2 6 3

Êàçàíñêèé ìåäèöèíñêèé æóðíàë, 2004 ã., òîì 85, ¹ 4.

ÓÄÊ 616. 988. 23 : 575. 113

ÍÅÑÒÀÁÈËÜÍÎÑÒÜ ÃÅÍÎÌÀ Ó ÁÎËÜÍÛÕ ÄÅÒÑÊÈÌÖÅÐÅÁÐÀËÜÍÛÌ ÏÀÐÀËÈ×ÎÌ

Ä.Ä. Ãàéíåòäèíîâà, Â.Â. Ñåìåíîâ, Ì.Ô. Èñìàãèëîâ, È.À. Ïàõàëèíà, Å.Â. Êîëî÷êîâà

Êàôåäðà íåâðîëîãèè ñ êóðñîì ìåäèöèíñêîé ãåíåòèêè (çàâ. – ïðîô. Ì.Ô. Èñìàãèëîâ),êàôåäðà ìåäèöèíñêîé áèîëîãèè è ãåíåòèêè (çàâ. – ïðîô. Â.Â. Ñåìåíîâ) Êàçàíñêîãî

ãîñóäàðñòâåííîãî ìåäèöèíñêîãî óíèâåðñèòåòà

Ñîäåðæàíèå ïîíÿòèÿ äåòñêîãî öåðåá-ðàëüíîãî ïàðàëè÷à (ÄÖÏ) îáúåäèíÿåòêðàéíå ãåòåðîãåííóþ ãðóïïó çàáîëåâàíèéíåïðîãðåäèåíòíîãî õàðàêòåðà, èìåþùèõñîâåðøåííî ðàçëè÷íûå ýòèîëîãèþ è ïà-òîãåíåç è ñõîäíûõ çà÷àñòóþ ëèøü ïî êëè-íè÷åñêèì ôåíîìåíàì äâèãàòåëüíûõ íà-ðóøåíèé öåíòðàëüíîãî ïðîèñõîæäåíèÿ,ñîïðîâîæäàþùèõñÿ ðå÷åâûìè ðàññòðîéñò-âàìè, ýïèëåïòè÷åñêèìè ïðèñòóïàìè, èí-òåëëåêòóàëüíîé íåäîñòàòî÷íîñòüþ [1].Áîëüøèíñòâî èññëåäîâàòåëåé ñ÷èòàþò ÄÖÏäèçîíòîãåíåòè÷åñêèì çàáîëåâàíèåì, ðàç-âèâàþùèìñÿ âñëåäñòâèå ðàçëè÷íûõ íå-áëàãîïðèÿòíûõ ôàêòîðîâ â àíòåíàòàëü-íîì, ïåðèíàòàëüíîì è èíòðàíàòàëüíîìïåðèîäàõ (ñîìàòè÷åñêèå è èíôåêöèîí-íûå çàáîëåâàíèÿ, ïðîôåññèîíàëüíûåâðåäíîñòè ìàòåðè âî âðåìÿ áåðåìåííîñ-òè, àñôèêñèÿ, íàðóøåíèÿ ìîçãîâîãî êðî-âîîáðàùåíèÿ ðàçëè÷íîãî ãåíåçà è äðó-ãèå ïàòîëîãè÷åñêèå ñîñòîÿíèÿ óíîâîðîæäåííîãî) [1, 9].

Äî íàñòîÿùåãî âðåìåíè îñòàåòñÿ íå-ÿñíûì, ïî÷åìó â îäíèõ ñëó÷àÿõ íàëè÷èåöåëîãî êîìïëåêñà âðåäíûõ ôàêòîðîâ íåïðèâîäèò ê êàêèì-ëèáî íàðóøåíèÿìäåÿòåëüíîñòè ìîçãà, à â äðóãèõ äàæå ëåã-êàÿ àñôèêñèÿ ìîæåò ïîâëå÷ü çà ñîáîéðàçâèòèå ãðóáîé öåðåáðàëüíîé ïàòîëîãèè.Êàê ïðàâèëî, íåîáû÷íûå îòâåòíûå ðå-àêöèè ïðîÿâëÿþòñÿ ó èíäèâèäóóìîâ,êîòîðûå ïî ñâîåìó ãåíåòè÷åñêîìó ñòàòó-ñó çíà÷èòåëüíî îòëè÷àþòñÿ îò ìîäû ðàñ-ïðåäåëåíèÿ â ïîïóëÿöèè [10]. Èñõîäÿ èçýòîãî, îäíèì èç ìîìåíòîâ, ïðîâîöèðó-þùèõ âîçíèêíîâåíèå çàáîëåâàíèÿ, ìî-æåò ñòàòü ïîÿâëåíèå ó çàðîäûøà èëèïëîäà íåñòàáèëüíîñòè ãåíîìà (ÍÃ). Ðå-ãèñòðàöèÿ ýòîãî ôåíîìåíà ïîñëå ðîæäå-íèÿ ðåáåíêà è ó äåòåé ðàçíûõ âîçðàñò-íûõ ãðóïï ìîæåò ñëóæèòü êîñâåííûìäîêàçàòåëüñòâîì ñòîéêîñòè ýòîé ïàòîëî-ãèè ïðè ÄÖÏ è, ñëåäîâàòåëüíî, ðàññìàò-ðèâàòüñÿ êàê ïîñòîÿííî äåéñòâóþùèéôàêòîð, èíòåãðèðîâàííûé â îáùóþ ñè-ñòåìó ïàòîãåíåçà çàáîëåâàíèÿ. Íå èñêëþ-÷åí è îáðàòíûé ìåõàíèçì, êîãäà â óñëî-âèÿõ ðàçâèâàþùåéñÿ ïàòîëîãèè îïðåäå-ëåííûå ïàòîãåíåòè÷åñêèå çâåíüÿ ìîãóòñòàòü ïðè÷èíîé ïîâðåæäåíèÿ ãåíåòè÷å-ñêîãî àïïàðàòà.  ëþáîì ñëó÷àå óñòàíîâ-

ëåíèå ôåíîìåíà Íà ó áîëüíûõ ÄÖÏ ìî-æåò âíåñòè ñóùåñòâåííûé âêëàä â ïðåä-ñòàâëåíèå îá ýòèîëîãèè è ïàòîãåíåçå ýòî-ãî çàáîëåâàíèÿ, íàìåòèòü áîëåå ðàäèêàëü-íûå ïóòè âîññòàíîâèòåëüíîãî ëå÷åíèÿ.

 ñïåöèàëüíîé ëèòåðàòóðå øèðîêîäèñêóòèðóåòñÿ âîïðîñ îá ó÷àñòèè ðàçëè÷-íûõ ãåíåòè÷åñêèõ ìåõàíèçìîâ â ýòèîëî-ãèè è ïàòîãåíåçå ÄÖÏ [14]. Îäíàêî ìûíå îáíàðóæèëè ïóáëèêàöèé, ïîñâÿùåí-íûõ àíàëèçó óðîâíÿ õðîìîñîìíûõ àáåð-ðàöèé â ëèìôîöèòàõ è ìèêðîÿäåð â ýðèò-ðîöèòàõ (ÝÌ) ïåðèôåðè÷åñêîé êðîâè óáîëüíûõ ÄÖÏ.

Öåëü èññëåäîâàíèÿ: îöåíêà ìåòîäàìèöèòîãåíåòèêè ñîñòîÿíèÿ ãåíîìà ó áîëü-íûõ ÄÖÏ.

Îáñëåäîâàíî 98 äåòåé è ïîäðîñòêîâ(59 ìàëü÷èêîâ è 39 äåâî÷åê) ñ ðàçëè÷-íûìè ôîðìàìè ÄÖÏ è 40 çäîðîâûõøêîëüíèêîâ (10 ìàëü÷èêîâ è 30 äåâî-÷åê). Äèàãíîç ÄÖÏ óñòàíàâëèâàëñÿ íàîñíîâàíèè êëèíèêî-àíàìíåñòè÷åñêèõäàííûõ è èíñòðóìåíòàëüíûõ ìåòîäîâèññëåäîâàíèÿ. Âñå áîëüíûå áûëè ðàçäå-ëåíû íà 6 ãðóïï ñîãëàñíî ïðèíÿòîé âíàøåé ñòðàíå êëàññèôèêàöèè [1]. Ó 23 (23,5%)áîëüíûõ áûëà ñïàñòè÷åñêàÿ äèïëåãèÿ(ÑÄ), ó 23 (23,5%) – äâîéíàÿ ãåìèïëå-ãèÿ (ÄÃ), ó 17 (17,7%) – ãèïåðêèíåòè-÷åñêàÿ ôîðìà (ÃÊ), ó 15 (15,3 %) – ëåâîñòî-ðîííÿÿ ãåìèïàðåòè÷åñêàÿ ôîðìà (ËÃ), ó12 (12,2 %) – ïðàâîñòîðîííÿÿ ãåìèïà-ðåòè÷åñêàÿ (ÏÃ), ó 8 ( 8,2 %) – àòîíè-÷åñêè-àñòàòè÷åñêàÿ ôîðìà (ÀÀ).  òðeõïåðâûõ ãðóïïàõ è â ãðóïïå ñ Ïà ïðå-îáëàäàëè ìàëü÷èêè (ïðèìåðíî 60%), âãðóïïå Ëà – äåâî÷êè, à â ãðóïïå ÀÀ ÷èñ-ëî ìàëü÷èêîâ è äåâî÷åê áûëî îäèíàêî-âûì.

Äëÿ ðåãèñòðàöèè ìèêðîÿäåð [15] ïðî-ñìàòðèâàëè ìàçêè ïåðèôåðè÷åñêîé êðî-âè áîëüíûõ ïðè ïîñòóïëåíèè èõ â ñòà-öèîíàð äî ëå÷åíèÿ.  êîíòðîëüíîé ãðóï-ïå (30 äåòåé) èñïîëüçîâàëàñü êðîâü, âçÿ-òàÿ ïðè ïëàíîâûõ äèñïàíñåðíûõ îáñëå-äîâàíèÿõ. Ñâåæèå âûñóøåííûå ìàçêèôèêñèðîâàëè 90–70% ýòèëîâûì ñïèðòîì3 ìèíóòû. Ñóõèå ïðåïàðàòû îêðàøèâàëèâ ðàñòâîðå àçóð-ýîçèíîâîãî êðàñèòåëÿ Ðî-ìàíîâñêîãî–Ãèìçû â ñîîòíîøåíèè 1:5 íàäèñòèëëèðîâàííîé âîäå ñ ðH 6,8 â òå÷å-

2 6 4

Êàçàíñêèé ìåäèöèíñêèé æóðíàë, 2004 ã., òîì 85, ¹ 4.

íèå 20 ìèíóò è õîðîøî ïðîìûâàëè.Ïðîñìàòðèâàëè 1-2 ìàçêà, ïîëó÷åííûõ îòêàæäîãî îáñëåäîâàííîãî.  êàæäîì ìàçêåïîäñ÷èòûâàëè íå ìåíåå 20 òûñÿ÷ ýðèòðî-öèòîâ, ÷òî ïîçâîëÿëî ïðîâîäèòü èññëå-äîâàíèÿ â ãðóïïàõ ñ ìàëîé âûáîðêîé.

Àáåððàöèè õðîìîñîì (ÀÕ) áûëè èçó-÷åíû ó 49 áîëüíûõ, ðàñïðåäåëåííûõ âñîîòâåòñòâèè ñ ôîðìîé çàáîëåâàíèÿ ïî 5ãðóïïàì.  êàæäîé ãðóïïå áûëî â îñíîâ-íîì ïî 10 ÷åëîâåê. Èç-çà ìàëî÷èñëåííî-ñòè èç îáñëåäîâàíèÿ áûëè èñêëþ÷åíûáîëüíûå ñ ÀÀ.  ãðóïïå äåòåé ñ Äà áûëîîáñëåäîâàíî 9 ÷åëîâåê, òàê êàê ïîòåõíè÷åñêèì ïðè÷èíàì (ãåìîëèç êðîâè)óðîâåíü ÀÕ ó îäíîãî èç íèõ îïðåäåëèòüíå óäàëîñü. Êóëüòèâèðîâàíèå êðîâè îñó-ùåñòâëÿëè ñîãëàñíî ìåòîäó Í.Ï. Áî÷êî-âà è ñîàâò. [2]. Êóëüòóðó ôèêñèðîâàëè íà48 ÷àñîâ. Çà 3 ÷àñà äî ôèêñàöèè äîáàâëÿ-ëè êîëõèöèí â êîíå÷íîé êîíöåíòðàöèè0,5 ìêã/ìë. Íà êàæäîãî îáñëåäîâàííîãîãîòîâèëè 2 ìàçêà, â êàæäîì ìàçêå èçó÷à-ëè ïî 150 ìåòàôàç, ïîëó÷åííûå äàííûåñóììèðîâàëè. Èñïîëüçîâàííûå ðåàê-òèâû(ôèòîãåìàããëþòèíèí, êîëõèöèí è êðà-ñèòåëè) ïðîèçâîäèëèñü ôèðìîé “Sigma”.Ó÷èòûâàëèñü âñå õðîìîñîìíûå è õðîìà-òèäíûå àáåððàöèè [3].

Ïðè îòáîðå äåòåé â ãðóïïû, â êîòî-ðûõ ïðîèçâîäèëñÿ ó÷åò ÀÕ, âîçíèê âîïðîñî âåëè÷èíå âûáîðêè. Ñ îäíîé ñòîðîíû,÷åì ìåíüøå äåòåé â ãðóïïå, òåì ìåíü-øåå èõ ÷èñëî áóäåò ïîäâåðãàòüñÿ ðàçëè÷-íûì èññëåäîâàòåëüñêèì ìàíèïóëÿöèÿì(õîòÿ ïîñëåäíèå è ñîâìåùåíû ñ ïëàíî-âûìè ëàáîðàòîðíûìè àíàëèçàìè), ÷òî ñýòè÷åñêîé òî÷êè çðåíèÿ ÿâëÿåòñÿ áëàãî-ïðèÿòíûì ìîìåíòîì. Ñ äðóãîé ñòîðîíû,ìàëàÿ ðåïðåçåíòàòèâíàÿ âûáîðêàïîâûøàåò âåðîÿòíîñòü îøèáêè 1 è 2-ãîðîäà (âåðîÿòíîñòü ëîæíîïîëîæèòåëüíî-ãî èëè ëîæíîîòðèöàòåëüíîãî çàêëþ÷å-íèÿ) [3]. Ñîãëàñíî äàííûì ëèòåðàòóðû,ïðè öèòîãåíåòè÷åñêîì àíàëèçå, ïîäîáíîçàïëàíèðîâàíîìó íàìè, äîñòàòî÷íîïîëüçîâàòüñÿ âûáîðêàìè ïðè âåëè÷èíåîøèáîê, ðàâíîé 0,05 è àíàëèçèðîâàòü îòêàæäîãî èíäèâèäóóìà 200—700 êëåòîê.Ýòè ñâåäåíèÿ, à òàêæå ðåêîìåíäàöèè Í.Ï.Áî÷êîâà è ñîàâò. [3] ïîçâîëèëè îñòàíî-âèòüñÿ íà âåëè÷èíå âûáîðêè äëÿ êàæäîéôîðìû ÄÖÏ, ðàâíîé 10, è íà 300 ïðî-ñìàòðèâàåìûõ êëåòêàõ îò êàæäîãîîáñëåäîâàííîãî.

Ñòàòèñòè÷åñêèé àíàëèç ïîëó÷åííûõäàííûõ ïðîâîäèëñÿ ñ ïîìîùüþ ïàêåòàïðîãðàìì “ STATISTIKA” (Stat. Soft. I nc.1993, USA). Âàðèàöèîííûé àíàëèç èñ-ïîëüçîâàëè òîëüêî ïðè îáðàáîòêå ðåçóëü-òàòîâ, ïîëó÷åííûõ ìåòîäîì ðåãèñòðàöèèâ êðîâè ÝÌ. Ïðè ðàñ÷åòàõ èñïîëüçîâàëèôîðìóëó:

Xmax — Xmin K

ãäå i – âåëè÷èíà êëàññîâîãî èíòåðâàëà,Õmàõ è Xmin – ìàêñèìàëüíûå è ìèíèìàëü-íûå âàðèàíòû ñîâîêóïíîñòè, Ê – ÷èñëîêëàññîâ, êîòîðîå îïðåäåëÿëè ïî ôîðìó-ëå Ñòåðäæåñà: K=l+lgn. [6].

Óðîâåíü ýðèòðîöèòîâ ñ ìèêðîÿäðàìè.Ïðè àíàëèçå ðåçóëüòàòîâ èññëåäîâàíèÿïðåæäå âñåãî ñëåäóåò îòìåòèòü ôàêò áî-ëåå ñóùåñòâåííîãî ïîâûøåíèÿ óðîâíÿÝÌ â êðîâè áîëüíûõ ÄÖÏ, ÷åì ó çäîðî-âûõ äåòåé. Ýòî õîðîøî âèäíî ïî äàííûìòàáë. 1: óðîâåíü ÝÌ ó áîëüíûõ äåòåé âîâñåõ ñëó÷àÿõ äîñòîâåðíî ïðåâûøàåò êîíò-ðîëüíûå çíà÷åíèÿ (ð<0,001). Îöåíêà êî-ëè÷åñòâà ÝÌ â ñîîòâåòñòâèè ñ ôîðìîéçàáîëåâàíèÿ, âîçðàñòîì è ïîëîì ïðèâå-ëà ê íåîäíîçíà÷íûì âûâîäàì. Ó áîëüíûõñ ðàçëè÷íîé ôîðìîé çàáîëåâàíèÿ ñðåä-íèé óðîâåíü ÝÌ áûë ïðèìåðíî îäèíà-êîâ – âî âñåõ ñëó÷àÿõ ð>0,05 (òàáë.1). Ýòîòíåîæèäàííûé ôàêò ìû îáúÿñíèì ïîçæå,â ðàçäåëå, ïîñâÿùåííîì âëèÿíèþ âèäó-àëüíûõ ðåàêöèé áîëüíûõ ÄÖÏ íà ôàê-òîðû, ïîâðåæäàþùèå èõ ãåíîì.

Áîëåå ñëîæíîé áûëà çàâèñèìîñòüóðîâíÿ ÝÌ îò ïîëà ðåáåíêà. Åñëè ñðàâ-íåíèå ïîêàçàòåëåé ÝÌ ìåæäó ãðóïïàìèìàëü÷èêîâ è äåâî÷åê ñ îäèíàêîâûìèôîðìàìè çàáîëåâàíèÿ ïðàêòè÷åñêè íåâûÿâèëî ñóùåñòâåííûõ îòêëîíåíèé (âîâñåõ ñëó÷àÿõ ð>0,05), òî çàâèñèìîñòü âå-ëè÷èí ÝÌ è ôîðì ÄÖÏ âíóòðè ãðóïïîêàçàëàñü íåîäíîçíà÷íîé. Ó ìàëü÷èêîâóðîâåíü ÝÌ íå çàâèñåë îò ôîðìû çàáî-ëåâàíèÿ, ó äåâî÷åê æå ñ ãèïåðêèíåòè-÷åñêîé ôîðìîé çàáîëåâàíèÿ îí áûë äîñ-òîâåðíî âûøå, ÷åì ïðè ñïàñòè÷åñêîéäèïëåãèè (ð<0,05) è ãåìèïàðåòè÷åñêèõôîðìàõ áîëåçíè (ð<0,05). Ìû çà-òðóäíÿåìñÿ äàòü îöåíêó äàííîìó ÿâëå-íèþ, îäíàêî íå èñêëþ÷åíî, ÷òî ýòè ðàç-ëè÷èÿ ìîãóò áûòü ñâÿçàíû ñ ìàëîéâûáîðêîé â èññëåäóåìûõ ãðóïïàõ.

 çàêëþ÷åíèå íåîáõîäèìî îòìåòèòüçíà÷èòåëüíóþ âàðèàáèëüíîñòü ÷èñëà ÝÌó îáñëåäîâàííûõ áîëüíûõ. Ýòîò ôàêò íå-îäíîêðàòíî ïîä÷åðêèâàëè è äðóãèå èñ-ñëåäîâàòåëè [5]. Äëÿ èëëþñòðàöèè äàí-íîãî ôåíîìåíà ìû ïîñòðîèëè âàðèà-öèîííûå êðèâûå ðàñïðåäåëåíèÿ ÷èñëàîáñëåäîâàííûõ äåòåé ïî êðàòíîñòè ïðå-âûøåíèÿ ó íèõ óðîâíÿ ÝÌ ïî ñðàâíå-íèþ ñ êîíòðîëåì (ðèñ. 1) Âûÿâëåíî íå-ñêîëüêî çàêîíîìåðíîñòåé: âî-ïåðâûõ, óáîëüøèíñòâà äåòåé êðàòíîñòü ïðåâûøå-

i = ,

2 6 5

Êàçàíñêèé ìåäèöèíñêèé æóðíàë, 2004 ã., òîì 85, ¹ 4.

íèÿ óðîâíåé ÝÌ ïî ñðàâíåíèþ ñ êîí-òðîëåì óêëàäûâàëàñü â äèàïàçîíå 2,1–2,9.Âî-âòîðûõ, íè ïðè îäíîé ôîðìå çàáî-ëåâàíèÿ íå âûÿâëåí ïèê ïðåâûøåíèÿêðàòíîñòè, âûõîäÿùèé çà ïðåäåëû ýòîãîäèàïàçîíà. Êðîìå òîãî, äîñòàòî÷íî áîëü-øîé ðàçìàõ âàðüèðîâàíèÿ óðîâíÿ ÝÌ óáîëüíûõ ÄÖÏ (Õmàõ ó íåêîòîðûõ áîëü-íûõ ïî÷òè â 4 ðàçà ïðåâûøàë êîíòðîëü)ÿâëÿåòñÿ ñâèäåòåëüñòâîì çíà÷èòåëüíîãîâëèÿíèÿ èíäèâèäóàëüíîé êîìïîíåíòû(íàïðèìåð, íàñëåäñòâåííîñòè) íàôîðìèðîâàíèå êëèíèêî-ïàòîãåíåòè÷åñ-êîãî ñîñòîÿíèÿ áîëüíûõ ÄÖÏ. È, íàêî-íåö, ïðè áîëüøîì ðàçìàõå èíäèâèäóàëü-íûõ ïîêàçàòåëåé äîñòîâåðíóþ ðàçíèöóìåæäó ðàçíûìè ôîðìàìè çàáîëåâàíèÿ(ïî ñðåäíèì çíà÷åíèÿì óðîâíåé ÝÌ)ìîæíî âûÿâèòü òîëüêî îïåðèðóÿ ñ áîëü-øîé âûáîðêîé áîëüíûõ (ïî êðàéíåéìåðå, áîëåå 30 èíäèâèäóóìîâ). Ñ ýòèõïîçèöèé ñòàíîâÿòñÿ ïîíÿòíûìè ïðèâå-äåííûå âûøå äàííûå îá îòñóòñòâèè âíàøèõ èññëåäîâàíèÿõ äîñòîâåðíûõ ðàç-ëè÷èé â óðîâíÿõ ÝÌ ïðè ðàçíûõ ôîðìàõçàáîëåâàíèÿ (òàáë. 1).

Ñðåäíÿÿ âåëè÷èíà êðàòíîñòè ïðåâû-øåíèÿ óðîâíÿ ÝÌ íàä êîíòðîëåì ó âñåõîáñëåäîâàííûõ äåòåé íåçàâèñèìî îò ôîð-ìû çàáîëåâàíèÿ ñîñòàâëÿëà ïðèìåðíî 2,5.Ó áîëüíûõ ñ ðàçíûìè ôîðìàìè çàáîëå-âàíèÿ îíà íåçíà÷èòåëüíî îòëè÷àëàñü îòýòîé âåëè÷èíû è ïðè ÑÄ, Äà è ÃÊ ñî-ñòàâëÿëà 2,7, ïðè ÀÀ – 2,3, Ïà – 2,2,Ëà – 2,1. Òàêèì îáðàçîì, íàèáîëåå òÿ-æåëûå ïîðàæåíèÿ ãåíîìà íàáëþäàëèñüïðè ÑÄ, Äà è ÃÊ. Çàêîíîìåðíî âîçíè-êàåò âîïðîñ î ñîñòîÿíèè áîëüíûõ, ó êî-òîðûõ óðîâåíü ïðåâûøåíèÿ ÷èñëà ÝÌ íàäêîíòðîëåì áûë ñóùåñòâåííî âûøå äèà-ïàçîíà êîëåáàíèé, õàðàêòåðíîãî äëÿáîëüíûõ ÄÖÏ (ò.å. áîëåå ÷åì â 2,9 ðàçà).Òàêèõ áîëüíûõ îêàçàëîñü 13 ÷åëîâåê, è óâñåõ îòìå÷àëîñü òÿæåëîå òå÷åíèå çàáîëå-âàíèÿ: ó 2 ãðóáûå äâèãàòåëüíûå íàðóøå-íèÿ ñîïðîâîæäàëèñü ðåçèñòåíòíûì ê àí-òèêîíâóëüñàíòíîé òåðàïèè ýïèëåï-òè÷åñêèì ñèíäðîìîì, 12 – íå ìîãëè ñåáÿîáñëóæèòü.

Óðîâåíü àáåððàöèé õðîìîñîì. Â ïðåä-âàðèòåëüíûõ èññëåäîâàíèÿõ áûëî âûÿñ-íåíî, ÷òî óðîâåíü ÀÕ ó çäîðîâûõ äåòåé

Ðèñ. 1. Âàðèàöèîííàÿ êðèâàÿ ðàñïðåäåëåíèÿ êîëè÷åñòâà ýðèòðîöèòîâ ñ ìèêðîÿäðàìèó áîëüíûõ ÄÖÏ.

Âñåãîîáñëåäîâàíî

161511674

10

ó äåâî÷åêó ìàëü÷èêîâ

23231715128

40

Òàáëèöà 1

×èñëî ýðèòðîöèòîâ ñ ìèêðîÿäðàìè ó áîëüíûõ ÄÖÏ â çàâèñèìîñòèîò ôîðìû çàáîëåâàíèÿ è ïîëà äåòåé

nâ ãðóïïå( Ì ± m )

0,212±0,009*0,210±0,008*0,201±0,014*0,187±0,011*0,188±0,007*0,216±0,016*0,088±0,014*

Ñ ÄÄÃÃ ÊËÃÏ ÃÀÀ

Êîíòðîëü

( M ± m ) ( M ± m )

Ôîðìû ÄÖÏ

0,201±0,008**0,219±0,017*0,244±0,015*0,198±0,009*0,201±0,006**0,204±0,012**0,075±0,006*

0,209±0,006*0,213±0,007*0,215±0,011*0,193±0,007*0,194±0,005*0,210±0,009*0,087±0,008*

n

×èñëî ýðèòðîöèòîâ ñ ìèêðîÿäðàìè, â %

786954

30

Ðàçëè÷èÿ ñ êîíòðîëåì äîñòîâåðíû (ð<0,001). * ð>0,05 — ðàçëè÷èÿ ìåæäó ìàëü÷èêàìè è äåâî÷êàìèñ îäèíàêîâûìè ôîðìàìè çàáîëåâàíèÿ, ** ð>0,05 — ïî ñðàâíåíèþ ñ ÃÊ.

2 6 6

Êàçàíñêèé ìåäèöèíñêèé æóðíàë, 2004 ã., òîì 85, ¹ 4.

êîëåáëåòñÿ â ïðåäåëàõ îò 2,00±0,81 äî2,67±0,93 (êëåòêè ñ äâóìÿ è áîëåå ñòðóê-òóðíûìè ïåðåñòðîéêàìè íå âñòðå÷àëèñü).Ýòè öèôðû ñîãëàñóþòñÿ ñ äàííûìè äðó-ãèõ èññëåäîâàòåëåé è ïîäòâåðæäàþò ôàêòïîâûøåíèÿ â êîíöå ÕIX è íà÷àëå XXñòîëåòèÿ óðîâíÿ ñïîíòàííûõ ïåðåñòðîåêâ ïîïóëÿöèè ÷åëîâåêà.

Îöåíêà óðîâíÿ ÀÕ ó äåòåé â ðàçëè÷-íûõ ãðóïïàõ ÄÖÏ ïîêàçàëà, ÷òî ó âñåõîáñëåäîâàííûõ ðåãèñòðèðóåòñÿ ïîâûøåí-íîå (ïî ñðàâíåíèþ ñ êîíòðîëåì) êîëè-÷åñòâî ïåðåñòðîåê õðîìîñîì â ëèìôîöè-òàõ êðîâè. Îäíàêî ïðè ñòàòèñòè÷åñêîéîáðàáîòêå ðåçóëüòàòîâ èññëåäîâàíèÿ âû-ÿâëåíî, ÷òî òàêîå ïðåâûøåíèå íàä êîíò-ðîëåì áûëî äîñòîâåðíûì íå ó âñåõ îá-ñëåäîâàííûõ äåòåé, à òîëüêî ó 60 – 78%(òàáë. 2).

Ñðàâíèòåëüíûé àíàëèç ÷èñëà ïåðå-ñòðîåê õðîìîñîì ó äåòåé ñ ðàçëè÷íûìèôîðìàìè çàáîëåâàíèÿ âûÿâèë íàèáîëååâûñîêèé óðîâåíü ïîâðåæäåíèé õðîìîñîìïðè ÄÃ. Ó äåòåé ýòîé ãðóïïû óðîâåíü ÀÕäîñòèãàë â ñðåäíåì 8,24%, ÷òî áûëî äîñ-òîâåðíî âûøå àíàëîãè÷íûõ ïîêàçàòåëåéâ äðóãèõ ãðóïïàõ è áîëåå ÷åì â 3 ðàçàâûøå ñïîíòàííîãî óðîâíÿ. Èçâåñòíî, ÷òîÄà – ñàìàÿ òÿæåëàÿ ôîðìà ÄÖÏ, ïðèêîòîðîé äâèãàòåëüíûå íàðóøåíèÿ, ïñè-õè÷åñêèå è ðå÷åâûå ðàññòðîéñòâà ñîïðî-

âîæäàþòñÿ èçìåíåíèÿìè ôóíêöèîíèðî-âàíèÿ è äðóãèõ (ýêñòðàöåðåáðàëüíûõ)ñèñòåì îðãàíèçìà. Êîëè÷åñòâî âûÿâëåí-íûõ ïîâðåæäåíèé õðîìîñîì ïðè äðóãèõôîðìàõ çàáîëåâàíèé áûëî ñóùåñòâåííîíèæå, íàõîäèëîñü â äèàïàçîíå îò 6,19±±0,42 äî 6,39±0,51 è äîñòîâåðíî íå çà-âèñåëî îò ôîðìû çàáîëåâàíèÿ.

Ñðàâíèòåëüíàÿ îöåíêà ðåçóëüòàòîâèññëåäîâàíèÿ, ïîëó÷åííûõ ðàçíûìè ìå-òîäàìè, ïîêàçàëà, ÷òî äîñòîâåðíî âûñî-êèé óðîâåíü ÝÌ ðåãèñòðèðîâàëñÿ ïðàê-òè÷åñêè ó êàæäîãî áîëüíîãî íåçàâèñèìîîò ôîðìû çàáîëåâàíèÿ.  ïðîòèâî-ïîëîæíîñòü ýòîìó äîñòîâåðíî âûñîêèéóðîâåíü ÀÕ îòìå÷åí íå ó âñåõ îáñëåäî-âàííûõ áîëüíûõ. Ñ óêàçàííûõ ïîçèöèéìèêðîÿäåðíûé ìåòîä îöåíêè Íà ó áîëü-íûõ ÄÖÏ îêàçàëñÿ áîëåå ÷óâñòâèòåëüíûì(òàáë. 3). Ýòî íå ðàñïðîñòðàíÿåòñÿ íàîöåíêó ñòåïåíè ïîâðåæäåíèÿ ãåíîìà.×óâñòâèòåëüíîñòü îáîèõ ìåòîäîâ â äàí-íîì ñëó÷àå áûëà ïðèìåðíî îäèíàêîâîé,õîòÿ ïîâûøåíèå ÷èñëåííîñòè îáñëåäóå-ìûõ âûáîðîê ìîæåò âíåñòè îïðåäåëåí-íûå êîððåêòèâû.

Èçó÷åíèå ñîñòîÿíèÿ ãåíîìà ó áîëü-íûõ ÄÖÏ, ïðîâåäåííîå äâóìÿ öèòîãå-íåòè÷åñêèìè ìåòîäàìè, îäíîçíà÷íî ïî-êàçàëî, ÷òî ó áîëüøèíñòâà äåòåé ïðîèñõîäèòäåñòàáèëèçàöèÿ ãåíîìà – ïîâûøàþòñÿ óðî-

àáñ.âñåãî îáñëåäîâàíî

äåòåé

Áîëüíûå ñ ÄÂÓ ÀÕ

7078706060—

ó áîëüíûõ ñ ÄÂÓ ÀÕó âñåõ îáñëåäîâàííûõ

109

10101010

Òàáëèöà 2

Óðîâåíü àáåððàöèé õðîìîñîì ó áîëüíûõ ÄÖÏ â çàâèñèìîñòè îò ôîðìû çàáîëåâàíèÿ

%àáñ.

5,70±0,417,63±0,515,80±0,436,00±0,435,53±0,422,63±0,93

Ñ ÄÄÃÃ ÊËÃÏ Ã

Êîíòðîëü

ðÔîðìû ÄÖÏ

6,38±0,538,24±0,596,19±0,516,39±0,586,39±0,582,63±0,93

77766—

nÑðåäíèé óðîâåíü ÀÕ, %

<0,001*<0,001**<0,001*<0,001*<0,001*<0,001*

Ìåòîä îïðåäåëåíèÿ ÝÌ

100100100100100100100

âûÿâëåíî äåòåé ñ ÍÃâûÿâëåíî äåòåé ñ ÍÃ

23231715128

40

Òàáëèöà 3

×èñëî äåòåé ñ äîñòîâåðíî âûñîêèì óðîâíåì ïîâðåæäåíèÿ ãåíîìà è ñòåïåíü åãî ïîâðåæäåíèÿïðè ðàçëè÷íûõ ôîðìàõ çàáîëåâàíèÿ ÄÖÏ â çàâèñèìîñòè îò èñïîëüçóåìûõ ìåòîäîâ

%àáñ.

109

1010101010

Ñ ÄÄÃÃ ÊËÃÏ ÃÀÀ

Êîíòðîëü

%

Ôîðìû ÄÖÏ

77766——

23231715128

40

âñåãî îáñëåäîâàíîäåòåé

Ìåòîä îïðåäåëåíèÿ ÀÕ

7078706060——

Ïðèìå÷àíèå: ÄÂÓ — äîñòîâåðíî âûñîêèé óðîâåíü. * Ïî ñðàâíåíèþ ñ êîíòðîëåì, ** ïî ñðàâíå-íèþ ñ êîíòðîëåì è äðóãèìè ôîðìàìè çàáîëåâàíèÿ.

2 6 7

Êàçàíñêèé ìåäèöèíñêèé æóðíàë, 2004 ã., òîì 85, ¹ 4.

âåíü ÀÕ â ëèìôîöèòàõ è êîëè÷åñòâî ÝÌâ ïåðèôåðè÷åñêîé êðîâè. Âûÿâëåííûéíàìè ôåíîìåí íå ÿâëÿåòñÿ õàðàêòåðíûìòîëüêî äëÿ áîëüíûõ ÄÖÏ, ðåãèñòðèðó-åòñÿ îí è ïðè äðóãèõ íåíàñëåäñòâåííûõçàáîëåâàíèÿõ – õðîíè÷åñêîì îñòåîìèå-ëèòå, áðîíõèàëüíîé àñòìå, àíåìèè Ôàí-êîíè è äð. [8, 11]. Ïðåäïîëàãàåòñÿ, ÷òî âîñíîâå ýòîãî ÿâëåíèÿ ëåæèò èíòåíñèôè-êàöèÿ â îðãàíèçìå áîëüíûõ ïðîöåññîâìóòàãåíåçà çà ñ÷åò óñèëåííîé ãåíåðàöèèýíäîìóòàãåíîâ è (èëè) îñëàáëåíèÿ àí-òèìóòàãåííûõ ñèñòåì çàùèòû ãåíîìà [8].

Èçâåñòíûå ê íàñòîÿùåìó âðåìåíèìåõàíèçìû ïàòîãåíåçà ÄÖÏ ñâèäåòåëü-ñòâóþò, ÷òî â äåñòàáèëèçàöèè ãåíîìà,ñêîðåå âñåãî, ïðèíèìàþò ó÷àñòèå îáàïðîöåññà. Òàê, ïåðâè÷íûì çâåíîì ïàòî-ãåíåçà ÄÖÏ â ïîäàâëÿþùåì áîëüøèí-ñòâå ñëó÷àåâ ïðèíÿòî ñ÷èòàòü ãèïîêñèþíåðâíîé ñèñòåìû [12,13]. Äåôèöèò Î2èíèöèèðóåò â êëåòêàõ öåëûé ðÿä ìåòà-áîëè÷åñêèõ ñäâèãîâ, ïðåæäå âñåãî îêèñ-ëèòåëüíîå ôîñôîðèëèðîâàíèå â ìèòî-õîíäðèÿõ, ñèíòåç ëèïèäîâ è íóêëåèíîâûõêèñëîò, âíóòðèêëåòî÷íîå ñîäåðæàíèåÑà2+, áàëàíñ àìèíîêèñëîò, ðÍ è äðóãèõ

ïðîöåññîâ, îáÿçàòåëüíûìè ó÷àñòíèêàìèêîòîðûõ ÿâëÿþòñÿ ñâîáîäíûå ðàäèêàëû(íàïðèìåð, àêòèâíûå ôîðìû êèñëîðî-äà) èëè äðóãèå èíòåðìåäèàòû (íàïðèìåð,ãëóòàìàò, ìàëîíîâûé äèàëüäåãèä è äðó-ãèå ïðîäóêòû ïåðåêèñíîãî îêèñëåíèÿëèïèäîâ), ìóòàãåííàÿ àêòèâíîñòü êîòî-ðûõ íåîäíîêðàòíî ïîäòâåðæäàëàñü [4].Îáðàçóþùèåñÿ â ðåçóëüòàòå íàðóøåíèÿäåÿòåëüíîñòè êëàñòîãåíñîäåðæàùèõ áèî-õèìè÷åñêèõ öèêëîâ ýíäîìóòàãåíû ìîãóòíàêàïëèâàòüñÿ â îðãàíèçìå äî óðîâíÿ,ïðåäñòàâëÿþùåãî ñåðüåçíóþ îïàñíîñòüäëÿ åãî ãåíîìà. Âûñîêîå ñîäåðæàíèå íå-êîòîðûõ ïåðå÷èñëåííûõ âûøå ýíäîìóòà-ãåíîâ â îðãàíèçìå áîëüíûõ ÄÖÏ â íà-ñòîÿùåå âðåìÿ äîêàçàíî (íàïðèìåð, äëÿìàëîíîâîãî äèàëüäåãèäà, ãëóòàìàòà è äð.).

 êà÷åñòâå ïðèìåðà ìåòàáîëè÷åñêèõöèêëîâ, ÿâëÿþùèõñÿ ìåñòàìè îáðàçîâà-íèÿ ýíäîìóòàãåíîâ (êëàñòîãåíîâ), ïðè-âåäåì õàðàêòåðíóþ äëÿ ÄÖÏ ïàòîãåíå-òè÷åñêóþ öåïî÷êó, îòìåòèâ íà íåé ìåñòàîáðàçîâàíèÿ àêòèâíûõ ôîðì êèñëîðîäà(ÀÔÊ) è ïðîäóêòîâ ïåðåêèñíîãî îêèñ-ëåíèÿ ëèïèäîâ. Ýòî íå åäèíñòâåííûåìåòàáîëè÷åñêèå öèêëû êëàñòîãåíåçà

Ðèñ. 2. Ñïåöèôè÷åñêèå äëÿ áîëüíûõ ÄÖÏ ìåòàáîëè÷åñêèå öèêëû ãåíåðàöèè ýíäîìóòàãåíîâ: ãèïî-êñèÿ — ãëóòàìàò — êàëüöèé — öèêëîîêñèãåíàçà (ÃÃÊÖ), ãèïîêñèÿ — ãëóòàìàò — êàëüöèé — ìåìá-ðàíû êëåòêè (ÃÃÊÌ), ãèïîêñèÿ — ãëóòàìàò — êàëüöèé — ñîïðÿæåííîå ôîñôîðèëèðîâàíèå (ÃÃÊÑ).

2 6 8

Êàçàíñêèé ìåäèöèíñêèé æóðíàë, 2004 ã., òîì 85, ¹ 4.

(ÌÖÊ) â îðãàíèçìå áîëüíûõ ÄÖÏ. Çà-ñëóæèâàåò âíèìàíèÿ è íàðóøåíèå àìè-íîêèñëîòíîãî îáìåíà ó áîëüíûõ ÄÖÏ.Ñðåäè àìèíîêèñëîò, íàêàïëèâàþùèõñÿâ ìîçãå ïðè ãèïîêñèè, îñîáî âûäåëÿþòãëóòàìàò. Íà äîëþ ãëóòàìàòíûõ ðåöåïòî-ðîâ (NMDA-ðåöåïòîðîâ) ïðèõîäèòñÿîêîëî 80% ñèíàïñîâ è íåéðîíîâ â êîðåè ãèïïîêàìïå. Íàøè èññëåäîâàíèÿ íàìûøàõ (àíàëèç ìèêðîÿäåð â ýðèòðîöè-òàõ ïåðèôåðè÷åñêîé êðîâè) ïîêàçàëèáèôàçíûé õàðàêòåð äåéñòâèÿ ãëóòàìàòàíà ãåíîì êëåòêè.  ôèçèîëîãè÷åñêèõ êîí-öåíòðàöèÿõ (10-6–10-8 Ì) îí çàùèùàåòãåíîì îò ïîâðåæäåíèÿ ìóòàãåíàìè, íî âêîíöåíòðàöèÿõ âûøå 10-6 Ì ñòàíîâèòñÿîïàñíûì ìóòàãåíîì. Ñ ó÷åòîì çíà÷è-òåëüíîãî âûäåëåíèÿ ãëóòàìàòà â èíòåð-ñòèöèé ïðè ãèïîêñèè âåðîÿòíîñòü ïî-âðåæäåíèÿ ýòîé àìèíîêèñëîòîé ãåíîìàêëåòîê ìîçãà è äðóãèõ òêàíåé î÷åíü âû-ñîêà.

Âìåñòå ñ òåì îáðàùàåò íà ñåáÿ âíè-ìàíèå íåñîñòîÿòåëüíîñòü àíòèîêñèäàíò-íîé çàùèòû ïðè ïîðàæåíèÿõ ÖÍÑ ãè-ïîêñè÷åñêîãî ãåíåçà [7]. Ïîñêîëüêóàíòèîêñèäàíòíàÿ ñèñòåìà ïðèíèìàåò àê-òèâíîå ó÷àñòèå â çàùèòå ãåíîìà ÷åëîâå-êà, òî ìîæíî ïðåäïîëîæèòü, ÷òî îñëàá-ëåíèå ñèñòåì çàùèòû òàêæå ìîæåòïðîâîöèðîâàòü ïîÿâëåíèå äåñòàáèëèçà-öèè ãåíîìà ó áîëüíûõ ÄÖÏ (ðèñ. 2).

 öåëîì, ïî êàêîìó áû ïóòè íå ðàç-âèâàëàñü äåñòàáèëèçàöèÿ ãåíîìà, îíàïðèâîäèò ê îäíîçíà÷íîìó ðåçóëüòàòó –íàðóøåíèþ ýêñïðåññèè ãåíîâ. Ñëåäñòâè-åì ýòîãî ÿâëÿåòñÿ ðàññòðîéñòâî ìåòàáî-ëèçìà â ñàìûõ ðàçëè÷íûõ çâåíüÿõ. Ñ îä-íîé ñòîðîíû, ýòî óñóãóáëÿåò èìåþùèåñÿïàòîëîãè÷åñêèå ïðîöåññû ó áîëüíîãî èâåäåò ê íîâûì íàðóøåíèÿì, à ñ äðóãîé –ñíèæàåò ýôôåêòèâíîñòü òåðàïèè ÄÖÏ.Íåîáõîäèìà ôàðìàêîëîãè÷åñêàÿ êîððåê-öèÿ ãåíîìà ó áîëüíûõ ÄÖÏ, êîòîðàÿäîëæíà ñî÷åòàòüñÿ ñ êîìïëåêñîì ñïåöè-ôè÷åñêèõ òåðàïåâòè÷åñêèõ âîçäåéñòâèé.

ÂÛÂÎÄÛ1. Ó áîëüíûõ ÄÖÏ ïîâûøåí óðîâåíü

ýðèòðîöèòîâ ñ ìèêðîÿäðàìè è ïåðåñòðî-åê õðîìîñîì â ëèìôîöèòàõ ïåðèôåðè÷åñ-êîé êðîâè.

2. Óðîâåíü êëàñòîãåíåçà è àíýóãåíåçàó áîëüíûõ çàâèñèò îò ôîðìû ÄÖÏ.

3. Ðåãèñòðàöèÿ ìèêðîÿäåð â ýðèòðî-öèòàõ ïåðèôåðè÷åñêîé êðîâè áîëåå ÷óâ-ñòâèòåëüíà ïðè âûÿâëåíèè íåñòàáèëü-íîñòè ãåíîìà, ÷åì îïðåäåëåíèå ïåðå-

ñòðîåê õðîìîñîì â ëèìôîöèòàõ ïåðèôå-ðè÷åñêîé êðîâè.

ËÈÒÅÐÀÒÓÐÀ

1. Áàäàëÿí Ë.Î., Æóðáà Ë.Ò., Òèìîíèíà Î.Á. Äåò-ñêèå öåðåáðàëüíûå ïàðàëè÷è. – Êèåâ, 1988.

2. Áî÷êîâ Í.Ï., Ôèëèïïîâà Ò.Â., ßêîâåíêî Ê.Í.//Öèòîë. è ãåíåò. – 1984. – ¹ 6. – Ñ. 422—428.

3. Áî÷êîâ Í.Ï. ,×åáîòàðåâ À.Í. Íàñëåäñòâåí-íîñòü ÷åëîâåêà è ìóòàãåíû âíåøíèé ñðåäû. – Ì.,1989.

4. Äóðíåâ À.Ä., Ñåðåäåíèí Ñ.Â. Ìóòàãåíû. Ñêðè-íèíã è ôàðìàêîëîãè÷åñêàÿ ïðîôèëàêòèêà âîç-äåéñòâèé. – Ì., 1998.

5. Èëüèíñêèõ Í.Í., Íîâèöêèé Â.Â., Âàí÷óãîâà Í.Í.Ìèêðîÿäåðíûé àíàëèç è öèòîãåíåòè÷åñêàÿ íåñòà-áèëüíîñòü. – Òîìñê, 1992.

6. Ëàêèí Ã. Ô. Áèîìåòðèÿ.— Ì., 1980.7. Ïåòðóøèíà À.À., Ëåâèòèíà Å.Â. è äð. //Ðîññ.

âåñòí. ïåðèíàòîë. è ïåäèàòð. – 2000. – ¹ 1. –Ñ. 22—23. .

8. Ñåìeíîâ À.Â., Ïèãàëîâ À.Ï. è äð.// Ïóëüìî-íîëîãèÿ. – 2003.— ¹ 4.— Ñ. 34 – 36.

9. Ñåìåíîâà Ê.À., Ìàñòþêîâà Å.Ì., Ñìóãëèÿí Ì.ß.Êëèíèêà è ðåàáèëèòàöèîííàÿ òåðàïèÿ äåòñêèõöåðåáðàëüíûõ ïàðàëè÷åé. – Ì., 1972.

10. Ôîãåëü Ô., Ìîòóëüñêè À. Ãåíåòèêà ÷åëîâå-êà. – Ì., 1990.

11. ×åðåïí¸â Ã.Â., Ìàëûøåâ Ê.Â. è äð. // Ýêñïåð.è êëèí. ôàðìàêîë. – 2000. – ¹ 6. – Ñ. 43 – 48.

12. Finer N.N., Robertson C.M. et al. // J. Pediatr. –1981. – Vol. 98. – P. 112 – 117.

13. Hill A. // Pediatr. Neurol. – 1999. – Vol. 7(5). –Ð. 317 – 325.

14. Monreal F.J. // Dev. Med. Child. Neurol. –1985. – Vol. 27. – P. 325 – 330.

15. Schmid W. // Mutat. Res. – 1975. – Vol. 31. –P. 9–15.

Ïîñòóïèëà 12.01.04.

INSTABILITY OF GENOME IN PATIENTSWITH INFANTILE CEREBRAL PALSY

D.D. Gainetdinova, V.V. Semenov, M.F. Ismagilov,I.A. Pakhalina, E.V. Kolochkova

S u m m a r y

State of the genetic apparatus in patients withinfantile cerebral palsy is studied. The high level ofchromosomal aberrations and micronuclei is foundin peripheric blood cells. Clastogenic effect was notcorrelated with age and sex and was reliably higher ina group of children with double hemiplegia. Aneugeniceffect was similar in children with different forms ofthe disease and in different age groups. The authorsconnect the high intensity of clastogenesis andaneugenesis in patients with breaking of metaboliccycles of clastogenesis accompanied by the increasedgeneration of endomutagens and weakening ofantimutagenous protective system of genome.