UNIVERSIDAD CATÓLICA DE CUENCA

UNIDAD ACADEMICA DE SALUD Y BIENESTAR

FACULTAD DE MEDICINA

CATEDRA: MICROBIOLOGIA Y PARSITOLOGIA ICATEDRÁTICA: DRA. ANDREA ASTUDILLO.INTEGRANTES: MARITZA ENRÍQUEZ

ANDREA ESCANDON

ANDRES FLORES PARALELO: TERCER CICLO DE MEDICINA “A”

TINCIÒN Las células bacterianas son ricas en ácidos nucleicos tienen cargas (+)

en los grupos fosfatos que se combina con las cargas (+) de loscolorantes básicos.

Los colorantes ácidos no tiñen a las células bacterianas, se utilizanpara teñir el material de fondo para proporcionar un contraste decolor

TINCIÒN DE GRAM Tinción utilizada para separar las bacterias en Gram (+) y Gram (-).

Se fija la muestra en un portaobjetos mediante calentamiento o tratamiento conalcohol.

Se expone ala muestra a violeta de cristal.

Se añade yodo para formar el complejo con el colorante principal.

TINCIÒN DE GRAM En la decoloración con alcohol o acetona el complejo:

• Queda retenido en las bacterias Gram positivas y

• Se pierde en las Gram negativas.

Los microrganismos Gram (-) retienen el colorante safranina( color rojo).

TINCIÒN DE GRAM El grado en el que un microrganismo conserva el colorante depende de:

• Del microorganismo

• De las condiciones del cultivo.

• Habilidades tintoriales del microscopista.

TINCIÒN DE GRAM

TINCIÒN DE GRAM

TINCIÓN DE ZIEHL NEELSEN

La tinción de Ziehl-Neelsen (BAAR) es una técnica de tinción diferencial rápiday económica, usada para la identificación de microorganismos patógenos,como M. tuberculosis o el género Apicomplexa (coccidios intestinales) entreotros.Fue descrita por primera vez por dos médicos alemanes: Franz Ziehl, unbacteriólogo, y Friedrich Neelsen, un patólogo.

TINCIÓN DE ZIEHL NEELSEN

TINCIÓN DE ZIEHL NEELSEN

Esta tinción demuestra la capacidad de ciertas bacterias de resistir a la decoloración porácidos y alcoholes, lo cual se correlaciona con su alto contenido en lípidos en la paredcelular y presencia de ácidos micólicos que aumentan el carácter hidrófobo.

Una de las bacterias que presentan esta característica es Mycobacterium tuberculosisPrincipal causante de la tuberculosis.

TINCIÒN DE ZIEHL NEELSEN

Se utiliza para teñir micobacterias y otros microorganismos acido resistentes.

Se tiñen con carbolfucsina básica.

Resisten a la descoloración con soluciones de acido-alcohol.

Se realiza contra tinción del fondo con azul de metileno.

Los microorganismos aparecen de color rojo sobre un fondo azul claro.

Los reactivos necesarios para su realización son los siguientes:ácido periódico 58% carbol fucsina de Ziehl culina (fucsina fenicada). Prepararmezclando en el orden dado:

0,5 g fucsina básica50 cc agua destilada5 cc etanol absoluto28,5 g cristales de fenol derretidoshematoxilinaalcohol ácido 1%:alcohol de 35ºácido clorhídrico

Técnica

PROCEDIMIENTO

Etapa 1:

PREPARACIÓN DEL EXTENDIDO

Tomar una cantidad homogénea de esputo y extenderla de un extremo a otro del portaobjetos para lograr una película homogénea

Etapa 2

CUBRIR El EXTENDIDO CON FUCSINA FILTRADA

Etapa 3

CALENTAR HASTA EMISIÓN DE VAPORES TRES VECES DURANTE 5 MINUTOS

Etapa 4

LAVAR CON AGUA

Etapa 5

CUBRIR CON SOLUCIÓN DECOLORANTE DURANTE 3 MINUTOS

Solución decolorante: alcohol ácido

Etapa 6

LAVAR CON AGUA

Etapa 7

CUBRIR CON AZUL DE METILENO DURANTE 1 MINUTO

Etapa 8

LAVAR CON AGUA Y SECAR AL AIRE

ETAPA 10

OBSERVACION MICROSCÓPICA Y LECTURA DE EXTENDIDOS

INTERPRETACION DE RESULTADOS

Células Color

Bacilos y microorganismos

Alcohol Acido-Resistentes.Rojo brillante

Gérmenes, otros organismos y

material de soporte.Diferentes tonalidades de azules