Reaksi Aglutinasi Direk
Reaksi Aglutinasi Direk Reaksi WidalVella Anggun
HP07134112037Winih MawarningsihP07134112038Yuli Noor
AlfianiP07134112039Yunita MuslimahP07134112040KelompokDengan
pemeriksaan serologi dimungkinkan melakukan pengamatan secara in
vitro terhadap perubahan kompleks antigen-antibodi (Ag-Ab).
Pengujian tersebut berdasar pada proses presipitasi atau aglutinasi
atau aktivasi komplemen. Di Indonesia, pemeriksaan serologik
sederhana yang masih banyak dilakukan adalah Widal. Pemeriksaan
serologi lain yang lebih canggih di antaranya adalah ELISA ( Enzym
Linked Immunosorbent Assay).Uji Serologi
Tujuan dilakukannya pemeriksaan widal adalah untuk mengetahui
adanya antibodi spesifik terhadap bakteri Salmonella. Tujuan
Pemeriksaan WidalPrinsip PemeriksaanPemeriksaan ini tergantung pada
kemampuan antibodi pada serum pasien untuk mengaglutinasi tetap
antigen bakteri. Ketika ini terjadi, agregasi menjadi terlihat
jelas dengan mata telanjang.Produk Antigen yang TersediaSalmonella
O grup A (Paratyphi A-O)Salmonella O grup B (Paratyphi
B-O)Salmonella O grup C (Paratyphi C-O)Salmonella O grup D (Typhi
O)Salmonella H grup a (Paratyphi A-H)Salmonella H grup b (Paratyphi
B-H)Salmonella H grup c (Paratyphi C-H)Salmonella H grup d (Typhi
H)
Micropath antigen tersedia dalam volume 5 ml atau pada kemasan
lain.
Tindakan PencegahanMicropath antigen harus disimpan pada suhu
2-8 C. Tidak boleh digunakan setelah kadaluwarsa. Jangan disimpan
di pendingin. Hanya untuk diagnosis secara in vitro. Salmonella A,
B, C, D, (hanya antigen somatik), Salmonella A, B, C, D, (hanya
antigen flagel) diawetkan dengan formalin 0,5%. Alat dan BahanPipet
serologiTabung reaksi kecil ukuran 75 x 12 mmGaram
fisiologisInkubator atau penangas airOmega febrile slide tesNaCl
0,9% Kit pemeriksaan Widal / Micropath antigens (Omega
diagnostics)Sampel diperoleh dari darah pasien yang dibiarkan
menggumpal dan bereaksi. Bekuan darah yang terbentuk disentrifuge
dan serum yang terbentuk dipisahkan.
Catatan :Jangan sampai terjadi hemolisa, kontaminasi pada saat
pemeriksaan. Simpan pada suhu -20C sampai maksimum 4-6
minggu.SampelSiapkan slide yang diberi 5 lingkaranDengan mikropipet
masukkan serum ke dalam masing-masing lingkaran dengan volume
berturut-turut : 80 l, 40 l, 20 l, 10 l, 5 l Tambahkan ke dalam
masing-masing serum 1 tetes antigenHasil pengenceran 1:20, 1:40,
1:80, 1:160, 1:320Campurkan dengan cara digoyang-goyangkan selama 1
menitPerhatikan aglutinasi yang terjadi. Setiap sampel yang
menunjukkan aglutinasi sebaiknya dikonfirmasi dengan Tube
Aglutination TestRapid Slide TestSiapkan 10 tabung reaksi dan
susunlah dalam 1 rak. Beri nomor 1 10Dengan pipet masukkan 1,9 ml
NaCl pada tabung 1Dengan pipet masukkan 1 ml NaCl pada
masing-masing tabung 2-10Masukkan 0,1 ml serum pada tabung 1 dan
campur hingga homogenAmbil 1 ml campuran tabung 1 dan masukkan
tabung 2. Tabung 2 dicampur hingga homogen, dan ambil 1 ml untuk
dimasukkan tabung 3 , dan seterusnya hingga tabung 9Ambil 1 ml
larutan pada tabung 9 dan dibuangTube Aglutination Test7. Tambahkan
1 tetes antigen ke dalam setiap tabung. Dengan demikian didapatkan
pengenceran pada tabung 1 9 berturut-turut : 1/20, 1/40, 1/80,
1/160, 1/320, 1/640, 1/1280, 1/2560, 1/51208.Tabung 10 hanya berisi
NaCl dan antigen, serta berfungsi sebagai kontrol9.Campur larutan
hingga homogen dan inkubasikan sebagai berikut :- Titrasi O : 50o C
selama 4 jam- Titrasi H : 50o C selama 2 jam10.Pada kontrol antigen
harus tidak terdapat aglutinasiAdanya aglutinasi menunjukkan adanya
antibodi. Titer yang lebih dari 1/80 kemungkinan benar.
HasilTiter O yang tinggi (> : 160) atau kenaikan titer
menunjukkan infeksi aktifTiter H yang tinggi (> : 160)
menunjukkan peran divaksinasi/pernah terinfeksiInterpretasi
HasilTERIMA KASIH
