分 子 生 物 学 实 验

分 子 生 物 学 实 验分 子 生 物 学 实 验

1.1.分子生物学实验综合规程分子生物学实验综合规程

2.2.分子生物学实验常用仪器设备分子生物学实验常用仪器设备

3.3.分子生物学基本技术分子生物学基本技术

4.4. 实验准备实验准备

分子生物学实验综合规程分子生物学实验综合规程 上课时间提前上课时间提前 55 分钟进入实验室；不迟到、不早分钟进入实验室；不迟到、不早

退，无故旷课累计退，无故旷课累计 33 次没成绩；次没成绩； 请假须医院病假条或班主任签字的假条；请假须医院病假条或班主任签字的假条； 上课时需穿实验服，不许在实验室内吃东西，不上课时需穿实验服，不许在实验室内吃东西，不

背着书包做实验，不穿拖鞋进实验室；背着书包做实验，不穿拖鞋进实验室； 实验课期间不许打闹、闲聊等，不大声喧哗，保实验课期间不许打闹、闲聊等，不大声喧哗，保

持课堂纪律，实验过程中，至始至终需全组同学持课堂纪律，实验过程中，至始至终需全组同学一起完成，任何人中途不得缺席。一起完成，任何人中途不得缺席。

必须做到课前认真预习，课间做好实验记录、课必须做到课前认真预习，课间做好实验记录、课后详细总结实验结果并按时提交实验报告；后详细总结实验结果并按时提交实验报告；

公用试剂不得污染！每次都必须用新枪头。公用台公用试剂不得污染！每次都必须用新枪头。公用台上公用试剂不得私自拿到自己实验台上；上公用试剂不得私自拿到自己实验台上；

不得私自拿走或乱放别人的实验物品、实验产品；不得私自拿走或乱放别人的实验物品、实验产品； 不得擅自使用实验室中非本实验仪器、试剂。不得擅自使用实验室中非本实验仪器、试剂。 实验废液不随便倾倒，实验废液不随便倾倒，随时保持实验台的整洁；随时保持实验台的整洁； 爱护实验器材，实验器材损坏必须按规定赔偿；爱护实验器材，实验器材损坏必须按规定赔偿； 实验前按仪器性能与要求，进行仪器预热；实验前按仪器性能与要求，进行仪器预热； 实验完成后检查电源插座，用完仪器后必须复位，实验完成后检查电源插座，用完仪器后必须复位，

仪器清洁干净 、摆放整齐；每组实验物品齐全，需仪器清洁干净 、摆放整齐；每组实验物品齐全，需教师验收，枪量程要归位，发现问题及时报修；教师验收，枪量程要归位，发现问题及时报修；

每位同学负责自己实验台面和柜体的卫生，值日每位同学负责自己实验台面和柜体的卫生，值日生负责公用实验台、地面等处卫生；生负责公用实验台、地面等处卫生；

每次轮到打扫卫生的小组，要认真做好值日工作，每次轮到打扫卫生的小组，要认真做好值日工作，离开实验室须向教师声明；离开实验室须向教师声明；

同学与老师之间、同学与同学之间、实验班与实同学与老师之间、同学与同学之间、实验班与实验班之间一定要互相协作配合保持公用房间卫生，验班之间一定要互相协作配合保持公用房间卫生，注意门窗水电的安全。注意门窗水电的安全。

遵守通用的实验室规则。遵守通用的实验室规则。 违反上述任何一条规则责任自负，并要扣分，造违反上述任何一条规则责任自负，并要扣分，造

成损失要照价赔偿。成损失要照价赔偿。

实 验 成 绩实 验 成 绩

实验技能 实验技能 2020 分分

实验报告 实验报告 2020 分分

实验态度 实验态度 1515 分分

实验室常识 实验室常识 1515 分分

实验实施 实验实施 3030 分分

分子生物学实验教程 自编 分子生物学实验教程 自编 分子生物学实验指导分子生物学实验指导 魏群 高等教育出版社魏群 高等教育出版社 分子生物学实验指导 刘进元 清华大学出版社分子生物学实验指导 刘进元 清华大学出版社

参 考 书参 考 书

实 验 内 容实 验 内 容 实验一 分子生物学实验的基本知识和基本技实验一 分子生物学实验的基本知识和基本技

能培训能培训 实验二 大肠杆菌感受态细胞的制备实验二 大肠杆菌感受态细胞的制备 实验三 质粒实验三 质粒 DNADNA的转化的转化 实验四 实验四 碱裂解法提取碱裂解法提取质粒质粒 DNADNA 实验五 琼脂糖凝胶电泳检测实验五 琼脂糖凝胶电泳检测 DNADNA 实验六 实验六 PCRPCR基因扩增基因扩增

1.1.分子生物学实验综合规程分子生物学实验综合规程

2.2.分子生物学实验分子生物学实验常用仪器设备

3.3.分子生物学基本技术分子生物学基本技术

4 4 实验准备实验准备

样品、试剂和材料等的保存样品、试剂和材料等的保存

温度控制系统温度控制系统 ---- 冰箱：冰箱： 44℃℃ 、、 -20-20℃℃ 、、 -70-70℃℃

纯

水

器

恒温培养箱恒温培养箱

细菌平板的培养细菌平板的培养

恒温空气摇床恒温空气摇床

菌体的培养菌体的培养

灭菌器灭菌器

培养基、试剂、耗材等的灭菌

PCR PCR 仪仪

PCR 扩增、保温实验等

恒温水浴及微量加热器恒温水浴及微量加热器

保证实验温度的恒定

电 泳 仪电 泳 仪

电泳时提供电压和电流

电泳槽电泳槽

核酸或蛋白质的电泳定性分析时的凝胶支架

凝胶成像系统凝胶成像系统

电泳结果的定性和定量分析电泳结果的定性和定量分析

紫外分析仪紫外分析仪

电泳结果的定性分析电泳结果的定性分析

台式高速冷冻离心机台式高速冷冻离心机

样品的分离样品的分离

落地式高速冷冻离心机落地式高速冷冻离心机

样品的分离

分光光度计分光光度计

样品的定量测定

超净工作台超净工作台

提供洁净工作环境提供洁净工作环境

电子天平电子天平

样品、试剂等的称量

精确的精确的 pHpH值测值测定定

pH pH 计计

液体试剂的精确取量液体试剂的精确取量

移 液 器移 液 器

制冰机制冰机

1.1.分子生物学实验综合规程分子生物学实验综合规程

2.2.分子生物学实验分子生物学实验常用仪器设备

3.3.分子生物学基本技术分子生物学基本技术3.13.1 实验规范训练－仪器的操作实验规范训练－仪器的操作3.23.2 实验规范训练－量程的选择实验规范训练－量程的选择3.33.3 实验规范训练－标签实验规范训练－标签3.43.4 实验规范－实验操作实验规范－实验操作

4 4 实验准备实验准备

3.1 3.1 实验规范训练－仪器的操作实验规范训练－仪器的操作要求：要求：仪器在未经培训前，不得擅自使用仪器在未经培训前，不得擅自使用

严格按操作规程使用仪器，严格按操作规程使用仪器，

有些仪器必须有教师在场时才能使用，并由教师操作有些仪器必须有教师在场时才能使用，并由教师操作

违反规定的使用者，造成的后果由使用者承担违反规定的使用者，造成的后果由使用者承担

3.2 3.2 实验规范训练－量程的选择实验规范训练－量程的选择

天平天平

烧杯、量筒、容量瓶、试剂瓶－－不同规格烧杯、量筒、容量瓶、试剂瓶－－不同规格

量程的选择－移液器量程的选择－移液器

3.3 3.3 实验规范训练－标签实验规范训练－标签

1.1. 所用的器皿上一定要做标记所用的器皿上一定要做标记

2.2. 标签一定要贴到固定的位置标签一定要贴到固定的位置

3.3. 标签上应包括具体的名称、组别、实验班、日期标签上应包括具体的名称、组别、实验班、日期

3.4 3.4 实验规范－实验操作实验规范－实验操作

• 详细记录和分析实验结果并按时提交实验报告详细记录和分析实验结果并按时提交实验报告

• 实验中一定要处处用心、勤动手，多问为什么实验中一定要处处用心、勤动手，多问为什么

• 仔细操作和观察仔细操作和观察

• 保留好每一步的实验样品，在确准的情况下才保留好每一步的实验样品，在确准的情况下才

能当废液扔掉能当废液扔掉

1.1.分子生物学实验综合规程分子生物学实验综合规程

2.2.分子生物学实验常用仪器设备分子生物学实验常用仪器设备

3.3.分子生物学基本技术分子生物学基本技术

4.4. 实验准备实验准备

4.1 4.1 清点和熟悉常用玻璃器皿、耗材等清点和熟悉常用玻璃器皿、耗材等

4.2 4.2 洗涤本学期实验用玻璃器皿洗涤本学期实验用玻璃器皿

4.3 4.3 配制试剂配制试剂

4.4 4.4 高温灭菌高温灭菌

4 4 实验准备实验准备

4.1 4.1 清点和熟悉常用玻璃器皿、耗材等清点和熟悉常用玻璃器皿、耗材等

4.1 4.1 洗涤本学期实验用玻璃器皿洗涤本学期实验用玻璃器皿

4.3 4.3 配制试剂配制试剂

11） ） 0.1 mol/L CaCl0.1 mol/L CaCl2 2 100 mL100 mL

22） ） 5 mol/L NaOH 100 mL 5 mol/L NaOH 100 mL 胶塞胶塞 33） ） LBLB液体培养基 液体培养基 100 mL100 mL

胰蛋白胨（胰蛋白胨（ typtone) 1gtyptone) 1g

酵母提取物（酵母提取物（ yeast extract) 0.5gyeast extract) 0.5g

NaCl 1gNaCl 1g

加部分水溶解后加加部分水溶解后加 2020μμL 5 mol/L NaOHL 5 mol/L NaOH，定容到，定容到 100 mL100 mL

44） ） 10%(w/v)SDS10%(w/v)SDS储液 储液 50 mL 50 mL ，，室温保存室温保存55） ） 1 mol/L Tris 200 mL1 mol/L Tris 200 mL

66） ） 2 mol/L HCL 100 mL2 mol/L HCL 100 mL

77） ） 0.5 mol/L EDTA 100 mL0.5 mol/L EDTA 100 mL

80 mL80 mL 水中加水中加 18.61g EDTA-Na18.61g EDTA-Na22HH22OO ，用，用 NaOHNaOH调 调 pH 8pH 8（约需（约需 2g NaOH2g NaOH），后定容至），后定容至 100 mL100 mL

88） ） 5xTAE 1000 mL5xTAE 1000 mL

99） ） 70%70%乙醇 乙醇 500 mL500 mL

1010） ） Amp Amp ：： 100 mg/ mL 20ml100 mg/ mL 20ml ，分装每管 ，分装每管 1 mL1 mL ，，－－ 202000CC 保存保存

4.4 4.4 高温灭菌高温灭菌

①① LBLB 液体培养基 液体培养基

②② 1.5mL1.5mL 离心管 离心管 22瓶瓶 // 组组

③③ 枪头枪头 /1/1 组 ： 组 ： 1mL 11mL 1盒，盒， 200uL 1200uL 1盒盒

④④ 培养皿 培养皿 1212套套 // 组 组

⑤⑤ 无菌水 无菌水 100 mL /100 mL / 班 班

⑥⑥ 0.1 mol/L CaCl0.1 mol/L CaCl22