Download pdf - Osmoregulasi Ikan Pari Dan Hiu

7/23/2019 Osmoregulasi Ikan Pari Dan Hiu

1/11

KATA PENGANTAR

Puji dan syukur kami panjatkan kekhadirat Allah SWT, karena berkat rahmat

serta karunia-Nya, kami dapat menyelesaikan tugas penulisan Makalah dengan judulElasmobranchi Hiu. Makalah ini kami susun untuk memenuhi salah satu tugas mata

kuliah Biokimia Ikan di urusan Budidaya Perairan !akultas Perikanan dan Ilmu

"elautan #ni$ersitas Bra%ijaya& "ami mengu'apkan banyak terima kasih kepada

dosen Mata "uliah !isiologi (e%an Air, yang telah memberikan tanggung ja%ab

kepada kami dalam penulisan makalah ini, sebagai media penunjang dalam

pembelajaran Mata "uliah & Semoga bantuan dan moti$asi dari semua pihak dapat

di'atat sebagai amal shaleh dan senantiasa mendapat balasan berupa limpahan

pahala yang sepadan dari Allah SWT&

)emikian, hasil penulisan makalah ini yang dalam pelaksanaannya telah

melibatkan berbagai pihak, semoga Makalah ini dapat berman*aat bagi semua yang

memba'anya&

Malang, + ktober +./0

Penulis

1


2/11

BAB I

PENDAHULUAN

1.1Latar Belakang

Meskipun mayoritas elasmobran'hs sebagian besar stenohaline, setidaknya

/1. spesies dari //.. diakui spesies elasmobran'h mampu mentolerir lingkungan

payau atau sepenuhnya air ta%ar untuk %aktu yang lama 2Martin, +..03,

menunjukkan bah%a beberapa derajat euryhalinity lebih umum dari yang

diperkirakan sebelumnya& Sementara banyak yang diketahui tentang osmoregulasi

elasmobran'h dalam air laut normal, lebih sedikit yang diketahui tentang tanggapan

mereka terhadap perubahan salinitas lingkungan, dan terutama yang berkaitan

dengan hypersalinity 2di mana salinitas lingkungan mungkin melebihi dari air laut3&

Air laut hypersaline dapat berkembang di lingkungan pesisir di mana

pertukaran dengan perairan terbuka dibatasi, dan dengan tingkat penguapan atau

input air ta%ar rendah seperti di laguna pesisir atau muara pasang 2Potter et al&,

+./.3& )alam kasus yang jarang lingkungan ini dapat sebanyak 4,0 kali lebih asin

dari laut terbuka 2Brauner et al&, +./+3, meskipun biasanya mereka berkisar di

salinitas 5.-/6. 7& 8lasmobran'hi tampaknya ter%akili di banyak lingkungan

hypersaline pesisir, misalnya +4 spesies hiu dan pari sendiri diketahui menghuni

daerah Shark Bay di pantai Australia Barat 2di mana air dapat berkisar salinitas 50-1.

7 29audo dan (eithaus, +..33& #ntuk elasmobran'hi, perairan hypersaline lebih

sering ditemui dari hypersaline& Perairan hypersaline dapat berkembang di daerah

pesisir di mana limpasan air ta%ar dari sungai dan sungai memasuki laut& (anya

sejumlah ke'il elasmobran'hi sepenuhnya euryhaline, yang memungkinkan mereka

untuk menempati relung sungai yang dihuni untuk sebagian elasmobran'hi&

ika suatu larutan mempunyai konsentrasi osmotik lebih tinggi, tekanan

osmotiknya juga lebih tinggi& :arutan yang mempunyai konsentrasi osmotik lebih

tinggi daripada larutan yang lain disebut larutan hiperosmotik& Sebaliknya larutan

yang mempunyai konsentrasi omotik lebih rendah dari pada larutan lainnya

dinamakan larutan hipoosmotik& Sedangkan istilah tonisitas menga'u pada

tanggapan suatu sel, jika sel tersebut diletakkan dalam larutan yang berbeda& adi

penentuan si*at suatu larutan; 'airan sebagai 'airan hipotonis, hipertonis, isotonis&

2


3/11

1.2Rumusan Masalah

Bagaimana osmoregulasi hiu&

Bagaimana perbedaan antara ikan elasmobran'hi yang berada pada

lingkungan salinitas rendah dan salinitas tinggi

1.Tu!uan

Mengetahui bagaimana osmoregulasi hiu terjadi

Mengetahui bagaimana perbedaan ikan elasmobran'hi yang diletakkan

pada salinitas tinggi dan salinitas rendah

3


4/11

BAB II

PEMBAHA"AN

2.1 #sm$regulas% H%u

Biasanya elasmobran'hi yang tinggal di luar salinitas laut terbuka

menimbulkan ion masalah regulasi& Biasanya, 'airan dan jaringan dari hiu dan pari

yang tinggal di air laut yang hipertonik sehubungan dengan air laut sekitarnya yang

mem*asilitasi masuknya sedikit osmotik air dan keuntungan di*usi bersih Na radien ini berarti bah%a hiu di air laut umumnya tidak perlu minum, dan setiap

keuntungan bersih dari ion ditangani sebagian besar oleh kelenjar menskresi garam&

Akumulasi konsentrasi tinggi urea dalam sel dan 'airan ekstraseluler menyumbang

sebagian besar tekanan osmotik internal yang tinggi dari elasmobran'hi dan

sementara tingkat tinggi urea dapat mempengaruhi *ungsi protein dalam organisme

lain, beberapa protein elasmobran'hi unik hanya bisa ber*ungsi di tingkat urea yang

tinggi 2?an'ey dan Somero, /143& Memang, mempertahankan tingkat yang 'ukup

tinggi dari urea dianggap salah satu alasan mengapa begitu sedikit spesies

beberapa elasmobran'hi dapat tinggal di lingkugan air ta%ar 2Ballantyne dan !raser,+./+3&

2.2 Per&e'aan Elasm$&ran(h% )ang &era'a '% sal%n%tas ren'ah 'an sal%n%tas

t%ngg%

)alam lingkungan salinitas rendah, elasmobran'hi euryhaline harus

mengurangi gradien osmotik yang bekerja pada he%an dan melakukannya dengan

menurunkan plasma urea dan Na


5/11

air laut normal, gradien hyperosmoti' sedikit antara ikan dan lingkungan berarti

bah%a he%an tidak perlu minum untuk menjaga keseimbangan air 2Ballantyne dan

!raser, +./+3& )alam lingkungan hypersaline, tantangan tetap untuk memastikan

bah%a dire'tionality dari gradien osmotik dipertahankan@ namun (al ini mungkin

berarti bersaing dengan banyak osmolyte signi*ikan dan biaya energikmempertahankan mereka& Produksi urea dan retensi adalah biaya energik signi*ikan

untuk elasmobran'hs dan pengalihan akut elasmobran'hi untuk lingkungan salinitas

tinggi dapat merangsang minum di beberapa spesies& Sebagai akibatnya, plasma

Na


6/11

menganalisis akti$itas N"A& (emibran'h yang kedua pada setiap sisi juga dipotong

dan tetap di bu**ered *ormalin netral 2NB!3 semalam pada suhu 5 F =& Sampel tetap

ditempatkan ke 1. etanol dan disimpan sampai pengolahan di -+. F =& "elenjar

dubur juga dihapus dari masing-masing ikan hiu, dibekukan dengan 'epat dan

disimpan pada -4. F =&

'& "onsentrasi Hat terlarut (ematokrit dan plasma

Sampel darah segera disentri*ugasi pada 0... g selama menit dan plasma

telah dihapus dan disimpan pada -+. F = sebelum analisis& Sebuah pipa kapiler ke'il

dari seluruh darah disentri*ugasi pada /.&... g selama / menit untuk menentukan

hematokrit 2(=T3& smolalitas plasma ditentukan dalam rangkap tiga dengan

menggunakan 9apro 00+. tekanan uap osmometer 2Wes'or, :ogan, #T, #SA3&

smolalitas air akuarium juga diukur& Sampel plasma dien'erkan oleh 00 dalam air

ultra murni 2Millipore3 dan konsentrasi ion 2Na


7/11

untuk menentukan konsentrasi Pi& "onsentrasi protein dari homogenat diukur

menggunakan metode Brad*ord& Semua tes dilakukan dalam rangkap tiga& "egiatan

N"A dinyatakan sebagai mmol Pi mg-/ protein h-/&

e& imunohistokimia

Analisis imunohistokimia *ormalin tetap insang bagian jaringan yang

disiapkan sesuai dengan metode yang disajikan dalam Leilly et al& 2+.//3 dan

Babonis dkk& 2+..3& Lin'ian spesi*ik antibodi sekunder yang digunakan dalam

penelitian ini& Se'ara singkat, alkohol sampel insang dia%etkan yang dehidrasi,

tertanam dalam lilin para*in, dipotong pada 6 m dan ditempatkan ke slide poli-:-lisin

dilapisi& Bagian yang depara**inised kemudian direhidrasi dan diblokir dengan a$idin

dan biotin 2.,./, masing-masing /0 menit3 dan serum kambing normal 2+ serum,

/ BSA, .,/ ikan dingin gelatin kulit, .,/ Triton -/.., .,.0 T%een- +., dan

.,.0 thimerosal di .,./ M PBS, p( 1,+3 selama . menit pada suhu kamar&

Antibodi primer yang diterapkan dan bagian diinkubasi pada 5 F = semalam di ruang

dilembabkan& Antibodi sekunder terbiotinilasi kemudian diterapkan pada bagian

diikuti oleh lobak peroidise-berlabel strepta$idin 2/J /... di PBS@ 9e'tor

:aboratories, #SA3 selama . menit setiap pada suhu kamar& )eteksi kromogenik

dilakukan dengan menggunakan )AB 2, OdiaminobenHidin tetrahydro'hloride3

substrat 'air 2Sigma Aldri'h, Australia3& Slide disiapkan dari bagian insang yang

dilihat dan di*oto menggunakan lympus B(-+ mikroskop dengan kamera :ei'a

)!=+.&

*& N"A Western blotting

Western Blotting dilakukan sesuai =hoe dkk& 2+..03 untuk mengukur jumlah

relati* N"A, khususnya -subunit dari transporter kompleks N"A 2Wilson et al&,

+..13, dalam jaringan bran'hial dengan re-spe't salinitas lingkungan& "arena jumlah

ke'il jaringan berhasil-mampu, sampel yang 'ukup $olume dikumpulkan dari hanya

tiga he%an per kelompok perlakuan& aringan yang homogen dan disentri*ugasi dan

pelet disuspensikan dalam bu**er es homogenisasi dingin 2di mmol :-/J +0. sukrosa,

. Tris, / 8)TA, /.. mg m:-/ phenylmethylsul*onyl *luoride, 0 mg m:-/ PI koktail3&

Sebuah alikuot telah dihapus untuk pro-Tein kuanti*ikasi 2Gubit, :i*e Te'hnologies

Australia3& 8nam mikrogram protein dari setiap binatang di masing-masing kelompok

perlakuan kemudian digabungkan untuk analisis selanjutnya& AliGuot dari homogenatgabungan yang berisi total 6 mg protein bran'hial ditambahkan ke / Q NuPA>8 :)S

7


8/11

=ontoh Bu**er 2:i*e Te'hnologies Australia, Mulgra$e, 9i'toria, Australia3 dan

kemudian didenaturasi pada 1. F = selama /. menit sebelum dimuat dalam rangkap

tiga ke 5-/+ Bis-Tris gel 2No$e, :i*e Te'hnologies Australia3 dan dielektro*oresis

pada +.. 9 selama 50 menit 2=ell Sure:o'kR Mini, :i*e Te'hnologies Australia3&

Sampel kemudian ditrans*er dari gel ke .,50 um In$itrogen P9)! membran pada 09 selama . menit dalam =ell II Blot Module 2:i*e Te'hnologies Australia3&

Membran diblokir dengan 0 susu skim dalam TBST dan kemudian diinkubasi di

antibodi primer 2LB/ /J /... di TBST3 selama 6. menit pada suhu kamar& Seekor

kambing terbiotinilasi anti-kelin'i antibodi sekunder 2/J +..., Antibodi Australia3

kemudian diterapkan pada membran selama 6. menit pada suhu kamar& Sebuah

konjugat (LP-strepta$idin 2/J /... dalam TBST@ 9e'tor :aboratories, #SA3

ditambahkan ke membran selama . menit diikuti dengan 'hromagen ,O-diaminobenHidin 2)AB3& Membran di'u'i dan dikeringkan dan digital menggunakan

=anon *latbed s'anner& Analisis densitometri band dilakukan dengan menggunakan

Euantity Satu so*t%are 2Bio-Lad, >lades$ille, NSW, Australia3&

2.* Has%l

a& "onsentrasi at Terlarut (ematokrit dan Plasma

(=T tidak menunjukkan perbedaan signi*ikan antara +0 7 2//,/4 D +,/3,5 7 2/,0 D .,603 dan 5. 7 2/0,./ D /,+3 menyesuaikan diri =& pun'tatum

2AN9A !+, /+ C /,01, P C .,+0@ Tabel +3& Salinitas lingkungan signi*i-'antly

dipengaruhi osmolalitas plasma 2AN9A !+, /+ C 6,, P C /&60e-//@& )engan

osmolalitas he%an terbiasa untuk 5. 7 2//0 D 6 msm kg-/3 se'ara signi*ikan lebih

tinggi daripada hiu terbiasa untuk baik +0 7 2141 D 6 msm kg-/3 atau 5 7 2/./ D

/. msm kg-/3 2P C /&6e-// dan P C &08-1, masing-masing3& smolalitas plasma

hiu dalam pengobatan +0 7 juga se'ara signi*ikan lebih rendah dibandingkan dari

5 7 kelompok 2P C 6&0e-/.3& (iu dipertahankan osmolalitas plasma yang baik

isoosmotik dengan lingkungan 25 73 atau lebih tinggi dari lingkungan 2+0 7 dan 5.

73& Aklimatisasi salinitas se'ara signi*ikan mempengaruhi konsentrasi Na


9/11

b& "egiatan N"A bran'hial dan kelenjar re'tal

Tidak ada e*ek salinitas pada massa kelenjar re'tal setelah mengoreksi e*ek

massa tubuh 2AN=9A, ! 2+, //3 C .,/++, P C .,41103& Tidak ada pengaruh yang

signi*ikan dari salinitas lingkungan pada akti$itas spesi*ik enHim N"A baik kelenjar

re'tal atau jaringan bran'hial& )alam semua pera%atan, kegiatan N"A hampir

sepuluh kali lipat lebih tinggi pada kelenjar relati* re'tal ke insang&

9


10/11

BAB III

PENUTUP

.1 KE"IMPULAN

)alam lingkungan salinitas rendah, elasmobran'hi euryhaline harus

mengurangi gradien osmotik yang bekerja pada he%an dan melakukannya dengan

menurunkan tingkat plasma urea dan Na


11/11

Re+erens%

=ramp, L& :&, M&& (ansen and =&8& !ranklin.+./0&smoregulation by ju$enile

bro%n-banded bamboo sharks,=hilos'yllium pun'tatum, in hypo- and hyper-

saline %aters& =omparati$e Bio'hemistry and Physiology, Part A /40J/.1//5

11