View
216
Download
0
Category
Preview:
Citation preview
8/18/2019 Diskusi kimfor
1/2
Diskusi
Pemanfaatan yang sukses dari GRP sebagai bagian dari prosedur penyaringan sampel
rutin bergantung pada imina yang terbentuk antara GRP dan molekul keton yang bersifat
reversibel. Pembentukan produk dapat maksimal ketika reaksi dilakukan pada kisaran pH 4-
5. Oleh karena itu, untuk kepekaan dan presisi kuantitatif, lebih baik untuk tidak memurnikan
molekul analit dari kelebihan reagen GRP sebelum ineksi. !i ba"ah kondisi HP#$ yang
digunakan, % &g GRP diineksikan untuk dielusi selama ',5 menit pertama, sehingga
kemudian dapat se(ara otomatis menuu ke penampungan limbah. )ifat hidrofilik dari GRP
memungkinkan dengan mudah dibilas dari instrumentasi #$-*) , tidak menimbulkan
penumpukan pada instrumen, atau pemeliharaan tambahan. )etelah proses pemisahan tidak
diperlukan adanya pembersihan, reaksi pemisahan uga tidak lebih rumit daripada
rekonstitusi sampel di fase gerak HP#$.
Hanya sekitar setengah dari analit dalam metode ini yang dikonversi ke dalam bentuk
amina kuartener yang mengandung derivat GRP. +nalit yang tersisa tidak terpengaruh oleh
reagen GRP dan hanya terprotonasi, atau terprotonasi dan dehidrasi selama proses
ele(trospray. *eskipun mereka tetap dalam bentuk underivat, telah diamati selama
pengembangan metode sensitivitas setara atau lebih baik untuk sebagian analit underivat
ketika GRP ditambahkan kedalam ekstrak urin dibandingkan dengan ketika tidak
ditambahkan. *ekanisme di balik penelitian ini masih belum elas, tetapi kemungkinan
karena derivatisasi metabolit endogen urin tidak dimonitor, menyebabkan "aktu retensi
mereka bergeser auh dari underivatnya, pemantauan steroid menyebabkan penekanan
ionisasi menurun. $lenbuterol adalah penge(ualian untuk pengamatan ini #O! meningkat
mesikun tidak ada GRP. Hal ini disebabkan (o-elusi dengan kromatografi kelebihan reagen
GRP yang diduga dapat menyebabkan penekanan ionisasi (lenbuterol, namun #O! untuk
(lenbuterol saat ada GRP masih auh di ba"ah +!+/s *RP#.
!erivatisasi kelompok keton dengan hasil GRP menghasilkan pembentukan isomer
(is 0 trans. 1ntuk epitrenbolone, gestrinon, 2HG, dan standar baku internal metiltestosteron,
isomer kromatografi ini dihasilkan diba"ah gradien HP#$. Pemisahan kromatografi isomer
ini menyebabkan dilusi sinyal analit tetapi mengasilkan pun(ak kromatografi peak yang
dapat digunakan sebagai bagian tambahan bukti konfirmasi untuk sampel positif.
*etode yang dielaskan di dalam urnal ini tidak berguna untuk analisisandrostenedion dan dion yang mengandung metabolit 3 -hydroyandrostenedione. 2urunan
bis-GRP terlalu hidrofilik untuk mengelusi kelebihan GRP, dan umlah yang tidak signifikan
dari turunan mono-GRP dibentuk untuk memenuhi persyaratan sensitivitas. )kenario ini
diberlakukan untuk semua dion yang mengandung steroid. !alam salah satu pengamatan,
menunukkan bah"a hal itu tidak mungkin6 7- hydroymethyl-'8- metilandrosta-',4-diena-
'', '89-diol-:-one metabolit formebolone dan mestanolone metabolit Oymetholone
mengandung kelompok fungsional keton, namun lebih baik untuk dianalisis dalam bentuk
turunan mereka, hal tersebut kemungkinan karena asosiasi kesetimbangan reaksi konstan ;
d ke(il dan 0 atau karena tingkat disosiasi reaksi konstan ; d terlalu besar menyebabkankerugian derivatif yang (epat pada penghapusan kelebihan GRP ketika sampel disuntikkan ke
8/18/2019 Diskusi kimfor
2/2
kolom HP#$. ;arena hal tersebut, mungkin ada dion yang mengandung steroid yang se(ara
efektif memperoleh hanya satu turunan GRP, memungkinkan untuk dilakukan analisis dengan
metode yang dielaskan di dalam urnal ini.
!i ba"ah kondisi yang dielaskan didalam ural ini, fulvestrant yang tidak tidak
mengandung gugus keton atau aldehida yang diderivatisasi oleh GRP, kemungkinan
merupakan kelompok sulfoksida. *enariknya, meskipun derivatif benar-benar dihilangkan
selama proses ionisasi dan menghasilkan underivat, ion fulvestrant akan terprotonasi. Reaksi
ini karena underivat fulvestrant tidak terelusi dalam kolom HP#$ atau dari kolom !
Recommended