Tincion de Ziehl Neelsen

TINCION DE ZIEHL-NEELSEN

MICROBIOLOGIA GENERAL

M en C. Graciela González

3QM1 EQUIPO 2

GUARNEROS HERNANDEZ JORGE LUISGARCIA FLORES MIGUEL ANGELZAMORA RUIZ MACARENASEDILLO TORRES IXCHELL YUREIMY

• Tinción diferencial desarrollada inicialmente por Paul Ehrlich para poner en manifiesto la presencia de los bacilos causantes de la tuberculosis en muestras clínicas.

Friedrich Neelsen Franz Ziehl

HISTORIA

FUNDAMENTO • Las paredes celulares de ciertos

parásitos y bacterias contienen ácidos grasos que les confieren la propiedad de resistir la decoloración con alcohol-ácido, después de la tinción con colorantes básicos.

• Ácido-alcohol resistencia (AAR.)

Mycobacterium y Nocardia

• Pared celular con un alto contenido de ácidos grasos de cadena muy larga: • Ceras• ácidos micólicos y

nocárdicos respectivamente.

Se utiliza para diferenciar las bacterias denominadas ácido alcohol resistente (BAAR) del no ácido alcohol resistente (NAAR).

• Las células ácido-alcohol resistentes no se decoloran fácilmente con una solución ácido-alcohólica, permaneciendo de color rojo .

• Esto se debe al elevado contenido en lípidos de las paredes de estas células en particular, el ácido micólico –un grupo de lípidos hidroxílicos de cadena ramificada-parece ser el responsable de la propiedad de ácido-alcohol resistencia.M. tuberculosis. Cordones vistos por Microscopía Electrónica.

Fuente: Dra. Marina Luquin. Universidad Autónoma de Barcelona ©

Técnica de Ziehl-Neelsen

Fuscina fenicada

Alcohol ácido

Azul de metileno

1.-Hacer un frotis con la cepa de prueba, dejar secar al aire y fijarlo al calor.

2.-Cubrir el portaobjetos con fucsina fenicada.

3.-Calentar suavemente con el mechero hasta la emisión de vapores (5 min.)

4.-Lavar con agua

5.-Decolorar exhaustivamente con alcohol-ácido.

6.-Lavar con agua.

7.-Cubrir el frotis con azul de metileno durante un minuto

8.-Lavar con agua, escurrir, dejar secar.

9.-Observar con objetivo de inmersión.

•Al calentar la preparación hasta emisión de vapores se favorece la fusión de las ceras y aumenta la energía cinética de las moléculas facilitando la penetración del colorante a la célula.

•Al suspender el calentamiento y lavar con agua fría se provoca la solidificación de las ceras.

•El proceso de decoloración es muy enérgico por lo tanto cualquier bacteria que no contenga abundantes lípidos perderá el colorante primario y tomará el colorante de contraste

RESULTADOS• Bacilos ácido alcohol resistentes

(BAAR ó Zn+ )•No ácido alcohol resistentes ( NAAR ó Zn- )

INFORMEMorfología microscópica

Microorganismos Forma Agrupación Acido-alcohol resistencia

Mycobacterium phlei Bacilar Aislada Zn + BAAR

Sthaphylococcus aureus Cocos Estafilar (racimos) Zn – o NAAR

Mycobacterium tuberculosis

Nocardia sp.

Cryptosporidium sp.

Baciloscopia Es la técnica de elección para el

diagnóstico rápido y el control del tratamiento de la tuberculosis pulmonar.

Es simple, económica y eficiente para detectar los casos infecciosos.

Por eso es la herramienta fundamentalde un diagnostico presuntivo de la

tuberculosis

BACILOSCOPIA RESULTADOS

Baciloscopia Positiva

Baciloscopia Negativa

Para que la baciloscopia sea positiva es preciso que la muestra tenga como mínimo, entre 5 .000 y 10 .000

bacilos por mililitro de muestra .

COMO REPORTAR RESULTADOS

BIBLIOGRAFIA

• http://www.tbrieder.org/publications/books_spanish/orange_guide_sp.pdf

• Murray R. Patrick, Microbiología Clínica. España Madrid 5ed : Elsevier , 2006

• Prats, Guillem, Microbiología Clínica. Buenos Aires; Madrid: Médica Panamericana 2005.

• Romero Cabello Raúl, Microbiología y parasitología humana: bases etiológicas de las enfermedades infecciosas y parasitarias. 3ed, México: Editorial Médica Panamericana, 2007.