Studio della metabolismo ossidativo della Dopamina
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Neuromelanin formation
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LOCALIZZAZIONE ATTIVITA DOPAMINO PEROSSIDASICA IN CERVELLO DI
RATTO E UMANO * * *
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Studio in vitro della formazione del dopaminocromo La
formazione di dopaminocromo catalizzata in maniera simile da
perossidasi purificate (lattoperossidasi, mieloperossidasi,
perossidasi di rafano) e da una frazione di cervello di ratto, in
presenza di perossido didrogeno. Biochim Biophys ActaLa formazione
di un intermedio radicalico, dopamino-o-semichinone, comune nelle
reazioni catalizzate da ciascuna delle perossidasi e dalla frazione
di cervello di ratto. (Galzigna et al. Biochim Biophys Acta
1999)
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Procedures The midbrain fractions were homogenized and
centrifuged. The supernatant, obtained after two successive
centrifugations, was spectrophotometrically assayed for enzymatic
activity. Preparation of protein mixture: Assay of peroxidizing
activity Dopamine peroxidizing activity was in vitro followed
spectrophometrically, as increasing absorbance at 475nm,
corresponding to the peak of maximum absorption of the
dopaminochrome formed from dopamine and hydrogen peroxyde. striato
s.nigra
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Come si determina lattivit enzimatica Attivit enzimatica A 475
rappresenta la variazione di assorbanza misurata a 475 nm; il
coefficiente di estinzione molare del substrato cromoforo = 1175 M
-1 cm -1 La determinazione stata effettuata in un il volume totale
della miscela (omogenato e tampone di lettura) di 10 -3 L (Galzigna
et al., 1999)