基本概念物理消毒灭菌法化学消毒灭菌法

消毒灭菌消毒灭菌情景 1-4

基本概念杀死一切微生物，包括芽孢。

灭菌分为 杀菌：菌体尚存

溶菌：菌体消失消毒：只杀死病源菌，未伤及芽孢防腐：暂时抑制微生物生长除菌：用冲洗、过滤等法，除去微生物

是保证生产成功的重要手段返回本章

物理消毒灭菌法

一、热力灭菌二、紫外线灭菌

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一、热力灭菌（一）原理

高温使菌体蛋白质、核酸、酶等凝固或变性失活。

（二）方法 湿热灭菌

干热灭菌

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（一）干热灭菌热源 火焰及热空气

特点 简便、快速、范围有限

方法小的金属、玻璃器皿酒精灯烧

烘箱烤 大的玻璃、金属器皿

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器皿包装→ 160 ~170 2h℃ ℃干燥箱

使用

注意70℃以下开箱取物勿超 180℃随用随开包

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（二）湿热灭菌

特点 范围广、温度低、效果好、时间短

热蒸气或热水热源

方法

高压蒸汽灭菌

常压蒸汽灭菌

巴 氏 消 毒

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蛋白质凝固点与其含水量的关系蛋白质含水量 (%) 凝固温度 (℃)

50251860

5674~8080~90145

160~170

热蒸气穿透力大蛋白质凝固点随其含水量的增加而降低

因为

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干热灭菌与湿热灭菌穿透力的比较加热方式

传导介质

温度（℃）

加热时间（ h）

透过布层温度（℃）

结果

20层

40层

100 层

干热 空气 130~140

4 86 72 70 以下

灭菌不完全

湿热 饱和蒸汽

105.3 3 101

10l

10l 灭菌完全

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1.高压蒸气灭菌

概念 利用高压产生的高蒸汽温度杀灭微生物的方法

方法

原理水沸点随热蒸汽压力的增加而升高密闭锅 蒸气多 压力高 沸点高

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步骤：装锅→加热排气→升压→保压灭菌→降压出锅

关键：排净冷空气

注意灭菌时间和压力因物而异升降压力要稳灭菌时间从保压时算起压力降至“ 0” 才能开盖

使用

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排气

纯蒸气压力与温度的关系

1kg/cm2=0.098Mpa( 兆帕）=98Kpa （千帕） 返回本节

2. 常压蒸汽灭菌

概念 利用常压产生的 100℃蒸汽温度进行灭菌的方法

特点 设备简，成本低，灭温低，时间长

用法 一次性灭菌（ 100 ℃， 10 余h)尽快达到 100 ℃达到 100 ℃时开始计时灭菌中勿降温，勿干锅

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灭菌池

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3. 巴氏消毒概念

利用低于 100℃的温度杀灭有害微生物的方法

培养料堆积发酵

料温 60 ~70℃ ℃杀死有害微生物

方法

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二、紫外线灭菌

概念 利用电子射过水银气体 产生的紫外线而杀菌的方法

杀菌机理

直接：使蛋白质、酶等变性失活间接：空气中产生臭氧或过氧化氢

使用有效距离： 1.5~2.0m理想波长： 265nm

30w 紫外灯照 30min→ 避光 30mi

n 返回本节

便携式

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透力很弱定期更换灯管只起辅助作用伤眼睛和皮肤

特点

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化学消毒灭菌法

概念与划分一、气雾消毒灭菌法二、液体消毒灭菌法

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利用化学药剂杀灭或抑制微生物的方法概念

抑菌剂消毒剂灭菌剂

浓度

液态：喷雾、浸泡、洗刷等气态：加热、焚烧、氧化等

状态划分

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一、气雾消毒灭菌法（一）要求

密闭条件下保持一定时间

（二）种类甲醛

气雾盒

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机理：结合蛋白质氨基， 使其变性 。喷： 5%熏： 10ml/m3+1/2KMnO4

用法

1.甲醛

有刺激性和腐蚀性

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2.气雾消毒盒 粉末状 刺激性小 扩散力及渗透性强特点

2~6g/m3→ 点燃（ 熏 30min 以上）

用法

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二、液体消毒法

固体或液体药品 水 药液（多现配现用）概念

种类氧化剂

熟石灰表面活性剂

乙醇酚类新洁尔灭

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（一）氧化剂

氧化菌体蛋白质的活性基团，使其变性。 机理

种类高锰酸钾过氧化氢漂白粉过氧乙酸

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1.高锰酸钾紫色针状结晶 0.1%~0.2%浸泡手、器具等。

 

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2.过氧化氢

无色液体，属环保型消毒剂3%皮肤、伤口消毒 6％浸泡器皿 30min

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3.漂白粉2%~5%浓度洗刷、喷雾、浸泡湿处可干撒 作用约 30min

使用

注意

原品密封随配随用对衣物有退色和腐蚀性

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4.过氧乙酸无色至微黄色液体，有刺激性、腐蚀性、挥发性。

1.5%熏蒸7ml/m3

0.2%洗手

0.5%浸泡

0.5%喷雾

使用

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（二）表面活性剂脱水剂脂溶剂蛋白质变性剂

1.乙醇

70％ ~75％效果最好 皮肤、器皿擦拭或浸泡浓

度浓度 高浓度效果差

无水的无杀菌作用

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3.新洁尔灭

0.25% 消毒皮肤、浸泡器具0.5%喷雾

2.酚类石炭酸： 3%~5%浸泡或喷雾

来苏尔刺激性小效力比苯酚强 4倍3%~5%喷雾、擦洗2% 消毒手

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（三）熟石灰 提高 pH 、消毒 破坏秸草表面的蜡质 提供钙素养料

作用

使用1%~2％拌料5%~10％喷、浸、刷、喷干撒湿环境或霉染处

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药品及浓度的选择依据

微生物特点物品的性质消毒目的环境影响

标准

性质稳定易溶于水杀菌力强抗菌谱广作用较快使用浓度低价格低廉

没有毒腐性或很小返回本节

主要内容一、物理消毒灭菌法1. 热力 灭菌

干热（酒精灯、干燥箱）高压 ( 排净冷空气）常压（攻头、控中、保尾）湿热

2. 紫外线（使用方法、注意事项）二、化学消毒灭菌法常用 酒精、甲醛、高锰酸钾

来苏、新洁尔灭等返回本节

1. 高压灭菌与常压灭菌有哪些不同？2. 高压灭菌应注意些什么？3. 紫外线灭菌应注意些什么？4. 为何不使用高浓度的酒精？

思考题

作业题

1. 为何湿热灭菌比干热灭菌效果好、时间短 ?2.来苏尔和石炭酸都是酚类，为何来苏尔的杀菌效力高？

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主要参考资料1. 白毓谦 . 微生物实验技术 .第 3章 .济南：山东大学出版社， 19862.黄毅 .食用菌栽培 .第二版 .上册 .第 8章 .北京：高等教育出版社， 19983. 陈士瑜 .食用菌生产大全 .p83~99.北京：中国农业出版社， 19884.沈平等 . 微生物学实验 .第 6章 .北京：高等教育出版社， 20015.李顺鹏 . 微生物学实验指导 .P16-24.北京：中国农业出版社， 20036.周德庆 . 微生物学教程 .第 7章 .北京：高等教育出版社， 1999 返回本节

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