Transplant infeksiyonlarında Olası etkenlerErken dönem (1ay) donör kaynaklı greft iliĢkili infeksiyonlar sık VRE, MRSA, MRKNS flukanozol dirençli Candida Aspergillus nadir

Transplant infeksiyonlarında

Olası etkenler ve

Mikrobiyolojik yaklaĢım

(8.10.2010-Kıbrıs)

Doç.Dr.Mustafa ÖZYURT

Gata Haydarpaşa Eğitim Hastanesi

Tıbbi Mikrobiyoloji Servisi

1

Transplantlı Hastalarda Ġnfeksiyon

►En önemli mortalite ve morbidite nedeni

Red sorunundan daha kritik

2

Risk faktörleri*► Transplantasyon öncesi konağa ait faktörler

Altta yatan hastalık ve kronik enfeksiyon

Spesifik immunitede eksiklik

Kolonizasyon

Latent enfeksiyonların varlığı

► Transplantasyona koşulları Transplant edilen doku yada organın tipi

Kontamine allogreft transplantasyonu

Cerrahi travma

Ameliyat süresi

Bilier, üriner veya drenaj kataterlerine bağlı infeksiyon

► Çevresel faktörler Hastane kökenli etkenlerle temas

Toplumdan kazanılmış etkenlerle temas

► İmmunsupresyon

► Allogreft reaksiyonlar

* Ulusoy S.: Organ Nakli ve Ġnfeksiyon , 405-411; 2011

3

Ġnfeksiyon kaynağı

►Endojen

Müköz membran kolonizasyonları

Latent doku enfeksiyonları

►Eksojen

Çevresel temas

Ġnsanlarla temas

Transplante edilen doku ile bulaĢ

Kan ve kan ürünleri ile bulaĢ

4

Endojen kaynaklı etkenler-1(Müköz membran kolonizasyonları)

►Gram (-) bakteriler Enterik bakteriler Pseudomonas Acinetobacter Serratia Bacterioides ve diğer

anaeroblar

►Gram (-) kokobasiller H.influenzae Moraxella spp.

►Gram (+) bakteriler S.aureus, MRSA S.epidemidis, MRKNS Vridans streptococcus Enterococcus spp, VRE S.pneumonia

►Fungal etkenler Candida spp.

5

Endojen kaynaklı etkenler-2

(latent infeksiyon etkenleri)

► Viral etkenler Herpes virus grubu viral ajanlar

(HSV, CMV, VZV, EBV, HHV 6-7 ve HHV-8 ) HBV HCV Adenovirus, Papillomavirus, BK/JK polyomavirus

► T. gondii, T. cruzi, S. stercoralis ve Leishmania spp ► M.tuberculosis► H.capsulatum, C.immitis ve B.dermatitidis ► Pneumocystis jirovecii/carinii

6

Eksojen kaynaklı etkenler

(çevresel bulaĢ)

► Aspergillus

► Coccidioides

► Histoplasma

► Cryptococcus

► Fusarium

► Trichosporon

► Nocardia

► L.monocytogenes

►Hastane kaynaklı Legionella spp,

Acinetobacter spp.

P.aeruginosa

VRE

MRSA

Cl.difficile

Aspergillus spp

Non-albicans Candida

Azol dirençli Candida

7

Eksojen kaynaklı etkenler(Transfüzyonel kan ürünleri, doku ve organ)

►HBV ,HCV , HIV

►CMV

►Batı Nil Virus ,

►Kuduz virus

►Arena viruslar

8

Ġnfeksiyon riski açısından transplantasyon sonrası dönemler

►Solid organ transplantlı(SOT)

Erken dönem (1.ay)

Orta/ara dönem (1-6 ay)

Geç dönem (> 6 ay)

►Hematopoetik kök hücre transplantlı (HKHT)

Erken dönem (1.ay, nötropenik periyod )

Orta/ara dönem (2-3 ay)

Geç dönem (>100 gün)

9

Solid organ transplantlı(SOT)hastalardasıklıkla izole edilen etkenler

► Erken dönem (1ay)donör kaynaklı greft iliĢkili infeksiyonlar

sık VRE, MRSA, MRKNS flukanozol dirençli Candida Aspergillusnadir Batı Nil Virusu, Kuduz virusu ve HIV T.gondii ve T.cruzi Rekurren infeksiyonlar HBV, HCV,HIV Nosokomiyal patojenler Aspergillus Strongyloides

► Geç dönem (>6 ay) Solunum Virusları, Pnömokoklar, Legionella, Mikoplazma Pneumocystis jirovecii/carinii C.neoformans Nocardia L.monocytogenes

► Ara(orta)dönem (1-6ay)

Pneumocystis jirovecii/carinii

T.gondii , Leishmania, T.cruzei,

H.capsulatum, C.immitis, B.dermatididis

HSV,CMV,EBV,VZV

HBV, HCV

BK polyomavirus, HHV-6-7 ve 8

Ġnfluenza, parainfluenza, RSV, Adenovirus

M.tuberculosis , non-tuberküloz mikobakteri

Cryptosporidium, Microsporidium, Rota virus

10

Hemotopoetik kök hücre transplantlı (HKHT) hastalarda sıklıkla izole edilen etkenler

► Erken dönem(1.ay, nötropenik periyod )

Bakteri

KNS, S.aureus, Viridans streptokok C.difficile Legionella spp. Enterobakteriler, P.aeruginosa, S.maltophilia

Fungal Candida, Aspergillus, Fusarium,

Zygomycetes

Viral HSV, RSV, parainfluenza virus, rhinovirus,

influ.A ve B, Human metapneumovirus

► Orta dönem (2-3 ay)Bakteri L.monocytogenes, L.pneumophilia,

Nocardia, R.equiFungal Aspergillus, Candida, Fusarium,

Zygomycetes, P.boydii,Trichosporon Pneumocystis jirovecii/cariniiViral CMV, EBV, HHV-6,7,8 Adenovirus Coxsackie virus,Echovirus, Rotavirus

ve Norovirus RSV, Ġnfluenza ve Parainfluenza virus,

Rhinovirus, Human metapneumovirus Paraziter T.gondii S. stercoralis, C.parvum,

Leishmania,T.cruziMikobakteri M.tuberculosis ve M.avium complex NTM

11

Hemotopoetik kök hücre transplantlı (HKHT) hastalarda sıklıkla izole edilen etkenler

► Geç dönem

(3. ay sonrası, >100 gün)

Kapsüllü bakteriler

► S.pneumoniae,

► H.influenzae,

► N.meningitidis,

Stafilokok’lar

Pseudomonas spp.

Sık Viral etkenler

► VZV,

► EBV

Nadir viral etkenler

► Measles,

► Mumps,

► Rubella,

► Parvovirus B19

► BK/JK virus

► HHV-8

HBV , HCV

12

BağıĢlanmıĢ doku, kan ve kan ürünleri ile geçen major infektif ajanlar

Dummer J.S., Thomas L.D.: Principles and practice of ınfectious diseases. Vol.2, Pages 3809-3819; 2010

Doku Türü Ġnfektif Ajan

Böbrek, Kalp, Karaciğer, Akciğer, Kemik iliği CMV

Kalp, Böbrek T.gondii

Kalp Trypanosoma cruzi

Böbrek, Karaciğer HSV

Böbrek HHV-8

Böbrek, Kalp, Karaciğer HIV-1,HBV,HCV, WNV

Böbrek, Karaciğer, Akciğer LCMV, Arenavirus

Böbrek, Karaciğer, Kornea Rabies

Kan* CMV,EBV,HIV-1, HBV,HCV, HAV, HDV, HTLV-1, WNV

Lökositler CMV,HIV-1

*Nadir vakalarda T.cruzi, Plasmodium, Babesia ve T.pallidium kan transfüzyonu ile aktarılır.

13

MĠKROBĠYOLOJĠK YAKLAġIM

►Transplantasyon merkezlerinin olduğu yerlerde

GeniĢ imkan ve yetkilerle donatılmıĢ,

Optimal Ģartlara sahip

Klinik Mikrobiyoloji Laboratuvarı

14

Transplantasyon merkezleri

► infeksiyon kontrol timi oluĢumu

►Hasta örneklerine ait rutin değerlendirme

►Klinisyenleri bilgilendirme

►Mikrobiyolojik yaklaĢımların standardizasyonu

► Ġnfeksiyonların yönetimi ve rehber hazırlama

15

I.Transplantasyon öncesi tarama

►Allograft alıcılarında Serolojik tarama; CMV, HSV, EBV, VZV, HBV, HCV,

HIV ve T.gondii Parazitolojik inceleme: S.stercoralis Rutin dıĢkı kültürü : Salmonella spp.

►Allograft donör Serolojik tarama; CMV, HBV, HCV, T.gondii, Brucella Dimorfik fungal etkenlerin takibi; kültür/cilt

testleri, serolojisi Mikobakteriyel infeksiyonların takibi; tüberkülin

deri testi (PPD) veya IFN-γ testleri

Kadavradan alınan organlar; Kültür takibi

16

II. ġüpheli infeksiyonlarda laboratuvar tanı

►Spesifik örneklere

►Hastanın kliniğine uygun test iĢlemleri histolojik,

bakteriyolojik,

fungal,

viral,

mikobakteriyolojik,

parazitolojik,

immuno-serolojik (özgül antikor/antijen arama)

moleküler mikrobiyolojik (viral yük)

17

III. Asemptomatik alıcılarda mikrobiyolojik sürveyans

► Transplantasyon sonrası periyotlarda infeksiyon geliĢim riski

► Spesifik bir infeksiyon olasılığı ve Ģiddetinin takibi

► Sürveyans testlerinin klinik ile uyumunu takipte

► Profilaktik tedavi etkinliği ve direnç geliĢiminin araĢtırılması

18

Asemptomatik transplant alıcılarında mikrobiyolojik sürveyans

Hızlı tanı önemlidir

► Sürveyans kültürleri*

Boğaz, idrar, cilt ve rektal sürüntü, kan kültürü

(haftada 2 kez)

Burun ve Balgam kültürleri

(nötropenik hastalarda invazif fungal infeksiyonların erken tanısı )

► E test

Candida infeksiyonlarında azol direnç takibi

*Selektif mukozal dekontaminasyona bağlı olarak transplantlı hastalardarutin sürveyans kültürlerinin önemi kalmamıĢtır.

Larocco M.T., Burgert S.J.: Clinical Microbiology Reviews, Apr. 1997, p. 277–297 Vol. 10, No. 2

19


► Serolojik testler

Serum, BOS, bronĢ sıvısında Ġnvazif Aspergillus (EIA)

►Galakto-mannan antijeni arama

(Serumda duyarlılık %80-90, Özgüllük: %90;

BAL’da duyarlılık %70, özgüllük%90)

Cut-off değeri 0,5-1 ng/ml

►(1,3)Beta-D- glukan antijeni arama;

(duyarlılık %100 özgüllük %80-94)

BOS ve Serumda Dissemine C. neoformans

► polisakkarit kapsül antijeni arama20


► CMV için erken tanıda

transplantasyon sonrası 100 güne kadar haftalık izlem

infeksiyonlarda 1 yıl takip

Kan lökositlerinde(PMNL) pp65 antijeneminin semikantitatif olarak saptanması (BOS ve ASY örneklerinde saptanabilir)

( sınır değer 1-15/50.000 hücre, duyarlılık >% 90 , özgüllük >%95 )

Kan örneği ve idrarda Real-Time PCR CMV DNA arama

(pozitif değer >= 1.000-10.000 copya genom/ml)

NA hibridizasyon ile genomik materyalin saptanması

Shell vial kültürü (monoklonal antikorla 48 saate kadar saptanır)

(duyarlılığı düşük< %50, özgüllük >%95 )

► EBV, HHV-6, BK-JK polyomavirus, parvovirus B19

Tanıda PCR önerilmekte 21


► Diğer serolojik testler

Aglütinasyon,

Hemaglütinasyon inhibisyon,

Kompleman fikzasyon,

ĠFA

► immunolojik testler (cilt testleri dahil)

tanı değeri sınırlıdır (yalancı pozitif ve negatiflik)

22

Transplantlı hastalardan alınan BAL* ve Biyopsi örneklerine uygulan iĢlemler

MĠKROSKOPĠ KÜLTÜR DĠĞER ĠġLEMLER

Gram boyama Rutin aerob bakteri Mycoplasma pneumonia

Kinyon / EZN Fungal Chlamydia pneumonia

Calcofluor white Mycobacteria Kantitatif kültür*

DFA

Legionella spp.

Legionella spp. • CMV DNA- PCR,

• BAL histolojisinde tipik intranuklear inklüzyon yapılar

Methanamine Gümüş

P. jirovecii

Virus

CMV - shell vial kültür

RSV IFA/ ELISA

*BAL 105 CFU/ml, prot-BAL 103 CFU/ml patojen transplantlı hastalarda anlamlı. 23

Şüpheli infeksiyonlarda laboratuvar tanı“bakteriyel etkenler”

Rutinde sıklıkla izole edilenler

MRSA,VRE, Pseudomonas,

Acinetobacter, Enterobactericea,

Kapsüllü bakteriler, Anaerob’lar

► Mikroskopi

► Aerob/anaerob kültür

► 72 saate kadar inkübasyon

► rejeksiyonlardan sıklıkla sorumlu non tifoidal Salmonella’ların takibi

bakteriyemi,

organ abseleri,

peritonit,

pyelonefrit

septik artrit

L. monocytogenes:

► Mikroskopi

► Koyun kanlı agarda sınırlı bir beta hemoliz

► Serolojik olarakaglütinasyon yöntemi ile serotip araĢtırma

24

http://www.google.co.za/imgres?imgurl=http://www.rayal.com/images/products/campy.JPG&imgrefurl=http://www.rayal.com/products/food/microscreen-listeria.html&usg=__u5VHUPZUZcQUJnIXlqUZgTWbeFo=&h=198&w=250&sz=11&hl=tr&start=2&zoom=1&tbnid=nLAwNR-_RAf2PM:&tbnh=88&tbnw=111&prev=/images%3Fq%3DListeria%2Bagglutination%26hl%3Dtr%26sa%3DX%26gbv%3D2%26tbs%3Disch:1&itbs=1


Legionella spp.:

► infeksiyonları <100 gün

► Gram boyama tanıda sınırlı

► Selektif olarak BCYE besiyeri

► 37 C’de 1 hafta inkübasyon

► Kültürden poly/monovalan antiserumlarla tanımlama

► Hasta örneğinden DFA

► IC membran yöntemiyle idrarda antijen arama

► Serolojik taramanın tanı değeri yoktur (ĠFA/EIA antikor arama)

► PCR

25


Nokardia► Transplantasyonu takiben (1- 6 ay

sonra) uzun süren pneumonilerde etken olabileceği düĢünülmelidir.

► Genel üretim besiyerleri► 5-7 günlük (nadiren 2 hafta)

inkübasyon► TebeĢir tozu görünümünde koloni► Gram boyamada dallanma gösteren

gram pozitif filamentöz yapılar► Modifiye Kinyon Boyamada asid-

fast pozitliği

26


Mikobakteriler:

► PPD veya serumda IFN-γ testi

► EZN boyama ve/veya Auramin-Rhodamin boyama ARB arama,

► Katı ve sıvı fazlı mikobakteri vasatlarında kültür takibi,

► Otomatize sistemlerle 7-14 günde etkenin saptanması

► PCR

► Konvansiyonel veya hibridizasyon esaslı ticari sistemlerle direnç saptama

27

Şüpheli infeksiyonlarda laboratuvar tanı“viral etkenler *”

CMV tanısı

Herpes grubunda en sık sorumlu ajandır.

CMV serolojisi riskli alıcılarda;

< 100 güne kadar haftalık serolojik test takibi

CMV DNA

Tedavi ile birlikte haftalık takip

pp65 antijen

Histolojik incelemede inklüzyon yapılar

*Akan ÖA.:Infections in hematopoietic Stem Cell Transplantation,2005 28

SOLUNUM ÖRNEĞĠNĠN HĠSTOLOJĠK ĠNCELEMESĠNDE CMV ĠNTRANUCLEAR ĠNKLÜZYON YAPILARI

29


HSV tanısı

Genellikle kliniktir

►Lezyonlardan alınan örnekler

DFA

PCR, in situ hibridizasyon

Kültür (pratik değil)

►Serolojik tanının değeri yoktur

►Endoskopik biyopsi (özöfagusa yayılımda)

Candidiasis,

CMV enfeksiyonu

GVHD’ ten ayırımda

*Akan ÖA.:Infections in hematopoietic Stem Cell Transplantation,2005

30


VZV tanısı Genellikle kliniktir

►Organ tutulumlu A tipik zoster olgularında Doku veya sıvıdan kültür ĠFAT Ġn situ hibridizasyon Seroloji PCR

EBV tanısı: ►Lymphoproliferative hastalık en önemli komplikasyonudur

Histopatolojik tanı EBV DNA arama

(in-situ hibridizasyon, SB, WB veya immunohistokimya) Serolojik tanı (ĠFAT) ve Antijen arama (DFA) Plazmada Real-Time PCR ile EBV DNA ölçümü

(tedavi takibinde)

*Akan ÖA.:Infections in hematopoietic Stem Cell Transplantation,2005

31

http://www.google.co.za/imgres?imgurl=http://www.labgeminis.com/ver_imagen.php%3Fid_imagen%3D108&imgrefurl=http://www.labgeminis.com/plantilla.php%3Fid_sub_seccion%3D253&usg=__WfN9NHCAq12pEujhatCaZ4BT2zk=&h=351&w=479&sz=14&hl=tr&start=39&zoom=1&tbnid=sdO6khoj3rPO0M:&tbnh=95&tbnw=129&prev=/images%3Fq%3DVZV%2BIFA%26start%3D20%26hl%3Dtr%26sa%3DN%26gbv%3D2%26tbs%3Disch:1&itbs=1


HBV ve HCV

► Serolojik olarak ELĠSA ile viral marker

► Real-Time PCR ile Viral yük

HIV

Yüksek riskli donörlerde

► Serolojik olarak ELĠSA ile viral marker

► PCR

32

http://www.google.co.za/imgres?imgurl=http://www.ivdpretest.com/IVD_tests_kits_pic/Medical_diagnostics_samples/Anti-HCV_ELISA_Kits/HCV_ELISA/Hepatitis_C_ELISA3.jpg&imgrefurl=http://www.ivdpretest.com/HCV-ELISA-Kits-blood-Bank-Screening.html&usg=__nGpK_B2PQJtGXx6jq4kNC289LOI=&h=156&w=200&sz=5&hl=tr&start=2&zoom=1&tbnid=gqWv4VB_VQ4pNM:&tbnh=81&tbnw=104&prev=/images%3Fq%3DHBV%2B,%2BHCV%2BEIA%26hl%3Dtr%26sa%3DG%26gbv%3D2%26tbs%3Disch:1&itbs=1


Solunum Virusları

(RSV,Influenza, Parainfluenza, Rhino, Adeno viruslar)

►Fatal seyirli solunum enfeksiyonlarına neden olabilirler

►Örneklerden (BAL,BronĢial sıvı, Balgam, ve diğer) tanı

viral kültür

Ġmmunfloresan incelemeler,

antijen arama,

ELISA,

PCR

BK/JC virus

Renal transplantlı hastaların idrarlarının sitolojik incelemesinde

► Basofilik intranüklear inklüzyonlar (decoy hücreleri)

► PCR

► Viral antijen arama

( ELISA veya immunfloresan ile) 33

http://www.ncbi.nlm.nih.gov/bookshelf/br.fcgi?book=eurekah&part=A40307&rendertype=figure&id=A40317

http://www.google.co.za/imgres?imgurl=http://www.cvm.ncsu.edu/dphp/phm/images/IFA.jpg&imgrefurl=http://www.cvm.ncsu.edu/dphp/phm/&usg=__tMgjXYYHtcUb_6ul_aySKekAtqM=&h=299&w=450&sz=49&hl=tr&start=10&zoom=1&tbnid=HYCQySZsoacLgM:&tbnh=84&tbnw=127&prev=/images%3Fq%3Dinfluenza%2B%25C4%25B1fa%26hl%3Dtr%26sa%3DN%26gbv%3D2%26tbs%3Disch:1&itbs=1

Şüpheli infeksiyonlarda laboratuvar tanı“Paraziter etkenler”

Trypanosoma cruzi

► Cilt, miyokardiyal biopsi örnekleri,kanda trypomastigotların varlığı

Giemsa

Ġmmunofloresan

► Fibroblast hücre kültüründe amastigotların görülmesi (Giemsa ile)

► Serolojik olarak

ELISA, CF, ĠFAT, IHA ile antikor arama

(özgüllüğü düĢüktür,donör taramalarının faydası tartıĢmalıdır)

34

http://upload.wikimedia.org/wikipedia/commons/0/0b/Trypanosoma_cruzi_crithidia.jpeg


Leishmania spp

Kemik iliği, karaciğer,dalak veya cilt biyopsileri

► histopatolojik olarak amastigotların gösterilmesi

► NNN besiyerine (Novy-Nicolle-McNeal) mikrokültür

► PCR ile Leishmania DNA’sı arama (özgül ve duyarlı)


ELISA, IFA ve Direkt aglütinasyon testleri

(bazı protozoer hastalıklarla çapraz reaksiyon)

35

http://www.gechem.net/php/images/stories/casos/2005-caso03-fig03.jpg

http://www.gechem.net/php/images/stories/casos/2005-caso03-fig02A.jpg


Toxoplasma gondii

► Serolojik testlerle (ELISA, IFA)

Spesifik IgM ve IgG titrelerindeki pozitiflik

Avidite testi ile reaktivasyonun değerlendirilmesi

► BOS, lenf bezi, kemik iliği, vitreus sıvısında

PCR ile T.gondii DNA arama

► Hasta örneklerinde

Wright-Giemsa ile takizoit/kistlerin gösterilmesi

36

http://www.google.co.za/imgres?imgurl=http://images-en.busytrade.com/170123800/Anti-circovirus-Antibody-Elisa-Kit.jpg&imgrefurl=http://www.busytrade.com/products/1738047/Anti-circovirus-Antibody-Elisa-Kit.html&usg=__3FA2bb1mK71f-SEKNyIW03lF-cI=&h=269&w=536&sz=21&hl=tr&start=13&zoom=1&tbnid=28QTSset51bpdM:&tbnh=66&tbnw=132&prev=/images%3Fq%3Dt.gondii%2Bdiagnostic%2Bkit%26hl%3Dtr%26sa%3DG%26gbv%3D2%26tbs%3Disch:1&itbs=1

http://www.google.co.za/imgres?imgurl=http://img.medscape.com/fullsize/migrated/444/863/iim444863.fig2.jpg&imgrefurl=http://www.medscape.com/viewarticle/444863_5&usg=___aAf2dp5DRC8CXf7WMz-WwNudo4=&h=331&w=400&sz=29&hl=tr&start=20&zoom=1&tbnid=mRurOz4wIU8sXM:&tbnh=103&tbnw=124&prev=/images%3Fq%3DT.gondii%2Bdiagnosis%26um%3D1%26hl%3Dtr%26sa%3DG%26tbs%3Disch:1&um=1&itbs=1


Strongyloides stercoralis

► Örneklerin direkt mikroskopik incelemesi Hareketli larvaların görülmesi Embiryonlu yumurtalar (ishalli vakalarda)

► Doku biyopsilerinin histopatololojik incelemeleri Embiryonlu yumurtalar Larvalar

► Serolojik tanıda Cilt testi ĠFAT ve ELISA testlerin birlikte kullanımı

► Eozinofili her zaman olmayabilir

37

http://www.google.co.za/imgres?imgurl=http://img.youtube.com/vi/cOSowPgBtqQ/0.jpg&imgrefurl=http://www.formula1movies.com/strongyloides/&usg=__QNAKh7ZKU12_eY0KaN2bP3SrzNY=&h=360&w=480&sz=18&hl=tr&start=3&zoom=1&tbnid=NsT4JGxMhbUmGM:&tbnh=97&tbnw=129&prev=/images%3Fq%3Dstrongyloides%2Bstercoralis%2Bdiagnosis%26um%3D1%26hl%3Dtr%26sa%3DG%26tbs%3Disch:1&um=1&itbs=1

Şüpheli infeksiyonlarda laboratuvar tanı“Fungal etkenler”

Candida spp.

► Flukanozol direnci önemlidir. ► C.albicans için germ tüp test ► SDA, kromojenik agar besiyeri► Cornmeal agarda morfolojik tanı ► Otomatize/yarı otomatize sistem► MIC testi ile direnç takibi► Serolojik olarak

ELISA ile dolaşan mannan antijen/antikor arama

( tanıda çok duyarlı değildir.)

C.neoformans

► BOS örneklerinden nativ preparasyon

► Dokunun histolojik incelemesi

► Serum/BOS örneklerinde kapsül polisakkarit antijeni gösterilmesi

Lateks aglütinasyon

ELİSA

(duyarlılık ve özgüllük yaklaşık %100)

► Seçici besiyeri Bird seed agar

38

http://jcp.bmj.com/content/54/2/158/F1.large.jpg

http://www.google.co.za/imgres?imgurl=http://www.voigtglobal.com/images/BBL-CHROMagar-plates.JPG&imgrefurl=http://www.voigtglobal.com/BBL_prepared_media.htm&usg=__WiKJzZ9kNneEej2ALhMF7EUIGi4=&h=220&w=220&sz=10&hl=tr&start=10&zoom=1&tbnid=Zj2EgBb6UbCk9M:&tbnh=107&tbnw=107&prev=/images%3Fq%3Dchromagar%2Bcandida%26hl%3Dtr%26sa%3DX%26gbv%3D2%26tbs%3Disch:1&itbs=1


Aspergillus spp

► IA’un tanısında altın standart Mikroskopik etkenin gösterilmesi

Kültürde (SDA’da) üretilmesi

Histolojik inceleme (sıkça tercih edilmez)

► Kan /Solunum örneklerinde EIA Galaktomannan antijen

(1,3)-beta-D-glukan antijen

► PCR, kültürden daha duyarlıdır. (Test standardizasyonu yok)

► Antikor aramanın tanı değeri yok (uygun antikor yanıtının olmayışı)

39

http://www.google.co.za/imgres?imgurl=http://www.cytology-asc.com/cec/respiratory/images/resp83li.jpg&imgrefurl=http://www.cytology-asc.com/cec/respiratory/resp83.html&usg=__MV4yhyWEcfj5JmN88jt098_2nEY=&h=347&w=519&sz=26&hl=tr&start=10&zoom=1&tbnid=FGPkLu6p7VfysM:&tbnh=88&tbnw=131&prev=/images%3Fq%3Daspergillus%26hl%3Dtr%26gbv%3D2%26tbs%3Disch:1&itbs=1

http://www.doctorfungus.org/mycoses/images/aspergillus-flavus.jpg

http://www.google.co.za/imgres?imgurl=http://www2.ac-lyon.fr/enseigne/biotech/galerie/champignons/tableau/aspergillus14.gif&imgrefurl=http://www2.ac-lyon.fr/enseigne/biotech/galerie/champignons/tableau/champignons.html&usg=__JRCi2T7Qpxl4yQu1GS4WF6B_-O0=&h=240&w=320&sz=49&hl=tr&start=8&zoom=1&tbnid=OLBB73LJlYufHM:&tbnh=89&tbnw=118&prev=/images%3Fq%3Daspergillus%26hl%3Dtr%26sa%3DG%26gbv%3D2%26tbs%3Disch:1&itbs=1


Rhizopus,Mucor,Rhisomucor

► Zigomikoz etkenleri

► SDA’da oda ısısında hızlı, yoğun küf üremesi

► Mikroskopta hifal yapılar

septasız, geniĢ-kalın duvarlı açılı dallanma gösterir

H.capsulatum,C.immitis, B.dermatidis

► Endemik mikoz etkenleridir.


spesifik ELISA, IgM ve IgG

ID testi,presipitasyon antikorları

lateks aglütinasyon

kompleman fikzasyon

► 25 ve 37°C’de dimorfik üreme

► doku/eksuda histolojik inceleme

tüberkül makro-mikro konidya

► DFA ile etken arama

40

http://www.google.co.za/imgres?imgurl=http://www.mycology.adelaide.edu.au/images/rhizopus1.gif&imgrefurl=http://www.mycology.adelaide.edu.au/Fungal_Descriptions/Zygomycetes/Rhizopus/&usg=__qq1hEZgCIzHUm7xC116PhN5UyTw=&h=187&w=225&sz=42&hl=tr&start=64&zoom=1&tbnid=T3X0mW3u534wfM:&tbnh=90&tbnw=108&prev=/images%3Fq%3DRhizopus,Mucor,Rhizomucor%26start%3D60%26hl%3Dtr%26sa%3DN%26gbv%3D2%26tbs%3Disch:1&itbs=1

http://labmed.ucsf.edu/education/residency/fung_morph/fungal_site/subpages/rhizopus.7sp.html

http://labmed.ucsf.edu/education/residency/fung_morph/fungal_site/subpages/rhizopus1.1sp.html

http://www.google.co.za/imgres?imgurl=http://upload.wikimedia.org/wikipedia/commons/thumb/6/61/Mucor.mucedo.-.lindsey.jpg/150px-Mucor.mucedo.-.lindsey.jpg&imgrefurl=http://dbpedia.neofonie.de/browse/rdf-type:Species/kingdom:Fungus/class:Zygomycota/&usg=__6GjYK8EYjccp9NNh3fOsk_C_riw=&h=100&w=150&sz=5&hl=tr&start=79&zoom=1&tbnid=MM4044difb7_8M:&tbnh=64&tbnw=96&prev=/images%3Fq%3DRhizopus,Mucor,Rhizomucor%26start%3D60%26hl%3Dtr%26sa%3DN%26gbv%3D2%26tbs%3Disch:1&itbs=1


Pneumocystis carinii (P.jiroveci)

Kültürü yapılamamakta

Histolojik tanı

(BAL, ind.balgam, doku)

Hücre duvarının gösterilmesi(metahamin gümüĢ, toludin mavisi)

Kistik yapının gösterilmesi(Wright-Giemsa )

Ġmmuno-histokimyasal boyama oldukça duyarlı ve özgül

Pneumocystis jiroveci kistleriİntra kistik yapılar. BAL,Giemsa

Pneumocystis jiroveci kist duvarı-siyah boyalı,İntra kistik yapı görülmüyor.Akc.doku,Met.gümüş

41

http://pathmicro.med.sc.edu/parasitology/pneu3.jpg

IV. Transplant alıcısında infeksiyonun mikrobiyolojik yönetimi-1

► Mikrobiyoloji laboratuvarının kapasitesi önemlidir

► Kadavradan alınan organların naklinde; süre ve sakalama koĢulları dikkat edilmelidir

► Nakil öncesi doku/organ/kan ürünlerininmikrobiyolojik incelemeleri mutlaka yapılmalıdır

► Tanıda altın standart doku histolojisidir.

► Serolojik testler, maruziyeti ve latent hastalıklara ait relaps riski araĢtırmada yardımcıdır

42

IV. Transplant alıcısında infeksiyonun mikrobiyolojik yönetimi-2

► immunsupressif tedavi altında antikor yanıtının izlenmesinin tanısal değeri yoktur.

► Bu periyotta organizmaya ait protein ürünleri veya nükleik asitlerin doğrudan saptandığı; ELISA, DFA veya PCR gibi kantitatif testler tercih

edilir

► Hastane kaynaklı dirençli patojenlere karĢı mikrobiyolojik izlem yapılmalıdır

► Drene edilmemiĢ sıvı kolleksiyonların tedavisinde erken ve agresiv cerrahi debridmanı esastır.

43

Sonuç

Transplantasyon tıbbına girerken ve uygularken;

Mikrobiyoloji Laboratuvarları imkan ve kabiliyetleri

Sıkı bir klinik-laboratuvar iĢbirliği oldukça önemlidir

Laboratuvar imkanları geliĢtikçe ;

► Fırsatçı infeksiyonların önlenmesi

► Mortalite, morbidite ve graft reddinde azalma

► Transplantasyon baĢarısında artıĢ

44

15.12.2010 45TEŞEKKÜR EDERİM45

Documents

Transplant infeksiyonlarında Olası etkenlerErken dönem (1ay) donör kaynaklı greft iliĢkili infeksiyonlar sık VRE, MRSA, MRKNS flukanozol dirençli Candida Aspergillus nadir