Penyimpanan in Vitro Minggu7

8/18/2019 Penyimpanan in Vitro Minggu7

1/10

Perkembangan Teknologi TRO VOL. XV, No. 1, 2003

51

PENYIMPANAN IN VITRO TANAMAN OBAT POTENSIAL

Nurliani Bermawie dan Natalini Nova Kristina

Balai Penelitian Tanaman Rempah dan Obat

ABSTRAK

Penyimpanan in vitro pada tanaman

dapat dilakukan dengan cara sederhana,

pertumbuhan minimal maupun dengan teknik

pembekuan. Penyimpanan in vitro pada

tanaman obat telah berlangsung sejak tahun

1999 hingga saat ini, dengan mengunakan

bahan tanaman hasil-hasil penelitian. Koleksi

tanaman pada tahun 1998/1999 adalah 16 jenis

tanaman obat langka sampai saat ini telah

terkoleksi sekitar 32 jenis dan selanjutnya

masih akan bertambah. Seluruh koleksi

tanaman obat ini disimpan dalam teknik penyimpanan dalam keadaan tumbuh dan

pertumbuhan minimal dengan menggunakan

ABA ataupun manitol. Periode subkultur pada

keadaan tumbuh adalah antara 3 - 6 bulan,

kecuali pada tanaman tertentu seperti

purwoceng (Pimpinella pruatjan), meniran,

trengguli dan kumis kucing karena terjadi

penurunan respon tanaman pada media, seperti

layu daun, daun menguning atau gugur dan

adanya eksudat fenol yang merubah warna

media menjadi coklat.

PENDAHULUANIndonesia merupakan negara

yang memiliki keanekaragaman hayatiyang kaya, sekitar 40.000 species

tumbuhan ditemukan di Indonesia dan

180 species di antaranya berpotensisebagai tanaman obat (Rifai dan

Anggadiredja, 1995). Plasma nutfah

tumbuhan mempunyai fungsi dan

peranan yang penting bagi kehidupandan penghidupan manusia di muka

bumi. Dari plasma nutfah inilah dapatdirakit bibit-bibit unggul. Selanjutnyamenurut Toyib (dalam Abdullah,

1991), tumbuh-tumbuhan yang sehari-hari dipandang tidak berguna mungkin

memiliki sifat khusus yang sangat

berharga bagi perakitan varietas-varietas unggul. Sifat-sifat khusus ini

sering baru diketahui dan diperlukan

setelah timbul keadaan darurat.

Dari tahun ke tahun terjadidegradasi generasi lahan yang cepat

seiring dengan erosi plasma nutfah.

Banyak jenis tumbuhan asli sukar

dijumpai bahkan punah jika dicariditempat-tempatnya yang asli. Di

antara berbagai plasma nufah yang ada,maka tumbuhan obat merupakan

kelompok tumbuhan yang erosinya

tergolong pesat. Mengingat manfaat

tumbuhan obat bagi kebutuhanmanusia maka dilakukan usaha

pelestariannya. Pelestarian berbagai

sumber genetika tumbuhan tersebuttelah dilakukan di kebun koleksi, kebun

botani, cagar alam maupun kebun percobaan (Mariska, et al., 1993). Dilain pihak, banyak di antara tumbuhan

obat yang belum dibudidayakan,

sehingga erosi genetiknya tergolong

pesat (Rifai, 1983).Di Balittro sebelumnya tercatat

331 jenis koleksi tanaman rempah dan

obat, saat ini tinggal 274 jenis, disamping itu 47 aksesi jahe, 61

pyrethrum, 5 aksesi panili, 10 cabe

jawa, 9 ketumbar, > 100 aksesicengkeh telah hilang/mati akibat

kurangnya pemeliharaan (Bermawie, et


2/10


52

al., 2000). Di samping faktor kematian

pada tanaman, menurut Sastrapraja(1988), pada tanaman yang mudah

diperbanyak secara badaniah dan

sifatnya tahunan memerlukan

perlakuan yang tinggi karenadilestarikan melalui koleksi hidup yang

dipertahankan di kebun koleksi. Setiap

data koleksi tersebut perludiperbaharui, agar tidak mati karena

sifatnya yang tahunan. Dapat

dibayangkan jumlah dana dan tenagayang perlu disediakan untuk

menanganinya.

TEKNIK PENYIMPANAN

PLASMA NUTFAH BIAKAN IN

VITRO

Berkaitan dengan masalahtersebut maka sering dikatakan

bioteknologi kultur jaringan merupakan

teknologi yang berpotensi untukdimanfaatkan dalam kegiatan

pelestarian plasma nutfah, khususnya

tanaman obat. Penerapan penyimpananin vitro ada beberapa cara di antaranya

adalah penyimpanan dalam keadaan

tumbuh (jangka pendek), penyimpanan pertumbuhan minimal (jangka pendek

dan menengah) dan penyimpanandengan pembekuan (jangka panjang).

Penyimpanan dalam keadaan tumbuh

adalah cara pemeliharaan dengan

melakukan pemindahan tanaman(subkultur) secara rutin pada media

yang sama agar biakan tetap hidup.

Untuk menghindari terjadinya mutasidan menjaga viabilitas tanaman maka

zat pengatur tumbuh yang digunakandiusahakan seminimal mungkin(Irawati, 1990).

Penyimpanan pertumbuhan

minimal adalah dengan menekan pertumbuhan biakan dengan menurun-

kan proses pembelahan sel dan proses

metabolisme yang hampir mendekati

nol. Untuk menekan pertumbuhantersebut dilakukan manipulasi suhu,

pemberian zat penghambat tumbuh

(Paclobutrazol, CCC, Ancymidol),retardan (ABA), pemberian stabilisator

osmotic seperti manitol dan sorbitol

serta pemiskinan media, terutama unsurmakronya dari ½ sampai 1/10 nya

(Mariska, et al., 1993). Dengan cara

tersebut tetap diperlukan pemindahan

pada media baru, akan tetapi frekuensi

pemindahannya lebih rendah daripadacara pertama.

Penyimpanan dengan teknik pembekuan atau jangka panjang

dengan cara ini proses metabolisme

dari sel, jaringan maupun organ yangdisimpan dihentikan sehingga tidak ada

proses pertumbuhan (Bhojwani dan

Razdan, 1983).Dari ketiga teknik penyimpanan

tersebut Balittro telah mengupayakan penyimpanan dengan pertumbuhan

sederhana dan pertumbuhan minimal

dengan menggunakan media tumbuh

yang sesuai dari hasil-hasil penelitian in

vitro) sejak tahun 1999/2000 pada

berbagai tanaman obat. Umumnya

menggunakan media dasar MS dengan penambahan Benzil Adenin untuk

penyimpanan sederhana dan

penyimpanan minimal menggunakan paclobutrazol, manitol, ABA dan

pengurangan unsur makro-mikronya.


3/10


53

PERKEMBANGAN

PENELITIAN PENYIMPANAN

TANAMAN OBAT

Dalam perplasmanutfahan kultur

in vitro berperan sebagai alat

penyimpan dan penggandaan tanaman,namun bagaimanapun kebun-kebun

percobaan tetap mempunyai fungsi

yang menonjol. Kalau pada

koleksi/pengumpulan dan identifikasidiperlukan dalam luasan yang cukup

besar, maka pada saat konservasi

menyusut di laboratorium kultur jaringan. Menurut Toyib (dalam

Abdullah, 1991), satu laboratorium

sanggup menyimpan sejumlah plasma

nutfah.Balittro telah melakukan

penyimpanan in vitro pada tanaman

obat potensial ini dengan teknik penyimpanan dalam keadaan tumbuh

dan pertumbuhan minimal. Koleksi

tanaman berupa tanaman herba,tanaman semusim dan tanaman

berkayu. Teknik penyimpanan pada

tanaman herba ataupun semusim sudahcukup berkembang, tetapi untuk

tanaman berkayu hasilnya kurangmaksimum (Soetikno dalam Abdullah,

1991).

Jenis tanaman obat yang dikoleksi

Pada tahun 1999 tanaman obatyang dikoleksi secara in vitro adalah

tiga jenis tanaman obat yang telah

langka yakni purwoceng (Pimpinella pruatjan), pule pandak ( Raufolvia

serpentina) dan inggu ( Ruta

angustifolia). Populasi purwoceng di

pegunungan Anjasmoro sudah beranjakdari kategori genting menjadi hampir

punah seperti halnya yang terjadi di

gunung Dieng (Rifai, 1986). MenurutAmzu (1990), pule pandak atau akar

tikus termasuk dalam kelompok

tumbuhan obat langka yang mulai kritis

keberadaanya. Begitu juga denganinggu, tanaman ini juga dikategorikan

langka (Wahid, dalam Amzu, 1990).

Pada tahun 2000 disamping 3 jenis tanaman yang telah langka

tersebut, ditambah 6 jenis dari famili

Zingiberaceae, 3 tanaman diuretika, 1rematik, 1 obat kanker (Tabel 1). Di

samping itu dikoleksi juga tanaman

rempah (lada dan panili) serta tanaman

atsiri seperti nilam, sehingga koleksi in

vitro menjadi 14 jenis (Tabel 1).Perkembangan koleksi tanaman

obat in vitro terus bertambah seiringdengan bertambahnya jenis tanaman

yang telah selesai diteliti, sehingga

memerlukan pemeliharaan agar sumbertanaman tidak hilang. Untuk tahun

2003 jumlah tanaman yang dikoleksi

bertambah yakni trengguli (Casia

fistula), Sambang nyawa (Gynura prumbocens), som jawa (Talinum

paniculatum) dan tempuyung (Sonchus

arvensis) (Tabel 2).

Bahan tanaman yang digunakan

untuk koleksi kultur in vitro tergantungdari sifat yang dikandung oleh tanaman

yang ingin dibiakkan, dapat berupa

kalus, emrio, biji, mata tunas danmeristem. Perbanyakan plasma nutfah

melalui kalus jarang digunakan, karena

timbulnya perubahan genetis.


4/10


54

Tabel 1. Tanaman obat koleksi in vitro tahun 2000

No Nama tanaman Tahun Sumber

koleksi eksplan

1.

2.

3.4.

5

6.7.

8.

9.

10.

11.12.

13.

14.

Pule pandak ( Raufolvia serpentina)

Purwoceng (Pimpinella pruatjan)

Inggu ( Ruta angustifolia)Jahe ( Zingiber officinale)

Bangle ( Zingiber cassumar )

Kunyit (Curcuma domestica)Temu putih (Curcuma zeodaria)

Temu kunci (Curcuma pandurata)

Temulawak (Curcuma xanthorhiza)

Pegagan (Centella asiatica)

Kumis kucing (Orthosiphon cristatus)Tapak dara (Vinca rosea)

Meniran (Phyllanthus niruri)

Daun encok (Plumbago zeylanica)

1994

2000

19941993

1998

19981998

1998

1998

1998

19962000

1998

2000

tunas

anakan

tunasrimpang

rimpang

rimpangrimpang

rimpang

rimpang

stolon

tunas biji

tunas

tunas

Sumber : Syukur, et al., 2001; Hadipoentyanti et al., 2000

Tabel 2. Perkembangan koleksi jenis tanaman obat dan media tumbuh

No. Nama tanaman Media tumbuhJumlah

tunas

1.

2.

3.

4.5.

6.

7.8.

9.10.

11.

12.13.

14.

15.16.

17.

18.

19.20.



Inggu ( Ruta angustifolia)

Jahe ( Zingiber officinale)Bangle ( Zingiber cassumar)

Kunyit (Curcuma domestica)

Temu putih (Curcuma zeodaria)Temu kunci (Curcuma pandurata)

Temulawak (Curcuma xanthorhiza)Pegagan (Centella asiatica)

Kumis kucing (Orthosiphon cristatus)

Tapak dara (Vinca rosea)Meniran (Phyllanthus niruri)


Kapolaga sabrang ( Elletaria carda momum)Adas (Foeniculum vulgare)

Murbei ( Morus alba)

Trengguli (Casia fistula)

Som jawa (Talinum paniculatum)

Tempuyung (Sonchus arvensis)

MS +BA 0.8 mg/l

BA 2.5 + Kin 2 mg/l

¾ MS BA 0.5 mg/l

BA 3 mg/lBA 2 mg/l

BA 3 mg/l

BA 2 mg/lBA 2 mg/l

BA 2 mg/lBA 0.1 mg/l

BA 0.3 mg/l

BA 0.1 mg/lBA 0.3 mg/l

BA 0.1 mg/l

BA 0.5 mg/lBA 0.5 Adenin sulfat

60mg/l

¾ MS BA 0.5 mg/l

WPM + BA 0.1 mg/l

BA 0.1 mg/lBA 0.1 mg/l

9,12

4,5

kalus

2,542,82

2,3

3,22,5

2,762,14

2,29

8,61,33

2

4,22

2,2

1,3

11

Sumber : Syukur, et al., 2001


5/10


55

FAKTOR-FAKTOR YANG

MEMPENGARUHI

PENYIMPANAN IN VITRO

Media penyimpanan tanaman

Dalam penyimpanan in vitro

media yang digunakan umumnyamedia dasar Murashige dan Skoogyang diperkaya dengan zat pengatur

tumbuh dengan konsentrasi tertentu

sesuai dengan hasil penelitian. Namunadakalanya media tanaman diganti

karena respon tanaman yang telah

berkurang pada media tersebut yangterlihat pada penampilan tanaman di

mana tunas menjadi menjadi

pendek/roset dan layu, daun

menguning, ataupun gugur daun.Di samping itu terjadi juga

pergantian media tumbuh hal ini

dilakukan untuk memperbaiki per-tumbuhan tanaman, karena responnya

mulai kurang baik. Pergantian media

ini terlihat pada inggu dan purwoceng.Eksplan inggu yang terkoleksi pada

tahun 1999 berbentuk kalus, sehingga

perlu diganti untuk merangsang kalusmembentuk tunas. Penyimpanan dalam

bentuk kalus sering mengalami penyimpangan genetik sehingga tidak

sama dengan induknya (Mariska,

1987). Sementara purwoceng yang

dikultur pada media BA 2,5 mg/l, penampilannya tidak baik, ditemukan

masalah pelayuan daun. Menurut

Mariska et al., (1994) media untuk perbanyakan purwoceng adalah MS +

kinetin 10 mg/l dengan jumlah tunas 3 -

5/bulan. Penggunaan media MS + BA

2,5 + kinetin 5 mg/l dapatmeningkatkan jumlah tunas menjadi

4,5 (Syahid, et al., 2002).

Pengantian media pada tanaman

inggu menjadi ¾ MS + BA 0,5 mg/l,dapat merangsang pembentukan tunas,

walaupun pada awalnya tunas yang

terbentuk mengalami vitrifikasi,

namum karena periode subkultur yangterus menerus, tunas-berangsur-angsur

tumbuh hijau segar. Menurut Husni etal., (1994), media terbaik untukmerangsang pembentukan tunas inggu

adalah ¾ MS + BA 0,5 mg/l didapat

13,6 tunas.

Periode subkultur

Setiap tanaman memiliki

sensitifitas masing-masing terhadap

media tumbuh, namum umumnya

disubkultur secara periodik antara 3sampai 6 bulan. Namun untuk tanaman

tertentu periode subkultur harus lebih

cepat karena respon dari tanaman yangkurang baik, seperti pada purwoceng

(Pimpinella pruatjan) yang harus

disubkultur antara 4 – 6 minggu, karenatunas cepat layu bila melewati periode

tersebut.

Pada tanaman jahe sampaidengan periode kultur ke-7 jumlah

tunas yang dihasilkan tetap tinggi yaitu9,7 tunas, di mana vigor tanaman tetap

normal (Mariska, et al., 1998).

Penurunan daya tumbuh jahe terjadi

setelah memasuki periode subkultur ke-9 dengan rata-rata jumlah tunas 8,5

(Herwinia, 1993). Tanaman trengguli

(Casia fistula) yang baru dikoleksiawal tahun 2003, periode subkultur

harus sering dilakukan karena

tingginya eksudat fenol yang

dikeluarkan tanaman sehingga mediamenjadi coklat dan mengakibatkan

kematian tanaman. Masalah eksudat


6/10


56

fenol yang menghambat pertumbuhan

ini juga ditemukan pada tanaman lada, penambahan polypynyl pyrolidon

dapat membantu periode sukultur

menjadi antara 3 - 4 bulan (Kristina dan

Bermawie, 1999). Pada beberapatanaman, dengan media multiplikasi

yang sama, perlakuan subkultur terus

menerus tidak mengurangi dayamultiplikasi tunas, seperti pada nilam,

mentha dan pule pandak (Seswita,dalam Krstina dan Bermawie, 1999).Pengaruh periode kultur dan jumlah

tunas dapat dilihat pada Tabel 3.

Periode subkultur yang terus-menerus

dapat menurunkan daya regenerasi

tunas (Lauzer, et al., 1992).

Penyimpanan dengan cara

tumbuh ini memerlukan periodesubkultur yang rutin sehingga berakibat

pada terkontaminasinya tanaman yang

dapat mengurangi populasi bahkan

memusnahkan tanaman koleksi dilaboratorium. Untuk menghindari hal

tersebut telah diupayakan teknik

penyimpanan pertumbuhan minimaldengan menggunakan zat penghambat,

stabilator dan pemiskinan unsur hara

atau stress media.

Tabel 3. Periode subkultur dan jumlah tunas

No. Nama tanaman Periode subkultur Jumlah tunas

1.

2.

3.

4.

5.

6.

7.

8.

9.

10.

11.

12.

13.

14.

15.16.

17.

18.

19.

20.

21.



Inggu ( Ruta angustifolia)Jahe ( Zingiber officinale)Bangle ( Zingiber cassumar ) Kunyit (Curcuma domestica)

Temu putih (Curcuma zeodaria)

Temu kunci (Curcuma pandurata)

Temulawak (Curcuma xanthorhiza)

Pegagan (Centella asiatica)

Kumis kucing (Orthosiphon cristatus)

Tapak dara (Vinca rosea)

Meniran (Phyllanthus niruri)


Kapolaga sabrang ( Elletaria carda momum)Adas (Foeniculum vulgare)

Murbei ( Morus alba)

Trengguli (Casia fistula)

Som jawa (Talinum paniculatum)

Sambung nyawa (Gynura prumbocens)

Tempuyung (Sonchus arvensis)

6 bulan

4-6 minggu

5 bulan

3 bulan

3 bulan

3 bulan

3 bulan

3 bulan

3 bulan

4 bulan

2 bulan

4 bulan

2 bulan

5 bulan

4 bulan3 bulan

3 bulan

2 bulan

4 bulan

4 bulan

3 bulan

8,3

4,2

2,9

4,08

3,94

*

*

*

3,75

2,42

4,8

6

2,8

3,15

9

2

2,2

1,3

1

1

19Keterangan : *) Tanaman mati terkontaminasi mikroorganismeSumber : Syukur, et al., 2001


7/10


57

Penggunaan zat penghambat

dilakukan dengan mengacu hasil penelitian Mariska et al., (1994) pada

tanaman pule pandak, pemberian ABA

1 mg/l menekan pertumbuhan tunas

sampai 5,6, sementara bila meng-gunakan media perbanyakan MS + BA

0,8 mg/l memberi jumlah tunas 14/2

bulan. Untuk tanaman inggu mediauntuk penyimpanan digunakan

penghambat ABA dan stabilator

Manitol. Dengan ABA 4 mg/l dapatmenekan pertumbuhan tunas menjadi

2,0 selama 6 bulan, sementara pada

manitol 500 – 1500 mg/l menekan

jumlah tunas 3/6 bulan.

Berdasarkan hasil tersebut di atassaat ini sedang digunakan ABA,

manitol dan pengurangan unsur haramakro pada tanaman koleksi pule

pandak, tapak dara, daun encok,

meniran, kumis kucing dan adas.

KEMUNGKINGAN

TIMBULNYA PERUBAHAN

GENETIK

Akibat dari penyimpanan kultur

yang cukup lama dapat menurunkandaya regenerasi tunas. Menurut

Wetherell (dalam Santoso, 1995)secara teori ada tiga masalah yang

dapat menyebabkan kerusakan kultur-

kultur tersebut, yaitu perubahan

genetik, kekurangan nutrisi dan penyakit. Kerusakan kultur dilaporkan

oleh Husni, et al., 1994 pada tanaman

lada yang telah disimpan lebih dari 4tahun, di mana pertumbuhan tunas

menjadi terhambat, batang gemukmemendek, daunnya memucat dankurus panjang. Sedangkan faktor

penyakit dilaporkan oleh Syahid et al.,

(2002) pada tanaman kunyit dantemulawak yang terkontaminasi

bakteri, tanaman bahkan telah musnah.

Menurut Sarwana (1994), mutasi

genetik “off type” yang muncul padatanaman dapat bervariasi antara 0 –

100%. Akibat mutasi genetik ini tidak

terlihat pada saat kultur di dalam botol,kecuali kerdil dan bule. Mutasi genetik

akan terlihat setelah tanaman

dikeluarkan (aklimatisasi). Padatanaman pisang setelah aklimatisasi

mutasi terlihat dengan adanya tanaman

yang roset, kipas, tidak bertangkai

tandan, bertangkai tandan panjang,

berbuah kecil dan kulit buah sepertikerak, mozaik dan daun sempit.

Untuk melihat kemungkinanterjadi mutasi genetik, saat ini telah

diaklimatisasi tanaman pegagan dan

temu putri dan menyusul tanaman pule pandak.

KESIMPULAN

Peluang penyimpanan secara in

vitro pada tanaman obat, cukup baik

dilakukan dengan teknik penyimpanandalam keadaan tumbuh pada media

yang sama dan penyimpanan dengan pertumbuhan minimal dapat dengan

menggunakan ABA, Manitol dan

pengurangan unsur makro. Saat ini

telah disimpan 21 jenis tanaman obatdalam keadaan tumbuh maupun

pertumbuhan minimal.


8/10


58

DAFTAR PUSTAKA

Abdullah, A., 1991. Kegunaan kultur

jaringan dalam pelestarian plasma nutfah. Buletin Littri

No.2 Maret 35 - 39.

Amzu, E. dan Haryanto, 1990.

Pelestarian pemanfaatantumbuhan obat di Indonesia.

Dalam E.A.M. Zuhud (Ed.).

Pelestarian pemanfaatantumbuhan obat dari hutan

tropis Indonesia. Jurusan

Konservasi Sumberdaya Hutan.

Fak. Kehutanan IPB. Bogor.Hal. 15 - 26.

Bermawie, N., E. Hadipoentyanti, S.Fatimah Syahid, S. Wahyuni,

D. Seswita dan R. T. Setiyono,2000. Status dan pengem-

bangan plasma nutfah tanaman

rempah dan obat 1995 - 2000.Bahan Laporan Hasil Penelitian

Plasma Nutfah 1995 - 2000,

KPKN, Bogor. 10 h.

Bhojwani, S. S. and M.K. Razdan,1983. Plant tissue culture.

Elseveir. Amsterdam. NewYork. 502 p.

Hadipoentyanti, E., D. Seswita, N.

Bermawie, S.F. Syahid, N.N.

Kristina, L. Udarno, Amalia, Nur Ajijah dan Meynarti SDI.,

2001. Rejuvinasi plasma nutfah

tanaman rempah, obat dananeka tanaman perkebunan

secara in vitro. Laporan Teknis

Penelitian. Balittro-Bogor. 7 h.

Herwinia, M., 1993. Pengaruh padat

dan cair serta penambahankombinasi benzyl adenin (BA)

dengan adenin sulfat, air kelapa

dan arang aktif terhadap

organogenesis jaringantanaman jahe ( Zingiber

officinale Rosc). Sripsi S1

FMIPA-UNPAD. Bandung 64 p.

Husni, A., Gati, E. dan I. Mariska,

1994. Perbanyakan klonal

tanaman obat langka inggumelalui kultur jaringan.

Makalah pada Seminar Hasil

Penelitian dan Pengembangan

Bioteknologi II. Bogor. 6 - 7September 1994. LIPI.

Irawati, 1990. Pelestarian plasma

nutfah melalui kultur jaringan.Makalah dalam Latihan

Bioteknologi Kultur Jaringan.

Balittro. 12-24 Maret. Bogor.

Kristina, N.N. dan N. Bermawie, 1999.Pengaruh subkultur dan lama

periode kultur pada daya

multiplikasi tunas lada (Pipernigrum) asal biji varietas

Petaling 1.

Lauzer, D.G. Laublin, G. Vincent andM. Cappadocia, 1992. In vitro

propagation and cytology of

wild Yams. Dioscorea

abyssinia Hoch and D.

mangenotiana Miege. Plant

Cell, Tissue and Organ Culture.

28 (2) : 215 - 223.


9/10


59

Mariska, I., 1987. Konsepsi pelestarian

plasma nutfah dengan baikanin vitro. Edisi Khusus Littro 3

(1): 22 - 27.

Mariska, I., E. Gati dan D.

Sukmadjaya, 1993. Pelestariantumbuhan obat melalui kultur

jaringan. Warta TOI : 2 (1) : 14

- 16.

Mariska, I. dan D. Seswita, 1994.Pengaruh lama penyimpanan

dan zat penghambat terhadap

daya regenerasi biakan pule

pandak. Makalah pada SeminarHasil Penelitian dan Pengem-

bangan Bioteknologi II. Bogor

6 - 7 September. LIPI.

Mariska, I., R. Purnamaningsih, M.Kosmiatin, 1995. Pertumbuhan

biakan purwoceng pada

beberapa media dasar.Prosiding Kongres Ilmu

Pengetahuan Nasional VI.

Jakarta 11 - 15 September.Buku III. LIPI-DIKTI dan

Forum Organisasi Profesi

Ilmiah. h. 250 - 256.Mariska, I., Hobir dan S. F. Syahid,

1998. Upaya penyediaan benih

tanaman jahe melalui kultur jaringan. Jurnal Litbang

Pertanian XVII (1) : 9 - 13.

Rifai, M.A., 1986. Perkembangan

muktahir perplasmanutfahantumbuhan obat di Indonesia.

Makalah dalam Simposium

Penelitian Tumbuhan Obat,

Juli. Surabaya.Santosa, 1995. Perbanyakan vegetatif

melalui kultur jaringan pada

tanaman jahe ( Zingiberofficinale Rosc.) dilaboratorium ioteknologi

Puslitbangtri. Bogor. Laporan

Kerja Praktek S1. Univ.Sudirman. 89 p.

Sastrapraja, S., 1988. Bioteknologi

untuk pelestarian dan

pemanfaatan plasma nutfah.Makalah Seminar Bioteknologi

Tanaman, BPPT dan PT.

Fitotek Unggul. 12 - 13Desember. Jakarta.

Sarwana, T.W.A., 1994. “Off type”

pada tanaman pisang hasil

kultur jaringan. Makalah padaSeminar Hasil Penelitian dan

Pengembangan Bioteknologi

II. 6 - 7 September. LIPI-Bioteknologi.


10/10


60

Syukur, C., N. Bermawie, E.

hadipentyanti, S.F. Syahid, S.wahyuni, D. Seswita, N. N.

Kristina, R.T. Setiyono,

Sulaiman, U. Rasiman, E.

Sudiadi, Nasrun dan R.Suryadi, 2001. Konservasi

tanaman rempah dan obat.

Laporan Teknis Penelitiantahun 2001. Balittro Buku III.

85 - 96.

Rifai, M.A. dan Y. Anggadiredja,

1995. Keragaman plasmanutfah tanaman obat Indonesia,

penanganan penelitian,

pengembangan dan pelestarian.

Seminar Keanekaragamanhayati tumbuhan obat tropik.

PPOT-UGM. 10 h.

Syahid, S. F., N. N. Kristina, Sukarman

dan N. Bermawie, 2002.Konservasi tanaman rempah

dan obat secara in vitro di

lapang serta benih di

laboratorium. Laporan teknis penelitian 2002. Balittro-

Bogor. 40 hal.

Documents

Penyimpanan in Vitro Minggu7