Reprodukční imunologie

  • View
    214

  • Download
    2

Embed Size (px)

Transcript

  • Laboratorn reprodukn imunologie praktick zkuenosti v podmnkch rutinn

    imunologick laboratoe

    Ivana Janatkov,Karin Malkov

    Klinick imunologie a alergologie - laborato

    KBLD VFN a 1.LF UK v Praze

    Hoejho veer 2011

  • Hoejho veer 2011

    postihuje podle WHO 15 a 20 % pr v reproduknm

    vku

    u 40 % takto postiench pr je pina neplodnosti

    na stran mu

    ve 40 % je pina na stran en

    ve 20 % je problm na obou stranch

    Neplodnost neschopnost pot dt

    po roce pravidelnho nechrnnho

    styku

  • Hoejho veer 2011

    neplodnch pr pibv

    piny neplodnosti: gynekologick/andrologick,

    hormonln, infekn, genetick

    imunologick (zejmna orgnov a systmov

    autoimunitn onemocnn, bunn imunopatologie)

    velmi zle na sprvn a vasn diagnostice

    http://sli-csaki.wz.cz/data/plodnost.pdf

  • Klinick imunologie a alergologie - laborato

    KBLD VFN a 1.LF UK v Praze

    vyeten pro Centrum asistovan reprodukce

    Gynekologicko-porodnick kliniky VFN, jin CAR

    (v. mimopraskch)

    vyeten pro Ambulanci reprodukn imunologie

    KBLD VFN, jin ambulance reprodukn a/nebo

    klinick imunologie

    Hoejho veer 2011

  • KIA KBLD VFN a 1.LF UK

    Reprodukn soubor laboratornch vyeten

    1. protiltky proti fosfolipidm

    2. protiltky proti spermim

    3. protiltky proti zona pellucida

    4. protiltky proti ovarim

    5. protiltky proti annexinu V

    6. protiltky proti tkov transglutaminze

    7. antinuklern protiltky

    8. [protiltky proti thyreoperoxidze]

    9. poet cirkulujcch NK (natural killers) bunk

    10. intracelulrn produkce cytokin

    Hoejho veer 2011

  • KIA KBLD VFN a 1.LF UK

    Reprodukn soubor laboratornch vyeten

    protiltky proti fosfolipidm: kardiolipin, beta-2 GP1,

    fosfatidylserin, fostatidylinositol, kyselina fosfatidov

    Hoejho veer 2011

    multivariantn analza souboru 61 nemocnch s APS: vysok prediktivn

    hodnota kombinace

    AB2GP1 + ACL + APS a AB2GP1 + ACL + APA pro cvn trombzu

    jako komplikaci APS

    AB2GP1 + ACL a AB2GP1 + APS pro habituln potrcen

    tj. testovn protiltek proti irmu spektru fosfolipid zvyuje senzitivitu

    laboratornch test k potvrzen APS a uveden kombinace autoprotiltek

    mohou klinika upozornit na vy riziko konkrtn komplikace APS

    Branch W; Obstetric Task Force. Report of the Obstetric APS Task Force: 13th International Congress on

    Antiphospholipid Antibodies, 13th April 2010. Lupus. 2011;20(2):158-64.

  • KIA KBLD VFN a 1.LF UK

    Reprodukn soubor laboratornch vyeten

    fosfatidylserin-dependentn anti-protrombinov

    protiltky anti-PS/PT

    opakovan asn spontnn potraty

    vskyt aPS/PT nesouvis s APLA

    ELISA

    Hoejho veer 2011

    Atsumi T, Koike T. Antiprothrombin antibody: why do we need more assays? Lupus. 2010;19(4):436-9.

    1 1

    13

    1

    8

    6

    aPS/PT

    APLA aANNXV

    Pilotn studie KIA KBLD: 30 pacientek

    22 habituln potrcen (3-11x), 8 primrn sterilita (0 gravidita)

    v souboru potrcejcch vskyt aPS/PT 14/22 (64%)!!, v souboru sterilit 0/8

  • KIA KBLD VFN a 1.LF UK

    Reprodukn soubor laboratornch vyeten

    protiltky proti spermim clov antigeny

    specifick proteiny spermi

    heat shock proteiny (HSP70, HSP70-2)

    disulfid izomerza (ER60), kaspza 3

    podjednotky proteasomu - komponenta C2 a zeta-

    etzec

    metoda stanoven - ELISA

    Hoejho veer 2011

  • KIA KBLD VFN a 1.LF UK

    Reprodukn soubor laboratornch vyeten

    protiltky proti ovarim vyskytuj se a u 2/3 en s diagnzou predasnho ovarilnho

    selhn

    clov antigeny: specifick ovariln proteiny derivovan z ooplasmy

    oocytu, bunk theca granulosa a corpus luteum

    metody stanoven: nepm imunofluorescence (ezy opich ovari),

    ELISA (aktinin-4, heat shock 70 protein 5, cytoplazmatick aktin)

    Hoejho veer 2011

  • KIA KBLD VFN a 1.LF UK

    Reprodukn soubor laboratornch vyeten

    protiltky proti zona pellucida clov antigen: proteiny extracelulrn matrix oocytu, kter maj

    vznamnou lohu pri folikulogenezi a fertilizaci

    nemonost prniku spermie do oocytu jak pri pokusech o fyziologickou

    koncepci, tak i pi technikch IVF bez ICSI

    Metody stanoven: nepm imunofluorescence, ELISA

    Hoejho veer 2011

  • ELISA Metoda stanoven

    Vznam interference s implantac embrya -

    ovlivnn placentace v prbhu invaze

    trofoblastu

    Indikace spontnn potraty zejm. v 1. trimestru

    ANNEXIN V - placentrn antikoagulan faktor vysok exprese na bukch tvoc se placenty

    molekuly fosfolipid

    Annexin V

    syncytiotrofoblast

    Hoejho veer 2011

    KIA KBLD VFN a 1.LF UK

    Reprodukn soubor laboratornch vyeten

    protiltky proti annexinu V

  • KIA KBLD VFN a 1.LF UK

    Reprodukn soubor laboratornch vyeten

    protiltky proti tkov transglutaminze

    Hoejho veer 2011

    celiakie gluten-senzitivn enteropatie

    silent forma bez GI pznak

    jedin a inn terapie bezlepkov dieta

    porucha plodnosti pi celiakii malabsorpce?

    jin mechanizmy?

    V naem souboru 67 % pozitivnch pacientek pi

    terapii dietou othotnlo a donosilo zdrav dt.

  • KIA KBLD VFN a 1.LF UK

    Reprodukn soubor laboratornch vyeten

    antinuklern protiltky

    (jadern antigeny ANA, ENA)

    Hoejho veer 2011

    autoimunitn ladn organizmu

    autoimunitn onemocnn (Sjgrenv syndrom CAVB III.stupn u plodu, SLE riziko progrese nemoci v prbhu gravidity a po

    porodu)

  • KIA KBLD VFN a 1.LF UK

    Reprodukn soubor laboratornch vyeten

    NK buky

    (natural killers, pirozen zabjei)

    Hoejho veer 2011

    NK buky jsou vznamn zastoupeny v dlon

    sliznici, kde v prbhu implantace embrya pln adu

    fyziologickch funkc.

    U en s primrn idiopatickou sterilitou a u

    habitulnho potrcen bylo zjitno zven

    zastoupen NK bunk v perifern krvi

    dysregulace NK aktivity s patologickm vlivem NK

    cytotoxicity na spermie a/nebo buky trofoblastu

  • KIA KBLD VFN a 1.LF UK

    Reprodukn soubor laboratornch vyeten

    Intracelulrn cytokiny

    TNF-alfa, IL-2, IL-4, IFN-gama

    Hoejho veer 2011

    Comparative

    parameters

    Infertile women Healthy non-pregnant

    women p-value

    n = 185 n = 50

    Median IQR Median IQR

    Age (years) 34.2 30.5-36.4 33.5 29.0-37.0 0.1867*

    TNF- (%) 41.7 35.6-50.3 23.6 16.5-38.2

  • Kdy indikovat imunologick vyeten neplodnho

    pru:

    po 2 nespnch embryotransferech u en < 35 let a

    po 1 nespnm embryotransferu u en > 35 let

    2 a vce potrat (bez rozdlu vku)

    Screening autoprotiltek reproduknho souboru by

    dle naich zkuenost ml patit mezi vstupn

    laboratorn vyeten v centrech asistovan

    reprodukce

    zchyt imunopatologie jet ped zahjenm

    technik asistovan reprodukce

    Hoejho veer 2011

  • Z ambulanc VFN (CAR + ambulance reprodukn

    imunologie) bylo odeslno k vyeten celkem 3555

    pacientek.

    Z toho u 872 pacientek byla alespo 1x prokzna

    imunopatologie.

    2009 - 2010

    Hoejho veer 2011

  • Jak je stav tchto pacientek s pozitivnm nlezem/nlezy

    k dnenmu dni?

    53 x APLA +

    APS (Sapporo, Sydney)

    19 porodily

    4 gravidn

    14 potratily

    13 neothot-

    nly

    44 %

    Hoejho veer 2011

    2 chyb

    informace

  • Jak je stav tchto pacientek s pozitivnm nlezem/nlezy

    k dnenmu dni?

    15 x anti-annexin V +

    5 porodily

    1 gravidn

    3 potratily

    6 neothot-

    nly

    40 % Hoejho veer 2011

  • Jak je stav tchto pacientek s pozitivnm nlezem/nlezy

    k dnenmu dni?

    234 x ASA +

    89 porodily

    50 gravidn

    10 potratily

    81 neothot-

    nly

    59 %

    1 chyb

    informace

    Hoejho veer 2011

  • Jak je stav tchto pacientek s pozitivnm nlezem/nlezy

    k dnenmu dni?

    42 x AOVA +

    2 porodily

    9 gravidn

    2 potratily

    27 neothot-

    nly

    26 %

    1 chyb

    informace

    Hoejho veer 2011

  • Jak je stav tchto pacientek s pozitivnm nlezem/nlezy

    k dnenmu dni?

    10 x AZP +

    4 porodily

    0 gravidn

    0 potratily

    0 neothot-

    nly

    40 % Hoejho veer 2011

    6 chyb

    informace

  • Jak je stav tchto pacientek s pozitivnm nlezem/nlezy

    k dnenmu dni (z 2011) ?

    24 x ATTA +

    15 porodily

    1 gravidn

    3 potratily 2 neothot-

    nly

    67 %

    3 chyb

    informace

    Hoejho veer 2011

  • Jak je stav tchto pacientek s pozitivnm nlezem/nlezy

    k dnenmu dni?

    62 porodily

    13 gravidn

    14 potratily

    86 neothot-

    nly

    39 %

    194 pacientek s vysokou i.c.

    produkc embryotoxickho TNF-alfa

    21 chyb

    informace

    Hoejho veer 2011

  • Kolik to vechno stoj...

    Stimulan protokol s rec FSH ( vetn liva) 5 000,-

    Ostatn lky 5 000 30 000,-IVF cyklus bez transferu 11 660,-

    IVF kompletn cyklus s transferem embry 22 500,-

    ICSI vpchnut spermi do max. 10 oocyt 6 000,-

    ICSI vpchnut spermi nad 10 oocyt 8 000,-Poplatek za sperma pi drcovsk inseminaci 550,-

    Pjem darovanch oocyt 8 000,-

    Pjem darovanch embry 12 600,-

    K