencijeplacentenavodeseblizanačkigraviditet,niskatelesnamasatela-dinarođenju,hipokalcemijaikraćiperiodgraviditetaodprosečnog(GhaviHos-sein-Zadeh iArdalan,2011).Upatogenezi retencijeplacentedominirajusman-jenorazlaganjekolagenazbogporemećajau funkcijiNG isistemska imunosu-presija,aliiinflamacijajačegintenzitetazboginfekcije(Benedictusisar.,2011).Ipak, etiopatogeneza retencije placente u najvećembroju slučajeva ostaje ne-dovoljnorazjašnjena.

Ciljovogistraživanjajebiodaopišupromeneuapsolutnombrojupojedinihvrstaleukocitauperipartalnomperiodukodkravasaibezretencijeplacente,saposebnimosvrtomnaprisustvomladihNGčijepovećanjemožedaukaženapri-sustvosistemskeinflamatornereakcije.

Ogledne životinje i formiranje grupa / Experimental animals and forming groups

Ispitivanjejeizvedenona16visokosteonihkravaholštajnrasetokomletnjihmeseci.Životinjesubilesmeštenenafarmigovedasavezanimsistemomdrža-nja.Kravesubilestarostiod3do9godina,saujednačenimprosečnimgodišnjimprinosommleka.Ispitivaneživotinjenisupokazivalekliničkeznakeoboljenjapreteljenja.

Posleteljenjasvekravesupodeljeneu2grupe.Prvugrupu(n=9)činilesukravekojenisu imaleretencijuplacentenitibilokakvuvidljivu inflamacijuposleporođaja.Drugugrupusučinilekrave(n=7)kojesuimaleretencijuplacente.Di-jagnozaretencijeplacentejepostavljenakodživotinjakodkojihplacentanijeiz-bačenado8satiposleporođaja.

Uzimanje uzoraka krvi na analizu i određivanje broja i vrste leukocita / Taking blood samples and determining the number and kind of leukocytes

Krvjeuzorkovana3putapreteljenjaurazmakuodnedeljudana,odnosnotri,dveijednunedeljupreočekivanogterminaporođaja,ijednom24satanakonporođaja.Uzorcikrvisudobijenipunkcijomrepnevene,komercijalnimvakutanersistemom,iglompromera18G(VenojectTERUMO)uvakutanerekojisusadrža-liEDTA(D-VAC,DemophoriusUK,EU).Krvni razmaz jenapravljenodmahpouzorkovanjuidvasatakasnijeobojenHemacolorom®(Merck).

Broj leukocita jeodređendvasatapouzorkovanjukrvi, rutinskomručnommetodompomoćuNeubauer-ove komore za brojanje uobličenih elemenata kr-

Materijal i metode rada / Material and methods

Page 4: leukogram u peripartalnom periodu kod krava sa i bez retencije

46

vi (Fein-optikBADBlankenburg),melanžera za leukocite,Türk-ovog rastvora imikroskopa.Relativnaleukocitarnaformulajedobijenapregledomkrvnograzma-zaibrojanjempojedinihvrstaleukocitadoukupnogbrojaod200.OdređivanjebrojsegmentiranihinesegmentiranihNG,limfocita,monocitaieozinofilnihgranu-locita, dok su ćelije koje nisumogle biti razvrstane ni u jednu vrstu leukocitaoznačenekaoatipičnećelije.

Pojedine vrste leukocita su na krvnom razmazu prepoznavane premasledećimkarakteristikama:a)ćelijesatridopetsegmenataujedruisvetlopla-vomcitoplazmom,dvado triputavećeoderitrocitasudefinisnekaoNG;b)umladeNGsusvrstavanećelijekojesubileneštovećeodsegmentiranihNG,alisanesegmentiranimštapićastimjedrom;c)ćelijepodjednakeveličinekaoiNG,ali sa bilobarnim jedrom i eozinofilnim (ružičasto-narandžastim) granulama, sudefinisanekaoeozinofilnigranulociti;d)ćelijesamalimokruglimjedromkojesusadržaleheterohromatin, iuzankrugsvetloplavecitoplazme,ačijaveličina jemalo prevazilazila veličinu eritrocita su definisane kaomali limfociti; e) srednjilimfocitisudefinisanikaoćelijesaneštovećim,okruglim,ekscentričnopostavlje-nimjedromsaneštosvetlijimhromatinomineštovišecitoplazme;f)ćelije3do4putavećeoderitrocita,savelikimcentralnopostavljenimeuhromatičnimjedromidostasvetloplavecitoplazmesudefinisanekaovelikilimfociti;g)kaomonoci-tisuoznačeneonećelijekojesutakođebile3do4putavećeoderitrocita,alisajedromnepravilnogoblika isivkastoplavomcitoplazmom(saibezvakuola);h)svećelijekojenisumogledaserazvrstajupoopisanimkarakteristikamasvrstanesuuatipičnećelije.Uradujeprikazanukupanbrojlimfocitakojijepredstavljaozbirmalih,srednjihivelikihlimfocita.

Leukocitarnu fomulusuodređivaladva lica,akoeficijentvarijacije izmeđudvabrojanjajebioispod10%.Kaorezultat,uzetajesrednjavrednostizmeđudvabrojanja.Naosnovurelativneleukocitarneformuleiapsolutnogbrojaleukocitaiz-računatjeapsolutanbrojpojedinihvrstaleukocita.

Statistička obrada podataka / Statistical data processing

Sviispitivaniparametrisuobrađenideskriptivnomstatistikomiprikazanikaosrednjevrednosti (SV)±standardnadevijacija(SD).Značajnostrazlike izmeđuispitivanihparametraodređenajestudentovimt-testom.

Rezultati ispitivanja pokazuju da se ukupan broj leukocita kod obe grupekrava,uperioduodtrinedeljepredporođaj,nemenjaznačajnoidasenemožeuočititrendprepartalnogpadailiporastaovihćelija(grafikon1A).Međutim,kodobegrupekrava,24sataposleporođajauočavaseznačajanpadukupnogbrojaleukocita(grafikon1A),iakonjihovevrednostiostajuuokvirureferentnih(Kramer,

Rezultati / Results

Vet.glasnik68(1-2)43-54(2014)LužajićTijanaisar.:Leukogramuperipartalnomperiodukodkravasaibezretencijeplacente

Page 5: leukogram u peripartalnom periodu kod krava sa i bez retencije

47

2000).AnalizombrojaNG,možeseuočitidakodobegrupepostojitrendporastaNGdopredporođaj,dokvrednostiposleporođajapadaju,alinenastajeneutro-penija(grafikon1B).RazlikaubrojuNG,unedeljipredporođajiodmahposlepo-rođajajevećaugrupikojajeimalaretencijuplacente,jersuivrednostipredpo-rođajbileviše,avrednostidobijeneodmahposleporođajasubileniženegokodzdravihkrava(grafikon1B).

Grafikon1.Ukupan broj leukocita i ukupan broj neutrofilnih granulocita kod krava koje su klinički bile zdrave pre i posle porođaja (beli stubici, n=9) i kod krava koje su pre po-rođaja klinički bile zdrave, ali posle porođaja su imale retenciju posteljice (svetlo sivi stubici, n=7)

Graph 1. Total number of leukocytes and neutrophils in cows that were clinically healthy before and after calving (white columns, n=9) and in cows that were clinically healthy before, and after calving had retained pla-centa (light gray columns, n=7)

KadaseukupanbrojNGpredstavikaobrojsegmentiranihibrojnesegmen-tiranihNG,možeseuočitidapostojitrenduporastubrojasegmentiranihNGunedeljamapredporođaj i njihovznačajanpadodmahposleporođaja (grafikon

0

2

4

6

8

10

12

14

16

18

20

-21 dan -14 dana -7 dana +1 dan

partus

Ukupanbrojleukocitax109

/L *

*

0

1

2

3

4

5

6

7

8

9

10

-21 dan -14 dana -7 dana +1 dan

partus

Ukupnineutro

filnigranulocitix109/L

***

A

B

Vet.glasnik68(1-2)43-54(2014)LužajićTijanaisar.:Leukogramuperipartalnomperiodukodkravasaibezretencijeplacente

Page 6: leukogram u peripartalnom periodu kod krava sa i bez retencije

48

2A).BrojmladihNGsetokomispitivanetrinedeljepredporođajnemenja,ali24sataposleporođajaznačajnorasteiprelazigornjugranicureferentnihvrednostizagoveda(grafikon2B).Jedinarazlika(iakonijeznačajna),kojasemožeuočitiizmeđudvegrupeživotinja,jedakodkravakodkojihjeposleporođajanastalare-tencijaplacente,tokomčitavogispitivanogperiodapreporođajapostojineštovećibrojsegmentiranihNG(grafikon2A).

Grafikon2.Broj segmentiranih i nesegmentiranih neutrofilnih granulocita kod krava koje su klinički bile zdrave pre i posle porođaja (beli stubici, n=9), kod krava koje su pre po-rođaja klinički bile zdrave ali posle porođaja su imale retenciju posteljice (svetlo sivi stubici, n=7)

Graph 2. Number of segmented and non segmented neutrophils in cows that were clinically healthy before and after calving (white columns, n=9) and in cows that were clinically healthy before, but after calving had re-tained placenta (light grey columns, n=7)

Posle obrade podataka, zaključeno je da između pojedinih vrsta limfoci-ta(mali,srednji iveliki)nijebilorazlike izmeđupojedinihgrupa, takoda jebrojlimfocitaprikazankaozbirnavrednost.Broj limfocita imonocita kod ispitivanih

0

1

2

3

4

5

6

7

8

9

10

-21 dan -14 dana -7 dana +1 dan

partus

Brojsegmentiranihneutro

filax109

/L

**

**

0

0.5

1

1.5

2

2.5

3

-21 dan -14 dana -7 dana +1 dan

partus

Brojnesegmentiranihneutro

filax109

/L ******

A

B

Vet.glasnik68(1-2)43-54(2014)LužajićTijanaisar.:Leukogramuperipartalnomperiodukodkravasaibezretencijeplacente

Page 7: leukogram u peripartalnom periodu kod krava sa i bez retencije

49

0

0.5

1

1.5

2

2.5

3

3.5

4

-21 dan -14 dana -7 dana +1 dan

partus

Brojmonocitax109

/L

0

1

2

3

4

5

6

7

8

9

10

-21 dan -14 dana -7 dana +1 dan

partus

Brojlim

focitax109

/L

životinjanijebiopromenjen,niuperioduodtrinedeljeprenitiodmahposlepo-rođaja(Grafikon3AiB).Brojeozinofilnihgranulocitaiatipičnihćelijanijebiora-zličituispitivanimgrupamaivremenima(rezultatinisuprikazani).

Grafikon3.Broj limfocita i monocita kod krava koje su klinički bile zdrave pre i posle po-rođaja (beli stubici, n=9), kod krava koje su pre porođaja klinički bile zdrave ali posle porođaja su imale retenciju posteljice (svetlo sivi stubici, n=7)

Graph 3. Number of lymphocytes and monocytes in cows that were clinically healthy before and after calving (white columns, n=9) and in cows that were clinically healthy before, but after calving had retained pla-centa (light grey columns, n=7)

Rezultatiovogistraživanjapokazujudakodkravasaibezretencijeplacen-te,ucirkulaciji, tokom24sataposleporođaja,dolazidoznačajnogpadaukup-nogbrojaleukocita,ukupnogbrojaNGibrojasegmentiranihNG,aporastabro-jamladihNG.Kakotokomovogistraživanjakrvnijeuzorkovanasvakodnevnou

A

B

Diskusija / Discussion

Vet.glasnik68(1-2)43-54(2014)LužajićTijanaisar.:Leukogramuperipartalnomperiodukodkravasaibezretencijeplacente

Page 8: leukogram u peripartalnom periodu kod krava sa i bez retencije

50

nedeljipredpartus,nemožemosasigurnošćuodreditikadajezaistanastaopadubrojusegmentiranih,aporastnesegmentiranihNG.Poznato jeda jeneutro-penija,sapojavommladihNG,karakterističannalazzaodgovorakutnefazekodgoveda,alibrzinanastankaneutropenijeserazlikujeuzavisnostiodeksperimen-talnogpristupa.Naime,neutropenijanastajeposlečetirisataodinokulacijeen-dotoksinauvime,atekposle16časovaodinokulacijeE. coli(Grielisar.,1975).MladiNGsuuprethodnimistraživanjimauočeniposle24do72časaodinoku-lacijeE. coliuvime(JainiLasmanis,1978).Naosnovunavedenihrezultataizlit-erature,možesesmatratidajepadsegmentiranihiporastmladihNGmogaodanastaneuprepartalnomperiodu,alinemožeseisključitimogućnostdasuovepromenenastaleiutokusamogporođaja.Ranijaispitivanjaupromenibrojapo-jedinihvrstaleukocitaiukupnogbrojaleukocitauperipartalnomperiodupokazujudapredporođajpostojitrendporastaukupnogbrojaleukocitaiNG,aposlepo-rođajanjihovpad(Kornmatititsukisar.,2004;Ohtsukaisar.,2004)štojeuskla-dusanašimistraživanjima.Suprotnonašimnalazima,Megliaisar.,(2001)poka-zalisupovećanjebrojaleukocitaiNGuprvih24satapostpartalnokojekorelirasapovećanjemkoncentracijeglukokortikosteroida.Naosnovusveganavedenog,kaoinaosnovunašihrezultata,možemopretpostavitidajedinamikapromenebrojaNGpostpartalnoveomabrza(Kherlyisar.,1989)idabrojNGpočinjedapadanekolikosatiposleporođaja,adasevrednostistabilizujunavišemnivouutokuprvogmesecaposleporođaja.Možese,takođe,pretpostavitidanaglipadubrojuNGposleporođaja,kojijepočeouterminu(ibezinfekcije),nastajezbognji-hovogprelaskausveregionematericeicerviks(Thomsonisar.,1999; Keski-Ni-sulaisar.,2000;Osmanisar.,2006; Gomez-Lopezisar.,2011;Shynnlovaisar.,2013)omogućavajući uklanjanjeoštećenih ćelija, remodelovanje i regeneracijutkiva.IakopadsegmentiranihNGnastajeodmahposleporođaja,mogućejedaporastbrojamladihNGucirkulacijizapravopočinjejedanilidvadanaprepartusaidajepovezansastvaranjempro-inflamatornihcitokinaihemotaksičnihmaterijaumatericipreporođaja(Benedictusisar.,2011).Našaprethodnaispitivanjasupokazaladauprvih24sataposlepartusadolaziidonaglogpadakoncentracijegvožđa,padakoncentracijealbuminaiporastakoncentracijeglobulinaifibrino-genakodkravaodmahposleporođaja,štosveukazujenasistemskuinflamator-nureakciju(Katić,2011).Koncentracijadrugihproteinaakutnefazetakođeras-teuprvojnedeljiposleporođaja(Kovačisar.,2009).Naosnovusveganavede-nogmožemopretpostavitidasupromeneubrojuzrelihimladihNGpodstaknutefiziološkimpromenamakojeuključujuodgovorakutnefazeuuterusupredpartusitokomsamogpartusa.

Broj segmentranihNG jeu trećoj, drugoj i uprvoj nedelji predpartusbioneštovećikodkravakojesuimaleretencijuplacenteuodnosunakravebezre-tencije.Našaprethodnaispitivanjapokazujudakodkravasaretencijomplacentenedeljudanapreporođajapostojiznačajanporastbrojatrombocita(Lužajićisar.,2013).NaosnovučinjenicedajebrojsegmentiranihNG,kaoibrojtrombocitauprepartalnomperioduvećikodkravakodkojihseposlepartusarazvijeretencija

Vet.glasnik68(1-2)43-54(2014)LužajićTijanaisar.:Leukogramuperipartalnomperiodukodkravasaibezretencijeplacente

Page 9: leukogram u peripartalnom periodu kod krava sa i bez retencije

51

placente,možesepretpostavitidasutekravepreporođajabileizloženenekomoblikustresa.Stresdovodidoporastakoncentracijeglukokortikosteroidakoji sjednestranesprečavajuprelazakNGutkivaipovećavajunjihovbrojucirkulaci-ji(Jacobsisar.,1981),asadrugestranepovećavajubrojtrombocitaucirkulaciji(Mandell,2000).

Naosnovusvihprethodnonavedenihrezultata,možesezaključitidasusveživotinjeodmahposleporođajaimalesubkliničkusistemskuinflamatornureakci-ju.Životinjekodkojihjedijagnostikovanaretencijaplacente,odgovorakutnefaze,evaluirankrozispitivaneparametre,nijebiojačegintenzitetauodnosunakravekodkojihovopatološkostanjenijepostojalo.Kodkravakodkojihjeustanovljenaretencijaplacenteprepartalnonijepostojalasistemskasubkliničkainflamacija,alidasunaosnovusvihnavedenihrezultatateživotinjebileizloženenekomstreso-genomfaktorukojijedoveodosistemskereakcijeorganizma.

NAPOMENA/ACKNOWLEDGEMENT:Deoovogradajefinansiransredstvimaprojektabroj175061Ministarstvazaprosvetu,naukui tehnološkirazvoj,RepublikeSrbije.A part of this work was funded bz the project number 175061 of the Ministry of Education, Science and Technological Development, Republic of Serbia.

1. BeagleyJC,WhitmanKJ,BaptisteKE,ScherzerJ,.Physiologyand treatmentof retained fetalmembranesincattle.JVetInternMed2010;24(2):261-8.

2. BenedictusL, JorritsmaR,KnijnHM,VosPL,KoetsAP.Chemotactic activity of cotiledons formononuclearleukocytesrelatedtooccurenceofretainedplacentaindexametasonein-duceparturitionincattle.Theriogenology2011;76(5):802-9.

3. BenedictusL,ThomasAJ,JorritsmaR,DaviesCJ,KoetsAP.Two-waycalftodammajorhistocom-patibilityclassIcompatibilityincreasesriskfactorretainedplacentaincattle.AmJReprodImmunol2012;67(3):224-30.

4. EckersallPD,YoungFJ,McCombC,HogarthCJM,SafiS,WeberA,McDonaldT,NolanAM,Fitz-patrickJL.Acutephaseproteinsinserumandmilkfromdairycowswithclinicalmastitis.VetRec2001;148:35-42.

5. EckersallPD,YoungFJ,NolanAM,KnightCH,McCombC,WaterstonMM,HogarthCJ,ScottEM,FitzpatrickJL.AcutephaseproteinsinbovinemilkinanexperimentalmodelofStaphylo-coccusaureussubclinicalmastitis.JDairySci2006;89:1488-501.

6.GhaviHossein-ZadehN,ArdalanM.Cow-specificriskfactorsforretainedplacenta,metritisandclinicalmastitisinHolsteincows.VetResCommun2011;35(6):345-54.

7. Gomez-LopezN,Vadillo-PerezL,NessimS,OlsonDM,Vadilo-OrtegaF.Choriodeciduaandam-nionexhibitselectiveleukocytechemotaxisduringtermhumanlabor.AmJObstetGyne-col2011;204(4):364.

8.GrielLCJr,ZarkowerA,EberhartRJ.Clinicalandclinico-pathologicaleffectsofEscherichiacoliendotoxininmaturecattle.CanJCompMed1975;39(1):1-6

Zaključak / Conclusion

Literatura / References

Vet.glasnik68(1-2)43-54(2014)LužajićTijanaisar.:Leukogramuperipartalnomperiodukodkravasaibezretencijeplacente

Page 10: leukogram u peripartalnom periodu kod krava sa i bez retencije

52

9.HamiltonS,OomomianY,StephenG,ShynlovaO,TowerCL,GarrodA,LyeSJ,JonesRL.Macro-phagesinfiltratethehumanandratdeciduaduringtermandpretermlabor:evidencethatdecidualinflammationprecedeslabor.BiolReprod2012;86(2):39.

10. HeuwieserW,GrunertE.Steroidhormonprofileintheafterbirthexpulsionperiodofcattle.OtschTierarztlWochenschr1987;94(5):311-4.

11. Jacobs RM,HorneyB,BeinerL.CutaneousresponsetoPHA-Mandhematologicalchangesincorticosteroidtreatedcows.CanJCompMed1981;45(4):384-7.

12. JainNC,LasmanisJ.LeucocyticchangesincowsgivenintravenousinjectionsofEscherichiacoliendotoxin.ResVetSci1978;24(3):386-7.

13. KatićM.Statusgvožđa,krvnaslikaiproteinikodkravauposlednjemmesecugraviditetaikodnji-hoveteladi.U:KatićM.Parametristatusagvožđakodnovorođeneteladiikodkravara-zličitestarostiuperipartalnomperiodu.Beograd,Specijalističkirad2011:48-53.

14. Keski-NisulaL,AaltoML,KatilaML,KirkinenP.Intrauterineinflammationatterm:ahistopathologicstudy.HumPathol2000;31(7):841-6.

15.KherlyMEJr,NonneckeBJ,RothJA.Alterationsinbovineneutrophilfunctionduringtheperipar-turientperiod.AMJVetRes1989;50(2):207-14.

16.KornmatitsukB,DahlE,RopstadE,BeckersJE,GustafssonH,KindahlH.Endocrineprofiles,haematologyandpregnancyoutcomesof latepregnantHolsteindairyheiferssiredbybullsgivingahighorlowincidenceofstillbirth.ActaVetScand2004;45(1-2):47-68.

17. KováčG,TóthováC,NagyO,SeidelH,KonvičnáJ.AcutePhaseProteinsandtheirRelationtoEnergyMetabolitesinDairyCowsduringthePre-andPostpartalPeriod.ActaVetBrno2009;78:441-7.

18.KovačevićFilipovićM,StevanovićJ,StevanovPavlovićM,DebeljakMartačićJ,KneževićM,Mi-jačevićZ,BožićT.Acutephaseproteinresponse incowswithStaphylococcusaureussubclinicalmastitis. ActaVetBeograd2010;60:205-16.

19.KramerJW.Normalhematologyofcattle,sheepandgoats,In:FeldmanFB,ZinklGJ,NemiCJ,editors,2000:VeterinaryHematology,107-6.

20. LužajićT,KatićM,DanilovićJ,BlondB,BogdanovićD,KovačevićFilipovićM.Peripartalnibrojtrombocitaikoncentracijafibrinogenakodgovedasaibezretencijeplacente.TrinaestiSrednjeevropskiKongresBujatričara,Beograd,Srbija,5-8Jun,2013:(in press)

21. MandellPC.Essentialsthrombocythemiaandreactivethrombocytosis,In:FeldmanFB,ZinklGJ,NemiCJ,editors,2000:VeterinaryHematology,504

22. MegliaGE,JohannissonA,PeterssonL,WallerKP.Changesinsomebloodmicronutrientsleuko-cytesandneutrophilexpressionofadhesionmoleculesinperiparturientdairycows.ActaVetScand2001;42(1):139-50.

23. OhtsukaH,KoiwaM,FukundaS,SatohY,HayashiT,HoshiF,YoshinoTO,KawamuraS.Chang-esinperipheralleukocytesubsetsindairycowswithinflammatorydiseasesaftercalving.JVetMedSci2004;66(8):905-9.

24. OsmanI,YoungA,JoradanF,GreerIA,NormanJE.Leukocytedensityandproinflammatorymedi-atorexpressioninregionalhumanfetalmembranesanddeciduabeforeandduringlaboratterm.JSocGynecolInvestig2006;13(2):97-103.

25.PrinsJR,Gomes-LopesN,RobertsonSA.InterleukiN-6inpregnancyandgestationaldisorders.JReprodImmunol2012;95(1-2):1-14.

26.ShynlovaO,LeeYH,SrikhaionK,LyeSJ.Physiologicuterineinflammationandlaboronset:ine-grationofendocrineandmechanicalsignals.ReprodSci2013;20(2):154-67.

27. TaylorJA.LeukocyteResponseinRuminanats.In:BernardF.Feldman,JosephG.Zinkl,NemiC.Jain.VeterinaryHematology.Philadelphia,2000:391-2.

28.ThomsonAJ,TelferJF,YoungA,CampbellS,StewartCJ,CameronIT,GreerIA,NormanJE.Leu-kocytesinfiltratethemyometriumduringhumanparturition:futherevidencethatlaborisaninflammatoryprocess.HumReprod1999;14(1):229-36.

Vet.glasnik68(1-2)43-54(2014)LužajićTijanaisar.:Leukogramuperipartalnomperiodukodkravasaibezretencijeplacente

Page 11: leukogram u peripartalnom periodu kod krava sa i bez retencije

53

29.vanEngelenE,deGrootMW,Breeveld-DwarkasingVN,EvertsME,vanderWeydenGC,Tav-erneMA,RuttenVP.Cervicalripeningandparturitionincowsaredrivenbyacascadeofpro-inflammatorycytokines.ReprodDomestAnim2009;44(5):834-41.

PERIPARTAL LEUKOGRAM IN COWS WITH AND WITHOUT RETAINED PLACENTA

Luzajic Tijana, Danilovic Jelena, Katic Marko, Bozic Tatjana, Kovacevic Filipovic Milica

Theaimofthisstudywastoinvestigatewhetherprepartalleukogramincowswithretainedplacentacouldindicatethepresenceofsubclinicalsystemicinflamma-toryresponsebeforetheonsetofdisease.Aftercalving,sixteenhighlypregnantHolsteincows,aged3to9years,withoutclinicalsignsofthediseasepriortocalvingweredividedintotwogroups:thefirstgroup(n=9)wereanimalswithoutretainedplacenta,oranyvisi bleinflammationafterbirth;thesecondgroup(n=7)werecowswithretainedplacenta.Bloodwassampledthreetimesbeforeparturition,atintervalsofoneweek,andonce24hoursafterbirth.Thenumberof total leukocytes,segmentedandnonsegmentedneutrophilicgranulocytes(NG),lymphocytesandmonocytesweredeterminedbystandardlaboratorytechniques.Theresultshaveshownthatinthegroupofcowswithretainedplacentathenumberofmatureneutrophilswasslightlyelevatedinthethird,secondandlastweekbe-forecalving,andequalnumberofnonsegmentedneutrophilsinregardtothegroupwithnoretention.Theresultshavealsoshownthat,inbothgroupsofcows,24hoursaftercal-ving,thenumberoftotalleukocytesandthenumberofsegmentedneutrophilsdecreased,butthenumberofthenonsegmentedneutrophilsincreased.Basedonthis,wecancon-clude that cowswith retained placenta had no systemic inflammatory response duringthreeweeksprepartalperiod,but24hoursaftercalving,systemicinflammatoryresponsewasdocumentedinallthecows.Moreover,theintensityofinflammatoryresponseincowswithretainedplacentawasnotmorepronouncedincomparisontocowswithoutretainedplacenta.

Key words: band neutrophils, dairy cows, leukocytes formula, partus, retained placenta

ЛЕЙКОГРАММА КОРОВ В ОКОЛОРОДОВОМ ПЕРИОДЕ СО И БЕЗ УДЕРЖКИ ПЛАЦЕНТЫ

Лужаич Тиянa, Данилович Елена, Катич Марко, Божич Татьяна,

Ковачевич Филипович Милица

Цельюданногоисследованиябылоопределить,являетсялизадержкаплацентыв связи с субклинической воспалительной реакцией в околородовом периоде наосновании изменений абсолютного числа отдельных видов лейкоцитов коров воколородовом периоде со и без удержки плаценты. Шестнадцать високостеоних

ENGLISH

РУССКИЙ

Vet.glasnik68(1-2)43-54(2014)LužajićTijanaisar.:Leukogramuperipartalnomperiodukodkravasaibezretencijeplacente

Page 12: leukogram u peripartalnom periodu kod krava sa i bez retencije

54

Голштайнкороввовозрастеот3до9лет,которыенепоказываликлиническиепризнакизаболеваниядоотела,после родахбылиразделенынадвегруппы:перваягруппа(n=9)состоялаизживотных,имеющихзадержкуплацентыилилюбоеклиническоевидимоепослеродовоевоспаление,вовторойгруппе(n=7)быликоровысзадержкойплаценты. Образцы коров брали три раза до отела через одну неделю и раз втечение24часапослерождения.Общееколичестволейкоцитовиабсолютноечислосегментированныхинесегментированный(молодых)нейтрофильныхгранулоцитов(НГ), а также количество лимфоцитов и моноцитов было определено с помощьюстандартныхлабораторныхметодов.Результатыпоказали,чтогруппакоров,вкото-ройродыпроизошлипослеудержкиплацентывтретьей,второйипоследнейнеделипередродами,количествосегментированныхНГбылонемногобольше,аколичествомолодыхНГодинаковопосравнениюсгруппой,вкоторойнебылоудержки.Вобеихгруппахкоров,через24часапослеродов,наблюдалосьзначительноеуменьшениеобщегочислалейкоцитовичислосегментированныхNG,увеличениечисламолодыхNG.Наоснованииэтихрезультатов,можнопредположить,чтоживотное,укоторого в первые 24 часа был поставлен диагноз удержка плаценты до родов не имелисубклиническогосистемноговоспалительногоответа.Двадцатьчетыречасапослеродов,всеживотныеимелисуб-клиническуюсистемнуювоспалительнуюреакцию. Кроме того, уживотных с задержкой плаценты, в течение первых 24 часов послерождения, воспалительная реакция, которую оценили на основании параметрах исследования,небылаболеевысокойинтенсивностипосравнениюскоровами,укоторыхнесуществуетпатологическоесостояние.

Ключевые слова: молодые нейтрофилы, крупный рогатый скот, лейкоциты,роды,задержкаплаценты

Vet.glasnik68(1-2)43-54(2014)LužajićTijanaisar.:Leukogramuperipartalnomperiodukodkravasaibezretencijeplacente