Pregled analitičkih tehnika u analizi farmaceutika u bioti

R. Álvarez-Ruiz i Y. Picó, Trends Environ. Anal. Chem. 25 (2020) e00082

PRIRODOSLOVNO-MATEMATIČKI FAKULTETKemijski odsjek

Poslijediplomski sveučilišni studij - Analitička kemija

Klaudija Ivanković, mag. appl. chem.Institut Ruđer Bošković

Zavod za istraživanje mora i okoliša,Laboratorij za analitiku i biogeokemiju organskih spojeva

Farmaceutici Proizvodni pogoni

Nesavjesno odlaganje starih

lijekovaEliminacija iz

organizma ljudi i životinja

Akvakultura

Tretmani stoke uzgajane za prehranu

Odlaganje stajskog gnojiva

Korištenje stajskog gnojiva u ratarstvu

TLOPOVRŠINSKA

VODA

PRIKUPLJANJE I PRIPREMA UZORKA

01

PRIKUPLJANJE UZORAKA

LABORATORIJSKI UZGOJ OKOLIŠ DISTRIBUTERI

• bioakumulacija,toksičnost, opći utjecajzbog izloženosti

• stvarna izloženost biote u određenom području

• ljudska izloženost putemprehrane

PRIPREMA UZORAKA

■ dobivanje plazme iz krvi■ taloženje proteina

■ hidroliza glukuronida

DODATAK β-GLUKURONIDAZE

■ analiza cijelog tijela iliviše jedinki

■ ČVRSTI UZORCI: usitnjavanje

HOMOGENIZACIJA CENTRIFUGIRANJE

■ eliminacija vode

LIOFILIZACIJA

EKSTRAKCIJA FARMACEUTIKA02

EKSTRAKCIJA TEKUĆE-TEKUĆE (LLE)

ANALIZIRANA BIOTA

Plazmaribe

Jetra ribe Mozakribe

Beskralježnjaci

■ Aceton■ Acetonitril■ Metanol■ Smjesa otapala■ Dodatak kiseline ili bazeMeko tkivo

školjke

EKSTRAKCIJA NA ČVRSTOJ FAZI (SPE)

ANALIZIRANA BIOTA

Plazma ižuč ribe

Jetra ribe

Mozakribe

Beskralježnjaci

“Quick Easy Cheap Effective Rugged Safe”

ANALIZIRANA BIOTA

Beskralježnjaci

Ribe

EKSTRAKCIJSKE SOLI■ Magnezijev sulfat■ Natrijev klorid■ Acetatni pufer■ Citratni pufer

Meko tkivoškoljke

Biljke

EKSTRAKCIJA POTPOMOGNUTA ULTRAZVUKOM (USE)

ANALIZIRANA BIOTA

BeskralježnjaciRaznatkiva ribe

Meko tkivoškoljke

Biljke Ptice Alge

EKSTRAKCIJA POTPOMOGNUTA VISOKIM TLAKOM (PLE)

ANALIZIRANA BIOTA

BeskralježnjaciRaznatkiva ribe

Meko tkivoškoljke

Biljke

Ptice Planktoni

SPE

LLE

PLE

USE

JEDNOSTAVNOTEHNIKA

QuEChERS

BRZO JEFTINO “ZELENO” PONOVLJIVOST

C. L. Chitescu, E. Oosterink, J. De Jong i A. A. M. Stolker, Talanta 88 (2012) 653–662.B. Huerta, A. Jakimska, M. Gros, S. Rodríguez-Mozaz i D. Barceló, J. Chromatogr. A 1288 (2013) 63–72.

ANALITIČKIPOVRATI

PROČIŠĆAVANJE IUKONCENTRIRAVANJE

03

https://www.sigmaaldrich.com/technical-documents/articles/analytical/bioanalytical/sample-prep-overcome-matrix-effect.html

1. Kolonskakromatografija 2. GPC 3. (d)SPE

■ hidrofilne i lipofilne interakcije (Oasis HLB)■ kationski izmjenjivači (Oasis MCX)■ anionski izmjenjivači (SAX)■ π-π, dipol-dipol i hidrofobne interakcije (Strata X)■ primarne i sekundarne aminske skupine (PSA)

> >

B. Huerta, A. Jakimska, M. Gros, S. Rodríguez-Mozaz i D. Barceló, J. Chromatogr. A 1288 (2013) 63–72.R. Tanoue, K. Nomiyama, H. Nakamura, T. Hayashi, J. W. Kim, T. Isobe, R. Shinohara i S. Tanabe, J. Chromatogr. A 1355 (2014) 193–205.

■ Polimerni gel, silika gel, aluminijev oksid■ Potrebno ukoncentriravanje

INSTRUMENTNA ANALIZA

04

KROMATOGRAFSKA SEPARACIJA I MASENOSPEKTROMETRIJSKA DETEKCIJA

GC-MS

LC-MS

91%

9%

■ Kromatografija obrnute faze■ HPLC ili UPLC■ Elektroraspršenje■ Trostruki kvadrupol (QqQ)

■ Analizator s vremenom preleta spregnut s kvadrupolom (QTof) i Orbitrap

■ Kemijska ionizacija ili ionizacijaubrzanim elektronima

■ Kvadrupol (Q)■ Derivatizacija

IDENTIFIKACIJA

Separacija roditeljskog spoja od ostalih prisutnih spojeva

Analizator

Separacija analita naosnovi afiniteta prema

mobilnoj/stacionarnoj fazi

LC ili GC sustav praćenje odabranihfragmenata roditeljskog spojakoji su specifični i selektivni

Fragmentacija

Separirani analiti se prevodeu plinsku fazu i ioniziraju

IonizacijaRoditeljski spoj Detektor

KVANTIFIKACIJA

Diazepam

Diazepam-D5

ZAHVALJUJEMNA PAŽNJI!