Tinción de Ziehl-Neelsen

BAAR Bacilo Acido Alcohol Resistente

• La mayoría de las bacterias se encuentran englobadas en 2 grandes grupos según la tinción de Gram sin embargo algunas bacterias del genero Mycobacteriun no pueden ser clasificadas por aquella tinción, dado a que estas bacterias una vez teñidas con colorantes básicos no se pueden decolorar con alcohol acido

• Robert Koch 1882 ideo esta tinción denominada BAAR y fue modificada por sus autores Ziehl y Neelsen

• Mycobacterias:• Bacterias de forma bacilar delgada rectas ó

ligeramente curvas con extremos redondos • No esporulados• No capsulados• No moviles• Aerobios estrictos

• Las Mycobacterias están recubiertas por un grueso material céreo (paredes lipidicas muy gruesas resistiendo el alcohol acido) que resiste la tinción; sin embargo una vez teñidas las células bacterianas resisten la decoloración con solventes orgánicos fuertes como el alcohol-ácido por este motivo estas bacterias se conocen como acidorresistentes fenómeno descubierto por Ziehl y Neelsen en 1882.

• Mycobacterias tienen una pared celular que contiene una capa de peptidoglicanos y mesodiaminopimelico arabinosa y galactosa siendo una característica importante de esta.

• Su alto contenido de lípidos (60%) la da la característica hidrofobica a la célula.

• Entre los lípidos están la cera D y los glicolipidos (micosidos) teniendo como componente principal a los ácidos micólicos los cuales aumentan este carácter hidrófobo

• Se tiñen con dificultad en ocasiones se tiñen irregularmente y se observan espacios claros o gránulos fuertemente teñidos

TinciónZiehl-Neelsen

Tinciones

• Kinyoun: (tinción acidorresistente) método en frio se usa un detergente activo de superficie como el tergitol en lugar de calor

• Tintura fluorocromo auramina y rodamina en microscopio de fluorescencia, las células bacterianas se ven amarillas con fondo oscuro usando permanganato de potasio como contratinción

Muestra

• Leche: alimento muy consumido por el hombre, el cual si no se maneja con la higiene adecuada y calidad puede contener una bacteria muy agresiva que si no es tratada puede ser mortal

Muestra

• Espectoraciones (flema o esputo)• LCR• Heces fecales• Leche• Biopsias• Orina• Jugos garstricos

Las micobacterias son microorganismos ampliamente distribuidos, típicamente se las encuentra en el agua (incluyendo el agua del grifo tratada con cloro) y en los alimentos. Algunas especies, sin embargo, son patógenos obligados, tales como las causantes de tuberculosis y lepra y no se las encuentra viviendo en el agua.

FrotisTinción Ziehl-Neelsen

1. Carbol fucshina 5 minutos calentando (mas soluble en sustancias lipidicas

2. Enfriar y lavar3. Decoloración alcohol acido (OH 95% + HCl

3%) gota a gota4. Lavar 5. Azul de metileno 1 min6. Lavar secar y observar 100x

Reportar

• (-) no se encuentran BAAR en 100 campos microscópicos observados

• (+) menos de 1 BAAR por campo en 100 campos observados

• (++) 1 a 10 BAAR por campo en 50 campos observados

• (+++) Mas de 10 BAAR por campo, en 20 campos observados

• Si en todo el espacio del extendido (200 – 400) campos se observan de 1 a 4 bacilos solicitar otra muestra.

• Prueba PPD (Derivado Proteínico Purificado de Tuberculina) intradérmica

• + si se observa una roncha mayor de 10mm de tamaño