PROF. DR. LUIS E. QUIROGA, PH.D. 2011

PANEL INMUNOLOGICO

PERFIL

1. EVALUACION DE I. INNATA.

2. E. DE I. ADQUIRIDA.3. E. DE LA I. HUMORAL.4. E. DEL ESTADO ALERGICO.5. E. DE LAS REACCIONES

Ag-Ac 6. E. DE LOS Ags CHM.7. E. DE AUTOINMUNIDAD.8. EVALUACIONES GENICAS.9. E. INMUNO-

HISTOQUIMICAS.

Evaluacion de I. Innata

E. DE LA QUIMOTAXIS: Prueba de la agarosa; camara de Boyden; P.de ori- entacion; ventana cutanea de Rebuck.

E.DE LA FAGOCITOSIS:Rde leucocit actividad bactericida;reduccion de la dihidrorodamina;quimioluminis- cencia.

E. DE LA INFLAMACION: VES proteina C reactiva; liberacion de la histamina;dosificacion de factores del Complemento.

E. DE LAS CELULAS NK:uso deCr51 usando NK sensibles a celulas tumoral

E. DEL S. DEL COMPLEMENTO: actividad hemolitica total; dosificacion individual de factores.

E. De la I. Adquirida

E.DE LOS LINFOCITOS: extendido de sangre; recuento total de linfocitos;

Estudio de subpoplaciones de linfocitos: citometria de flujo (CMF).

Clasificacion del grado de desarro llo de los Ls.de la inmunidad preexisten te, sensibilizacion activa.(T. cutaneos).

Transformacion de los Ls; medici- on de la capacidad de transformacion de los Ls. T y B.

Estudio de Citoquinas: (ILs; IFN; Quimoquinas).

Deteccion de Ags de Diferencia cion. Cluster Dterminants (CDs)

Estudio del Complemento: CH50 ; C3; C4, etc.,

Evaluacion de la I. Humoral

Medicion de las Inmunoglobulinas: electroforesis; inmunoelectroferesis;

Dosificacion individual de los Igs: A,D,E,G y M.

Dosificacion de la IgE: se debe medir con el nefelometro E.de la capacidad de desarrollar una respuesta humoral: emplear DPT o vacuna de polio (virus muerto).

E. Del Estado Alérgico

Estado Alérgico: se evalúa mediante la evaluación y cuanti ficacion de los eosinofilos en la sangre periférica.

Evaluación de Rinitis: Se evalúa mediante el extendido de moco nasal para evaluar el numero de eosinofilos presente

RAST:Es el test especifico, per mite detectar y cuantificar la IgE.

Pruebas epicutaneas: se usan alergenos liquidos o en parches con diversos antigenos

E. De Las Reacciones Ag-Ac.

Reacciones de precipitacion: in vitro y en fase solida:Inmun difusion doble (Ouchterloni) inmunodifusion radial simple (Manzini) inmunoelectroforesis cruzada (Laurell).

Aglutinacion: prueba de Coombs aglutinacion de particulas recubier tas con Acs.; Hemoaglutinaciones. Inhibicion de hemoaglutinacion; Fi jacion del Complemento;

Deteccion de Ags y de Acs: Pru ba de las citotoxinas; Radioinmu- noanalisis (RIA); Ensayo inmuno- enzimatico (ELISA); Anticuerpos Fluorescentes.

Identificacion de Ags del MHC

Serologia: hasta hace poco la determinacion de los diferente Ags HLA se hacia empleando colecciones de sueros obteni- dos de Pts sensibilizados a determinados Ags HLA por em barazo o transfusiones.

Reacciones en cadena de la Polimerasa PCR: es el metod empleado en la actualidad pa- ra tipificar los Ags HLA clase I y de la claseII.

Clas. de grupos sanguineo: se mezclan GR del Pt. con sue ros ricos en Acs contra grupo A y contra grupo B.

E. De Problemas Autoinmunes

Determinacion de Acs antinucleares: hay varias pruebas que permiten establecer la presencia y cuantificar los distintos Acs.

Dosific.De Compl.Inmunes se mide el C1q del complemen to , molecula con la cual tienen gran afinidad, luego se mide la cantidad de IgG.

Inmunoblot: o Western blot, se transfiere proteinas separadas por electroforesis o gel de agar e identificar el Ag por el empleo de Acs marcados.

Evaluaciones Genicas

MICROARREGLOS: se emplean filtros de nitrocelulosa, soporte solido donde se adhieren las moleculas de DNA, de manera que no interaccionan con otras moleculas movilizadas y mantiene su capacidad de hibridar moleculas presentes en solucion.

DETECCION: de estas hibridaciones se realiza mediante la deteccion de un marcador reactivo en revelado de autorradiografia, a este tipo de tecnica se denomina

Southern Blot: Este tecnica luego se extendio al campo de inmovilizacion de proteinas .

Northern Blot: de RNA Western Blot: Eastern Blot:

E. I. Experimental

INMUNOHISTOQUIMICA: Es un estudio histopatologico que se basa en la utilizacion de un Ac es pecifico, previamente marcado, mediante un enlace quimico, con una enzimaque puede transformar un sustrato en visible.

Sin afectar la capacidad del Ac, para formar un complejo con el antigeno,aplicado a una muestra de tejido organico, correctamente fijada e incluida en parafina.

Para el complejo Ag-Ac: asi for- mado se utilizan tecnicas especificas (peroxidasas, fluoresceina).