PETUNJUK PRAKTIKUM MATA KULIAH ILMU … IN VIVO GrowthAssay (uji pertumbuhan) Prinsip : mengukur kemampuan protein (yang diteliti availabilitasnya) untuk mengganti asam amino tertentu

SELAMAT DATANG DI PRALTIKUM KELAS 3ILMU NUTRISI TERNAK NON RUMINANSIA

PETUNJUK PRAKTIKUM MATA KULIAH ILMU NUTRISI TERNAK NON RUMINANSIA

Materi 4 :

METODE UNTUK MENENTUKAN AVAILABILITAS ASAM AMINO PADA UNGGAS

PETUNJUK PRAKTIKUM MATA KULIAH ILMU NUTRISI TERNAK NON RUMINANSIA

TUJUAN PRAKTIKUM

Untuk mengetahui beberapa metode penentuan availabilitas asam amino

Metode yang dapatdilakukan dalam PenentuanAvailabilitas Asam Aminoadalah :

1. In Vivo2. In Vitro

METODE

METODE IN VIVO

Growth Assay (uji pertumbuhan)

Prinsip : mengukur kemampuan protein (yang diteliti availabilitasnya) untukmengganti asam amino tertentu pada pertumbuhan. Perhitungan availabilitasberdasarkan hubungan antara laju pertumbuhan dengan kandungan asamamino dalam pakan percobaan.

Kelemahan : pertumbuhan itu sendiri dipengaruhi oleh beberapa faktor, yaitutingkat konsumsi, kandungan protein dalam pakan, dan interaksi antar asamamino.

Faktor lain yang mempengaruhi hasil availabilitas pada metode ini adalahtemperatur lingkungan, kandungan energi dalam pakan dan interaksi antaraasam amino dengan beberapa mineral (Na, Cl, K)

METODE IN VIVO

Kandungan Asam Amino Bebas Dalam Darah

Jumlah asam amino dalam darah dapat digunakan sebagai indikator availabilitasnya.

Anabolisme akan menghasilkan pengambilan asam amino dari darah, sedangkan katabolisme protein akan meningkatkan kandungan asam amino dalam darah.

Daya Cerna (digestibility method)

Prinsip : availabilitas dapatditentukan dari daya cerna(digestibility).

Daya cerna adalah perbedaan antarajumlah asam amino yang dikonsumsidengan jumlah asam amino yangterdapat dalam feses.

Kelemahan : asam amino endogen(endogenus amino acid) danmikroorganisme.

METODE IN VIVO

•Sumber asam amino endogenadalah sel-sel yang telah mati dansekresi dari saluran gastro intestinal.Sekresi ini dari dari glandulasalivaris, perut, hati, pankreas danmukosa sel yang berguna dalamproses pencernaan yang padaumumnya berupa enzym. Enzim iniberbentuk protein atau mucoprotein.

• Efek dari mikroorganisme padapencernaan protein. Mikroorganismejuga mempunyai kemampuanmemecah protein untukkehidupannya. Tidak hanya sebagaikonsumen tetapi juga sebagaiprodusen asam amino.

METODE IN VIVO

METODE IN VITRO

Uji Kimia (Chemical Assay)Availabilitas lisin dapat diukur dengan reaksi quanidin. Untuk availabilitasmethionine dapat ditentukan dengan gas chromatography.

Metode EnzimatisLisin dapat diisolasi dari bahan makanan setelah dicerna dengandekarboksilase dan cystine digunakan pancreatin.

Metode MikrobiologisMO yang bisa digunakan untuk test adalah Streptococcus zymogenes,Streptococcus faecalis, Streptococcus durens, E.colli, dan Lactobacillusarabinosus.

Faktor-faktor yang Mempengaruhi Availabilitas Asam Amino Dari Bahan Pakan

Protease Inhibitor Lectin Letak Protein Dalam Biji-bijianSerat Kasar Daya Larut Protein Reaksi Mailard Oksidasi Lemak Gugus Karbonyl Bebas

CONTOH SOAL PENENTUAN AVAILABILITAS METIONIN PADA SUNFLOWER MEAL

LANGKAH KERJA :

PERTAMA:Susun pakan yang defisien akan METIONIN. Jika kebutuhan metionin pada ayam starter

adalah 0,45%, maka sebagai contoh susunlah pakan yang mengandung metionin 0,40%. Misalsebagai berikut (pakan ini disebut pakan BASAL):

BAHAN PAKAN JUMLAH (g/100g) JJagung 55,1 Bekatul 3,0 Wheat pollard 3,0 Tepung ikan 9,0 Bungkil kedele 21,0 Bungkil kelapa 2,0 Meat and bone meal 2,0 Minyak 3,0 CaCO3 0,5 Molasses 0,9 Vitamin mineral mix 0,5 JUMLAH 100,0

Pakan tersebut mengandung zat makanan sebagai berikut:

ZAT MAKANAN: KANDUNGAN:

ME, kkal/kg 2986

Protein kasar, % 21,05

Lemak kasar, % 7,11

Serat kasar, % 3,92

Kalsium, % 0,92

Phospor, % 0,74

Metionin, % 0,40

Lisin, % 1,12

KEDUA : Buat 2 kelompok pakan, yang pertama mengandung metionin sintetis dan yang

kedua mengandung bahan yang akan dihitung availabilitas asam amino-nya,dalam contoh ini sunflower meal (bungkil biji bunga matahari). Masing-masing pakan dalam tiap kelompok mengandung metionin (asam amino yangakan dihitung availabilitasnya) secara berjenjang mulai dibawah kebutuhansampai diatas kebutuhan. Dalam contoh ini kita buat kandungan metioninsebesar 0,400%, 0,425%, 0,450% dan 0,475%. Selang kandungan metioninadalah 0,025%. CATATAN metionin sintetis mengandung metionin sebesar80% dan sunflower meal mengandung metionin sebesar 1%. Kedua kelompokpakan ini kita sebut dengan pakan TEST

CARA MENGHITUNG: Untuk kelompok pakan test metionin, untuk mendapatkan tambahan metionin sebesar 0,025% adalah:

= (0,025/80) x (1000) gram

= 0,3125 g/kg pakan

Untuk kelompok pakan test sunflower meal, untuk mendapatkantambahan metionin sebesar 0,025% adalah:

= (0,025/1) x (1000) gram

= 25 g/kg pakan

JADI: Untuk mendapatkan pakan test yang mengandung metionin masing- masingsebesar 0,400%, 0,425%, 0,450% dan 0,475% maka pada 1 kg pakan BASAL ditambahkan:

PADA KELOMPOK pakan TEST METIONIN:

1. 1 kg pakan BASAL + 0 gram metionin ------ pakan TEST 0,400% met.

2. 1 kg pakan BASAL + 0,3125 g metionin ----- pakan TEST 0,425% met.



PADA KELOMPOK pakan TEST SUNFLOWER MEAL (SF):

1. 1 kg pakan BASAL + 0 g SF ------------- pakan TEST 0,400% met.

2. 1 kg pakan BASAL + 25 g SF ----------- pakan TEST 0,425% met.



KETIGA:MEMBUAT RANCANGAN PERCOBAAN:

Ulangan 3 atau 4 kali. Misal 4 kali

Tiap ulangan terdiri dari 3 s/d 5 ekor DOC. Misal 5 ekor

Jadi rancangan: 2 kelompok pakan x 4 ulangan x 4 pakantest. Jadi ada 32 petak kandang percobaan. Jika tiap ulangandiisi 5 ekor, maka jumlah DOC yang dibutuhkan adalah 32 x 5 ekor atau sama dengan 160 ekor.

Pengamatan 1 atau 2 minggu. Misal 1 minggu

MISAL DARI PERCOBAAN YANG KITA LAKUKAN KITA PEROLEH

DATA SEBAGAI BERIKUT:

KETERANGAN: KP = konsumsi pakan, PBB = pertambahan bobot badan, Kmet.= konsumsi metionin. Kmet = KP x kandungan metionin dalam pakan.

PERHITUNGAN REGRESI LINEAR: Y = a + bX

CARA MENGHITUNG: UNTUK KELOMPOK METIONIN

RUMUS:b = (X-Xbar)(Y-Ybar)/(X-Xbar)2a = Ybar – b(Xbar)

Dalam perhitungan ini makab = 0,3325/0,00399 = 83,33a = 93,5 – 83,33(0,507) = 51,26

JADI PERSAMAAN REGRESINYA ADALAH: Y = 51,26 + 83,33X ANALOG UNTUK KELOMPOKSUNFLOWER: Y = 48,73 + 80,73X AVAILABILITAS:

= b SUNFLOWER dibagi b METIONIN kali 100%= (80,73/83,33) 100%= 96,87%

ARTINYA AVAILABILITAS METIONIN DALAM SUNFLOWER MEAL ADALAH 96,87% DIBANDINGKAN DENGAN AVAILABILITAS METIONIN DARI METIONIN SINTETIS. CATATAN: ASAM AMINO SINTETIS PADA UMUMNYA MEMPUNYAI AVAILABILITAS YANG BAIK

Terima Kasih

Documents

PETUNJUK PRAKTIKUM MATA KULIAH ILMU … IN VIVO GrowthAssay (uji pertumbuhan) Prinsip : mengukur kemampuan protein (yang diteliti availabilitasnya) untuk mengganti asam amino tertentu