Yadira Yleana Pinto QuinteroYadira Yleana Pinto Quintero

Universidad de los Andes- Universidad del Rosario-Hospital Militar Central

Agosto de 2006

POLIMORFISMOS DEL GEN P53 POLIMORFISMOS DEL GEN P53 EN CÁNCER DE MAMA FAMILIAR EN CÁNCER DE MAMA FAMILIAR

EN UNA POBLACIÓN EN UNA POBLACIÓN

COLOMBIANACOLOMBIANA  

• Estudio Colaborativo Interinstitucional:HMC Dr. William Sánchez Dr. Diego Vanegas. Dr. Alfredo BallénUnidad Oncológica del Country Dr. José Fdo Robledo Dr. José Joaquín CaicedoUniversidad Javeriana Dr. Ignacio Briceño Dra. Diana Torres Dr. Jaime BernalFundacion Santafe de Bogota Dr. Fabio TorresFundación ONES

POLIMORFISMOS DEL GEN P53 EN CÁNCER DE POLIMORFISMOS DEL GEN P53 EN CÁNCER DE MAMA FAMILIAR EN UNA POBLACIÓN MAMA FAMILIAR EN UNA POBLACIÓN

COLOMBIANA COLOMBIANA 

Enfermedad multifactorial caracterizada por

una proliferación celular descontrolada,

causada por alteraciones en la información

genética que inducen cambios en eventos

moleculares de la células.

CÁNCER

MutacionesMutaciones::

• Espontáneas.

• Producidas por cancerígenos (químicos, físicos y virales).

Mecanismos celulares alteradosMecanismos celulares alterados::

• Reparación del ADN (BRCA 1, BRCA 2, ATM, P53)

• Proliferación (PRb, control ciclo celular Ciclina y CDKs y P53)

• Adhesión celular (cadherinas)

• Apoptosis o muerte celular programada P53

Cáncer de mamaCáncer de mama

• PrevalenciaPrevalencia

- En el Reino Unido 1:12 mujeres

- En USA 1:8 mujeres

• 10-15% son de origen familiar (BRCA)

• Factores genéticos de baja penetrancia “Polimorfismos”

P53 y el cáncer de P53 y el cáncer de mamamama

Localizado en el cromosoma 17 posición 17p13.1

Factor de transcripción.

Monitorea la integridad y la estabilidad del genoma.

Se transcribe y traduce continuamente.

En humanos el gen p53 es polimórfico en el exón 4, el intrón 3 y el intrón 6.

Polimorfismo del exón 4: Codón 72; a.a. Arginina o Prolina.

Intrón 3: duplicación de 16 pb.

Intrón 6 presenta un cambio de A/G : donde G contiene el sitio de restricción para la enzima MspI.

Polimorfismos del gen p53Polimorfismos del gen p53

Relación del polimorfismo Relación del polimorfismo del codón 72 con la función del codón 72 con la función

de P53de P53P53 codón 72 Prolina Arginina

Movilidad electroforética más rápidaCrecimiento tumor más lentoTamaño tumor más pequeñoCaracterística enfermedad más oncogénicoInducción de la transcripción más fuerteInducción apoptósis más eficienteInteracción con mdm2 mayor afinidad

más rápido

OBJETIVOSOBJETIVOS

OBJETIVO GENERALOBJETIVO GENERAL

Describir la frecuencia de los polimorfismos del codón 72, del intrón 3 y del intrón 6 del gen p53, en una población colombiana con cáncer de mama familiar con respecto a un grupo control de individuos sin antecedentes de cáncer.

OBJETIVOS ESPECíFICOSOBJETIVOS ESPECíFICOS

• Determinar las frecuencias alélicas del polimorfismo del codón 72 del gen p53

• Determinar las frecuencias alélicas del polimorfismo de la inserción de 16 pb en el intrón 3 del gen p53.

• Determinar las frecuencias alélicas del polimorfismo del intrón 6 (A/G) Msp I del gen p53

• Determinar si existe asociación entre los polimorfismos del gen p53 en el codón 72, intrón 6 (A/G) MspI o Inserción en el intrón 3 de16pb y la presencia de cáncer de mama familiar.

Tipo de estudio: Prospectivo y analítico de casos y controles (1:1).

Población : mujeres con edad entre 18 y 80 años.

Caso: Paciente con Dx de Ca de mama con patología confirmada que cumpla

con los criterios de inclusión de Bethesda.

METODOLOGIAMETODOLOGIA

Análisis Estadístico• Se utilizo el programa estadístico SPSS 11.5• Pruebas efectuadas:• Análisis Bivariado:

– Prueba exacta de Fisher– Prueba Ji-cuadrado sin corregir de Pearson

• Análisis Multivariado:– Regresión Logística incondicional – Razón de disparidad (OR)

• Todas las purebas estadisticas se evaluaron con una Significancia (p<0,005)

Marco Muestral:Marco Muestral: HMC UOC

FSFBUJParticulares

Tamaño de Muestra: 186 Casos186

Controles

MUESTRAMUESTRA

RESULTADORESULTADOSS

GENOTIPOS DE LOS GENOTIPOS DE LOS POLIMORFISMOS DEL GEN p53 POLIMORFISMOS DEL GEN p53

404pb

336pb

199pb

113pb

86pb

196pb180pb

Gel de agarosa 2% con los productos de PCR-RFLP’s. Línea 1 y 8 marcador de peso 50 pb, Intrón 6: Línea 2 homocigoto (M/M), línea 3 heterocigoto (W/M), línea 4 homocigoto (W/W); Exón 4: Línea 5 homocigoto (Pro/Pro), línea 6 heterocigoto (Arg/Pro), línea 7 homocigoto (Arg/Arg); Intrón 3: línea 9 homocigoto (M/M), línea 10 heterocigoto (W/M), línea 11 homocigoto (W/W)

Edad P=0,020 Estrato Social Educación

P=0,000

Características Características Sociodemográficas en Casos y Sociodemográficas en Casos y

ControlesControles

05

1015202530354045

<39

40-4

9

50-5

9

60-6

9>7

0 2 3 4 5 6

Primar

ia

Secun

daria

Univer

sitar

io

Post-g

rado

Po

rce

nta

je (

%)

Casos (%) Controles (%)

Características Clínicas en casos y Características Clínicas en casos y controlescontroles

8.2

28.6

63.2

73.6

26.423.1

76.9

8.1

19.9

72

55.9

44.1

16.7

83.3

0

10

20

30

40

50

60

70

80

90

< 20 20-23 > 23 Si No Si No

Po

rcen

taje

(%)

Casos (%) Controles (%)

IMC Medicamentos

P=0,000

Alergias P=0,125P=0,144

Antecedentes Gineco-Antecedentes Gineco-ObstetricosObstetricos

Edad Menarquia Edad del Primer Embarazo P=0,015P=0,006

42

29,3

2,8

20,211,3 14

65,8

9,916 14,3

8,8

76,9

15,616,123,7

33,3

0102030405060708090

≤12 13 14 15 ≥16 ≤25 26-29 ≥30

Casos (%) Controles (%)

No. Embarazos

P=0,868

Anticonceptivos

P=0,946

Terapia Hormonal

P=0,008

Antecedentes Gineco-Antecedentes Gineco-ObstObstéétricostricos

18,8

90,9

57,7

42,3

81,2

1,77,9

20,7

56,2

13,5

58,1

41,9

9,11,6

10,8

22

51,6

14

0

10

20

30

40

50

60

70

80

90

100Casos (%) Controles (%)

Hábitos Alimenticios en Casos y Hábitos Alimenticios en Casos y ControlesControles

24,9

87,9

12,1

80,986,1

13,9

69,471

29

41,9

31

75,1

30,6

69

19,1 16,1

34,4

15,117,7

82,3 84,9 83,9

58,165,6

0

10

20

30

40

50

60

70

80

90

100

Si No Si No Si No Si No Si No Si No

Casos (%) Controles (%)

FumaP = 0,099

CarnesAsadas

P = 0,421

EnlatadosP = 0,036

CaféP = 0,550

EmbutidosP = 0,029

AlcoholP = 0,496

Características Clínico Características Clínico Patológicas de los casos de Patológicas de los casos de

cáncer de mamacáncer de mama

13,926,1

6,514,4

9,4

49,2 44,2

6,6

24,4

54

18,6

56,243,8

0102030405060

Casos %

Edad n = 180 Lateralidad n = 181

NódulosLinfáticos

n = 169

GradoHistológico

n = 172

Características Clínico Características Clínico Patológicas de los casos de Patológicas de los casos de

cáncer de mamacáncer de mama71.5

20.3

3.8 4.4

77.2

13.310

0.6 0.6 1.1 1.1 0.6

63.9

36.1

0

10

20

30

40

50

60

70

80

90

Pos Neg

ER+ y PR-

ER- y P

R+CDI

CD In si

tu CLI

CD y CL

In si

tu

Muc

inoso

Coloide

CL Insit

u

Filode

s

Pre-M

eno

Post-M

eno

Casos %

ReceptoresHormonales

n = 158

TipoHistológico

n = 180

EstadoMenopáusico

n = 182

Asociación entre los genotipos de los Asociación entre los genotipos de los polimorfismos y las características polimorfismos y las características

clinicopatolclinicopatolóógicas de los casosgicas de los casos

P≥0,15

8,3

18

7

16,2

7

14,8

6,3

41,7

23,428,1 27,9

25

100

24,7

37,5

50

3640,4

34,6

41,938,3

13,518,6

13,6

50

9 8,8 11

4,78,6

58,363,7 65,5

61,6

70,5

100

65,5

43,8

100

36,3 34,938,4

29,534,5

56,2

15,8 13,216,7 18,8

41,7

0

20

40

60

80

100

120

Pro/Pro (%) Arg/Arg (%) Pro/Arg (%) I 6W/W (%) I6 W/M(%) I6 M/M (%) I3 W/W (%) I3 W/M(%) I3 M/M (%)

≤39 40-49 50-59 60-59 ≥ 70 Pre-Meno Post-meno

Asociación entre los genotipos de los Asociación entre los genotipos de los polimorfismos y las características polimorfismos y las características

clinicopatolclinicopatolóógicas de los casosgicas de los casos

70

51,4

63

53,9

62,5

100

55,8

64,3

30

48,6

37

46,1

37,5

44,2

35,7

66,7

74

67,971,7 73 71,3 71,4

22,218,8

22,620 18,9

100

21

14,3

4,2 3,8 3,80

2,8

14,311,1

3,15,7 3,3

8,14,9

100

0

20

40

60

80

100

120

Pro/Pro (%) Arg/Arg (%) Pro/Arg (%) I 6W/W (%) I6 W/M(%) I6 M/M (%) I3 W/W (%) I3 W/M(%) I3 M/M (%)

Gan. Linf Neg Gan Linf Pos ER-PR Pos ER-PR Neg ER (+) – PR(-) ER(-) PR(+)

P>0,15

Cáncer de mama

Controles Valor –P

Genotipos Codón 72

n (%) n (%) 0,004

Arg/Arg 114(61,3) 82(44,1) 0,001 Pro/Arg 60(32,3) 85(45,7) 0,008 Pro/Pro 12(6,5) 19(10,2) 0,260 Alelos 0,004

Arg 288 (77,4) 249 (67,0) Pro 84 (22,6) 123 (33,0)

λ2 EHW 1,113 0,195

Distribución de frecuencias Distribución de frecuencias genotípicas y alélicas del codón 72 genotípicas y alélicas del codón 72

en casos y controlesen casos y controles

*Regresión Logística Incondicional OR ajustado por edad menarquia, nuliparidad, edad del primer embarazo, IMC

 

Asociación entre el genotipo del codón Asociación entre el genotipo del codón 72 de p53 y el riesgo a 72 de p53 y el riesgo a desarrollar desarrollar

Cáncer de mamaCáncer de mama

*Regresión Logística Incondicional OR ajustado por Estrato social, Nivel educativo, Terapia hormonal, Enlatados y Embutidos

Asociación entre el genotipo del codón Asociación entre el genotipo del codón 72 y factores de riesgo hallados en el 72 y factores de riesgo hallados en el

presente estudiopresente estudio 

Frecuencias genotFrecuencias genotíípicas y alélicas del picas y alélicas del Intron 3 y 6 en Casos y ControlesIntron 3 y 6 en Casos y Controles

Asociación entre el genotipo deAsociación entre el genotipo de los los intrintroonneses 3 y 6 3 y 6 yy el riesgo el riesgo a a desarrollardesarrollar Cáncer de mama Cáncer de mama

Genotipos Intrón 6

Cáncer de mama n= 186

Controles n=186

OR (IC95%) OR Ajustado* (IC95%)

W/W 140 153 1 referencia 1 referencia W/M 45 29 1,7 (1,08-2,85) 1,53 (0,89-2,82) M/M 1 4 0,27 (0,03-2,47) 0,36 (0,03-3,81)

Genotipos Intrón 3

W/W 168 184 1 referencia 1 referencia W/M 16 1 17,53 (2,29-133,57) 17,86(2,25-141,84) M/M 2 1 2,19 (0,19-24,38) No aplica

*Regresión Logística Incondicional OR ajustado por edad menarquia, nuliparidad, edad del primer embarazo, IMC

Genotipos Intrón 6 Cáncer de mama n= 186

Controles n=186

OR (IC95%) OR Ajustado* (IC95%)

W/W 109 92 1 referencia 1 referencia W/M 33 12 1,7 (1,08-2,85) 1,26(0,68-2,32) M/M 1 2 0,27 (0,03-2,47) 0,16(0,01-2,09)

Genotipos Intrón 3 W/W 168 184 1 referencia 1 referencia W/M 16 1 18,53 (2,29-133,57) 18,24 (2,30-144,4 M/M 2 1 2,19 (0,19-24,38) 2,66(0,14-50,87)

Asociación entre el genotipo deAsociación entre el genotipo de llosos iintrntroonneses 33 yy 6 6

y y los factores de riesgo hallados en el los factores de riesgo hallados en el presente estudiopresente estudio

*Regresión Logística Incondicional OR ajustado por estrato social, nivel educativo, terapia hormonal, enlatados y embutidos

CONCLUSIONESCONCLUSIONES  

Para la población colombiana estudiada de individuos

con cáncer de mama heredofamiliar se puede concluir

que:

El genotipo Arg/Arg del codón 72 del gen p53 es un

factor de riesgo (2 veces más) para el desarrollo del

cáncer de mama heredofamiliar.

El genotipo W/M del intrón 3 del gen p53 es un factor

de riesgo (18 veces más) para el desarrollo del cáncer

de mama heredofamiliar.

El genotipo W/M del intrón 6 del gen p53 tiene asociación aunque

no muy fuerte con el riesgo en el desarrollo del cáncer de mama

heredofamiliar.

Hay asociación entre los siguientes factores y el desarrollo de

cáncer de mama heredofamiliar:

Edad de la menarquia inferior a 12 años

La edad del primer hijo (26-29 años)

El consumo de embutidos y de enlatados

El uso de terapia hormonal

No hay asociación entre los genotipos de los diferentes

polimorfismos del gen p53 y las características clinicopatológicas

en los casos con cáncer.